教案组织学与胚胎学课程

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组织胚胎学教案

章节:第一章绪论

目的要求:掌握组织学、胚胎学的定义、研究范围及在医学教育中的地位;

了解组织学与胚胎学常用研究方法和技术。

授课内容:一、组织学和胚胎学的研究内容(35分钟)

二、学习组织学与胚胎学的意义(10分钟)

三、组织胚胎学常用研究方法和技术(35分钟)

四、组织学和胚胎学的学习方法(10分钟)

重点:组织学、胚胎学的定义、研究范围及在医学教育中的地位。

难点:组织胚胎学常用研究方法和技术。

授课单位:组织胚胎学教研室

时间

光学显微镜(光镜,LM)是一种既古老又常用的观测工具。

最好的光镜其分辨率约为0.2μm可将物体放大约1500倍。借

助光镜能观察到细胞组织的微细结构,称光镜结构。

在应用光镜技术时,需把组织制成薄片,以便光线透过,

才能看到组织结构。最常用的薄片是石蜡切片,其制备过程大

致如下:

①取材、固定:将新鲜材料切成小块,放入固定液中(如

甲醛等)使蛋白质等成分迅速凝固,以保持活体状态的结构。

②脱水、透明、包埋:组织块经酒精脱水,二甲苯透明后,

包埋在石蜡中,使柔软组织变成具有一定硬度的组织蜡块。

教学内容

③切片、染色:用切片机将埋有组织的蜡块切成5-7μm

的薄片,贴于载玻片上,脱蜡后进行染色,最后用树胶加盖片

封固。

组织切片的染色是使无色的组织结构呈现颜色,增加对比

度,便于镜下分辨。在组织学中,染色方法很多,但没有一种

方法能使细胞全部结构同时呈现不同颜色。最常用的染色方法

是苏木精(hematoxylin)伊红(eosin)染色法(HE染色)。

苏木精将细胞核染成紫蓝色,伊红将细胞质染成红色。

苏木精是具有阳离子的碱性染料,可以与具有阴离子基团

的组织成分耦合成盐,凡组织结构对苏木精起紫蓝色反应的称

为嗜碱性(basophil)。

伊红是具有阴离子的酸性染料,可以与具有阳离子基团的

组织成分耦合成盐,凡组织结构对伊红起红色反应的称为嗜酸

性(acidophil)。

备注

时间

H-E染色

除石蜡切片外,还有:①冰冻切片;②涂片;③铺片;④

磨片。

(二)电子显微镜术

目前电镜的分辨率达0.2nm,能将物体放大几千倍、几万

倍、甚至100万倍。借助电镜可观察到细胞更微细的结构,称

超微结构(ultrastructure)或亚微结构。

当前常用的电镜有透射电镜(TEM)和扫描电镜(SEM)。

透射电镜像扫描电镜像

教学内容

(三)组织化学术

组织化学(histochemistry)是应用物理、化学反应原理,

研究细胞组织内某种化学物质的分布和数量,从而探讨与其有

关的机能活动。可分三类。

1.一般组织化学

是使化学试剂与组织或细胞微细结构的化学成分发生反

应,在局部形成有色沉淀物,在显微镜下对组织或细胞内的化

学成分及酶活性进行定性、定位和定量研究的方法。

组织化学技术

备注

时间10ˊ

2.免疫细胞化学技术

免疫细胞化学技术(immunocytochemistry)是应用免

疫学原理,通过抗原和特异性标记抗体的结合反应,显示细胞

内的抗原或抗体成分。虽然目前的免疫细胞化学中常用的染色

法仅3~5种,但却可以定位或示踪细胞内的各种成分,包括各

种蛋白质、多肽、部分类脂和多糖,以及细胞膜表面的膜抗原

和受体等。

免疫细胞化学技术

3.原位杂交技术

原位杂交(in situ hybridization)是一种核酸分子杂交技

术,它是通过检测细胞内mRNA和DNA序列片段,原位研究

细胞合成某种多肽或蛋白质的基因表达。组织学应用的原位杂

交术主要是染色体原位杂交和细胞原位杂交。

(四)其它技术

1.细胞形态计量术

是运用数学和统计学原理对组织和细胞进行二维和三维

的形态测量研究,如细胞及其微细结构成分的数量、体积、表

教学内容

面积、周长等的相对和绝对值的测量。研究物体内某种结构的

立体数值的科学又称为体视学(ereology)。物质结构平面测

量研究有一定意义,但它是不全面的。利用体视学从二维走向

三维,使形态定量研究更可靠,更有比较价值。目前已广泛应

用图像分析仪进行形态计量研究。

2.组织培养技术

组织培养技术(tissue culture)是将离体细胞、组织或器

官,放置在模拟机体生理条件的培养溶液(培养基)中,在无

备注

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