人参提取物的含量检验方法

人参提取物的含量检验方法

一、目的：建立人参提取物的含量操作规程，保证分析结果的准确性。

二、依据：GB16740-1997保健（功能）食品通用标准及《中国药典》

三、范围：本规程适用于本公司人参提取物的含量检验操作

四、职责：质量检验员对本标准的实施负责

五、正文：

1、试剂与材料

1.1 甲醇，分析纯。

1.2 正丁醇，分析纯。

1.3 氨水，分析纯。

1.4 水，纯化水。

1.5 乙腈，色谱纯。

2 仪器

2.1 高效液相色谱仪，紫外检测器。

2.2 超声波清洗器

3．分析步骤

3.1 供试品溶液制备

取本品约1.0g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加甲醇50ml，称定重量，超声处理（250w，50kHz）20分钟，放置室温，称重，用甲醇补足减失的重量，滤过，精密吸取续滤液25ml，蒸干，残渣加水20ml溶解，置分液漏斗中，用水饱和正丁醇提取3次，每次20ml，合并正丁醇液，用氨试液40ml洗涤，放置分层，分取正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇溶解并定容至25ml容量瓶中，摇匀，即得。

3.2 对照品溶液制备

精密称取人参皂苷Rg

1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf、人参皂苷Rb

1

、人参皂苷

Rc、人参皂苷Rb2、人参皂苷Rb3及人参皂苷Rd对照品，加甲醇制成每1ml各含0.2mg 的混合溶液，摇匀，即得。

3.3 测定

3.3.1色谱参考条件

检测波长：203nm

柱温：35℃

(1) 色谱柱：C18，2.6μm, 50mm×4.6mm

流动相：乙腈为流动相A，以水为流动相B，按下表进行梯度洗脱；

时间（分钟） 流动相（A%） 流动相（B%）

0～15 15～20 20～35 35～40 17→19 19→30 30→33 33→17 83→81

81→70

70→67

67→83

(2) 色谱柱：C18，5μm ，250mm ×4.6mm

流动相：乙腈为流动相A ，以水为流动相B ，按下表进行梯度洗脱； 时间（分钟） 流动相（A%） 流动相（B%）

0～40 40～50 50～70 70～100 100～110 18→18 18→22 22→28 28→38 38→18 82→82

82→78

78→72

72→62

62→82

3.3.2 分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各5μl ，注入液相色谱仪，测定，即得。

按照以上步骤取两份样品进行平行试验，并计算相对平均偏差（≤3%，n=4）。

4 结果计算

人参皂苷含量按下式计算：X =21A A ×W C ×1000

50×100% 式中：X-被测组分含量，%

C-对照品溶液浓度，mg/ml

A1-被测组分峰面积值

A2-对照品峰面积值

W-取样量，g 。