比色法测定土壤中氨态氮有效磷速效钾
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比色法测定土壤中氨态氮、有效磷、速效钾
1. 实验仪器及药品
1.1 实验仪器：可见分光光度计、磁力搅拌仪、pH计、滴管。
2.2 所需药品：浓硫酸、盐酸、氢氧化钠、无水硫酸钠、碳酸氢钠、无磷活性炭、酒石酸钾钠、阿拉伯胶、碘化钾、氯化汞、氢氧化钾、酒石酸钠、钼酸铵、氯化亚锡、甘油、五水硫酸铜、酒石酸、EDTA-Na2、四笨硼钠、磷酸二氢钾、硫酸氨、硝酸钾、硫酸钾。
2. 实验试剂配制：
2.1 (1+9）硫酸溶液：1体积硫酸+9体积水
2.2 (1+1)盐酸溶液：盐酸与水1:1混合
2.3 氢氧化钠溶液：100g/L
2.4 联合浸提剂：称取无水硫酸钠5
3.12g，碳酸氢钠37.8g，溶于800mL水中，用（1+9）硫酸或氢氧化钠溶液将pH值调至8.5，蒸馏水定容至1000mL。
2.5 无磷活性炭
2.6 氨态氮掩蔽剂：400g/L酒石酸钾钠溶液。
2.7 氨态氮助色剂：50g/L阿拉伯胶溶液。
2.8 氨态氮显色剂：称取碘化钾50g溶于50mL水中，边搅拌边加入饱和氯化汞溶液，直至出现少量的紫红色沉淀充分搅拌后不溶解为止。缓缓加入氢氧化钾150g，搅拌使其溶解，定容至1000mL，转移到大烧杯中静置过夜，取上清液。
2.9 氨态氮强色剂：300g/L氢氧化钠溶液。
2.10 有效磷掩蔽剂：10g/L酒石酸钠溶液。
2.11 有效磷显色剂：35g/L钼酸铵溶液:量取146mL浓硫酸，溶于500mL水中，冷却；另取35g钼酸铵溶于200mL水中；将硫酸缓缓倒入钼酸铵溶液中，边加边搅拌，最后加水定容至1000mL。
2.12 有效磷还原剂：20g/L氯化亚锡甘油溶液：称取氯化亚锡20g溶于100mL盐酸中，充分溶解后转入1000mL容量瓶中，用甘油定容至1000mL。
2.13 速效钾掩蔽剂：称取五水硫酸铜5g，酒石酸12g，溶于500mL 水中，加入浓硫酸200mL，冷却后定容至1000mL。
2.14 速效钾助掩剂：75g/LEDTA-Na2溶液。
2.15 速效钾浊度剂：62.5g/L四笨硼钠溶液：称取氢氧化钠8g溶于80mL水中，冷却后定容至100mL，即得2mol/LNaOH溶液，备用；另取四笨硼钠62.5g，溶于900mL水中，加入0.5mL 2mol/L NaOH溶液，摇匀，定容至1000mL，过滤至溶液澄清。
2.16 土壤混合标准储备溶液：称取磷酸二氢钾0.4602g，硫酸氨1.1319g，硝酸钾1.7323g，硫酸钾0.0611g，溶于800mL水中，加入浓硫酸10mL，定容至1000mL。
2.17 土壤混合标准液：吸取1mL土壤混合标准液储备液，用土壤联合浸提剂稀释至100mL，摇匀。
3.实验步骤
3.1试液制备
称取2.5g风干试样，置于100mL锥形瓶内，加入无磷活性炭0.5g，土壤联合浸提剂50mL，盖紧瓶塞，然后放在磁力搅拌仪托盘上，保持温度25±2℃，转速1200r/min，搅拌8min，过滤。滤液用于测定。
3.2铵态氮的显色和测定
3.2.1显色
吸取土壤联合浸提剂2mL于一只玻璃瓶中作空白，吸取土壤混合标准液2mL于另一只玻璃瓶中，吸取土壤土壤浸提滤液2mL于第三只玻璃瓶中，3只玻璃瓶分别依次加入：土壤氨态掩蔽剂6滴，土壤氨态助色剂3滴，土壤氨态显色剂4滴，土壤氨态强色剂4滴。摇匀，静置10min。
3.2.2测定
将待测液分别转移到10mm比色皿中，在420nm波长下，以空白液调0后，测定标准液与待测液的吸光值。按以下公式计算铵态氮：铵态氮(mg/kg)=A2／A1×48
注：A1为标准液的吸光值，A2为待测液的吸光值
3.3有效磷的显色和测定
3.3.1显色
吸取土壤联合浸提剂2mL于一只玻璃瓶中作空白，吸取土壤混合标准液2mL于另一只玻璃瓶中，吸取土壤土壤浸提滤液2mL于第三只玻璃瓶中，加入土壤有效磷掩蔽剂4滴，摇匀至无气泡，3只玻璃瓶分别依次加入：土壤有效磷显色剂5滴，土壤有效磷还原剂1滴。摇匀，静置10min。
3.3.2测定
将待测液倒入比色皿，在685nm波长下，以空白调0后测定标准液与待测液的吸光值。按以下公式计算有效磷：
有效磷(mg/kg)=A2／A1×48
注：A1为标准液的吸光值，A2为待测液的吸光值
3.4速效钾的显色和测定
3.4.1显色
吸取土壤联合浸提剂2mL于一只玻璃瓶中作空白，吸取土壤混合标准液2mL于另一只玻璃瓶中，吸取土壤土壤浸提滤液2mL于第三只玻璃瓶中，3只玻璃瓶分别依次加入：土壤速效钾掩蔽剂2滴，土壤速效钾助掩剂6滴，土壤速效钾浊度剂4滴。摇匀，立即测定。
3.4.2测定
将待测液倒入比色皿，在685nm波长下，以空白调0后测定标准液与待测液的吸光值。按以下公式计算速效钾：
速效钾(mg/kg)=A2／A1×200
注：A1为标准液的吸光值，A2为待测液的吸光值