微生物室工作流程

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不确定标本应与临床科室联系 不合格标本就予以退回


标本接收后应及时处理,因一些细菌对环 境比较敏感,比如脑膜炎奈瑟菌、淋病奈 瑟菌和流感嗜血杆菌等在脱离人体后极易 死亡; 如不能及时处理则应该妥善保存:
标本不能冷 冻或冷藏
编号:目的是为保证标本号的唯一性 细菌室标本采用每日编号形式,用7位数“月、 日、标本号”联合编号


需氧培养:临床细菌室最常用的培养方法, 将已接种好的平板置于35度温箱中孵育。 二氧化碳培养:有些细菌初次分离培养时 需置5%-10%CO2环境才能生长良好,如一 些奈瑟菌属,布鲁菌属等。
鉴定及药敏

依据细菌的菌落形状、气味、颜色、溶血 类型及有无等和一系列的生化反应对细菌 进行鉴定,然后进行药敏试验。

粪便培养:接种环在加热器内烧红冷却后, 取粪便病变明显部位标本适量,分别在SS 平板,BA和MAC平板上三区划线。 注意:在划第二区之前应再次灭菌接种环 以分出单个菌落。 小便培养:用加样器无菌取10ul分区划线接 种于BA 、Mac,置CO2温箱培养。
脑脊液 穿刺液 其它无菌体液
首先接种小BB:取600ul标 本打入小BB试管中,再各 取一滴分别接种在BA、 CA 、 MAC,灭菌接种环后三区 划线
棉拭子 组织标本
用灭菌后的镊子钳取标本后在 BA、 MAC、CA、SDA上滚动接种,然后三 区划线

深静脉导管(PICC):用无菌移液管将小 BB移入装有PICC的无菌试管中。 支原体:将棉拭子标本与营养液R1充分混 匀后,取出棉拭子,将营养液R1与营养液 R2混匀,然后将混合液加入药敏板,每孔 55ul.

麦康凯(MAC):内含有胆盐可抑制革兰 阳性菌的生长,有利于革兰阴性菌的生长, 是常用的选择性培养基;发酵型革兰阴性 杆菌因分解乳糖能力不同,在此平板上菌 落颜色不同,便于鉴别菌种。
巧克力平板(CA):内含有V和X因子,嗜 血杆菌、奈瑟菌等生长良好。凡疑有这些 菌种存在的标本,均须接种巧克力平板。



标本类型 血 中段尿 脑脊液 穿刺液 胆汁 呼吸道标本 粪便标本 病灶分泌物



培养基 血培养瓶 血平板、麦康凯平板 小BB、血平板、巧克力平板 小BB、血平板、麦康凯平板、巧 克力平板 血平板、巧克力平板、麦康凯平 板 血平板、麦康凯平板、巧克力平 板、沙宝氏平板 SS平板、MAC平板和血平板 血平板、巧克力平板、麦康凯平 板

注意事项




接种环使用前后均应灭菌,以免造成环境 污染及交叉污染。 脑脊液与其他无菌体液均应先接种小BB进 行增菌,以免小BB污染造成假阳性结果。 接种标本时应待接种环冷却后进行,以免 将细菌烫死从而造成假阴性结果。 三区划线时应轻柔,不破坏平板;线条应 疏密合适,从而更好分离出单个菌落。
培养
ห้องสมุดไป่ตู้
“无菌概念”
“无菌概念”有两层含义: 一、保护自己不被感染:要求细菌室工作 人员做好自我防护工作,如使用口罩、手 套、帽子等。 二、保护细菌不被污染: 标本采集——标本接收——编号——登记— —接种——培养——鉴定——做药敏—— 发报告

谢谢大家


SS琼脂:因胆盐含量较高,具有较强的抑 制力,是常用的强选择性培养基。其中的 胆盐抑制革兰阳性菌的生长,枸椽酸盐和 粕绿能抑制大肠埃希菌,因而使致病菌的 沙门菌、志贺菌容易分离到。因选择性过 强,可能会影响检出率,使用时常加弱选 择性培养基以配对互补。 小BB:即为营养肉汤,用于标本和各类细 菌的增殖。
如0708082 07为七月 08为七月八号 082为七月八号的第82个标本 90 91
培养基选择
根据标本的不同需要接种不同的平板 首先了解一下平板的性质和用途:
血平板(BA):除含有普通营养琼脂所包含 的所有营养之外,还加入了5%的羊血,大 大增加了其中的蛋白质和生长因子,适用 各类细菌的生长,一般细菌检验标本的分 离都应接种在此平板。
接种


血培养:将血培养瓶上条形码贴到化验单 上,点击血培养瓶图标进入输入窗口—— 扫描条形码(血培养箱右侧)—— 打开右 侧抽屉将血培养瓶放入亮灯空位——点击 “√”关上血培养箱。 痰培养:接种环在加热器内烧红冷却后, 取脓性部分一环分三区划线,分别接种于 BA、Cho、Mac(CO2温箱)、SDA(30℃温箱) 培养。
细菌室学习体会
苏长青
细菌室的主要任务:



一、培养、鉴定病原菌的类别 二、做出致病菌的药敏结果 三、监测院内感染 四、菌种保存及科研
细菌室的工作流程:

标本采集——标本接收——编号——登 记——接种——培养——鉴定——做药 敏——发报告
合 抱 之 木 始 于 毫 末

标本采集——主要由临床科室负责 标本接收——做好核对工作 患者基本信息 核对 标本类型 标本采集时间 标本量
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