双波长

二、双波长分光光度法的原理
1、双波长分光光度计光路示意图
2、双波长工作原理示意图
3、双波长分光光度法的分析 3.1 根据朗伯—比尔定律：A=εbc
3.2 测量波长λ2和参比波长λ1的选择与组合 以两组分x和y的双波长法测定为例： 设：x为待测组分，y为干扰组分，二者的 吸光度差分别为ΔAx和ΔAy，则该体系的总 吸光度差ΔAx+y为： ΔAx+y=ΔAx+ΔAy
双波长分光光度法 的基本原理及应用
指 导 老 师 ：孙杰 研究生姓名：郑许光
2015年6月10日
提纲
一、双波长分光光度法的概述
二、双波长分光光度法的原理
三、双波长分光光度法的特点
四、双波长法的应用
一、双波长分光光度法的概述
紫外----可见分光光度法是当 前用途最广泛、应用最普遍的 仪器分析方法之一。自1829 年伯格提出，数年后由郎伯发 表“伯格---郎伯定律”，以及 1852年比耳提出“比耳定律” 后，为吸光度法奠定了理论基 础。分光光度法不仅用于溶液 中有色成分的定量分析而且可 在紫外光区对许多有机化合物 作定量和定性分析，此外还可 以作络合物（络合比）测定， 及有关物理化学常数的测定。
3.3 选择波长组合λ1 、λ2的基本要求
① 选定的波长λ1和λ2处干扰组分应具有相同吸光度 即：ΔAy = ΔＡyλ2 － ΔＡyλ1 = 0 故： ΔＡx+y = ΔＡx=(εxλ2－εxλ1)bcx 此时：测得的吸光度差ΔＡ只与待测组分x的浓度呈线性关系 ，而与干扰组分y无关。若x为干扰组分，则也可用同样的方 法测定y组分。 ② 选定的两个波长λ1和λ2处待测组分的吸光度应具有 足够大的差值
可采用作图法选择符合上述两个条件的波长组Байду номын сангаас。
三、双波长分光光度法的特点
可进行浑浊试样的分析。 通过适当的波长组合，可进行双组合或三组合混合物的同 时测定。 当波长相差1~2nm时，使双波长同时扫描，可记录一阶导 数光谱。 采用一波长固定，另一波长扫描，记录吸收光谱。可消除 浑浊背景的影响。 采用双笔记录器，可记录溶液中发生的两种现象。 从原理上讲，单波长法和双波长法的不同之处是:双波长 用二个单色器，得到二个不同波长的单色光，测量的是两个 波长处的吸光度差，使用一个吸收池，取消了参比池。
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四、双波长法的应用 （1）. 双组份同时测定 有些化学性质相似的元素，可在一定条件下同时 与一种显色剂反应，生成的有色配合物吸收光谱相互 重叠，相互干扰测定。由于它们的化学性质相似，一 般难于找到合适的掩蔽剂来消除干扰影响。采用双波 长法，通过适当的波长组合，就能顺利地消除干扰影 响，实现两组分同时测定。 （2）. 单一组分测定中干扰组分影响的消除 当待测组分和共存组分吸收光谱重叠，严重干扰待 测组分时，采用双波长法可消除干扰组分的影响，提高 测定的准确度。 （3）. 双波长法作背景吸收和浑浊干扰的消除 在分光光度法分析中，有些显色剂或显色体系，在 测定条件下，由于背景吸收较大产生的误差显著的降低了 测定的准确度，并使方法的测定收到限制。 用双波长法能在一定程度上消除浑浊背景的干扰，进行 浑浊样品分析。在生物化学和临床医学上，浑浊样品较多 ，双波长法应用更为广泛。