土壤硝化作用强度测定
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土壤硝化作用强度测定
一、原理
将定量的土壤接种到硝化细菌培养基中,由于土壤中硝化细菌的作用,是亚硝酸氧化成硝酸,用培养基中亚硝酸的消失量占原始培养基中亚硝酸含量的百分比作为硝化作用强度的指标。
亚硝酸能与格利斯试剂反应产生一种紫红色的化合物,该显色反应不易受硝态氮的干扰。
二、药品器材
1.硝化细菌培养基:NaNO2 1g MgSO4·7H2O 0.03g MnSO4·4H2O 0.01g K2HPO40.75g
Na2CO3(无水)1g NaH2PO40.25g超纯水1000ML
2.格利斯试剂:溶液一,称取磺胺酸0.5g,溶于150ml醋酸溶液(30%)中,保存于棕色
瓶中。
溶液二,称取α-萘胺0.5g,加入50ml蒸馏水中,煮沸后,缓缓加入30%的醋酸溶液150ml,保存于棕色瓶中。
3.亚硝酸根标准溶液:称取 1.500g分析纯亚硝酸那于烧杯中,加蒸馏水溶解后定容至
1000ml,此溶液亚硝酸根离子浓度为1mg/ml。
用时以此液配成亚硝酸根标准溶液(亚硝酸根离子浓度为0.01mg/ml)。
三、步骤
1.在150ml三角瓶中装30ml硝化细菌培养基,灭菌。
2.冷却后的培养基中接种1/10土壤悬液1ml,于28℃恒温培养15d,取出三角瓶过滤。
3.用比色法测定滤液中的亚硝酸含量。
四、硝化作用强度
硝化作用强度=(原始培养基中亚硝酸根含量-培养后培养基中亚硝酸根含量)/原始培养基中亚硝酸根含量*100%。