细胞实验室简介PPT
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n 消毒准备室
功能 一切与实验有关的准备工作 要求 设备的安装和排列要合理
房间要宽敞明亮,通风条件好 地面要便于清洁、防滑 配备 实验台,高压灭菌锅、排风灭火设备、 超声波清洗器、洗瓶机等。
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6Leabharlann n 制备室➢ 功能 进行培养液及相关试剂的配制 ➢ 要求 在无菌操作台内过滤、除菌。 ➢ 配备 冰箱、天平、真空泵、PH计等。
细胞培养实验室的设置必须满足三个基本的需要,即:实验 准备(培养基配制,洗涤与灭菌等)、无菌操作、控制培养。
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基本组成:
• 基本实验室
消毒准备室 制备室 无菌操作室
• 辅助实验室
细胞学实验室 生化分析室 摄影室及暗室
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1.基本实验室:
n 消毒准备室 n 制备室 n 无菌操作室
电子消毒灭菌器—-在高压电场作用下,电子管的内外电极发生强烈电子轰击,
使空气电离而将空气中的氧转换成臭氧。臭氧是一种强氧化剂,能同细菌的胞膜
及酶蛋白氢硫基进行氧化分解反应,从而靠臭氧气体弥漫性扩散达到杀菌之目的
,消毒时没有死角。消毒后空间的残留臭氧只需30~40min即能自行还原成氧气,
空气不留异味,消毒物体表面不留残毒。
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➢ PH 7.0~7.4 去离子水 无菌
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2.灭菌设备
➢ 高温电子灭菌炉 ➢ 蒸汽式压力灭菌锅 ➢ 过滤灭菌装置 ➢ 喷雾消毒器 ➢ 紫外灯
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0.45 μm
0.22 μm
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细胞培养室的设计ppt课件
2020/3/21
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在条件比较简单的实验室,要进行组织细胞培养 实验,可以采用自制的单人或双人无菌操作箱。 箱内可安装紫外线灯供消毒灭菌和日光灯供照明, 操作时仅双手伸入箱内,也可达到一定的无菌条 件。由于箱内空气不流动,温度较高,因此操作 时间不宜太长,仅可做一般的细胞培养工作。
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①每次实验前必须充分预习,熟悉实验操作 中主要步骤和环节,了解仪器的性能和操方 法。
②严禁将与实验无关的物品带人实验室。
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③除严格按规程进行无菌操作,要培养良好习惯以防染菌或污染环境,并 做好必要的全防护。
实验前清洗双手,用75%酒精棉球擦手,用湿布擦净台面,必要时可用新 洁尔灭(扎溴铵)溶液;进行接种操作时,要关闭门窗,以防空气对流,保 持安静和良好秩序,尽量减少走动和说话,以防尘埃飞扬和唾沫飞溅;实 验室内严禁吸烟和饮食;凡需进行培养的材料,应注明名称、接种日期及 操作者姓名(或组别),放在指定的培养箱中进行培养;带菌移液管、培养 瓶、培养皿等器材,应置于专用盘、架,确定不再使用后,应立即投入消 毒液中浸泡20min以上,或煮沸0.5 h,或进行蒸汽灭菌后再清洗;离开实 验室前要用肥皂洗手;实验室中物品未经许可,不得携带出实验室。
清洗区地面应耐湿,设置地并排水良好
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6、消毒灭菌区
直接或间接与细胞接触的物品均需消毒灭菌处理。消 毒灭菌区主要用于培养液的灭和各种器具的消毒灭菌, 应备有高压蒸汽灭菌锅、细菌过滤设备、电热干燥箱、 消毒柜、排风火设备等。
清洗和消毒灭菌区应与其他区分开。
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三、动物细胞培养室的规章制度
2020/3/21
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作者 Vincent
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大纲
一.细胞实验室组成 二.细胞实验室的设置 三.细胞实验室的基本设备配置 四.常用器皿、器械 五.实验室操作注意事项
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一.细胞实验室组成
细胞培养实验室的设计是由工作的目的和规模决定的, 其基 本要求是:便于隔离、便于操作、便于灭菌、便于观察。
细胞培养实验室的设置必须满足三个基本的需要,即:实验 准备(培养基配制,洗涤与灭菌等)、无菌操作、控制培养。
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基本组成:
• 基本实验室
消毒准备室 制备室 无菌操作室
• 辅助实验室
细胞学实验室 生化分析室 摄影室及暗室
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1.基本实验室:
消毒准备室 制备室 无菌操作室
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消毒准备室
功能 一切与实验有关的准备工作 要求 设备的安装和排列要合理
房间要宽敞明亮,通风条件好 地面要便于清洁、防滑 配备 实验台,高压灭菌锅、排风灭火设备、 超声波清洗器、洗瓶机等。
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四.常用器皿、器械
培养器皿 移液器 特殊用具
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移液器
➢ 电动移液器 ➢ 微量移液器 ➢ 多通道微量移液器
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特殊用具 细胞筛网、细胞刮刀、细胞计数板
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五.实验室操作注意事项
➢ 做好实验前准备,避免反复进出而增加污染机会
➢ 进入细胞培养室前需更换工作服,换鞋并洗净、消 毒双手。
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显示pH的观察。
无菌操作间的空气消毒:
紫外线灯—-产生臭氧,并且室内温度及湿度均较高,不利于工作人员健康。
细胞培养室的设置、设备和准备工作 PPT课件
2. 高温湿热灭菌:压力蒸汽灭菌是最常用的高温湿热灭菌 方法。对生物材料有良好的穿透力,能造成蛋白质变性凝 固而使微生物死亡。布类、物、璃器皿、属器皿、胶和某 些培养液都可以用这方法灭菌。 不同压力蒸汽所达到的温度不同,不同消毒物品所需的有 效消毒压力和时间不同。从压力蒸汽消毒器中取出消毒好 的物品(不包括液体),应立即放到60-70℃烤箱内烘干, 再贮存备用,否则,潮湿的包装物品表面容易为微生物污 染。煮沸消毒也是常用的湿热消毒方法,它具有条件简单、 使用方便等特点。
滤 器
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储藏区
储存区要求是取放物品方便。主要存放各类冰箱﹑ 干燥箱﹑液氮罐﹑ 无菌培养液﹑培养瓶等,此环境也 需要清洁﹑无尘。
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清洗和消毒灭菌区
清洗和消毒灭菌区应与其他区域分开,主要进行 所有细胞培养器皿的清洗﹑ 准备﹑ 消毒及三蒸水制 备等工作。
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1.1.2 细胞培养实验室的设备
常用的基本设备 较高级的特殊设备
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二、包装
对细胞培养用品进行消毒前,要进行严密 包装,以便于消毒和贮存。常用的包装材料: 牛皮纸、硫酸纸、棉布、铝饭盒、较大培养皿 等,近几年用铝箔包装,非常方便,适用。培 养皿、注射器、金属器械等用牛皮纸包装后再 装入饭盒内,较大的器皿可以进行局部包扎。
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三、消毒和灭菌
微生物污染是造成细胞培养失败的 主要原因。
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培养用品的清洗
一、清洗 离体条件下,有害物质直接同细胞接 触,细胞对任何有害物质十分敏感,极少 残留物都可以对细胞产生毒副作用。因此 ,新的或重新使用的器皿都必须认真清洗 ,达到不含任何残留物的要求。
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(一)玻璃器皿的清洗 一般经过浸泡、刷洗、 浸酸、和清洗四个步骤。
细胞实验室简介
利用细胞实验室比较不同物种对同一毒物的反应差异,为毒理学研 究提供参考。
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细胞实验室的安全与伦理
实验室安全规定
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实验室人员培训
所有实验室人员必须经过专业培训,熟悉操作规 程和安全规定,确保实验过程的安全性。
实验设备管理
定期对实验设备进行维护和检查,确保设备正常 运行,防止因设备故障导致的安全事故。
干细胞治疗研究
总结词
随着干细胞研究的深入,干细胞治疗已成为未来细胞 实验室的重要发展方向之一,它具有广阔的临床应用 前景和巨大的市场潜力。
详细描述
干细胞治疗是指利用干细胞的自我更新和分化能力, 将其定向诱导为所需的细胞类型,以达到修复或替代 受损组织、治疗疾病的目的。目前,干细胞治疗已经 在多种疾病的治疗中取得了一定的成果,如糖尿病、 帕金森病、心肌梗死等。未来,随着技术的不断进步 和应用范围的扩大,干细胞治疗将成为一种重要的治 疗手段,为许多难治性疾病提供新的治疗途径。
依据。
医学研究
疾病模型建立
利用细胞实验室模拟人类疾病过程,为医学研究提供实验模型。
病因机制研究
通过细胞实验探究疾病的发病机制,为疾病预防和治疗提供理论 支持。
药物敏感性研究
利用细胞实验室研究不同个体对药物的敏感性和反应差异,为个 性化治疗提供依据。
再生医学
干细胞研究
利用细胞实验室研究干细胞的分化、增殖和功能,为组织工程和再 生医学提供支持。
用于药物研发、疫苗制备和基因 治疗等领域。
细胞克隆技术
定义
通过单细胞分离和培养,获得均一、同质的细胞 群体。
特点
可获得具有相同遗传特性的细胞群体。
应用
用于基因敲除、基因编辑和基因治疗等领域。
细胞实验室简介
未来发展方向与前景
发展方向
随着生物技术的不断发展,细胞实验室将朝着自动化、智能化、个性化方向发展。同时,细胞治疗、 再生医学等领域的应用也将进一步拓展细胞实验室的研究范围和应用领域。
前景展望
细胞实验室在未来的发展中将发挥越来越重要的作用,为人类健康和医疗事业的发展提供有力支持。 同时,随着技术的不断进步和应用领域的拓展,细胞实验室将有望成为生物技术领域的重要发展方向 之一。
功能
细胞实验室的主要功能包括细胞培养 、细胞生物学研究、药物筛选、基因 编辑等,旨在探索细胞生长、发育、 代谢和疾病机制等方面的问题。
细胞实验室的历史与发展
历史
细胞实验室的建立可以追溯到20世纪初,随着显微镜技术和细胞培养技术的不 断发展,细胞实验室逐渐成为生物学和医学研究的重要领域。
发展
随着分子生物学、基因组学和生物信息学等新兴技术的引入,细胞实验室的研 究范围和深度不断拓展,为生命科学领域的发展提供了有力支持。
肿瘤细胞研究是细胞实验室中 的重要实践案例,涉及肿瘤发 生、发展和转移等多个方面。
实验室通过观察肿瘤细胞形态、 生长特性、基因表达和信号转 导等方面的变化,深入了解肿 瘤的生物学特征。
研究肿瘤细胞对药物的反应, 为药物研发和个性化治疗提供 实验依据。
案例三:基因编辑在细胞实验室的应用
基因编辑技术如CRISPR-Cas9 在细胞实验室中广泛应用于基因
04 细胞实验室的挑战与前景
技术挑战与解决方案
技术挑战
细胞培养技术需要高标准的无菌操作,以防止微生物污染。此外,细胞培养过程 中需要精确控制温度、湿度、气体浓度等环境因素,以确保细胞的正常生长和功 能。
解决方案
采用先进的细胞培养技术和设备,如细胞培养箱、显微镜、离心机等,以实现自 动化和精确控制。同时,加强操作人员的培训和规范操作流程,提高细胞培养的 成功率和稳定性。
细胞生物学实验室介绍
精编资料细胞生物学实验室始建于1978年.老一代教师为实验室的建设和课程的设置付出了巨大的努力,积累了丰富的经验.在211工程的资助下,本实验室的结构和设备得到了改善,...生物学细胞生物学实验室细胞生物学实验室主要承担“细胞生物学实验”和“细胞生物学大实验”的教学任务。
其中“细胞生物学实验”是全体本科生的必修课,34学时,计1学分。
这2门课程的宗旨是使学生以具体直观的方式认识动植物细胞的功能和结构的多样性,了解细胞生活周期的主要特征、加深对课堂学习知识的理解和印象,初步掌握光学显微术、荧光显微术、细胞培养、细胞融合等现代细胞生物学研究的思维方式、实验原理和操作方法,从而建立完整的生命科学知识体系,为进一步从事与本学科有关的科学研究打下必要的知识和能力基础。
细胞生物学实验室始建于1978年。
老一代教师为实验室的建设和课程的设置付出了巨大的努力,积累了丰富的经验。
在211工程的资助下,本实验室的结构和设备得到了改善,1998购置了高质量的实验用显微镜。
在设备改善的基础上,实验课的教学内容得到了大幅度的调整。
新设的“细胞质DNA的荧光显微观察”、“免疫荧光样品的制备与观察”、“植物原生质体融合”以及“GFP转基因细胞的荧光显微观察”等实验内容采用了先进的细胞生物学技术成果或广泛应用的研究方法。
本实验室的全体教学人员将在“方法先进、结果直观、贴近科研”的思想指导下不断改进教学内容和方法,努力将该实验室建设成“有思想内容特色,受学生欢迎”的新型生命科学教学实验室。
细胞周期蚕豆染色体细胞生物学实验细胞生物学是生物学中一门重要的主干基础课。
在细胞生物学的教学过程中,我们非常重视实验课的内容设置,努力使其贴近现代细胞生物学研究和实验的最新方法。
比如;细胞质DNA的原位荧光显微显示与观察、GFP(绿色荧光蛋白)细胞器转基因拟南芥的活细胞观察以及细胞周期中微管骨架的免疫荧光标记与观察等实验是我们新近开设的特色实验,它们涉及的实验方法和科学思想在目前的细胞分子生物学研究中应用非常普遍。
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五.实验室操作注意事项
➢ 做好实验前准备,避免反复进出而增加污染机 会
➢ 进入细胞培养室前需更换工作服,换鞋并洗净、 消毒双手。
➢ 注意无菌室内的紫外灯
➢ 室内常规用品不准随意拿出室外,所有物品不 得挪作它用
➢ 冰箱内的培养液要注明姓名、配制日期, 不随便使用他人的培养液,以免交叉污染
➢ 注意各类设备运行状态,发现问题及时报 告
制备室
➢ 功能 进行培养液及相关试剂的配制 ➢ 要求 在无菌操作台内过滤、除菌。 ➢ 配备 冰箱、天平、真空泵、PH计等。
无菌操作室
➢ 地面、天花板及四壁尽可能光洁, 无死角,易于清洁。
➢ 大小适度,层高不高于2.5米。 ➢ 干爽、安静、清洁、明亮。 ➢ 紫外灯1-2盏,保持室内无菌状态
。
无菌操作室
➢ 无自带风机,依赖外接通风管中的风机 带 动气流。
三级生物安全柜
➢ 为3-4级实验室生物安全等级而设计, 柜体完全气闭。
➢ 通过手套进行操作,俗称“手套箱”。 ➢ 实验品通过双门的传递箱进出。 ➢ 适用于高风险的生物实验。
4.细胞培养设备
➢CO2培养箱 ➢离心机
温度:37℃±0.5℃ CO2浓度:5% 相对湿度:100% 定期清洗、消毒
➢ 设置空气过滤和恒温恒湿装置,恒 温温度26度左右。相对湿度控制在 30-65%。
➢ 保持正压,尽量减少与外界的空气 对流,减少尘埃与微生物侵入。
➢ 通常由内外间组成,外间为缓冲间 ,用于准备工作。
➢ 研究人员进入操作间前要穿上消过 毒的工作服和拖鞋。
无菌操作
(1)无菌操作室:无菌操作区只限于细胞培养及其他无菌操作的区域,最好能 与外界隔离,不能穿行或受其他干扰。
一级生物安全柜
➢ 保护工作人员和环境,而不保护样品。
➢ 排气口安装有HEPA过滤器。
➢ 无自带风机,依赖外接通风管中的风机 带 动气流。
二级生物安全柜
➢ 可提供对样品,环境,工作人员的保护 。
➢ 排气口安装有HEPA过滤器,独有特征是 具有垂直层状薄片(无定向的)HEPA过 滤器。
➢ 内置风机,形成下沉气流
基本组成:
• 基本实验室
消毒准备室 制备室 无菌操作室
• 辅助实验室
细胞学实验室 生化分析室 摄影室及暗室
1.基本实验室:
消毒准备室 制备室 无菌操作室
消毒准备室
功能 一切与实验有关的准备工作 要来自 设备的安装和排列要合理房间要宽敞明亮,通风条件好 地面要便于清洁、防滑 配备 实验台,高压灭菌锅、排风灭火设备、 超声波清洗器、洗瓶机等。
➢ 实验完毕,及时清洁工作台面,将使用过 的实验用品移出无菌室
➢ 定期对无菌室进行消毒灭菌
谢谢
理想的无菌操作室应划为三部分: a) 更衣室—―供更换衣服、鞋子及穿戴帽子和口罩。 b) 缓冲间—―位于更衣间与操作间之间,目的是为了保证操作间的无菌环境。 c) 无菌操作间—―专用于无菌操作、细胞培养。其大小要适当,且其顶部不宜
过高(不超过2.5m)以保证紫外线的有效灭菌效果;墙壁光滑无死角以便清 洁和消毒。工作台安置不应靠墙壁,台面要光滑压塑作表面,漆成白色或灰 色以利于酚红
➢ PH 7.0~7.4 去离子水 无菌
2.灭菌设备
➢ 高温电子灭菌炉 ➢ 蒸汽式压力灭菌锅 ➢ 过滤灭菌装置 ➢ 喷雾消毒器 ➢ 紫外灯
0.45 μm 0.22 μm
3.无菌操作设备
➢生物安全柜
生物安全柜
根据主要几项生物安全柜国际标 准的规定,安全柜可分为一级、二 级和三级三大类以满足不同生物研 究和防疫的要求。安全柜的分类级 别与生物安全登记无关。
细胞实验室简介
作者 Vincent
大纲
一.细胞实验室组成 二.细胞实验室的设置 三.细胞实验室的基本设备配置 四.常用器皿、器械 五.实验室操作注意事项
一.细胞实验室组成
细胞培养实验室的设计是由工作的目的和规模决定的, 其 基本要求是:便于隔离、便于操作、便于灭菌、便于观察。
细胞培养实验室的设置必须满足三个基本的需要,即:实 验准备(培养基配制,洗涤与灭菌等)、无菌操作、控制培养。
显示pH的观察。 无菌操作间的空气消毒:
紫外线灯—-产生臭氧,并且室内温度及湿度均较高,不利于工作人员健康 。 空气过滤的恒温恒湿装置—-最好 无臭氧紫外线消毒器 电子消毒灭菌器—-在高压电场作用下,电子管的内外电极发生强烈电子轰 击,使空气电离而将空气中的氧转换成臭氧。臭氧是一种强氧化剂,能同细 菌的胞膜及酶蛋白氢硫基进行氧化分解反应,从而靠臭氧气体弥漫性扩散达 到杀菌之目的,消毒时没有死角。消毒后空间的残留臭氧只需30~40min即能 自行还原成氧气,空气不留异味,消毒物体表面不留残毒。
二.细胞实验室的设置
细胞培养实验室应能进行五方面的工作: ➢ 无菌操作 ➢ 制备 ➢ 清洗 ➢ 消毒灭菌处理 ➢ 储藏
三.细胞实验室的基本设备配置
基本设备 灭菌设备 无菌操作设备 细胞培养设备 细胞学鉴定设备
1.基本设备
➢ 冰箱 ➢ 天平 ➢ 酸度计 ➢ 恒温水浴锅 ➢ 磁力搅拌器 ➢ 液氮罐 ➢ 纯水设备
输出压力指示
罐内压力指示 流量控制阀门
接培养箱的管子
压力调节旋钮
5.细胞学鉴定设备
➢ 倒置显微镜 ➢ 荧光显微镜 ➢ 酶标检测仪 ➢ 流式细胞仪
四.常用器皿、器械
培养器皿 移液器 特殊用具
移液器
➢ 电动移液器 ➢ 微量移液器 ➢ 多通道微量移液器
特殊用具 细胞筛网、细胞刮刀、细胞计数板