DNA分子的复制及图解
3-3+DNA的复制课件- 高一下学期生物人教版(2019) 必修2
15N和14N是N元素的两种稳定的同 位素(无放射性),这两种同位 素的相对原子质量不同,含15N的 DNA比含14N的DNA密度大。
二 Part Two DNA半保留复制的实验证据
二、DNA半保留复制的实验证据
1958年,美国生物学家梅塞尔森和斯塔尔以大肠杆菌 为实验材料,运用同位素示踪技术和密度梯度离心技术, 设计了一个巧妙的实验,证明了DNA的确是以半保留的 方式复制的。
C DNA链的比值为( )
A.1∶1 B. 2∶1 C.3∶1 D.4∶1
[例题3]一个由15N标记的DNA分子,放在没有标记的环境中
C 培养,复制5次后标记的DNA分子占DNA分子总数的( )
A.1/10 B.1/5 C.1/16 D.1/25
3. 消耗的脱氧核苷酸数
若亲代DNA分子含某种脱氧核苷酸m个
AT
+ A T
CG
AT CG
GC
GC
AT
AT
GC
GC
9. DNA准确复制的原因 (1)DNA独特的双螺旋结构,为复制提供了精确的模板。 (2)通过碱基互补配对保证了复制能够准确地进行。
AT GC AT AT CG GC AT GC
AT
AT
GC
GC
AT
AT
+ A T
CG
AT CG
GC
GC
AT
AT
GC
实验验证 证明DNA半保留复制的实验
得出结论 DNA以半保留方式进行复制
三 Part Three DNA分子复制的过程
三、DNA复制的过程
亲代DNA
1. 概念:以亲代DNA为模板合成子代DNA的过程。
高中生物人教(2019)必修2课件第3章第3节 DNA的复制
2.DNA 复制的过程
能量 解旋酶
螺旋 母链
脱氧核苷酸 DNA 聚合酶
碱基互补配对
模板链
双螺旋结构
3.DNA 复制的特点 (1)过程:_边__解__旋__边__复__制___,多起点复制。 (2)方式:半保留复制。 4.准确复制的原因 (1)DNA 独特的双螺旋结构,为复制提供了精确的模板。 (2)通过_碱__基__互__补__配__对___,保证了复制能够准确地进行。 5.DNA 复制的意义 将遗传信息从亲代细胞传递给子代细胞,从而保持了_遗__传__信__息___的连续性。
A.酶①和酶②均作用于氢键 B.该过程的模板链是 a、b 链 C.该过程可发生在细胞有丝分裂间期 D.DNA 复制的特点是半保留复制 解析:由题图可知,酶①(解旋酶)使氢键断裂,而酶②(DNA 聚合酶)催化形成磷酸 二酯键,A 错误。答案:A
2.真核细胞中 DNA 复制如下图所示,下列表述错误的是
结果如下图所示。
(1)Ⅰ代细菌 DNA 分子的结构是怎样的? 提示:Ⅰ代细菌 DNA 分子中只有一条链被 15N 标记。 (2)Ⅲ代细菌 DNA 分子的平均相对分子质量是多少? 提示:Ⅲ代细菌 DNA 分子的平均相对分子质是为(7a+b)/8。
1.关于 DNA 分子复制的早期推测 在 DNA 分子复制的早期研究中,科学家们提出了三个模型:全保留复制模型、弥 散复制模型和半保留复制模型。 比较如下: 全保留复制:亲代 DNA 分子两条链不变,子代 DNA 分子的两条链都是新合成的。 半保留复制:新合成的每个 DNA 分子中,都保留了原来 DNA 分子中的一条链。 弥散复制:亲代 DNA 分子的两条链分散成短片段,与新合成的子代 DNA 分子的 两条链分散成的短片段混杂在一起,不能分出亲代 DNA 单链。
DNA的复制PPT课件
•Molecular Biology Course
(CsCl gradient centrifuge)
N15
DNA
N14
Semi-ConservationReplication
–第三阶段为DNA复制的终止阶段。DNA复制的整个 过程中需要30多种酶及蛋白质分子参加,我们将 在DNA复制的各个阶段着重介绍它们的作用。
•Molecular Biology Course
•Molecular Biology
Course (二)、复制的起始阶段
1、复制的起点 2、复制的方向 3、复制的速度 4、DNA复制起始引发体的形成及所参与的酶和 蛋白质
1、DNA半保留复制的机理 2、DNA的半不连续复制
•Molecular Biology
Course
1、DNA半保留复制的机理
Semi-Conservation Replication
DNA作为遗传物质的基本特点就是在细胞分裂前进行准 确的自我复制,使DNA的量成倍增加,这是细胞分裂的 物质基础。
当用缺乏糖苷酶的大肠杆菌变异株(ung-进行 实验时,尿嘧啶不再被切除。)
此时,新合成的DNA有一半放射性标记出现于岗 崎片断中,另一股直接进入大的片断。由此可 见,当DNA复制时,一条链是连续的,另一条链 是不连续的,因此称为半不连续复制(semidiscontinuous replication) 。
二、复制的起始阶段
•Molecular Biology Course
复制叉( replication fork ):DNA分子中正在进行 复制的分叉部位。它由两条亲代链及在其上新合成的子 链构成。
3-3DNA的复制课件 高一下学期 生物人教版必修2
两条链被标记情况 都是15N
一条15N,一条14N 都是14N
密度大小
离心位置
最大 靠近试管的__底____部
居中 位置__居__中____
最小 靠近试管的__上____部
核心任务1:
请各小组按照DNA复制方式的三种假说分别 进行演绎推理,将预测的实验过程和结果画在 错题分析本上,并进行展示交流。
25
DNA复制的意义:将_遗__传__信__息__从亲代细胞传递给子代细胞, 从而保持了_遗__传__信__息__的连续性。
四、DNA复制中的有关计算
① ② ③
亲代 子一代
亲代DNA分子经 n 次复制后,则 1.DNA分子数 ①子代DNA分子数: 2n个
子二代 子三代
②含亲代母链的DNA分子数: 2个
5’
3’
3’
5’
沃森和克里克大胆地作出假说
一、对DNA复制的推测
预习反馈
请阅读《必修2》P53第1自然段及图3-9,阐述沃森和克里克
对于遗传物质自我复制的假说内容。
DNA复制时,DNA双螺旋__解__开__,互补的碱基之间的氢键_断__裂___, 解开的两条单链分别作为复制的_模__板____,游离的脱氧核苷酸根
演绎推理 DNA分子数
半保留复制
全保留复制
亲代
1个
子一代
2个
子二代
4个
重带
重带
均为中带
1个重带,1个轻带
2个中带,2个轻带 1个重带,3个轻带
实验检验 科学家完成上述实验,结果如下:
亲结代论:DNA的复制子是一以代半保留的方子式二进代行的 实验结果与半
中带
轻带 中带
保留复制的预 期结果一致
分子生物学:DNA复制
(CsCl gradient centrifuge)
N15
DNA
N14
Semi-Conservation Replication
Source:M. Meselson and F. W. Stahl, Sciences 44:675, 1958.
半半保保留留复复制制-小结
DNA生物合成时,母链DNA解开为两股单链,各自作为 模板(template)按碱基配对规律,合成与模板互补的子链。子代 细胞的DNA,一股单链从亲代完整地接受过来,另一股单链则 完全重新合成。两个子细胞的DNA都和亲代DNA碱基序列一致。 这种复制方式称为半保留复制。
RNA引物的形成
DNA链合成及延长
复制的终止
• RNApol (RNA polymerase)
[Rif S ]
完成对先导链引物的合成
实现DNA复制的转录激活起始
起
• dnaG (primase) [Rif R]
始
完成对后随链引物的合成
较先导链的启动落后一个Okazaki片断
• 完成10±NtRNA引物合成后.
遗传物质的基本属性:基因的自我复制 基因的突变 控制性状的表达
DNA复制
亲代双链DNA分子在DNA聚合酶的作用下, 分别以每 条 单链DNA分子为模板,聚合与 自身碱基可以互补配对的游离的dNTP,合 成出两条与亲代DNA分子完全相同的子代 DNA分子的过程。 主 要 包 括 引 发 、 延 伸 、 终止三个阶段。
复制发动温度敏感突变型(慢停突变) 42℃不能发动DNA复制、但可完成DNA延伸
37 ℃, 5 ci / mM H3-T , 6min
37 ℃, 52 ci / mM H3-T , 6min
DNA分子结构与复制及基因概念2012.12.12
例如:已知某个DNA分子中, A=32%,其中 一 条单链中A占该链总碱基数的比例为24%, 则其互补链中A 所占的比例应为 40% 。
第二类 DNA分子复制中的有关计算
1、某DNA分子经复制n次后,所得的子代DNA数为2n 2、由n对碱基对组成的DNA分子的种类有4n种(注意 在不考虑DNA分子中每种碱基比例关系的情况下)
DNA
记忆口诀:空间结构双螺旋,糖酸成链两相间,
碱基配对靠氢键,A-T、G-C必相连
7、DNA分子的特性(见导学70页)
1.稳定性:DNA分子两条长链上的脱氧核糖与 磷酸交替排列的顺序和两条链之间碱基互补配 对的方式是稳定不变的,从而导致DNA分子的稳 定性。
2.多样性:DNA分子中碱基相互配对的方式虽 然不变,但长链中的碱基对的排列顺序是千变 万化的。如一个最短的DNA分子大约有4000个碱 基对,这些碱基对可能的排列方式就有 44000≈102408种。实际上构成DNA分子的脱氧核苷 酸数目是成千上万的,其排列种类几乎是无限 的,这就构成了DNA分子的多样性。
中带
实验步骤: (1)大肠杆菌在含15N标记的NH4Cl培养基中繁殖 几代,使DNA双链充分标记15N。 (2)将含15N的大肠杆菌转移到14N标记的普通培 养基中培养。 (3)在不同时刻收集大肠杆菌并提取DNA(间隔 的时间为大肠杆菌繁殖一代所需时间)。 (4)将提取的DNA进行离心,记录离心后试管中 DNA位置。
三、一半关系
1、两类不互补的碱基之和占整个DNA分子中总碱基 数的一半。 则:A+G = T+C = A+C = T+G = 50% 2、整个DNA分子中某一种碱基所占总碱基的比例等于 该种碱基在每一单链中所占比例的和的一半。则: A/(G+C+A+T)=1/2[A1/(G+C+A+T)1+A2/(G+C+A+T)2]
DNA分子的复制
A.子一代DNA应为② C.子三代DNA应为④
B.子二代DNA应为① D.亲代的DNA应为⑤
基础回顾 考点探究
解析
由题意可知,子一代的 DNA应为全中 (14N、 15N) ,即
b.在氮源为15N的培养基中生长的大肠杆菌,其DNA分子均
为15N-DNA(亲代)。 c.将亲代15N大肠杆菌转移到氮源为14N的培养基中,再连续 繁殖两代 (Ⅰ和Ⅱ),用密度梯度离心法分离,不同相对分子 质量的DNA分子将分布在试管中的不同位置上。
基础回顾
考点探究
实验预测:
(1)如果与对照(14N/14N)相比,子代Ⅰ能分辨出两条DNA带:
只含14N的DNA分子为 2个,离心后一半位于中密度带,一半位于 低密度带,对应图中的e;复制3次后,产生8个DNA分子,其中含
15N、14N的DNA分子为2个,只含14N的DNA分子为6个,离心后少
部分位于中密度带,大部分位于低密度带,对应图中的f。
答案
A
基础回顾 考点探究
2.细菌在15N培养基中繁殖数代后,使细菌DNA的含氮碱基
制;哺乳动物成熟的红细胞已丧失细胞核,也无各种细 胞器,不能进行DNA分子的复制。
基础回顾
考点探究
2.若上图为核DNA复制过程,则图中刚形成的两个子 DNA 位置如何?其上面对应片段中基因是否相同?两个子
DNA将于何时分开?
提示 染色体复制后形成两条姐妹染色单体,刚复制产
生的两个子DNA分子即位于两姐妹染色单体中,由着丝 点相连,其对应片段所含基因在无突变等特殊变异情况 下应完全相同,两子DNA分子将于有丝分裂后期或减数
DNA分子的结构和DNA分子的复制
运用同位素示踪技术及密度梯度离心方法进行了 DNA复制方式
的探索实验,实验内容及结果见下表。
组别 培养液中唯 一氮源
繁殖代数
1组
14NH Cl 4
2组
15NH Cl 4
3组
14NH Cl 4
4组
14NH Cl 4
培养产物
操作
多代 A
多代 B
一代
两代
B的子Ⅰ代
B的子Ⅱ代
1/2轻带 (14N/14N) 1/2中 带(15N/14N)
⑩子代DNA
2.时间:细胞有丝分裂的 ⑪间期 和减数 ⑫第一次 分 裂前的间期。 3.场所:主要是 ⑬细胞核 。
4.过程
5.结果:形成两个与 DNA分子。 6.意义:将
⑳亲代DNA分子完全相同的子代
遗传信息
从亲代传给了子代,从而保
持了遗传信息的连续性。
7.特点:(1)
边解旋边复制;(2)
半保留复制 。
解析: 本题考查对核酸的生物合成相关基础知识的理解能 力。DNA复制需要消耗能量;在逆转录过程中,以RNA为模板 合成DNA;真核生物由于DNA主要存在于细胞核中,所以DNA 的复制和转录主要发生在细胞核中。真核细胞染色体 DNA的复
制发生在分裂间期。
答案:D
3 . [2010· 北京高考, 30] 科学家以大肠杆菌为实验对象,
解旋酶作用于⑨氢键处。 每条链上相邻的脱氧核苷酸以磷酸二酯键相 连,限制酶、DNA连接酶和 DNA聚合酶均可作 用于磷酸二酯键。
先画出简图,根据碱基互补配对原则推知规律
规律1:在双链DNA分子中,互补碱基两两 相等,A=T,C=G,A+G=C+T,即嘌 呤碱基总数等于嘧啶碱基总数。
先画出简图,根据碱基互补配对原则推知规律
浙科版高中生物学必修2精品课件 第3章 遗传的分子基础 第3节 DNA通过复制传递遗传信息
2.实验材料:大肠杆菌。
3.实验原理
含15N的双链DNA密度较大,含14N的双链DNA密度较小,而一
条链含15N与另一条链含14N的双链DNA密度应该介于双链均
含15N的DNA和双链均含14N的DNA之间。
4.实验过程
(1)培养含15N的大肠杆菌:用以 15NH4Cl为唯一氮源的培养液
结构。这样,原来的一个双螺旋DNA分子就变成了两个双螺
旋DNA分子。这两个新形成的DNA分子是相同的,并且与亲
代DNA分子相同。
2.复制的条件
模板:亲代DNA解旋产生的两条母链。
原料:游离的四种脱氧核苷酸。
酶:解旋酶、DNA聚合酶。
能量来源:ATP。
3.复制的特点
(1)边解旋边复制,即随着DNA的不断解旋,新的子链也逐渐合
2.DNA分子复制时,解旋酶作用的部位可能是(
)
A.腺嘌呤与鸟嘌呤之间的氢键
B.腺嘌呤与胸腺嘧啶之间的氢键
C.脱氧核糖与含氮碱基之间的化学键
D.脱氧核糖与磷酸之间的化学键
答案:B
解析:DNA复制过程中用到解旋酶和DNA聚合酶,其中解旋酶
的作用是把两条螺旋的双链解开,破坏的是A与T、G与C之
间的氢键。
DNA双链充分被15N标记。
(2)将被15N标记的大肠杆菌转移到只含14N的培养基中培养。
(3)在不同时刻收集大肠杆菌并分离出DNA(间隔的时间为大
肠杆菌分裂一次所需的时间)。
(4)将分离出的DNA进行离心,记录离心后试管中DNA的位置。
5.实验预期:离心后应出现3种类型的DNA带。
(1)重带(梯度密度最高):两条链都被15N标记的亲代双链DNA
DNA分子的结构、复制及基因
2.遗传信息:指基因中脱氧核苷酸的排列顺序。 3.染色体、DNA、基因、脱氧核苷酸的关系
染色体——是DNA的主要载体
DNA——是主要的遗传物质
控制生物性状的基本单位,
基因 ——
携带遗传信息。主要存在 于 染色体上,少量存在于
叶绿体 和 线粒体 中
1.某DNA分子含m对碱基,其中腺嘌呤有A个。下
列有关此DNA在连续复制时所需的胞嘧啶脱氧
核苷酸数目的叙述中,错误的是
(D)
A.在第一次复制时,需要(m-A)个
B.在第二次复制时,需要2(m-A)个
C.在第n次复制时,需要2n-1(m-A)个
D.在n次复制过程中,总共需要2n(m-A)个
解析 该DNA分子含胞嘧啶数目为m-A,复制n
C.氢键
D.—脱氧核糖—磷酸—脱氧核糖—
解析 DNA分子单链上相邻碱基A与T的连接方
式如图:
由此可知是通过“—脱氧核糖—磷酸—脱氧核 糖—”连接起来的。
考点二 DNA中碱基数量的计算 解题时先画出简图,根据碱基互补配对原则推 知规律
规律1:在双链DNA分子中,互补碱基两两相 等,A=T,C=G,A+G=C+T,即嘌呤碱基总数 等于 嘧啶碱基总数。 规律2:在双链DNA分子中,互补的两碱基之和 (如A+T或C+G)占全部碱基的比例等于其任何 一条单链 中这两种碱基之和占该单链中碱基数 的比例。单双链转化公式。
假设,这个小组设计了下列实验程序,请完成实验 并对结果进行预测。
(1)实验步骤: 第一步:在氮源为14N的培养基上生长的大肠杆菌, 其DNA分子均为14N-DNA;在氮源为15N的培养基 上生长的大肠杆菌,其DNA分子均为15N-DNA。用 某种离心方法分离得到的结果如上图所示,其DNA 分别分布在轻带和重带上。
第3讲DNA的复制和修复
图 3 – 3 在复制不同阶段的 DNA分子
图 3 – 4 在非 复制DNA的旁 边复制的DNA 被看成是复制 眼
图3 – 5 放 射活性标 记的不同 密度可被 用于区别 不定向和 双向复制
图3-6 复制可能是不定向或 双向的,这决定于在起始点 形成1或2个复制叉。
表 2-9
物种
大肠杆菌 酵母
1、DNA replicase system
Helicase,任何DNA在被复制前都必须解开双链,这个过 程是由helicase来完成的,它可在ATP的作用下将DNA母链 不断解开形成单链。 Topoisomerase,主要功能是消除DNA解链过程中所产生 的扭曲力。 DNA结合蛋白,使新解链的DNA保持稳定结构。 Primases,为DNA复制提供RNA引物。 DNA polymerases,合成新生DNA链,切除RNA引物。 DNA Ligases,使新生DNA链上的缺口(3'-OH, 5'-p)生 成磷酸二酯键。
效应:拓扑异构酶可使DNA发生:
连环化(catenate) 脱连环化(decatenate) 打结(knot) 解结(unknot)
图3 – 13 I型拓扑异构酶作用机理示意图
(5) 连接酶(ligase) DNA 随后链上的复制是不连续的,各合成的片段需要连 接酶连接,连接酶的反应条件: 被连接的两链必须与另一链(模板链)互补; 两链相邻; 每次只能连接一个切口; 使一条链的5′- P 与另一链的3′- OH形成磷酸二酯键。 A T T A A T G C
(4) 拓扑异构酶(topoisomerase) 拓扑异构体:具有不同螺旋数的同一DNA分子两种异构体。 拓扑异构酶:可使DNA的两种拓扑异构体互变的酶。
分子生物学--DNA的复制课件
polⅢ + + +
- - - + >140 kD 10-20 polC
D.真核生物的DNA聚合酶
(1) DNA聚合酶a,300kD,4或5个亚基组成,占总量 的80-90%,主要负责染色体DNA的复制。 (2) DNA聚合酶b,45kD,单链,主要修复核内DNA。
(3) DNA聚合酶g,140kD,负责线粒体DNA的复制。 (4) DNA聚合酶δ,与原核生物的聚合酶类似,具有3‘→5’核 酸外切酶活性。 除了DNA聚合酶δ,其它DNA聚合酶均没有3'→5'或 5'→3'外切酶活性。
Molecular Biology
Biotechnology Institute Hu Dongwei hudw@
第三章 DNA的复制
一、半保留复制
Semi-conservation replication
以每条链为模板,按碱基互补配对原则由DNA 聚合酶催化合成新的互补链。
分子两端是靠端粒酶完成其复制。
六、DNA复制的真实性
大肠杆菌中,每复制109-1010个核苷酸便要出现一个 误差。每1000个细胞经过一次分裂才会插入一个不正常的
DNA分子的复制--公开课PPT课件
9
练习:结合所学知识回答下列问题:
(1)从图中可看出DNA复制的方式是 __半__保__留__复__制___。 (2)A和B是DNA分子复制过程需要的酶, 其中B能将单个的脱氧核苷酸连接成 脱氧核苷酸链,从而形成子链;
则A是____解__旋_____酶, B是_____D_N__A_聚__合_____酶。 (3)图示过程在绿色植物叶肉细胞 中进行的场所细有胞__核__、__线__粒__体,、叶绿体 进行的时间为_有__丝__分__裂__的__间__期____。
位素磷分别是: 31P , 31P 和32P 。
⑷、上述实验结果证明了DNA的复制方式
是 半保留复制 。
23
2020/1/15
26
10
二、对DNA分子复制的推测
半保留复制
全保留复制
11
如果要你来设计实验,你认为最基本的思路是什么?
区分亲代和子代的DNA,
标记亲代DNA链,然后观察它们在子代DNA中如何分 布
12
2020/1/15
13
问题1:如果要在实验中直观地区别、“标识” 母链或子链,可以采取什么办法?
同位素标记法
问题2:可以用什么元素的同位素(放射性)
6
一、DNA分子复制的过程(P54) :
解旋: 解旋酶催化 模板 边解旋边复制
合成子链:以母链为模板进行碱基配对 (在DNA聚合酶的催化下,利用游离的脱 氧核苷酸合成脱氧核苷酸链)
母链(旧链) 形成子代DNA: 组成
子链(新链)
方式:半保留复制
7
8
一、DNA复制的过程
思考及小组讨论解决以下问题:
5
一、DNA复制的过程
DNA分子的结构和复制及相关计算(共40张)
含氮碱基
A
T
C
G
A
T
A
T
C
G
G
C
A
T
G
C
DNA双螺旋结 构的主要特点
1 DNA分子是由两条反向平 行(píngxíng)的脱氧核苷酸长链盘 旋而成的双螺旋结构。
2 DNA分子中的脱氧核糖 和磷酸交替连接,排列在外侧, 构成基本骨架;碱基在内侧。
3 两条链上的碱基通过氢键连
结,形成碱基对,且遵循碱基互 补配对原则。
腺嘌呤脱氧核苷酸
鸟嘌呤脱氧核苷酸
胞嘧啶脱氧核苷酸
胸腺嘧啶(mì dìnɡ)脱氧核苷酸
第4页,共40页。
DNA的空间结构
从图上可辨认出DNA是 由两条链交缠在一起 的螺旋结构
以超高分辨率扫描式电子显 微镜拍到的DNA照片(zhàopiàn)。
第5页,共40页。
DNA的空间结构
第6页,共40页。
放大
母链(旧链)
复制后的DNA: 组成 子链(新链)
复制的结果: 形成两个完全相同的DNA分子
第23页,共40页。
5、DNA分子复制 时需何条件?
①模板(múbǎn):亲代DNA的两条母链;
②原料:4种脱氧核苷酸;
③能量:ATP; ④酶 :DNA解旋酶,DNA聚合酶等。
第24页,共40页。
6、DNA分子(fēnzǐ)复制的特点:
6、复制特点: (1)边解旋边复制 (2)半保留复制
7、复制的精确性:(1)DNA的双螺旋结构
(2)碱基互补配对原则
8、复制的生物学意义:
使遗传信息在传递过程中保持了连续性
第28页,共40页。
DNA 半保留 复制 (bǎoliú)
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
DNA分子的复制及图解
所谓复制就是新合成的DNA分子与原来的DNA分子结构一致。
能够“自我”复制是遗传物质的重要特征之一。
染色体能够复制,基因能够复制,归根到底是DNA能够复制。
DNA分子的复制发生在细胞的有丝分裂或减数分裂的第一次分裂前的间期。
这时候,一个DNA分子双链之间的氢键断裂,两条链彼此分开,各自吸收细胞内的核苷酸,按照碱基配对原则合成一条新链,然后新旧链联系起来,各自形成一个完整的DNA分子。
复制完毕时,原来的一个DNA分子,即成为两个DNA分子,因为新合成的每条DNA分子都含有一条原来的链和一条新链,所以这种复制方式称为半保留复制。
应该指出,研究工作表明,在复制过程中,DNA的两条母链并不是完全解开以后才合成新的子链,而是在DNA聚合酶的作用下,边解开边合成的(图6-11),并且这种复制需要RNA作引物,待DNA复制合成后,由核酸酶切掉引物,经DNA聚合酶的修补和连结酶的“焊接”把它们连结成完整的DNA链(图6-12)。
1.DNA的解旋。
亲代DNA分子,利用细胞提供的能量,在解旋酶的作用下,氢键断裂,部分双螺旋链解旋为二条平行双链(图6-12,1)。
2.RNA引物的生成。
以单股DNA为模板,在引物酶作用下,合成小段(由几十个核苷酸组成)RNA引物(图6-12,2)。
3.DNA的生成。
以单股DNA为模板,在DNA聚合酶作用下,在RNA引物末端合成DNA(图6-12,3)。
4.切掉引物生成冈崎片段。
在核酸酶作用下切掉引物。
在DNA聚合酶作用下,将引物部位换上DNA,此时的DNA片段(由1 000~2 000个核苷酸组成)称为冈崎片段(1968年日本科学家冈崎等人首先提出的)(图6-12,4)。
5.DNA片段的连结。
在连结酶作用下,将冈崎片段连结起来(图6-12,5),形成一条完整的新的DNA链,新链与旧链构成DNA双链。
关于DNA分子的复制功能,现已在人工合成DNA分子的实验中获得完全的证实。
1956年,康贝格(A.Kornberg)以天然的大肠杆菌噬菌体φX174的DNA为引子(即按照它的分子结构),用四种核苷酸作为原料,加入适当的能源ATP,在大肠杆菌DNA聚合酶的作用下,已经能在试管中成功地把游离的核苷酸合成为φX174的DNA。
这个半人工合成的DNA具有生物活性,用它来侵染大肠杆菌,能够在寄主体内繁殖。
DNA分子能够人工复制是有重大的生物学意义的。
但是,必须指出,DNA分子的人工复制不能脱离细胞内的其他物质和条件,如需要原料(四种核苷酸)、能量(ATP)、酶的作用等等。
因此,它必然要受整个生活细胞的制约。
严格地说,那种认为DNA能够脱离其他物质和条件进行“自我”复制的看法是不确切的。
人民教育出版社。