血清尿素测定参考方法
血清尿素测定的正常参考范围
血清尿素测定的正常参考范围（原创版）目录1.血清尿素测定的定义和意义2.血清尿素测定的正常参考范围3.血清尿素测定的临床应用4.异常结果的判断和处理正文血清尿素测定是指通过检测血液中的尿素含量，了解肾脏功能和体内代谢情况的一种检查方法。
尿素是蛋白质分解产生的一种代谢废物，主要通过肾脏排泄。
因此，血清尿素测定可以反映肾脏的滤过功能和尿路通畅情况。
一、血清尿素测定的正常参考范围血清尿素测定的正常参考范围因实验室和检测方法的不同而有所差异。
通常情况下，血清尿素浓度的正常范围为 3.2-7.2 毫摩尔/升（mmol/L）。
若检测结果超出正常范围，可能提示肾脏功能受损或存在其他代谢性疾病。
二、血清尿素测定的临床应用血清尿素测定在临床诊断中有广泛的应用，主要体现在以下几个方面：1.评估肾脏功能：血清尿素浓度可以反映肾脏滤过功能，对慢性肾脏病、急性肾损伤等疾病的诊断和评估具有重要意义。
2.判断肾小球滤过率：血清尿素浓度与肾小球滤过率（GFR）密切相关，通过公式计算可估算 GFR，有助于了解肾脏功能状况。
3.评估蛋白质摄入和分解：血清尿素浓度可反映体内蛋白质的摄入和分解情况，对营养不良、蛋白质丢失性胃肠病等疾病的诊断和评估有参考价值。
三、异常结果的判断和处理当血清尿素测定结果异常时，应结合临床表现和其他检查结果进行综合分析，明确病因和诊断。
常见的异常情况和处理方法如下：1.血清尿素浓度升高：常见于慢性肾脏病、急性肾损伤、尿路梗阻等情况。
需进一步检查明确病因，针对性治疗。
2.血清尿素浓度降低：常见于蛋白质摄入不足、营养不良、严重肝损害等情况。
需调整饮食和营养支持，改善身体状况。
总之，血清尿素测定是一种常用的临床检查方法，对评估肾脏功能和诊断相关疾病具有重要价值。
尿素检测标准操作规程SOP
还原型辅酶I（NADH)
0.3mol/l
α-酮戊二酸
13.0mol/l
不同批次的试剂不推荐混合使用
7.4储存条件有效期
试剂在2-8℃保存可稳定1年，试剂开瓶后于2-8℃可稳定1个月。
7.5参数设置
主波长
340nm
辅助波长
405nm
反应方法
速率法
反应温度
37℃
反应方向
向下
试剂1
200ulቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
样本
2.5ul
4.1生理性：高蛋白饮食可引起血尿素浓度和尿液排出量显著增高。成人血清尿素浓度男性比女性平均高出0.3-0.8mmol/l，并随着年龄增加有增高倾向。妊娠妇女由于血容量增加，尿素浓度比非孕妇低。
4.2病理性：分为肾前性、肾性、肾后性。①肾前性:主要是严重失水引起的血液浓缩，肾血流量減少及肾小球滤过率降低，从而使尿素潴留，可见于剧烈呕吐、肠梗阻和长期腹泻;②肾性:为最常见的因素，可见于急性肾小球肾炎、肾功能衰竭、慢性肾盂肾炎及中毒性肾炎等，在肾功能不全的代偿期可见尿素轻度升高(＞8.0mmol/L)，肾功能衰竭失代偿期，尿素可中度升高(17.9～21.4mmol/L)，肌酐也中度升高(442.0umol/L);尿毒症时尿素＞21.4mmol/L，肌酐也可达1800umol/L，为尿毒症的诊断标准之一;③肾后性:如前列腺肥大、尿路结石、尿道狭窄、膀胱肿瘤等都可能使尿路阻塞引起血尿素升高。血液尿素减少较为少见，除了妊娠、蛋白质营养不良等情況外。常表示有严重的肝病、肝坏死。
12.2尿素氮测定只是临床医师对患者进行诊断的指标之一，临床医师还要根据患者的体征、病史及其他的诊断项目、诊断手段进行综合判断。
13.性能指标
13.1线性范围：在（0.3-35.7）mmol/L范围内：a)线性相关系数（r）应>0.995;b)（0.3-10.0）mmol/L范围内，线性偏差应≦2.0mmol/L;（10.0-35.7）mmol/L范围内，线性偏差应该≦10.0%。
血清尿素测定的正常参考范围
血清尿素测定的正常参考范围（实用版）目录1.血清尿素测定的简介2.血清尿素测定的正常参考范围3.血清尿素测定的临床意义4.血清尿素测定的注意事项正文一、血清尿素测定的简介血清尿素测定是一种常用的临床检查方法，用于评估肾脏功能和检测氮代谢紊乱。
尿素是蛋白质代谢产生的废物，主要通过肝脏转化为尿素，并通过肾脏排出体外。
因此，血清尿素水平可以反映肾脏的滤过功能和氮代谢状况。
二、血清尿素测定的正常参考范围正常情况下，血清尿素测定的参考范围因实验室和仪器不同而略有差异。
一般来说，成人血清尿素的正常参考范围为 3.2-7.2 mmol/L（毫克每升），儿童的正常范围略低。
当血清尿素值超出正常范围时，可能提示肾脏功能受损或存在氮代谢紊乱。
三、血清尿素测定的临床意义1.评估肾脏功能：血清尿素测定是评估肾脏功能的重要指标。
当肾脏受损时，滤过功能下降，导致血清尿素水平升高。
因此，血清尿素测定可用于检测肾脏疾病的早期病变。
2.检测氮代谢紊乱：血清尿素是蛋白质代谢产生的废物，当摄入过多的蛋白质或肾脏功能受损时，可能导致氮代谢紊乱。
血清尿素测定可用于检测氮代谢紊乱的类型和程度。
3.评估治疗效果：在治疗肾脏疾病或氮代谢紊乱时，血清尿素测定可用于评估治疗效果。
若治疗有效，血清尿素水平会逐渐降低；若治疗无效，血清尿素水平可能持续升高。
四、血清尿素测定的注意事项1.抽血前空腹：进行血清尿素测定前，患者需要空腹 8-12 小时，以免食物影响检测结果。
2.避免剧烈运动：剧烈运动可能导致血清尿素水平升高，因此在检测前应避免剧烈运动。
3.遵医嘱：在进行血清尿素测定时，应根据医生的建议进行，确保检测结果的准确性。
总之，血清尿素测定是一种常用的临床检查方法，用于评估肾脏功能和检测氮代谢紊乱。
了解血清尿素测定的正常参考范围、临床意义及注意事项，有助于更好地进行检测和评估。
实验三十一 尿素、肌酐测定
尿素、肌酐测定
血清尿素、肌酐和内生肌酐清除率可作为反映肾小 球滤过功能的指标，主要用于肾脏功能的检查和诊断。 由于造成尿素升高的因素较多，而肌酐在肾小球滤过 率降低到正常的50%以下时，才开始升高，所以二者 的测定对晚期肾脏疾病的诊断和治疗有重要的临床意 义。
速率法（脲酶-谷氨酸脱氢酶）法测定尿素 一、实验原理：
二、实验试剂： R1：氢氧化钠 R2：苦味酸 肌酐标准液：133μ mol/L
R2与R1等体积完全混合，即为工作液。
三、实验操作： 蒸馏水 标准液 10μ l 血清 10μ l 试剂 1ml 1ml 1ml 混匀室温放置15分钟,空白管调零，510nm波 长下测定各管的吸光度。 【参考值】 男性：53μ mol/L - 97μ mol/L 女性：44μ mol/L - 80μ mol/L 空白 10μ l 标准 测定
蒸馏水 标准液 血清 试剂
空白 10μl
标准
10μl
测定
1ml
1ml
10μl 1ml
混匀37℃,30秒，பைடு நூலகம்自动生化分析仪测定，程序4
【参考值】1.7-8.3mmol/L
碱性苦味酸法测定血清肌酐
一、实验原理： 在碱性条件下，血清中的肌酐能够与 苦味酸盐作用生成橘黄色的苦味酸肌酐 复合物。其生成量与肌酐含量成正比。 在 510-520nm 波长附近测定其吸光度值， 通过与同样处理的肌酐标准液比较，即 可求出样品中肌酐的含量。
BUN＋2H2O UREASE 2NH3 ＋CO2 2NH3＋2α－酮戊二酸＋2NADH GLDH ＋ 2L－谷氨酸＋2NAD ＋2H2O
二、实验试剂： R1：UREASE、GLDH、NADH R2：缓冲液、 α－酮戊二酸 尿素标准液：7.14mmol/L
尿素氮测定的标准操作规程
尿素氮测定（速率法）1：概述尿素是人体内蛋白氮代谢的终产物，它构成了血液中绝大部分的非蛋白氮.尿素产生于肝脏，经过肾脏排泄至尿中，因此尿素的含量取决于蛋白质的摄入量，蛋白质分解代谢和肾功能。
2：标本的手收集新鲜无溶血标本，血清或血浆样本均不溶血.血浆样本只能采用肝素或EDTA抗凝。
样本在4摄氏度可稳定7天.采血前病人应禁食12小时,采集静脉3ml,待凝固后(最好放在37摄氏度水浴箱内45分钟）通常为加抗凝剂的血液在30—60分钟凝血析出血清.3000r/min离心5-10分钟,分离出血清备用.不建议采用血浆标本。
3方法原理样品中的尿素在试剂中脲酶的催化下与水反应生成氨和二氧化碳，生成的氨与试剂中的酮戊二酸在谷氨酸脱氢酶的催化下产生谷氨酸，同时NADH被氧化为NAD+，从而使340nm处的光吸收值下降.通过监测340nm处光吸收值下降的速率，可计算出样品中尿素的浓度。
4剂来源，配置及储存试剂来源：试剂配置：试剂一和试剂二均为液体试剂,可直接使用。
启用后在2—8度可稳定30天.若试剂混浊,或以蒸馏水为空白在340nm处的光吸收值低于1.0A,应予丢弃。
试剂储存：试剂避光储存2-8摄氏度可稳定至标签所示失效期。
5分析仪器CS—600B全自动生化分析仪6计算方法ALT（U/L)=（A/min*Tv*1000）(6.3*Sv＊P）式中Tv=总反应体积Sv=样本体积6.3=NADH在340nm处的毫摩尔消光系数P=比色杯光径(cm）7 线性范围：本实验的线性范围：0—---35mmol/L8 参考范围:2。
82—-—8。
2 mmol/L9 失控控理1：立即重测同一质控品,如重测后结果仍不再允许范围,请进行下一步。
2：新开一瓶质控品，重测失控项目，如新开的质控血清结果正常,那么原来质控血清可能过期或在室温防止时间过长而变质，如结果仍不再允许范围，则进行下一步。
3：进行仪器维护，重测失控项目。
检查仪器状态,查明光源是否更换，比色杯是否需要清洗或更换？对仪器进行清洗等维护.另外还要检查试剂，此时可更换试剂已查明原因。
血清尿素尿素氮（UreaBUN）测定-标准操作程序
三级文件定标准操作程序第2页共3页生效日期：目的：规范血清尿素/尿素氮(Urea/BUN)测定标准操作规程。
范围：适用于血清尿素/尿素氮(Urea/BUN)测定的标准操作。
职责：生化部检验人员对本规程的实施负责。
规程：1 测定方法：采用动力学紫外法，定量测定血清中血清尿素/尿素氮(Urea/BUN)的含量。
2 测定原理脲酶尿素 + H2O 2NH+4 + CO2谷氨酸脱氢酶2NH+4 + α-酮戊二酸 + NADH + H+ L-谷氨酸 + 2NAD+ + H2O3 标本血清，肝素或EDTA抗凝血浆（不要用肝素铵的抗凝剂），处理方法见标本准备。
稳定性：20-25℃ 7天2 - 8℃ 7天-20℃ 1年4 试剂4.1试剂来源：ROCHE配套试剂（详见试剂说明书）。
贮存条件及稳定性：未打开试剂盒：2－8℃储存至效期末R1：打开后机上稳定28天R2：打开后机上稳定28天准备：直接使用。
4.2 校准物来源：ROCHE配套校准物, 符合SRM916a标准，具体如下：S1：生理盐水S2：C.f.a.s贮存条件：校准物在2-8℃保存可保存至有效期。
准备：直接使用。
定标频率：A试剂盒在仪器上放置42天后B 试剂批号更换后C 由质控结果决定4.3 质控物来源：Precinorm (罗氏正常值质控)Precipath (罗氏病理值质控)其它适合的质控品贮存条件：置2-8℃冰箱至有效期。
准备：直接使用。
质控间隔时间及限制：应视不同地区及各自实验室情况而定。
质控结果应在限定的范围之内，如果超出范围，实验室应根据情况采取措施。
三级文件定标准操作程序第3页共3页生效日期：5 上机操作见GS200全自动生化分析仪操作维护保养程序。
6 参考范围6.1 尿素：10－50mg/dL6.2 血清/血浆：成人（18－60岁）：8－20mg/dL7 性能指标本法线性范围为血液：：5-400mg/dl ，不准确度允许范围X±9%，不精密度CV=3.4%，尿液：CV=1.9%，灵敏度5mg/dl。
尿素测定标准操作规程
尿素测定标准操作规程1.检验原理：（酶偶联检测法）尿素经脲酶催化水解生成氨与二氧化碳，在谷氨酸脱氢酶催化下，氨与α-酮戊二酸、还原型辅酶Ⅰ（NADH ）作用生成谷氨酸与氧化型辅酶Ⅰ（+NAD ），还原型辅酶Ⅰ在340nm 波长处有吸收峰，而氧化型辅酶Ⅰ几乎无吸收峰，还原型辅酶Ⅰ在340nm 吸光度的下降速率与样品中尿素含量成正比。
尿素+2O H 2−−→−脲酶2+4NH +-23CO Α-酮戊二酸++4NH +NADH++H −−−−→−谷氨酸脱氢酶L-谷氨酸++NAD +O H 2 2.试剂主要组成成分3.样本要求：新鲜无溶血血清。
在22～25℃保存8小时，2～8℃保48小时，-20℃保存7天，样本不可反复冻融！样本中抗坏血酸含量≤0.3g/L 、胆红素含量≤0.4g/L 、血红蛋白含量≤5.0g/L 、脂血含量≤5.0g/L 对检测结果基本无影响。
4.检验方法；仪器法（详见DF-603/DI-600标准操作规程）5.参考范围：6.检验结果的解释：6.1样本含量超出线性范围时，建议用0.9%（W/V ）的氯化钠溶液稀释样本，最大稀释不超过10倍。
6.2.单位换算：mg/dl=mmol/L×6.027.检验方法的局限性7.1结果的准确性依赖于仪器的校正和测定温度、时间的控制。
7.2若试剂浑浊，或以水空白在340nm处吸光度小于1.000时不能使用。
7.3检验结果仅供参考，不作为临床诊断的唯一依据。
8.试剂性能指标8.1试剂外观：无色透明液体，无悬浮物及沉淀。
8.2装量：不低于标识值。
8.3试剂空白8.3.1试剂空白吸光度：在340nm处，光径1cm时，空白吸光度A≥1.0008.3.2试剂空白吸光度变化率：在340nm处，光径1cm时，△A/min≤0.004.8.4线性区间：试剂的线性区间为[0.9-35.7]mmol/L，在此线性区间内：a）线性相关系数r应不小于0.9900；b)[0.9-4.0]mmol/L区间内，线性绝对偏差不超过±0.4mmol/L；[4.0-35.7]umol/L区间内，线性相对偏差不超过±10%。
血清尿素测定的正常参考范围
血清尿素测定的正常参考范围【原创实用版】目录1.血清尿素测定的定义2.血清尿素测定的正常参考范围3.血清尿素测定的临床意义4.异常结果的处理建议正文一、血清尿素测定的定义血清尿素测定是指通过检测血清中尿素的含量，来了解肾脏功能和蛋白质代谢状况的一种实验室检查方法。
尿素是蛋白质在体内分解代谢产生的一种废物，主要通过肾脏排泄。
二、血清尿素测定的正常参考范围正常情况下，血清尿素测定的结果有一个参考范围。
在我国，血清尿素正常参考范围为：成人男性 2.9-8.2mmol/L，成人女性 2.9-7.5mmol/L，儿童和老人的正常范围略有不同。
需要注意的是，不同实验室和检测设备可能会有不同的正常范围，应以实际检测报告为准。
三、血清尿素测定的临床意义血清尿素测定在临床上具有很高的实用价值，可以用于评估肾脏功能、蛋白质代谢、水分代谢等多种方面。
以下是血清尿素测定的一些常见临床应用：1.评估肾脏功能：血清尿素水平升高，通常意味着肾脏滤过功能受损。
尿素水平越高，肾脏损害程度可能越严重。
2.评估蛋白质摄入和代谢：血清尿素水平与蛋白质摄入量和蛋白质代谢有关。
蛋白质摄入过多或蛋白质代谢亢进时，尿素水平可能会升高。
3.评估水分代谢：血清尿素水平可以反映体内水分状况。
脱水、水分过多等情况下，尿素水平可能发生变化。
四、异常结果的处理建议如果血清尿素测定结果异常，建议采取以下措施：1.咨询医生：向专业医生咨询，了解尿素升高的原因和可能的临床意义。
2.进一步检查：根据医生的建议，进行进一步的检查，如肾功能检查、B 超、生化检查等，以明确诊断。
3.调整生活习惯：如果尿素升高与蛋白质摄入过多或水分代谢紊乱有关，可以尝试调整饮食和饮水习惯，保持平衡。
实验十三血清尿素氮测定(脲酶—Berthelot比色法)
实验十三血清尿素氮测定（脲酶—Berthelot比色法）一、实验目的与要求1 了解血液尿素氮（BUN）在人体营养学上的生理学意义及其在代谢上的重要性。
2 掌握血液尿素氮测定方法及721分光光度计或AT648半自动生化多用仪的使用方法和现代生化检测试剂盒的应用。
二、实验原理尿素在脲酶作用下分解生成氨。
在碱性条件下，经次氯酸氧化生成的氯胺与苯酚被亚硝基铁氰化钠催化生成蓝色的靛酶。
其反应式为： CH2NH2N尿素O+HOH脲酶NH3彩+CHOH2N氨基甲酸O-2NH3+CO2氨NH3+OCl-NH2Cl+OH-次氯酸氨胺催化剂NH2Cl+OH+OH-Cl-+H2O+HONH2苯酚P胺基苯酚HONH2+OH-+O2==N——O-+H2O酚靛三、实验仪器与试剂1 仪器（1） AT648半自动生化分析仪1台；（2） 4孔恒温水浴锅1个；（3）振动摇床1台。
2 分组及仪器2人一组，每组仪器包括：（1）试管架1个；（2） 2ml试管10个；（3） 20μl微量加样器1个；（4） 1ml移液管1个；（5） 5ml移液管2个；（6）吸耳球1个；（7）搪瓷盘1个；（8）微量加样滴头；（9）吸水纸。
3 本试剂盒内含5种试剂：（1）脲酶（冻干） 2瓶（2） pH 8.0缓冲液：由乙二胺四乙酸二钠盐和磷酸氢二钾组成 1×46ml（3）显色剂Ⅰ：由苯酚和亚硝基铁氰化钠组成 1×225ml（4）显色剂Ⅱ：由氢氧化钠和安替福民组成 1×225ml（5）尿素氮标准液（20mg/dl） 2×2ml四、实验步骤1 血清（1）取脲酶一瓶，用23.0ml pH 8.0缓冲液溶解。
（2）于一系列试管中，按下表加入各溶液。
表131系列反应管中所加溶液的量空白管标准管样品管样品（μl）——20标准液（μl）—20—酶液（μl）0.50.50.5 （3）于37℃水浴中保温15min，然后各管分别加入显色剂Ⅰ和显色剂Ⅱ各2.5ml。
血清(血浆)尿素氮测定
以空白管调零比色，读取各管吸光度。
【计算】
尿素氮mg% = 测定管/标准管×0.002×100/0.1×5 = 测定管/标准管×10
【参考范围】
5-20 mg/dl
【临床意义】 1．血液尿素浓度增高，可分生理性与病理性因素二个方面。 (1) 生理性因素：高蛋白的饮食可引起血清尿素浓度和尿液排出量显著增高。血
【注意事项】 1．试剂中加入硫氨脲和镉离子可增加显色强度和色泽的稳
定性，还可消除羟胺的干扰，但仍有轻度退色现象，故应及时 比色。
2．尿液中尿素亦可用此法测定，但因尿液中尿素浓度较高， 需将尿液作50倍以上稀释后再行测定。
3．尿素浓度以前习惯用尿素氮表示，尿素分子中含有二个 氮原子，因此1mmol/L尿素等于2 mmol/L尿素氮。世界卫生组 织推荐使用尿素，并以mmol/L表示浓度单位，我国卫生部也已 规定一律使用尿素，不再使用尿素氮一词。
取4只试管，具体操作按下表进行。
加入物(ml)
空白管（B） 标准管（S） 测定管（人） 测定管（牛）
血清
——0.1Fra bibliotek0.1
尿素标准应用液
—
0.1
—
—
蒸馏水
0.1
—
—
—
二乙酰一肟溶液
0.5
0.5
0.5
0.5
尿素氮试剂
5.0
5.0
5.0
5.0
各管混匀后，置沸水中加热15min，取出置冷水中冷却后，分光光度计波长540nm，
血清（血浆）尿素氮测定
（二乙酰一肟显色法）
非蛋白含氮化合物包括除蛋白质以外的 尿素、肌酐、肌酸、尿酸、氨基酸、核苷酸、 嘌呤、谷胱甘肽等多种含氮有机物。体内氨 基酸代谢产生的氨，主要经肝脏生成尿素， 而后又主要经肾脏排出体外。因此，血清尿 素浓度的测定是临床上应用较多的反映肾小 球滤过功能的常用指标。
尿素测定方法
实验十七实验名称：尿素的测定实验目的与要求：掌握测定血清尿素的基本原理实验仪器、试剂：半自动生化分析仪、尿素测定试剂盒实验原理：尿素经脲酶水解生成NH3与CO2,在谷氨酸脱氢酶（GLDH）的作用下，氨与α-酮戊二酸及还原型辅酶Ⅰ（NADH）反应生成谷氨酸和NAD+，NADH在340nm 处的吸光度下降速率与待测样品中尿素的含量成正比。
操作方法：1、将试剂R1：R2=4：1混合，即为工作液2、按下列顺序加入各试剂单位ml 空白标准样本蒸馏水0.01 ——样本－－0.01标准液－0.01 －工作液 1.0 1.0 1.03、混匀各管，340nm,空白管调零，延时30秒，读取初始吸光度A1，60秒后读取A2，计算ΔA实验现象与数据：记录ΔA结果分析与结论：尿素＝ΔA样/ΔA标×C标（8.32 mmol/l）参考范围：1.7-8.3mmol/l临床意义：实验十八实验名称：血清尿酸的测定实验目的与要求：掌握尿酸酶-过氧化物酶耦联法测定尿酸的基本原理实验仪器、试剂：尿酸测定试剂盒，722E/723分光光度计实验原理：尿酸酶氧化尿酸，生成尿囊素和过氧化氢，在过氧化物酶催化下，过氧化氢使ESBmT和4－氨基安替比林缩合成有色化合物，其在546nm吸光度与尿酸浓度成正比。
操作方法：按以下步骤操作单位ml 标准测定空白样本－0.025 －标准液0.025 －－蒸馏水－－0.025酶试剂 1.0 1.0 1.0混匀37℃温浴5min，以空白管调零。
546nm，0.5cm比色杯，测定各管的A 实验现象与数据：记录各管的A结果分析与结论：血清尿酸浓度＝A样/A标×C标（357μmol/l）参考值：男202－416μmol/L，女142-339μmol/L临床意义：思考题：P223第2题。
血清尿素测定方法
血清尿素测定方法
血清尿素测定是一种常用的临床实验室检测方法，用于评估肾功能和测定血氨水平。
以下是一种常用的血清尿素测定方法：
1. 准备样本：从患者的静脉或指尖采集血液样本，并将其放入干燥的试管或离心管中。
2. 离心：将采集到的血液样本离心，以分离血浆或血清。
3. 取样：使用移液器或微量吸管，将所需量的血浆或血清转移到清洁的试管中。
4. 加试剂：添加尿素试剂到试管中。
尿素试剂通常是一种含有酶的溶液，可以将尿素转化为氨气。
5. 反应：将试管放入恒温水浴或试剂盒中，进行反应。
在此过程中，尿素与试剂中的酶发生反应，产生氨气。
6. 检测：使用光度计或其他光学方法，测量反应后产生的氨气的吸光度。
吸光度的程度与血清中尿素的浓度成正比。
7. 计算：通过比较待测样本的吸光度与标准曲线上的吸光度，确定样本中尿素的浓度。
需要注意的是，每个实验室可能有自己的具体操作步骤和试剂，因此在进行血清尿素测定时，还应该参考相应的实验室方法手册。
血清尿素测定
【目的】学习血清尿素(Urea)测定方法，了解其意义。
【原理】血清尿素（Urea）是蛋白质的正常代谢产物。
它的测定是常用的衡量肾小球功能的指标之一。
肾性血清尿素含量增加，提示肾小球损伤。
是研究药物肾毒性的重要指标之一。
【器材】兔固定架、注射器、烧杯、可见分光光度计、试管、水浴【药品】0.5%氯化高汞溶液、生理盐水【动物】家兔2只【方法】取家兔2只，1只注射氯化高汞5ml/kg（0.5%氯化高汞溶液1.0ml/kg)，另1只注射等量的生理盐水。
48小时后，从家兔耳静脉取血1ml，制取血清，按血清尿素测定方法测定血清尿素含量。
【结果】记录2只家兔血清尿素含量，比较并分析其差别。
附血清尿素(Urea)测定方法【原理】尿素与二乙酰在酸性反应环境中加热，缩合生成色素原二嗪化合物。
因二乙酰不稳定，不宜直接加入，可由化学反应生成。
通常由反应系统中二乙酰一肟与强酸作用，产生乙二酰。
二乙酰和尿素反应，缩合生成红色的二嗪。
根据颜色深浅确定尿素含量的多少。
【试剂】(1)酸性试剂：在三角烧瓶中加蒸馏水约100ml，然后加入浓硫酸44ml及85%磷酸66ml。
冷至室温，加入硫氨脲50mg及硫酸镉(CdSO4·8H2O)2g。
溶解后用蒸馏水稀释至1L，置棕色瓶中冰箱保存，可稳定6个月。
(2)二乙酰-肟溶液：称取二乙酰-肟20g，加蒸馏水约900ml，溶解后，再用蒸馏水稀释至1L，置棕色瓶中，贮放冰箱内可保存半年。
(3)尿素标准贮存液（100mmol/L）:称取干燥纯尿素(MW=60.06)0.6g，溶解于蒸馏水中，并稀释至100ml，加0.1g叠氮钠防腐，置冰箱内可稳定半年。
(4)尿素标准液应用液(5mmol/L)：取5.0ml贮存液用无氨蒸馏水稀释至100ml.【操作】按表T4-1进行混匀后，置沸水中加热12分钟，置冷水中冷却5分钟后，用分光光度计在波长540nm，以空白管调至零点。
比色读取标准管及测定管的吸光度。
血清尿素的实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 熟悉生物化学实验的基本操作步骤。
2. 掌握血清尿素测定的原理和方法。
3. 了解血清尿素在临床诊断中的意义。
二、实验原理尿素是哺乳动物体内蛋白质代谢的终产物，主要由肝脏合成，通过肾脏排泄。
血清尿素氮（BUN）是血液中尿素的浓度，是反映肾功能和体内氮代谢状况的重要指标。
本实验采用二乙酰-肟法测定血清尿素，该方法基于二乙酰在强酸条件下与尿素缩合成红色的4,5-二甲基-2-氧咪唑化合物，颜色深浅与尿素含量成正比。
三、实验材料1. 血清样本：采集受试者空腹静脉血，分离血清。
2. 试剂：二乙酰试剂、强酸试剂、显色剂、空白试剂等。
3. 仪器：分光光度计、移液器、试管等。
四、实验方法1. 样本处理：取血清样本100μl，加入1ml强酸试剂，充分混匀后室温放置10分钟。
2. 显色：加入2ml显色剂，充分混匀，室温放置10分钟。
3. 测定：以空白试剂为参比，于540nm波长下测定吸光度。
4. 结果计算：根据标准曲线计算血清尿素含量。
五、实验结果1. 标准曲线绘制：将不同浓度的尿素标准品按照实验方法进行测定，绘制标准曲线。
2. 血清尿素含量测定：将受试者血清样本按照实验方法进行测定，得到吸光度值，根据标准曲线计算血清尿素含量。
六、结果分析1. 血清尿素正常范围为3.2～7.1mmol/L。
本实验受试者血清尿素含量在正常范围内，说明受试者肾功能正常。
2. 血清尿素升高可能见于以下情况：- 肾脏功能受损：如急性肾功能衰竭、慢性肾功能衰竭、肾小球肾炎等。
- 蛋白质摄入过多或分解代谢增强：如发热、创伤、肿瘤等。
- 肾前性少尿：如严重脱水、充血性心力衰竭、肝肾综合征等。
3. 血清尿素降低可能见于以下情况：- 蛋白质摄入减少：如营养不良、消化系统疾病等。
- 肝脏功能异常：如肝功能衰竭、肝脏病变等。
- 肾小球滤过功能下降：如肾小球肾炎、肾病综合征等。
七、实验讨论1. 本实验采用二乙酰-肟法测定血清尿素，该方法操作简便、准确度高，是临床常用的测定方法。
尿素氮的检测及临床意义
尿素氮的检测及临床意义一、概述1、尿素是蛋白质代谢的终末产物，血清尿素的浓度取决于机体蛋白质的分解代谢速度、食物中蛋白质摄取量及肾脏的排泄能力。
2、尿素分子量小且不与血浆蛋白结合，可自由通过肾小球滤过膜滤入原尿，约50% 可被肾小管重吸收，正常情况下30% ~40% 被肾小管重吸收，肾小管有少量排泌。
当肾实质受损害时，肾小球滤过率（GFR）降低，致使血尿素浓度增加，因此目前临床上多测定尿素，粗略观察肾小球的滤过功能。
二、检测方法尿素的测定方法大体上可归纳为酶学方法和化学方法。
1、酶学方法先用尿素酶将尿素分解成离子(NH4+)和碳酸根，然后用波氏反应或谷氨酸脱氢酶法，测定反应过程中的离子生成量。
2、化学方法是用二乙酰一肟直接与尿素反应，缩合成红色二嗪化合物，在 540nm 测定其吸光度值。
波氏法和二乙酰一肟法适用于手工法。
3、谷氨酸脱氢酶偶联速率法是在340nm 处通过监测NADH 吸光度值降低速率检测尿素量，较前两种方法有更高的准确度与灵敏度，是自动生化仪最常用的方法。
三、样本收集与处置1、血清和肝素抗凝血浆在二乙酰法、酶谷氨酸脱氢酶、离子导电法中均可应用。
2、氟化物能抑制脲酶反应，故不能用氟化物作为抗凝剂，肝素抗凝剂也不能在脲酶法中使用。
3、尿样本按照1:20到1:50稀释后，可用以上三种方法测定。
4、由于尿素易于被细菌降解，故血清和尿样本在分析前应放置在4~8℃的冰箱中。
四、参考区间成人血尿素：男：(20~59岁)3.1~8.0mmol/L，(60~79岁) 3.6 ~9.5mmol/L；女：(20~59岁)2.6 ~ 7.5mmol/L(60~79岁) 3.1~ 8.8mmol/L。
若表示为血(清)尿素氮(blood urea nitrogen，BUN)，因为1分子尿素中含 2个氮原子，故应将上述数值乘以2即BUN。
五、临床意义1、肾前性疾病常见于剧烈呕吐、幽门梗阻、肠梗阻和长期腹泻等。
严重脱水、大量腹腔积液、心脏循环功能衰竭、肝肾综合征等导致的血容量不足、肾血流量减少灌注不足致少尿。
二乙酰一肟法测定血清尿素
(无色)
(粉红色)
三、器材
1、主要器具
试管与试管架
微量移液器
三用水浴箱
紫外可见分光光度计
四、试剂
1.酸性试剂
离子水约100ml、浓硫酸44ml、85%
磷酸66ml、氨基硫脲50mg及硫酸镉(CdSO4·8H2O) 2g。
2.二乙酰一肟溶液 3.尿素标准贮存液(100mmol/L) 4.尿素标准应用液(5mmol/L)
实验一：二乙酰一肟法测定血清尿素
一、实验目的
1.掌握血清尿素的测定原理和方法。
2. 了解尿素测定的参考范围及临床意义。
二、实验原理
尿素（urea）在强酸、加热的条件下，与
二乙酰缩合生成红色的二嗪化合物（Fearon反
应），其颜色深浅与尿素含量成正比。与同样
处理的标准液在540nm处比色，求得尿素含量。 由于二乙酰不稳定，一般由二乙酰一肟与强酸 作用产生。其反应式如下：外,常见
于肝功能衰竭患者。
九、方法学评价
1．本法试剂单一，方法简便，但试剂具毒性和腐蚀
性。在标本数量多时加热开始难以达到100℃,各管 间受热温度也可能不一致,因而本法重复性不佳.若
改善加热条件,如采用在水浴锅底部加置高约5mm
的网垫,在网垫上加热显色,可使CV由不加网垫时的
6.46%降至2.99%。
2．线性上限仅达7.14mmol/L；回收率为96%～ 102.1%。
3．二乙酰一肟法的主要干扰来自血清中存在的含
氮化合物。很多其它化合物在结构中会有尿素的
残基，如瓜氨酸、四氧嘧啶和尿囊素，虽然也会
产生一种带颜色的产物，但这些化合物在血清中
浓度很低，故很少引起明显的干扰。另一些其它 的化合物在血清中浓度高，但这些色素的最大吸 收峰不同，因此不产生明显干扰。胆红素达 171μmol/L、血红蛋白达10g/L均无影响。
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ICS 11．020C 50VS 中华人民共禾口国卫,--l=行业标准WS／T 345—20 11血清尿素测定参考方法Reference procedure of the measurement of urea in serum201 1-09-30发布2012—04—01实施中华人民共和国卫生部发布目次前言1范围· ·Ⅲ，2规范性引用文件●3术语和缩略语·●4测定原理·· ··05测定样品 06测定试剂.0 6．1警示与安全注意事项.0 6．2试剂原料- 0 6．3试剂眭能要求.0 6．4试剂制备 06．5标准液的制备·07测定条件·，7．1仪器·7．2最终反应混合液的浓度7．3血清尿素测定条件，如7．4校准的扩展不确定度u8测定······u 8．1无蛋白滤液的制备···8．2试剂准备8．3标准曲线制作···8．4测定方法······8．5测定范围u他挖地n 8．6误差的来源8．7测定样品要求9结果计算·····-9．1计算实际吸光度值···n¨¨n 9．2标准曲线的制作·一n 9．3样品测定结果的计算·-‘H9i 4卓岔换算·····- M 附录A(规范性附录)L一谷氨酸脱氢酶催化活性浓度测定附录B(规范性附录)脲酶催化活性浓度测定···¨n前言本标准修改采用由国际检验医学溯源联合委员会(JCTLM)批准的《CDC人血清尿素参考方法(分光光度法)》，并参考ISO 15193：2009《体外诊断器具生物源样品中量的测定参考测定程序的表述》适当增加内容。
本标准按照GB／T 1．1—2009给出的规则起草。
本标准由卫生部临床检验标准专业委员会提出。
本标准起草单位：卫生部临床检验中心。
本标准主要起草人：杨振华、陈宝荣、邵燕、陈琦、孙慧颖、胡滨。
Ⅲ血清尿素测定参考方法1范围本标准规定了在临床医学应用中，测定血清尿素浓度的参考方法。
本标准主要适用于参考实验室，作为血清尿素测定的溯源，也可作为与血清尿素检验有关的仪器和试剂生产企业的溯源，可供有关认可单位及质量管理部门应用。
2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。
凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。
凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
ISO 15193—2：2009体外诊断器具生物源样本中量的测定参考方法的表述3术语和缩略语3．1术语下列术语和定义适用于本文件。
3．1．1原始样本primary sample最初从一个系统中取出的一个或几个部分的集合物，旨在提供该系统的信息或作为对该系统做出决定的基础。
洼：在某些情况下，所提供的信息可以适用于一个较大的系统或一组系统，此时取样系统是这些系统的组成部分。
3．1．2实验室样本laboratory sample准备送到实验室或实验室接收的用于测定的原始样本或原始样本的分样本。
3．1．3分析样本analytical sample 自实验室样本制各的、可从中取出分析部分的样本。
注：在取出分析部分之前，分析样本可经过各种处理。
3．1．4分析部分analytical portion 从分析样本中取出的用于实际测定和观察的物质部分。
注：如果不需预处理，分析部分直接从原始样本或实验室样本中取出。
某些情况下，需将分析部分溶解成分析溶液再上机测定。
3．1．5分析溶液analytical solution将分析部分溶解在气体、液体或固体中而制备的溶液，溶解过程中可以有反应发生或无反应发生。
3．1．6(某一物质系统的)基质matrix(of a material system)一个物质系统中除被分析物之外的所有成分。
WS／T 345—20 113．1．7参考方法reference procedure在校准或表征标准物质时为提供测定结果所采用的测定方法，适用于评定由同类量的其他测定方法获得的被测定量值的测定正确度。
3．1．8测定系统的灵敏度sensitivity of a measuring system 简称灵敏度(sensitivity) 测定系统的示值变化除以相应的被测定值变化所得的商。
注1：测定系统的灵敏度可能与被测定的量值有关。
注2：所考虑的被测定值的变化必须大于测定系统的分辨力。
3．1．9分析特异性analytical specificity测定方法只测定可测定的量的能力。
3．1．10分析干扰analytical interference由一个影响量引起的系统测定误差，该影响量自身在测定系统中不产生信号，但它会引起示值的增高或降低。
3．1．11影响量influence quantity被测定以外的可影响测定结果的量。
3．1．12 被测量measurand 拟测定的量。
注1：对被测定的说明要求了解量的种类，以及含有该量的现象、物体或物质状态的描述，包括有关成分及所涉及的化学实体。
注2：在VIM第二版和IEC 60050—300；2001中，被测定定义为受到测定的量。
注3：测定包括测定系统和实施测定的条件，它可能会改变研究中的现象、物体或物质，使被测定的量可能不同于定义的被测定。
在这种情况下，适当的修正是必要的。
3．1．13检出限detection limit，limit of detection由给定测定方法获得的测得值，其声称的物质成分不存在的误判概率为口，声称物质成分存在的误一’判概率为a。
注1：国际理论和应用化学联合会(IUPAC)推荐a和卢的默认值为0．05。
注2：有时使用缩写词LOD。
注3：不要用术语“灵敏度”表示“检出限”。
3．1．14校准品calibrator用于校准的测定标准。
3．2缩略语下列缩略语适用于本文件。
GLDH：L一谷氨酸脱氢酶(glutamate dehydrogenase)NADH：还原型}烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(pnicotinamide-adenine—dinucleotide，reduced form)IFCC：国际临床化学与检验医学联合会(international federation of clinical chemistry and laboratory medicine)2WS／T 345—20 11 SOP：标准操作方法(Standard Operation Procedure)。
4测定原理尿素在脲酶催化下，水解生成氨和CO：，氨在a一酮戊二酸和还原性辅酶I存在下，经谷氨酸脱氢酶催化生成谷氨酸，同时，还原性辅酶I被氧化成氧化型辅酶I，反应式如下：尿素+H：0竖要(NH。
)。
C0。
nW一(NH4)2C03222—2NH3+C02NH。
+p酮戊二酸+NADH+H+_!三!竺曼谷氨酸+NAD一+H：O 在还原性辅酶I转化成氧化型辅酶I同时伴有340 nm处吸光度的下降，吸光度下降的程度与样本中尿素含量成正比，测定反应30min后，339 nm处吸光度变化即可测定样本中尿素含量。
5测定样品标准物质、校准品、质控品、血清。
6测定试剂6．1警示与安全注意事项6．1．1氢氧化钡：高毒类物质，吸人及接触可引起中毒，表现为恶心、呕吐、腹痛、腹泻、脉缓、进行性肌麻痹、心律紊乱、血钾明显降低等。
接触高温度溶液可造成皮肤灼伤毒。
称量及配制试剂时应进行有效防护，带防护眼镜、橡胶手套，穿隔离服。
6．1．2硫酸锌：对眼睛有中度刺激性，对皮肤无刺激性，误服可引起急性胃肠炎，严重可引起休克至死亡，称量及配制试剂时应进行有效防护，带防护眼镜、橡胶手套，穿隔离服。
6．2试剂原料本方法使用下列试剂。
6．2．t 3，3-双(4一羟基苯基)一l(3H)-异苯并呋喃酮(酚酞，cz。
Ht；O。
)，相对分子质量一318．33。
6．2．2硫酸锌(ZnSO。
·7H：O)，相对分子质量一287．56。
6．2．3氢氧化钡[Ba(OH)：·8HzO]，相对分子质量一315．46。
6．2．4 L一谷氨酸脱氢酶(glutamate dehydrogenase，GLDH)，来源于牛肝脏，要求高纯度。
6．2．5 2一氨基-2-羟基一1，3一丙二醇(Tris_Hcl)(NHzC(CHzOH)a·HCl)，相对分子质量一157．60。
6．2．6三羟甲基氨基甲烷(Tris—Base)[NH：C(CHzOH)。
]，相对分子质量一121．14。
6．2．7脲酶(Urease)，来源于刀豆，要求高纯度。
6．2．8 a一酮戊二酸(Na00CCHzCH：COCOONa·2HzO)，相对分子质量，相对分子质量一226．09。
6．2．9还原型p烟酰胺腺嘌呤二核苷酸二钠盐(NADH)(cz-Hz，N，NazO，tP：·xH。
O)，相对分子质量=709．40。
6．2．10乙二胺四乙酸二钠盐(EDTA)(c。
H。
N。
Nazos·2H20)，相对分子质量=372．24。
6．2．11 5’二磷酸腺嘌呤单钾盐(ADP)(C。
H，。
KNsO。
oP：·2HzO)，相对分子质量一501．32。
6．3试剂性能要求6．3．1宜使用最高纯度的试剂。
3WS／T 345—201 16．3．2 GLDH：试剂纯度≥70％，每毫克蛋白酶含量≥20单位。
6．3．3 Urease：试剂含量每克固体酶含量为(15 000～50 000)单位。
6．3．4牛血清白蛋白，五级，相对分子质量一68000。
6．4试剂制备6．4．1试剂原料含量试剂的原料纯度应为100％，如果试剂原料含量小于100％[例如，Y(％)]，按公式(1)计算实际含量：W；；=孚式中：w女《——实际称量；wm*——理论称量；Y——试剂原料纯度，％。
注：每次称量过程中的扩展不确定度(^一2)(包括物质纯度的不确定度)应≤1．5％，称量时显示的值与靶值的差异不应超过o．5“。
6．4．2试剂制备用水6．4．2．1纯水宜使用高纯度的水(导电性<2 VS·c．wl～，pHs～7，硅酸盐<o．1 mg·L_=)射备试剂，6．4．2．2无C02水试剂水在敞1：3的容器中煮沸15 rain，密闭冷却至使用前。
6．4．2．3无氨水试剂水在敞口的容器中煮沸15 rain，密闭冷却至使用前。