实验1 中药制片技术

玻片上，加上盖玻片；或滴加水合氯醛加热透 化，滴加稀甘油后加上盖玻片。
徒手切片——桑枝横切面
思考 1、在完成实验、准备离开实验室前还应做哪
些工作？ 2、在显微物镜低倍镜头中，哪一种最常用？
水装片与水合氯醛装片粉末用量有何区别？
3、进行粉末水合氯醛加热透化过程中，应注 意哪些关键问题？显微制片最后一个环节加盖玻片，该如何操作？
何首乌叶下表皮组织
五、徒手制片
徒手制片的目的及材料
➢目的：观察组织构造、细胞特征； ➢材料：新鲜、干燥或经固定的材料
常用固定液——FAA固定液：
70％乙醇
90ml
福尔马林（37％~40％甲醛） 5ml
冰醋酸
5ml
➢取材 材料分割成适当大小，直径必须小于
盖玻片。 ➢材料软化或冲洗
坚硬的干燥材料于稀甘油10％醋酸液中 煮至表面无气泡。
金银花两种非腺毛
金银花腺毛
金 银 花 花 粉 粒
四、叶表皮撕片
叶表皮撕片适用对象及操作 ➢适用对象：观察表皮细胞、气孔、毛茸。 ➢材料：通常为叶下表皮。
➢操作：以镊子自下表面夹住少许叶片，往 一侧撕取表皮。将撕下的表皮外表面朝上 置于滴有1~2滴水的载玻片上，使其自然展 开，盖片观察。
实验一 显微镜的使用保养 与中药临时制片技术
一、显微镜的使用和保养
显微镜的结构 ➢镜座 ➢镜臂 ➢镜筒 ➢载物台 ➢光路系统：目镜、物镜、集光器、光源
物镜 ➢低倍镜：4×、10 × ——用于观察整体结构、寻找特定特征。 ➢高倍镜：40 ×、100 ×（油镜） ——用于观察特定细微结构与组织特征， 油镜较为少用。
固定材料需在流水中冲洗12小时以上。
➢操作：取新鲜或已软化的中药材，用拇指及 食指和中指夹住材料，下端用无名指托住，另 外一只手持刀片，自左向右移动手腕，牵曳切 片。 ➢薄片移入在盛水培养皿 中浸泡。
➢装片 将切片以镊子夹出，置于滴加了甘油的载
➢加盖玻片时应先一侧接触装置液，缓缓 放下，最后抽出镊子，以排除气泡。 ➢以吸水纸吸去溢出的装置液。 ➢稍放置后，镜检。
水装片或斯氏液装片 ➢适用于观察淀粉粒。 ➢装置液：蒸馏水或斯氏液（甘油醋酸）。 ➢不可加热，否则淀粉粒糊化。
天花粉粉末——淀粉粒
水合氯醛加热透化装片 ➢适用于除淀粉粒、菊糖以外的组织、细 胞、细胞后含物的观察。 ➢装置液：水合氯醛（水合三氯乙醛）、 稀甘油。 ➢需要加热。
天花粉粉末——石细胞
天花粉粉末——石细胞
天花粉粉末——具缘纹孔导管
水合氯醛或乙醇装片 ➢适用于观察菊糖。 ➢装置液：水合氯醛或乙醇。 ➢不可加热，否则菊糖溶解。
党参菊糖（水合氯醛装置）
水合氯醛装置液的作用 ➢使细胞膨胀,便于观组织、细胞及其
内含物特征。 ➢去除细胞表面或内部杂质。 ➢增强透明度。
4、显微制片中水合氯醛及稀甘油作用是什么？
使用注意与技巧 ➢先低倍后高倍，即先整体后局部 ➢之字形扫描式寻找需要观察的特征 ➢由低倍镜转成高倍镜后，只能使用微调 ➢高倍镜观察时，应通过控制光源强度、 集光器高低、虹彩光阑的张合，并结合 微调，使被观察物清晰。
使用过程及使用后的保养 ➢显微制片必须将多余的装置液清理干净， 以免沾染镜头。 ➢如目镜与物镜被沾染，则以镜头纸从中 央向四周以划圆圈的方式擦拭。必要时 还要使用去污剂擦拭。
➢使用完毕后，移去玻片，按上述方法擦 拭，将最低倍物镜转入光路，载物台复位。 ➢关闭电源，拔下插座，盖上防尘罩。 ➢在相应使用登记本上签名。
二、粉末临时制片
粉末临时制片操作要领 ➢粉末用量：米粒大小，尽可能少。 ➢每次滴加装置液2~3滴。 ➢每次滴加装置液后需要搅拌均匀。 ➢控制搅拌范围约为盖玻片大小。 ➢如加热透化，则重复进行3~4次， 沸即离火，勿烧干、焦。
稀甘油装置液的作用 ➢增加透明度。 ➢防止气泡生成。 ➢防止水合氯醛结晶析出。
三、整体透化装片
整体透化装片的目的与操作 ➢目的：避免出现有些组织在粉末中破碎 或不完整而影响观察。 ➢材料：多为叶或花。
➢操作：切或剪取叶或花约4mm2 ，外表朝 上，透化后观察。 ➢装置液：水合氯醛、稀甘油。 ➢需要加热。