选修3现代生物科技专题重点知识点

②。《现代生物科技

专题》知识点总结选修3

③具

有，供。专题1 基因

工程（2）最常用的运

载体是，它是一种裸露的、结构简单的、独立于一、

基因工程的基本工具，并

具有的双链。 1.“分子手术刀”——

二、基因工程的基本操作程序 1）来源：主要是从生物中分离纯化出来的。

（第一步：目的基因的获取分子的某种2）功能：能够识别 DNA

的核苷酸序列，并且使每一条链中（性。

部位的两个核苷酸之间的断开，因此具有的因子。，也可以是一些具有

1.目的基主要是指：

（片段末端通常有两种形式：3）结果：经限制酶切割产生的DNA 2.原核基因采取

直接分离获得，真核基因是人工合成。人工合成目的基因的常用方法有

。和法。法和

2.“分子缝合针”

——技术扩增目的基因连接酶）的比较：TE连接酶（·coliDNA连接

酶和DNA(1)两种DNA4- DNA片段的核酸合成技术。）PCR的含义：是一项在生物体外复制特定（1 键。①相同点：都缝合 2）目的：获取大量的目的基因（，只能将双链·②

区别：EcoliDNA连接酶来源于 DNA片段互补的

（3）原理：，但连接平连接酶能缝合DNA之间的磷酸二酯键连接起来；而

T 4。末端的之间的效率

较解链为；）过程：第一步：加热至90～95℃，DNA（4与

(2)DNA聚合酶作用的异同：DNA加到已有的核苷酸片段的末端，聚合酶只能将 DNA

结合；6055～℃，与两条单链第二步：冷却到的

末端，形成磷酸二酯键。形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接的合成。

75℃，从引物起始进行70第三步：加热至～

第二步：基因表达载体的构建，目的：使目的基因在受体细胞中，并且可以1.模板不同点模板模板。使目的基因能够

个连接的对象2DNADNA单个脱氧核苷酸加到已存在的单链片段片段上＋

组成：＋＋＋2.

作用实质形成，是1）启动子：是一段有特殊结构的，位于基因的（相同点

化学本质蛋白质，最终获得所需的。能驱动基因识别和结合的部位，

。 2（）终止子：也是一段有特殊结构的，位于基因的 3.“分子运输车”——

，从而将 3（）标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中）运载体具备的条件：（1。

筛选出来。常用的标记基因是

①。

（2）用途：微型繁殖、作物脱毒、制造人工种子、单倍体育种、细胞产物的工厂化生产。第三步：将目的基因导入受体细胞_

（3）地位：是培育、培育植物新品种的最后一道工序。：是目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。1.

3.植物体细胞杂交技术常用的转化方法：2.（1）过程：和采用最多的方法是将目的基因导入植物细胞：，其次还有

等。

将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是。方法的受体细胞多是。

（2）诱导融合的方法：物理法包括

等。将目的基因导入微生物细胞：原核生物作为受体细胞的原因是

）作为诱导剂。（化学法一般是用处理，最常用的原核细胞是，其转化方法是：先用

。）意义：

（3溶于缓冲液中与感受，再将细胞，使其成为

二、动物细胞工程态细胞混合， 1. 动物细胞培养分子，完成转化过程。在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA，将它分散成概念：动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的，（1）重组细胞导入受体细胞后，筛选含

基因表达载体受体细胞的依据3. 。然后放在适宜的中，让这些细胞

是。→剪碎（2）动物细胞培养的流程：取动物组织块（动

物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→第四步：目的基因

的检测和表达转入培养制成→用处理分散成

→

贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成→培养瓶中进

行，首先要检测转基因生物1.DNA上是否方法是采用技术。培养。单个细胞继续

2.技术。，其次还要检测目的基因是否方法是采用

上，称为。（3）细胞贴壁和接触抑制：悬液中分散的细胞很快就 3.技术。，方法是采用最后检测目的基因是否

时，细胞就会细胞数目不断增多，当贴壁细胞分裂生长到表面

的鉴定。如生物抗虫或抗病的鉴定等。 4.有时还需进

行。，这种现象称为

）动物细胞培养需要满足以下条件（4专题细胞工程2 通常还要在培养液中添加一定处理。培养液应进行①：

一、植物细胞工程，以防培养过程中的污染。此外，应定量的

理论基础（原理）：1. ，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。期动物细胞全能性表达

的难易程度：受精卵＞生殖细胞＞干细胞＞体细胞；植物细胞：合成培养基成分：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。②

2.植物组织培养技术等天然成分。通常需加入

）过程：离体的植物器官、组织或细胞1（―→试管苗―→愈伤组织―→植物体：～。

pH0.536.5 ③：适宜温度：哺乳动物多是℃＋℃；

④：95% ＋5% 。O是所必需的，（3）动物细胞融合的意义：克服了，成为研究细胞遗传、细胞2

免疫、肿瘤和生物生物新品种培育的重要手段。 CO的主要作用。2（5）动物

细胞培养技术的应用：制备病毒疫苗、制备单克隆抗体、检测、4）动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较：（

培养医学研究的各种细胞。

2.动物体细胞核移植技术和克隆动物（比较难）和核移植。）（1哺乳动物核移植可以分为核移植（比较容易）导原生质体融合 (（2）选用去核卵母)细胞的原因：交性剂诱导得杂种植株

；)(母细胞①卵

细胞膜除应用植物细胞杂②卵( ；母)细胞动物细使细胞分散后诱制备单克隆抗体的流动交手段外，再加

灭 )(③卵母细胞含有。的技术之一导细胞融合胞融合活的病毒诱导性（3）体细胞核移植的大致过程是：（左图）单克隆抗体4.

、纯 B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。从血清中分离出的抗体产量（1）抗体：一个。度、特异性 2）单克隆抗体的制备过程：

（

抗原注入小鼠体内分离骨髓瘤细胞B淋巴细胞

细胞融合

杂交瘤细胞

细胞培养核移植胚胎移植选择培养细胞 3.动物细胞融合培养基注入小鼠是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的动物细胞融合也

称，）1（体外培养体内培养称为融合后形成的具有原来过程。细胞遗传信息的单核细胞，。从培养液提取从腹水提取）动物细胞融合与植物原生质体融合原理基本相同，诱导动物细胞融合的方