1_诺禾致源数字PCR 仪

仪器配套——扩增仪
用途： 将已制成芯片进行PCR扩增。
通量： 1～12 chip(s)/run
尺寸： 约40×25×25cm
类型： 有源产品
说明： 二类医疗器械：将于8月份拿证。
01
Novogene 3D 系统组成
仪器配套——芯片阅读仪
用途： 将已PCR完成芯片进行读取
通量： 1 chip/run
02
Novogene 3D vs Bio-rad QX 200 流程对比
Novogene 3D：只需4步操作，1次手动加样，避免交叉污染。
手动移液
体系制备与加样
微滴生成
Bio-rad QX200：6步操作，3次加样/移液，极易交叉污染。
加热封膜
循环扩增
微滴检测
02
操作对比
Novogene 3D
只需一次手动加样； 不需要移液操作
数据？
A：是的，在分析软件V3.0的导出选项卡上有一个选项，可以
将芯片数据导出为.xml
02
对比 Bio-rad QX 200
QX ddPCR系统由微滴发生仪、热封仪、扩增仪和微滴检测仪组成。原理是将反应体系制成油包水结构 后，经过PCR仪进行扩增，再经过微滴检测油路，由检测仪检测每个微滴中的荧光信号值。
微滴发生仪：将体系制备为油 包水结构的微滴
热封仪：对PCR板进行热封膜 操作
扩增仪：对PCR体系进行扩增
手动加样；
Bio-rad QX 200 需要多次移液操作
手动移液；
仪器移液
02
Novogene 3D
检测原理对比
Bio-rad QX 200
整张芯片直接拍照，软件根据不同微滴的荧光 信号区分阴性和阳性模板。检测速度快，数据 分析准确，避免检测误差。 芯片可以低温保存，以便进行复检。
逐个微滴检测，对每个微滴进行单独激发和信 号检测。速度较慢，存在交叉污染的风险。每 次运行前都需要清洗管路。 样品检测后即丢弃，无法对存疑的样品进行复 检。
02
Chip loader 扩增仪
芯片阅读仪
系统对比
Novogene 3D： 系统由3台设备组成，只需简单清洁，不 需要管路清洗及定期维护。 仪器体积小巧，全套仪器仅需要半张试验 台即可。 自带中文操作界面，避免误操作。
Bio-rad QX200： 系统共四台设备，其中微滴发生仪和微滴 检测仪都需要及时清洗管路以避免堵塞。 增加一台设备，增加维护难度。 存在死体积。
01
Novogene 3D 系统原理
芯片表面为疏水材质，微孔内 部为亲水材质，可以保证微体系全部存 在于微孔内部，不会溢出或孔间串样。 由CCD对整张芯片进行拍照，对目标基 因进行无标曲的绝对定量。
01
Novogene 3D 系统组成
Novogene 3D数字PCR系统由Chip loader、扩增仪和芯片阅读仪组成。
01
Novogene 3D 操作流程
优势1：只有一步人工加样的步骤。 每片芯片单独制作并且严格密封， 完全避免样品间的交叉污染。
1.将芯片和芯片盖安装在Chip loader对
2.将刷头安装在Chip loader上
应的卡槽中
优势2：芯片上拥有20,000个微孔， 以物理方式隔绝每一个DNA分子， 不会发生油包水破裂造成分子间的
Novogene 3D 数字PCR仪
CONTENTS
Novogene 3D特性介绍
01
对比 Bio-rad QX 200
02
总结
03
常见问题
04
2018-8-14
2
01
பைடு நூலகம்
Novogene 3D 系统原理
Ø 将混有样品和探针的PCR反应体系均匀分散至一张含有2万个微孔的芯片上，形成2万个相互独立的微反应体系； Ø 每个微孔均进行独立的PCR扩增； Ø 扫描芯片，检测荧光信号； Ø 利用柏松分布的数学模型计算目标片段拷贝数。
8.在PCR中进行扩增
优势4：扩增完全后不再打开芯片和 移液操作，直接拍照检测。速度快， 无交叉污染的风险。芯片可以保存 和复建。
9.在芯片阅读仪中进行数据采集
01
FAM positive: mut detected
Novogene 3D 结果图
FAM+VIC positive: wt and mut detected
串样，保证实验结果的正确。
3.将混合好的扩增体系滴加到刷头上
4.仪器自动将样品刷入微流控芯片 的20,000个微孔中。
01
Novogene 3D 操作流程
5.向芯片中滴加浸液，完全覆盖芯片表面； 6.关闭摇臂，保持15秒以盖上芯片盖 7.向芯片中滴加密封油，并密封芯片
优势3：您有几个样品，就做 几块芯片进行实验，完全不用 担心样品太少而浪费试剂和耗 材。
Chip loader：用于微流控芯片的制备
扩增仪：用于对反应体系进行扩增
Ø 采用微流控芯片技术，样本均匀分配至20000个单独的反应孔中； Ø 样本之间保持完全隔离，避免样品交叉污染； Ø 减少移液过程，简化操作步骤，降低实验误差； Ø 芯片式设计避免了微滴式系统可能面临的管路堵塞问题； Ø 有医疗器械注册证。
尺寸： 约24×14×21cm
类型： 有源产品
说明： 二类医疗器械——已拿证。
01
Novogene 3D 系统组成
仪器配套——数据分析软件
用途： 将阅读仪读取的.eds数据进行分析处理，
并可出具报告。
通量： 1～n chip data/run
尺寸： 约15×10×2cm
类型： 光盘
说明： 阅读仪附件，随机器发送。
ROX positive: passive dye, wt and mut not detected
VIC positive: wt detected, mut not detected
3D拥有三个检测通道，分别 对FAM、VIC和ROX信号进行 检测。 在案例中，FAM探针检测阳性 （突变型）样本，VIC探针检 测阴性（野生型）样本，ROX 通道检测空白微孔，进行结果 校准。
芯片阅读仪：用于阅读芯片 中的荧光信号
01
Novogene 3D 系统组成
仪器配套——chip loader
用途： 将已配成体系加入到芯片中，并将芯片
密封压制完成。
通量： 1 chip/run
尺寸： 约40×15×7cm
类型： 有源产品
说明： 不属于医疗器械，无需注册证，不需校准。
01
Novogene 3D 系统组成
检测仪：对每个微滴进行荧 光信号检测
02
QX 200系统缺陷
1、体系脆弱，油包水系统对样品粘度和表面活性要求高，容易造成油滴破裂和串样，引起假阳性。 2、操作繁琐，需要多次移液，对实验操作手法要求高；极易造成气溶胶污染。 3、每次制备8个样品，样品数量不足时，必须使用缓冲液补充。 4、设备数量多，仪器复杂，管路易堵塞，需要日常维护。 5、管路多，死体积大于30%。
微滴发生仪 微滴转移
孔板热封仪 扩增仪
微滴检测
02
仪器对比
03
Novogene 总结
04
常见问题
Q：在3D数字PCR系统中，微孔体积变化会如何影响数据? A：在低拷贝条件下，对数据没有影响。在高拷贝(> 2000拷贝
/µL)有轻微的影响。使用泊松加算法将校正井间的体积变化。
Q：在分析软件V3.0中，有没有办法从3D芯片中获取原始荧光