常用的45种缓冲溶液的配制
实验室常用试剂缓冲液配制方法一览表
实验室常用试剂缓冲液配制方法一览表实验常用试剂、缓冲液的配制方法1、1MTri-HCl□组份浓度1MTri-HCl（pH7.4，7.6，8.0）□配制量1L□配置方法1.称量121.1gTri置于1L烧杯中。
2.加入约800mL的去离子水，充分搅拌溶解。
3.按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。
pH值浓HCl7.4约70mL7.6约60mL8.0约42mL4.将溶解定容至1L。
5.高温高压灭菌后，室温保存。
注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tri溶液的pH值随温度的变化差很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。
2、1.5MTri-HCl□组份浓度1.5MTri-HCl（pH8.8）□配制量1L□配置方法1.称取181.7gTri置于1L烧杯中。
2.加入约800mL的去离子水，充分搅拌溶解。
3.用浓盐酸调pH值至8.8。
4.将溶液定容至1L。
5.高温高压灭菌后，室温保存。
注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tri溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。
3、10某TEBuffer□组份浓度100mMTri-HCl，10mMEDTA（pH7.4，7.6，8.0）□配制量1L□配置方法1.量取下列溶液，置于1L烧杯中。
1MTri-HClBuffer（pH7.4，7.6，8.0）100mL500mMEDTA（pH8.0）20mL2.向烧杯中加入约800mL的去离子水，均匀混合。
3.将溶液定至1L 后，高温高压灭菌。
4.室温保存。
4、3M醋酸钠□组份浓度3M醋酸钠（pH5.2）□配制量100mL□配置方法1.称取40.8gNaOAc3H2O置于100～200mL烧杯中，加入约40mL的去离子水搅拌溶解。
2.加入冰乙酸调节pH值至5.2。
3.加入去离子水将溶液定容至100mL。
4.高温高压灭菌后，室温保存。
5、PBSBuffer□组份浓度137mMNaCl，2.7mMKCl，10mMNa2HPO4，2mMKH2PO4□配制量1L□配置方法1.称量下列试剂，置于1L烧杯中。
各种缓冲液的配制方法_
各种缓冲液的配制方法Na2HPO4-柠檬酸钠缓冲液24。
2柠檬酸. H2O，分子量=210.14 0.1mol/L溶液含21.01g/L2柠檬酸钠. 2H2O，分子量=294.12；0.1mol/L溶液含29.4 g/LNaAC.3 H2O,分子量=136.09 0.2mol/L溶液含27.22g/L（1）醋酸盐溶液的配制：醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3.6)取醋酸钠5.1g,加冰醋酸20ml，再加水稀释至250ml,即得。
醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3.7)取无水醋酸钠20g,加水300ml溶解后，加溴酚蓝指示液1ml及冰醋酸60～80ml，至溶液从蓝色转变为纯绿色，再加水稀释至1000ml，即得。
醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3.8)取2mol/L醋酸钠溶液13ml与2mol/L醋酸溶液87ml,加每1ml含铜1mg的硫酸铜溶液0.5ml,再加水稀释至1000ml，即得。
醋酸－醋酸钠缓冲液(pH4.5)取醋酸钠18g,加冰醋酸9.8ml,再加水稀释至1000ml,即得。
醋酸－醋酸钠缓冲液(pH4.6)取醋酸钠5.4g,加水50ml使溶解，用冰醋酸调节pH值至4.6，再加水稀释至100ml，即得。
醋酸－醋酸钠缓冲液(pH6.0)取醋酸钠54.6g，加1mol/L醋酸溶液20ml溶解后，加水稀释至500ml，即得。
用醋酸和醋酸钠配制的缓冲溶液的PH=PKa+lg[C(NaAc)/C(HAc)]（在此，C(HAc)指醋酸的浓度，C(NaAc)指醋酸钠的浓度,Ka是醋酸的解离常数=1.8*10-5（1.8乘10的-5次方），PKa=-lgKa=4.75，将PH=5.5代入，可得C(NaAc)/C(HAc)=5.6 通常我们配制时会使C(HAc)=0.1mol/L，或是C(HAc)=0.2mol/L等。
若是配制C(HAc)=0.1mol/L，则C(NaAc)=0.56mol/L 称量醋酸钠固体质量为82*0.56=46克量取冰醋酸体积为0.1*1000/17.5=5.7mL。
各种缓冲液的配制方法_
各种缓冲液的配制方法Na2HPO4-柠檬酸钠缓冲液24。
2柠檬酸. H2O，分子量=210.14 0.1mol/L溶液含21.01g/L2柠檬酸钠. 2H2O，分子量=294.12；0.1mol/L溶液含29.4 g/LNaAC.3 H2O,分子量=136.09 0.2mol/L溶液含27.22g/L（1）醋酸盐溶液的配制：醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3.6)取醋酸钠5.1g,加冰醋酸20ml，再加水稀释至250ml,即得。
醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3.7)取无水醋酸钠20g,加水300ml溶解后，加溴酚蓝指示液1ml及冰醋酸60～80ml，至溶液从蓝色转变为纯绿色，再加水稀释至1000ml，即得。
醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3.8)取2mol/L醋酸钠溶液13ml与2mol/L醋酸溶液87ml,加每1ml含铜1mg的硫酸铜溶液0.5ml,再加水稀释至1000ml，即得。
醋酸－醋酸钠缓冲液(pH4.5)取醋酸钠18g,加冰醋酸9.8ml,再加水稀释至1000ml,即得。
醋酸－醋酸钠缓冲液(pH4.6)取醋酸钠5.4g,加水50ml使溶解，用冰醋酸调节pH值至4.6，再加水稀释至100ml，即得。
醋酸－醋酸钠缓冲液(pH6.0)取醋酸钠54.6g，加1mol/L醋酸溶液20ml溶解后，加水稀释至500ml，即得。
用醋酸和醋酸钠配制的缓冲溶液的PH=PKa+lg[C(NaAc)/C(HAc)]（在此，C(HAc)指醋酸的浓度，C(NaAc)指醋酸钠的浓度,Ka是醋酸的解离常数=1.8*10-5（1.8乘10的-5次方），PKa=-lgKa=4.75，将PH=5.5代入，可得C(NaAc)/C(HAc)=5.6 通常我们配制时会使C(HAc)=0.1mol/L，或是C(HAc)=0.2mol/L等。
若是配制C(HAc)=0.1mol/L，则C(NaAc)=0.56mol/L 称量醋酸钠固体质量为82*0.56=46克量取冰醋酸体积为0.1*1000/17.5=5.7mL。
常用缓冲溶液配制方法
常用缓冲溶液配制方法 Prepared on 24 November 2020常用缓冲溶液的配制方法1．甘氨酸–盐酸缓冲液（L）X毫升 mol/L甘氨酸+Y毫升 mol/L HCI，再加水稀释至200毫升甘氨酸分子量 = ， mol/L甘氨酸溶液含15.01克/升。
2．邻苯二甲酸–盐酸缓冲液（ mol/L）X毫升 mol/L邻苯二甲酸氢钾 + mol/L HCl，再加水稀释到20毫升邻苯二甲酸氢钾分子量 = ， mol/L邻苯二甲酸氢溶液含40.85克/升3．磷酸氢二钠–柠檬酸缓冲液Na2HPO4分子量 = ， mol/L溶液为28.40克/升。
Na2HPO4·2H2O分子量 = ， mol/L溶液含35.01克/升。
C4H2O7·H2O分子量 = ， mol/L溶液为21.01克/升。
4．柠檬酸–氢氧化钠-盐酸缓冲液①使用时可以每升中加入1克克酚，若最后pH值有变化，再用少量50%氢氧化钠溶液或浓盐酸调节，冰箱保存。
5．柠檬酸–柠檬酸钠缓冲液（ mol/L）柠檬酸C6H8O7·H2O：分子量， mol/L溶液为21.01克/升。
柠檬酸钠Na3 C6H5O7·2H2O：分子量， mol/L溶液为29.41克/毫升。
6．乙酸–乙酸钠缓冲液（ mol/L）Na2Ac·3H2O分子量 = ， mol/L溶液为27.22克/升。
7．磷酸盐缓冲液（1）磷酸氢二钠–磷酸二氢钠缓冲液（）Na2HPO4·2H2O分子量 = ， mol/L溶液为85.61克/升。
Na2HPO4·12H2O分子量 = ， mol/L溶液为克/升。
NaH2PO4·2H2O分子量 = ， mol/L溶液为克/升。
磷酸盐是化学研究中使用最广泛的一种缓冲剂，由于它们是二级解离，有二个pKa 值，所以用它们配制的缓冲液，pH 范围最宽：NaH2PO4： pKa1＝，pKa2＝；Na2HPO4：pKa1＝，pKa2＝配酸性缓冲液：用NaH2PO4，pH＝1～4，配中性缓冲液：用混合的两种磷酸盐，pH＝6～8，配碱性缓冲液：用Na2HPO4，pH＝10～12。
常见缓冲液配制大全
常见缓冲液配制大全缓冲液乙醇－醋酸铵缓冲液(pH3.7) 取5mol/L醋酸溶液15.0ml，加乙醇60ml和水20ml,用10mol/L氢氧化铵溶液调节pH值至3.7，用水稀释至1000ml，即得。
三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.0) 取三羟甲基氨基甲烷12.14g,加水800ml,搅拌溶解，并稀释至1000ml,用6mol/L盐酸溶液调节pH值至8.0,即得。
三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.1) 取氯化钙0.294g,加0.2mol/L三羟甲基氨基甲烷溶液40ml使溶解，用1mol/L盐酸溶液调节pH值至8.1，加水稀释至100ml，即得。
三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH9.0) 取三羟甲基氨基甲烷6.06g,加盐酸赖氨酸3.65g、氯化钠5.8g、乙二胺四醋酸二钠0.37g，再加水溶解使成1000ml，调节pH值至9.0，即得。
乌洛托品缓冲液 取乌洛托品75g，加水溶解后，加浓氨溶液4.2ml，再用水稀释至250ml,即得。
巴比妥缓冲液(pH7.4) 取巴比妥钠4.42g,加水使溶解并稀释至400ml，用2mol/L盐酸溶液调节pH值至7.4，滤过，即得。
巴比妥缓冲液(pH8.6) 取巴比妥5.52g与巴比妥钠30.9g,加水使溶解成2000ml，即得。
巴比妥－氯化钠缓冲液(pH7.8) 取巴比妥钠5.05g,加氯化钠3.7g及水适量使溶解,另取明胶0.5g加水适量，加热溶解后并入上述溶液中。
然后用0.2mol/L 盐酸溶液调节pH值至7.8，再用水稀释至500ml，即得。
甲酸钠缓冲液(pH3.3) 取2mol/L甲酸溶液25ml，加酚酞指示液1滴，用2mol/L 氢氧化钠溶液中和，再加入2mol/L甲酸溶液75ml,用水稀释至200ml,调节pH值至3.25～3.30,即得。
邻苯二甲酸盐缓冲液(pH5.6) 取邻苯二甲酸氢钾10g，加水900ml,搅拌使溶解，用氢氧化钠试液(必要时用稀盐酸)调节pH值至5.6,加水稀释至1000ml，混匀，即得。
各种缓冲液的配制方法
1．甘氨酸–盐酸缓冲液（0.05mol/L）X毫升0.2 mol/L甘氨酸+Y毫升0.2 mol/L HCI，再加水稀释至200毫升甘氨酸分子量 = 75.07，0.2 mol/L甘氨酸溶液含15.01克/升。
2．邻苯二甲酸–盐酸缓冲液（0.05 mol/L）X毫升0.2 mol/L邻苯二甲酸氢钾 + 0.2 mol/L HCl，再加水稀释到20毫升邻苯二甲酸氢钾分子量 = 204.23，0.2 mol/L邻苯二甲酸氢溶液含40.85克/升3．磷酸氢二钠–柠檬酸缓冲液Na2HPO4分子量 = 14.98，0.2 mol/L溶液为28.40克/升。
Na2HPO4-2H2O分子量 = 178.05，0.2 mol/L溶液含35.01克/升。
C4H2O7·H2O分子量 = 210.14，0.1 mol/L溶液为21.01克/升。
4．柠檬酸–氢氧化钠-盐酸缓冲液① 使用时可以每升中加入1克克酚，若最后pH 值有变化，再用少量50% 氢氧化钠溶液或浓盐酸调节，冰箱保存。
②5．柠檬酸–柠檬酸钠缓冲液（0.1 mol/L ）柠檬酸C 6H 8O 7·H 2O ：分子量210.14，0.1 mol/L 溶液为21.01克/升。
柠檬酸钠Na 3 C 6H 5O 7·2H 2O ：分子量294.12，0.1 mol/L溶液为29.41克/毫升。
6．乙酸–乙酸钠缓冲液（0.2 mol/L ） Na 2Ac·3H 2O 分子量 = 136.09，0.2 mol/L 溶液为27.22克/升。
7．磷酸盐缓冲液（1）磷酸氢二钠–磷酸二氢钠缓冲液（0.2）Na 2HPO 4·2H 2O 分子量 = 178.05，0.2 mol/L 溶液为85.61克/升。
Na 2HPO 4·2H 2O 分子量 = 358.22，0.2 mol/L 溶液为71.64克/升。
Na 2HPO 4·2H 2O 分子量 = 156.03，0.2 mol/L 溶液为31.21克/升。
各种缓冲液的配制方法
各种缓冲液的配制方法缓冲液（Buffer）在生物化学和分子生物学实验中起到了至关重要的作用，它可以维持溶液的稳定性，调节pH值，同时还提供所需的离子环境。
这是一个关于不同类型缓冲液的配制方法的综合指南。
1. Tris缓冲液Tris缓冲液是实验室中最常用的缓冲液之一、以下是Tris缓冲液的配制方法：- 配制0.1 M Tris缓冲液（pH 7.4）：a. 在100 mL去离子水中加入12.11 g Tris（Tris(hydroxymethyl)aminomethane）粉末。
b.用盖住容器的滤纸纸带覆盖容器，并将其放在磁力搅拌器上。
c.用盖住容器的锡纸覆盖容器，加热至溶解。
搅拌以加速溶解过程。
d.继续搅拌，使其冷却至室温。
e.使用0.1MHCl或0.1MNaOH调节pH值至7.4，直到所需的pH值稳定。
f.用去离子水稀释至总体积100mL。
2.PBS缓冲液PBS缓冲液是生物学实验中常用的缓冲液之一、以下是PBS缓冲液的配制方法：-配制10×PBS缓冲液：a.在1L去离子水中加入80gNaCl，2gKCl，14.4gNa2HPO4，2.4gKH2PO4b.使用10MNaOH或10MHCl调节pH值至7.4c.用去离子水稀释至总体积1L。
-配制1×PBS缓冲液：a.取10×PBS缓冲液100mL，用去离子水稀释至总体积1L。
3.TAE缓冲液TAE缓冲液常用于琼脂糖凝胶电泳。
以下是TAE缓冲液的配制方法：-配制50×TAE缓冲液：a. 在1 L去离子水中加入242 g Tris base，57.1 mL 0.5 M EDTA，100 mL冰醋酸。
b.用10MNaOH或10MHCl调节pH值至8.3c.用去离子水稀释至总体积1L。
-配制1×TAE缓冲液：a.取50×TAE缓冲液20mL，用去离子水稀释至总体积1L。
4. Tris-HCl缓冲液Tris-HCl缓冲液常用于DNA或RNA的酶切反应。
常用缓冲溶液配制方法
常用缓冲溶液的配制方法1．甘氨酸–盐酸缓冲液（0.05mol/L）2．邻苯二甲酸–盐酸缓冲液（0.05 mol/L）邻苯二甲酸氢钾分子量= 204.23，0.2 mol/L邻苯二甲酸氢溶液含40.85克/升3．磷酸氢二钠–柠檬酸缓冲液24Na2HPO4·2H2O分子量= 178.05，0.2 mol/L溶液含35.01克/升。
C4H2O7·H2O分子量= 210.14，0.1 mol/L溶液为21.01克/升。
4．柠檬酸–氢氧化钠-盐酸缓冲液① 使用时可以每升中加入1克克酚，若最后pH 值有变化，再用少量50% 氢氧化钠溶液或浓盐酸调节，冰箱保存。
5．柠檬酸–柠檬酸钠缓冲液（0.1 mol/L ）6872柠檬酸钠Na 3 C 6H 5O 7·2H 2O ：分子量294.12，0.1mol/L 溶液为29.41克/毫升。
6．乙酸–乙酸钠缓冲液（0.2 mol/L ） Na 2Ac·3H 2O 分子量 = 136.09，0.2 mol/L 溶液为27.22克/升。
7．磷酸盐缓冲液（1）磷酸氢二钠–磷酸二氢钠缓冲液（0.2）242Na 2HPO 4·12H 2O 分子量 = 358.14，0.2 mol/L 溶液为71.628克/升。
NaH 2PO 4·2H 2O 分子量 = 156.01，0.2 mol/L 溶液为31.202克/升。
磷酸盐是生物化学研究中使用最广泛的一种缓冲剂，由于它们是二级解离，有二个pKa 值，所以用它们配制的缓冲液，pH 范围最宽：NaH 2PO 4： pKa1＝2.12，pKa2＝7.21； Na 2HPO 4：pKa1＝7.21，pKa2＝12.32配酸性缓冲液：用NaH2PO 4，pH ＝1～4，配中性缓冲液：用混合的两种磷酸盐，pH ＝6～8， 配碱性缓冲液：用Na 2HPO 4，pH ＝10～12。
用钾盐比钠盐好，因为低温时钠盐难溶，钾盐易溶，但若配制SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的缓冲液时，只能用磷酸钠而不能用磷酸钾，因为SDS(十二烷基硫酸钠)会与钾盐生成难溶的十二烷基硫酸钾。
常见缓冲溶液的配制
常见缓冲溶液的配制缓冲液是一种能在加入少量酸或碱时抵抗pH改变的溶液。
PH缓冲系统对维持生物的正常pH值，正常生理环境起重要作用。
多数细胞仅能在很窄的pH范围内进行活动，而且需要有缓冲体系来抵抗在代谢过程中出现的pH变化。
在生物体中有三种主要的pH缓冲体系，它们时蛋白质、重碳酸盐缓冲体系。
每种缓冲体系所占的分量在各类细胞和器官中是不同的。
在生化研究工作中，常常要用到缓冲溶液来维持实验体系的酸碱度。
研究工作的溶液体系pH值的变化往往直接影响到我们工作的成效。
如果提取酶实验体系的pH值变化或变化过大，会使酶活性下降甚至完全失活。
所以我们要学会配制缓冲溶液。
由弱酸及其盐组合一起使具有缓冲作用。
生化实验室常常用的缓冲系主要有磷酸、柠檬酸、碳酸、醋酸、巴比妥酸、Tiris（三羟甲基氨基甲烷）等系统，在生化实验或研究工作中要慎重地选择缓冲体系，因为有时影响实验结果的因素并不是缓冲液的pH值，而是缓冲液中的某种离子。
如硼酸盐、柠檬酸盐、磷酸盐和三羟甲基甲烷等缓冲剂都可能产生不需要的反应。
硼酸盐：硼酸盐与许多化合物形成复盐、如蔗糖。
柠檬酸盐：柠檬酸盐离子容易与钙结合，所以存在有钙离子的情况下不能使用。
磷酸盐：在有些实验，它是酶的抑止剂或甚至是一个代谢物，重金属易以磷酸盐的形式从溶液中沉淀出来。
而且它在pH7.5以上时缓冲能力很小。
三羟甲基氨基甲烷：它可以和重金属一起作用，但在有些系统中也起抑止的作用。
其主要缺点时温度效应。
这点往往被忽视，在室温pH是7.8的Tris一缓冲液，在4℃时是8.4，在37℃时是7.4，因此，4℃配制的缓冲液拿到37℃测量时，其氢离子浓度就增加了10倍。
而且它在pH7.5以下，缓冲能力很差。
缓冲液的pH值由哪些因素决定？设缓冲系统的弱酸的电离常数为K（平衡常数），平衡时弱酸的浓度为[酸]，弱酸盐的浓度为[盐]，则由弱酸的电离平衡式可得下式：根据此式可得出下列几点结论：（1）缓冲液的pH值与该酸的电离平衡常数K及盐和酸的浓度有关。
常用缓冲溶液配制方法
常用缓冲溶液的配制方法1．甘氨酸–盐酸缓冲液（L）X毫升mol/L甘氨酸+Y毫升mol/L甘氨酸分子量= ，mol/L甘氨酸溶液含15.01克/升。
2．邻苯二甲酸–盐酸缓冲液（mol/L）X毫升mol/L邻苯二甲酸氢钾+邻苯二甲酸氢钾分子量= ，mol/L 邻苯二甲酸氢溶液含40.85克/升Na2HPO4分子量= ，mol/L溶液为28.40克/升。
Na2HPO4·2H2O分子量= ，mol/L 溶液含35.01克/升。
C4H2O7·H2O分子量= ，mol/L溶液为21.01克/升。
①使用时可以每升中加入1克克酚，若最后pH值有变化，再用少量50%氢氧化钠溶液或浓盐酸调节，冰箱保存。
柠檬酸C 6H 8O 7·H 2O ：分子量， mol/L 溶液为21.01克/升。
柠檬酸钠Na 3 C 6H 5O 7·2H 2O ：分子量， mol/L 溶液为29.41克/毫升。
Na2Ac·3H2O分子量= ，mol/L溶液为27.22克/升。
7．磷酸盐缓冲液（1）磷酸氢二钠–磷酸二氢钠缓冲液（）Na2HPO4·2H2O分子量= ，mol/L溶液为85.61克/升。
Na2HPO4·12H2O分子量= ，mol/L 溶液为克/升。
NaH2PO4·2H2O分子量= ，mol/L溶液为克/升。
磷酸盐是生物化学研究中使用最广泛的一种缓冲剂，由于它们是二级解离，有二个pKa 值，所以用它们配制的缓冲液，pH 范围最宽：NaH2PO4：pKa1＝，pKa2＝；Na2HPO4：pKa1＝，pKa2＝配酸性缓冲液：用NaH2PO4，pH＝1～4，配中性缓冲液：用混合的两种磷酸盐，pH＝6～8，配碱性缓冲液：用Na2HPO4，pH＝10～12。
用钾盐比钠盐好，因为低温时钠盐难溶，钾盐易溶，但若配制SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的缓冲液时，只能用磷酸钠而不能用磷酸钾，因为SDS(十二烷基硫酸钠)会与钾盐生成难溶的十二烷基硫酸钾。
各种缓冲液的配制方法
各种缓冲液的配制方法Na2HPO4-柠檬酸钠缓冲液Na2HPO4。
2H2O，分子量=178.05 0.2mol/L溶液含35.61g/L 柠檬酸. H2O，分子量=210.14 0.1mol/L溶液含21.01g/L2柠檬酸钠.2H2O，分子量=294.12；0.1mol/L溶液含29.4g/L2（1）醋酸盐溶液的配制：醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3.6)取醋酸钠5.1g,加冰醋酸20ml，再加水稀释至250ml,即得。
醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3.7)取无水醋酸钠20g,加水300ml溶解后，加溴酚蓝指示液1ml及冰醋酸60～80ml，至溶液从蓝色转变为纯绿色，再加水稀释至1000ml，即得。
醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3.8)取2mol/L醋酸钠溶液13ml与2mol/L醋酸溶液87ml,加每1ml含铜1mg的硫酸铜溶液0.5ml,再加水稀释至1000ml，即得。
醋酸－醋酸钠缓冲液(pH4.5)取醋酸钠18g,加冰醋酸9.8ml,再加水稀释至1000ml,即得。
醋酸－醋酸钠缓冲液(pH4.6)取醋酸钠5.4g,加水50ml使溶解，用冰醋酸调节pH值至4.6，再加水稀释至100ml，即得。
醋酸－醋酸钠缓冲液(pH6.0)取醋酸钠54.6g，加1mol/L醋酸溶液20ml溶解后，加水稀释至500ml，即得。
用醋酸和醋酸钠配制的缓冲溶液的PH=PKa+lg[C(NaAc)/C(HAc)]（在此，C(HAc)指醋酸的浓度，C(NaAc)指醋酸钠的浓度,Ka是醋酸的解离常数=1.8*10-5（1.8乘10的-5次方），PKa=-lgKa=4.75，将PH=5.5代入，可得C(NaAc)/C(HAc)=5.6 通常我们配制时会使C(HAc)=0.1mol/L，或是C(HAc)=0.2mol/L等。
若是配制C(HAc)=0.1mol/L，则C(NaAc)=0.56mol/L 称量醋酸钠固体质量为82*0.56=46克量取冰醋酸体积为0.1*1000/17.5=5.7mL。
各种缓冲液的配制方法-
各种缓冲液的配制方法Na2HPO4-柠檬酸钠缓冲液24。
2柠檬酸. H2O，分子量=210.14 0.1mol/L溶液含21.01g/L2柠檬酸钠. 2H2O，分子量=294.12；0.1mol/L溶液含29.4 g/L2（1）醋酸盐溶液的配制：醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3.6)取醋酸钠5.1g,加冰醋酸20ml，再加水稀释至250ml,即得。
醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3.7)取无水醋酸钠20g,加水300ml溶解后，加溴酚蓝指示液1ml及冰醋酸60～80ml，至溶液从蓝色转变为纯绿色，再加水稀释至1000ml，即得。
醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3.8)取2mol/L醋酸钠溶液13ml与2mol/L醋酸溶液87ml,加每1ml含铜1mg的硫酸铜溶液0.5ml,再加水稀释至1000ml，即得。
醋酸－醋酸钠缓冲液(pH4.5)取醋酸钠18g,加冰醋酸9.8ml,再加水稀释至1000ml,即得。
醋酸－醋酸钠缓冲液(pH4.6)取醋酸钠5.4g,加水50ml使溶解，用冰醋酸调节pH值至4.6，再加水稀释至100ml，即得。
醋酸－醋酸钠缓冲液(pH6.0)取醋酸钠54.6g，加1mol/L醋酸溶液20ml溶解后，加水稀释至500ml，即得。
用醋酸和醋酸钠配制的缓冲溶液的PH=PKa+lg[C(NaAc)/C(HAc)]（在此，C(HAc)指醋酸的浓度，C(NaAc)指醋酸钠的浓度,Ka是醋酸的解离常数=1.8*10-5（1.8乘10的-5次方），PKa=-lgKa=4.75，将PH=5.5代入，可得C(NaAc)/C(HAc)=5.6 通常我们配制时会使C(HAc)=0.1mol/L，或是C(HAc)=0.2mol/L等。
若是配制C(HAc)=0.1mol/L，则C(NaAc)=0.56mol/L 称量醋酸钠固体质量为82*0.56=46克量取冰醋酸体积为0.1*1000/17.5=5.7mL。
将称好的醋酸钠和量好的冰醋酸加入1000mL水中溶解、搅拌均匀即可。
各种缓冲液的配制方法-
各种缓冲液的配制方法之巴公井开创作Na2HPO4-柠檬酸钠缓冲液Na2HPO4.2H2O,分子量=178.05 0.2mol/L溶液含35.61g/L 柠檬酸. H2O,分子量=210.14 0.1mol/L溶液含21.01g/L柠檬酸. H2O,分子量=210.14 0.1mol/L溶液含21.01g/L柠檬酸钠.2H2O,分子量=294.12；0.1mol/L溶液含29.4g/LNaAC.3H2O,分子量=136.09 0.2mol/L溶液含27.22g/L （1）醋酸盐溶液的配制：醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3.6)取醋酸钠 5.1g,加冰醋酸20ml,再加水稀释至250ml,即得. 醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3.7)取无水醋酸钠20g,加水300ml溶解后,加溴酚蓝指示液1ml 及冰醋酸60～80ml,至溶液从蓝色转酿成纯绿色,再加水稀释至1000ml,即得.醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3.8)取2mol/L醋酸钠溶液13ml与2mol/L醋酸溶液87ml,加每1ml含铜1mg的硫酸铜溶液0.5ml,再加水稀释至1000ml,即得.醋酸－醋酸钠缓冲液(pH4.5)取醋酸钠18g,加冰醋酸9.8ml,再加水稀释至1000ml,即得. 醋酸－醋酸钠缓冲液(pH4.6)取醋酸钠5.4g,加水50ml使溶解,用冰醋酸调节pH值至4.6,再加水稀释至100ml,即得. 醋酸－醋酸钠缓冲液(pH6.0)取醋酸钠54.6g,加1mol/L醋酸溶液20ml溶解后,加水稀释至500ml,即得.用醋酸和醋酸钠配制的缓冲溶液的PH=PKa+lg[C(NaAc)/C(HAc)]（在此,C(HAc)指醋酸的浓度,C(NaAc)指醋酸钠的浓度,Ka是醋酸的解离常数=1.8*10-5（1.8乘10的-5次方）,PKa=-lgKa=4.75,将PH=5.5代入,可得C(NaAc)/C(HAc)=5.6 通常我们配制时会使C(HAc)=0.1mol/L,或是C(HAc)=0.2mol/L等.若是配制C(HAc)=0.1mol/L,则C(NaAc)=0.56mol/L 称量醋酸钠固体质量为82*0.56=46克量取冰醋酸体积为0.1*1000/17.5=5.7mL.将称好的醋酸钠和量好的冰醋酸加入1000mL水中溶解、搅拌均匀即可.固然若想配制其它的浓度,也可照公式计算即可,通常缓冲溶液不能配的太稀,否则缓冲能力要下降,太浓的话又浪费试剂.0.2mol/L苯二甲酸氢钾溶液：称取在硫酸干燥器中干燥过24小时的苯二甲酸氢钾20.44g溶于水中,稀释至500ml.Na2HPO4.2H2O ,分子量=178.05, 0.2mol/L溶液含35.61g/L NaH2PO4.2H2O ,分子量=156.03, 0.2mol/L溶液含31.21g/L NaH2PO4.H2O,分子量=138.03, 0.2mol/L溶液含27.6g/LNa2HPO4.12H2O,,分子量=358.22, 0.2mol/L溶液含71.64g/L磷酸盐缓冲液（PBS）配制方法0.01M PBSPBS (135 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 1.5 mM KH2PO4, and 8 mM K2HPO4,pH 7.2)PBS缓冲液（pH7.2～7.4）：NaCl 137mmol/L,KCl 2.7mmol/L,Na2HPO4 4.3mmol/L, KH2PO4 1.4mmol/L称7.9g NaCl,0.2g KCl,0.24g KH2PO4(or 1.44g Na2HPO4)和1.8g K2HPO4,溶于800 ml 蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1 L.保管于4℃冰箱中即可.需要注意的是,通常所说的浓度0.01 M指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度,而非Na 离子或K 离子的浓度,Na 离子和K 离子只是用来调节渗透压的.母液的配制：0.2M Na2HPO4：称取71.6g Na2HPO4-12H2O,溶于 1000ml 水0.2M NaH2PO4：称取31.2g NaH2PO4-2H2O,溶于1000ml 水各种浓度PB(pH=7.4)的配制：先配0.2M PB (pH=7.4,100ml)：取19ml 0.2mol/L的 NaH2PO4, 81ml 0.2mol/L 的 Na2HPO4, 即可.然后只需将0.2M PB (pH=7.4)按相应比例适当稀释即可,如：0.1M PB（PH=7.4）：取 500ml 0.2M PB,加水稀释至 1000ml 即可. 0.01M PB （PH=7.4）：取50ml 0.2M PB,加水稀释至 1000ml 即可. 0.02M PB （PH=7.4）：取100ml 0.2 M PB,加水稀释至 1000ml 即可.若需要 NaCl的话,加入 NaCl 至0.9%（g/100ml）即可.另：其它各种另 PH值的0.2M PB（100ml)配方：pH 0.2M NaH2PO4（ml）0.2M Na2HPO4（ml）5.7 93.56.55.8 92 85.9 90 106.0 87.7 12.36.1 85 156.2 81.5 18.56.3 77.5 22.56.4 73.5 26.56.5 68.5 31.56.6 62.5 37.56.7 56.5 43.56.8 51 496.9 45 557.0 38 627.1 33 677.2 28 727.3 23 777.4 19ml 81ml7.5 16 847.6 13 877.7 10.5 90.57.8 8.5 91.57.9 7 938.0 5.3 94.70.01M磷酸盐缓冲液（PBS）配制方法称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L即可.在15lbf/in2(1034×105Pa)高压下蒸气灭菌（至少20分钟）,保管存于室温或4℃冰箱中.需要注意的是,通常所说的浓度0.01M指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度,而非Na 离子或K 离子的浓度,Na 离子和K 离子只是用来调节渗透压的.如果是用于免疫组化的话,则需要在配置的时候分别加入100 u/ml青霉素和链霉素之后再调PH、定容、灭菌消毒.PH 7.6 7.4 7.2 7.0H2O 1000 1000 1000 1000NaCl 8.5 8.5 8.5 8.5Na2HPO4 2.2 2.2 2.2 2.2NaH2PO4 0.1 0.2 0.3 0.4根据经验来看,新鲜配置的PBS搅匀后其PH值约在7.2-7.4之间,可是在温度的影响下,尤其在夏天,其电离常数发生了改变,在经过昼夜的时间后,PH值会明显改变（我亲自测过偏酸）.所以做实验的同学可要注意了,PH值可能会影响实验结果,甚至可能招致阴性.所以务必记得这个时候和天气,要加强实验条件控制问题.每次使用前最好用试纸测一下过夜了的PBS,如果发生偏酸或偏碱,注意重新换新液.PBS缓冲液称取NaCl 8g,KCl 0.2g,Na2HPO4?12H2O 3.63g, KH2PO4 0.24g,溶于900ml双蒸水中,用盐酸调pH值至7.4,加水定容至1L,常温保管备用.PBST缓冲液取300μl Tween-20 加入PBS 100ml中,混匀后即刻使用.现用现配.如果是把所有固体加年夜十倍,配置为浓缩液,工作时候十倍稀释,那么,在刚配好浓缩液时,PH在6.5左右,明显偏酸.不能用盐酸调.虽然可以用氢氧化钠颗粒调,可是有更方便的方法.十倍稀释以后,PH自动升高到所需要的值.不需要其它任何处置.这个可以先取少量试一试,配好之后再测一次~PH8.0的PBS配方详细1. NaCl 137mmol/L,KCl2.7mmol/L,Na2HPO4 4.3mmol/L, KH2PO41.4mmol/L2. 向烧杯中加入约800 ml的去离子水,充沛搅拌溶解.3. 滴加浓盐酸将pH值调节至8.0,然后加入去离子水将溶液定容至1 L.4. 高温高压灭菌后,室温保管.注意：上述PBS Buffer中无二价阳离子,如需要,可在配方中弥补1 mM CaCl2和0.5 mM MgCl2.0.05mol/L PBS(磷酸缓冲液Phosphate Buffer Solution,PBS)的配制：甲液：0.05mol/L Na2HPO4溶液：称取磷酸氢二钠9.465g7.099g,加蒸馏水至1000ml ;乙液：0.05mol/L KH2P04溶液: 称取磷酸二氢钾, 9.07g6.803g,加蒸馏水至1000m1.将甲乙液分装在棕色瓶内,于4℃冰箱中保管,用时甲、乙两液各按分歧比例混合,即可得所需pH的缓冲液,见下表:pH 甲液ml 乙液mI5.29 2.5 97.55.59 5.0 95.05.91 10.0 90.06.24 20.0 80.06.47 30.0 70.06.64 40.0 60.06.81 50.0 50.06.98 60.0 40.07.17 70.0 30.07.38 80.0 20.07.73 90.0 10.08.04 95.0 5.0你要配制pH=6.8的PBS,可用甲、乙液各50ml混合即可.硼砂Na2B4O7.10H2O,分子量=381.43,0.05mol/L溶液=0.2mol/L硼砂含19.07g/L硼酸,分子量=61.84,0.2mol/L溶液含12.37g/L硼砂易失去结晶水,必需在带塞得瓶中保管；硼砂溶液也可以用半中和的硼酸溶液取代0.02mol/LKCl溶液：溶7.455g氯化钾于水中,稀释至500ml0.02mol/L苯二甲酸氢钾溶液：称取在硫酸干燥器中干燥过24小时额苯二甲酸氢钾20.44g溶于水中,稀释至500ml0.2mol/L磷酸二氢钾溶液：溶13.616g磷酸二氢钾于水中,稀释至500ml时间：二O二一年七月二十九日0.02mol/L硼酸-氯化钾溶液：溶6.202g硼酸和7.456g氯化钾于水中稀释至500ml时间：二O二一年七月二十九日。
各种缓冲液的配制方法
1・甘氨酸-盐酸缓冲液（0. OSmol/L）Na：HPO—2H；0 分子 fi = 1 7 8 . 05,0. 2 mol / L 瀋液含 3 5・ 0 1 克 / 升。
CM0：・H・・0 分子fi =210. 14,0. 1 aol/L iff液为 21.0 1 克/升・①使用时可以每升中加入1克克酚，若最后pH 值有变化，再用少§50%氢氧化钠溶液或浓 盐酸调节，冰箱保存， ②6•柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液（0、1 mo 1 /L ）B 柠棣酸钠丸，CHO ■- 2出0：分子虽294、12, 0、1 mol/tiff 液为2 9.巾1克/宅升。
BO mol7.碑酸盐缓冲液（1 ）磷酸氢二钠-磷酸一氢钠缓冲液（0. 2）Na：HP0；・2H：O 分子 fi = 178、05, 0. 2 BO 1/L 溶液为 85. 6 1 克 / 升。
Na：HP Or 2H?0 分子址=358、224、2 mol/L 溶液为 7 1.61 克 / 升。
Na,HPO.-2H：0 分子 g = 1 56, 03, 0. 2 nol/L 溶液为 $1. 21 克 / 升.（2）磷酸氢二钠•磷酸一氢钾缓冲液（1/ 1 5 mo 1/L）•loKHcPOl 8•磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲液（0・0 510X毫升0・2MK2PO：+ Y毫升0、2N NaOH加水稀释至29老升NacHPOr 2H：0 分予fi = 17 8、05, 1, 15M 溶液为 H。
87 6 克/升.KHWOd 分子 g = 136 . 09. 1, 15MiK 液为 9, 07 8 克 / 升。
10 .Tris-盐酸缓冲液（0. O5M, 2 6P ）50毫升0.山三瓮甲基氨基甲烷（Tris ）溶液与X 亳升0、1N 盐®混匀后.加水稀释至】00毫升。
HOCH2 XH2分子 S=12 1、11: 1M 溶液为1 2。
114克/升.Tr IS 溶液可从空气中吸收一氧化碳，使川时注总将瓶盖（老C H2OH0、 严9・巴比妥钠一盐酸缓冲液（1 89） 巴比妥钠盐分fa=206. 18： 0. 01M iff 液为& 25克/升硼酸出Bg分子S=61. 84. 0. 2M溶液为1 2. 87克/升。
各种缓冲液的配制方法_
各种缓冲液的配制方法Na2HPO4-柠檬酸钠缓冲液24。
2柠檬酸. H2O，分子量=210.14 0.1mol/L溶液含21.01g/L2柠檬酸钠. 2H2O，分子量=294.12；0.1mol/L溶液含29.4 g/LNaAC.3 H2O,分子量=136.09 0.2mol/L溶液含27.22g/L（1）醋酸盐溶液的配制：醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3.6)取醋酸钠5.1g,加冰醋酸20ml，再加水稀释至250ml,即得。
醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3.7)取无水醋酸钠20g,加水300ml溶解后，加溴酚蓝指示液1ml及冰醋酸60～80ml，至溶液从蓝色转变为纯绿色，再加水稀释至1000ml，即得。
醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3.8)取2mol/L醋酸钠溶液13ml与2mol/L醋酸溶液87ml,加每1ml含铜1mg的硫酸铜溶液0.5ml,再加水稀释至1000ml，即得。
醋酸－醋酸钠缓冲液(pH4.5)取醋酸钠18g,加冰醋酸9.8ml,再加水稀释至1000ml,即得。
醋酸－醋酸钠缓冲液(pH4.6)取醋酸钠5.4g,加水50ml使溶解，用冰醋酸调节pH值至4.6，再加水稀释至100ml，即得。
醋酸－醋酸钠缓冲液(pH6.0)取醋酸钠54.6g，加1mol/L醋酸溶液20ml溶解后，加水稀释至500ml，即得。
用醋酸和醋酸钠配制的缓冲溶液的PH=PKa+lg[C(NaAc)/C(HAc)]（在此，C(HAc)指醋酸的浓度，C(NaAc)指醋酸钠的浓度,Ka是醋酸的解离常数=1.8*10-5（1.8乘10的-5次方），PKa=-lgKa=4.75，将PH=5.5代入，可得C(NaAc)/C(HAc)=5.6 通常我们配制时会使C(HAc)=0.1mol/L，或是C(HAc)=0.2mol/L等。
若是配制C(HAc)=0.1mol/L，则C(NaAc)=0.56mol/L 称量醋酸钠固体质量为82*0.56=46克量取冰醋酸体积为0.1*1000/17.5=5.7mL。
各种缓冲液的配制方法
1.甘氨酸–盐酸缓冲液(0。
0５mol/L)X毫升0、2 mｏl/Ｌ甘氨酸+Y毫升０。
2ｍoｌ/LＨCI,再加水稀释至２０0毫升甘氨酸分子量 = 7５。
07,0。
2 mol/L甘氨酸溶液含1５。
0１克/升、２。
邻苯二甲酸–盐酸缓冲液(0。
0５ mｏl/Ｌ)Ｘ毫升0、2mol／L邻苯二甲酸氢钾 + 0。
2 mol/L HＣl,再加水稀释到２0毫升邻苯二甲酸氢钾分子量= 20４.23,0、２ mol/L邻苯二甲酸氢溶液含40.8５克/升3.磷酸氢二钠–柠檬酸缓冲液Na2HＰO4分子量 = 1４、98,0、2 mｏｌ／Ｌ溶液为２８。
４0克/升。
Ｎａ2HPＯ4-2H２Ｏ分子量 = １78、０5,０。
2 mｏl／Ｌ溶液含35．01克/升。
C4H2Ｏ7·H2O分子量 = 2１０。
14,０。
１ moｌ/L溶液为21．０1克/升、4、柠檬酸–氢氧化钠－盐酸缓冲液① 使用时可以每升中加入1克克酚,若最后p Ｈ值有变化,再用少量50％ 氢氧化钠溶液或浓盐酸调节,冰箱保存。
②5.柠檬酸–柠檬酸钠缓冲液(０、1 ｍol ／L)柠檬酸C ６H 8Ｏ7·H 2O:分子量210、1４,0.1 mol/L 溶液为21.0１克/升。
柠檬酸钠Na 3 C ６H 5O ７·２H ２Ｏ:分子量294。
1２,0。
1 mol/L 溶液为29.4１克/毫升。
６.乙酸–乙酸钠缓冲液(0.2 mo ｌ／L) Na 2Ac·３H 2O 分子量 = 1３６。
09,０.２ mol/Ｌ溶液为２7.２2克/升。
７.磷酸盐缓冲液(1)磷酸氢二钠–磷酸二氢钠缓冲液(0.2)Ｎａ２ＨＰＯ４·2H2O分子量 = 178、０5,0。
2ｍol/L溶液为85.６１克／升。
Na２HＰＯ４·2H２O分子量= ３58.２2,０。
２ mol/L溶液为7１。
64克/升。
Na2HPO4·2H2O分子量 = 156。
常用缓冲溶液的配制方法
常用缓冲溶液的配制方法1．甘氨酸–盐酸缓冲液（0.05mol/L）X毫升0.2 mol/L甘氨酸+Y毫升0.2 mol/L HCI，再加水稀释至200毫升甘氨酸分子量 = 75.07，0.2 mol/L甘氨酸溶液含15.01克/升。
2．邻苯二甲酸–盐酸缓冲液（0.05 mol/L）X毫升0.2 mol/L邻苯二甲酸氢钾 + 0.2 mol/L HCl，再加水稀释到20毫升邻苯二甲酸氢钾分子量 = 204.23，0.2 mol/L邻苯二甲酸氢溶液含40.85克/升3．磷酸氢二钠–柠檬酸缓冲液Na2HPO4分子量 = 14.98，0.2 mol/L溶液为28.40克/升。
Na2HPO4-2H2O分子量 = 178.05，0.2 mol/L溶液含35.01克/升。
C4H2O7·H2O分子量 = 210.14，0.1 mol/L溶液为21.01克/升。
4．柠檬酸–氢氧化钠-盐酸缓冲液①使用时可以每升中加入1克克酚，若最后pH值有变化，再用少量50% 氢氧化钠溶液或浓盐酸调节，冰箱保存。
5．柠檬酸–柠檬酸钠缓冲液（0.1 mol/L）柠檬酸C6H8O7·H2O：分子量210.14，0.1 mol/L溶液为21.01克/升。
柠檬酸钠Na3 C6H5O7·2H2O：分子量294.12，0.1 mol/L溶液为29.41克/毫升。
6．乙酸–乙酸钠缓冲液（0.2 mol/L）Na2Ac·3H2O分子量 = 136.09，0.2 mol/L溶液为27.22克/升。
7．磷酸盐缓冲液（1）磷酸氢二钠–磷酸二氢钠缓冲液（0.2）Na 2HPO 4·2H 2O 分子量 = 178.05，0.2 mol/L 溶液为85.61克/升。
Na 2HPO 4·2H 2O 分子量 = 358.22，0.2 mol/L 溶液为71.64克/升。
Na 2HPO 4·2H 2O 分子量 = 156.03，0.2 mol/L 溶液为31.21克/升。
各种缓冲液的配制方法
各种缓冲液的配制方法Na2HPO4-柠檬酸钠缓冲液24。
2柠檬酸. H柠檬酸. H2O，分子量=210.14 0.1mol/L溶液含21.01g/L 柠檬酸钠. 2HNaAC.3 H2O,分子量=136.09 0.2mol/L溶液含27.22g/L〔1〕醋酸盐溶液的配制：醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3.6)取醋酸钠5.1g,加冰醋酸20ml，再加水稀释至250ml,即得。
醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3.7)取无水醋酸钠20g,加水300ml溶化后，加溴酚蓝指示液1ml及冰醋酸60～80ml，至溶液从蓝色转变为纯绿色，再加水稀释至1000ml，即得。
醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3.8)取2mol/L醋酸钠溶液13ml与2mol/L醋酸溶液87ml,加每1ml含铜1mg的硫酸铜溶液0.5ml,再加水稀释至1000ml，即得。
醋酸－醋酸钠缓冲液(pH4.5)取醋酸钠18g,加冰醋酸9.8ml,再加水稀释至1000ml,即得。
醋酸－醋酸钠缓冲液(pH4.6)取醋酸钠5.4g,加水50ml使溶化，用冰醋酸调节pH值至4.6，再加水稀释至100ml，即得。
醋酸－醋酸钠缓冲液(pH6.0)取醋酸钠54.6g，加1mol/L醋酸溶液20ml溶化后，加水稀释至500ml，即得。
用醋酸和醋酸钠配制的缓冲溶液的PH=PKa+lgC(NaAc)/C(HAc)]〔在此，C(HAc)指醋酸的浓度，C(NaAc)指醋酸钠的浓度,Ka是醋酸的解离常数=1.8x10-5〔1.8乘10的-5次方〕，PKa=-lgKa=4.75，将PH=5.5代入，可得C(NaAc)/C(HAc)=5.6 通常我们配制时会使C(HAc)=0.1mol/L，或是C(HAc)=0.2mol/L等。
假设是配制C(HAc)=0.1mol/L，则C(NaAc)=0.56mol/L 称量醋酸钠固体质量为82x0.56=46克量取冰醋酸体积为0.1x1000/17.5=5.7mL。
各种缓冲液的配制方法-
各种缓冲液的配制方法之袁州冬雪创作Na2HPO4-柠檬酸钠缓冲液（1）醋酸盐溶液的配制：醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3.6)取醋酸钠5.1g,加冰醋酸20ml，再加水稀释至250ml,即得. 醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3.7) 取无水醋酸钠20g,加水300ml溶解后，加溴酚蓝指示液1ml及冰醋酸60～80ml，至溶液从蓝色转变成纯绿色，再加水稀释至1000ml，即得.醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3.8) 取2mol/L醋酸钠溶液13ml与2mol/L醋酸溶液87ml,加每1ml含铜1mg的硫酸铜溶液0.5ml,再加水稀释至1000ml，即得.醋酸－醋酸钠缓冲液(pH4.5)取醋酸钠18g,加冰醋酸9.8ml,再加水稀释至1000ml,即得. 醋酸－醋酸钠缓冲液(pH4.6)取醋酸钠5.4g,加水50ml使溶解，用冰醋酸调节pH值至4.6，再加水稀释至100ml，即得. 醋酸－醋酸钠缓冲液(pH6.0)取醋酸钠54.6g，加1mol/L醋酸溶液20ml溶解后，加水稀释至500ml，即得.用醋酸和醋酸钠配制的缓冲溶液的PH=PKa+lg[C(NaAc)/C(HAc)]（在此，C(HAc)指醋酸的浓度，C(NaAc)指醋酸钠的浓度,Ka是醋酸的解离常数=1.8*10-5（1.8乘10的-5次方），PKa=-lgKa=4.75，将PH=5.5代入，可得C(NaAc)/C(HAc)=5.6 通常我们配制时会使C(HAc)=0.1mol/L，或是C(HAc)=0.2mol/L等.若是配制C(HAc)=0.1mol/L，则C(NaAc)=0.56mol/L 称量醋酸钠固体质量为82*0.56=46克量取冰醋酸体积为0.1*1000/17.5=5.7mL.将称好的醋酸钠和量好的冰醋酸加入1000mL水中溶解、搅拌平均即可.当然若想配制其它的浓度，也可照公式计算即可，通常缓冲溶液不克不及配的太稀，否则缓冲才能要下降，太浓的话又华侈试剂.0.2mol/L苯二甲酸氢钾溶液：称取在硫酸干燥器中干燥过24小时的苯二甲酸氢钾20.44g溶于水中，稀释至500ml.磷酸盐缓冲液（PBS）配制方法0.01M PBSPBS (135 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 1.5 mM KH2PO4, and 8 mM K2HPO4，pH 7.2)称 NaCl， KCl， KH2PO4(or Na2HPO4)和 K2HPO4，溶于800 ml 蒸馏水中，用HCl调节溶液的pH值至7.4，最后加蒸馏水定容至1 L.保管于4℃冰箱中即可.需要注意的是，通常所说的浓度0.01 M指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度，而非Na 离子或K 离子的浓度，Na 离子和K 离子只是用来调节渗透压的.母液的配制：Na2HPO4：称取 Na2HPO4-12H2O，溶于 1000ml 水NaH2PO4：称取 NaH2PO4-2H2O，溶于1000ml 水各种浓度PB(pH=7.4)的配制：先配 PB (pH=7.4，100ml)：取19ml 0.2mol/L的 NaH2PO4，81ml 0.2mol/L 的 Na2HPO4, 即可.然后只需将 PB (pH=7.4)按相应比例适当稀释即可，如：PB（PH=7.4）：取 500ml PB，加水稀释至 1000ml 即可. PB （PH=7.4）：取50ml PB，加水稀释至 1000ml 即可.PB （PH=7.4）：取100ml 0.2 M PB，加水稀释至 1000ml 即可.若需要 NaCl的话，加入 NaCl 至0.9%（g/100ml）即可.另：其它各种另 PH值的 PB（100ml)配方：pH NaH2PO4（ml） Na2HPO4（ml）5.8 92 85.9 90 106.1 85 156.8 51 496.9 45 557.0 38 627.1 33 677.2 28 727.3 23 777.4 19ml 81ml7.5 16 847.6 13 877.9 7 93磷酸盐缓冲液（PBS）配制方法称取8g NaCl、 KCl、 Na2HPO4和 KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中，用HCl调节溶液的pH值至7.4，最后加蒸馏水定容至1L即可.在15lbf/in2(1034×105Pa)高压下蒸气灭菌（至少20分钟），保管存于室温或4℃冰箱中.需要注意的是，通常所说的浓度指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度，而非Na 离子或K 离子的浓度，Na 离子和K 离子只是用来调节渗透压的.如果是用于免疫组化的话，则需要在配置的时候分别加入100 u/ml青霉素和链霉素之后再调PH、定容、灭菌消毒.PH 7.6 7.4 7.2 7.0 H2O 1000 1000 1000 1000NaCl 8.5 8.5 8.5 8.5 Na2HPO4 2.2 2.2 2.2 2.2根据经历来看，新鲜配置的PBS搅匀后其PH值约在7.2-7.4之间，可是在温度的影响下，尤其在夏天，其电离常数发生了改变，在颠末昼夜的时间后，PH值会分明改变（我亲自测过偏酸）.所以做实验的同学可要注意了，PH值能够会影响实验成果，甚至能够导致阴性.所以务必记得这个时候和天气，要加强实验条件节制问题.每次使用前最好用试纸测一下过夜了的PBS，如果发生偏酸或偏碱，注意重新换新液. PBS缓冲液称取NaCl 8g，KCl ，Na2HPO4?12H2O , KH2PO4 ，溶于900ml 双蒸水中，用盐酸调pH值至7.4，加水定容至1L，常温保管备用.PBST缓冲液取300μl Tween-20 加入PBS 100ml中，混匀后即刻使用.现用现配.如果是把所有固体加大十倍，配置为稀释液，工作时候十倍稀释，那末，在刚配好稀释液时，PH在6.5左右，分明偏酸.不克不及用盐酸调.虽然可以用氢氧化钠颗粒调，但是有更方便的方法.十倍稀释以后，PH自动升高到所需要的值.不需要其它任何处理.这个可以先取少量试一试，配好之后再测一次~2. 向烧杯中加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解.3. 滴加浓盐酸将pH值调节至8.0，然后加入去离子水将溶液定容至1 L.4. 高温高压灭菌后，室温保管.注意：上述PBS Buffer中无二价阳离子，如需要，可在配方中补偿1 mM CaCl2和0.5 mM MgCl2.0.05mol/L PBS(磷酸缓冲液Phosphate Buffer Solution，PBS)的配制：甲液：0.05mol/L Na2HPO4溶液：称取磷酸氢二钠,加蒸馏水至1000ml ;乙液：0.05mol/L KH2P04溶液: 称取磷酸二氢钾, ,加蒸馏水至1000m1.将甲乙液分装在棕色瓶内，于4℃冰箱中保管，用时甲、乙两液各按分歧比例混合，即可得所需pH的缓冲液,见下表: pH 甲液ml 乙液mI5.29 2.5 97.55.59 5.0 95.05.91 10.0 90.06.24 20.0 80.06.47 30.0 70.06.64 40.0 60.06.81 50.0 50.06.98 60.0 40.07.17 70.0 30.07.38 80.0 20.07.73 90.0 10.08.04 95.0 5.0你要配制pH=6.8的PBS，可用甲、乙液各50ml混合即可.硼砂易失去结晶水，必须在带塞得瓶中保管；硼砂溶液也可以用半中和的硼酸溶液代替0.02mol/LKCl溶液：溶7.455g氯化钾于水中，稀释至500ml0.02mol/L苯二甲酸氢钾溶液：称取在硫酸干燥器中干燥过24小时额苯二甲酸氢钾20.44g溶于水中，稀释至500ml0.2mol/L磷酸二氢钾溶液：溶13.616g磷酸二氢钾于水中，稀释至500ml。
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常用的45种缓冲溶液的配制1.乙醇－醋酸铵缓冲液(pH3.7)取5mol/L醋酸溶液15.0ml，加乙醇60ml和水20ml,用10mol/L 氢氧化铵溶液调节pH值至3.7，用水稀释至1000ml，即得。
2.三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.0)取三羟甲基氨基甲烷12.14g,加水800ml,搅拌溶解，并稀释至1000ml,用6mol/L盐酸溶液调节pH值至8.0,即得。
3.三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.1)取氯化钙0.294g,加0.2mol/L三羟甲基氨基甲烷溶液40ml使溶解，用1mol/L盐酸溶液调节pH值至8.1，加水稀释至100ml，即得。
4.三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH9.0)取三羟甲基氨基甲烷6.06g,加盐酸赖氨酸3.65g、氯化钠5.8g、乙二胺四醋酸二钠0.37g，再加水溶解使成1000ml，调节pH值至9.0，即得。
5.乌洛托品缓冲液取乌洛托品75g，加水溶解后，加浓氨溶液4.2ml，再用水稀释至250ml,即得。
6.巴比妥缓冲液(pH7.4)取巴比妥钠4.42g,加水使溶解并稀释至400ml，用2mol/L盐酸溶液调节pH值至7.4，滤过，即得。
7.巴比妥缓冲液(pH8.6)取巴比妥5.52g与巴比妥钠30.9g,加水使溶解成2000ml，即得。
8.巴比妥－氯化钠缓冲液(pH7.8)取巴比妥钠5.05g,加氯化钠3.7g及水适量使溶解,另取明胶0.5g 加水适量，加热溶解后并入上述溶液中。
然后用0.2mol/L盐酸溶液调节pH值至7.8，再用水稀释至500ml，即得。
9.甲酸钠缓冲液(pH3.3)取2mol/L甲酸溶液25ml，加酚酞指示液1滴，用2mol/L氢氧化钠溶液中和，再加入2mol/L甲酸溶液75ml,用水稀释至200ml,调节pH值至3.25～3.30,即得。
10.邻苯二甲酸盐缓冲液(pH5.6)取邻苯二甲酸氢钾10g，加水900ml,搅拌使溶解，用氢氧化钠试液(必要时用稀盐酸)调节pH值至5.6,加水稀释至1000ml，混匀，即得。
11.枸橼酸盐缓冲液取枸橼酸4.2g,加1mol/L的20％乙醇制氢氧化钠溶液40ml使溶解,再用20％乙醇稀释至100ml，即得。
12.枸橼酸盐缓冲液(pH6.2) 取2.1％枸橼酸水溶液，用50％氢氧化钠溶液调节pH值至6.2，即得。
13.枸橼酸－磷酸氢二钠缓冲液(pH4.0)甲液：取枸橼酸21g或无水枸橼酸19.2g,加水使溶解成1000ml，置冰箱内保存。
乙液：取磷酸氢二钠71.63g，加水使溶解成1000ml。
取上述甲液61.45ml与乙液38.55ml混合，摇匀，即得。
14.氨－氯化铵缓冲液(pH8.0)取氯化铵1.07g，加水使溶解成100ml，再加稀氨溶液(1→30)调节pH值至8.0，即得。
15.氨－氯化铵缓冲液(pH10.0)取氯化铵5.4g，加水20ml溶解后，加浓氯溶液35ml，再加水稀释至100ml，即得。
16.硼砂－氯化钙缓冲液(pH8.0)取硼砂0.572g与氯化钙2.94g，加水约800ml溶解后,用1mol/L 盐酸溶液约2.5ml调节pH值至8.0，加水稀释至1000ml，即得。
17.硼砂－碳酸钠缓冲液(pH10.8～11.2)取无水碳酸钠5.30g,加水使溶解成1000ml；另取硼砂1.91g，加水使溶解成100ml。
临用前取碳酸钠溶液973ml 与硼砂溶液27ml，混匀，即得。
18.硼酸－氯化钾缓冲液(pH9.0)取硼酸3.09g,加0.1mol/L氯化钾溶液500ml使溶解，再加0.1mol/L氢氧化钠溶液210ml，即得。
19.醋酸盐缓冲液(pH3.5)取醋酸铵25g，加水25ml溶解后，加7mol/L盐酸溶液38ml，用2mol/L盐酸溶液或5mol/L氨溶液准确调节pH值至3.5(电位法指示),用水稀释至100ml,即得。
20.醋酸－锂盐缓冲液(pH3.0)取冰醋酸50ml，加水800ml混合后，用氢氧化锂调节pH值至3.0，再加水稀释至1000ml，即得。
21.醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3.6)取醋酸钠5.1g,加冰醋酸20ml，再加水稀释至250ml,即得。
22.醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3.7)取无水醋酸钠20g,加水300ml溶解后，加溴酚蓝指示液1ml及冰醋酸60～80ml，至溶液从蓝色转变为纯绿色，再加水稀释至1000ml，即得。
23.醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3.8)取2mol/L醋酸钠溶液13ml与2mol/L醋酸溶液87ml,加每1ml 含铜1mg的硫酸铜溶液0.5ml,再加水稀释至1000ml，即得。
24.醋酸－醋酸钠缓冲液(pH4.5)取醋酸钠18g,加冰醋酸9.8ml,再加水稀释至1000ml,即得。
25.醋酸－醋酸钠缓冲液(pH4.6)取醋酸钠5.4g,加水50ml使溶解，用冰醋酸调节pH值至4.6，再加水稀释至100ml，即得。
26.醋酸－醋酸钠缓冲液(pH6.0)取醋酸钠54.6g，加1mol/L醋酸溶液20ml溶解后，加水稀释至500ml，即得。
27.醋酸－醋酸钾缓冲液(pH4.3)取醋酸钾14g，加冰醋酸20.5ml，再加水稀释至1000ml，即得。
28.醋酸－醋酸铵缓冲液(pH4.5)取醋酸铵7.7g，加水50ml溶解后，加冰醋酸6ml与适量的水使成100ml，即得。
29.醋酸－醋酸铵缓冲液(pH6.0)取醋酸铵100g，加水300ml使溶解，加冰醋酸7ml,摇匀，即得。
30.磷酸－三乙胺缓冲液取磷酸约4ml与三乙胺约7ml，加50％甲醇稀释至1000ml，用磷酸调节pH值至3.2，即得。
31.磷酸盐缓冲液取磷酸二氢钠38.0g，与磷酸氢二钠5.04g,加水使成1000ml,即得。
32.磷酸盐缓冲液(pH2.0)甲液:取磷酸16.6ml，加水至1000ml，摇匀。
乙液：取磷酸氢二钠71.63g，加水使溶解成1000ml。
取上述甲液72.5ml与乙液27.5ml混合，摇匀，即得。
33.磷酸盐缓冲液(pH2.5)取磷酸二氢钾100g，加水800ml，用盐酸调节pH至2.5,用水稀释至1000ml。
34.磷酸盐缓冲液(pH5.0)取0.2mol/L磷酸二氢钠溶液一定量,用氢氧化钠试液调节pH值至5.0，即得。
35.磷酸盐缓冲液(pH5.8)取磷酸二氢钾8.34g与磷酸氢二钾0.87g,加水使溶解成1000ml，即得。
36.磷酸盐缓冲液(pH6.5)取磷酸二氢钾0.68g,加0.1mol/L氢氧化钠溶液15.2ml，用水稀释至100ml，即得。
37.磷酸盐缓冲液(pH6.6)取磷酸二氢钠1.74g、磷酸氢二钠2.7g与氯化钠1.7g，加水使溶解成400ml，即得。
38.磷酸盐缓冲液(含胰酶)(pH6.8)取磷酸二氢钾6.8g,加水500ml使溶解,用0.1mol/L氢氧化钠溶液调节pH值至6.8；另取胰酶10g，加水适量使溶解，将两液混合后,加水稀释至1000ml，即得。
39.磷酸盐缓冲液(pH6.8)取0.2mol/L磷酸二氢钾溶液250ml，加0.2mol/L氢氧化钠溶液118ml，用水稀释至1000ml，摇匀，即得。
40.磷酸盐缓冲液(pH7.0)取磷酸二氢钾0.68g，加0.1mol/L氢氧化钠溶液29.1ml，用水稀释至100ml，即得。
41.磷酸盐缓冲液(pH7.2)取0.2mol/L磷酸二氢钾溶液50ml与0.2mol/L氢氧化钠溶液35ml，加新沸过的冷水稀释至200ml，摇匀，即得。
42.磷酸盐缓冲液(pH7.3)取磷酸氢二钠1.9734g与磷酸二氢钾0.2245g,加水使溶解成1000ml，调节pH值至7.3，即得。
43.磷酸盐缓冲液(pH7.4)取磷酸二氢钾1.36g，加0.1mol/L氢氧化钠溶液79ml，用水稀释至200ml，即得。
44.磷酸盐缓冲液(pH7.6)取磷酸二氢钾27.22g，加水使溶解成1000ml，取50ml，加0.2mol/L氢氧化钠溶液42.4ml，再加水稀释至200ml，即得。
45.磷酸盐缓冲液(pH7.8)甲液：取磷酸氢二钠35.9g，加水溶解，并稀释至500ml。
乙液：取磷酸二氢钠2.76g，加水溶解，并稀释至100ml。
取上述甲液91.5ml与乙液8.5ml混合，摇匀，即得。
46.磷酸盐缓冲液(pH7.8～8.0)取磷酸氢二钾5.59g与磷酸二氢钾0.41g，加水使溶解成1000ml，即得。
常用贮液与溶液1mol/L亚精胺（Spermidine）: 溶解2.55g亚精胺于足量的水中，使终体积为10ml。
分装成小份贮存于-20℃。
1mol/L精胺（Spermine）：溶解3.48g精胺于足量的水中，使终体积为10ml。
分装成小份贮存于-20℃。
10mol/L乙酸胺（ammonium acetate）：将77.1g乙酸胺溶解于水中，加水定容至1L后，用0.22um孔径的滤膜过滤除菌。
10mg/ml牛血清蛋白(BSA）：加100mg的牛血清蛋白（组分V 或分子生物学试剂级，无DNA酶）于9.5ml水中（为减少变性，须将蛋白加入水中，而不是将水加入蛋白），盖好盖后，轻轻摇动，直至牛血清蛋白完全溶解为止。
不要涡旋混合。
加水定容到10ml，然后分装成小份贮存于-20℃。
1mol/L二硫苏糖醇（DTT）：在二硫苏糖醇5g的原装瓶中加32.4ml水，分成小份贮存于-20℃。
或转移100mg的二硫苏糖醇至微量离心管，加0.65ml的水配制成1mol/L二硫苏糖醇溶液。
8mol/L乙酸钾（potassium acetate）：溶解78.5g乙酸钾于足量的水中，加水定容到100ml。
1mol/L氯化钾（KCl）：溶解7.46g 氯化钾于足量的水中，加水定容到100ml。
3mol/L乙酸钠（sodium acetate）：溶解40.8g的三水乙酸钠于约90ml水中，用冰乙酸调溶液的pH至5.2，再加水定容到100ml。
0.5mol/L EDTA:配制等摩尔的Na2EDTA和NaOH溶液（0.5mol/L），混合后形成EDTA的三钠盐。
或称取186.1g的Na2EDTA·2H2O和20g的NaOH，并溶于水中，定容至1L。
1mol/L HEPES：将23.8gHEPES溶于约90ml的水中，用NaOH调pH（6.8-8.2），然后用水定容至100ml。
1mol/L HCl：加8.6ml的浓盐酸至91.4ml的水中。
25mg/ml IPGT：溶解250mg的IPGT（异丙基硫代-β-D-半乳糖苷）于10ml水中，分成小份贮存于-20℃。
1mol/LMgCl2:溶解20.3g MgCl2·6H2O于足量的水中，定容到100ml。
100mmol/L PMSF：溶解174mg的PMSF（苯甲基磺酰氟）于足量的异丙醇中，定容到10ml。