硝酸纤维素膜使用方法及作用
NC膜,PVDF膜和尼龙膜的区别
NC膜、PVDF膜、尼龙膜的应用及差别硝酸纤维素膜(nitrocellulose filter membrane,简称NC膜),NC膜在Northern Blot、Southern Blot、Western Blot中都需要用到,杂交技术有固相杂交和液相杂交之分。
固相杂交技术目前较为常用,先将待测核酸结合到一定的固相支持物上,再与液相中的标记探针进行杂交。
固相支持物常用硝酸纤维素膜。
PVDF膜即聚偏二氟乙烯膜(polyvinylidene fluoride)是蛋白质印迹法中常用的一种固相支持物。
PVDF膜是疏水性的,膜孔径有大有小,随着膜孔径的不断减小,膜对低分子量的蛋白结合就越牢固。
大于20000的蛋白选用0.45um的膜,小于20000的蛋白选用0.2um 的膜。
PVDF膜使用是需预处理,用甲醇处理的目的是活化膜上的正电基团,使其更容易与带负电的蛋白结合。
PVDF膜具有较高的机械强度,是印迹法中的理想固相支持物材料。
尼龙膜是一种合成的长链聚酰胺薄膜,对核酸和蛋白质具有很强的结合能力,能代替硝酸纤维素薄膜用于分子印迹和杂交实验。
NC膜、PVDF膜、尼龙膜的差别:尼龙膜是较理想的核酸固相支持物,有多种类型;硝酸纤维素膜是目前应用最广的一种固相支持物,价格最便宜;PVDF膜介于二者之间。
1. 就结合能力而言:尼龙膜结合DNA和RNA能力可达480-600μg/cm2,可结合短至10bp的核酸片段;硝酸纤维素膜结合DNA和RNA能力可达80-100μg/cm2,对于200bp 的核酸片段结合能力不强;PVDF膜结合DNA和RNA能力可达125-300μg/cm2。
2. 就温度适应性而言:尼龙膜经烘烤或紫外线照射后,核酸中的部分嘧啶碱基可与膜上的正电荷结合;硝酸纤维素膜依靠疏水性相互作用结合DNA,结合不牢固;PVDF膜结合牢固,耐高温,特别适合于蛋白印迹。
就韧性而言:尼龙膜较强;硝酸纤维素膜较脆,易破碎;PVDF膜较强。
硝化纤维素膜和硝酸纤维素膜
硝化纤维素膜和硝酸纤维素膜硝化纤维素膜和硝酸纤维素膜是两种常见的化学纤维素膜。
尽管它们都是从纤维素提取而来,但它们的制备方法和性质略有不同,因此也有不同的用途和应用场合。
本文将从不同的角度分析这两种膜。
1. 制备方法硝化纤维素膜是通过将纤维素与硝酸和硫酸混合物反应来制备的。
这种方法称为硝化法,它需要使用很强的酸来处理纤维素,以使它硝化并形成硝化纤维素。
硝化纤维素膜制备过程中需要控制硝化程度,以获得所需的性能和厚度。
硝酸纤维素膜是通过将纤维素纤维浸泡在浓度为12%的硝酸中,并通过真空干燥的方法制备的。
在这种方法中,硝酸的浓度和浸泡时间可以控制膜的性能和厚度。
2. 性质硝化纤维素膜的硝化程度可以影响其性质。
通常,硝化程度高的硝化纤维素膜具有较高的透明度、柔韧性和耐冲击性,但其机械强度较低。
硝化程度低的硝化纤维素膜可以提高其机械强度,但透明度和柔韧性较差。
硝酸纤维素膜是一种透明、柔韧、高韧性、高强度和高温度稳定性的材料。
硝酸纤维素膜的透明度和光学特性可通过控制硝化程度、浸泡时间和温度等因素进行调节。
3. 应用硝化纤维素膜具有较好的透明度、光泽和柔韧性,可用于电子产品显示屏幕、光学滤波器和装饰材料等领域。
此外,硝化纤维素膜还可用于烟雾发生器、防火罩和电容器等电子元器件的制造。
硝酸纤维素膜可用于至尊国际娱乐的色彩印刷、光学滤波器、核聚变反应器、防弹材料和医疗用品等领域。
此外,硝酸纤维素膜还可以制成光学器件的支架和微机械系统的构件。
总体来说,硝化纤维素膜和硝酸纤维素膜在制备方法、性质和应用中存在差异。
它们都是一种重要的化学纤维素材料,具有广泛的应用前景。
硝化纤维素薄膜用途有哪些
硝化纤维素薄膜用途有哪些硝化纤维素薄膜是将纤维素纤维经过硝化反应后制得的一种具有高透明度、高强度和高隔热性能的薄膜材料。
它具有很广泛的应用领域,下面我将从生物医学、光学、包装、环保和新能源等方面详细介绍其用途。
在生物医学领域,硝化纤维素薄膜被广泛应用于手术用具和医疗敷料上。
由于硝化纤维素薄膜具有良好的生物相容性和透气性,可以有效地防止细菌感染,同时又能够促进伤口的愈合,因此被广泛应用于创伤治疗和皮肤再生方面。
在光学领域,硝化纤维素薄膜的高透明度和低散射性能使其成为一种重要的光学材料。
它可用于制备各种光学元件,如透明膜、透镜、滤光片等。
此外,硝化纤维素薄膜还可以用于制备触摸屏薄膜和柔性显示屏等光电子器件,显著提高了显示器的可靠性和稳定性。
在包装领域,由于硝化纤维素薄膜具有优异的机械性能和防潮性能,以及透明度高、轻薄柔韧等特点,因此它被广泛应用于各种包装材料中。
硝化纤维素薄膜可以用于食品、药品、化妆品等各种包装领域,有效地延长产品的保鲜期,并且能够提高包装材料的安全性和可靠性。
在环保领域,硝化纤维素薄膜被用于制备高效过滤膜。
硝化纤维素薄膜具有优异的孔隙结构和高比表面积,能够有效地去除水中的悬浮物和有害物质,同时具有高流量和低能耗的特点。
它可应用于水处理、废水处理、气体净化等环保领域,起到了净化环境、保护生态的重要作用。
在新能源领域,硝化纤维素薄膜的高透明度和耐候性使其成为太阳能电池的重要材料之一。
硝化纤维素薄膜可以用作太阳能电池的封装材料,有效地提高了太阳能电池的光电转换效率和稳定性。
此外,硝化纤维素薄膜还可以用于制备柔性电子器件,如柔性太阳能电池、柔性光电显示器等,推动了新能源领域的发展。
总结来说,硝化纤维素薄膜具有高透明度、高强度和高隔热性能等优良特性,广泛应用于生物医学、光学、包装、环保和新能源等领域。
随着科学技术的不断进步,相信硝化纤维素薄膜在更多领域将会有更广阔的应用前景。
胶体金 硝酸纤维素膜 吸水
胶体金硝酸纤维素膜吸水1. 引言1.1 胶体金介绍胶体金是一种具有广泛应用前景的纳米材料,其具有优异的光学性质和化学活性,使其在生物医学、催化剂、传感器等领域有着重要的应用。
胶体金的制备方法多样,包括溶剂热法、还原法等。
在溶液中,胶体金可以形成稳定的胶体颗粒,具有可调控的形貌和尺寸,因此被广泛用于制备各种功能性材料。
在材料科学领域,胶体金的研究备受关注,并展现出了极大的潜力。
1.2 硝酸纤维素膜介绍硝酸纤维素膜是一种由硝酸纤维素通过溶液浸渍、干燥而成的薄膜状材料。
硝酸纤维素是一种具有优良物理性质和生物相容性的天然高分子材料,具有很高的机械强度和热稳定性。
硝酸纤维素膜常被用于医疗领域,如制备生物支架、药物缓释等方面。
硝酸纤维素膜的制备通常通过湿法工艺,将硝酸纤维素溶解于适当的溶剂中,在基板上形成均匀的薄膜,并通过干燥或者其他方法使其固化。
硝酸纤维素膜的厚度、孔隙结构和表面化学性质可以根据应用需求进行调整和控制。
硝酸纤维素膜具有较大的比表面积和孔隙率,有利于吸附和扩散水分子。
其多孔结构和高度结晶化的形态使得硝酸纤维素膜具有较强的吸水性能,可以广泛应用于水处理、湿敷等领域。
与其他材料相比,硝酸纤维素膜不仅具有优异的吸水性能,还具有生物相容性好、可降解等优点,因此在生物医学、环境保护等领域具有潜在的广阔应用前景。
1.3 研究背景胶体金是一种具有优异光学性能和表面增强拉曼散射活性的纳米材料,广泛应用于传感、光催化和生物医学等领域。
硝酸纤维素膜是由硝酸纤维素纳米颗粒组成的薄膜,具有优异的透气性和可降解性,被广泛应用于药物包裹和食品包装等领域。
通过深入研究胶体金硝酸纤维素膜在吸水方面的性能特点和机制,可以为其在医疗、环境保护和工业生产等领域的实际应用提供理论基础。
对胶体金硝酸纤维素膜的吸水性能进行系统研究具有重要的科学意义和应用前景。
2. 正文2.1 制备胶体金硝酸纤维素膜制备胶体金硝酸纤维素膜是一个复杂而关键的过程。
硝酸纤维素膜(NC膜)与PVDF膜的区别
硝酸纤维素膜(NC膜)与PVDF膜的区别1. 硝酸纤维素膜硝酸纤维素膜是蛋⽩印迹最⼴泛使⽤的转移介质,对蛋⽩有很强的结合能⼒,⽽且适⽤于各种显⾊⽅法,包括同位素,化学发光(Luminol类)、常规显⾊、染⾊和荧光显⾊;背景低,信噪⽐⾼。
NC膜的使⽤也很简便,⽐如不需要甲醛预处理,只要在⽆离⼦⽔⾯浸润排出膜内⽓泡,再在电泳缓冲液中平衡⼏分钟就可以了;⽐如NC膜很容易封闭,也不需要特别严谨的清洗条件。
转移到NC膜上的蛋⽩在合适的条件下可以稳定保存很长时间,不过要注意的是纯的硝纤膜在⽐较脆,⼜容易卷,操作要⼩⼼,不适合⽤于需要多次重复清洗的⽤途--因为经不起多次“折磨”。
选择硝纤膜时要注意的是选择合适的孔径,通常20KD 以上的⼤分⼦蛋⽩⽤0.45um孔径的膜,⼩于20KD的话建议选择0.2um的,如果⼩于7KD的话最好选择0.1um的膜。
另外还要注意选择纯的NC膜--混有含醋酸纤维(CM)的NC膜结合⼒会有所降低。
另外提醒⼀句:由于NC膜上结合的蛋⽩会因为⼀些去污剂⽽被代替,因此在封闭时最好使⽤较温和的Tween20,⽽且浓度不要超过0.3%(据说0.05%效果最好)。
⼀般⽽⾔,NC膜越纯,其蛋⽩结合能⼒就越⾼,所以要增加WB的灵敏度和分辨率,提⾼所使⽤膜的纯度是个可以考虑的选择。
如果NC膜搀杂⼀些醋化纤维素--这在前⾯已经提到,会影响蛋⽩质结合。
Protran由于是纯NC膜,⽐较脆,机械耐受⼒⽋佳,需要⼩⼼操作,如果担⼼⾃⼰“粗⼿粗脚”,那么就可以考虑⼀下Optitran或者Pall公司的以耐受⼒著称的BioTrace NT Nitrocellulose Transfer Membrane。
卷膜肯定是最实惠的选择,只不过要⾃⼰动⼿裁剪--切记,必须带⼿套操作。
2. PVDF膜与硝酸纤维素膜相⽐,PVDF膜在蛋⽩质截留能⼒,机械强度和化学相容性上都更优越的性能。
市售硝酸纤维素膜的典型结合量是80-100µg/cm2,⽽PVDF膜结合量是100-200µg/cm2(⽽结合强度PVDF⽐硝纤膜强6倍!)。
硝酸纤维素膜生产工艺
硝酸纤维素膜生产工艺
硝酸纤维素膜是一种常用的防水材料,其生产工艺主要包括以下几个步骤:
1. 原料准备:将纤维素原料(通常为棉花、麻类纤维等)剥离成纤维状。
2. 硝化反应:将纤维素纤维与硝酸及硫酸等混合物进行反应,使纤维素发生硝化反应,生成硝酸纤维素。
3. 过滤与洗涤:将硝化后的溶液进行过滤去除杂质,然后用大量的水对硝酸纤维素进行洗涤,去除硫酸等残留物。
4. 压榨与干燥:将洗涤后的硝酸纤维素通过压榨机榨干,去除多余的水分,然后进行干燥,使硝酸纤维素膜变得干燥。
5. 涂层处理:将硝酸纤维素膜放入溶液中,进行浸涂处理,使膜表面形成一层均匀的涂层,以增加膜的抗水性和耐久性。
6. 切割与包装:将经过涂层处理的硝酸纤维素膜切割成所需的尺寸,然后进行包装,以便于运输和使用。
需要注意的是,硝酸纤维素膜的生产过程需要控制反应条件、洗涤和干燥过程的温度、湿度等参数,以保证膜的质量和性能。
此外,生产过程中需要注意安全措施,防止硝酸纤维素的爆炸和火灾等危险。
斑点印迹原理、操作步骤及应用
斑点印迹原理、操作步骤及应用一、原理斑点印迹(dot blot)是一种定性检测核酸或蛋白质的技术,其基本原理是硝酸纤维素膜和醋酸纤维素膜具有很强的静电吸附力,在中性条件下即可有效地吸附蛋白质等生物大分子,因而将抗原吸附于纤维素膜后,就可利用纤维素膜作为固相载体进行抗原-抗体反应。
当加入抗体后即可与膜上的抗原结合,然后再加入带有标记物的抗体,使标记通过抗抗体和相应抗体的结合间接地交联于纤维素膜上。
加入标记物相应的底物后,标记物即可与底物作用形成不溶性产物,呈现斑点状着色,从而判定结果。
二、材料免疫斑点印迹所需的材料包括硝酸纤维素膜(或尼龙膜、NC膜),PBS缓冲液,抗原、抗体、标记二抗、相应底物,洗涤液、封闭液,37℃湿盒和温箱。
三、操作步骤免疫斑点印迹根据所用的二抗标记物不同,又可分为:①辣根过氧化物酶免疫斑点试验;②碱性磷酸酶免疫斑点试验;③金银染色免疫斑点试验(使用胶体金作为抗抗体的标记物)等。
其中最常用的是以辣根过氧化物酶标记系统为基础的免疫斑点试验。
具体操作步骤如下:1.抗原包被将0.01mol/L PBS pH 7.4稀释的已知抗原液2μl点于硝酸纤维素膜(或醋酸纤维素膜)上,置37℃温箱中干燥20~30分钟。
2.封闭滴加封闭液37℃温盒中封闭10分钟,用洗涤液洗1~2次,滤纸吸干。
3.抗原抗体结合加用稀释液稀释的抗体或待检标本,置37℃湿盒中30分钟。
4.洗涤用洗涤液震洗3次×3分钟、吸干。
5.加酶标二抗加入经过辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶或胶体金标记的抗抗体,孵育、震洗、吸干。
6.显色加相应标记抗抗体的底物溶液显色5~10分钟,终止反应,观察结果。
四、注意事项免疫斑点印迹要求包被的抗原处于最适浓度,多以蛋白质含量500~1000μg/ml为宜。
浓度过高可出现假阳性,过低则降低试验的敏感性。
注意酶结合物的浓度,最适浓度常与包被抗原浓度有关,应根据试验具体条件作方阵滴定来确定。
玻璃纤维膜 nc膜 原理
玻璃纤维膜 nc膜原理
玻璃纤维膜和NC膜(硝酸纤维素膜)的原理如下:
1. 玻璃纤维膜的原理:
玻璃纤维膜是一种由连续玻璃纤维组成的非织造布,其原理基于玻璃纤维的优异性能和结构特点。
玻璃纤维具有高强度、高模量、耐高温、耐腐蚀等特性,因此玻璃纤维膜具有优良的抗拉强度、抗撕裂性、耐磨损性和化学稳定性。
此外,玻璃纤维膜还具有良好的透气性和过滤性能,能够有效地过滤和分离气体、液体中的固体颗粒和杂质。
玻璃纤维膜的应用范围广泛,包括工业过滤、环保治理、医疗卫生、食品加工等领域。
在过滤和分离过程中,玻璃纤维膜通过其独特的纤维结构和表面性质,实现对固体颗粒和杂质的拦截和吸附,从而达到过滤和净化的目的。
2. NC膜(硝酸纤维素膜)的原理:
NC膜是一种由硝酸纤维素制成的薄膜材料,其原理基于硝酸纤维素的溶解和再生过程。
硝酸纤维素是一种高分子化合物,具有良好的溶解性和成膜性。
在制造过程中,硝酸纤维素溶解在适当的溶剂中,形成均匀的溶液。
然后,通过流延、刮涂或喷涂等方法,将溶液涂布在基材上,经过干燥和固化后形成薄膜。
NC膜具有优良的机械性能、化学稳定性和生物相容性,因此广泛应用于生物分离、免疫检测、药物筛选等领域。
在生物分离和免疫检测中,NC膜作为固相支持体,能够固定和吸附生物分子(如蛋白质、核酸等),从而实现生物分子的分离、纯化和检测。
总之,玻璃纤维膜和NC膜的原理分别基于玻璃纤维的优异性能和硝酸纤维素的溶解再生过程。
这两种膜材料具有不同的特点和应用领域,但都能够在过滤、分离和检测等方面发挥重要作用。
硝酸纤维素膜对蛋白的吸附作用
硝酸纤维素膜对蛋白的吸附作用在免疫层析检测中,蛋白质固着于NC膜作为待测样本的捕获试剂。
由于检测结果完全取决于捕获试剂在膜上达到良好的吸附效果,因此蛋白质在膜上均一、良好的吸附对检测结果非常重要。
NC膜上结合的蛋白量不足或者蛋白结合力不够强时,就会出现相当多的问题,在检测结果的检测线上非常明显。
如果膜上结合的蛋白量太低,那么在结果中检测线显色较弱而且检测灵敏度降低。
如果蛋白不能牢固的吸附于NC膜,那么在蛋白吸附于NC膜以前发生扩散,从而导致检测线较宽、显色较弱而不是鲜艳而清晰,使检测结果难以解释。
在极端条件下,如果蛋白与NC膜的物理吸附作用太弱,流过的蛋白检测物和表面活性剂溶液可能将固着的蛋白从NC膜上洗掉,从而显示较宽或者根本不清晰的检测线,难以解释检测结果。
为了了解如何解决上述问题,首先应该牢固的掌握影响蛋白与NC膜结合的各种因素,包括材料的固有属性及其检测前的处理过程。
自从NC膜第一次应用于蛋白质吸附以来,已有相当多的关于蛋白质吸附于NC膜的研究,但蛋白质吸附于NC膜的确切作用机理仍然不能确定。
虽然多种作用力在结合中起到作用,尤其比如疏水力、氢键、静电作用,但是每种作用力的重要性和明确的效果仍然让人难以琢磨。
目前有两种比较合理的作用模式。
第一种模式认为,蛋白质最初通过静电作用被吸附到NC膜表面,而长期的结合作用是通过氢键和疏水作用完成的。
虽然这一原理难以证明,但与已发表的文献实验结论一致,也是最为接受的作用机理。
第二种模式认为,蛋白质首先通过疏水相互作用结合到NC膜上,通过静电力牢固地与NC膜结合则。
该结合模式同大量已发表的文献结果一致,然而静电作用机理对于采用干燥或乙醇吸附方法到达的蛋白质长期稳定的吸附于NC膜上无法提供合理的解释。
当研究蛋白质捕获剂结合于NC膜时,应该考虑下面五个影响蛋白质结合作用机理的每一个关键因素。
1.溶解捕获蛋白的工作缓冲液;2.用来固着捕获蛋白的NC膜;3.捕获蛋白自身;4.将捕获蛋白点样于NC膜的系统;5.捕获蛋白点样时的环境湿度。
纸条结构
1.样品垫(Sample pad)的作用主要为:-减缓样品渗透速度,有利于样品在结合垫上均匀分布;-去除样品中杂质颗粒;-调节样品液pH值或粘度等。
2.结合垫(Conjugate pad)的作用主要为:-吸附一定量的金标结合物颗粒;-吸附并持续不断的将样品转移到NC膜上;-保持金标结合物颗粒的稳定性;-保证金标结合物颗粒定量完全释放等。
3.硝酸纤维素膜( Nitrocellulose)的作用:-在检测线和对照线条带区域固定抗体;-样品在NC膜上流动并与试剂混合发生免疫反应;-反应在NC膜上显色,读检测结果。
NC膜的重要参数:孔径、对称性、层析速度、表面活性剂、蛋白结合力、强度、表面质量、厚度、批间均一性等。
图2. 胶体金免疫层析内部组件规范性名称蛋白在膜上固定化的机理还不确定,但大家都认可疏水作用力、H键和静电作用力等对固定化有贡献。
试验也表明,任何影响以上三种作用力的因素,都会影响蛋白的固定化。
除了蛋白试剂和膜本身之外,溶解试剂的缓冲液、环境温度和湿度及用于蛋白固定在膜上的仪器设备都是蛋白固定化的影响因素。
其中缓冲液的作用尤为突出,也是只要优化对象,缓冲液中的离子强度、PH值和其他试剂(比如稳定剂BSA)都会对蛋白的固定起明显的作用。
研究人员在固定过程中对各种因素都应该了解,这样在优化过程中能考虑各种因素进行整体优化,而不能只是在某一两个方面集中优化而忽略其他因素的作用。
图3. 抗体在硝酸纤维素膜上的固定所经常遇到的问题由于NC膜本身是疏水的,因此在蛋白结合后要对膜进行封闭处理,使膜表面变得更具亲水性。
很多产品都是用NC膜浸泡在封闭溶液中进行封闭;也有一部分将封闭溶液喷洒在样品垫或金标垫上,当加样时封闭会随溶液向上层析而自动进行。
4.吸收垫(Absorbent Pad)的作用主要表现在控制样品的流速,促进虹吸作用以及使试剂跨过膜而不仅仅移到膜上。
胶体金 硝酸纤维素膜 吸水
胶体金硝酸纤维素膜吸水全文共四篇示例,供读者参考第一篇示例:胶体金,又称纳米金,是一种特殊形态的金纳米颗粒,具有独特的光学性质和生物学特性。
胶体金颗粒具有调节表面等离子体共振频率的能力,它们能够在可见光范围内表现出特定的吸收和散射特性。
胶体金广泛应用于光学传感器、光热治疗、纳米载药等领域。
硝酸纤维素膜是一种由纤维素分子交联形成的薄膜材料,具有优异的生物相容性和生物相似性。
硝酸纤维素膜具有良好的吸水性能,可以吸收大量水分,并在一定程度上减缓水分的蒸发,对于生物医学领域的应用有着广泛的潜力。
将胶体金与硝酸纤维素膜结合在一起,可以实现胶体金纳米颗粒在硝酸纤维素膜上的定向组装和稳定固定,从而拓展了胶体金的应用场景。
一方面,通过胶体金的表面增强拉曼散射效应,可以实现对溶液中微量分子的高灵敏检测;硝酸纤维素膜的吸水性能可以实现对湿度的高灵敏检测,结合两者的优势,可以构建一种高灵敏的吸水传感器。
在制备胶体金硝酸纤维素膜吸水传感器时,首先需要制备胶体金溶液和硝酸纤维素膜。
胶体金溶液的制备可以采用溶剂还原法、光辐射法等不同方法。
硝酸纤维素膜的制备则可以通过溶液旋涂、溶胶-凝胶法等不同工艺。
将胶体金溶液滴于硝酸纤维素膜上,经干燥和固化后,即可得到胶体金硝酸纤维素膜传感器。
胶体金硝酸纤维素膜吸水传感器具有如下特点:传感器具有较大的吸水性能,可以吸收周围环境中的水分,从而实现对湿度的高灵敏检测。
胶体金的高灵敏检测能力使传感器对水分中微量分子的检测更加精准。
硝酸纤维素膜的生物相容性使传感器具有生物医学领域的潜在应用前景。
通过不断优化胶体金硝酸纤维素膜吸水传感器的制备工艺和结构设计,可以进一步提高传感器的检测灵敏度和稳定性。
将其应用于环境监测、医疗诊断、食品安全等领域,将为人类生活带来更多便利和保障。
在未来的研究中,我们将继续探索胶体金硝酸纤维素膜吸水传感器的潜在应用领域,为传感技术的发展做出更多贡献。
【字数:640】第二篇示例:在近年来的研究中,研究者们将胶体金和硝酸纤维素膜结合起来,发现这种复合材料不仅具有胶体金的高表面活性和硝酸纤维素膜的优异性能,更具备了新的功能,如吸水性能。
硝酸纤维素膜电泳法
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15-671微米孔径硝酸纤维素膜
15-671微米孔径硝酸纤维素膜硝酸纤维素膜是一种常见的纳米材料,具有广泛的应用领域。
其中,以15-671微米孔径的硝酸纤维素膜尤为值得关注。
本文将从其结构特点、制备方法、应用前景等方面进行探讨,旨在为读者提供全面的了解。
一、结构特点15-671微米孔径硝酸纤维素膜的主要特点之一是其孔径大小。
孔径大小决定了膜的通透性和选择性,影响着其在不同领域的应用。
与其他孔径纤维素膜相比,15-671微米孔径硝酸纤维素膜具有更高的孔隙度和较大的孔径,因此在液体过滤、气体分离等领域具有独特的优势。
二、制备方法制备15-671微米孔径硝酸纤维素膜的方法有多种,常见的方法包括溶液浸渍法、相转移法和电纺法等。
其中,溶液浸渍法是一种常见且简单的方法。
它通过将硝酸纤维素溶液浸渍在合适的模板上,再经过干燥和热处理等步骤,最终得到孔径均匀的硝酸纤维素膜。
三、应用前景15-671微米孔径硝酸纤维素膜在多个领域具有广阔的应用前景。
以下是几个典型的应用领域:1. 液体过滤:由于15-671微米孔径硝酸纤维素膜具有较大的孔径和高的孔隙度,因此在液体过滤领域具有良好的过滤效果。
它可以用于饮用水净化、工业废水处理等方面,有效地去除悬浮固体和微生物等杂质。
2. 气体分离:15-671微米孔径硝酸纤维素膜对不同气体具有不同的分离效果。
通过调节孔径大小和膜的厚度等参数,可以实现对特定气体的高效分离。
这在石油化工、环保等行业具有重要的应用价值。
3. 药物传递:硝酸纤维素膜具有优异的生物相容性和可降解性,因此在药物传递系统中有广泛的应用。
15-671微米孔径硝酸纤维素膜可以用于药物缓释、组织工程等方面,提供精确的释放控制和良好的生物相容性。
4. 电池隔膜:随着新能源技术的发展,15-671微米孔径硝酸纤维素膜在锂离子电池等领域的应用也日益重要。
作为电池隔膜材料,它具有优异的电化学稳定性和较高的离子传输速率,有助于提高电池的性能和安全性。
15-671微米孔径硝酸纤维素膜具有独特的结构特点和广泛的应用前景。
硝酸纤维素膜
硝酸纤维素膜推荐用于大多数日常应用,是在严格控制室内清洁的条件下生产的。
一般情况下,无须要求任何明显的技术改变,就可以直接替换掉其他生产厂商的用于一般过滤目的的滤膜。
使用者会从Whatman现有的滤膜的改进中获得益处。
更高的强度和韧性大多数膜本质上都很脆而且不容易操作;但是很少在装载到过滤器或在使用过程中损坏掉。
Whatman硝酸纤维素膜韧性很明显加强了,能承受住在不破坏膜完整性的条件下操作、装载和消毒时的撕裂。
经破裂测试已是最强的膜。
低可提取水平滤膜中可提取物水平和过滤或吸附技术的改进一样变的越来越重要。
尤其是在药学、免役学、生物学组织培养和衡量分析应用方面,高的提取物水平会起到负面影响。
Whatman硝酸纤维素膜的提取物水平一般比其它同种型号的膜低。
孔径精确Whatman滤膜一个主要特征是孔径精确度很高。
膜的孔径率经先进的生产和控制系统严格控制。
另外,批间差的变化最小,保持一致的实验结果。
增加的温度稳定性滤膜可以在不失完整性的情况下在121℃下进行正常消毒。
硝酸纤维素膜有圆片、方片和卷状等规格。
收缩量减少过多的收缩在消毒过程中会产生问题,也经常会在消毒后在滤器中发生膜的撕裂,也可能导致流速的降低和整个过滤量的减少。
Whatman滤膜在消毒过程中收缩量低。
特征和优点·孔径分布精确能改进表面俘获和分析。
·提取物水平低,保证样品的完整性。
应用·样品分离·微生物研究·水溶液过滤硝酸纤维素膜类型白色光滑滤膜这是大多数实验室应用的标准滤膜,用于1.0µm-5.0µm大小的颗粒和细胞。
过滤后的残留物大多数保留在膜的表面,可以进行沉淀物物理性回收和显微镜观察。
用于核酸和蛋白分析的硝酸纤维素膜1975年,E.M.Southern发明了从琼脂凝胶转移DNA到一张硝酸纤维素膜的技术。
这个技术以它的发明者命名为Southern Blotting.随后,蛋白和RNA转移的技术也发展起来了。
制作胶体金试纸的硝酸纤维素膜选择及应用技巧
制作胶体金试纸的硝酸纤维素膜选择及应用技巧硝酸纤维素膜又称为NC膜, 在胶体金试纸中用做C/T线的承载体,同时也是免疫反应的发生处.所以NC膜成为该试验中最重要的耗材,而由于其属于非标准器件,基本上每个项目开始阶段都会遇到如何选择合适的NC膜的问题.同时也存在是否要对NC膜进行后期处理及如何处理的讨论.一. NC膜的生产原理这个虽然看上去属于生产厂商的事情,但是GMP有个观点是强调对过程的控制才会有好的结果.那么只有了解NC膜的大致生产过程和基本原理才能更好的掌握这种材料的特性,最终制作出满意的试纸.你了解吗?我找了很久,终于找到一些比较直观的图片,大家可以到伊能公司的官方网站看到http://www.e /. 生产NC膜的过程和普通的造纸过程是非常类似的,我们可以借鉴对造纸的认识来理解.首先,匀浆配比购买回的原料硝酸纤维素粒子是一种非常普遍的有机化学物,溶解形成混浆,在该浆体内,会加入一定比例的试剂来调整最后形成的膜的性质,一般是一个试剂配方,主要包含表面活性剂/高分子聚合物/盐离子/成型剂等溶解在一个缓冲体系内. 不同的厂家加入的溶液配方不一样,直接导致了在产品的差异.其次,滚筒铺膜配好的匀浆通过滚筒,形成了一张薄膜,平摊在十分光滑的平面载体上.这个和造纸的过程是非常相似的.最后,成型在匀浆内的成型剂开始挥发,膜逐步干燥成型.同时在这个过程中由于温度比较高,有些厂家在这个过程采取了在密闭腔体内成型,同时补充配方溶液的形式,来避免一些有效成分的蒸发.切割出产品通过以上步骤生产出来的膜是呈一个宽度极大的产品,宽度的大小直接和滚筒的大小相关,滚筒越大生产越方便,但设备的成本也越高.宽膜要经过切割才能成为我们购买到的25mm或18mm(或20mm)宽,而长度上,成品卷膜和宽膜的长度是相同的.理论上可以让厂家切成你需要的任意宽度,但这样会造成原料的浪费和人力成本的增加,后来厂商在和试纸生产厂家的协调过程中,综合用料成本和生产便利性基本确定了上面说的宽度,以次为标准.关于不同宽度的用途差异,稍后详述.从生产的过程,我们可以得知, NC膜本身是已经添加了表面活性剂来改善亲水能力,而且已经存在有一定的缓冲系统(虽然对纸条测试影响不会很大).对后面谈到的一些问题就比较容易理解.二.NC膜的供应商及现状现在有销售的NC膜品牌型号如下:MILLIPORE(美国), M135(有背衬/无背衬两种) M180(有背衬/无背衬两种)WHATMAN and S&S, Immunopore RP, 100 sec/4cm, 带被衬, CT线不会扩散, 很集中, 背景干净. 适用于各种test. (只有25mm x 50M); PuraBind R, 140sec/4cm, 不带被衬, 适用于小分子竞争test等. (20/25mm x 50M)SARTORIUS(德国), CN140伊能(国产), 8um 6umMDI(印度), 8um 6um说到这些供应商,不得不谈谈发展的历史. S&S是膜行业的鼻祖,这点所有的膜公司都承认.mill ipore,SARTORIUS和whatman都是后辈, 我的理解是S&S在市场竞争的过程中经营方式落后,最后被whatman收购. 就产品质量来说S&S的AE99和AE98是非常优良的.而MDI是近年才出现的一个膜公司,可能也是与印度胶体金试纸生产行业的快速发展密切相关,其所有的产品都是在印度生产,经营者为父子两人,父亲负责技术,儿子进行经营.03年我曾测试过其样品,结果发现在跑板方面有不均匀波浪现象,且加速稳定性试验结果很不理想.今年初我又收到了一些样品,情况仍然没有太大改善,后来就不再考虑使用了.国产膜伊能是在去年开始进入市场的,主要特点是能降低成本,样品我也试测了几批,性能已经与进口膜很接近,经过一些有针对性的优化后可以用在HCG产品的生产.但不是所有的工厂都能购轻易的完成这个优化工作.膜的国产化是一个趋势,但进口厂家要实现国产化还面临很大的问题,其中厂房设备的搬迁就是一个非常大的问题.几家供应商的国内联络人和技术支持分别是MILLIPORE(美国), Mrs Yang, harryWHATMAN and S&S, Clark, kevinSARTORIUS(德国), Mr Xu, Iric伊能(国产), connie, Mr YangMDI(印度), Ashawant Gupta销售模式都是直销式,少量购买的情况下要通过代理商走一下帐.价格上MILLIPORE与WHATMAN 相当,SARTORIUS便宜一些,国产膜更便宜一些.印度膜和SARTORIUS价格相同,基本不用考虑. 在科研市场,MILLIPORE使用最多.科研市场由于仅用来试验,所以膜需求量小,不被供应商重视. 生产客户中,MILLIPORE,WHATMAN,SARTORIUS占有量相当,伊能现在也开始有一些工厂客户了,MD I量最小投诉也最多.三.膜的选择以上谈了该行业的一些发展现状,那么我们大致了解后,回到最关心的问题,如何选择膜? 经常会遇到的问题是,我是做**项目的,我该选择那类膜?这里涉及到一个膜的分类标准问题,一个供应商可能提供这个膜是8um,但另一个供应商告诉你膜是135s的.这之间的区别与联系是什么?um指的是膜孔径,而从上面膜的生产过程,我们可以看出,膜的孔径实际上是没有办法界定的.由于干燥成型等过程的非绝对均一,膜的孔径也是非均一的.膜孔径的说法实际上是沿用了一直以来的一个形象称呼.而以秒为单位的定义为,每4cm膜,水的层析时间是***s.该单位已经越来越被各大厂商所接受,成为了一个通用的比较标准.以下我们将采用s单位来进行交流.换算情况大致为: 8um=135s; 6um=180s.不同秒数的膜对反应有什么影响呢?首先,我们分析一下液体在膜上的运动过程. 一张长度为4cm的膜, 每隔1cm做一个标记, 当液体运动过标记处时记录时间点. 那么你将会发现液体在膜上的运动是呈减速前行的. 而两张不同秒数的膜(例如135s, 180s)在同一时间标记点处的运动速度不同.这个试验用清水做不好观察,可以考虑用色素水溶液,非常明显.那么从这个试验可以看出,在通过同一T线喷点位置时, 金溶液通过的速度是快速膜>慢速膜. 那么通过速度越快和包被在T线的物质反应时间也就越短, 读数快, 那么灵敏度也就越低. 反之, 反应时间长, 读数慢, 也就灵敏度高. 同时还有一个问题是, 反应时间越长, 发生非特异性结合的可能性就越大, 所以过长时间的反应不一定就能够真正的提升灵敏度. 所以这里就有一个读数时间/反应灵敏度/非特异性结合的均衡.其实我们并没有那么多选择. 经过使用实践, 各供应商一般都只提供两个型号, 就是135s和18 0s. 虽然看到有些厂家的产品目录上型号种类繁多,但这两个型号的定货量就占了95%以上, 其他型号供货上也就远不如这两个型号来得顺利. 135s一般用在双抗体夹心法, 180s一般用在竞争法. 你所要做的是,先选择其中的一个型号, 然后比较不同供应商同一个型号的差异, 由于前面说的添加配方与你的试验条件配合的不同,这个差异可能大也可能小. 具体要根据试验结果来确定最后的选择.我个人不建议地毯式的测试不同规格/不同厂家的膜, 这样成本高, 成功的几率也小.四.膜的质控方式本节适合用膜量较大的公司用户参考.对于一卷膜可以用上几个月的用户来说, 厂家的质控标准已经完全能满足你的要求,而不需要自己再做相关的质控.膜的质控虽属于原辅料QC职能, 但由于其专业性强, 一般都由小样调试人员来执行. 膜入原料库后需要进行如下检验工作:1. 查收COA在购买时, 供应商会随产品为每个lot的膜提供一张纸质的出厂质量证书, 该证书被称为COA. 如果你已经购买某一批次的膜, 而没有索取相应的证书, 如果有需要可提供批号向厂家要求补发. 其实在很多行业都有厂商为自己的产品附上COA的习惯.COA一般只提供给大客户, 对小客户是没有意义的.其内容主要是厂家在产品出厂时做过一些测试的罗列. 作用可以理解为质量凭证和测试数据参考.2. 检查物理性能膜的物理性能主要是2个参数, 膜厚度和宽度. 长度不需要检测. 使用中可以关注长度上是否有断面重接现象, 断面多费料则多, 少数发生.厚度, 由螺旋测微尺,选择几个测量点检测后算平均. 膜生产的必测参数. 主要表现为厚度不均匀影响生物原料在膜上的扩散性能, 点出来的C/T线宽窄不一. 另外也影响爬速.宽度, 普通直尺测量.物理性能一般都不会有什么大问题. 毕竟检测标准客观, 易把握. 没有条件执行的厂家可省略.3. 跑水性能样本采用含有有色食用色素的水溶液, 目的是容易观测. 需制作一个简易支架.操作: 注入足够溶液到下部槽内, 将不同批次膜每隔1cm做一次标记(总长大于4cm)并放到倾斜支架, 整个支架下端放入溶液槽, 膜开始吸液, 计时. 记录每个标记处的通过时刻, 并与对照组比较.跑板时, 理论上溶液呈水平线形式上吸, 观测是否有波浪倾斜或包围润湿等反常现象.4. 点样测试C/T线出线时间, 其他试验条件相同情况下, 记录和比较C/T线出现时间是否与对照有差异.灵敏度, 比较不同样本浓度情况下, T线的变化是否和对照组同. 一般每批次膜取前端一段用来测试即可. 由于制造过程的不均一性, 不同批号的灵敏度会有一定差异, 当大批量使用时,这种差异影响是非常大的, 那么就要按照灵敏度表现将不同批号的膜进行分类. 在膜的STOCK中要能够轻易的分辨出来. 当进入后期生产调用时, 就能根据这些分类, 按照订单要求取用不同批号的膜, 或者用强灵敏度的原料和差灵敏度的膜来搭配.关于膜的批内差. 批内差是肯定存在的,只是差距大小的问题,依据一般的测试条件是很困难获得详细的数值,因为你不可能对每一卷膜的每一段都做详细的测试. 减小膜批内差的最有效方法是不购入边缘膜带. 前面说过膜的生产方式,生产出的半成品是宽幅很大的一个膜面,要通过截面裁切才能获得25mm或者20mm的宽度.那么就有中间部分,和边缘部分之分.越靠近中间部分,膜的均匀性越好,边缘部分则相对要差,就造成了批内差. 一般可以通过COA获得具体位置信息,例如MILLIPORE就在切割后用字母A,B,C……来表示切出的窄膜在宽幅膜中的位置.如果是试用某个型号的膜小样, 还需要在以上检测后加入膜加速老化试验. 包括膜单独的老化试验和点好膜后产品的老化试验, 具体试验方法请参看我以前写的研发思路一文.五.膜的深入探讨和应用技巧从本节开始,我们开始对膜进行深入讨论和谈一些应用技巧.1. 蛋白与膜的结合原理蛋白与膜的结合原理, 已知的结合力包括疏水作用力\H键\静电作用力等,确切的结合原理并不明确,主要靠假说来支撑.主要有两种假说:1) 首先两者靠静电作用力结合, 然后靠H键和疏水作用来维持长时间结合.2) 首先两者靠疏水作用结合, 然后靠静电作用来维持长时间结合.两条假说, 都表明其结合过程分为两步, 首先结合和后面长时间结合.由于结合原理的不明确性,导致在这方面的工作非常依赖实践经验.2. 膜对结合的影响1)膜孔径有些技术人员倾向使用膜孔径来区分不同的膜,但是请注意这只仅仅限于同一厂家的产品,如果是不同厂家的产品,这种比较是无意义的. 膜孔径与层析速度的关系,已在上文描述.随着膜孔径减小,膜的实际可用表面积递增,膜结合蛋白的量也递增. 估量表面积的参数为表面积比率(实际可用表面积与所用膜平面积的比率).另外, 膜孔径越小,层析速度也越小,那么金标复合物通过T线的时间也就越长,反应也就越充分. 综合以上两点,结论为膜孔径越小灵敏度越高.但是同时也减慢了跑板速度,增加了非特异性结合的机会,也就是假阳性越高.所以要按照试验结果挑选适合实际项目的膜,找到合适的平衡点.2)不同厂家的膜差异这个差异主要来源于两点:1> 生产膜时,使用的聚合物和表面活性剂的来源,类型,数量不同.同理,在膜处理中这两类物质一般会对性能产生较大影响.2> 处理过程不同.3. 生物原料,缓冲溶液的试剂和配方1) 生物原料, 作为CT线的生物原料使用情况各异,所以这里只做略述.首先,单克隆抗体与膜的结合优于多克隆抗体, 主要时由于多克隆抗体有很多不同的表面位点, 而各位点与膜的最佳结合条件都有细微的差别, 毫无疑问就增加了优化难度.其次,分子量越大,蛋白越难结合到固相材料上.2)缓冲液大家最关心的可能就是希望获得一个性能优良的配方,包括缓冲液,封闭液等等处理溶液配方. 其实我也无法提供给你一个万用配方清单. 因为不同的反应体系需要不同的配方来支持, 而不同机构的反应体系又有差异. 想获”鱼”先学”渔”. 为了不误导大家,我在下面涉及到配方的问题上,仅提供思路,具体配方请自己摸索.缓冲液的构成一般是: PBS(或其他缓冲体系)+作用物质(针对某一特定问题)+PH调整. 我在参考过以前的各种资料后,个人意见为配方原则为宜简不宜繁,根据自己的需要添加作用物质,原来的很多需要添加的作用物质,由于膜制造技术的改进已经不再需要.推荐的缓冲体系为0.01M PBS PH7-7.2, 该缓冲体系对多种抗原抗体都有良好的适应性.作用物质的情况大致罗列如下:少量NACL,减少信号强度,消假阳.有机醇(甲醇,异丙醇等),润湿膜,减少膜带有的静电,利于结合包被.个人不推荐,因制膜工艺改进.表面活性剂(TW20,TX100),增加亲水力,可避免线条中空现象,也可增色.糖,保护剂,减缓老化速度,也可以增加亲水力同上.调PH到某个位置,可以消假阳.4. 点样环境环境湿度对点膜过程非常重要.最佳湿度一般在45-65%.湿度过低,膜上容易聚集静电荷,点膜容易出现散点,导致测试会出现疏水斑.湿度过高,膜上毛细作用加强,点膜容易引起CT线变宽甚至扩散.为了保证点样时膜湿度的均一性,一般在点样前把膜放到该湿度条件下平衡一段时间.5. 点样仪器与膜面情况的关系目前有两种点样方式,划膜式和非接触点膜式.非接触点膜式优于划膜式,进口划膜式优于国产划膜式.因划膜式为软管将抗体划到膜表面,而膜本身的物理性质为软脆,划管会在其表面留下印痕.进口的划膜机由于使用的材料和控制系统较好,所以留下的划痕较轻,而国产仪器较差,留下的划痕也就比较严重. 划痕容易对层析的金标复合物形成阻力,导致假阳性. 同时容易出现跑板时在T线位置出现若有若无一条细线(鬼线),而跑板结束后鬼线消失的奇怪现象.6. 膜的宽度与点样位置膜的宽度一般有18mm(or 20mm)和25mm两种, 分别使用在做测试条和做测试板上.然而,不同的T线点样位置将带来不同的灵敏度. 点样位置上移,金标复合物通过T线位置时速度变慢,反应时间增加,灵敏度升高. 反之灵敏度降低. 这个方法可以用来改变灵敏度和消除假阳性.7. 溶液在膜上的扩散溶液在膜上的点样量一般情况下为1ul/cm.溶液在膜上的扩散是趋向两端的,喷点上去的是均匀的抗体溶液,但当干燥时线条边缘的干燥速度高于中间,中间的抗体会不断向两边扩散,所以干燥后抗体是向线条的两端聚集的.一般情况下不影响你的试验.如果你发现线条出现两端红,中间淡的现象,就要考虑这个问题了.可以加如上面说的作用物质来解决.8. 点膜前后的封闭作用从供应商处购买回的膜基本上都是已经优化处理好的,直接点膜就可使用.然而我们还是经常会遇到关于封闭的讨论.其实封闭不象大家认为的那样,一封闭什么问题都解决了. 老问题走了新问题又来了,而且更麻烦,我要说的是慎用封闭.我极其反对点膜前封闭的做法. 原因为厂家在生产膜时候,各种配方是混合加入原浆的.而点膜前封闭时要将膜浸泡在封闭液内,必然扰乱了膜内正常的物质分布.由此引发了许多问题,也降低了工作效率. 也有厂家遇到不封闭就无法包被上膜的问题,其实可以通过其他办法来解决,封闭必然是下测.我经常使用的封闭手法有两种.流动封闭,将作用物质处理在样品垫上.膜上定点封闭,将作用物质配成溶液喷点在膜的特定位置上. 该方法需要使用BIODOT的AIRJET 喷头.可以将不合格的半成品大板重新复活.只要是将封闭做在了膜上,就必然会对产品的稳定性造成影响.具体的影响程度要通过稳定性测试来评判.9. 膜的储存刚生产出的膜一般含有5-10%的水分. 关于膜的老化机理,有个理论支持,不过争议比较大. 理论认为:膜的老化是因为膜上的水分蒸发,使膜变得疏水,带电荷并变脆. 储存膜一般要求是避光,密封.过干或过湿都不利.在这种保存条件下,一般可以放置两年. 但是如果膜上做了封闭处理,就要根据具体试验情况来判断了.有些膜由于生产工艺的问题,使用后灵敏度会在一段时间内发生变化,遇到这种问题,就需要在点膜后放置一段时间,待稳定后方可进入调试生产.后序以上便是我在胶体金层析诊断试验中使用硝酸纤维素膜过程中的一些经验.从起笔到结尾花了大约一个月时间,断断续续,终于完成. 也要感谢所有膜生产厂家技术专家在以前的工作接触中给我做过的大量技术培训,其中很多已经成为了经常联系的朋友.由于膜工业是在不断发展的,可能出现新的问题或新的解决办法. 欢迎进行讨论.(完)。
硝化纤维素的用途
硝化纤维素的用途硝化纤维素(nitrocellulose)是一种纯天然纤维素衍生物,通过将纤维素与硝酸和硫酸等强酸反应得到。
硝化纤维素在工业、军事和日常生活中有着广泛的应用。
以下是关于硝化纤维素的用途的详细说明。
首先,硝化纤维素在火药制造中是一种重要的原料。
硝化纤维素是火药的主要成分之一,它具有高度的可燃性和爆炸性,是制造炸药的必要原料。
硝化纤维素作为固体状或颗粒状的形式被广泛用于制造各种军用和民用炸药,如炮弹、火箭弹、手榴弹、信号弹和烟雾弹等。
硝化纤维素还被用于制造火工品,如鞭炮、焰火和烟花。
其次,硝化纤维素在摄影行业有广泛应用。
硝化纤维素薄膜(或称“胶片”)是拍摄照片的基本材料之一。
在数码相机出现之前,摄影爱好者使用胶片相机进行拍摄。
硝化纤维素胶片具有良好的感光性能和色彩还原能力,可以记录高质量的图像。
虽然现在数字技术已经取代了传统胶片摄影,但硝化纤维素在摄影技术的发展中起到了重要的作用。
此外,硝化纤维素也被广泛应用于涂料、胶粘剂和油墨等领域。
硝化纤维素具有良好的可溶性,可以与各种有机和无机颜料、树脂和溶剂相容。
它可以应用于木材、塑料、玻璃、皮革和金属等各种基材上,形成坚韧、耐候、抗磨损的涂膜。
硝化纤维素胶粘剂具有良好的粘接性能,可用于纸张和纺织品等材料的胶合。
此外,硝化纤维素还可用于制造印刷油墨,具有良好的印刷性能和耐光性。
同时,硝化纤维素也在医疗领域有一些应用。
硝化纤维素被用作可溶性缝合线的原材料,用于手术缝合。
硝化纤维素缝线具有可吸收和良好的生物相容性,避免了手术后取出线的不便。
此外,硝化纤维素还可以制备成含药膏材料,用于治疗皮肤疾病和创伤。
硝化纤维素材料在治疗烧伤、糖尿病溃疡和创面感染等方面有一定的临床疗效。
最后,硝化纤维素还被用于制造各种塑料制品。
硝化纤维素塑料是一种具有很高机械强度、耐磨蚀性和耐化学性的塑料。
它可以加工成各种形状的制品,如手柄、把手、按钮、键盘等。
硝化纤维素塑料还具有良好的绝缘性能,可用于制造绝缘子、电子器件和电气设备的零部件。
硝酸纤维素膜活化方法
硝酸纤维素膜活化方法说实话硝酸纤维素膜活化这事,我一开始也是瞎摸索。
我试过好多方法,走了不少弯路,今天就跟你们唠唠。
我最先想到的就是用化学试剂来活化。
我就拿一个常见的试剂来试,就像咱们做菜放盐一样,觉得放得越多可能就效果越好。
结果大错特错,因为这个浓度一高啊,直接把硝酸纤维素膜给弄坏了,膜变得特别脆弱,根本没法再用在之后的操作里,这算是一个挺失败的教训。
后来我就想啊,是不是得慢慢来,就像小火炖汤似的。
我开始降低试剂的浓度,同时延长反应时间。
这个时候就像等待花开一样,得有耐心。
我发现这个办法比之前好一点了,但还是差点意思,活化的效果不是很理想,膜的活性没有达到我想要的程度。
我还试过加热的方式。
就想啊,加热一下说不定能让活化反应快一点呢。
可是这就跟烤面包似的,火候掌握不好就坏事了。
要是温度太高了,膜就容易变形,变得凹凸不平的,再要是一不小心有点杂质混进去,那膜的性能就更差了。
直到前几天,我又试了个新方法,总算成功了。
这次我严格控制试剂的种类、浓度还有反应的温度和时间。
就像是按照一个精确的食谱做菜一样。
比如说我先选了一种比较温和的活化试剂,它的浓度呢,我经过多次尝试发现按照1:10的比例跟缓冲液混合是比较好的。
然后温度我就设定在了30度,这个温度就像春天的温度一样,感觉刚刚好。
反应时间我给了1个小时,不长不短。
就这样小心翼翼地操作,这次硝酸纤维素膜的活化效果就非常不错,活性明显提高了。
我还有一点心得就是,在整个活化过程中,操作环境也挺重要的。
实验室要是太脏了,灰尘啊杂质啊飘进去,就像在一锅好汤里掉进了苍蝇一样讨厌。
所以操作之前一定要把周围环境清理好。
我建议啊,要是你们也在试这个硝酸纤维素膜活化,刚开始千万不要像我一开始那样莽撞,浓度先从低的开始试,时间可以慢慢调整,多记录每次的操作和结果,这样总能找到最适合的方法。
我还不确定是不是还有其他更好的活化方法,不过就目前我的经验来说,这个算是比较靠谱的了。
原创Westernblot转膜整个过程
转膜(T r a r s m e m b r a n)1转膜的定义将电泳后分离的蛋白质从凝胶中转移到固相载体(例如NC膜)上,通常有两种方法:毛细管印迹法和电泳印迹法。
常用的电泳转移方法有湿转和半干转。
两者的原理完全相同,只是用于固定胶/膜叠层和施加电场的机械装置不同。
前者操作容易,转移效率高;而后者适用于大胶的蛋白转移,所用缓冲液少。
2转移膜的选择杂交膜的选择是决定Westernblot成败的重要环节。
应根据杂交方案、被转移蛋白的特性以及分子大小等因素,选择合适材质、孔径和规格的杂交膜。
用于Westernblot的膜主要有两种:硝酸纤维素膜(NC)和PVDF膜。
NC膜是蛋白印迹实验的标准固相支持物,在低离子转移缓冲液的环境下,大多数带负电荷的蛋白质会与膜发生疏水作用而高亲和力的结合在一起,但在非离子型的去污剂作用下,结合的蛋白还可以被洗脱下来。
根据被转移的蛋白分子量大小,选择不同孔径的NC膜。
因为随着膜孔径的不断减小,膜对低分子量蛋白的结合就越牢固。
通常用0.45μm和0.2μm两种规格的NC膜。
大于20kD的蛋白可用0.45μm的膜,小于20kD的蛋白就要用0.2μm的膜了,如用0.45μm的膜就会发生“Blowthrough”的现象。
PVDF膜灵敏度、分辨率和蛋白亲和力比常规的膜要高,非常适合于低分子量蛋白的检测。
但PVDF膜在使用之前必需用纯甲醇浸泡饱和1-5秒钟。
最常用于WesternBlot的转移膜主要是硝酸纤维素(Nitrocellulose,NC)膜和聚偏二氟乙烯(PolyvinylideneFluoride,PVDF)膜,此外也有用尼龙膜、DEAE纤维素膜做蛋白印迹。
尼龙膜和NC膜的特点相似,主要用于核酸杂交。
硝酸纤维素(nitrocellulose,NC)膜:NC与蛋白质靠疏水作用结合,无需预先活化,对蛋白质的活性影响小;非特异性本底显色浅;价格低廉,使用方便。
但结合在NC上的小分子蛋白质在洗涤时易丢失;NC韧性较差,易损坏。
硝酸纤维素膜使用方法及作用
硝酸纤维素膜使用方法及作用硝酸纤维素膜又称为NC膜,在胶体金试纸中用做C/T线的承载体,同时也是免疫反应的发生处。
硝酸纤维素膜的原理:硝酸纤维素膜是蛋白印迹最广泛使用的转移介质,对蛋白有很强的结合能力,而且适用于各种显色方法,包括同位素,化学发光(Luminol类)、常规显色、染色和荧光显色;背景低,信噪比高。
NC膜的使用也很简便,比如不需要甲醛预处理,只要在无离子水面浸润排出膜内气泡,再在电泳缓冲液中平衡几分钟就可以了;比如NC膜很容易封闭,也不需要特别严谨的清洗条件。
转移到NC膜上的蛋白在合适的条件下可以稳定保存很长时间,不过要注意的是纯的硝纤膜在比较脆,又容易卷,操作要小心,不适合用于需要多次重复清洗的用途--因为经不起多次“折磨”。
选择硝酸纤维素膜的的注意事项:1.选择硝纤膜时要注意的是选择合适的孔径,通常20KD以上的大分子蛋白用0.45um孔径的膜,小于20KD的话建议选择0.2um的,如果小于7KD的话最好选择0.1um的膜。
2.还要注意选择纯的NC膜--混有含醋酸纤维(CM)的NC膜结合力会有所降低。
选择硝纤膜时要注意的是选择合适的孔径,通常20KD以上的大分子蛋白用0.45um孔径的膜,小于20KD的话建议选择0.2um的,如果小于7KD的话最好选择0.1um的膜。
硝酸纤维素膜的应用技巧:1.蛋白与膜的结合原理蛋白与膜的结合原理,已知的结合力包括疏水作用力、H 键、静电作用力等,确切的结合原理并不明确,主要靠假说来支撑。
主要有两种假说:1).首先两者靠静电作阻力结合,然后靠H键和疏水作用来维持长时间结合。
2).首先两者靠疏水作用结合,然后靠静电作用来维持长时间结合。
两条假说,都表明其结合过程分为两步,首先结合和后面长时间结合。
由于结合原理的不明确性,导致在这方面的工作非常依赖实践经验。
2.生物原料,缓冲溶液的试剂和配方1).生物原料;作为C/T线的生物原料使用情况各异,所以这里只做略述。
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硝酸纤维素膜使用方法及作用
硝酸纤维素膜又称为NC膜,在胶体金试纸中用做C/T线的承载体,同时也是免疫反应的发生处。
硝酸纤维素膜的原理:
硝酸纤维素膜是蛋白印迹最广泛使用的转移介质,对蛋白有很强的结合能力,而且适用于各种显色方法,包括同位素,化学发光(Luminol类)、常规显色、染色和荧光显色;背景低,信噪比高。
NC膜的使用也很简便,比如不需要甲醛
预处理,只要在无离子水面浸润排出膜内气泡,再在电泳缓冲液中平衡几分钟就可以了;比如NC膜很容易封闭,也不需要特别严谨的清洗条件。
转移到NC膜上的蛋白在合适的条件下可以稳定保存很长时间,不过要注意的是纯的硝纤膜在比较脆,又容易卷,操作要小心,不适合用于需要多次重复清洗的用途--因为经不起多次“折磨”。
选择硝酸纤维素膜的的注意事项:
1.选择硝纤膜时要注意的是选择合适的孔径,通常20KD以上的大分子蛋白用0.45um孔径的膜,小于20KD的话建议选择0.2um的,如果小于7KD的话最好选择0.1um的膜。
2.还要注意选择纯的NC膜--混有含醋酸纤维(CM)的NC膜结合力会有所降低。
选择硝纤膜时要注意的是选择合适的孔径,通常20KD以上的大分子蛋白用
0.45um孔径的膜,小于20KD的话建议选择0.2um的,如果小于7KD的话最好选择0.1um的膜。
硝酸纤维素膜的应用技巧:
1.蛋白与膜的结合原理蛋白与膜的结合原理,已知的结合力包括疏水作用力、H 键、静电作用力等,确切的结合原理并不明确,主要靠假说来支撑。
主要有两种假说:
1).首先两者靠静电作阻力结合,然后靠H键和疏水作用来维持长时间结合。
2).首先两者靠疏水作用结合,然后靠静电作用来维持长时间结合。
两条假说,都表明其结合过程分为两步,首先结合和后面长时间结合。
由于结合原理的不明确性,导致在这方面的工作非常依赖实践经验。
2.生物原料,缓冲溶液的试剂和配方
1).生物原料;作为C/T线的生物原料使用情况各异,所以这里只做略述。
首先,单克隆抗体与膜的结合优于多克隆抗体,主要时由于多克隆抗体有很多不同的表面位点,而各位点与膜的最佳结合条件都有细微的差别,毫无疑问就增加了优化难度。
其次,分子量越大,蛋白越难结合到固相材料上。
2).缓冲液;大家最关心的可能就是希望获得一个性能优良的配方,包括缓冲液,封闭液等等处理溶液配方。
不同的反应体系需要不同的配方来支持,而不同机构的反应体系又有差异。
缓冲液的构成一般是:PBS(或其他缓冲体系)+作用物质(针对某一特定问题)+pH调整。
我在参考过以前的各种资料后,个人意见为配方原则为宜简不宜繁,根据自己的需要添加作用物质,原来的很多需要添加的作用物质,由于膜制造技术的改进已经不再需要。
推荐的缓冲体系为0.01M PBS pH7-7.2该缓冲体系对多种抗原抗体都有良好的适应性。
作用物质的情况大致罗列如下:少量NaCl,减少信号强度,消假阳。
有机醇(甲醇,异丙醇等),润湿膜,减少膜带有的静电,利于结合包被。
个人不推荐,因制膜工艺改进。
表面活动剂(TW20,TX100),增加亲水力,可避免线条中空现象,也可增色。
糖,保护剂,减缓老化速度,也可以增加亲水力同上。
调pH到某个位置,可以消假阳。
3.点样环境环境湿度对点膜过程非常重要。
最佳湿度一般在45-65%。
湿度过低,膜上容易聚集静电荷,点膜容易出现散点,导致测试会出现疏水斑。
湿度过高,膜上毛细作用加强,点膜容易引起CT线变宽甚至扩散。
为了保证点样时膜湿度的均一性,一般在点样前把膜放到该湿度条件下平衡一段时间。
4.点样仪器与膜面情况的关系目前有两种点样方式,划膜式和非接触点膜式。
非接触点膜式优于划膜式,进口划膜式优于国产划膜式。
因划膜式为软管将抗体划到膜表面,而膜本身的物理性质为软脆,划管会在其表面留下印痕。
进口的划膜机由于使用的材料和控制系统较好,所以留下的划痕较轻,而国产仪器较差,留
下的划痕也就比较严重。
划痕容易对层析的金标复合物形成阻力,导致假阳性。
同时容易出现跑板时在T线位置出现若有若无一条细线(鬼线),而跑板结束后鬼线消失的奇怪现象。
5.膜的宽度与点样位置膜的宽度一般有18mm(or20mm)和25mm两种,分别使用在做测试条和做测试板上。
然而,不同的T线点样位置将带来不同的灵敏度。
点样位置上移,金标复合物通过T线位置时速度变慢,反应时间增加,灵敏度升高。
反之灵敏度降低。
这个方法可以用来改变灵敏度和消除假阳性。
6.溶液在膜上的扩散溶液在膜上的点样量一般情况下为1μl/cm。
溶液在膜上的扩散是趋向两端的,喷点上去的是均匀的抗体溶液,但当干燥时线条边缘的干燥速度高于中间,中间的抗体会不断向两边扩散,所以干燥后抗体是向线条的两端聚集的。
一般情况下不影响你的试验。
如果你发现线条出现两端红,中间淡的现象,就要考虑这个问题了。
可以加如上面说的作用物质来解决。
7.点膜前后的封闭作用从供应商处购买回的膜基本上都是已经优化处理好的,直接点膜就可使用。
然而我们还是经常会遇到关于封闭的讨论。
其实封闭不象大家认为的那样,一封闭什么问题都解决了。
老问题走了新问题又来了,而且更麻烦,我要说的是慎用封闭。
我极其反对点膜前封闭的做法。
原因为厂家在生产膜时候,各种配方是混合加入原浆的。
而点膜前封闭时要将膜浸泡在封闭液内,必然扰乱了膜内正常的物质分布。
由此引发了许多问题,也降低了工作效率。
也有厂家遇到不封闭就无法包被上膜的问题,其实可以通过其他办法来解决,封闭必然是下测。
我经常使用的封闭手法有两种。
流动封闭,将作用物质处理在样品垫上。
膜上定点封闭,将作用物质配成溶液喷点在膜的特定位置上。
该方法需要使用BIODOT的AIRJET喷头。
可以将不合格的半成品大板重新复活。
只要是将封闭做在了膜上,就必然会对产品的稳定性造成影响。
具体的影响程度要通过稳定性测试来评判
8.膜的储存刚生产出的膜一般含有5-10%的水分。
关于膜的老化机理,有个理论支持,不过争议比较大。
理论认为:膜的老化是因为膜上的水分蒸发,使膜变得疏水,带电荷并变脆。
储存膜一般要求是避光,密封。
过干或过湿都不利。
在这
种保存条件下,一般可以放置两年。
但是如果膜上做了封闭处理,就要根据具体试验情况来判断了。
有些膜由于生产工艺的问题,使用后灵敏度会在一段时间内发生变化,遇到这种问题,就需要在点膜后放置一段时间,待稳定后方可进入调试生产。