单纯疱疹病毒2型感染与非淋菌性尿道炎的病因关系(1)

单纯疱疹病毒2型感染与非淋菌性尿道

炎的病因关系(1)

作者：王万卷，王颖娟，王秀莹，李红敏，王晓鹏，陈丽【摘要】目的探讨非淋菌性尿道炎患者单纯疱疹病毒2型感染的流行病学状况及实验室诊断方法。方法实验分为NGU患者组和健康对照组。免疫快速测定法检测沙眼衣原体，培养法检测解脲支原体,血清酶联免疫吸附法检测血清HSV2抗体，荧光定量聚合酶链反应检测尿道分泌物HSV2。结果NGU患者组的CT、UU感染率分别为%和%。NGU患者组和健康对照组的HSV2IgG、IgM、HSV2DNA阳性率分别为%/%、%/%、%/%，两组相比差异均有统计学意义。NGU患者组无CT、UU、阴道毛滴虫、念珠菌感染的HSV2阳性率为%，与对照组相比差异亦有统计学意义。结论HSV2是NGU的重要病原体之一。FQ PCR 法作为HSV感染的实验室诊断技术具有很好的临床应用价值。

【关键词】非淋菌性尿道炎；单纯疱疹病毒2型；血清学酶联免疫吸附实验；荧光定量聚合酶链反应

非淋菌性尿道炎为最常见的性传播疾病之一，在欧美国家的发病率已经超过淋病。近年来，NGU发病率在我国逐年上升，占报告病例总数的第3位，仅次于淋病和尖锐湿疣。其病原体复杂多样，沙眼衣原体和解脲支原体是其中最主要的病原体[13]，但临床上相当部分的患者无明显病因。有研究报道单纯疱疹病毒与NGU发病有一定关系[4]。为明

确HSV感染与NGU发病的病因学关系，我们进行了NGU人群中HSV2感染的流行状况的研究，现报告如下。

1材料与方法

临床资料275例NGU患者来源于我院皮肤科、性病专科及妇科门诊，其中男165例，女110例，均按卫生部制定的NGU的诊断标准选择病例[3]。临床症状为尿痛、尿频、分泌物多、尿道口红、尿道痒、尿道不适、排尿不尽感等，每例至少有以上3种症状。患者年龄20-63岁，平均岁。已婚192例，未婚83例，有婚外性行为者78例。平均NGU病程月。对既往有生殖器疱疹病史及本次就诊时有可疑疱疹皮损者予以剔除。对照组61例，为健康体检人员，男24例，女37例，年龄27-44岁，平均岁，CT、UU、阴道毛滴虫、念珠菌检测均为阴性。

标本采集和处理

血清标本NGU患者组及对照组均抽取静脉血2mL，离心后留取，-80℃保存。

分泌物标本按常规方法用无菌一次性棉拭子自男性尿道2-3cm处和女性宫颈管内1-2cm处取材，拭子停留10s旋转取出。NGU患者组留取3份，分别接种UU培养基及用于CT和HSV2检测；正常对照组取1份，用于HSV2检测。余置-4℃保存。

方法

HSV2血清抗体检测血清样本以ELISA血清试剂盒检测HSV2血清抗体，具体方法参照试剂盒使用说明。

分泌物CT、UU等检测采用英国“立明”衣原体抗原免疫快速测定法检测CT；以支原体培养鉴定试剂盒检测UU；阴道毛滴虫及念珠菌镜检由性病门诊实验室完成。

FQ PCR检测HSV2DNAPEGeneAmp5700型PCR仪为美国PerkinElemer公司产品。所用的HSV2荧光定量PCR诊断试剂盒购自中山医科大学达安基因诊断中心，试剂盒包括DNA 提取液、HSV PCR反应管、阳性定量参考品。标本处理后，加入PCR反应管，放入仪器样品槽。设置循环条件：93℃2min 预变性，93℃45s-55℃60s先做10个循环后，再以93℃30s-55℃45s做30个循环，保存文件，运行。反应结束后保存检测数据，分析结果。

2结果

NGU的病因学构成NGU患者组中CT感染率为%,UU感染率为%，阴道毛滴虫感染率为%，念珠菌感染率为%，HSV2感染率为%；两种以上病原体感染率为%；原因不明者为%。

两组HSV2IgG、IgM、HSV2DNA阳性率的比较NGU患者组中HSV2IgG阳性105例，占%，正常对照组HSV2IgG阳性11例，占%，两者比较差异有统计学意义；NGU患者组中HSV2IgM 阳性30例，占%，正常对照组HSV2IgM阳性1例，占%，两者比较差异有统计学意义；NGU患者组中HSV2DNA阳性54例，

占%，正常对照组HSV2DNA阳性3例，占%，两者比较差异有统计学意义；NGU患者组中102例无CT、UU、阴道毛滴虫、念珠菌感染，占%。这102例患者中HSV2DNA阳性34例，占%，正常对照组HSV2DNA阳性3例，占%，两者比较有显著性差异。

3讨论

NGU是由多种病原体感染而引起的尿道炎的总称,其中CT是最常见的病原体。NGU中30%-50%的病例由CT引起，10%-20%的病例由UU引起，约1%-17%的病例由阴道毛滴虫引起，还有小于10%的病例与HSV、白色念珠菌、细菌性阴道病有关[5]。由于检测技术、病例选择、病例数量及地理分布的差异，各研究报告存在较大差异。本研究结果显示，以CT、UU感染阳性率较高，其次为HSV2，与Chen等[6]的研究结果相近。其中有%患者查不出上述病原体，因缺乏实验条件，未做鉴定。有报道认为大肠杆菌、表皮葡萄球菌及腐生葡萄球菌等可能成为NGU的致病菌。本研究中是否也存在这种情况，有待于进一步证实。

文献报道[7]，ELISA法是目前主要用于检测HSV抗原或抗体的非培养方法，在没有生殖器疱疹临床损害而无法检测

HSV抗原时，测定血清抗体具有它的优越性。IgM抗体一般出现较早，为一过性，提示患者正在感染期；IgG抗体是在感染1周后出现，而且可持续很长时间，IgG阳性代表HSV 感染或曾经感染过HSV。Beauman[8]认为，在HSV2抗体阳性的患者中，20%有典型的皮损，20%的患者可能无症状或皮损位于宫颈等隐蔽部位而不能发现，另外60%的患者有皮损但由于不典型，表现为阴唇、阴茎及肛周的裂隙和局限性红斑等而不被注意。本研究发现NGU患者组血清HSV2IgG、IgM 阳性率分别为%和%，与谭志建等[9]的报道相近，提示存在HSV2感染；而正常对照组HSV2IgG、IgM阳性率分别为%和%，两组相比差异有统计学意义，表明应用ELISA法检测HSV2抗体有一定意义。

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