（TOC约束理论）干细胞常用实验技术
(TOC约束理论)TOC约束理论约束理论简介
约束理论简介约束理论（TheoryofConstraints，简称TOC）是戈德拉特博士（Dr.EliyahuM.Goldratt）在他的优化生产技术（OptimizedProductionTechnology，简称OPT）的基础上发展起来的。
戈德拉特最初开发的OPT软件用了有限能力排程、车间控制和决策支持，由一家叫CreativeOutput公司经销。
由于戈德拉特把重点从经销软件转移到强调管理哲理和培训教育上，他被迫离开了这家公司。
因此，当前存在早期以OPT命名的商品软件和戈德拉特博士进一步发展的OPT哲理或TOC，不要混淆。
OPT有9条基本原则，这些原则在约束理论中得应用。
它们是：1.重要的是平衡物流，不是平衡能力；2.非瓶颈资源的利用率是由系统的其它约束条件决定的，而不是由其本身能力决定的；3.让一项资源充分开动运转起来同使该项资源带来效益不是同一一个涵义；4.瓶颈资源损失一小时相当于整个系统损失一小时，而且是无法补救的；5.想方设法在非瓶颈资源上节约下一小时以提高生产率只是一种幻想，非瓶颈资源不应满负荷工作；6.产量和库存量是由瓶颈资源决定的；为保证瓶颈资源负荷饱满并保证企业的产出，在瓶颈工序和总装配线前应有供缓冲用的物料储备。
瓶颈工序前可用拉式作业，其后可用推式作业。
7.传送批量可以不等于甚至多数情况是不应等于加工批量；8.批量是根据实际情况动态变化的，而不是固定不变的；加工批量应当是一个变数；9.只有同时考虑到系统所有的约束条件后才能决定加工件计划进度的优先级。
提前期只是排进度的结果。
TOC是在OPT的基础上发展起来的，它是一种在能力管理和现场作业管理方面的哲理，把重点放在瓶颈工序上，保证瓶颈工序不发生停工待料．提高瓶颈工作中心的利用率，从而得到最大的有效产出。
根据不同的产品结构类型、工艺流程和物料流动的总体请况，设定管理的控制点。
约束是多方面的，有市场、物料、能力、工作流程、资金、管理体制，员工行为等，其中，市场、物料和能力是主要的约束。
干细胞定向分化的实验技巧
干细胞定向分化的实验技巧干细胞是具有自我更新和分化为多种细胞类型潜能的细胞群体。
干细胞定向分化是指将未分化的干细胞诱导分化为特定细胞类型的过程。
这项技术在医学研究和临床应用中具有巨大的潜力，可以用于组织工程、再生医学和疾病治疗等领域。
在干细胞定向分化的实验中，一些关键的技巧和方法是必不可少的。
本文将介绍一些常用的干细胞定向分化实验技巧。
1. 干细胞培养和扩增在进行干细胞定向分化实验之前，首先需要培养和扩增干细胞。
常用的干细胞包括胚胎干细胞和诱导多能干细胞（iPS细胞）。
在培养过程中，需要提供适当的培养基和生长因子来维持干细胞的自我更新和增殖能力。
在扩增时要注意细胞的密度控制，以避免细胞在过度拥挤的环境中产生自发分化。
2. 诱导分化因子的选择和优化干细胞定向分化的关键是选择合适的诱导分化因子。
对于每种分化类型，诱导因子的选择和浓度需要进行优化。
通常，这些诱导因子可以是细胞因子、转录因子或化学物质。
例如，要将干细胞定向分化为神经细胞，可以添加神经生长因子等相关因子。
在优化过程中，可以通过调整因子的浓度、处理时间和培养条件来实现更有效的定向分化。
3. 细胞外基质的使用细胞外基质（ECM）是一种提供细胞黏附和信号传导的支持物质。
在干细胞定向分化实验中，使用细胞外基质可以模拟体内的微环境，促进特定细胞类型的定向分化。
常用的细胞外基质包括胶原蛋白、纤维蛋白和海藻酸。
选择合适的细胞外基质可以提高定向分化的效率和特异性。
4. 流式细胞术分析流式细胞术是一种常用的细胞分析方法，可以用来检测和分离不同细胞类型。
在干细胞定向分化实验中，可以利用流式细胞术来检测和定量特定细胞表面标记物的表达。
通过标记特定蛋白或分子，可以确定定向分化的效率和细胞类型的纯度。
流式细胞术还可以用于分离和纯化特定细胞群体，以进一步进行后续实验。
5. 功能性分析在干细胞定向分化实验中，除了表面标记物的表达外，还需要进行功能性分析来验证定向分化的效果。
约束理论(TOC)
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约束理论(TOC)
OPT的九条原则(续)
• 原则6:瓶颈控制了库存和产销率
– 产销率指的是单位时间内生产出来并销售出去的产品 所创造的利润额
– 从平衡物流的角度出发，应允许在非关键资源上安排
适当的闲置时间
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约束理论(TOC)
OPT的九条原则(续)
• 原则4:瓶颈上一个小时的损失则是整个系统的 一个小时的损失
– 生产时间包括调整准备时间和加工时间。但在瓶颈 资源与非瓶颈资源上的调整准备时间的意义是不同 的。而如果在瓶颈资源上节省一个小时的调整准备 时间，则将能增加一个小时的加工时间，相应地， 整个系统增加了一个小时的产出
• OPT的计划与控制步骤 • “鼓”、“缓冲器”和“绳子”
– OPT中的提前期是批量、优先权和其它许多因素的 函数，是编制作业计划产生的结果
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约束理论(TOC)
OPT的九条原则(续)
• 目前理论界对OPT认识还不一致,存在着 各种看法,主要包括
– 把OPT当做一种新的计划思想
– 作为一种作业计划的仿真语言
– 作为生成MPS、物料和能力需求计划及详细 计划的一个软件包
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约束理论(TOC)
约束理论的理论基础─ OPT
• OPT的一些重要概念 • OPT的九条原则 • OPT的计划与控制─DBR系统
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约束理论(TOC)
OPT的一些重要概念
• 瓶颈与非瓶颈资源
二级物流师基础名词解释-TOC约束理论-物流师考试.doc
2014年二级物流师基础名词解释:TOC约束
理论-物流师考试
2014年物流师备考阶段，特为大家整理总结2014年二级物流师基础名词解释，供大家参考学习，希望能够帮到大家！
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TOC约束理论
约束理论(theory
of
constraints)简称TOC，通常称之为最优生产技术OPT的软件和技术也属于TOC的范畴。
TOC提出不同的指导思想，首先将产品与过程信息合起来表示，以减少信息容量。
其次，不是对所有资源同时进行排序和负荷分配，而是先找出生产系统中的瓶颈(或称约束)、然后只对瓶颈资源进行排序和资源分配，最后根据对瓶颈资源的排序来对其他有多余容量的资源进行排序。
这样，不仅大大的减少了排序与资源负荷分配的难度，而且这两者可以同时完成，大大缩短了排序时间。
所以这种方法也称为同步制造。
精编【TOC约束理论】TOC制约法
【TOC约束理论】TOC制约法xxxx年xx月xx日xxxxxxxx集团企业有限公司Please enter your company's name and contentv约束理论（制约法）指约束管理/约束理论（theory of constraints ，TOC) 。
简单的讲，约束理论是关于企业应作哪些变化以及如何最好地实现这些变化的理论。
具体一些，约束理论是这样一套管理原则──帮助企业找出目标实现过程中存在的障碍，并实施必要的改变来消除这些障碍。
约束理论认为，对于任何一个系统来说，如果它的投入/产出过程可以按环节或者阶段进行划分，而且一个环节的产出依赖于前面一个或多个环节的产出的话，那么，这个系统最终的产出将受到系统内生产率最低的环节的限制。
换言之，任何一个链条的牢固程度取决与它最薄弱的环节。
在论及生产制造企业时，约束理论认为企业的目标就是取得更多的利润。
为实现这一目标，可以有三条途径：增加产销率，减少库存，减少运营费用。
这三条途径中，正如约束理论奠基者Dr. Goldratt所说，减少库存和减少运营费用会碰到最低减少到0的限制，而对于通过提高产销率来取得更多利润的可能性，则是无穷无尽的。
此外，约束理论还发展出一系列工具，来帮助企业重新审视自己的各种行为和措施，看它们对于企业目标的实现产生了怎样的有利或不利的影响。
TOC是什么？TOC是Theory of Constraints的简称，中文译为“约束理论”。
美国生产及库存管理协会(APICS)又称它为约束管理(Constraint Management)。
TOC是怎么发展出来？TOC是由以色列的一位物理学家Eliyahu M. Goldratt博士所创立的。
他的第一本有关TOC的著作于1984年出版，书名为“目标”(The Goal)。
该书以小说的行文写成，描述一位厂长应用TOC在短时间内将工厂转亏为盈的故事。
因为该书所描述的是许多工厂都普遍存在的问题，因此该书出版之后，读者甚广，并译成13国语言，成为全球的畅销书，销售量在200万册以上，TOC因而流传。
约束理论(TOC)
约束理论（TOC）TOC(Theory ofconstraints)，中文译为"瓶颈理论"，也被称为制约理论或约束理论，由以色列物理学家高德拉特(Eliyahu M. Goldratt)博士创立，与精益生产、六西格玛并称为全球三大管理理论;其核心观点为立足于企业系统，通过聚焦于瓶颈的改善，达到系统各环节同步、整体改善的目标。
约束理论是关于企业应作哪些变化以及如何最好地实现这些变化的理论。
具体一些，约束理论是这样一套管理原则──帮助企业找出目标实现过程中存在的障碍，并实施必要的改变来消除这些障碍。
约束理论认为，对于任何一个系统来说，如果它的投入/产出过程可以按环节或者阶段进行划分，而且一个环节的产出依赖于前面一个或多个环节的产出的话，那么，这个系统最终的产出将受到系统内生产率最低的环节的限制。
换言之，任何一个链条的牢固程度取决与它最薄弱的环节。
在论及生产制造企业时，约束理论认为企业的目标就是取得更多的利润。
为实现这一目标，可以有三条途径：增加产销率，减少库存，减少运营费用。
这三条途径中，正如约束理论奠基者Dr. Goldratt所说，减少库存和减少运营费用会碰到最低减少到0的限制，而对于通过提高产销率来取得更多利润的可能性，则是无穷无尽的。
此外，约束理论还发展出一系列工具，来帮助企业重新审视自己的各种行为和措施，看它们对于企业目标的实现产生了怎样的有利或不利的影响。
TOC理论的内容TOC认为，任何系统至少存在着一个约束，否则它就可能有无限的产出。
因此要提高一个系统 (任何企业或组织均可视为一个系统)的产出，必须要打破系统的约束。
任何系统可以想像成由一连串的环所构成，环与环相扣，这个系统的强度就取决于其最弱的一环，而不是其最强的一环。
相同的道理，我们也可以将我们的企业或机构视为一条链条，每一个部门是这个链条其中的一环。
如果我们想达成预期的目标，我们必须从最弱的一环，也就是从瓶颈(或约束)的一环下手，才可得到显著的改善。
TOC约束理论概述
TOC约束理论概述引言TOC（Theory of Constraints，约束理论）是由以色列物理学家艾略特·戴克斯特勒（Eliyahu M. Goldratt）提出的一种管理理论。
TOC的基本理念是认为系统的整体绩效受到系统内的某个约束因素的制约，解决这个约束即可提升整体绩效。
TOC的基本原理1.约束因素的存在：TOC认为在系统中必定存在一个或多个约束因素，限制着整体系统的绩效。
2.优化约束：TOC的核心策略是优化约束因素，通过提升约束因素的绩效来提升整体系统的绩效。
3.子约束：TOC指出系统中可能存在多个约束因素，形成约束链，需要依次解决这些子约束。
TOC的关键概念1.吞吐量（Throughput）：指的是系统在单位时间内生产的产品数量，是衡量系统绩效的关键指标。
2.存货（Inventory）：指的是系统中尚未完成的产品数量，存货过多会降低系统绩效。
3.操作费用（Operating Expenses）：指的是系统运转的成本，TOC鼓励降低操作费用来提升系统盈利。
4.约束（Constraint）：指的是限制系统整体绩效的因素，TOC的关键是找出约束并加以解决。
TOC的应用领域TOC最初是在生产领域应用最为广泛，例如生产制造、供应链管理等。
随着TOC理论的不断完善，其应用领域也逐渐扩展到服务行业、项目管理等领域。
TOC的实践方法1.五步过程：TOC提出了一个解决约束的五步过程，分别是：识别约束、决定如何利用约束、调整其它部分以适应约束、神经中枢改进、回到第一步。
2.批量生产管理：TOC提倡采用小批量生产的方式，通过缩短生产周期和减少存货来提升系统效率。
3.整体系统优化：TOC强调系统整体的优化，而不是片面优化某个环节，强调系统整体协同效应。
TOC的发展TOC理论得到了广泛应用和发展，形成了一系列的工具和方法，并衍生出应用于项目管理、营销管理等领域的相关理论。
结语TOC约束理论提供了一种系统思维的管理方法，帮助组织找到瓶颈并加以解决，从而提升整体绩效。
TOC约束理论基础知识简介
TOC(Theory of Constraints)约束理论简介约束理论（TheoryofConstraints，简称TOC）是戈德拉特博士（Dr.EliyahuM.Goldratt）在他的优化生产技术（OptimizedProductionTechnology，简称OPT）的基础上发展起来的。
戈德拉特最初开发的OPT软件用了有限能力排程、车间控制和决策支持，由一家叫CreativeOutput公司经销。
由于戈德拉特把重点从经销软件转移到强调管理哲理和培训教育上，他被迫离开了这家公司。
因此，当前存在早期以OPT命名的商品软件和戈德拉特博士进一步发展的OPT哲理或TOC，不要混淆。
OPT有9条基本原则，这些原则在约束理论中得应用。
它们是：1.重要的是平衡物流，不是平衡能力；2.非瓶颈资源的利用率是由系统的其它约束条件决定的，而不是由其本身能力决定的；3.让一项资源充分开动运转起来同使该项资源带来效益不是同一一个涵义；4.瓶颈资源损失一小时相当于整个系统损失一小时，而且是无法补救的；5.想方设法在非瓶颈资源上节约下一小时以提高生产率只是一种幻想，非瓶颈资源不应满负荷工作；6.产量和库存量是由瓶颈资源决定的；为保证瓶颈资源负荷饱满并保证企业的产出，在瓶颈工序和总装配线前应有供缓冲用的物料储备。
瓶颈工序前可用拉式作业，其后可用推式作业。
7.传送批量可以不等于甚至多数情况是不应等于加工批量；8.批量是根据实际情况动态变化的，而不是固定不变的；加工批量应当是一个变数；9.只有同时考虑到系统所有的约束条件后才能决定加工件计划进度的优先级。
提前期只是排进度的结果。
TOC是在OPT的基础上发展起来的，它是一种在能力管理和现场作业管理方面的哲理，把重点放在瓶颈工序上，保证瓶颈工序不发生停工待料．提高瓶颈工作中心的利用率，从而得到最大的有效产出。
根据不同的产品结构类型、工艺流程和物料流动的总体请况，设定管理的控制点。
TOC(约束理论)
第一章 TOC（约束理论）第一节TOC的理论一、 TOC产生背景约束理论（Theory of Constraints，TOC）是以色列物理学家戈德拉特博士（Dr. Eliyahu M. Goldratt）在他的优化生产技术（Optimized Production Technology，OPT）的基础上发展起来的。
OPT是Goldratt博士和其他三个以色列籍合作者创立的，他们在1979年下半年在美国成立了CreativeOutput公司。
接下去的七年中，OPT有关软件得到发展，同时OPT管理理念和规则开始成熟起来。
CreativeOutput公司的发展几起几落，后关闭。
OPT的软件所有权转让给一家名为SchedulingTechnologyGroup的英国公司。
TOC首先是作为一种制造管理理念出现。
《The Goal》、《The Race》这两本最初介绍TOC的书引起了读者的广泛兴趣和实施这套理念的热情。
TOC最初被人们理解为对制造业进行管理、解决瓶颈问题的方法，后来几经改进，发展出以"产销率、库存、经营成本"为基础的指标体系，逐渐形成为一种面向增加产销率而不是传统的面向减少成本的管理理论和工具，并最终覆盖到企业管理的所有职能方面。
1984年，Goldratt博士在他出版的第一本以小说体写成的TOC专著《目标》中，描述了一位厂长应用约束理论使工厂在短时间内转亏为盈的故事。
Goldratt博士把一个企业比喻作一条链子。
链子连结在一起象征一个完整的系统，能够产生巨大的力量，就像企业内部各个部门、科室互相配合、亲密合作，为股东带来巨额利润一般。
Goldratt博士认为任何一种体制至少都会有一个约束因素，从而阻碍它充分发挥潜能。
以企业为例，它经常为各种不确定的因素所阻碍，无法实现利润最大化。
这个系统就如同我们的链条比喻一样，约束因素使它无法承受重荷而很容易断裂。
这个简单而形象的比喻深入人心，加上书中描述的问题在很多企业普遍存在，使人读起来有亲切感。
精编【TOC约束理论】干细胞常用实验技术
【TOC约束理论】干细胞常用实验技术xxxx年xx月xx日xxxxxxxx集团企业有限公司Please enter your company's name and contentv实验室内部的人胚胎干细胞protocol人类胚胎干细胞H1和H9维持方案一、试剂配制饲养层细胞培养基Fibroblast-DMEM Media (F-DMEM)DMEM (GIBCO 11960-044) 450mlFCS GIBCO 16000-044 50ml 10%Pen/Strep 2.5ml 50IU/mlL-glut GIBCO 25030-081 5ml 2uM/ml人类胚胎干细胞培养基HESC-MediaKO-DMED GIBCO 10829-018 480mlKOSR GIBCO 10828-028 120ml 20%10mM NEAA GIBCO 11140-050 6ml 0.1mM L-glut(0.2M) GIBCO 25030-081 6ml 2mM Pen/Strep 3ml55mM BME GIBCO 21985-023 1.1ml 0.1mM ITS GIBCO 41400-045 6ml4-80C避光保存。
用前每50毫升加200-400ng bFGF细胞冻存培养基FBS-DMSOFCS GIBCO 16000-044 9ml 90%DMSO SIGMA D2650 1ml 10%细胞消化液Trypsin-EDTA0.25% Trysin-1mM EDTA GIBCO 25200-056 2ml 0.05%,0.2mMPBS(-) 14190-144 8mlMEF细胞有丝分裂终止液Mito CMitomycin C 0.2mg 0.05mg/mldd-H2O 15230-162 4ml避光保存。
Mito C的终浓度为10ug/ml即40吸ul 工作液加到2ml F-DMEM中。
【精品课件】TOC约束理论
步骤一:找出约束条件 约束条件的三种类型 按类别可分为物理约束条件、市场约束条件、方针约束条件三种类型。
(1)物理约束条件是由装置、设备、 人力资源引起的。生产产品D的工 厂的约束条件就属于物理约束条 件。
(2)市场约束条件是因需求、客户 等市场因素产生的。最具代表性 的市场约束条件是:生产能力远远 大于市场需求。在这种情况下, 营 销策略的变化和细分市场是十分 必要的。
的能力。 这两个步骤比较容易混淆, 但步骤四提高“约束条件的能力”, 是以在步骤二中已经最优化的约束条件为基础的, 在
此基础上对现有约束条件的能力进行提升。因此, 在这一步骤中, 需要导入新的装置来提高约束条件的性能, 或者让非 约束条件来承担约束条件的一部分作业。
2.把不需要的东西扔出背包 再来看一下前面提到的《目标》中童子军列队行走的例子。现在, 让其他成员帮助贺比(约束条件)提东西, 替他分 担放在背包里的水、食物和工具等, 贺比的速度就会提高。这个例子就如步骤四所说的, 提高了约束条件的能力。
产、成本管理、战略、市场营销等一切企业活动, 都不过是为达到上述目标的手段而已。可是, 要实现上述目标, 到 底应该怎么做呢?这时, TOC就应运而生了。
艾利·高德拉特 艾利·高德拉特博士，是以色列物理学家、企业管理大师，“TOC制约法”的创造者。他的第一部作品《目标》大
胆借用小说的笔法，说明如何通过近乎常识的逻辑推理，解决复杂的管理问题，结果一炮走红。 高德拉特的4部管理著作: 《目标》：反映了一位科学家对管理问题的种种思考 《绝不是靠运气》：企业要解决的3个甚为重要的问题 《关键链》：苏格拉底式的探索问题，并提出挑战性的新理念 《仍然不足够》： “不足够”，是指什么呢？ 是指科技，尤其是信息技术
零件A 零件B
约束理论TOC(完整版)
约束理论TOC(完整版)一、约束理论概述约束理论（Theory of Constraints，简称TOC）是由以色列物理学家艾利·高德拉特（Eliyahu M. Goldratt）于1980年代提出的一种管理理念。
它旨在帮助组织识别和解决制约其目标实现的瓶颈，通过系统化地优化流程，提高整体效率。
约束理论的核心观点是：一个系统的绩效往往受限于其最薄弱的环节，即约束。
只有解决约束，才能实现整体绩效的提升。
二、约束理论的五大核心原则1. 系统的整体性：约束理论强调，一个组织是一个相互关联的系统，每个环节的绩效都会影响到整个系统的绩效。
因此，在解决问题时，需要从整体出发，考虑各个环节之间的相互影响。
2. 约束是关键：约束是制约系统整体绩效的关键因素。
要实现整体绩效的提升，要识别和解决约束。
约束可能存在于生产、物流、销售、人力资源等各个环节。
3. 非瓶颈决定生产速度：在一个系统中，非瓶颈环节的产能往往大于瓶颈环节。
因此，提高非瓶颈环节的产能并不能提高整个系统的产能，反而可能导致库存积压。
要实现整体产能的提升，关键在于提高瓶颈环节的产能。
4. 瓶颈是提升整体绩效的关键：要提升整体绩效，要解决瓶颈。
解决瓶颈的方法包括：提高瓶颈环节的产能、调整生产计划以减少瓶颈环节的负担、寻找替代方案等。
5. 系统优化：约束理论强调，优化一个系统需要关注整体而非局部。
在解决问题时，需要考虑各个环节之间的相互影响，避免局部优化导致整体绩效下降。
三、约束理论的应用领域约束理论在多个领域得到了广泛应用，包括：1. 生产管理：通过识别和解决生产过程中的瓶颈，提高生产效率，降低生产成本。
2. 项目管理：通过识别和解决项目中的关键制约因素，确保项目按时完成，提高项目成功率。
3. 供应链管理：通过优化供应链各环节的协同效应，降低库存成本，提高供应链整体绩效。
4. 服务行业：通过优化服务流程，提高服务质量，降低服务成本。
5. 个人成长：通过识别和解决个人成长中的制约因素，提高个人绩效，实现人生目标。
TOC约束理论
TOC约束理论1，什么是TOC约束理论 (Theory of Constraints)？TOC: 任何系统至少存在着一个约束，否则它就可能有无限的产出。
因此要提高一个系统 (任何企业或组织均可视为一个系统)的产出，必须要打破系统的约束。
任何系统可以想像成由一连串的环所构成，环与环相扣，这个系统的强度就取决于其最弱的一环，而不是其最强的一环。
相同的道理，我们也可以将我们的企业或机构视为一条链条，每一个部门是这个链条其中的一环。
如果我们想达成预期的目标，我们必须从最弱的一环，也就是从瓶颈(或约束)的一环下手，才可得到显著的改善。
换句话说，如果这个约束决定一个企业或组织达成目标的速率，我们必须从克服该约束着手，才可以更快速的步伐在短时间内显著地提高系统的产出。
TOC有一套思考的方法和持续改善的程序，称为五大核心步骤。
这五大核心步骤是：(1)，找出系统中存在哪些约束。
(2)，寻找突破这些约束的办法。
(3)，使企业的所有其他活动服从于第二步中提出的各种措施。
(4)，具体实施第二步中提出的措施，使第一步中找出的约束环节不再是企业的约束(5)，回到步骤1，别让惰性成为约束，持续不断地改善。
TOC的九条生产作业计划制定原则:(1)，不要平衡生产能力，而要平衡物流(2)，非瓶颈资源的利用水平不是由自身潜力所决定，而是由系统的约束来决定(3)，资源的利用与活力不是一码事(4)，瓶颈损失1小时，相当于整个系统损失1小时(5)，非瓶颈上节约开1小时，无实际意义(6)，瓶颈制约了系统的产销率和库存(7)，转运批量可以不等于1，而且在大多数情况下不应该等于加工批量(8)，加工批量不是固定的，应该是随时间而变化(9)，优先权只能根据系统的约束来设定，提前期是作业计划的结果(不是预先设定的)2，什么是LP精益生产(Lean Production)？LP精益生产：包括JIT(Kanban)，GT成组技术(Cell manufacturing)，TQM全面质量管理。
(TOC约束理论]TOC验证
![(TOC约束理论]TOC验证](https://img.taocdn.com/s3/m/ff4e2dbb58fafab068dc0220.png)
（TOC约束理论）TOC验证验证文件类别：验证方案编号：部门：质量控制部页码：第1页，共17页总有机碳（TOC）分析仪验证方案（质量控制部）版次：□新订□替代：______________________起草：_______________ 日期：______________________审阅会签：____________________________________________批准：_______________ ________年____月____日实施日期：__________年_____月_____日复印数：_____________ 批准:____________分发至：____________________________________________________ _______________________________________________________________目录1.引言1.1概述1.2基本情况2. 验证目的3. 验证范围4. 验证合格标准5. 人员及职责6. 验证内容及实施7. 异常情况处理8. 漏项和偏差检查9. 时间进度10. 拟定日常监测及验证周期11. 验证结果评定和结论12. 附录1、引言：1.1概述：ZYT-1总有机碳检测仪，是用于测定工艺用水中的总有机碳浓度的专业分析仪器。
可广泛的应用于制药工业、电子工业等领域制药用水、去离子水和超纯水的水质监测和验证。
根据《中国药典》2010年二部注射用水检测要求，我公司采用该仪器进行注射用水中总有机碳的测定。
1.2基本情况：工作原理：水样通过进样口进入仪器后分成相等流量的俩路，其中一路通过延迟线圈4，进入电导率传感器3，测量总无机碳(TIC)或简单的说是IC。
另一份通过镀有二氧化钛的螺旋石英玻璃管l，且在紫外灯2的照射下催化氧化为二氧化碳，进入电导率传感器3，测量总碳(TC=TOC+TIC)。
高德拉特：约束理论(TOC)和最优生产技术(OPT)相关
高德拉特：约束理论(TOC)和最优生产技术(OPT)相关2006年1月，高得拉特的4本著名小说体管理理论著作：《目标》、《决不是靠运气》、《关键链》和《仍然不足够》，在大陆中国首次完全出版，可以说，这是中国企业管理界的一件大事。
（其中“目标”一书曾于1999年由上海三联书店出版过，我们大力推广过，并向我们的许多客户赠送过）。
高德拉特博士是以色列物理学家及企业管理大师。
是著名的企业管理思想“约束理论”的创造者。
高德拉特将科学家严谨的治学态度和精确的逻辑推理用来揭示制造现场的管理问题，并且创造出重要的管理车间现场的准则。
高德拉特用近于常识的逻辑推演，用小说的形式表达了他解决复杂管理问题的方法。
“他把他的理论放到一个虚拟的故事中，创造种种充滿問題的环境，但主角卻透過他想表达的理论基础，逐一的改善，而故事中所呈現的改善結果卻是十分驚人的。
這様引人入胜的表达方式，能让读者对他所传达的理论充滿希望，不僅增加可读性，更对理论的散佈多有助益－這使得他的理論更加的迷人。
”我向我们公司的职工—我们所有的系统设计师、实施顾问、软件专家和销售专家们推荐，大家都来学习这些书。
特别是《仍然不足够》，原文书名是Necessary but not sufficient，说的是“必要但并不充分”，含义是IT技术对企业是必要的，但还不够充分。
缺少的是什么？就是高德拉特指出的—用先进的管理思想，特别是约束理论来改变企业的运做规则。
《仍然不足够》的出版对澄清IT和管理思想改进的关系，帮助ERP的开发商（当然还有许多软件的开发人员）、ERP的实施顾问商（还有许多实施顾问们）以至于企业和企业的IT主管和IT人员校准需求、摆正各自的位子，让企业赚钱、让软件商和咨询商发达都有重要的指导意义。
几种常见的干细胞培育技术针对性解析
几种常见的干细胞培育技术针对性解析引言：干细胞研究是当代生物医学领域中备受关注的热门话题之一。
干细胞具有自我更新能力和多向分化潜能，被认为有着巨大的医学潜力。
随着科技的发展，越来越多的干细胞培育技术出现并得到应用。
本文将着重讨论几种常见的干细胞培育技术，并对其针对性和应用前景进行解析。
一、体细胞重编程技术体细胞重编程技术是指将成熟的体细胞通过基因操纵技术，重新转化为类似于胚胎干细胞的状态。
这种技术主要包括转染外源基因、核质交换和化学诱导等方法。
其中，转染外源基因的方法是最为常见的，如通过导入Oct4、Sox2、Klf4和c-Myc等关键基因来诱导体细胞转变为诱导多能干细胞（iPS细胞）。
这种技术的针对性在于可以使个体细胞恢复到干细胞状态，从而实现个体化的治疗。
二、多能干细胞维持培养技术多能干细胞是指具有自我更新能力和多向分化潜能的干细胞，包括胚胎干细胞和诱导多能干细胞。
在维持多能干细胞状态的培养技术中，重要的一环是细胞培养基的配制。
目前最常用的细胞培养基就是KSR（KNOCKOUT Serum Replacement）和FBS（Fetal Bovine Serum），具有供能和调控细胞分化的作用。
此外，还可以加入生长因子和细胞外基质等组分，提高细胞培养的效果。
这种技术的针对性在于维持多能干细胞状态，为后续研究和应用提供稳定的细胞资源。
三、单克隆细胞扩增技术单克隆细胞扩增技术是通过单个干细胞分裂和扩增，获得同一种类的大量干细胞。
在实际应用中，可以通过单克隆技术筛选出具有特定功能的干细胞，如神经干细胞、造血干细胞等。
在细胞扩增过程中，要注意培养基的调配，使细胞得到充分的营养和生长条件。
同时，也要控制细胞的分裂速率，使细胞的遗传稳定性得到保证。
这种技术的针对性在于单独扩增某一特定细胞种类，以满足特定的研究或治疗需求。
四、三维培养技术三维培养技术是相对于传统的二维培养而言的一种新兴技术。
在这种技术中，干细胞被培养在具有类似其生理环境的三维细胞支架上。
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（TOC约束理论）干细胞常用实验技术实验室内部的人胚胎干细胞protocol人类胚胎干细胞H1和H9维持方案一、试剂配制饲养层细胞培养基Fibroblast-DMEM Media (F-DMEM)DMEM (GIBCO 11960-044) 450mlFCS GIBCO 16000-044 50ml 10%Pen/Strep 2.5ml 50IU/mlL-glut GIBCO 25030-081 5ml 2uM/ml人类胚胎干细胞培养基HESC-MediaKO-DMED GIBCO 10829-018 480mlKOSR GIBCO 10828-028 120ml 20%10mM NEAA GIBCO 11140-050 6ml 0.1mML-glut(0.2M) GIBCO 25030-081 6ml 2mMPen/Strep 3ml55mM BME GIBCO 21985-023 1.1ml 0.1mMITS GIBCO 41400-045 6ml4-80C避光保存。
用前每50毫升加200-400ng bFGF细胞冻存培养基FBS-DMSOFCS GIBCO 16000-044 9ml 90%DMSO SIGMA D2650 1ml 10%细胞消化液Trypsin-EDTA0.25% Trysin-1mM EDTA GIBCO 25200-056 2ml 0.05%,0.2mMPBS(-) 14190-144 8mlMEF细胞有丝分裂终止液Mito CMitomycin C 0.2mg 0.05mg/mldd-H2O 15230-162 4ml避光保存。
Mito C的终浓度为10ug/ml即40吸ul 工作液加到2ml F-DMEM 中。
.0.1% Gelatin(用于培养皿的包被)1% Gelatin 40ml 0.1%ddH2O GIBCO 15230-162 360ml高压消毒。
二、培养方案一) 饲养层细胞的培养1、主要实验材料（1）培养液为F-DMEM。
（2）小鼠周龄为7～8w的性成熟母小鼠和周龄为8w的种公鼠。
2. 小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)的培养（1）小鼠胚胎的准备1)性成熟母小鼠与种公鼠按1公（♂）:2母（♀）比例合笼。
2)每天早上观察母小鼠阴道口。
有乳白色或蛋黄色冻胶状物(阴道栓)即确定为怀孕。
见栓当天上午定为怀孕的0.5d。
3)取怀孕12.5～14.5d母鼠,断颈处死，无菌条件下暴露子宫。
4)用镊子提起近子宫颈端,分离子宫系膜,剪断子宫角。
5)取出整个子宫,在无菌滤纸上吸干血迹,置于有PBS或无血清DMEM平皿内。
用PBS洗涤三次,弃除表面残余血迹。
6)沿子宫系膜侧剪开子宫,取出带有胎膜的胚胎,置于另一盛有PBS 或无血清DMEM平皿内,充分洗涤,弃除表面红细胞。
7)用小镊子撕破胎膜,取出胎鼠,弃除胎膜,用PBS洗涤三次。
8)去除胚胎头部、内脏和四肢，将躯干部置于另一盛有PBS或无血清DMEM平皿内,用PBS 至少洗涤三次,充分弃除红细胞。
（2）小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)的培养二) 培养方法有两种: 组织块培养法和单细胞悬液培养法。
组织块培养法：1) 用无菌眼科小剪刀或刮胡刀片将鼠胚躯干剪(切)成1mm3以下的碎块,吸置于离心管内。
2) 室温下静置5～10min, 弃上层液，留下胚胎组织碎块。
3) 向装有鼠胚组织碎块的离心管内加入1ml消化液,轻轻吹吸30sec。
4) 加入等体积的培养液终止消化。
室温下静止5-10min。
5) 弃上清液,留下鼠胚组织块沉淀物。
6）加入5ml培养液重新悬浮鼠胚组织块,移入培养瓶内。
每5个鼠胚的组织块可使用1个100ml的培养瓶。
7) 补加适量的培养液,使组织块悬浮液能均匀分布于培养瓶表面。
37℃、5%CO2、饱和湿度培养箱内培养。
8) 培养开始的前两天不要晃动培养瓶。
第三天见组织块附着培养瓶表面, 周围生长出细胞。
补充培养液或更换培养液,继续培养。
每天观察。
9) 待细胞连成一片时,即可消化。
消化时弃培养液,用PBS洗涤一次；加适量消化液（以能覆盖细胞层为度），在室温下作用大约30sec；弃消化液，让残余消化液继续作用。
轻敲培养瓶底, 当细胞层出现裂隙时，加入培养液终止消化。
或在倒置显微镜下观察，当细胞与细胞之间分开即可终止消化。
10）补加培养液，轻轻吹打均匀，吸置离心管内，静置5～10min。
11）上层为单细胞悬液,下层为组织块沉淀。
将上层单细胞悬液轻轻吸置另一离心管内,弃组织块。
12）以800～1000rpm 5min离心，弃上清。
加入培养液,重新悬浮细胞沉淀。
以1:3比例传代。
采用3～5代细胞作为饲养细胞。
单细胞悬液培养法：1)～5）步骤同组织块培养法1)～5) 步骤。
6)重复组织块培养法3）～4）步骤5～6次,即重复消化鼠胚组织块5～6次。
每次消化后都收集上层液即单细胞悬液。
最后一次消化后弃组织块。
７)将收集到的单细胞悬液离心，800～1000rpm 5min。
８)弃上清,加入培养液,轻轻吹吸,制备成均匀的单细胞悬液。
9) 移置培养瓶内。
5个鼠胚制备出来的单细胞悬液可以使用3个100ml的培养瓶。
10)补加适量的培养液，吹吸均匀。
37℃、5%CO2、饱和湿度培养箱内培养。
每天观察。
11)培养2～3d后,细胞连成片,即可消化。
消化过程同组织块培养法９)步骤。
12)以1:2～1:3比例传代培养,2～3d传一代。
采用3～5代细胞作为饲养细胞。
（3）培养结果在培养MEF初始的1～2代时,杂细胞（非成纤维细胞的其他组织细胞）较多,细胞形态多样；在第三代开始时,杂细胞逐渐减少。
小鼠胚胎成纤维细胞为梭状；但连成片时,由于受杂细胞的影响,形态不够典型。
三）细胞冷冻1. 当细胞90%-100% 融合时,尤其细胞少量堆聚可冷冻。
2. 处理方法同传代培养1-8，每25 cm2 的细胞加1ml FBS-DMSO重悬细胞。
3. 每个冷冻管编号加1ml细胞悬液。
4. 置入40C1小时，放入1cm厚的泡沫盒中置入-800C过夜，置入液氮长期保存。
四）灭活饲养层细胞并备饲养层皿试剂和材料HESC Medium、PBS(+)、PBS(-)、Mito C、Trypsin-EDTA离心管、移液管Mito C处理（以25 cm2培养瓶为例）1. 需要铺皿前一天，全换液。
.2. 留2ml培养基。
3. 加40ul Mito C（10ug/ml）。
4. 培养皿底以0.1％Gelatin溶液覆盖预处理。
5. 3小时后，去培养基，处理方法同传代方法。
6. 重悬细胞，细胞计数，以、7.0×104/ cm2（MEF）铺皿。
7. 置于培养箱常规培养。
8. 15分钟后，取出皿，吹打皿中央，重新置于培养箱中培养。
五、复苏及冻存hES细胞细胞被冻存在10％二甲基亚砜（DMSO）中防止结晶的形成，结晶的形成会损害细胞。
然而，二甲基亚砜对细胞有毒性，快速的进行细胞复苏是很重要的。
步骤：1．从液氮中取出一管细胞；2．将冻存管置于37℃水浴中2分钟（或放到管内溶液恰好完全溶解）；3．将细胞转移到一15ml Falcon管中；4．加入5ml ES培养基（用培养基冲洗冻存管）；5．离心200g×5min；6．弃上清，用2ml ES培养基重悬细胞，吹打10次；7．接种在明胶包被（见下文）的6孔或6cm组织培养皿；8．孵育。
冻存细胞冻存液：90％HS和10％二甲基亚砜步骤：1．1×PBS洗细胞并留少许PBS在培养皿内；2．用细胞刮刀收集细胞；3．将细胞转入15ml Falcon管内并离心200g×5min；4．弃去上清并将细胞重悬于冷的冻存液中。
5．分装于冻存管内，每管1ml；将冻存管装入Nalgen冻存盒内。
6．置－80℃过夜，第二天移入液氮。
转载自丁香园1、Stem Cell Analysis干细胞分析（功能、表型、核酸含量、边群）[London Research Institute]brief introduction：Stem Cell Analysis ,FACS Laboratory, London Research Institute干细胞分析，包括以下四方面内容：Functional AnalysisPhenotypingNucleic Acid contentSide Population analysis2、Production of ES Cell Chimeras by Aggregation wtih Eight-Cell Stage Embryos [Nagy Lab，Mount Sinai Hospital] brief introduction：Production of ES Cell Chimeras by Aggregation wtih Eight-CellStage Embryos[Nagy Lab，Mount Sinai Hospital]3、Production of Completely ES Cell-Derived Fetuses by Aggragation with Tetraploid Embryos[Nagy Lab，Mount Sinai Hospital]brief introduction：Production of Completely ES Cell-Derived Fetuses by Aggragation with Tetraploid Embryos Nagy Lab，Mount Sinai Hospital4、Picking ES Cell Colonies and Transferring Them to 24-Well Culture Dishesbrief introduction：Picking ES Cell Colonies and Transferring Them to 24-Well Culture DishesFrom the Laboratory of Dr. Allan Bradley Baylor College of Medicine, Houston, Texas5、Preparation of Feeder Layers And SNL Stocks [Baylor College of Medicine]brief introduction：Preparation of Feeder Layers And SNL Stocks ,Allan Bradley's Lab, Baylor College of Medicine, Houston, Texas6、Preparing 48-Well Plate Feeders[Baylor College of Medicine]brief introduction：Preparing 48-Well Plate FeedersFrom the Laboratory of Dr. Allan Bradley ,Baylor College of Medicine, Houston, Texas7、Freezing Embryonic Stem (ES) Cell Clones in 96-Well Plates冻存96空板中的胚胎干细胞克隆[Baylor College of Medicine] brief introduction：Freezing Embryonic Stem (ES) Cell Clones in 96-Well Plates the Laboratory of Dr. Allan Bradley ,Baylor College of Medicine, Houston, Texas8、In Vitro Differentiate ES cells into glial cells and neurons 胚胎干细胞体外分化为神经元和神经胶质细胞(Nagy Lab，Mount Sinai Hospital)brief introduction：Differentiate ES cells into glial cells and neurons ,Nagy Lab，Mount Sinai Hospital胚胎干细胞体外分化为神经元和神经胶质细胞9、In Vitro Differentiation of ES Cells into Cystic Embryoid Bodies 胚胎干细胞体外分化为囊胚体(Nagy Lab，Mount Sinai Hospital)brief introduction：In Vitro Differentiation of ES Cells into Cystic Embryoid Bodies ,Nagy Lab，Mount Sinai Hospital 胚胎干细胞体外分化为囊胚体10、In Vitro Differentiation of ES Cells into Cardiac Muscle胚胎干细胞体外分化成心肌细胞(Nagy Lab，Mount Sinai Hospital ) brief introduction：In Vitro Differentiation of ES Cells into Cardiac Muscle Nagy Lab，Mount Sinai Hospital11、Isolation of Primary Fibroblasts from Mouse Embryos 从小鼠胚胎分离纤维原细胞Baylor College of Medicinebrief introduction：Isolation of Primary Fibroblasts from Mouse Embryos , Allan Bradley's Lab, Baylor College of Medicine, Houston, Texas12、ES Cell Subcloning Protocol 胚胎干细胞亚克隆(NIH Stem Cell Unit)brief introduction：ES Cell Subcloning Protocol, NIH ，Stem Cell Unit13、ES and TS cell freezing/thawing胚胎干细胞冻存复苏brief introduction：ES and TS cell freezing/thawing, Nagy Lab,Samuel Lunenfeld Research Institute, Room 881 ,Mount Sinai Hospital该实验室专著于小鼠遗传学以及其跟人类疾病关系14、ES Cell Culture and Manipulation (The Cancer Center at Washington University)brief introduction：ES Cell Culture and Manipulation (The Cancer Center at Washington University)15、ES / MEF cell culture and electroporation of targeting construct 胚胎干细胞培养及电穿孔brief introduction：This website is an online resource for those interested in murine transgenesis. Within this site you will find information pertaining toresearch and techniques employed in the field of transgenics, including both DNA microinjection and embryonic stem cell injection.16、Electroporation of ES Cell 胚胎干细胞电穿孔[Mount Sinai Hospital]brief introduction：Electroporation of ES Cell ,Nagy Lab,Samuel Lunenfeld Research Institute, Room 881 ,Mount Sinai Hospital胚胎干细胞电穿孔，该实验室专著于小鼠遗传学以及其跟人类疾病关系17、Culture of Human Embryonic Stem Cells (hESC)人胚胎干细胞培养[NIH Stem Cell Unit]brief introduction：Culture of Human Embryonic Stem Cells (hESC),NIH Stem Cell Unit人胚胎干细胞培养，来自NIH Stem Cell Unit的材料，该网址下还有许多NIH关于干细胞的资料。