安捷伦1260液相操作规程
安捷伦1260型高效液相色谱仪详细操作规程
安捷伦1260型高效液相色谱仪详细操作规程1.目的：规范Agilent 1260高效液相色谱仪维修、保养、校正操作。
2.适用范围：本公司化验室Agilent 1260高效液相色谱仪的维修、保养。
3.有关责任：化验室精密仪器室4.引用标准：仪器说明书及Agilent化学工作者现场操作培训教材5.规程内容：5.1开机前准备5.1.1根据实验要求配制流动相，须经0.45μm滤膜过滤，之后再进行脱气处理，使用前必须用超声波振荡l0-15min，按无机相和有机相分开别装入溶剂瓶A（装有洗盐装置，最好固定盛放无机盐水相）、B中；对照品和样品溶液进样前要经0.45μm滤膜过滤。
5.1.2若流动相中含有缓冲盐,则必须以每分钟2～3滴的速度虹吸10%的异丙醇水冲洗seal-wash，以防有盐结晶在泵头产生而损坏泵头。
5.2.采样前准备5.2.1打开计算机,进入Windows 系统, 从上到下依次打开各模块电源。
5.2.2待各模块自检完成后，双击桌面上的“仪器1联机”图标，将自动进入化学工作站画面。
5.2.3从“视图”菜单中选择“方法和运行控制”画面,也可单击工作站画面左侧的“方法和运行控制”项，进入方法和运行控制窗口。
5.2.4打开Purge阀（逆时针），右击“泵”图标出现参数设定菜单单击“设定泵”选项进入泵编辑画面。
5.2.5设“流量”逐步增大流速至5ml/min ，A通道设到100%，单击“确定”。
5.2.6单击“泵”图标，出现参数设定菜单，单击“泵控制“选项选中“开”单击“确定”则系统开始Purge，直到管路内由溶剂瓶A到泵入口无气泡为止；切换B通道(B通道设到100%)继续Purge直到所有通道管路内均无气泡为止。
(查看柱前压力，若大于10Bar，则应更换排气阀内滤芯/过滤白头。
)5.2.7将泵的流量设到0.5ml/min，若使用双泵则应设定溶剂配比，如A=80%，B=20%；关闭排气阀（顺时针）；再将流量设到0.8ml/min，2分钟后设定至方法所需流速，冲洗色谱柱20-30min。
安捷伦1260全自动高效液相操作规程
安捷伦1260全自动高效液相操作规程
1.样品的准备：最好使用流动相溶解样品；进样前样品需过滤膜，除去悬浮不溶杂质。
2.流动相的选择和处理：使用高纯度试剂，所有含盐或含水溶剂必须膜过滤，100%色谱纯有机试剂，滤膜过滤后方可使用；流动相现配现用，剩余的流动相（水相）及时清理，实验间隔>2天，建议倒掉；任何溶剂，如果有可见悬浮物、菌丝，不可使用；更换流动相之前，必须事先阅读色谱柱的说明书；除非有说明，反相柱不得使用100%水。
3.开机注意事项：先开HPLC仪器开关、脱气机、泵和紫外检测电源；等各电源开启后（30s），打开在线软件；冲柱子和平衡时，暂不开紫外灯；平衡完后，打开紫外灯，设置梯度和波长或引用方法。
4.实验结束：C18反相柱应用色谱甲醇保存，不能含任何酸、盐；用甲醇替换通道，四个过滤头均存放于有机溶剂瓶中，以防长菌；流速调零，再关闭软件，最后依次关闭脱气机、泵和紫外检测器的电源。
安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程资料
安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程资料安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程一、开机（1）打开计算机，登陆windows操作系统。
（2）打开主机各模块电源（从上至下），待各模块完成自检后，再双击桌面“仪器1联机”图标，进入化学工作站，从视图菜单中选择“方法和运行控制”画面。
（3）进行仪器配置，点仪器-仪器配置-选择所需模块-自动配置-输入IP地址：192.168.254.11。
把各流动相放入相应的溶剂瓶中。
（4）编辑方法。
方法-新建方法-方法-编辑完整方法-编辑各项（四元泵、TCC、VWD、仪器曲线参数设定，仪器参数默认），完成后，文件→方法另存为→编辑名称，保存方法。
（5）排气。
旋开排气阀（逆时针），右单击“四元泵”图标出现快捷键，点击“方法”设置泵流速，排气可设置1.2ml/min，l流量梯度100，也可5ml/min，流量梯度10。
一般冲洗3-5min，注意倾斜储液瓶使过滤头处的气体进入管道才可使气体排出，观察管路中气体位置，以其排净为目的。
关泵，关闭排气阀（顺时针）。
（注意：先开排气阀，再开泵，先关泵，后关排气阀）。
（6）在让液体进入柱子之前应将甁填充设置为实际值，谨防空进。
将泵流速设置1ml/min,用过渡液即缓冲液冲洗色谱柱20—30分钟。
（7）换流动相，待柱前压力基本稳定后，打开检测器，视图，在线信号，选择信号，观察基线情况。
二、数据采集信息编辑及进样（1）编辑样品信息：点“单次样品”小瓶，或点击运行信息-单次进样，设定操作者姓名，样品数据文件名，进样量等。
（2）编辑好样品信息后方可进样。
三、数据处理（1）打开桌面“仪器1脱机”，单击“数据分析”进入数据分析画面。
（2）从“文件”菜单中选择调用信号，选择您的数据文件名，单击确定。
（3）谱图优化。
从“图形”菜单中选择“信号选项”从范围中选择“自动量程”及合适的显示时间，或选择“自定义量程”调整，反复进行，直到图比例合适为止。
安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程
安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程一、仪器介绍二、前期准备1.打开仪器电源，待仪器自检完成后，确保所有指示灯都亮起。
2.检查溶剂瓶的液位，确保足够的溶剂供给。
3.清洁好色谱柱并连接到系统中。
三、仪器启动1.打开色谱软件，选择相应的方法。
2.点击“系统”菜单，选择“启动系统”命令，系统开始进行初始化。
3.在系统初始化完成后，点击“准备”菜单，选择“准备系统”命令，系统开始进行一系列的自动化准备工作，比如冲洗和平衡柱子。
4.检查系统的压力和温度，确保在正常范围。
四、样品进样1.准备好待测样品和标准品。
2.将样品装入进样瓶中，注意不要超过瓶口。
3.将进样瓶插入样品进样系统中，按照方法设置的条件进行进样。
4.点击软件界面上的“进样”按钮，开始进样。
五、色谱柱选择1.根据待测样品的性质和分离特点，选择合适的色谱柱。
2.将色谱柱连接到色谱仪系统中。
3.检查色谱柱的压力和温度，确保在正常范围。
六、色谱条件设置根据分析方法的要求，设置好色谱条件，包括流量、温度、柱温等参数。
七、检测器设置1.根据需要选择合适的检测器，比如紫外检测器、荧光检测器等。
2.设置检测器的工作参数，如波长、增益、基线噪声等。
八、开始分析1.在样品进样后，点击软件界面上的“开始”按钮，开始进行色谱分析。
2.监控检测器输出的信号，根据需要可以对信号进行放大或调整。
九、结果解析1.根据所用方法的要求，对分析结果进行解析。
2.可以通过软件导出结果并进行后续处理。
十、仪器关机1.关闭色谱仪软件。
2.关闭色谱柱进样系统。
3.关闭色谱仪电源。
此为安捷伦1260高效液相色谱仪的操作规程，希望能对使用者提供一定的参考和帮助。
在操作过程中，应严格按照安全操作规范进行，并及时进行维护和保养，以保证仪器的正常运行。
安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程资料
安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程一、开机（1）打开计算机，登陆windows操作系统。
（2）打开主机各模块电源（从上至下），待各模块完成自检后，再双击桌面“仪器1联机”图标，进入化学工作站，从视图菜单中选择“方法和运行控制”画面。
（3）进行仪器配置，点仪器-仪器配置-选择所需模块-自动配置-输入IP地址：192.168.254.11。
把各流动相放入相应的溶剂瓶中。
（4）编辑方法。
方法-新建方法-方法-编辑完整方法-编辑各项（四元泵、TCC、VWD、仪器曲线参数设定，仪器参数默认），完成后，文件→方法另存为→编辑名称，保存方法。
（5）排气。
旋开排气阀（逆时针），右单击“四元泵”图标出现快捷键，点击“方法”设置泵流速，排气可设置1.2ml/min，l流量梯度100，也可5ml/min，流量梯度10。
一般冲洗3-5min，注意倾斜储液瓶使过滤头处的气体进入管道才可使气体排出，观察管路中气体位置，以其排净为目的。
关泵，关闭排气阀（顺时针）。
（注意：先开排气阀，再开泵，先关泵，后关排气阀）。
（6）在让液体进入柱子之前应将甁填充设置为实际值，谨防空进。
将泵流速设置1ml/min,用过渡液即缓冲液冲洗色谱柱20—30分钟。
（7）换流动相，待柱前压力基本稳定后，打开检测器，视图，在线信号，选择信号，观察基线情况。
二、数据采集信息编辑及进样（1）编辑样品信息：点“单次样品”小瓶，或点击运行信息-单次进样，设定操作者姓名，样品数据文件名，进样量等。
（2）编辑好样品信息后方可进样。
三、数据处理（1）打开桌面“仪器1脱机”，单击“数据分析”进入数据分析画面。
（2）从“文件”菜单中选择调用信号，选择您的数据文件名，单击确定。
（3）谱图优化。
从“图形”菜单中选择“信号选项”从范围中选择“自动量程”及合适的显示时间，或选择“自定义量程”调整，反复进行，直到图比例合适为止。
（4）积分。
从“积分”中选择“自动积分”，若积分结果不理想，从菜单中选“积分事件”，更改数据为合适的“斜率灵敏度、峰宽、最小峰面积、最小峰高”，从“积分”中选择积分选项，则数据被积分，如积分结果不理想则修改相应的积分参数直到满意为止。
安捷伦1260操作规程
安捷伦1260操作规程安捷伦（Agilent）1260操作规程一、仪器概述安捷伦1260高效液相色谱仪是一种用于液相色谱分析的仪器，具有高灵敏度、高分辨率和高效率的特点。
该仪器由进样器、色谱柱、色谱泵、检测器等组成。
二、仪器准备1. 确保仪器的电源已连接并接通。
2. 检查进样器、色谱柱和检测器是否安装正确。
3. 检查液相色谱仪的液相系统是否已进行适当的液相填充，以及是否有足够的溶剂。
三、方法设置1. 打开色谱软件，并选择合适的方法模板。
2. 根据分析需求，在方法设置中输入样品信息、进样量、流速等参数。
3. 设置检测器的波长、增益和测量范围。
四、进样操作1. 打开进样器的盖子，将待测样品加入样品瓶中。
2. 点击软件中的进样按钮，设置样品名称和进样量。
3. 将样品瓶放入进样器，并关闭盖子。
4. 点击软件中的进样按钮，开始进样。
5. 进样完成后，从进样器中取出样品瓶，并将它放入垃圾桶中。
五、色谱柱操作1. 打开色谱柱的阀门，并将柱端与色谱柱连接。
2. 检查色谱柱是否没有泄漏，如果有泄漏，则需重新连接。
3. 检查色谱柱的温度，确保它处于合适的温度范围内。
六、液相泵操作1. 打开液相泵的电源，并连接到电脑上。
2. 设置合适的流速和梯度梯度。
3. 点击软件中的启动按钮，开始进行分析。
七、数据分析1. 使用色谱软件进行数据采集和分析。
2. 根据需要选择适当的数据处理方法，如峰面积计算、定量分析等。
3. 导出分析结果并保存。
八、仪器维护1. 分析结束后，关闭液相泵、进样器、色谱柱和检测器等设备的电源。
2. 清洗色谱柱和进样器，保持其清洁。
3. 定期检查仪器的连接线和电源线是否有松动或损坏。
九、安全操作1. 在操作仪器时，注意安全，避免接触到有害化学品。
2. 在操作过程中，严禁随意触摸仪器或移动连接线。
3. 在操作过程中，如遇到异常情况，请及时停止分析并向管理员报告。
通过以上操作规程，可以有效地使用安捷伦1260高效液相色谱仪进行样品分析。
安捷伦1260型HPLC使用操作
安捷伦1260型HPLC使用操作1.准备工作-打开高效液相色谱仪电源，并确保与计算机的连接稳定。
-打开色谱柱箱的前盖，并检查柱箱是否安装了所需的柱。
-检查并确认进样器和检测器的所有连接口均已连接到系统中。
-打开色谱仪控制软件，并确保与色谱仪的连接正常。
2.样品准备和进样-准备样品溶液，并使用过滤器将其过滤以去除悬浮物。
-选择适当的进样方式，可以是自动进样器、手动进样或在线进样。
-根据进样方式的不同，设置进样器参数，并将样品注入进样器。
-设置进样体积和进样流速。
3.设定色谱柱和流动相条件-选择合适的色谱柱，根据分析需要选择固定相材料和尺寸。
-设置所需的流动相条件，包括流动相组成、流速和梯度程序等。
-确保流动相的pH值适合分离物质的性质。
4.开始运行HPLC实验-在色谱仪软件中设置分析方法，包括运行时间、梯度程序和检测波长等参数。
-点击运行按钮，开始HPLC分析实验。
-监控进样、分离和检测过程，并保持对系统的稳定控制。
5.数据分析和结果解读-实时监测实验过程中的色谱图和峰形。
-根据标准品或已知样品进行定量分析，并计算所需的峰面积和浓度。
-使用色谱仪软件进行数据分析，并生成报告和结果图表。
-解读分析结果，如峰形和保留时间，确定分离物质的纯度和结构。
6.实验后处理-关闭色谱仪电源。
-清洗色谱柱和进样器，以及其他与样品接触的部件。
-将废液正确处理，并清理实验台面。
-存储和整理实验数据和结果文件，以备后续分析和参考之用。
以上是安捷伦1260型HPLC使用操作的基本步骤，根据具体的实验需求和样品特性，可能需要进行一些调整和优化。
熟悉和掌握这些操作步骤，可以提高实验的效率和结果的准确性。
安捷伦1260液相操作规程
安捷伦1260液相操作规程一开机1 打开计算机，登录windows操作系统。
2 打开主机各模块电源（从上至下），待各模块完成自检后，双击桌面“仪器1联机”图标，进入化学工作站，出现进样器，泵，检测器，柱温箱四个图标。
若没有出现，从“视图”菜单中选择“方法和运行控制”选项。
二排气1 把各流动相放入溶剂瓶中2 旋开排气阀（逆时针），右单击“四元泵”图标出现快捷键，点击“方法”选项进入泵编辑画面。
将泵流速设到5ml/min，溶剂瓶A设到100％，开泵，排出管线的气体3分钟，柱压＜10bar。
3 依次切换到B,C,D溶剂瓶排气，待排气结束，关泵。
4 将泵的流速设到1.0ml/min，将多元泵设置成做样时的溶剂配比，关闭排气阀（顺时针）。
5 开泵，待柱压稳定后，基线平衡后方可进样。
三设置方法和调用方法1 设置进样量，在“进样器”的模块中，点击鼠标右键，在“方法”中，设定进样量。
在进样模式中输入进样量。
“标准进针”——只能输入进样体积。
“针清洗后进样”——可以输入进样体积和洗瓶位置。
2 在“检测器”模块中，点击鼠标右键，点击“控制”，打开检测器的灯，点击“确认”。
3 在“检测器”模块中，点击鼠标右键，点击“方法”，一般选择“与泵，进样器一致”。
4 紫外检测器参数设定：在“波长”下方的空白处输入所需的检测波长。
5 以上模块设置好后，从“方法”菜单中，选中“方法另存为”，输入方法名，点击“确认”。
6 从“方法”菜单中，选择“调用方法”，单击确认。
四设置序列和调用序列1 从“序列”菜单中，选中“序列参数”，选择数据文件路径和输入子目录名称，这样数据会自动保存在指定的文件夹中，方便查找。
2 从“序列”菜单中，选中“序列表”，在样品盘中依次放置好样品，命名样品的名称和批号，选择“方法”，点击“确认”。
3 从“序列”菜单中，选中“调用序列表”，把序列表改好后，点击保存当前序列模板。
点击“文件”，另存为序列模板。
4 点击“进样器”图标上的“序列”或者点击序列表中的“运行”，仪器进样。
安捷伦1260型高效液相色谱仪操作规程
一、开机1、开机前准备：流动相使用前必须过0.45um的滤膜（有机相的流动相必须为色谱纯；水相必须用新鲜注射用水，不能使用超过3天的注射用水，以防止长菌或长藻类）；把流动相放入溶剂瓶中。
A瓶：为水相B瓶：为有机相。
2、打开电脑，选Win 2000，进入Win 2000界面。
3、双击CAG Boodp server图标，放大CAG Boodp server小图标，出现窗口，5min 内打开液相各部件电源开关，等待1100广播信息后，表示通讯成功连接，关闭CAG Boodp serve窗口。
4、双击online图标，仪器自检，进入工作站。
该页面主要由以下几部分组成：——最上方为命令栏，依次为File，Run Control，Instrumen…等；——命令栏下方为快捷操作图标，如多个样品连续进行分析、单个样品进样分析、调用文件保存文件……等；——中部为工作站各部件的工作流程示意图；依次为进样器-输液泵-柱温箱-检测器-数据处理-报告；——中下部为动态监测信号；——右下部为色谱工作参数：进样体积、流速、分析停止时间、流动相比例、柱温、检测波长等。
4、从“View”菜单中选择“Method and control”画面。
二、编辑参数及方法1、开始编辑完整方法：从“Method”菜单中选择“New method”，出现DEF-LC.M，从“Method”菜单中选择“Edit entire method”，选择方法信息、仪器参数及收集参数、数据分析参数和运行时间表等各项，单击OK，进入下一画面。
2、方法信息：在“Method Comments”中加入方法的信息，如方法的用途等。
单击OK，进入下一画面。
3、泵参数设定：进入“Setup pump”画面，在“Flow” 处输入流量，如1ml/min；在“Solvent B”处输入有机相的比例如70.0，（A=100-B），也可在Insert 一行“Timetable”，编辑梯度；输入保留时间；在“Pressure Limits Max”处输入柱子的最大耐高压，以保护柱子。
安捷伦1260高效液相操作规程
安捷伦液相 1260 高效液相色谱操作规程1.前期工作查找资料（最好是外文文献）了解别人做该样品时常用的流动相和固定相。
如果还不清晰样品是什么物质，最起码也应该对其极性进行了解，为选择合适的流动相和固定相打好基础。
流动相选择注意事项：① 避免使用高粘度的溶剂作为流动相；② 所选用的流动相一定要与样品相溶；③ 各流动相之间可以很好的相溶；固定相选择注意事项：a. 正相色谱正相色谱用的固定相通常为硅胶（Silica）以及其他具有极性官能团胺基团，如（NH2，APS）和氰基团（CN，CPS）的键合相填料。
由于硅胶表面的硅羟基（SiOH）或者其他极性基团极性较强，因此，分离的次序是依据样品中各组分的极性大小，即极性较弱的组份最先被冲洗出色谱柱。
正相色谱使用的流动相极性相对照固定相低，如正已烷（Hexane），氯仿（Chloroform），二氯甲烷（Methylene Chloride）等。
b. 反向色谱反向色谱用的填料常是以硅胶为基质，表面键合有极性相对较弱官能团的键合相。
反向色谱所使用的流动相极性较强，通常为水、缓冲液与甲醇、乙腈等的混合物。
样品流出色谱柱的顺序是极性较强的组分最先被冲洗出，而极性弱的组分会在色谱柱上有更强的保留。
常用的反向填料有：C18（ODS）、C8（MOS）、C4（Butyl）、C6H5（Phenyl）等。
2.准备工作① 用于液相色谱分析的样品溶液使用前要经过0.15µm 过滤器过滤，必须达到均匀而无颗粒的状态；② 流动相一定要选用色谱级别的（最好是默克、飞世尔、时联等牌子的），并且在使用之前一定要使用0.4µm 过滤器过滤，再用超声波清洗仪脱气处理20-30min；③ 在连接柱子和色谱仪之前，阀件或者管路一定要清洗干净，（一般用异丙醇将管路清洗）3.仪器操作（一）将所选择的流动相加入相应的试剂瓶中：棕色瓶对应A 泵，该瓶中只能加双蒸水或者娃哈哈纯净水；B、C、D 泵根据需要添加。
Agilent 1260 LC型高效液相色谱仪标准操作规程
Agilent 1260 LC型高效液相色谱仪标准操作规程一、目的：建立Agilent 1260 LC型高效液相色谱仪标准操作规程，保证正确使用。
二、适用范围：适用于Agilent 1260 LC型高效液相色谱仪标准操作。
三、职责：研发部对本标准的实施负责。
四、正文：1 仪器组成及电源：1.1 仪器组成：本仪器由四元泵、真空脱气机、DAD检测器、安捷伦化学工作站组成。
1.2 电源：泵为110V稳压电源，检测器为220V稳压电源，工作站为220V稳压电源。
1.3开机运行前，更换溶剂瓶中的流动相，若管道为第一次使用，先用针管排空各管道中的气泡。
2 仪器硬件开启：自上而下或自下而上顺序开启各模块（真空脱气机、四元泵、自动进样器、VWD检测器、荧光检测器），打开电源指示灯，指示灯亮，显“绿色”；状态指示灯指示当前的状态，各模块进行自检（自动进样器的门板必须关上）。
3安捷伦化学工作站的操作：3.1开机运行步骤3.1.1 待各模块自检完成后，双击“仪器1联机”图标，化学工作站自动与1260LC通讯，进入工作站画面，各模块的软件图标均为绿色。
3.1.2从“视图”菜单中选择“方法和运行控制”画面，点击”视图”菜单中的”样品视图”、”系统视图”、“命令行”，来调用所需界面（或直接从“视图”菜单中选择“全部菜单”来调用全部界面。
3.1.3把流动相放入溶剂瓶中。
3.1.4打开“Purge”阀，点击泵图标，点击“设置泵”，进入泵编辑画面，设置流速为3-5ml/min，点击“确定”，则系统开始排空管道内的气泡，切换通道继续排空，直至所有要用的通道无气泡为止。
3.1.5点击泵图标，选“控制”选项，选中“关闭”关泵，关闭“Purge”阀。
3.1.6点击泵图标，设置流速冲洗柱子。
3.1.7点击泵下面的瓶图标，输入溶剂的实际体积和瓶体积，点击“确定”。
3.2数据采集方法编辑3.2.1从“方法”菜单中选择“编辑完整菜单”项，选中除“数据分析”外三项，点击“确定”，进入下一画面。
安捷伦LC1260液相色谱操作规程及使用注意事项
安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程及使用注意事项一、操作规程㈠开机1．把经过滤、脱气的各流动相装入贮液瓶中。
2．打开计算机，打开主机各模块电源（从上至下），再双击桌面“LC1260(联机)”图标，进入化学工作站。
3．旋开排气阀（逆时针），右键单击“四元泵”图标出现快捷键，点击“方法”选项进入泵编辑画面。
将泵流量设为“5mL/min”，溶剂A设为“100%”，打开泵，排出管路中的气体，直到由贮液瓶到泵入口整个管路中无气泡为止，此过程约需要5min。
4．依次切换到溶剂B、C、D，分别排气。
㈡数据采集1. 编辑样品信息：由“运行控制”进入“样品信息”，设定操作者姓名，样品数据，文件名等。
2. 编辑完整方法：从“方法”菜单中选择“编辑完整方法”项，单击“确定”进入“方法注释”，编辑好单击“确定”。
在“选择进样源”中选择“手动进样”单击“确定”，在“设置方法”中进行参数设定。
3. 四元泵参数设定：在“流速”处输入流量，如1mL/min，在“溶剂”处依据需要选中B、C、D并输入相应的百分数，在右侧注释栏中标明各溶剂的名称；设置“停止时间”和“后运行时间”,在“压力限值”处输入柱子的最大耐高压以保护柱子，在“时间表”添加编辑梯度。
4. TCC（柱箱）参数设定：在“温度”左侧下面的方框内输入所需温度,并选中它,右侧选中“与左侧相同”，使柱箱的温度左右一致。
5. VWD检测器参数设定：在“波长”右侧的空白处输入所需的检测波长，在“峰宽(响应时间)”下方点击下拉式三角框，选择合适的响应时间，再设置“停止时间”和“后运行时间”。
6. 仪器曲线设置：默认即可。
7. 关闭排气阀（顺时针），冲洗色谱柱20~30min，待柱前压力基本稳定后，打开检测器灯，观察基线情况。
8. 将进样器转动手柄逆时针转到LOAD位置，在环路全量进样时（定量环体积为20uL），用50~100 uL的液相进样针将2~5倍定量环体积的样品缓慢注入进样器中，再将进样器转动手柄顺时针方向迅速转到INJECT位置，将定量环中样品引入系统中。
安捷伦1260型高效液相色谱仪操作规程
安捷伦1260型高效液相色谱仪操作规程开机1.1 打开计算机，输入用户名和密码，进入Windows XP画面。
1.2 打开1260 LC 各模块电源(不分先后)。
待各模块自检完成后，双击“仪器2联机”图标，化学工作站自动与1260 LC通讯，进入工作站。
（注意：在“仪器2脱机”关闭的情况下，“仪器2联机”方能打开。
）1.3 从“视图”菜单中选择“方法和运行控制”画面，来调用所需的界面，正常情况会默认进入此界面。
1.4 确保对应溶剂瓶装入所要使用的流动相，左击“四元泵”模块下的“溶剂瓶”图标或右击“四元泵”下选择“瓶填充”，输入溶剂的实际体积和瓶总体积，可输入停泵的体积。
单击“确定”。
（注意：此操作很重要，以免气泡进入系统）。
1.5 轻轻旋开泵上的冲洗阀（缓缓旋开约1/4即可，不可用力太过）。
右击“四元泵”图标，出现参数设定菜单，单击“方法”选项，进入泵编辑画面。
设流量6ml/min，溶剂A设到100%；单击“确定”。
右击“四元泵”图标，选择“控制”选项，选中“打开”，单击“确定”，则系统开始排气，直到管线内（由溶剂瓶到泵入口）无气泡为止；切换到通道同法继续排气，直到所有要用通道无气泡为止（只需排所用到的通道即可）。
1.6 右击“四元泵”图标，出现参数设定菜单，单击“方法”选项，进入泵编辑画面。
设流量为：0ml/min，单击“确定”，轻轻关闭排气阀（旋紧即可）。
2. 数据采集方法、系列编辑：2.1 编辑完整方法：2.1.1. 从“方法”菜单中选择“编辑完整方法” 项，选中除“数据分析”外的三项，单击“确定”，进入下一界面“方法注释”。
2.1.2. 方法信息：在“方法注释”中写入方法的相关信息。
此项可忽略不写，单击“确定”，进入下一界面“选择进样源/位置”。
2.1.3. 自动进样器参数设定:选择“Als”的进样方式，单击“确定”，进入下一界面“设置方法”。
2.1.4. 方法参数设定：在“设置方法”界面选择“四元泵”选项，在“流量”处输入所需流量，如：1ml/min，在溶剂“B”、“C”、“D”处输入流动相所占比例(A=100-B-C-D)，也可在右侧“时间表”项下选择“添加”，编辑梯度。
标准安捷伦1260液相色谱仪操作规程
安捷伦1260液相色谱仪操作规程一、 仪器开机1、更换流动相（水需要超纯水，有机试剂需要色谱纯），其中水需要每次使用时更换，有机试剂长时间不用也需要更换2、开机：打开电脑、打开液相所有模块电源、点击电脑桌面上的工作站联机图标3、打开工作站上的所有电源，待其就绪（所有灯变绿）4、拧开排空阀，四元泵里设置流速5 ml/min，A 100%；3分钟后，设置B 100%；3分钟后设置流速至合适流速，关闭排空阀二、 运行样品1、新建方法或调用已有方法2、设置方法参数四元泵：设置流速、流动相比例、采集时间，若需梯度则设置梯度，确定自动进样器（ALS）：设置进样量，确定柱温箱（TCC）：设置柱子温度，确定紫外检测器(VWD)：设置紫外波长，确定设置好后保存方法3、在线信号中点击“改变”，可添加泵的压力，以及VWD的信号4、等待系统平衡，所有灯变绿，泵的压力稳、VWD的信号稳定（约20分钟）5、进样：（1）单针进样：运行控制—样品信息，设置进样位置，保存路径等后运行方法（2）序列进样：序列—序列参数，编辑保存路径；序列—序列表，编辑序列表，然后运行序列6、待仪器自动停止分析（四元泵中已设置采集时间）或手动点击“停止”图标（四元泵中未设置采集时间）三、 关机1、冲柱流动相中含缓冲盐：先用10%甲醇、90%水冲30分钟，再用90%甲醇、10%水冲30分钟（四元泵里设置比例）后关机流动相中不含缓冲盐：用90%甲醇、10%水冲30分钟（四元泵里设置比例）后关机2、关机关闭各模块，关闭仪器电源，关闭工作站，关闭电脑四、 数据处理1、调用需要处理的信号2、自动积分，或者手动积分，删除不要的峰3、打印面积百分比结果，记录每个峰的峰面积、保留时间，在excel中用已知浓度（标准样品）的峰面积作工作曲线，得到工作曲线方程4、未知样品的峰面积来算得其浓度。
安捷伦1260液相色谱仪操作流程
安捷伦1260液相色谱仪操作流程及注意事项1、配制流动相，水相置于棕色玻璃瓶中，有机相置于相应无色玻璃瓶中。
水相和有机相必须过滤，滤膜选用0.45有机系滤膜（尼龙）。
注意：过夜的流动相必须重新过滤。
2、流动相过滤后，置超声仪中超声20min。
3、将已超声的流动相轻轻换上，动作不要太剧烈，会产生气泡，注意不要把有机相和水相换反了（A是有机相，B是水相）。
4、将色谱柱接上，注意：流动相的流动方向必须和色谱柱上的箭头方向一致。
5、打开计算机电源、显示器开关，并输入密码。
6、依次从上往下打开液相色谱仪上的所有开关。
7、打开液相色谱在线工作站（online），输入密码。
8、打开的液相工作站上分为四个小部分，依次为进样器、泵、柱温箱及检测器。
在第二个部分设置流动相的体积及溶剂瓶的总体积。
9、脱气：旋开purge阀开关，右击泵部分，选择“method”，选择B相100%，流速1ml/min，选择确定；右击泵部分，选择“control”，选择pump “on”，10秒后，调节流速为3ml/min，10秒后，调节流速5ml/min，开始水相脱气3min，水相脱气结束后，将流速按照5ml/min-3ml/min-1ml/min的流程往下调。
然后开始有机相脱气，步骤同上，注意流速不可一下子从1ml/min调到5ml/min，需慢慢调节。
流动相脱气结束后，旋紧purge阀开关。
10、建立样品的色谱方法：设置进样体积，选择洗针进样，注明洗针位置；设置流动相比例、流速及梯度洗脱条件，序列进样时设置样品运行时间和后运行时间；打开柱温箱，设置柱温；打开紫外检测灯，设置检测波长。
全部设置好后，保存方法，不要覆盖别人的方法。
11、谱图保存路径的设置：View—preferences—data path（第二个选项）—remove旧的文件夹，add自己的文件夹。
再打开Sequence—Sequence parameter—选择Data path为自己的文件夹即可。
(完整版)Agilent1260液相色谱系统操作规程
在柱温箱上手动输入规定的温度即可。
6.3.2.5紫外检测器（VWD G1314F）参数设定
在“波长”下方的空白处输入所需的检测波长,如254nm, 在“峰宽 (响应时间)”下方点击下拉式箭头,选择合适的响应时间, 如>0.1min (2s)。 在“时间表” 中可以“插入”一行，输入随时间切换的波长，如1min ，波长=300nm。点击“确定”，进入下一参数设定。
6.3.1.6右键点击四元泵下面的空白处，选择“方法”选项，进入泵编辑画面，设置使用的流动相比例和流速或选择已有方法开始系统平衡。
6.3.1.7点击四元泵下面的瓶图标，输入溶剂的实际体积和瓶体积。 也可输入停泵的体积，点击“确定”。
6.3.2方法编辑
若已创建方法，可在“方法”菜单选择“调用方法”，选择相应的方法。若无，需按下面步骤建立：
手动进样针：取样前应用试样润洗3次以上，使用后应用甲醇/乙腈清洗3次以上。
废液处理：及时清理废液瓶，以防废液溢出。
6.8仪器安全保障
6.8.1每天使用仪器之前，要打开Purge阀将各个通道冲洗4～5min左右；
6.8.2及时更换Purge Valve内的过滤芯(当打开Purge Valve，流速为5ml/min压力高于10bar时)。Purge阀在关闭状态时，不宜过紧。
从专用包装盒内取出色谱柱，松动并取下色谱柱出入口的止动塞；
将与进样器相连的管线一端插入色谱柱入口端，拧紧螺帽；
(注意:安装时色谱柱上的流向标志应与管路的流动相流向一致。)
将与检测器相连的管线一端插入色谱柱出口端，拧紧螺帽。
6.2开机
6.2.1通电前应检查仪器设备之间的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。
6.3.5打印报告
安捷伦1260液相操作规程
安捷伦1260高效液相操作规程及注意事项一开机1)打开主机各模块电源(从下至上),待各模块完成自检后,再双击桌面“仪器2联机”图标,进入化学工作站,2)把过滤白头放入流动相溶剂瓶中。
3)旋开排气阀(逆时针),右单击“四元泵”图标出现快捷键,点击“方法”选项进入泵编辑画面。
将泵流量从1mL/min梯度上升至5mL/min,排出管路中的气体2—3分钟,直到管线内由溶剂瓶到泵入口无气泡为止,查看柱前压力(若大于10bar,则应更换排气阀内过滤白头),关闭排气阀。
4)重复上述步骤,依此切换到B、C、D溶剂分别排气。
5)将泵的流量设到实验用流速,按照色谱柱使用说明用相应溶液冲洗色谱柱20—30分钟。
6)点击四元泵下面的瓶图标,输入溶剂的实际体积和瓶体积,点击“确定”。
7)把缓冲液换成流动相,待柱前压力基本稳定后,打开检测器灯,观察基线情况,进入平衡系统。
二数据采集方法编辑若已创建方法,可在“方法”菜单选择“调用方法”,选择相应的方法。
若无,需按下面步骤建立:(1)从“方法”菜单中选择“编辑完整方法”,钩选“方法信息”、“仪器/采集”、“运行时选项表”三项,点击确定;(2)出现“方法信息”对话框,如有需要可将方法的描述信息输入,也可选择不输入任何信息,点击确定;(3)泵参数设定:在“流量”处输入流量,如1ml/min,在“溶剂B”处输入80.0,(A=100-B-C-D) ,也可“插入”一行“时间表”,编辑梯度。
在“压力限”处输入柱子的最大耐高压,如300bar,以保护柱子。
点击“确定”进入下一参数设定。
(4)柱温箱参数设定:手动输入规定的温度即可。
(5)紫外检测器(VWD)参数设定:在“波长”下方的空白处输入所需的检测波长,如254nm,在“峰宽(响应时间)”下方点击下拉式箭头,选择合适的响应时间, 如>0.1min(2s)。
在“时间表”中可以“插入”一行,输入随时间切换的波长,如1min,波长=300nm。
1260操作规范及注意事项
安捷伦液相操作规程及注意事项一、开机1.接通电源，打开计算机，进入windows操作系统；2.检查色谱柱（型号是否正确及进出口有无接反）；3.检查流动相（是否正确，溶剂是否够用）；4.打开主机各模块，待其完成自检后，双击桌面联机系统(online)，单击view，选择方法和运行控制画面；5.排气：逆时针旋转排气阀60-90°，右击“四元泵”图标出现快捷键，点击method选项进入泵编辑画面。
将泵流量设到5 mL/min，溶剂A设到100%，打开泵，排出管线中的气体2-3分钟，直到管线内由溶剂瓶到泵入口无气泡为止，查看柱前压力（若大于10 bar，则应更换排气阀内过滤白头）。
依次切换到B、C、D管道分别排气；6.将泵流量设为0.5 mL/min，设定溶剂配比，关闭排气阀。
随后将泵流量设为0.8 mL/min，2 min后设为1 mL/min，冲洗柱子20-30 min；7.待柱前压力基本稳定后，打开检测器灯，观察基线情况，待基线稳定后即可进样。
二、采集方法编辑1.编辑样品信息：由“运行控制”进入“样品信息”，设定操作者姓名，样品数据文件名及存储路径等；2.编辑方法信息：从“方法”菜单中选择“编辑完整方法”项。
选中项单击“确定”入下一画面“方法注释”，编辑好单击“确定”进入下一画面“选择进样源”，选中Als单击“确定”入下一画面“设置方法”进行参数设定。
最后保存方法；3.设置泵参数：在“流速”处输入流量，在“溶剂”处选中输入相应比例，在右面注释栏中标明各溶剂的名称；设置“stop time”和“post time”，在“压力限值”处输入柱子的最大耐高压以保护柱子如：250 bar，在“时间表”添加编辑梯度；4.设定进样器参数：在进样模式中输入进样量。
标准进针：只能输入进样体积不能洗针。
针清洗后进样：可以输入进样体积和洗瓶位置，针从样品瓶抽完样品后会在洗瓶中洗针。
注意：洗针瓶不盖盖子，以免污染针外表面。
安捷伦1260型高效液相色谱仪操作规程
安捷伦1260型高效液相色谱仪操作规程一、开机1、开机前准备：流动相使用前必须过0.45um的滤膜（有机相的流动相必须为色谱纯；水相必须用新鲜注射用水，不能使用超过3天的注射用水，以防止长菌或长藻类）；把流动相放入溶剂瓶中。
A瓶：为水相B瓶：为有机相。
2、打开电脑，选Win 2000，进入Win 2000界面。
3、双击CAG Boodp server图标，放大CAG Boodp server小图标，出现窗口，5min 内打开液相各部件电源开关，等待1100广播信息后，表示通讯成功连接，关闭CAG Boodp serve窗口。
4、双击online图标，仪器自检，进入工作站。
该页面主要由以下几部分组成：——最上方为命令栏，依次为File，Run Control，Instrumen…等；——命令栏下方为快捷操作图标，如多个样品连续进行分析、单个样品进样分析、调用文件保存文件……等；——中部为工作站各部件的工作流程示意图；依次为进样器-输液泵-柱温箱-检测器-数据处理-报告；——中下部为动态监测信号；——右下部为色谱工作参数：进样体积、流速、分析停止时间、流动相比例、柱温、检测波长等。
4、从“View”菜单中选择“Method and control”画面。
二、编辑参数及方法1、开始编辑完整方法：从“Method”菜单中选择“New method”，出现DEF-LC.M，从“Method”菜单中选择“Edit entire method”，选择方法信息、仪器参数及收集参数、数据分析参数和运行时间表等各项，单击OK，进入下一画面。
2、方法信息：在“Method Comments”中加入方法的信息，如方法的用途等。
单击OK，进入下一画面。
3、泵参数设定：进入“Setup pump”画面，在“Flow” 处输入流量，如1ml/min；在“Solvent B”处输入有机相的比例如70.0，（A=100-B），也可在Insert 一行“Timetable”，编辑梯度；输入保留时间；在“Pressure Limits Max”处输入柱子的最大耐高压，以保护柱子。
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安捷伦1260高效液相操作规程及注意事项
一开机
1)打开主机各模块电源（从下至上），待各模块完成自检后，再双击桌面“仪
器2联机”图标,进入化学工作站，
2)把过滤白头放入流动相溶剂瓶中。
3)旋开排气阀（逆时针），右单击“四元泵”图标出现快捷键，点击“方法”
选项进入泵编辑画面。
将泵流量从1mL/min梯度上升至5mL/min，排出管路中的气体2—3分钟，直到管线内由溶剂瓶到泵入口无气泡为止,查看柱前压力（若大于10bar，则应更换排气阀内过滤白头），关闭排气阀。
4)重复上述步骤，依此切换到B、C、D溶剂分别排气。
5)将泵的流量设到实验用流速，按照色谱柱使用说明用相应溶液冲洗色谱柱
20—30分钟。
6)点击四元泵下面的瓶图标，输入溶剂的实际体积和瓶体积，点击“确定”。
7)把缓冲液换成流动相，待柱前压力基本稳定后,打开检测器灯，观察基线情
况，进入平衡系统。
二数据采集方法编辑
若已创建方法，可在“方法”菜单选择“调用方法”，选择相应的方法。
若无，需按下面步骤建立：
（1）从“方法”菜单中选择“编辑完整方法”，钩选“方法信息”、“仪器/采集”、“运行时选项表”三项，点击确定；
（2）出现“方法信息”对话框，如有需要可将方法的描述信息输入，也可选择不输入任何信息，点击确定；
（3）泵参数设定：在“流量”处输入流量,如1ml/min，在“溶剂 B”处输入80.0,(A=100-B-C-D) ,也可“插入”一行“时间表”,编辑梯度。
在“压力限”处输入柱子的最大耐高压,如300bar，以保护柱子。
点击“确定”进入下一参数设定。
（4）柱温箱参数设定：手动输入规定的温度即可。
（5）紫外检测器（VWD）参数设定：在“波长”下方的空白处输入所需的检测波长,如254nm，在“峰宽(响应时间)”下方点击下拉式箭头,选择合适的响应时间, 如>0.1min(2s)。
在“时间表”中可以“插入”一行，输入随时间切换的波长，如1min，波长=300nm。
点击“确定”，进入下一参数设定。
（6）在“运行时选项表”中选中“数据采集”，点击“确定”。
（7）完整方法编辑完毕。
点击“方法”菜单，选中“方法另存为…”，输入一方法名称，点击“确定”。
（8）运行样品：从菜单“视图”中选中“在线信号”,选中“信号窗口1”,然后点击“改变…”钮,将所要绘图的信号移到右边的框中,点击“确定”。
从“运行控制”菜单中选择“样品信息”选项，输入操作者名称；在“数据文件”中选择“手动”或“前缀/计数器”。
（区别:手动--每次做样之前必须给出新名字,否则仪器会将上次的数据覆盖掉。
Pr—在前缀/计数器----“前缀”框中输入前缀，在“计数器”框中输入计数器的起始位，仪器会自动命名，如vwd数据0001，vwd数据0002……）点击“确定”，从“仪器”菜单选择“系统开启”。
三数据处理
1)从“视图”菜单中单击“数据分析”进入数据分析画面
2)从“文件”菜单选择“调用信号”选中您的数据文件名，单击“确定”。
3)谱图优化,从“图形”菜单中选择“信号选项”从“范围”中选择“自动量
程”及合适的显示时间单击“确定”,或选择“自定义量程”调整,反复进行直到图的比例合适为止。
4)积分:从“积分”中选择“自动积分”,积分结果不理想,再从菜单中选“积
分事件”，选项选择合适的“斜率灵敏度,峰宽,最小峰面积,最小峰高”.从“积分”菜单中选择“积分”选项则数据被积分.如积分结果不理想则修改相应的积分参数直到满意为止。
单击左边图标将积分参数存入方法。
5)打印报告:从“报告”菜单中选择“设定报告”选项进入画面:单击“定量结
果”框中“定量”右侧的黑三角选中“百分比法”面积百分比其它选项不变单击“确定”.从“报告”菜单中选择“打印”则报告结果将打印到屏幕上如想输出到打印机上则单击“报告”底部的“打印”钮。
四关机
1)样品测试完毕后，按照说明书替换色谱柱保存溶液，冲洗至基线平衡。
关机
前用相应的溶剂充分冲洗系统：60%乙腈/甲醇-水冲洗大约20min；（若使用了无机盐流动体系，则冲洗约30-60min.）或80%乙腈/甲醇-水冲洗大约20min，至然后关泵。
2)退出化学工作站，及其它窗口，关闭主机各模块电源（从上至下），关闭计
算机。
注意事项：
1)第一次使用时，请联系负责人或在熟练人员指导下使用
2)氘灯是易耗品，应最后开灯，不分析样品即关灯。
3)流动相使用前必须过滤，不要使用多日存放的超纯水（易长菌）。
使用前必
须进行过滤（0.22um滤膜抽滤）及脱气处理（可用超声振荡10-15min）。
4)配制90%水+10%异丙醇，以每分2—3滴的速度虹吸排出，进行seal-wash，
溶剂不能干涸。
5)使用前仔细阅读色谱柱的说明书，注意适用范围，如pH值范围、压力范围、
温度范围、流动相类型等。
6)样品配制：尽量用流动相配制试样。
必要时使用超声波处理试样，确保试样
完全溶解并混合均匀。
样品必须用0.22um针头过滤器对试样进行过滤（根据试样的性质选择有机相或水相针头过滤器）。
进样针取样前应用试样润洗3次以上，使用后应用流动相清洗3次以上。
7)废液处理：及时清理废液瓶，以防废液溢出。
8)每次使用完毕后，必须将过滤白头浸泡在60%乙腈溶液或100%甲醇中，不能
使用超纯水（易长菌）。
9)流速突然变大或变小会导致柱压的突然改变，时间久了柱子填料会坍陷或松
动，最终柱压下降，所以泵开始和结束前要注意缓慢改变流速。
10)每次使用完毕后，应当详细填写使用记录，包括流动相，柱子类型，遇到的
问题、维护方法等。
对实验中仪器的出错，应当详细填写发生情况及处理方法。
未能处理的，应向他人求证，并对下位使用者提出问题所在。
每次使用仪器之前，应当查看使用记录。