考马斯亮蓝蛋白快速染色液
考马斯亮蓝G250染液的配制
考马斯亮蓝G250染液的配制
1R250。
2100mg考马斯亮蓝G-250，溶于50mL 90%乙醇中，加入85%的磷酸100mL，最后用蒸馏水定容到1000mL。
此溶液在常温下可放置一个月。
310mg G-250，溶于5mL的95%乙醇中，此时溶液为蓝色，再加入了10mL的85%的磷酸，溶液为血红色，可是加水定容到100mL时又成为了蓝色，据文献说应该是褐色，原因：配置溶液的容器未洗干净，可能沾有蛋白质类药品。
用乙醇把容器全部认真的洗干净后重配，不过配好之后需要过滤才可以用。
4中文名为考马斯亮蓝G250，简称G250，分子式为C47H48N3O7S2Na，分子量为854.02，分析纯。
考马斯亮蓝G250是常用蛋白染色剂，在游离状态下呈红色，当它与蛋白质结合后变为青色。
蛋白质含量在0～1000μg范围内，蛋白质一色素结合物在595nm下的吸光度与蛋白质含量成正比，故可用比色法测定。
5中文名为考马斯亮蓝R250，简称R250，分子式为C45H44N3O7S2Na，分子量为825.97，考马斯亮蓝R250是常用蛋白染色剂，可用于染色丙烯酰氨凝胶和琼脂糖凝胶中的蛋白质。
6、考马斯亮蓝G250和R250都可以作为染色剂，不同的配方、不同的染色方法适合于不同性质的蛋白质。
7、考马斯亮蓝分为G250、R250和R350等，R为红蓝色，G为蓝绿色。
例如考马斯亮蓝G250即二甲花青亮蓝。
考马斯亮蓝染色套装使用说明
考马斯亮蓝染色套装使用说明货号：P1305保存：室温保存，至少一年有效。
规格：100ml+500ml产品简介：本考马斯亮蓝染色套装(Commassie Blue Staining Kit)采用了最经典的考马斯亮蓝染色和脱色方法，以考马斯亮蓝G-250为染料，可用于SDS-PAGE或非变性PAGE等蛋白电泳凝胶的常规染色和脱色，或Western 转膜后PAGE胶上残余蛋白的检测。
产品内容：考马斯亮蓝染色液100ml考马斯亮蓝脱色液500ml说明书1份使用方法：1、电泳结束后，取凝胶放入适量考马斯亮蓝染色液中(至少5倍胶体积)，确保染色液可以充分覆盖凝胶。
2、将凝胶置于摇床上缓慢摇动，室温染色至少2小时，低丰度蛋白染色需4小时以上。
3、染色结束后移除染色液，染色液通常可重复利用2-3次，但染色效果会略有影响。
4、将凝胶浸泡于和染色液等量体积的脱色液中，摇床上脱色4-8小时，期间更换3-5次脱色液。
注意事项：1.染色时间4小时以上效果最佳。
2.脱色可根据目的蛋白丰度和脱色效果随时终止，或延长脱色时间。
3.脱色越彻底，检测的蛋白量越低，脱色24小时一般可以检测出0.1ug蛋白量。
4.脱色后，将凝胶保存在水中，拍照或扫描保存图像。
或制成干胶保存。
相关试剂：P1300-500考马斯亮蓝蛋白胶快速染色液PC0020BCA蛋白浓度测定试剂盒PR1400低分子量蛋白MARKERPR1700预染次高分子量蛋白MARKERI1020IPTG溶液(50mg/ml)A101030%丙烯酰胺(29:1)T10705×Tris-甘氨酸电泳缓冲液P1300SDS-PAGE凝胶制备试剂盒。
考马斯亮蓝蛋白胶快速染色液使用说明
考马斯亮蓝蛋白胶快速染色液使用说明货号：P1300规格：500ml组成：溶液A10ml、溶液B500ml保存：2-8℃保存，1年有效。
产品简介：考马斯亮蓝蛋白胶快速染色液是一种即用型快速灵敏而且安全的染液，以考马斯亮蓝G-250为染料，可用于SDS-PAGE或者非变性电泳蛋白凝胶的快速染色，染色时间短，半小时内即可检测到蛋白电泳条带。
使用方法：工作液的配制，取100ml溶液B，加入2ml溶液A，混匀，此为工作液。
此工作液配好后请在一周内使用完，过期效果会有一定的影响。
1.将电泳后的PAGE胶（以8cm×10cm大小为例）取下放入容器中，加入50ml双蒸水或去离子水，加热至沸腾后停止，（可选：继续在脱色摇床上摇动5分钟），弃去水溶液。
2.加入25ml快速染色工作液，加热至沸腾后保持沸腾状态30-60秒，停止加热后继续在脱色摇床上摇动5-10分钟，弃去染色液（此时蛋白条带应已可见）。
3.加入约50ml水，加热至沸腾后保持沸腾状态30-60秒，停止加热后继续在脱色摇床上摇动5-10分钟，换水即可完成脱色，观察结果。
注意事项：1.染色前的清洗步骤（第一步）中，水的质量非常重要，质量越好灵敏度越高，研究证明若用自来水加热清洗，染色效果与灵敏度仅与常规甲醇考马斯亮蓝染色（分子克隆第二版）相同。
2.脱色时可用自来水清洗。
3.若要得到无背景的染色胶，可重复脱色步骤或将胶放在水中过夜。
4.经本产品染色的PAGE胶，胶的缩涨度小于5%，染色后的胶可在水中放置数月而无明显脱色。
5.每次加热后，继续在脱色摇床上摇动5分钟，可增强染色效果。
6.本染色液有轻微腐蚀性，请带手套操作。
相关试剂：P10154×蛋白上样缓冲液（含DTT）P1305考马斯亮蓝染色套装（染色液+脱色液）A101030%丙烯酰胺(29:1)T10705×Tris-甘氨酸电泳缓冲液SP1060SDS-PAGE凝胶制备试剂盒P001210×丽春红染色液。
考马斯亮蓝快速染色液
考马斯亮蓝快速染色液简介：考马斯亮蓝快速染色液(Commassie Blue Fast staining solution)是以考马斯亮蓝G250为染料可用于SDS-PAGE 或非变性PAGE 等蛋白电泳胶的快速染色，亦可用于Western 转膜后PAGE 胶上残余蛋白的检测。
Leagene 考马斯亮蓝快速染色液采用Leagene 自主研发的技术，在传统考马斯亮蓝快速染色液的基础上进行改良，是一种无毒的染色液，快速染色液，可以检测低达蛋白电泳条带。
其核心优点在于：无需对凝胶进行固定，无需煮沸，无需脱色，染色时间短，操作更加简单。
组成：自备材料：1、 水平摇床或侧摆摇床2、 蒸馏水3、 (可选)加热装置4、 20%甘油水溶液操作步骤(仅供参考)：1、PAGE 电泳结束后取凝胶放入约蒸馏水中，在摇床上摇动，弃液，重复上述步骤1次。
2、弃蒸馏水，加入Commassie Blue Fast staining solution ，使染色液能盖住凝胶。
3、(可选)凝胶置于考马斯亮蓝快速染色液中，在水浴锅或微波炉内加热至95～100℃，立即从加热装置中取出。
(此步骤可以使染色提高灵敏度或加快染色进程，亦可省略。
)4、在摇床上摇动染色，蛋白量大的条带10～15min 左右会出现，大部分蛋白条带会在30～60min 左右出现。
一般情况下，5h 能获得极佳效果。
5、出现清晰的目标蛋白条带即可停止染色，弃染色液。
6、加入适量的蒸馏水停止染色反应。
亦可以在摇床上摇动脱色，以便减少背景干扰。
7、把凝胶保存在水中，用于后续的拍照等。
保存在水中的凝胶会发生溶涨。
如需避免溶涨，可以把胶保存在含20%甘油水溶液中，长期保存可以制备干胶。
编号 名称 PT0013 PT0013 Storage 考马斯亮蓝快速染色液 100ml 500ml 4℃ 使用说明书 1份注意事项：1、PAGE电泳后凝胶采用蒸馏水清洗的目的在于去除凝胶中的SDS等干扰物质。
考马斯亮蓝染色法测定蛋白质的含量_2
考马斯亮蓝染色法测定蛋白质的含量
原理:考马斯亮蓝G-250与蛋白质结合后,染料的最大吸收从465nm变为596nm,蛋白质-染料复合物具有很高的消光系数,因此蛋白质测定的灵敏度较高,最低检出量为1ug蛋白质.染料与蛋白质的结合,大约只需2min,结合物的颜色在1h内是稳定的.一些阳离子乙醇等物质不干扰测定,但去污剂严重干扰测定,少量的去污剂可通过用适当的对照而消除,犹豫染色法简单迅速,干扰物质少,灵敏度高,现已广泛用于蛋白质含量的测定.
试剂:○1标准蛋白质溶液：可用牛血清清蛋白。
或根据牛血清清蛋白的紫外消光系数来确定
○2蛋白染色剂的配置：取100mg考马斯亮蓝G-250溶于50ml95%愚蠢，假如100ml85%磷酸，将溶液用水稀释到1000ml。
试剂的终浓度为0.01%考马斯亮蓝G-250，4.7%乙醇和8.5%磷酸
操作：1.标准曲线的绘制
（1）取7支试管，分别假如0.4ml，0.6ml，0.8ml，1.0ml，1.2ml，
1.4ml，1.6ml标准蛋白质溶液，用水不足到2ml
（2）去8支试管，0号加入0.1ml蒸馏水，1~7号试管一次加入0.1ml步骤（1）的标准蛋白质稀释液，然后各加入5ml
蛋白染色剂，充分振荡混合，2min后于595nm测定光吸收
值。
以蛋白质浓度为横坐标，光吸收值为纵坐标，绘制标
准曲线作为定量的依据。
2.样品的测定
去样品溶液0.1ml，用制定标准曲线的方法测595nm光吸度，用标准曲线计算蛋白质的含量。
实验结果
测定所用的标准曲线方程为：v=0．1296x＋0．0907。
考马斯亮蓝G-250法测量蛋白质含量与凯氏定氮法相比较误差范围3％～8％。
蛋白调用及染色脱色实验方案
蛋白调用及染色脱色实验方案
(1)考马斯亮蓝染色液 1000mL:
先称取考马斯亮蓝R250 10g于1000mL试剂瓶内，加入甲醇450mL 溶解，再加冰醋酸 100 mL和双蒸水450mL至大约1000mL。
室温可放置12个月以上。
染色液可倒入专用的回收试剂瓶，届时加入适量甲醇、考马斯亮蓝和大约10g/L的三氯乙酸后可重复使用。
(2)考马斯亮蓝脱色液10L:
千101洁净塑料桶内装入工业乙醇21，冰醋酸500ml，加入去离子水至10L，混匀，室温可放置12 个月以上。
(3)蛋白电泳凝胶的快速染色和脱色。
凝胶的染色和脱色干合话体积的微波炉盒中讲行。
电泳后的凝胶加入染色液(以刚没过凝胶即可)。
干微波炉加热约40-70sec至染色液刚刚沸腾(注意塑料盒的盖子不要盖的太紧以防染色液爆洗出)，然后于脱色摇床上继续染色约10min即可。
染色液请倒入专用的回收容器内。
以自来水小心地淋洗凝胶冲去金热料，然后倒入活量的脱色湾，微波加执至刚沸腾后干热色摇床上探动公10 min，倒掉脱色液，此时凝胶的蛋白条带即可看清。
重复以上脱色步骤一次，即可看清电泳条带。
扫描凝胶蛋白条带需要完全脱掉背景颜色，这需要重新换上脱色液室温摇床脱色2h以上。
考马斯亮蓝染色总结
12.5％考马斯亮蓝染色液的配制（含30％甲醇，10％乙酸）考马斯亮蓝R250 0.125g甲醇30ml冰乙酸10ml加ddH2O至100ml染胶1h~2h脱色液配制（含30％甲醇，10％乙酸）甲醇30ml冰乙酸10ml加dd H2O至100ml注：1. 染色液可回收利用；室温保存即可；甲醇可以用乙醇代替。
2.其它脱色液：（1）用水脱色，但效果非常不好，建议不要用。
（2）脱色液也可以用0.5％mol/l的氯化钠，没有气味，脱色效果也不错。
但胶可能会胀的厉害!（3）20%的甲醇和0.1M的tis-磷酸（PH6.5）先用tis-磷酸（PH6。
5）漂洗2min，然后用20%的甲醇漂洗1min（最好不要超过1min），最后用20%的NH4SO4固定30min3. dd H2O煮法脱色PAGE胶染色完毕后，如果用一般的甲醇－乙酸脱色液进行脱色，一般至少需要2－3h，可利用蒸馏水煮的方法：（1）. 先将500ml蒸馏水放在一个干净的烧杯中，在电炉上煮沸。
（2）. 将染色好的胶用DD水冲净后放入煮沸的蒸馏水中，煮3～5min。
（3）. 将DD水倒掉，看胶是否已经脱净，如果还不好，可以用少量水再煮一次。
一般整个脱色过程最多15min即可搞定！还可以避免每次脱色时的醋酸味！4. 重复利用（1）染色液和脱色液重复次数不一定的,可以根据他们的着染能力和脱色能力考虑是否换新的.夏季甲醇挥发快,用3~5次应该可以用.当然,用时要加盖.（2）脱色时注意防止挥发,脱色液可以用活性碳处理后反复用多次的.（3）脱色液反复使用，用两三次后用活性炭“包被”的滤纸过滤，滤纸可反复使用。
脱色液反复使用后，胶有点泛红，但不影响观察，如果要发表，建议用新配脱色液。
5. 加快染色和脱色速度（1）染色和脱色都可以在微波炉中加热甚至煮沸，很省时间。
但注意不要沸腾时间太长，否则容易把胶上煮出泡状的破损。
（2）若为了提高考染及脱色速度，可在45℃左右的水浴中进行，染色时间只需几分钟（其间轻轻晃动一二次，整个胶变为较深的亮兰色即可）。
考马斯亮蓝染色法
考马斯亮蓝染色法考马斯亮蓝染色法——标准方法1．电泳后，将凝胶转入一洁净的玻璃或塑料容器中。
加入5倍于凝胶体积的0．25％考马斯亮蓝R—250(溶解于50％甲醇和10％乙酸中)。
2．室温下振摇温育4h至过夜。
3．去除染色液，收集保存可重复使用20～40次。
4．依次在25％甲醇、7．5％乙酸中室温振摇下脱色。
灵敏度为0．1～0．5ttg蛋白／每条带。
注：①使用加热的染液或脱色液可以缩短染色或脱色的时间。
将染液或脱色液在微波炉或水浴中加热(大约50-6013)。
染色时间可缩短至20min，脱色时间约1—2h。
②加入泡沫橡胶(海绵)、羊毛状物或其他物品吸收染料，可以加快脱色时间，特别是在室温下脱色时。
考马斯亮蓝染色法——快速方法1．将凝胶放入一洁净的玻璃或塑料培养皿中加入5倍于凝胶体积的0．25％考马斯亮蓝R-250(溶解于50％三氯乙酸中)。
2．室温下振摇温育20min。
3．去除染色液，收集保存可重复使用多次，用水洗去未与凝胶结合的染料。
4．加入数倍体积的脱色液(25％甲醇、7％乙酸)。
必要时更换脱色液，将凝胶加温或在脱色液中放入海绵、滤纸片等吸收残余的染料，有助于加快脱色。
灵敏度为1．0ug蛋白／每条带。
考马斯亮蓝染色法——最高灵敏度1．染色前，考马斯亮蓝G-250(系考马斯亮蓝R-250的二甲基化衍生物)必须纯化。
因为商品制剂中的杂质可增强染色背景。
在250m17．5％乙酸中溶解4g染料，加热到70℃；加入44g硫酸铵，溶解后，冷却过滤或置室温离心(3000g，10min)，去除上清液，让染料干燥。
2．配制染色液：在500m1 2％磷酸中溶解30g硫酸铵，待其完全溶解后，加入溶于10m1水中的0．5g 纯化的考马斯亮蓝G—250。
室温保存。
3．电泳后，将凝胶放入一洁净的玻璃或塑料容器中加入5倍于凝胶体积的12．5％三氯乙酸。
4．室温下振摇温育1h或更长时间。
5．排干液体。
摇动考马斯亮蓝G—250染液，使大颗粒胶体分散，加至凝胶内。
考马斯亮蓝快速染色液
考马斯亮蓝快速染色液
采用以下方法制备：
1)称取0.05-0.2g的考马斯亮蓝G-250，加入30-50ml的无水乙醇搅拌至溶解完全；
2)加入1.5-5g无水硫酸铜或三氯化铬，加入500-800ml超纯水，利用磁力搅拌器以200-600rpm/min的速度搅拌0.5-2小时；
3)加入10-50ml的冰乙酸搅拌至均匀，然后加入10-50ml浓盐酸(也可采用85％磷酸，效果相同)搅拌均匀；
4)加入超纯水定容至1L，采用10000rpm高速离心5min(也可使用普通定性滤纸负抽滤的方式，对最终结果无影响)去除沉淀后即可获得考马斯亮杀菌防腐剂蓝快速染色液。
染色脱色方法如下：1.清洗：聚丙烯酰胺凝胶电泳结束后取出胶板，切割舍弃浓缩胶瓦克，加入超纯水清洗凝胶一次，再次加入超纯水微波炉中高火加热至沸腾后取出凝胶；2.染色：凝胶尽量滤干水分，放入有盖耐热容器加入快速低刺激考马斯亮蓝染色液，染液需要保证完全覆盖凝胶表面，使用微波炉中高火加热煮沸2-3min；3.初步脱色：取出凝胶用超纯水冲洗凝胶表面残留染液(此时在目的蛋白量较大情况下即可初步看到染色条带)，然后加入超纯水使用微波炉中高火加热3-5min即完成初步脱色(此时可以清晰观察到染色蛋白条带，但凝胶背景色并未完全脱净)；4.彻底脱色：取出凝胶后加入150mMNaCl水溶液，溶液量以完全浸没凝胶且脱色过程中脱色液不坏洒出为度，水平摇床室温50rpm脱色1h即可彻底脱净背景色。
考马斯亮蓝快速染色液使用说明
考马斯亮蓝快速染色液产品编号产品名称包装P0017 考马斯亮蓝快速染色液 250ml产品简介：考马斯亮蓝快速染色液(Commassie Blue Fast Staining Solution)是以考马斯亮蓝G250为染料，可用于SDS-PAGE或非变性PAGE等蛋白电泳胶的快速、高灵敏染色，或Western转膜后PAGE胶上残余蛋白的检测。
本考马斯亮蓝快速染色液是一种无毒，无刺激性气味的高度环保型染色液。
普通的常规方法需使用剧毒的甲醇及强刺激性的乙酸，而碧云天生产的考马斯亮蓝快速染色液则采取全新配方，实现了无毒和无刺激性气味。
本考马斯亮蓝快速染色液只需一小时或更短时间就可以检测到低达100ng的蛋白电泳条带，而常规方法需3小时以上。
本试剂盒可以进行高灵敏染色，最低可以清楚检测到10ng的蛋白电泳条带，参考图1。
蛋白上样量： 10μg 5μg 2μg 1μg 500ng 200ng 100ng 50ng 20ng 10ng 5ng 2ng 1ng图1. 使用碧云天的考马斯亮蓝快速染色液对不同上样量的BSA蛋白样品用10% SDS-PAGE胶电泳后的两次染色结果。
无需对蛋白和凝胶进行固定，可以不进行脱色，操作更加简单。
本染色液和质谱分析兼容，即经过本染色液染色的蛋白条带或蛋白点可以用于后续的质谱分析。
包装清单：产品编号产品名称包装P0017 考马斯亮蓝快速染色液250ml—说明书1份保存条件：4℃保存，一年有效。
注意事项：本染色液呈酸性，有轻微腐蚀性，使用时请作必要防护。
如果使用微波炉加热，请特别注意避免沸腾。
以免因暴沸而导致凝胶碎裂。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明：1. 电泳结束后，取胶放入约50-100ml蒸馏水中，在摇床上摇动5分钟，倒弃液体，再重复两次，共洗涤三次。
注：本步骤的目的是为了洗去凝胶中的SDS等干扰物质。
如果不能充分去除SDS会导致背景较高，如果胶非常厚，每次的洗涤时间需适当延长并且洗涤次数也需适当增加。
拷染快速脱色
12.5％考马斯亮蓝染色液的配制（含30％甲醇，10％乙酸）考马斯亮蓝R250 0.125g甲醇 30ml冰乙酸 10ml加ddH2O至 100ml染胶1h~2h脱色液配制（含30％甲醇，10％乙酸）甲醇 30ml冰乙酸 10ml加dd H2O至 100ml注：1. 染色液可回收利用；室温保存即可；甲醇可以用乙醇代替。
2.其它脱色液：（1）用水脱色，但效果非常不好，建议不要用。
（2）脱色液也可以用0.5％mol/l的氯化钠，没有气味，脱色效果也不错。
但胶可能会胀的厉害!（3） 20%的甲醇和0.1M的tis-磷酸（PH6.5）先用tis-磷酸（PH6。
5）漂洗2min，然后用20%的甲醇漂洗1min（最好不要超过1min），最后用20%的NH4SO4固定30min3. dd H2O煮法脱色PAGE胶染色完毕后，如果用一般的甲醇－乙酸脱色液进行脱色，一般至少需要2－3h，可利用蒸馏水煮的方法：（1）. 先将500ml蒸馏水放在一个干净的烧杯中，在电炉上煮沸。
（2）. 将染色好的胶用DD水冲净后放入煮沸的蒸馏水中，煮3～5min。
（3）. 将DD水倒掉，看胶是否已经脱净，如果还不好，可以用少量水再煮一次。
一般整个脱色过程最多15min即可搞定！还可以避免每次脱色时的醋酸味！4. 重复利用（1）染色液和脱色液重复次数不一定的,可以根据他们的着染能力和脱色能力考虑是否换新的.夏季甲醇挥发快,用3~5次应该可以用.当然,用时要加盖.（2）脱色时注意防止挥发,脱色液可以用活性碳处理后反复用多次的.（3）脱色液反复使用，用两三次后用活性炭“包被”的滤纸过滤，滤纸可反复使用。
脱色液反复使用后，胶有点泛红，但不影响观察，如果要发表，建议用新配脱色液。
5. 加快染色和脱色速度（1）染色和脱色都可以在微波炉中加热甚至煮沸，很省时间。
但注意不要沸腾时间太长，否则容易把胶上煮出泡状的破损。
（2）若为了提高考染及脱色速度，可在45℃左右的水浴中进行，染色时间只需几分钟（其间轻轻晃动一二次，整个胶变为较深的亮兰色即可）。
考马斯亮蓝法
考马斯亮蓝测定蛋白质含量一、实验原理考马斯亮兰G-250在酸性溶液时呈棕红色，当与蛋白质结合后变为蓝色，且在蛋白质一定浓度范围内符合比尔定律，可在595nm处比色测定。
在3～5分钟即成大量吸收，至少稳定1小时。
在10～1000μg/mL范围内，吸光值与蛋白质浓度成正比。
是目前常用方法之一。
二、实验材料、器材与试剂1.材料结晶牛血清白蛋白。
2.器材（1）723分光光度计；（2）试管及试管架；（3）各型号吸量管；（4）坐标纸；（5）记号笔。
3.试剂（1）考马斯亮兰G-250染色液：取考马斯亮兰G-250 100mg溶于50mL95%乙醇中，加100mL85%磷酸，加水稀释至1升。
（2）标准蛋白溶液：用牛血清白蛋白，预先经微量凯氏定蛋法测定蛋白质含量，根据其纯度，配制成1000μg/mL的蛋白质标准溶液。
标准原液的配制：在分析天平上精确称取0.1g结晶牛血清白蛋白,于小烧杯内，加入少量蒸馏水溶解后转入100mL容量瓶中，烧杯内的残液用少量蒸馏水冲洗数次，冲洗液一并倒入容量瓶中，最后用蒸馏水定容至刻度。
配制成标准原液，其中牛血清白蛋白浓度为1000μg/mL。
(3)样品液：准确称取小麦叶片（或绿豆芽下胚轴）约200mg,放入研钵中，加入蒸馏水在冰浴中研成匀浆，转移到离心管中，于4000r/min离心10min,将上清液倒入10mL容量瓶中，再向残渣中加入2.0mL蒸馏水悬浮后以4000r/min再离心10min,合并上清液，定容至刻度。
三、实验方法1. 分别取8支试管，编号，按下表加入试剂，混匀，室温放置5～30分钟。
标准蛋白溶液（1000μg/mL）未知样品1未知样品2管号 1 2 3 4 5 6 7 8 样品/mL0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.0 1.0 水/mL 1.0 0.8 0.6 0.4 0.2 0 0 0 蛋白质含量/μg0 200 400 600 800 1000 待测待测染色液(mL)5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.02.绘制标准曲线：用723分光光度计在595nm处比色。
考马斯亮蓝快速染色液使用说明
考马斯亮蓝快速染色液使用说明考马斯亮蓝快速染色液是一种用于染色的化学药剂，适用于各种纺织品和织物，特别是棉和亚麻。
它能够以快速、均匀和持久的方式将颜色渗透到纤维中，使其具有鲜艳且持久的效果。
下面是考马斯亮蓝快速染色液的使用说明：1.准备工作首先，确保工作区域干净整洁，以防止灰尘和污垢附着在待染物品上。
同时，确保待染物品洗净并完全干燥，以免影响染色效果。
2.预备染料溶液在染色前，您需要制作考马斯亮蓝快速染色液的溶液。
按照包装上的指示，将适量的染料粉末加入到一定量的水中，并搅拌直至完全溶解。
请务必遵循正确的浓度和比例，以获得理想的染色效果。
3.浸泡待染物品将待染物品放入染色溶液中，确保其完全浸泡。
您可以使用盆子、桶或染缸来容纳溶液和物品，根据需求选择合适的容器尺寸。
确保物品可以自由活动，以确保染料均匀渗透到整个纤维中。
4.时间控制染色时间是控制染色深浅和颜色饱和度的关键。
根据您想要的颜色强度和深浅程度，选择适当的染色时间。
通常，较长的染色时间会产生更深的颜色，而较短的染色时间则会产生较浅的颜色。
在染色过程中，建议轻轻搅拌物品，以确保染料均匀分布。
5.清洗和固定颜色在染色时间结束后，将物品从染色溶液中取出，并用清水彻底冲洗。
这有助于清除多余的染料和杂质，以确保染料牢固地附着在纤维上，并防止晕染。
您可以使用温水进行冲洗，但请注意避免温度过高，以避免纤维收缩或变形。
6.晾干和修整彻底冲洗后，将物品晾干。
您可以将物品挂起或平放在通风良好的区域，直至完全干燥。
确保物品变得干燥后，您可以对其进行修整，如剪裁、熨烫等，以便达到所需的最终效果。
需要注意的是，染色液和染料是化学药剂，使用时必须遵循以下安全措施：-避免直接接触染料和染色液，尽量佩戴手套和护目镜等个人防护装备。
-在使用过程中，务必将染料和染色液存放在儿童无法触及的地方。
-在染色过程中，确保使用在通风良好的区域，并避免吸入染料和染色液的气味。
-如果发生意外，如染料或染色液溅入眼睛或皮肤上，应立即用清水冲洗，并寻求医生的帮助。
考马斯亮蓝快速染色液、脱色液使用说明书
考马斯亮蓝快速染色液、脱色液使用说明书产品编号：SL1290（染色液）；SL1300（脱色液）储存条件：2-8保存，保质期1年。
产品内容：产品内容SL1290-500ml产品内容SL1300-500ml 考马斯亮蓝快速染色液500ml考马斯亮蓝快速脱色液500ml 说明书1份说明书1份产品说明：考马斯亮蓝快速染色液（Coomassie brilliant blue R250Protein Stain Reagent）是以考马斯亮蓝R-250为染色剂，主要用于SDS-PAGE和非变性PAGE凝胶电泳中蛋白的染色，也可检测WB后PAGE凝胶的残留蛋白。
本产品用快染法数分钟即可完成染色。
考马斯亮蓝快速脱色液（Coomassie brilliant blue R250Protein destain Reagent）适用于蛋白凝胶考马斯亮蓝染色后脱色的溶液。
常规脱色1小时即可观察到蛋白条带，快速脱色20分钟即可观察到蛋白条带。
使用说明：常规染色脱色方法：1、电泳结束后，将凝胶置于培养皿内，加入染色液，确保覆盖凝胶。
2、置于水平摇床或侧摆摇床上缓慢摇动，室温染色1小时或更长时间。
3、倒出染色液（可重复使用2-3次）。
加入脱色液，确保覆盖凝胶。
4、置于摇床上缓慢摇动，室温脱色4-24小时。
期间更换脱色液2-4次，至蓝色背景全部脱去，蛋白条带染色达到预期效果。
一般脱色1-2小时后蛋白条带即可出现。
5、脱色后，凝胶保存在水中，用于拍照等。
水中的凝胶会发生溶涨，如需避免溶涨，可以把胶保存在含20%甘油的水中。
长期保存可以制备干胶。
快速染色脱色方法：1、电泳结束后，将凝胶置于适量考马斯亮蓝染色液中，微波炉加热至接近沸腾或刚刚沸腾，立即停止加热。
胶浓度大于10％的凝胶比较坚韧，煮沸时不易破损；胶浓度小于10%的凝胶，尽量避免煮沸。
2、在染色液温度较高的情况下，随即在摇床上摇动5-10分钟。
3、倒出染色液（可重复使用2-3次）。
考马斯亮蓝快速染色液使用说明
色，可以重复2-3次。 注：染色时如果把凝胶和染色液一起放置在微波炉中适当加热，可以大大加快染色速度。但加热时宜尽量避免沸腾，以 免出现因暴沸而导致的凝胶碎裂。 4. 染色至看到清晰的目标蛋白条带后即可停止染色。弃染色液，加入适量的蒸馏水，停止染色反应。然后即可拍照记录。 注：通常使用本染色液染色后背景非常低，如果希望获得更加清晰的蛋白条带，可以加入适量的室温蒸馏水进行洗涤。 通过蒸馏水洗涤可以进一步降低背景。在4℃蒸馏水中浸泡过夜可以获得背景更低，条带更清晰的条带。在次日对4℃蒸 馏水浸泡过夜的已经进行了染色的凝胶再同前一天一样进行染色和洗涤可以进一步改善染色效果，获得更好的考染蛋白 条带。
蛋白上样量： 10μg 5μg 2μg 1μg 500ng 200ng 100ng 50ng 20ng 10ng 5ng 2ng 1ng
图1. 使用碧云天的考马斯亮蓝快速染色液对不同上样量的BSA蛋白样品用10% SDS-PAGE胶电泳后的两次染色结果。
无需对蛋白和凝胶进行固定，可以不进行脱色，操作更加简单。 本染色液和质谱分析兼容，即经过本染色液染色的蛋白条带或蛋白点可以用于后续的质谱分析。
常见问题：
1. 无染色条带：可能上样量太少，建议电泳时加适当量的BSA等作为阳性对照。 2. 背景太高：可能杂质没有除尽，建议延长最初的蒸馏水洗涤时间或增加洗涤次数。也可以在完成染色后，把凝胶放置在
蒸馏水中在室温或4℃进行洗涤。在4℃蒸馏水中浸泡过夜，通常可以取得较好的脱色效果。 3. 染色条带的灵敏度不够理想：可以使用考马斯亮蓝快速染色液进行重复染色，重复染色可以改善染色效果。在加热情况
本考马斯亮蓝快速染色液是一种无毒，无刺激性气味的高度环保型染色液。普通的常规方法需使用剧毒的甲醇及强刺激 性的乙酸，而碧云天生产的考马斯亮蓝快速染色液则采取全新配方，实现了无毒和无刺激性气味。
蛋白胶染色液配方
蛋白胶染色液配方
嘿，你问蛋白胶染色液配方啊？这玩意儿还真有点讲究呢。
一般来说，蛋白胶染色液可以用考马斯亮蓝来配。
你得准备考马斯亮蓝粉末、甲醇、乙酸这些东西。
先把考马斯亮蓝粉末倒在一个容器里，就像倒调料似的。
然后呢，加上甲醇，这甲醇就像是给考马斯亮蓝找了个伴儿。
接着再倒点乙酸，这乙酸就像是给它们加了点酸味调料。
具体的比例嘛，大概是考马斯亮蓝粉末零点几克，甲醇多少毫升，乙酸多少毫升。
哎呀，具体数字我有点记不清了，你可以去网上查查或者翻翻书。
反正就是不能瞎配，得按照一定的比例来。
要是配得不对，那染色效果可就不好啦。
配的时候要小心点哦，别把粉末弄得到处都是，不然就像撒了一把面粉似的，收拾起来可麻烦了。
把这些东西搅拌均匀，就像搅拌面糊一样，让它们充分混合在一起。
等配好了染色液，就可以把蛋白胶放进去染色啦。
就像是给蛋白胶穿上一件蓝色的衣服。
让它在染色液里泡一会儿，时间也不能太长，也不能太短。
太长了可能会染得太深，太
短了又染不上色。
举个例子哈，我有个朋友在实验室里做实验。
他就是按照这个配方配的蛋白胶染色液。
一开始他还不太会配，比例掌握得不好，结果染出来的蛋白胶颜色不对。
后来他仔细研究了一下，按照正确的比例配好了染色液，染出来的蛋白胶可漂亮了。
咱要是也能像他那样认真，肯定也能配出好的蛋白胶染色液。
所以啊，好好配染色液，让蛋白胶变得美美的。
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贮存：
室温密封保存
使用说明 1.洗涤 电泳结束后，将凝胶剥离玻璃板， 放入烧杯或塑料盒中，加入 100ml 的蒸馏水。 煮沸或微波炉中加热至沸腾，维持 1 分钟， 弃水。 2.染色 倒入适量染色液，煮沸或微波炉中 加热至沸腾，维持 2 分钟；如果胶非常厚， 染色的时间需适当延长。
注：在微波炉中适当加热，可以大大加快染色速度。 加热时，敞开容器口，容器尽量大些 ，以免出现因
考马斯亮蓝蛋白胶快速染色液
考马斯亮蓝蛋白胶快速染色液 Commassie Blue Fast Staining Solution
包装：
Cat.No
产品名称
规格
WB021 考马斯亮蓝蛋白胶快 100ml
WB022
速染色液
50ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱml
产品简介： ※考马斯亮蓝快速染色液(Commassie Blue Fast Staining Solution)是以考马斯亮蓝R-250 为染料配 制而成的染色液，可用于SDS-PAGE或非变性PAGE 蛋白电泳胶的快速染色，或Western转膜后PAGE胶 上残余蛋白的检测。 ※考马斯亮蓝快速染色液采取新配方，超薄胶只需 染色 10 分钟，就可以显示出清晰的蛋白电泳条带； 检测到低达 10ng的蛋白电泳条带。 ※无需对蛋白和凝胶进行固定，操作更加简单。 ※本考马斯亮蓝快速染色液是一种无毒，无刺激性 气味的高度环保型染色液。普通的常规方法需使用 剧毒的甲醇及强刺激性的乙酸，而本公司生产的考 马斯亮蓝快速染色液则采取全新配方，实现了无毒 和无刺激性气味。 ※本染色液和质谱分析兼容，即经过本染色液染色 的蛋白条带或蛋白点可以用于后续的质谱分析。
暴沸而导致的凝胶碎裂。 3.脱色 到掉染色液（可以回收重复使用），
加入适量水，煮沸或微波炉中加热至沸腾， 维持 2 分钟；如果胶非常厚，脱色的时间需 适当延长。也可换水 3－4 次，至背景无色 4.扫描或拍照记录
注意事项： 1.本染色液呈酸性，有轻微腐蚀性，使用时请 作必要防护。 2.如果使用微波炉加热，敞开容器口，容器尽 量大些，以免出现因暴沸而导致的凝胶碎 裂。如果时间不是特别紧急，推荐按照常规 方法进行：洗涤 3 次，每次摇床摇晃 5 分钟 →染色 1～2 小时→脱色到出现清晰条带。