01组织学与胚胎学之绪论

SEM显示巨噬细胞表面
扫描电镜图(SEM)
脾血窦 细胞分裂
TEM显示胰腺腺泡 细胞内部结构。
C. 特殊的染色方法:
1. 组织化学(Histochemistry, 细胞化学)法: 通过生物化学的 方法在原位产生不溶解的有颜色的反应产物，来显示 微细结构的位置，然后用显微镜观察。
PAS 反应: 用来显示多糖的分布。先用过碘酸(Periodic acid )将多糖氧化，在多糖表面形成戊二醛结构，然后 用无色亚硫酸品红( Schiff试剂) 还原戊二醛形成紫红色 沉淀。
肝脏的PAS染色
免疫细胞（组织）化学
利用抗原（antigen, Ag），抗体（antibody）特异 结合的原理，用已知抗体检测未知抗原的一种方法。
免疫细胞化学(Immunocytochemistry)染色法: a. 待测结构或化学物质被看作抗原(Antigen)，通过非常敏感 和专一的免疫反应使抗原和被标记的抗体(Antibody)结合， 然后显示标记物，在原位产生不溶有色的反应产物，最后 用显微镜观察。
B. 相关功能: 微观结构和其功能相适应，反之亦然。 C. 人体结构的4个层次: 1. 细胞(Cell): 人体结构的基本结构和功能单位。 2. 组织(Tissue): 由一群结构和功能相同或相似的细胞(及其 细胞间质)构成。人体内有4种基本组织：上皮组织，结缔 组织，肌组织和神经组织。 3. 器官(Organ): 由组织有机地结合起来而构成。 4. 系统(System): 由结构相似且功能相关的器官构成。
* 伊红是酸性染料，粉红色。可以将大多数细胞的细胞质染 成红色。被伊红着色的结构本身为碱性，具有嗜酸性 (Acidophilic)。 * 不易被苏木素和伊红着色的结构具有嗜中性(Neutrophilic)。
HE染色：苏木精（Hematoxylin）伊红（Eosin）染色 碱性染料 将嗜碱性物质（本 身酸性）染成蓝色 细胞核中的DNA、 RNA细胞质中的RNA 酸性染料 将嗜酸性物质（本 身碱性）染成红色 细胞质、膜性结构 （线粒体、溶酶体、 滑面内质网）
单层立方上皮模式图
单层柱状上皮模式图
假复层纤毛柱状上皮模式图
复层扁平上皮模式图
变移上皮模式图（膀胱）
腺发生模式图
外 分 泌 腺 的 形 态 分 类
纤毛横切面超微结构模式图
大鼠输卵管上皮细胞纤毛电镜像 ×50000
左图 纤毛纵 切， 右图 纤 毛横切
细 胞 连 接 超 微 结 构 模 式 图
2. 染色(Staining): 染料可以将微观结构显示不同的颜色 以便观察鉴别。在染色前，需要脱蜡入水，因为染料 是水溶性的。
a. 最常用的染料是苏木素(Hematoxylin, H)和伊红(Eosin, E)。 * 苏木素是碱性染料，蓝紫色，可以使细胞核等着色。被苏木 素着色的结构本身为酸性，具有嗜碱性(Basophilic)。
b. 石蜡包埋(Paraffin embedding): * 脱水(Dehydration): 用浓度 逐渐升高的酒精 (70~100%) 将组织中的水完全置换出 来。 * 透明(Clearing): 用二甲苯 完全置换出酒精。 * 浸蜡(Infiltration): 在 60~62◦C时，用液态石蜡完 全置换出二甲苯。室温时 石蜡凝固成固态，内含待 切组织。
B. EM技术: 1. EM可分为透射电 镜(TEM)和扫描电镜 (SEM)2类。 2. EM的原理和LM相 似，但用电子束代替 光线，磁场代替玻璃 透镜。分辨率约为 0.2 nm。
3. EM的组织的制备与LM的相似，但有以下不同: a. 通常使用戊二醛和四氧化锇作双重固定。 b. 切片超薄 (厚度小于90nm)，塑胶包埋。 c. 用重金属盐如醋酸铀或醋酸铅等染色。因此，所有 原始的电镜图片都是黑白的。
来自百度文库
H&E染色的中等动静脉
d. 不同的染色方法，其结果不同。
醛复红染色的中等动静脉
在染色后，重新进入酒精和二甲苯，最后用中性树胶 封片，以便长期保存。 * 切片: 固定 → 梯度酒精 →二甲苯 → 石蜡。 * 染色: 石蜡 →二甲苯→梯度酒精 → 水。 * 保存: 水 →梯度酒精 →二甲苯→中性树胶。
胚胎学:研究人体在子宫内正常发育和 异常发育的科学。
精子 卵子
(Fertilization) 1 day-2w 3-8w 9-38w
受精 卵
胚
胎
分娩
7w
联体畸胎
II. 为什么要学习组织学? 1. 组织学又叫微观解剖学 (Microanatomy)，是解剖学知识 的进一步完善。 2. 结构是功能的基础，学好组 织学是学好生理学(Physiology) 的基础。 3. 只有了解正常结构，才能学 习其异常变化。因此组织学是 病理学(Pathology)的基础。 4. 组织学成绩不及格，必须补 考，重修和留级。
缝 隙 连 接 超 微 结 构 模 式 图
基膜超微结构模式图
上皮细胞基底面质膜内褶 超微结构模式图
组织学 与胚胎学
教学课件
浙江中医药大学
绪论(Introduction)
I. 什么是组织学 (Histology)? 组织学是研究人体正常 细微结构及其相关功能 的科学。 A. 微观结构: 1. 光学显微镜(Light microscope，LM): 计量单 位是微米(μ m )。 (1 μ m =0.001 mm) 。 2. 电子显微镜(Electron microscope，EM): 计量单 位是纳米(nm )。 (1 nm =0.001 μ m) 。
b. 2种基本染色法: * 直接法: 第一抗体被标记。 * 间接法: 第一抗体也被看作抗原，而第二抗体被标记。因 为信号被放大，因此更加敏感。 3. 放射自显影(Autoradiography): 给细胞所要代谢的物质分 子上标记放射性物质如 I125等，间隔照相，从而追踪该物质 代谢途径。
原位杂交
原理: 根据单链核酸片段能和经过标记的已知互补 核酸链（探针）特异性结合的原理定位识别 细胞内特异性 DNA 或 RNA 序列。
荧光原位杂交术
digitoxin
hybridization
原位杂交术（地高辛标记）
细胞培养(cell culture)
学习组织学应注意的问题: 1. 体内结构为立体的，三维的，而课本、讲义和显微镜 下的结构均为平面的，二维的。 2. 学习组织学应注意静态与动态、理论与实践相结合。
肥大细胞的颗粒被甲苯铵蓝(一种蓝色染料)染成紫红色
b. 如果某结构显示的颜色和染料本身的颜色不同，该结 构具有异染性(Metachromasia)。 c. 如果某结构能将银离子还原成银原子，并吸附银原子 而使自身显示棕黑色，该结构具有嗜银性(Argyrophilic)。
网状纤维具有嗜银性，因此可以用银盐染色来显示。
c. 切片: 用切片机将组织切成1~20μm厚的蜡片，然后将其放 到温水上，待其完全展开后，裱到有粘附剂的载玻片上。
除切片外，还有其他处理组织的方法： * 铺片(Whole mount): 用于很薄的组织，如肠系膜。 * 磨片(Ground section): 用于很坚硬的组织，如骨和牙。 * 涂片(Smear): 用于液态组织，如血液，精液和唾液。
组织胚胎学研究技术
问题 观察对象太小 观察对象无色，无反差 观察对象生化成分不同 观察对象是活体 解决方法 放大 显微镜
染色（HE染色） 细胞化学、免疫组织化学 培养
III. 怎样学习组织学? A. LM技术: 分辨率(Resolution)是指能够 分辨相邻两点之间的最小距 离。LM的分辨率约为200μm 。 1. 切片(Section): 将组织切薄 使光线可以透过。 a. 固定(Fixation): 为保存新鲜 组织的微观结构，尽快将组 织浸入到酒精，甲醛，苦味 酸，Bouin’s 液或Zenker’s液 等固定剂中。