结核杆菌培养标准操作流程

3、痰标本的保存和输送
痰标本容器密封，勿倒置，严防痰液外 溢。不能立即培养的痰标本，须置4℃冰箱 保存，防止痰液干涸或污染。
二、结核分支杆菌培养操作规程
培养基 酸性改良罗氏（分离培养）——目前由州 疾控统一购买按任务数配发并4℃冰箱保存。 1、将培养基从冰箱取出，恢复到室温并在培 养管上编培养序号，写上患者姓名、培养 日期、痰涂片编号等信息。 2、标本前处理：碱处理法 取2mL痰标本于前处理管中加1-2倍痰标本量 的4%NaOH，振荡器上震动30-60s后室温 放置10-15min（不得超过20min）。
结核分支杆菌培养
讲述内容： 一、痰标本的采集 二、结核分支杆菌培养操作规程
结核分支杆菌培养是结核病诊断 细菌学检验的重要内容之一（另外是 “抗酸杆菌涂片检查法”）这里我只 讲结核分支杆菌培养。 讲之前我还是要强调下要保护好 自己（即生物安全问题）。结核分支 杆菌是怎样传播我想你们比我懂，由 于时间关系，这里也不展开讲，进入 正题………
3、接种方法：取前处理消 化后痰液0.1mL,无菌操作接 种于培养基斜面上，每份标 本同时接种两支酸性改良罗 氏培养基，放37℃孵育。
4、结果与报告
接种后3~7天观察，此后每周观察一次菌落生 长情况，有菌落生长需经抗酸染色确认是否为分 支杆菌。若至第8周仍无菌落生长方可报告阴性 结果。 分支杆菌培养报告方式 分支杆菌培养阴性：斜面无分支杆菌菌落生长 分支杆菌培养阳性（1+）：菌落占斜面面积1/4 分支杆菌培养阳性（2+）：菌落占斜面面积1/2
分支杆菌培养阳性（3+）：菌落占斜面面3/4 分支杆菌培养阳性（4+）菌落布满全斜面。
5、培养基污染Βιβλιοθήκη Baidu况报告
在观察分支杆菌生长情况时，发现有非分支 杆菌生长，报告污染，重新送检。污染必须 控制在2%以下，当污染率高于2%时，提示 培养基污染或消化处理不当，应采取相应措 施，查寻和分析原因。
一、痰标本的采集
1、痰标本的种类 根据痰标本采集时间，可 将标本分为3类： （1）即时痰：就诊时深呼吸后咳出的痰液； （2）清晨痰：患者晨起立即用清水漱口后咳 出的第2口、第3口痰液； （3）夜间痰：送痰前一日患者晚间咳出的痰 液。
2、正确的咳痰方法：
（1）咳嗽前应缓慢的深吸气，吸气后稍屏气片刻。 （2）躯干略向前倾，两侧手臂屈曲，平放在两侧胸 壁下部，内收并稍加力。 （3） 咳嗽时腹肌用力快速收缩，使腹壁内陷。一次 深吸气可连续咳嗽三声。 （4）停止咳嗽并收缩将剩余的气体尽量呼尽。 （5）在缓慢吸气或平静呼吸片刻，准备再次咳嗽的 动作。 （6）勿将漱口水、唾液、呕吐物、鼻咽分泌物等混 入痰内，以免影响检验结果。如标本不合格，检验 人员应当拒收，并和临床医生对接，重新采样。 （7）标本量一般在3～5毫升。