(发酵过滤运行课件)01 酵母与酵母扩培

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酵母的养分
▪糖 ▪ 氨基酸 ▪氧 ▪ 矿物质和维生素
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酵母的养分
糖 葡萄糖
能量
丙酮酸盐
氧 脂质
二氧 化碳
蛋白质
乙醇
氨基酸
CH O 6 12 6 ©Anheuser-Busch InBev
2(C2H5OH) +2(CO2)
无菌室设计要求——易于清 • C • B 理
• 无菌间的空间不要太大，在 4M2左右
•E
• 顶棚距离地面2-2.5M
• 物品摆放尽可能不靠墙，能 够移动，避免出现死角
• 顶棚、地面、墙壁易于清理 ，采用冷瓷处理
•C
•B
•A •A
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•D
常用灭菌方法
• 物理除菌
• 从发酵容器底部收集酵母
• 将他们加入（或投放）到下一批麦芽汁 中
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鉴别技术
• 形态 • 染色体指纹鉴定
酵母形态 - 1
• 细胞形状 • 酵母菌是球状体
球状体
卵圆形
长卵形
蛋形
三角形的 瓶状 细尖形
曲形
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酵母形态 2
•4. 一支斜面使用一次。为确保菌种稳定性，各公司不得有擅自划 斜面、分离筛选及其他任何改变菌种性能稳定性的行为发生。
•5. 对于未使用的菌种，各公司需向做出说明。
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菌种销毁
• 1.各公司在领取到新的斜面后即对使用后菌种及过期未使用菌种进 行销毁并由部门经理签字。
提升物镜，不得下降物镜，避免物镜与载片相撞， 损伤镜头。 • 用后，物镜转成“八”字形，将其降至载物台，勿 使物镜与集光器对放，避免因镜筒脱落，损坏物镜 和集光器。 • 避免与酸、碱和易挥发、腐蚀性化学试剂放在一起， 这些物品对显微镜十分有害。 • 防止震动及暴力，防止光学系统光轴偏差，影响精 度。 • 物镜与目镜保持清洁，如有灰尘应用搽镜纸搽试， 不能用布等其他物品。
实验室常用设备
超净台
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• 用于提供局部高洁净度以满足接种 操作需要。
• 净化等级：100级 • 平均风速0.4-0.6m/s， • 由粗过滤及高效空气过滤器组成。 • 我们通常采用空补的方式来确定其
净化效果的有效性。
生化培养箱、干燥箱
生化培养箱用于接种后培养 工作
➢ 加热灭菌
通过使蛋白质变性，从而达到灭菌的目的 ✓ 干热灭菌 • 火焰灼烧和干热空气灭菌法 ✓ 湿热灭菌 • 巴斯消毒、煮沸消毒、常压间歇灭菌、高压蒸汽灭菌
➢ 过滤除菌
借助机械的办法将微生物截留在过滤介质上，从而达到除菌的目的。
➢ 紫外辐射
。 29 ©Anheuser-Bu通sch过In抑Bev制DNA的复制及空气在紫外线照射下，所产生臭氧的杀菌作用
酿造发酵学校课程
酿酒用酵母
大纲
▪ 酵母的历史 ▪ 酵母细胞结构 ▪ 菌种保藏方法 ▪ 实验室常用设备 ▪ 实验室纯培养 ▪ 大生产扩培设备及大生产扩培 ▪ 酵母代数命名法则
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早期酵母技术
• 公元前3000年时，古埃及人已经学会了 如何培养酿造啤酒用的酵母
• 2. 对所需销毁菌种的名称、日期、编号进行登记备案后由部门经理 签字。
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酵母细胞解剖
芽 细胞质 细胞核
内质网 芽痕
脂质体
线粒体
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高尔基体
糖原颗粒 液泡 细胞壁 细胞膜
酵母的生长和发芽
视频文件由 英国爱丁堡Riccarton的赫瑞·瓦特(Heriot-Watt)大学的Philip G. Meaden提供
卡氏罐
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•罐体与顶盖间的密封圈使用一段时间需要更换 防止多次杀菌后老化、变形影响密封效果
•风过滤器内介质保持干燥并经常性更换
实验室纯培养
实验室纯培养前准备
• 实验室无菌操作 • 培养基制备
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无菌室设计要求
常用灭菌方法
• 化学灭菌
通过改变微生物细胞膜的渗透性或损伤细胞膜，影响微生物细胞正常代谢或其本身具 有氧化作用，可使细胞内某些物质氧化以及改变原生质的胶体性状，使菌体沉淀或凝 固。
• 邮寄的斜面酵母
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菌种保存、使用
•1.各公司领取后菌管要有记录，注明菌种名称、编号、斜面日期、 保藏日期、使用日期。
•2.领取后斜面及时放入当地冰箱内1-4℃保藏，以菌管标注日期 为准35日内使用，保藏期间随时观察箱内温度。
•3.为保证菌种携带过程中尽可能低温保存。
•温度的准确性是关键因素。 需要用较准后温度计进行实 际测定。
干燥箱用于固体物质的干热灭菌工作。
•使用前物品摆放时不要过于紧密，更不能贴靠箱壁。避免由于过于紧
密防碍热空气流通，造成箱内受热不均，局部温度过高引起失火。
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高压灭菌器
• 用于液体培养物的湿热灭菌工作
• 独特模式或指纹
酵母细胞
染色体
细胞核
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CHEF胶体
最大的
最小的
酵母染色体指纹
下面酵母
A-B Labatt Kirin
上面酵母
1044 BRY96 BRY264
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菌种保藏方法
菌种保存、使用
• 来源 由TD每季度统一根据各公司的需求情况邮寄到各公司。
• 繁殖方法 • 酿酒酵母通过多边发芽来繁殖
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Bud yeast
W3470 repitched yeast
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Bud yeast
W3470 Culture yeast
染色体指纹识别
• 按大小将染色体分开
• 在凝胶上将染色体分开
• 灭菌过程严密观察压力变化，一旦压力不可 控则需要立即切断电源。
• 当灭菌锅压力降到零时，开排气阀，排掉余 气。打开锅盖，待温度降低后戴上手套取出 灭菌物品。进行修复。
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显微镜
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最常使用的是普通光学显微镜 • 镜检时，首先降低物镜，使其与载片接近，只允许