细菌菌落 计数 (1)
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1.广泛用于生物制品检验(如活菌制剂)，以及食品、饮料 和水(包括水源水)等的含菌指数或污染程度的检测。 2.疾病诊断 *泌尿系感染性疾病的诊断------尿培养 3.细菌感染及药物治疗效果 *临床病人 *实验动物
3、菌落计算方法 （1）菌落计数方法 做平板菌落计数时，可用肉眼观查，必要时用放大镜 检查，以防遗漏。在记下各平板的菌落数后，求出同稀释 度的各平板平均菌落总数。 （2）菌落计数的报告 ①平板菌落数的选择 选取菌落数在30～300之间的平板作为菌落总数测定 标准。一个稀释度使用两个平板，应采用两个平板平均数， 其中一个平板有较大片状菌落生长时，则不宜采用，而应 以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数，若片状 菌落不到平板的一半，而其余的一半中菌落分布又很均匀， 即可计算半个平板后乘2以代表全皿菌落数。
浇注平板法
涂布平板法
• 方法：
1.以无菌操作方法用灭菌吸管吸取 0.9 ml 生理盐水，分别 加入6支灭菌EP管中。 2.以无菌操作方法吸取0.1ml充分混匀的待 检样本，注入盛有0.9ml灭菌生理盐水的 试管中，混匀成1:10稀释液。 3.吸取1:10的稀释液0.1ml注入盛有0.9ml 灭菌生理盐水的试管中，混匀成1:100稀 释液。按同法依次稀释成1:1000， 1:10000稀释液等备用。（如此递增稀 释一次，必须更换一支1ml灭菌吸管）
• 结果：
稀释度 10-4 10-5 10-6
1 菌落数
每毫升中 总活菌数
2
平均
1
2
平均
1
2
平均
总活细菌数（CFUs/ml）=某一稀释度的平均菌落数 ×10×稀释度 *注意事项见实验讲义
间接法
平板菌落计数法(Colony-counting Methods)
一个活菌在合适的培养基表面，逐渐生长成一个 肉眼可见的菌落（菌落形成单位，colony forming unit, CFU），从而得知原始活菌含量。 涂布平板法Spread Plate 浇注平板法Pour Plate
间 接 法—平板菌落计数法
细菌菌落计数
直wk.baidu.com法
血球记数板 活菌染色：美蓝、吖啶橙、TTC
间接法
直接法—血球记数板
细菌计数板和血球计数板都用来侧微生物的总菌数。血球计数板用来测 较大微生物如酵母菌和霉菌孢子的总数，细菌计数板用来测细菌的总菌 数。两种计数板的构造相似，不同的是细菌计数板的深度仅为血球计数 板深度的1/5。
1 2 3 4 5 6
0.1ml
1
样本
0.1ml
0.1ml
0.1ml
0.1ml
0.1ml
0.1ml
1
2
3
4
5
6
4.用灭菌吸管取2～3个适宜稀释度的稀释菌 液0.1ml，分别注入灭菌平皿内，每个稀 释度重复做两个平板，涂布均匀后，置 37℃，培养24-48h。
0.1ml
0.1ml
0.1ml
• 适用领域：
3、菌落计算方法 （1）菌落计数方法 做平板菌落计数时，可用肉眼观查，必要时用放大镜 检查，以防遗漏。在记下各平板的菌落数后，求出同稀释 度的各平板平均菌落总数。 （2）菌落计数的报告 ①平板菌落数的选择 选取菌落数在30～300之间的平板作为菌落总数测定 标准。一个稀释度使用两个平板，应采用两个平板平均数， 其中一个平板有较大片状菌落生长时，则不宜采用，而应 以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数，若片状 菌落不到平板的一半，而其余的一半中菌落分布又很均匀， 即可计算半个平板后乘2以代表全皿菌落数。
浇注平板法
涂布平板法
• 方法：
1.以无菌操作方法用灭菌吸管吸取 0.9 ml 生理盐水，分别 加入6支灭菌EP管中。 2.以无菌操作方法吸取0.1ml充分混匀的待 检样本，注入盛有0.9ml灭菌生理盐水的 试管中，混匀成1:10稀释液。 3.吸取1:10的稀释液0.1ml注入盛有0.9ml 灭菌生理盐水的试管中，混匀成1:100稀 释液。按同法依次稀释成1:1000， 1:10000稀释液等备用。（如此递增稀 释一次，必须更换一支1ml灭菌吸管）
• 结果：
稀释度 10-4 10-5 10-6
1 菌落数
每毫升中 总活菌数
2
平均
1
2
平均
1
2
平均
总活细菌数（CFUs/ml）=某一稀释度的平均菌落数 ×10×稀释度 *注意事项见实验讲义
间接法
平板菌落计数法(Colony-counting Methods)
一个活菌在合适的培养基表面，逐渐生长成一个 肉眼可见的菌落（菌落形成单位，colony forming unit, CFU），从而得知原始活菌含量。 涂布平板法Spread Plate 浇注平板法Pour Plate
间 接 法—平板菌落计数法
细菌菌落计数
直wk.baidu.com法
血球记数板 活菌染色：美蓝、吖啶橙、TTC
间接法
直接法—血球记数板
细菌计数板和血球计数板都用来侧微生物的总菌数。血球计数板用来测 较大微生物如酵母菌和霉菌孢子的总数，细菌计数板用来测细菌的总菌 数。两种计数板的构造相似，不同的是细菌计数板的深度仅为血球计数 板深度的1/5。
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样本
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4.用灭菌吸管取2～3个适宜稀释度的稀释菌 液0.1ml，分别注入灭菌平皿内，每个稀 释度重复做两个平板，涂布均匀后，置 37℃，培养24-48h。
0.1ml
0.1ml
0.1ml
• 适用领域：