大肠杆菌生长曲线实验报告
大肠杆菌生长曲线实验报告
测定微生物的数量有多种不同的方法，可根据要求和实验室条件选用。本实验用比浊法测定，由于细菌悬液的浓度与光密度（OD值）成正比，因此可利用分光光度计测定菌悬液的光密度来推知菌液的浓度，并将所测的OD值与其对应的培养时间作图，即可绘出该菌在一定条件下的生长曲线，此法快捷、简单。
测量时要等数字变化不大时再读取，可以读三次，最后取平均值，这样能保证实验结果更加准确。
721型分光光度计要先预热，实验过程中最好使用同一台仪器，同一个比色皿，这样可以减少仪器误差，分光光度计的使用操作要规范。比色皿经蒸馏水清洗后，必须经待测样品润洗。比色皿的毛面用吸水纸擦干，而光面只能用吸水纸吸干，以免光面被划破。比色皿用擦镜纸擦干净，上面不要残留有纸纤维和水珠等。
延迟期：又叫调整期。细菌接种至培养基后，对新环境有一个短暂适应过程（不适应者可因转种而死亡）。此期曲线平坦稳定，因为细菌繁殖极少延迟期长短因素种、接种菌量、菌龄以及营养物质等不同而异，一般为1～4小时。此期中细菌体积增大，代谢活跃，为细菌的分裂增殖合成、储备充足的酶、能量及中间代谢产物。
对数生长期：又称指数期。此期生长曲线上活菌数直线上升。细菌以稳定的几何级数极快增长，可持续几小时至几天不等（视培养条件及细菌代时而异）。此期细菌形态、染色、生物活性都很典型，对外界环境因素的作用敏感，因此研究细菌性状以此期细菌最好。抗生素作用，对该时期的细菌效果最佳。
改进措施:在试验过程中应严格按照标准的操作要求，在上述步骤时更加应该规范操作。
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年 月 日
2.营养肉汤培养基灭菌:将步骤一包好的培养基置于高压蒸汽灭菌锅121℃灭菌30min.
大肠杆菌生长曲线测定
大肠杆菌生长曲线测定一、目的要求了解大肠杆菌生长曲线的基本特征，从而认识微生物在一定条件下生长、繁殖的规律。
二、基本原理一定量的微生物，接种在适合的新鲜液体培养基中，在适宜的温度下培养，以菌数的对数作纵坐标，生长时间作横坐标，做出的曲线叫生长曲线。
一般可分为延迟期、对数期、稳定期和衰亡期四个时期。
不同的微生物有不同的生长曲线，同一种微生物在不同的培养条件下，其生长曲线也不一样。
因此，测定微生物的生长曲线对于了解和掌握微生物的生长规律是很有帮助的。
测定微生物生长曲线的方法很多，有血球计数法、平板菌落计数法、称重法、比浊法等。
本实验采用比浊法测定，由于细菌悬液的浓度与混浊度成正比，因此，可利用光电比色计测定菌悬液的光密度来推知菌液的浓度，并将所测得的光密度值（OD值）与其对应的培养时间作图，即可绘出该菌在一定条件下的生长曲线。
现已有直接用试管就可以测定OD值的光电比色计（图Ⅶ-10），只要接种一支试管，定期用它测定，便可做出该菌的生长曲线。
三、器材培养18—20小时的大肠杆菌培养液，盛有5ml肉膏蛋白胨液体培养基的大试管12支；72型或72．1型分光光度计，自控水浴振荡器或摇床，无菌吸管等。
四、操作步骤1．编号取11支盛有肉膏蛋白胨液体培养基的大试管，用记号笔标明培养时间，即0、1．5、3、4、6、8、10、12、14、16、20小时。
2．接种用1ml无菌吸管，每次准确地吸取0．2ml大肠杆菌培养液，分别接种到已编号的11支肉膏蛋白胨液体培养基大试管中，接种后振荡，使菌体混匀。
3．培养中心以化工行业技术需求和科技进步为导向，以资源整合、技术共享为基础，分析测试、技术咨询为载体，致力于搭建产研结合的桥梁。
以“专心、专业、专注“为宗旨，致力于实现研究和应用的对接，从而推动化工行业的发展。
将接种后的11支试管置于自控水浴振荡器或摇床上，37℃振荡培养。
分别在0、1．5、3、4、6、8、10、12、14、16、20小时将编号为对应时间的试管取出，立即放冰箱中贮存，最后一同比浊测定光密度值。
实验五用大肠杆菌生长曲线的测定
优点：简便快速，适合于自动控制。 缺点：测定结果受培养液成分影响；某些样品 样品不适合用此法。
三、实验器材
菌种 培养不同时段的大肠杆菌。
仪器பைடு நூலகம்其他用具 分光光度计，比色皿等。
30，40，50，60 min）、自来水和橙汁 微生物的测定。（1种/人）
本次实验完
比色皿经蒸馏水清洗后，必须经待测样 品润洗。比色皿的毛面用吸水纸擦干，而光 面只能用吸水纸吸干，以免光面被划破。
比色皿之间吸光度进行比较。
四、实验结果
记录不同大肠杆菌培养液的OD600值， 并绘制大肠杆菌的生长曲线。
培养时间 （h）
光密度值 OD600
4 8 12 16 20 24
五、思考题
•光电比浊计数的原理是什么？这种计数法有何 优缺点？ •如果用活菌计数法制作生长曲线，你认为会有 什么不同？两者各有什么优缺点？
实验67 水、环境中微生物的测定 一、实验目的
比较不同场所和不同条件下细菌的数量和 类型。
观察不同类群微生物的菌落形态特征。 体会无菌操作的重要性。 掌握水和环境中微生物的测定方法。 检测污染水域微生物的类型和数量。
二、实验原理
应用平板菌落计数技术测定污染水的细菌 总数。由于细菌种类繁多，不可能找到一 种培养基在一种条件下，使所有的细菌均 能生长繁殖。因此，计算出来的细菌总数 仅是一种近似值。
通过细菌数量的测量了解大肠杆菌的生物特征和规律绘制生长曲线实验31大肠杆菌生长曲线的测定一实验目的生长曲线将少量纯种单细胞微生物接种到定量的液体培养基中定时取样测定细胞数量以培养时间为横坐标以菌数为纵坐标作图得到一条反映单细胞微生物在整个培养期间菌数变化规律的曲线二实验原理一个典型的生长曲线分为延缓期对数期稳定期和衰亡期四个时期微生物数量的测定方法稀释平板计数法显微镜直接计数法最大概率法光电比浊法稀释平板计数法对样品
09大肠杆菌生长曲线的测定
第九次课大肠杆菌生长曲线的测定（2学时）一、基本原理大多数细菌的繁殖速率很快，在合适的条件下，一定时期的大肠杆菌细胞每20min分裂一次．将一定量的细菌转入新鲜液体培养基中，在适宜的条件下培养细胞要经历延迟期、对数期、稳定期和衰亡期四个阶段。
以培养时间为横坐标，以细菌数日的对数或生长速率为纵坐标作图所绘制的曲线称为该细菌的生长曲线。
不同的细菌在相同的培养条件下其生长曲线不同，同样的细菌在不同的培养条件下所绘制的生长曲线也不相同。
测定细菌的生长曲线，了解其生长繁殖规律，这对人们根据不同的需要，有效地利用和控制细菌的生长具有重要意义。
本实验用分光光度计进行光电比浊测定不同培养时间细菌悬浮液的OD值，绘制生长曲线．也可以直接用试管或带有测定管的三角瓶测定“klett units”值的光度计。
只要接种1支试管或1个带测定管的三角瓶，在不同的培养时间(横坐标)取样测定，以测得的klett units为纵坐标，便可很方便地绘制出细菌的生长曲线。
如果需要，可根据公式1klett units=OD／0.002换算出所测菌悬液的OD值。
二、实验器材1．菌种大肠杆菌。
2．培养基LB液体培养基70m1，分装2支大试管(5ml／支)，剩余60ml装入250ml的三角瓶．3．仪器或其他用具722型分光光度计，水浴振荡摇床，无菌试管，无菌吸管等。
三、实验步骤1.标记取11支无菌大试管，用记号笔分别标明培养时间，即0、1.5、3、4、6、8、10、12、14、16和20h。
2．接种分别用5m1无菌吸管吸取2．5m1大肠杆菌过夜培养液(培养10—12h)转人盛有50m1 LB液的三角瓶内，混合均匀后分别取5m1混合液放人上述标记的11支无菌大试管中。
3．培养将已接种的试管置摇床37℃振荡培养(振荡频率250r／min)，分别培养0、1.5、3、4、6、8、10、12、14、16和20h，将标有相应时间的试管取出，立即放冰箱中贮存，最后一同比浊测定其光密度值。
细菌生长曲线的测定实验报告
竭诚为您提供优质文档/双击可除细菌生长曲线的测定实验报告篇一：细菌生长曲线实验九测定细菌生长曲线[实验目的]1．了解细菌生长曲线特征：2．学习液体培养基的配制以及注意事项。
3．学习液体种子和固体种子的不同接种方法和注意事项。
4．利用细菌悬液浑浊度间接测定细菌生长。
[仪器和材料]1．实验材料(1)大肠杆曲，枯草杆曲培养液及大肠杆菌平板。
(2)牛肉膏蛋门胨葡萄糖培养基(150ml／250ml三角瓶x4瓶／大组)，配方：牛肉膏5g，蛋白胨10g，nacl5g，葡萄糖10g，加水至1000ml，ph7．5。
2．实验仪器取液器(5000μl，1000μl，200tμl各一支)；培养箱．摇床，722s分光光度汁；1000μl无菌吸头100个；5000μl 无菌吸头2(:细菌生长曲线的测定实验报告)个；1ml或4ml 玻璃或塑料比色皿4个，共用参比杯一个。
[实验原理]将一定量的细菌接种在液体培养基内．在一定的条件下培养，可观察到细菌的生长繁殖有一定规律性，如以细菌活菌数的对数作纵坐标，以培养时间作横坐标，可绘成一条曲线，称为生长曲线(图91)。
单细胞微生物发酵具有4个阶段，即调整(迟滞期)、对数期(生长旺盛期)、平衡期(稳定期)、死亡期(衰亡期)。
生长曲线可表示细菌从开始生长到死亡的全过程动态。
不同微生物有不同的生长曲线，同一种微生物在不同的培养条件下，其生长曲线也不一样。
因此，测定微生物的生长曲线对于了解和掌握微生物的生长规律是很有帮助的．测定微生物生长曲线的方法很多，有血细胞计数法，平板菌落计数法，称重法和比浊法等。
本实验采用比浊法测定，由于细菌悬液的浓度与浑浊度成正比，因此，可以利用分光光度计测定菌悬液的光密度来推知菌液的浓度。
将所测得的光密度值(测oD550或oD620或oD600或oD420，可任选一波长)与对应的培养时间作图，即可绘出该菌在一定条件下的生长曲线。
注意，由于光密度表示的是培养液中的总菌数，包括活菌与死菌，因此所测生长曲线的衰亡期不明显。
大肠杆菌细胞生长曲线的测定实验报告思考题
大肠杆菌细胞生长曲线的测定实验报告思
考题
在大肠杆菌细胞生长曲线的测定实验报告中，以下是一些可能的思考题：
1. 实验结果显示大肠杆菌细胞在培养基中的生长呈现出典型的生长曲线，包括潜伏期、指数期、平台期和死亡期。
这种生长曲线的形成是由什么因素引起的？
2. 在实验中，为了测定大肠杆菌细胞的生长曲线，我们选择了什么样的培养基和培养条件？这些选择是否对实验结果产生了影响？
3. 在实验过程中，我们通过测量光密度或细胞数量来确定大肠杆菌细胞的生长情况。
这种测量方法可能存在的缺陷是什么？有没有更准确的测量方法可以应用于该实验？
4. 实验中，我们还讨论了大肠杆菌细胞生长的影响因素，如温度、pH值和营养成分等。
在未来的研究中，我们可以采取哪些控制变量的方法来深入探究这些影响因素对大肠杆菌细胞生长的具体影响？
5. 大肠杆菌细胞生长曲线的测定在哪些领域有广泛的应用？如何利用实验结果来研究和解决实际问题，比如食品安全、环境污染等？
这些思考题可以帮助你对实验结果进行进一步的思考和讨论，深化对大肠杆菌细胞生长曲线的理解并应用于更广泛的领域。
大肠杆菌生长曲线实验报告-xiang
E.coli growth curve measurement一、目的1、瞭解細菌生長曲線特徵，測定細菌繁殖的代時；2、學習液體培養基的配製以及接種方法；3、反復練習無菌操作技術；4、瞭解不同細菌，不同接種方法在同一培養基上生長速度的不同；5、掌握利用細菌懸液混濁度間接測定細菌生長的方法6、複習光電比濁法測量細菌數量的方法7、學習平板塗布技術二、原理1、大腸桿菌生長：將一定量的細菌接種在液體培養基內，在一定條件下培養，可觀察到細菌的生長繁殖有一定的規律性，如以細菌的活菌數的對數作縱坐標，以培養時間作橫坐標，可繪成一條曲線，成為生長曲線（如圖一）。
圖一微生物生長曲線示意圖單細胞微生物的發酵具有四個階段，即Ⅰ調整期（延滯期）、Ⅱ對數期（生長旺盛期）、Ⅲ平衡期（穩定期）、Ⅳ死亡期（衰亡期）。
生長曲線可表示細菌從開始生長到死亡的全過程的動態。
不同的微生物有不同的生長曲線，同一種微生物在不同的培養條件下，其生長曲線也不一樣。
因此，測定微生物的生長曲線對於瞭解和掌握微生物的生長規律是很有幫助的。
測定微生物生長曲線的方法很多，有血球計數板法、平板菌落計數法、稱重法和比濁法等。
本實驗採用比濁法測定，由於細菌懸液的濃度與混濁度成正比，因此，可利用分光光度計測定細菌懸液的光密度來推知菌液的濃度。
將所測得的光密度值（OD600）與其對應的培養時間作圖，即可繪出該菌在一定條件下的生長曲線。
注意，由於光密度表示的是培養液中的總菌數，包括活菌與死菌，因此所測定的生長曲線的衰亡期不明顯。
2、平板塗布技術：塗布法接種是一種常用的接種方法，不僅可以用於計算活菌數，還可以利用其在平板表面生長形成菌苔的特點用於檢測化學因素對微生物的抑殺效應。
原理:將一定濃度，一定量的待分離菌懸液加到已凝固的培養基平板上，再用塗布棒快速地將其均勻塗布，使長出單菌落或菌苔而達到分離或計數的目的。
其目的:用於目的微生物的分離；用於藥物的抑菌試驗；觀察菌苔的形狀和特點。
大肠杆菌生长曲线实验报告
7.测定:将培养的大肠菌群菌液用无菌移液管移取到比色皿中，选用600nm分光光度计上调节零点，用蒸馏水作为空白对照，并对不同时间培养液从0起依次进行测定，对浓度大的菌悬液用自来水适当稀释后测定，使其OD值在0.1-0.65之间，经稀释后测得的OD值要乘于稀释倍数，才是培养液实际的OD值。
实验步骤:配制营养肉汤培养基营养肉汤培养基灭菌配制大肠杆菌菌液标记接种培养测定绘制生长曲线
1.配制营养肉汤培养基:用电子天平称取14.4g营养肉汤粉末置于1000mL烧杯中，加水至800mL，用电炉加热(加热过程中要用玻璃棒不断搅拌)至沸腾后，冷却少许后分别倒进15个锥形瓶中，每个锥形瓶倒50mL，塞上胶塞，用报纸包好，棉绳系好。
但有两点不足:一是一开始忽略了OD值必须在0.10-0.65 之间才有效;二是时间的间隔不太合理,开始的阶段应该时间安排紧密一点，还有晚上的一段数据没有测，实验时间不够长，延迟期和衰亡期曲线不明显。实验中若能考虑全面，这样测出来的数据才更有代表性，更加准确。
2．本实验的关键环节及改进措施
本试验的关键环节有以下四点:
衰亡期：随着稳定期发展，细菌繁殖越来越慢，死亡菌数明显增多。活菌数与培养时间呈反比关系，此期细菌变长肿胀或畸形衰变，甚至菌体自溶，难以辩认其形。生理代谢活动趋于停滞。故陈旧培养物上难以鉴别细菌。
体内及自然界细菌的生长繁殖受机体免疫因素和环境因素的多方面影响，不会出现象培养基中那样典型的生长曲线。掌握细菌生长规律，可有目的地研究控制病原菌的生长，发现和培养对人类有用的细菌。
2.营养肉汤培养基灭菌:将步骤一包好的培养基置于高压蒸汽灭菌锅121℃灭菌30min.
细菌的生化实验报告
细菌的生化实验报告细菌的生化实验报告细菌是微生物界中最为常见的一类生物，它们以其微小的身躯和巨大的生物活动而闻名。
在本次实验中，我们旨在探索细菌的生化特性和其在环境中的作用。
通过实验，我们对细菌的生长、代谢和适应能力有了更深入的了解。
实验一：细菌的生长曲线在这个实验中，我们选择了大肠杆菌作为研究对象。
我们将大肠杆菌接种在培养基上，并在一定时间间隔内记录细菌的生长情况。
通过测量培养液中的细菌数量，我们绘制了细菌的生长曲线。
结果显示，细菌的生长曲线呈现出典型的“S”形曲线。
在实验初期，细菌数量增长较为缓慢，这是由于适应期的存在。
随着时间的推移，细菌进入了指数增长期，细菌数量迅速增加。
然而，随着培养基中营养物质的消耗和代谢产物的积累，细菌的生长速率逐渐减缓，进入了平台期。
这是由于细菌的生长受到了环境条件的限制。
实验二：细菌的代谢特性在这个实验中，我们研究了细菌的代谢特性，特别是其对碳源的利用能力。
我们选择了葡萄糖、乳糖和蔗糖作为碳源，通过测量细菌在不同碳源下的生长情况，评估了细菌对不同碳源的利用能力。
结果显示，大肠杆菌对葡萄糖的利用能力最强，其次是乳糖，而对蔗糖的利用能力较弱。
这表明细菌对碳源的利用能力存在差异，可能与其代谢途径和酶的分布有关。
此外，我们还观察到在不同碳源条件下，细菌的生长速率和产生的代谢产物也有所不同。
这提示我们，在实际应用中，选择合适的碳源可以促进细菌的生长和代谢活性。
实验三：细菌的适应能力在这个实验中，我们研究了细菌的适应能力，特别是其对环境压力的响应。
我们将大肠杆菌分别接种在不同的培养基中，其中一组培养基中添加了抗生素，另一组培养基中添加了高温。
结果显示，添加抗生素的培养基中，细菌的生长受到了明显的抑制。
抗生素通过抑制细菌的代谢活性和细胞分裂，从而阻碍了细菌的生长。
而在高温条件下，细菌的生长速率明显减慢，部分细菌甚至无法生存。
这表明细菌对环境压力的适应能力有限，过高的温度和抗生素的存在可能对细菌产生不可逆的影响。
大肠杆菌生长曲线的测定概要
大肠杆菌生长曲线的测定一、基本原理生长曲线是微生物在液体培养基中所表现出来的生长、繁殖的规律，不同的微生物表现为不同的生长曲线，而即使是同一种微生物在不同培养条件下，其生长曲线也不同。
因此测定微生物的生长曲线对于了解，掌握微生物的生长规律是有帮助的。
由于细菌悬液的浓度与混浊度成正比，因此可利用光电比色计测定菌悬液的光密度来推知菌液的浓度。
本实验是以活菌计数法与光电比浊法相对应来测定大肠杆菌在不同培养条件下的生长曲线，从而观察分析大肠杆菌在这些培养条件下的生长情况。
二、器材培养了20小时的大肠杆菌悬液；肉汤蛋白胨培养基（液体、固体）；浓缩的肉汤蛋白胨液体培养基（浓缩5倍）；无菌酸溶液（甲酸：乙酸：乳酸＝3：1：1）。
1毫升及5毫升无菌吸管；无菌试管；无菌生理盐水；无菌平皿；血球计数器；显微镜；光电比色计；无菌离心管；离心机等。
三、操作步骤1．将经20小时培养的大肠杆菌培养物，倒入无菌离心管内离心（3000r.p.m×10），以无菌生理盐水洗涤三次后，制成约9亿毫升的菌悬液（用显微镜直接计数法），作为种子。
上述过程都必须注意严格无菌操作。
2．取盛有200毫升培养基经灭菌的三角瓶三瓶，分别标明A、B、C，按5%接种量，将上述种子接入，置37℃振荡培养。
在B瓶培养了4小时后取出，加入10毫升无菌酸溶液，然后继续振荡培养。
在C瓶培养了6小时后取出，加入10毫升无菌浓缩肉汤蛋白胨液，再继续振荡培养。
3．间隔一定时间，即0、2、4、6、8、10、12、14、16、18、20小时后，从A、B、C三角瓶中各取5毫升菌液放于无菌试管中，置冰浴。
并作适当稀释，使菌悬液的光密度控制在0.0－0.4范围内，再置光电比色计中进行比浊测定（400－440毫微米波长），用未接种的肉汤蛋白胨液为空白对照。
记下光密度值。
另外，A管在比浊测定以前，以无菌操作吸取0.1毫升菌液于肉汤蛋白胨琼脂平板上，用玻璃刮棒涂抹均匀后，置37℃培养30小时后计数。
大肠杆菌生长曲线的测定
实验结果
1、将测定的OD600值填入下表： 培养时间(h) 对照 0 1.5 3 4 6 8 10 12 14 16 20 OD600
2、绘制大肠杆菌的生长曲线：
OD600值
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培养时间/h
LB液体培养基配方：100ml 酵母提取物(Yeast extract): 0.5g
蛋白胨(Tryptone)：1g 氯化钠(Nacl)： 1g
床、无菌试管、无菌吸管。
实用文档
操作步骤
1、配制LB液体培养基100 ml，分装1支试管(5 ml/支)，剩余培养 基装入250 ml的三角瓶，121℃灭菌20min。
2、取11支无菌大试管，用记号笔分别标明培养时间，即0、1.5、 3、4、6、8、10、12、14、16和20 h。
3、用5 ml无菌吸管取2.5 ml大肠杆菌培养液(培养12h)转入装有 LB液体培养基的三角瓶内，混匀后分别取5ml混合液放 入上述标记的11支无菌大试管中。
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黄同龙 左明星
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目的要求
1、通过光密度值的测量了解大肠杆菌的生 长规律，绘制生长曲线。
2、了解光电比浊法测量细菌数量的原理。
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基本原理
将一定量的细菌接种到恒容积的液体培养基 中，在适宜的培养条件下，该群体就会有规律的 增长。以培养时间为横坐标，以细胞数目的对数 或生长速率为纵坐标作图所绘制的曲线称为该细 菌的生长曲线。该曲线包括四个阶段：延滞期、 指数期、稳定期、衰亡期。
4、将已接种的试管置摇床37℃振荡培养(200 rpm)，在相应时间 取出试管放于冰箱中，最后一同测定OD600值。
大肠杆菌生长曲线
四川大学化学实验报告课程名称生物工艺学实验课程号 309119060学院轻纺与食品学院专业轻工生物技术学生姓名赵凤佼学号 0843095035指导教师周荣清成绩评定实验日期 2011-06-20~2011-06-22一、实验名称：大肠杆菌生长曲线的制作二、实验目的：1.通过细菌数量的测量了解大肠杆菌的生长特征与规律，绘制生长曲线。
2.掌握光电比浊法测量细菌数量的方法。
三、实验仪器及药品：1.菌种：大肠杆菌。
2.培养基：LB培养基100ml，分装两支大试管（5ml/支），剩余90ml装入250ml三角瓶。
3.仪器和其他药品：722型分光光度计，水浴振荡摇床，无菌试管和无菌吸管等。
四、基本原理：在合适的条件下，一定时期的大肠杆菌细胞每20min分裂一次，将一定量的细菌转入新鲜培养液中，在适宜的培养条件下细胞要经历延迟期、对数期、稳定器和衰亡期4个阶段。
以培养时间为横坐标，细菌数目的对数或生长速率为纵坐标所绘制的曲线成为该细菌的生长曲线。
不同的细菌在在相同的培养条件下其生长曲线不同，同种细菌在不同的培养条件下所绘制的生长曲线也不同。
当光线微生物菌悬液时，由于菌体的散射及吸收作用使光线的透过量降低。
在一定范围内，微生物细胞浓度与透光度成反比，与光密度成正比；而光密度或透光度可以通过光电池精确测出。
因此，可利用一系列菌悬液测定的光密度及其含菌量，做出光密度—菌数的标准曲线，然后根据样品液所测得的光密度，从标准曲线中查处对应的菌数。
本实验用分光光度计进行光电比浊，测定不同时间细菌悬浮液的OD值，绘制生长曲线。
五、关键步骤及注意事项：1.测定OD值时，要求从低浓度到高浓度测定2.严格控制培养时间六、操作步骤：1.标记取11支无菌试管，用记号笔分别标明培养时间，即0、1.5、3、4、6、8、10、12、14、16、20h。
2.接种分别用5ml无菌吸管吸取2.5ml大肠杆菌过夜培养液（培养10~12h）转入盛有90mlLB培养液的三角瓶，混合均与后分别取5ml混合液放入上述标记的11支无菌试管中。
大肠杆菌和枯草芽孢杆菌生长曲线的制作
实验项目名称大肠杆菌和枯草芽孢杆菌生长曲线的制作一、目的和要求1. 通过细菌数量的测定了解细菌的生长特征与规律，绘制生长曲线。
2. 掌握光电比浊法测定细菌数量的方法。
3. 比较大肠杆菌和枯草芽孢杆菌生长曲线的差异。
二、基本原理1．将一定数量的细菌，接种于新鲜培养液中，在适宜的培养条件下细胞要）或经历延迟期、对数期、稳定期及衰亡期四个阶段。
定时取样测光密度（OD600nm或细胞数的对数为纵坐标，生长时间为横坐标，绘制的曲线称细胞数，以OD600nm为生长曲线。
2.该曲线表明细菌在一定的环境条件下群体生长与繁殖的规律。
不同的细菌在相同的培养条件下其生长曲线不同，同样的细菌在不同的培养条件下所绘制的生长曲线也不相同。
与其他测定微生物生长的方法（血球计数法、平板菌落计数法、称童法等）相比，本方法操作简便，可重复性和准确性高。
三、实验器材1.菌悬液：大肠杆菌和枯草芽孢杆菌2.培养基：LB液体培养基3．仪器及其他器具：分光光度计、恒温摇床、无菌试管、无菌枪头、移液枪等四、实验步骤①接种：按无菌操作法用移液枪向220ml的LB培养液中加入适量的大肠杆菌或枯草芽孢杆菌液，接种后轻轻振荡，使菌体混匀，随后用5ml移液枪将上述培养液分装至无菌试管，每组分装39支试管。
②分开培养和取样：将接种后的培养管置于摇床上，在37°C下振荡培养（250r/min），分別在培养的0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11和12h后取样，每次取3支试管，取样后写上标记（注明菌名、培养时间、组号），在放冰箱中贮存，待测定。
③比浊：以未接种的牛肉膏蛋白液体培养基调零点，在分光光度计上，在600nm进行比浊，从最稀浓度的菌悬液开始，依次测定，将OD记录到表格中。
④生长曲线的绘制：在excel中计算每次取样的均值和SD，以OD600nm为纵坐标，生长时间为横坐标，绘制生长曲线。
\五、实验结果六、分析与讨论1. 大肠杆菌和枯草芽孢杆菌的生长曲线有什么特征又有什么不同？体现了什么问题（1） 曲线的四个阶段特征从实验数据中可以看出，无论是大肠杆菌还是枯草芽孢杆菌，其生长曲线都呈现出典型的四个阶段：延迟期、对数期、稳定期和衰亡期。
测定细菌生长曲线
实验七 测定细菌生长曲线一、实验目的1. 了解细菌生长曲线特征，测定细菌繁殖的代时；2. 学习液体培养基的配制以及接种方法；3. 反复练习无菌操作技术；4. 了解不同细菌，不同接种方法在同一培养基上生长速度的不同；5. 掌握利用细菌悬液混浊度间接测定细菌生长的方法二、 实验原理将一定量的细菌接种在液体培养基内，在一定条件下培养，可观察到细菌的生长繁殖有一定的规律性，如以细菌的活菌数的对数作纵坐标，以培养时间作横坐标，可绘成一条曲线，成为生长曲线（如图一）。
图一 微生物生长曲线示意图单细胞微生物的发酵具有四个阶段，即Ⅰ调整期（延滞期）、Ⅱ对数期（生长旺盛期）、Ⅲ平衡期（稳定期）、Ⅳ死亡期（衰亡期）。
生长曲线可表示细菌从开始生长到死亡的全过程的动态。
不同的微生物有不同的生长曲线，同一种微生物在不同的培养条件下，其生长曲线也不一样。
因此，测定微生物的生长曲线对于了解和掌握微生物的生长规律是很有帮助的。
测定微生物生长曲线的方法很多，有血球计数板法、平板菌落计数法、称重法和比浊法等。
本实验采用比浊法测定，由于细菌悬液的浓度与混浊度成正比，因此，可利用分光光度计测定细菌悬液的光密度来推知菌液的浓度。
将所测得的光密度值（OD600）与其对应的培养时间作图，即可绘出该菌在一定条件下的生长曲线。
注意，由于光密度表示的是培养液中的总菌数，包括活菌与死菌，因此所测定的生长曲线的衰亡期不明显。
从生长曲线我们可以算出细胞每分裂一次所需要的时间，即代时，以G 表示。
其计算公式为：2lg /)lg (lg 1212W W t t G --=式中t1和t2为所取对数期两点的时间；W1和W2分别为相应时间测得的细胞含量（g/L ）或OD 。
三、 实验仪器、材料和用具1. 实验材料:大肠杆菌，枯草杆菌菌液及平板；2. 培养基:牛肉膏蛋白胨葡萄糖培养基3.实验仪器:取液器(5000ul, 1000ul 各一支);培养箱, 摇床，722s分光光度计；4.实验用具:无菌1000ul吸头80个;无菌5000ul吸头2个;比色皿9个+共用参比杯一个.四、实验步骤1.准备菌种：将细菌接种到牛肉膏蛋白胨葡萄糖三角瓶培养基中，37℃振荡培养18h，另外准备单菌落平板各1块2.分为三个小组：第（1）小组取1.0ml大肠杆菌菌液接种到100ml培养基, 37 ℃200rpm取3.0ml大肠杆菌菌液接种到100ml培养基，37 ℃200rpm取5.0ml大肠杆菌菌液接种到100ml培养基，37 ℃200rpm第（2）小组取一个大肠杆菌菌落接种到100ml培养基，37 ℃200rpm取1.0ml大肠杆菌菌液接种到100ml培养基，37 ℃110rpm取1.0ml大肠杆菌接种到100ml培养基，30 ℃200rpm第（3）小组取1.0ml枯草杆菌接种到100ml培养基，37 ℃200rpm取1.0ml枯草杆菌接种到100ml培养基，30 ℃200rpm取1.0ml枯草杆菌接种到100ml培养基，37 ℃110rpm每培养一小时取样一次(2.5h,3.5h加测1次). 对照组测量起始pH,所有瓶子测量发酵9h结束测pH.3.测量：选用600nm波长，以蒸馏水作为参比，开始培养前测定每组培养液的OD值作为起始点。
大肠杆菌m9基本培养基下的生长曲线
大肠杆菌m9基本培养基下的生长曲线大肠杆菌（Escherichia coli）是一种较为常见的革兰氏阴性杆菌，它在大肠内生活，属于肠道菌群的一部分。
大肠杆菌是一种典型的革兰氏阴性菌，它对人体的肠道有着非常重要的生态功能。
大肠杆菌的基本培养基m9是一种典型的培养基，适合用于大肠杆菌的生长和研究。
本文将通过m9基本培养基对大肠杆菌的生长曲线进行研究，以探讨大肠杆菌在不同培养条件下的生长特性。
1.大肠杆菌m9基本培养基的制备大肠杆菌m9基本培养基是用来培养大肠杆菌的一种基本培养基，它包括氮源、磷源、镁盐、硫酸铵和糖等多种成分。
其制备方法如下：1）将1.28克m9培养基粉末加入到100毫升无菌水中。
2）混匀溶解后，pH值调至7.0-7.2。
3）装管，高压灭菌20分钟即成。
2.大肠杆菌m9基本培养基的生长条件大肠杆菌在m9基本培养基下的生长条件需要注意以下几点：1）温度：37°C2）培养时间：通常在24-48小时内观察生长情况3）pH值：7.0-7.24）氧气条件：需保持通气状态3.大肠杆菌m9基本培养基下的生长曲线大肠杆菌在m9基本培养基下的生长曲线通常可以分为四个阶段：潜隐期、对数期、平稳期和衰老期。
3.1潜隐期在接种后的一段时间内，大肠杆菌需要适应新的环境，其生长速度较慢，这个阶段称为潜隐期。
3.2对数期之后，大肠杆菌进入对数生长期，细菌数量呈指数级增长。
在这个阶段，大肠杆菌的生长速度非常快，细胞数量呈现出指数级增长的趋势。
3.3平稳期当培养基内营养物质逐渐耗尽时，大肠杆菌的生长速度会逐渐减慢。
此时大肠杆菌进入平稳期，细菌数量基本保持不变。
3.4衰老期当培养基内的营养物质耗尽，甚至有些有毒物质堆积到一定程度时，大肠杆菌进入衰老期，此时细菌数量开始下降。
4.大肠杆菌m9基本培养基的应用大肠杆菌m9基本培养基在生物学领域有着广泛的应用，主要有以下几个方面：1）基因表达：m9基本培养基可以用于大肠杆菌的基因表达实验，是一种较为理想的表达载体。
实验八九 生长曲线制作和环境因素对微生物的影响
5、半夜如何取样？ 半夜如何取样？ 实验结果： 实验结果：列表和绘制生长曲线
实验九 环境因素对微生物的影响
目的要求
掌握混和倒平板的方法 了解紫外线对微生物的杀菌作用 了解常见生化因素对微生物的影响。 了解常见生化因素对微生物的影响。
基本原理
物理因素：紫外线引起细胞核酸变性， 物理因素：紫外线引起细胞核酸变性，对微生物具有致 死作用。紫外线的穿透力很弱， 死作用。紫外线的穿透力很弱，仅限于物体表面或空气 灭菌。经紫外线照射后的受损细胞，遇光有光复活现象， 灭菌。经紫外线照射后的受损细胞，遇光有光复活现象， 需避光培养。 需避光培养。 化学因素：常用的化学消毒剂主要有重金属及其盐类， 化学因素：常用的化学消毒剂主要有重金属及其盐类， 酚、醇、醛等有机化合物以及染料、表面活性剂等。它 醛等有机化合物以及染料、表面活性剂等。 们的杀菌或抑菌作用主要是使菌体蛋白质，核酸变性， 们的杀菌或抑菌作用主要是使菌体蛋白质，核酸变性， 或改变些抗生素只对少数细菌有抗菌作用， 生物因素：某些抗生素只对少数细菌有抗菌作用，如青 霉素一般只抗G 多粘菌素只抗G 霉素一般只抗G+，多粘菌素只抗G-，这类抗生素称为窄 谱抗生素；而另一些抗生素，如四环素、 谱抗生素；而另一些抗生素，如四环素、土霉素对许多 G+和G-都有作用，这类抗生素称为广谱抗生素。 都有作用，这类抗生素称为广谱抗生素。
方法与步骤
1、制备含菌平板： 制备含菌平板： 培养基配制：配制LB固体培养基（每两小组300mL LB固体培养基 300mL， （1）培养基配制：配制LB固体培养基（每两小组300mL，分装 于两只250mL三角瓶内。） 250mL三角瓶内 于两只250mL三角瓶内。） 灭菌：121℃,20分钟 需同时准备的无菌材料见上页） 分钟（ （2）灭菌：121℃,20分钟（需同时准备的无菌材料见上页） 菌悬液配制：5mL无菌水分别倒入两株菌的斜面 无菌水分别倒入两株菌的斜面， （3）菌悬液配制：5mL无菌水分别倒入两株菌的斜面，接种环 将菌苔刮下，制成菌悬液后倒回试管（ 将菌苔刮下，制成菌悬液后倒回试管（原来装无菌水的试 ），吹吸均匀 吹吸均匀， 管），吹吸均匀，备用 倒平板： 0.5mL菌悬液加入无菌空平皿中央 菌悬液加入无菌空平皿中央， （4）倒平板：取0.5mL菌悬液加入无菌空平皿中央，灭菌的固 体培养基冷却至45 50℃，倒平板，缓慢混匀，标记菌号， 45体培养基冷却至45-50℃，倒平板，缓慢混匀，标记菌号， 静置冷却（已知菌和未知菌分别倒3个平板（分别用于紫外， 静置冷却（已知菌和未知菌分别倒3个平板（分别用于紫外， 化学药剂和抗生素实验），每小组共6个平板） ），每小组共 化学药剂和抗生素实验），每小组共6个平板）
最新测定细菌生长曲线
实验七 测定细菌生长曲线一、实验目的1. 了解细菌生长曲线特征，测定细菌繁殖的代时；2. 学习液体培养基的配制以及接种方法；3. 反复练习无菌操作技术；4. 了解不同细菌，不同接种方法在同一培养基上生长速度的不同；5. 掌握利用细菌悬液混浊度间接测定细菌生长的方法二、 实验原理将一定量的细菌接种在液体培养基内，在一定条件下培养，可观察到细菌的生长繁殖有一定的规律性，如以细菌的活菌数的对数作纵坐标，以培养时间作横坐标，可绘成一条曲线，成为生长曲线（如图一）。
图一 微生物生长曲线示意图单细胞微生物的发酵具有四个阶段，即Ⅰ调整期（延滞期）、Ⅱ对数期（生长旺盛期）、Ⅲ平衡期（稳定期）、Ⅳ死亡期（衰亡期）。
生长曲线可表示细菌从开始生长到死亡的全过程的动态。
不同的微生物有不同的生长曲线，同一种微生物在不同的培养条件下，其生长曲线也不一样。
因此，测定微生物的生长曲线对于了解和掌握微生物的生长规律是很有帮助的。
测定微生物生长曲线的方法很多，有血球计数板法、平板菌落计数法、称重法和比浊法等。
本实验采用比浊法测定，由于细菌悬液的浓度与混浊度成正比，因此，可利用分光光度计测定细菌悬液的光密度来推知菌液的浓度。
将所测得的光密度值（OD600）与其对应的培养时间作图，即可绘出该菌在一定条件下的生长曲线。
注意，由于光密度表示的是培养液中的总菌数，包括活菌与死菌，因此所测定的生长曲线的衰亡期不明显。
从生长曲线我们可以算出细胞每分裂一次所需要的时间，即代时，以G 表示。
其计算公式为：2lg /)lg (lg 1212W W t t G --=式中t1和t2为所取对数期两点的时间；W1和W2分别为相应时间测得的细胞含量（g/L ）或OD 。
三、 实验仪器、材料和用具1. 实验材料:大肠杆菌，枯草杆菌菌液及平板；2. 培养基:牛肉膏蛋白胨葡萄糖培养基3.实验仪器:取液器(5000ul, 1000ul 各一支);培养箱, 摇床，722s分光光度计；4.实验用具:无菌1000ul吸头80个;无菌5000ul吸头2个;比色皿9个+共用参比杯一个.四、实验步骤1.准备菌种：将细菌接种到牛肉膏蛋白胨葡萄糖三角瓶培养基中，37℃振荡培养18h，另外准备单菌落平板各1块2.分为三个小组：第（1）小组取1.0ml大肠杆菌菌液接种到100ml培养基, 37 ℃200rpm取3.0ml大肠杆菌菌液接种到100ml培养基，37 ℃200rpm取5.0ml大肠杆菌菌液接种到100ml培养基，37 ℃200rpm第（2）小组取一个大肠杆菌菌落接种到100ml培养基，37 ℃200rpm取1.0ml大肠杆菌菌液接种到100ml培养基，37 ℃110rpm取1.0ml大肠杆菌接种到100ml培养基，30 ℃200rpm第（3）小组取1.0ml枯草杆菌接种到100ml培养基，37 ℃200rpm取1.0ml枯草杆菌接种到100ml培养基，30 ℃200rpm取1.0ml枯草杆菌接种到100ml培养基，37 ℃110rpm每培养一小时取样一次(2.5h,3.5h加测1次). 对照组测量起始pH,所有瓶子测量发酵9h结束测pH.3.测量：选用600nm波长，以蒸馏水作为参比，开始培养前测定每组培养液的OD值作为起始点。
细菌生长曲线的测定实验报告
细菌生长曲线的测定实验报告竭诚为您提供优质文档/双击可除细菌生长曲线的测定实验报告篇一：细菌生长曲线实验九测定细菌生长曲线[实验目的]1．了解细菌生长曲线特征：2．学习液体培养基的配制以及注意事项。
3．学习液体种子和固体种子的不同接种方法和注意事项。
4．利用细菌悬液浑浊度间接测定细菌生长。
[仪器和材料]1．实验材料(1)大肠杆曲，枯草杆曲培养液及大肠杆菌平板。
(2)牛肉膏蛋门胨葡萄糖培养基(150ml／250ml三角瓶x4瓶／大组)，配方：牛肉膏5g，蛋白胨10g，nacl5g，葡萄糖10g，加水至1000ml，ph7．5。
2．实验仪器取液器(5000μl，1000μl，200tμl各一支)；培养箱．摇床，722s 分光光度汁；1000μl无菌吸头100个；5000μl 无菌吸头2(:细菌生长曲线的测定实验报告)个；1ml或4ml玻璃或塑料比色皿4个，共用参比杯一个。
[实验原理]将一定量的细菌接种在液体培养基内．在一定的条件下培养，可观察到细菌的生长繁殖有一定规律性，如以细菌活菌数的对数作纵坐标，以培养时间作横坐标，可绘成一条曲线，称为生长曲线(图91)。
单细胞微生物发酵具有4个阶段，即调整(迟滞期)、对数期(生长旺盛期)、平衡期(稳定期)、死亡期(衰亡期)。
生长曲线可表示细菌从开始生长到死亡的全过程动态。
不同微生物有不同的生长曲线，同一种微生物在不同的培养条件下，其生长曲线也不一样。
因此，测定微生物的生长曲线对于了解和掌握微生物的生长规律是很有帮助的．测定微生物生长曲线的方法很多，有血细胞计数法，平板菌落计数法，称重法和比浊法等。
本实验采用比浊法测定，由于细菌悬液的浓度与浑浊度成正比，因此，可以利用分光光度计测定菌悬液的光密度来推知菌液的浓度。
将所测得的光密度值(测oD550或oD620或oD600或oD420，可任选一波长)与对应的培养时间作图，即可绘出该菌在一定条件下的生长曲线。
注意，由于光密度表示的是培养液中的总菌数，包括活菌与死菌，因此所测生长曲线的衰亡期不明显。
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大肠杆菌生长曲线实验报告抗生素能破坏细菌细胞壁的结构，使细菌的繁殖和生长受到抑制。
但某些细菌对抗生素表现出抗性，原因是其基因发生了改变，产生能抵抗抗生素的性状。
在自然情况下，细菌的基因突变率很低，而且突变是不定向的，因此在自然条件下，想要获得有抗性的细菌是很困难的。
当给与适当的物理条件时，其突变率会大大增加。
如当用α射线、β射线、γ射线、Χ射线、中子和其他粒子、紫外线、微波等物理因素辐射时，能够促进遗传物质突变。
DNA对紫外线（UV）有强烈的吸收作用，尤其是碱基中的嘧啶，它比嘌呤更为敏感。
紫外线引起DNA 结构变化的形式有DNA链断裂、碱基破坏、胸腺嘧啶二聚体等。
因此，紫外线通常作为诱变剂，用于微生物菌种选育。
一般细胞分裂越旺盛，诱变剂量越大，突变率高，诱变最有效的波长253~265 nm。
选择合适的诱变剂量对于获得较高突变率十分关键，过高或过低的辐射剂量会导致菌株死亡或诱变不充分而降低诱变效果。
在紫外线诱变下，菌株发生不定向的突变，想要得到需要的特向变异必须对诱变后的菌株做筛选。
本实验想要得到的是能够抵抗抗生素的菌株，因此可以用抗生素培养基作为筛选培养基对菌种进行筛选。
若菌株没有发生定向突变，则该菌株不能在抗性培养基上正常生长，只有发生了定向突变才可能在筛选培养基上正常生长。
紫外线对于菌株有诱变作用外，对菌株还有较强的致死作用，因为紫外线改变了菌株的基因结构导致菌株无法正常生长繁殖。
因此，通过本实验的操作，在合适的照射剂量的设置下，比较不同不同照射剂量下的致死效果和突变率，并初步分析两者的相关性。
在分析死亡曲线和诱变率曲线的基础上，能了解诱变育种的机理和方法，为做进一步的诱变实验做准备。
2.材料和方法2.1实验材料、仪器和试剂菌种：大肠杆菌仪器：超净台、离心机、高压灭菌锅、培养箱、磁力搅拌器、培养皿、涂布器、移液管、移液器试剂：牛肉膏蛋白胨培养基相关试剂、硫酸卡那霉素水溶液（50mg/ml）、生理盐水2.2实验方法2.2.1制备培养基普通培养基——牛肉膏蛋白胨培养基（400ml）：牛肉膏5g蛋白胨10g Nacl 5g琼脂20g蒸馏水1000ml Ph7.0 按配方配制好培养基后置于灭菌锅中115℃15min，倒平板，4皿*15ml*5组+2皿*15ml=22皿*15ml=330ml筛选培养基(200ml)：含抗生素50mg/L。
（卡那霉素属于氨基糖苷类抗生素，能结合细菌核糖体的30S亚基上的16SrRNA，阻断细菌蛋白质的合成。
）牛肉膏5g蛋白胨10g Nacl 5g琼脂20g蒸馏水1000ml Ph7.0硫酸卡那霉素水溶液（50mg/ml）0.2ml，按配方先不要加硫酸卡那霉素配制然后115℃15min灭菌，取出培养基后冷却至60℃时将硫酸卡那霉素0.2ml加入培养基中，充分震荡混匀，倒平板，2皿*15ml*5组+2皿*15ml=12皿*15ml=180ml2.2.2制备菌悬液（106~108个/mL）①固体培养：大肠杆菌划线或涂布接种于固体培养基，37℃培养24-48h。
②菌悬液：用适量生理盐水刮洗菌落，倒入一个无菌小三角瓶（或试管）中，充分振荡使菌体散开，得到菌悬液。
③菌悬液浓度用血球计数板计数使用细菌计数板或血球计数板在显微镜下直接计数。
将菌液滴在血球计数板0．1ml的计数格中，细菌被固定染色后，在显微镜下选择数出若干个小格中的细菌数目，（一般数125个小格），根据比例关系折算出单位体积菌液中细菌的数量。
血球计数板规格：计数格=4*4=16大格1大格=5*5=25小格小格体积=0.05*0.05*0.1=0.00025mm3=2.5*10-7ml(长*宽*高) 计算方法例如：125格中90个细菌，则（90÷125）÷（2.5*10-7）个/ml=2.88*106所以，125格中的细菌大约在31(4格1个菌)—3125（每个小格25个菌）个。
2.2.3诱变处理及接种①将紫外灯打开，预热30min；②取无菌培养皿（Φ90mm，含无菌大针），加入稀释好的菌悬液8ml以覆盖培养皿底面为宜。
③将待处理的培养皿置于诱变箱内的磁力搅拌仪上，开启磁力搅拌仪旋纽进行搅拌1分钟，然后打开皿盖，分别处理10s、20s、40s、80s、160s （可以累积照射），照射完毕后先盖上皿盖，再关闭搅拌和紫外灯；④每个照射剂量分别取0.5ml分别稀释1000倍和100倍，然后取稀释液0.1ml做普通培养基的涂布培养，每个处理两个重复；同时每个照射剂量取0.1ml照射液直接做两个筛选培养基的涂布培养。
⑤对照涂布培养：将照射的菌液稀释1000倍，在稀释液中取0.1ml做2个普通培养基涂布培养，2个筛选培养基的涂布培养。
涂布要均匀，培养基表面无液流。
⑥37℃培养24h后，计数，统计分析。
对于筛选的抗性菌种进行验证、纯化。
2.2.4.结果计数、分析、统计及讨论①以辐射时间为横坐标，以存活菌落数的lg值为纵坐标，作紫外线对大肠杆菌致死效应曲线。
②列公式计算不同辐射剂量下的致死率。
死亡率?照射前活菌数/ml?照射后活菌数/ml?100%照射前活菌数/ml③计算并比较不同辐射剂量下大肠管杆菌的抗药突变率，并分析不同辐射剂量的诱变效果差异原因突变率=筛选平板菌数/普通平板菌数*100%④抗药性菌株的筛选与纯化将一抗性克隆划线到一新的抗性平板上，与对照菌相比较，观察生长状况3.结果与分析3.1实验结果记录及初步整理表1.大肠杆菌诱变初始数据照射时间0 10 20 40 80 160筛选培养基活菌数个/皿1号2号平均0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 00 0 0 0 0 0 0 0 0 0 00 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0普通培养下稀释度100 10-2 10-3 10-2 10-3 10-2 10-3 10-2 10-3 10-2 10-3普通培养基中菌数个/皿1号2号平均5000 2000 366 25 2 2 0 5 40 0 05600 1820 251 64 0 5 0 0 0 0 05300 1820 251 44.5 1 3 0 2.5 20 0 0溶液浓度个/ml 5.3*107 1.8*106 2.5*106 4.5*104 1*1043.5*103 0 2.5*103 2*105 0 03.2最佳照射时间的设置结合数据处理结果的图和表分析，在10s的照射下，细菌死亡率达到了95%，20s时达到了99.9%，说明在20s内大部分菌株已经死亡，而整个实验过程中未发生任何正突变，可能与此有较大关系。
已经有实验证实，当菌种死亡率达到70%~80%时，突变率最大。
所以在做进一步的实验中应该减少照射剂量，或通过增多10s内的照射设置，或增大照射距离，因为时间太短可能导致控制实验的难度加大。
使死亡率变化曲线能突显出变化趋势。
3.3筛选培养基选择筛选培养基是将发生突变的菌株从普通菌株中显现出来并对其浓缩。
该实验中的筛选培养基中的添加剂是硫酸卡那霉素，若发生突变的菌株能对其显现出抗性，但这抗性也是有一定范围的，若超过其抗性范围即使发生突变也不能正常生长。
本实验选用的50mg/L,实验证明该浓度对于该菌种抗性选育来说已经过高，应该选择较低的浓度。
可以在试验前对该菌种的最低致死浓度做检测。
将制备好的出发菌株溶液涂布在含不同浓度硫酸卡那霉素的平板上,37℃培养24h,观察不同平板上的菌落数,并记录不同抗生素作用浓度。
凡是在前一个低浓度平板上已长出菌落而在后一个较高浓度平板上未长出菌落的,后一浓度即为某种抗生素对出发菌株的最低致死浓度【1】。
表2.不同照射剂量下的存活率lg值和死亡率照射时间/s 0 10 20 40 80 160存活菌浓度5.3*107 2.5*106 4.5*104 3.5*103 2.5*103 0存活菌的lg值7.72 6.40 4.65 3.54 3.39死亡菌浓度05.05*107 5.29*107 5.299*107 5.299*107 5.3*107致死率0 0.953 0.999 0.9999 0.9999 14.小结与讨论（1）本实验通过对大肠杆菌进行紫外线照射，欲得到抗性菌株，但由于照射剂量过大和抗生素浓度过高等原因未得到任何一株抗性菌株。
（2）通过本实验，得到了在28cm，下大肠杆菌的照射致死致死曲线，可以依此曲线反回归在该照射条件下选择合适的照射时间得到较高的突变率。
（3）欲得到较高的抗性突变率，还可尝试改变培养温度，有实验证实不同的温度培养会对细菌的突变率造成影响【2】。
（4）欲得到较好的突变率还需要较优质的菌株。
因为菌株的突变主要是发生在遗传物质复制转录的过程中，所以菌株的生理活性对突变效率会有很大影响，最好选择在对数期的菌株。
状况比较同步、易变异、重复性较好；同时为了保证处理时具有一定的细胞浓度,以增加可变异细胞总数,故选用对数期的细胞进行处理。
[1]涂国全,刘姝,黎循航.通过获得链霉菌抗性基因突变株筛选梅岭霉素高产菌株[J].中国抗生素,2002,27(6):321-325.[2]汪志芸抗生素产生菌AP19-1的鉴定及UV诱变育种的研究[D],浙江：浙江大学生命科学学院，2003，29。