三叶木通齐墩果酸的超声提取工艺研究

关键词 三叶木通 ;正交设计 ;齐墩果酸 ;超声提取
传统中药木通始载于《神农本草经 》,味微辛 苦 ,性寒 。具有清热利尿 、通经活络 、镇痛 、排脓 、通 乳的功效〔1、2〕。关木通用药标准被取消后 ,退出药 材市场近 30年的三叶木通 A kebia trifolia ta ( Thunb) Koidz已逐渐被广泛使用 。本文采用正交试验法研 究超声提取三叶木通主要有效成分齐墩果酸的优选 提取条件 ,并与传统的溶剂提取法作了比较 ,现报道 如下 。 1 仪器与材料
Tu21901双光束紫外可见分光光度计 (北京普 析通用仪器有限公司 ) ,万分之一电子天平 ,电子恒 温水溶锅 (上海光地仪器设备有限公司 ) ,隆达 HF2 510 B 超声循环提取机 (北京弘祥隆生物技术开发 有限公司 ) 。齐墩果酸标准品 ,中国药品生物制品 检定所提供 ,批号 070929803。三叶木通于 2003 年 11月采自四川雅安 ,并经四川农业大学杨光辉教授 鉴定 。
Key words Peach kernels; V itam in E; γ2tocopherol; α2tocopherol; δ2tocopherol
三叶木通齐墩果酸的超声提取工艺研究
刘卫国 杨文钰 3 肖启银 (四川农业大学农学院 ,四川雅安 625014)
摘要 目的 :确定三叶木通齐墩果酸的最佳超声提取工艺条件 。方法 :采用正交设计 L9 (34 )方法 ,考察乙醇浓 度 、超声时间 、超声功率和间隙超声时间比等因素对提取率的影响 ,用分光光度法测定含量 ,并与常规提取法进行 了对比 。结果 :所考察的因素对三叶木通齐墩果酸提取的影响程度为 :超声时间 >乙醇浓度 >超声功率 >间隙超 声时间比 ,超声提取的最佳条件为 : A2B3 C1D2。结论 :与常规的提取方法相比 ,超声提取具有提取时间短 、简单 、收 率高等优点 。
中药材第 28卷第 2期 2005年 2月
下方法处理 ,测定吸光度值 ,代入方程 ,计算齐墩果
酸含量 。
213 正交试验及结果 按 L9 (34 )正交试验设计表 对三叶木通进行超声提取并测定含量 ,重复 2次 ,结
果见表 2。
表 2
正交实验结果
齐墩果酸
实验号 A
B
C
D 平均含量
(%)
1 2 3 4 5 6 7 8 9 X1 X2 X3 R 表 3
2 方法与结果 211 样 品 的 提 取 分 别 称 取 三 叶 木 通 茎 干 粉 21000 g 9 份 。按表 1 选择的因素和水平在循环水 冷却超声提取缸内超声提取 2次 ,合并提取液 , 50℃ 减压浓缩至干 ,加 2mol/L HCl 20 m l,氯仿 20 m l,在 恒温水浴锅上 60℃回流水解 5 h,萃取氯仿层 ,水层
(2004 - 09 - 07收稿 )
Study on Ultra son ic Extraction Techn ics of O leanolic Ac id in A keb ia trifo lia ta
L iu W eiguo, Yang W enyu, Xiao Q iyin ( Sichuan Agriculture University, Ya’an 625014) Abstract Objective: To op tim ize the ultrasonic extraction condition for oleanolic acid from A kebia trifoliata1 M ethod: According to the orthogonal design L9 (34 ) , the op timum ultrasonic extraction technique was sought through experimental investigation, and was com2 pared w ith the routine extraction technics1The contents of oleanclic acid were determ ined by UV 2spectrophotometry. Result: The order of factors to affect the oleanolic acid extraction was extraction time > ethanol concentration > ultrasonic power > ration of interval time to ultrasonic time1The op timum ultrasonic extractions were A2B3 C1D2. Conclusion: Compared w ith traditional extraction, ultrasonic method can save time, be easy to operate, imp rove extraction rates and need no heating1 Key words A kebia trifoliata ( Thunb) Koidz; O rthogonal design; O leanolic acid; U ltrasonic extraction
C 0104344 2 0102172 9134765 < 0101
D 0101817 2 误差 0102091 9
0100909 3191108 0100232
注 : F0105 (2, 9) = 4126; F0101 (2, 9) = 8102
由表 2、3可知 ,对三叶木通中齐墩果酸提取率
010251 013082 013464 013413 013694 014051 012776 012700 013800
方差来源
离均差 平方和
自由度
均方
F
P
A 0106376 2 0103188 13172077 < 0101
B 0108067 2 0104033 17135885 < 0101
·140·
再用氯仿萃取两次 ,每次 10 m l,合并氯仿并定容至
50 m l,作为供试品 。
表 1
因素水平表
因素
水平
A 乙醇浓度
(%)
B 超声时间
(m in)
C
D
超声功率 间隙 :超声
(W )
( s)
1
0
2
50
3
80
10
800 015∶015
20
1200
015∶1
30
1600
015∶115
212 齐墩果酸的测定 21211 标 准曲 线制 备〔3〕: 称取 齐墩 果酸 标 准 品 414000 mg,以氯仿配制成 014400 mg /m l的齐墩果 酸标准品溶液 10 m l,精密吸取 01025 m l、01050 m l、 01075 m l、01100 m l、01125 m l、01150 m l分别置于具 塞试管中 ,挥去溶剂 ,加入新制的 5%香草醛 2冰醛 酸 012 m l和高氯酸 018 m l,在 65℃恒温水浴加热 20 m in,冰水冷却 2 m in,加入冰醋酸 5 m l,摇匀 ,在 λ = 545 nm 处测定 ,随行试剂空白 ,绘制标准曲线 ,得出 齐墩果酸浓度 Y与吸光值 X 之间的回归直线方程 为 Y = 0100828 + 01094477X, r = 019990。 21212 样品的测定 :取供试品约 10 m l于离心管 中 , 4000 r/m in离心 ,取上清液 01125 m l按 21211项
Effects of Packag ing on the Stab ility of V itam in E in Peach Kernels Stored a t H igh Tem pera ture
L i Chengwen1 , Sun M eixia2 , M iao M ingsan1
(11Henan College of Chinese Traditional M edicine, Zhengzhou 450008; 21Henan University of Technology, Zhengzhou 450052) Abstract Peach kernels with three different kinds of packaging, including routine, vacuum and edible film , were put into an ac2
超声提取法是在提取过程中进行超声波强化处
理 ,最大的优点是提取时间短 、温度低 、提取率高 。
本实验采用的是隆达 HF2510 B 超声循环提取机 ,在 用于进行小剂量提取研究时应当尽量避免在超声过
程中因溶剂温度迅速升高而引起超声功率不稳定的
现象 ,为此 ,我们设计了一套循环水冷却超声提取 缸 ,利用循环水冷却来控制溶剂温度 ,适用于实验室 小剂量进行超声提取工艺研究 。
注 :四川省科技厅科技攻关项目 ; 3 通讯作者
参考文献
1 中国医学科学院药物研究所 1中药志 1第三卷 1北京 : 人民卫生出版社 , 1981∶563
2 《中国药物大全 》编委会 1中国药物大全 (第二版 ) 1中 药卷 1北京 :人民卫生出版社 , 1988∶208～209
3 唐春红 ,等 1木瓜中齐墩果酸的提取分离及含量测定 1 中国野生植物资源 , 2001, 20 (2) ∶48
果酸的含量 ,结果见表 4。对比实验结果表明 ,超声
提取对三叶木通齐墩果酸的提取率高于乙醇回流法
和浸提法 。
表 4
不同提取法对比实验及结果
提取方法
提取条件
齐墩果酸 含量 ( % )
乙醇回流法 浸提法 超声提取法
50%乙 醇 20m l沸 水 浴 回 流 提 取 2次 ,每次 210 h 50%乙醇 20 m l浸提 2次 ,每次 12 h
1
1
Байду номын сангаас
1
1
1
2
2
2
1
3
3
3
2
1
2
3
2
2
3
1
2
3
1
2
3
1
3
2
3
2
1
3
3
3
2
1
016797 016440 017002 017745
111158 019476 110295 019909
019276 111315 019934 019577
014361 014875 013293 012164
正交实验方差分析结果
celerated test in order to study the effects of packaging on the stability of vitam in E, γ2,α2, andδ2tocopherol1 The result indicated that
among the three kinds of packaging, the stabllity of vitam in E in the samp les w ith vacuum packaging was the best, and w ith routine packaging was the worst1 And for the samp les w ith the same kind of packaging, the stabilities ofγ2,α2andδ2tocophero decreased one by one1
的影响 : B >A > C > D ,其中 D 因素影响不显著 ,筛 选出的最佳工艺为 A2 B3 C1 D2 。 214 超声提取法与其它提取方法比较 分别称取
三叶木通多年生茎干粉 21000g,按表 4的方法和条 件进行提取 ,依法进行浓缩 、水解 ,最后用氯仿定容
至 50m l,每种方法重复 3次 ,测定各提取液中齐墩
50%乙醇 20 m l,功率 1200W 超 声提取 2次 ,每次 30m in
015035 014944 015661
3 讨论 本实验结果表明 :影响超声法提取三叶木通齐
墩果酸的主次因素为 :超声时间 >乙醇浓度 >超声 功率 >间隙超声时间比 。最佳提取工艺为 50%乙 醇 ,超声功率 800 W ,间隙超声时间比为 015∶1,超声 总时间 30m in。