培养基的成分

3、根据其作用不同，培养基分为： 诱导培养基 增殖培养基 生根培养基
4、根据其营养水平不同，培养基可分为基本培养基 和完全培养基。
基本培养基（就是通常称呼的培养基）主要有MS、 White、 N6、B5 、改良MS、Heller、Nitsh、SH、 Miller等。
完全培养基就是基本培养基的基础上，根据试验的 不同需要，附加一些物质，如生长调节物质和其他复杂有 机物质等。
通气性较好，便于操作， 但营养分布不均，生长 发育不整齐。
营养分布均匀，生 长整齐一致，但通 气性差。
液体培养基
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2、根据培养物的培养过程
培养基分为：
初代培养基和继代培养基 外植体：从植物体上取出的用于无菌培养的植物 材料。 植物材料：茎尖、茎段、花瓣、叶子、花药等
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初代培养 ：指用来第一次接种从植物体 上分离下来的外植体过程 。 继代培养：对培养物(包括细胞、组织或 其切段)通过更换新鲜培养基及不断切割 或分离，进行连续多代的培养，就称为继 代培养。
肌 氨 基 醇 酸
椰子汁（CM）
酵母浸出液（YE) 马铃薯汁液 水解酪蛋白（CH)
其
它
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碳水化合物
• 选用种类：蔗糖（或葡萄糖、果糖）等 • 蔗糖浓度：2%～3%，胚培养为4%～15% • 大生产时可用白糖
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糖在培养基的作用： 1）为细胞提供合成新物质的碳骨架 2）为细胞的呼吸代谢提供底物和能量
烟酸（VPP）
生物素（VH） 叶酸（VM） 抗坏血酸（VC） 肌醇
123.11
244.31 441.40 176.12 180.16
极易溶于水、乙醇
溶于水、乙醇
易 溶 于 乙 酸 、 NaOH、 参与生物甲基化作用 微溶于水 极易溶于水 易溶于水
有较强的还原能力，可做抗氧 化剂用，参与酪氨酸代谢及色 氨酸的羟基化作用
3）维持渗透压
维 生
素
种类： VB1（盐酸硫胺素）、VB6（盐酸吡哆 醇）、 VB3（烟酸）、Vc（抗坏血酸
浓度：0.1－1.0mg/L
作用：VB1 促愈伤组织产生，提高活力
VB6
Vc VB3
促根生长
防组织褐变 与植物代谢和胚的发育有关系
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氨基酸：甘氨酸、精氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、天冬 氨酸、 天冬酰胺、丙氨酸等等。因培养基的种类不 同，其种类和浓度不同。 肌醇：又称环己六醇，在糖类的转化中起作用
三、逐步增减法
四、广谱实验法
一、培养基的种类
1、根据其态相不同分为固体培养基与液体培养 基。 固体培养基是指加凝固剂的培养基。 培养基中加入一定量的凝固剂，加热溶解后， 分别装入常用的培养容器中冷却后即得到固体培 养基。 液体培养基是指不加凝固剂的培养基。
二者比较 固体培养基 培 养 基 种 类
无变旋现象 甜味与蔗糖相似
有变旋现象，以游离态或磷酯 形式存在 有变旋现象，甜度高于蔗糖 受高温影响小，可高温消毒 等电点 PH=6.0，碱性溶液中易 变质，光能加速变质 对光、空气、热稳定是转氨酶 的辅酶 受高温影响小，可高温消毒， 参与丝氨酸转变为甘氨酸过程 对空气、光、热、PH值稳定 对空气温度稳定
MS培养基
常 用 培 养 基 种 类
B5培养基 White培养基 N6培养基 KMຫໍສະໝຸດ Baidu8P培养基
KM-8P培养基特点：
•有机成分复杂，它包括了所有的单糖和维 生素
•用于原生质体培养( 包括原生质融合的培 养)
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N6培养基特点：
• 1974年朱至清等为水稻等禾谷类作物 花药培养而设计 • 成分简单 • KNO3 和 (NH4)2SO4含量高 • 广泛应用于小麦、水稻及其它植物的 花药培养等
常见糖和维生素及其主要性质
名称 蔗糖 山梨糖 葡萄糖 果糖 盐酸硫胺素（VB1） 核黄素（VB2） 盐酸吡哆素（VB6） 钴胺素（VB12） 分子量 342.30 180.16 180.16 180.16 337.28 376.37 205.64 1355.42 溶解性质 溶于水、乙醇 溶于水 溶于水 溶于水、乙醇 溶于水、乙醇、甘 油 溶于无水乙醇、微 溶于水 溶于水、乙醇 溶于水、乙醇 性质
White培养基特点：
• 1943年由Ｗhite为培养番茄根尖而设计的。 1963年又作了改良，称作Ｗhite改良培养 基。 • 特点：无机盐含量较低 • 适用：生根培养。
B5培养基特点：
• 含较低的铵 • 双子叶植物 尤其木本植物组培 可选择
MS培养基特点：
无机盐、离子浓度高，硝酸 盐含量较高。
MS培养基是目前应用最多最普遍的培养基。无机盐的浓 度较高，能保证组织培生长所需的矿物质营养。并且因 为离子浓度高，在配制、贮存、消毒过程中，即使有些 成分略有出入，也不致影响培养基中的离子平衡
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水 二 、 培 养 基 成 分 无机盐 有机物
植物激素 培养体支持材料 辅助性物质
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一、无 机 盐
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培养基
一、掌握培养基的种类及其特点
三、掌握培养基的组成和其适宜剂量
二、掌握MS培养基配制 四、理解培养基筛选方法
目 的 要 求 ：
第一节
培养基的种类和成分
一、培养基种类▼ 二、培养基成分▼
第二节 培养基制备
一、母液配制和保存
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二、培养基配制、分装和灭菌▼
第三节 培养基的选择▼
一、单因子试验 二、多因子试验
植物中广泛存在，可能与 IAA的代谢有关
天然复合物
椰乳：促愈伤组织和细胞培养，用量10－20%， 使用注意茎尖大小 香蕉泥：用量150－ 200ml/L ，应用在兰花组培
马铃薯汁液：用量150－200g/L，使苗壮
水解酪蛋白：浓度100－200mg/L，应用在微茎尖 培养
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三、激素
自然界中，植物激素是植物新陈代谢中产生的天然化合物，它 能以极微小的量影响到植物的细胞分化、生长、发育，影响到植物 的形态建成、开花、结实、成熟、脱落、衰老和休眠、萌发等许多 生理生化活动。 在培养基中，其各种成分对培养物影响最大的最显著的就是激素。 激素的种类、浓度、以及配比都会显著的影响愈伤组织的形成、不 定根、不定芽的分化，胚状体的形成等。 通常，不同植物，或不同品种，甚至同一植物的不同位置对激素 的要求有很大的变化，这主要取决于植物的内源激素水平。
氮 枝叶生长需要氮素，缺氮老叶先发黄； 氮过量，枝叶过度茂盛 。 磷 缺磷，植株生长缓慢，老叶暗紫色。 钾 促进花卉生长健壮，增强抗性，茎秆 挺拔。缺钾，叶尖、叶缘枯焦，叶片呈 皱曲状，老叶发黄或火烧状。 钴 缺钴，叶片失绿而卷曲，整个叶片向 上弯曲凋枯。
碳水化合物
二、 维 生 素 有 机 天然复合物 物