24、乙肝三系测定

1 检验申请

单独检验项目申请：乙肝三系、乙肝两对半；组合项目申请：术前八项。临床医生根据需要提出检验申请。

2 标本采集与处理

2.1 标本采集

2.1.1 采用含高效促凝剂或含分离胶的真空采血管，常规静脉采血约2 ml，无需抗凝。

2.1.2 检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符号。

2.1.3 急诊标本采集后，在检验申请单上填写标本采集时间。

2.1.4 标本采集后与检验申请单一起及时送至检验科。专人负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。

2.1.5 下列标本为不合格标本

2.1.5.1 标本量不足：少于0.5 ml的全血标本，或少于0.1ml的血清或血浆。

2.1.5.2 无法确认标本与申请单对应关系的。

2.1.5.3 其它如标识涂改、标本试管破裂等。

2.2 标本保存

2.2.1 标本接收后在30min内将标本离心分离出血清。

2.2.2 标本保存时间：血清室温（15～25℃）下可稳定48h，在冰箱中（2～8℃）可稳定7天。-20℃放置12个月。为避免标本中水份挥发使血清浓缩，对保存超过1天的标本均加塞密闭或覆盖保鲜膜。

2.2.3 已完成测试的标本保存完整的识别号，置2～8℃冰箱内保存7天。备复检。2.3 标本采集的注意事项

2.3.1 采血前使受检者保持平静、松弛状态。

2.3.2 不建议采集抗凝血标本，如果必须使用血浆，推荐的抗凝剂是肝素。

3 原理：乙型肝炎病毒表面抗原、表面抗体、e抗原、e抗体、核心抗体检测试剂盒（胶体金法）采用胶体金免疫层析分析技术、将五个诊断意义相关的试剂通过一个包装组合在一起，同时进行乙型肝炎病毒五项标志物的检测，在不影响各自性能的情况下，便于客户的储存和使用。

HBsAg检测试剂采用双抗体夹心法，试剂含有被事先固定于膜上测试区(T)的抗体。

测试时，标本滴入试剂加样处，标本与预包被的胶体金颗粒结合的抗HBsAg抗体反应。然后，混合物随之在毛细效应下向上层析。如是阳性，胶体金抗体在层析过程中先于标本中的HBsAg结合，随后家何物会被固定在膜上的抗HBsAg抗体结合，在测试区内（T）会出现一条紫红色带。这条带是HBsAg抗体-HBsAg-HBsAg抗体金标粒子的复合物在膜上结合形成的。如是阴性，则测试区内（T）将没有紫红色带。无论HBsAg是否存在于标本中，一条紫红色带都会出现在指控内（C）。质控区内（C）所显现的紫红色条带是判定是否有足够标本，层析过程是否正常的标准，同时也作为试剂的内控标准。

HBsAb检测试剂双抗原夹心法，试剂含有被事先固定于膜上测试区（T）的乙肝表面抗体。

测试时，标本滴入试剂加样处，标本与预包被的胶体金颗粒结合的HBsAg反应。然后，混合物随之在毛细效应下向上层析。如是阳性，胶体金抗体在层析过程中先于标本中的HBsAg结合，随后结合物会被固定在膜上的HBsAg抗体结合，在测试区内(T)会出

如果阴性，则测试区内(T)将没有紫红色条带。无论HBsAg是否存在于标本中，一条紫红色条带都会出现在质控区内(C)。质控区内(C)所显现的紫红色条带是判定是否有足够标本，层析过程是否正常的标准，同时也作为试剂的内控标准。

HBeAg检测试剂采用双抗体夹心法，试剂含有被事先固定于膜上测试区（T）的乙肝e抗体。

测试时，标本滴入试剂加样处，标本与预包被的胶体金颗粒结合的HBeAg抗体反应。然后，混合物随之在毛细效应下向上层析。如是阳性，胶体金抗体在层析过程中先于标本中的HBeAg结合，随后结合物会被固定在膜上的HBeAg抗体结合，在测试区内(T)会出现一条紫红色条带。这条带是HBeAg抗体-HBeAg-HBeAg抗体金标粒子的复合物在膜上结合形成的。如果阴性，则测试区内(T)将没有紫红色条带。无论HBeAg抗体是否存在于标本中，一条紫红色条带都会出现在质控区内(C)。质控区内(C)所显现的紫红色条带是判定是否有足够标本，层析过程是否正常的标准，同时也作为试剂的内控标准。

HBeAb,HBcAb检测试剂才有竞争抑制法，试剂含有被事先固定于膜上测试区(T)的抗体。

测试时，血清或血浆标本滴入试剂加样处，随之标本在毛细效应下向上层析。如标本中含有相应的抗体，则同膜上测试区(T)的抗体竞争与预包被在金标粒子的相应抗体反应。如果标本中没有相应抗体，预包被在金标粒子的复合物的相应抗原则同膜上测试区(T)的抗体全部结合。阳性标本，测试区内(T)将没有紫红色条带，阴性标本，测试区内(T)将会出现明显的紫红色条带。无论相应的抗体是否存在于标本中，一条紫红色条带都会出现在质控区内(C)。质控区内(C)所显现的紫红色条带是判定是否有足够标本，层析过程是否正常的标准，同时也作为试剂的内控标准。

4 试剂：艾博乙肝五项检测卡（胶体金法）。规格为25人份/盒。

5操作步骤：

5.1、将待测标本从储存条件下取出，平衡至室温（18－25℃）并编号。

5.2、将胶体金测试卡从包装盒中取出，打开铝箔包装袋，平置于台面上。编号（与样品相对应）；

5.3、用塑料滴管加2-3滴样本血清或血浆，加入试剂板的五个加样孔。

5.4、等待紫红色条带的出现，测试结果应在测定开始后20分钟开始读取。30分钟后判断无效。

6 参考范围：正常人为阴性。

7结果判定

HBsAg HBsAb HBeAg

阳性：两条紫红色条带出现。一条位于测试区（T）内，另一条位于质控区（C）。阳性结果表明：标本中含有待测物质。

阴性：仅质控区（C）出现一条紫红色条带，在测试区（T）内无紫红色条带出现。阴性结果表明：标本中检测不出待测物质

在此情况下，应再次仔细阅读说明书，并用新的试剂重新测试。如果问题仍然存在，应立即停止使用此批号产品，并与当地供应商联系。

注意：测试区（T）内的紫红色条带可显现出颜色深浅的现象。但是，在规定的观察时间内，不论该色带颜色深浅，即使只有非常弱的色带也应判定为阳性结果。

HBeAb HBcAb

阳性：仅质控区（C）出现一条紫红色条带，在测试区（T）内无紫红色条带出现。阳性结果表明：标本中含有待测物质。

阴性：两条紫红色条带出现，一条位于测试区（T）内，另一条位于质控区（C）。阴性结果表明：标本中检测不出待测物质。

无效：质控区（C）未出现紫红色条带，表明不正确的操作过程或试剂已变质损坏。在此情况下，应再次仔细阅读说明书，并用新的试剂重新测试。如果问题仍然存在，应立即停止使用此批号产品，并与当地供应商联系。

8 临床意义：

乙肝肝炎病毒引起的感染带来了严重的公共卫生问题。母婴传播、性传播和血液传播是最主要的传播途径。尽早的发现感染可以有效的减少疾病的传播。

乙肝五项检测卡（胶体金法）定性检测人血清、血浆中的乙肝表面抗原、表面抗体、