MMFSCNG食品中六六六滴滴涕残留量的测定方法

MMFSCNG0152 食品 六六六 滴滴涕 气相色谱法 薄层色谱法

MM_FS_CNG_0152

食品中六六六、滴滴涕残留量的测定方法

1.适用范围

本标准适用于食品中六六六、滴滴涕残留量的测定。

气相色谱法检测限：α-666、β-666、γ-666、δ-666依次为0.2，0.8，0.3，0.4μg/kg。p，p’-DDE、o，p’-DDT、p，p’-DDD、p，p’-DDT依次为0.5，2.7，1.6，4.0μg/kg。薄层色谱法最低检测量为0.02μg，适宜范围为0.02～0.20μg。

方法一：气相色谱法

2.原理概要

样品中六六六、滴滴涕经提取、净化后用气相色谱法测定，与标准比较定量。电子捕获检测器对于负电极强的化合物具有较高的灵敏度，利用这一特点，可分别测出微量的六六六和滴滴涕。不同异构体和代谢物可同时分别测定。

出峰顺序：α-666、γ-666、β-666、δ-666、p，p’-DDE、o，p’-DDT、p，p’-DDD、p，p’-DDT。

3.主要仪器和试剂

3.1.主要试剂（有机溶剂需经重蒸馏）。

丙酮、正己烷、石油醚（沸程30～60℃）、硫酸钠溶液(20g/L)。

六六六、滴滴涕标准溶液：准确称取甲、乙、丙、丁六六六四种异构体和p，p’-滴滴涕、p，p’-滴滴滴、p，p’-滴滴伊、o，p’-滴滴涕(α-666、β-666、γ-666、δ-666、p，p’-DDT、p，p’-DDD、p，p’-DDE、o，p’-DDT)各10.0mg，溶于苯，分别移入100mL容量瓶中，加苯至刻度，混匀，每毫升含农药100.0μg，作为储备液存于冰箱中。

六六六、滴滴涕标准使用液：将上述标准储备液以己烷稀释至适宜浓度，一般为0.01μg/mL。

3.2.仪器

小型粉碎机、小型绞肉机、组织捣碎机、电动振荡器、旋转浓缩蒸发器、吹氮浓缩器。

气相色谱仪：具有电子捕获检测器(ECD)。

4.过程简述

4.1.提取

称取具有代表性的样品(适用于生的及烹调加工过的蔬菜、水果或谷类、豆类、肉类、蛋类)约200g，加适量水捣碎。称取匀浆2.00～5.00g，于50mL具塞三角瓶中，加10～15mL丙酮，在振荡器上振荡30min，过滤于100mL分液漏斗中，残渣用丙酮洗涤四次，每次4mL，用少许丙酮洗涤漏斗和滤纸，合并滤液30～40mL，加石油醚20mL和加20mL 硫酸钠溶液(20g/L)进行萃取分层，弃水层，然后将石油醚液缓缓放出，经盛有约10g无水硫酸钠的漏斗，滤入50mL三角瓶中。再用石油醚分三次洗涤原分液漏斗、滤纸和漏斗，洗液并入滤液中，将石油醚浓缩，移入10mL具塞试管中，定容至5.0mL或10.0mL。

称取具有代表性的乳样品2.00g，于10mL具塞试管中，加4mL丙酮，振摇1min，加4mL石油醚，振摇1min。静置分层。将上层石油醚溶液移入另一25mL具塞试管中，再加1mL石油醚于原试管中，不摇。取出上层石油醚合并于25mL试管中，重复两次。再加与石油醚等体积的硫酸钠溶液(20g/L)，摇混，分层。将上层石油醚溶液取出经无水硫酸钠滤入10mL具塞试管中，再加1mL石油醚于原25mL试管中，不摇。取出上层液合并于10mL

试管中，重复两次。提取液定容至4.0mL

称取食用油样品0.50g 以石油醚溶解于10mL 试管中，定容至10.0mL。

4.2.净化

5.0mL 提取液加0.50mL 浓硫酸，盖上试管塞。振摇数次后，打开塞子放气，然后振摇0.5min，于1600r/min，离心15min，上层清液，供气相色谱法分析用。

4.3.测定

气相色谱参考条件：色谱柱：内径3～4mm，长 1.2～2m 的玻璃柱，内装涂以OV-17(15g/L)和QF-1(20g/L)的混合固定液的80～100目硅藻土。Ni-电子捕获检测器：汽化室温度：215℃；色谱柱温度：195℃；检测器温度：225℃；载气(氮气)流速：90mL/min；纸速：0.5cm/min。

测量与计算：电子捕获检测器的线性范围窄，为了便于定量，选择样品进样量使之适合各组分的线性范围。根据样品中六六六、滴滴涕存在形式，相应的制备各组分的标准曲线，从而计算出样品中的含量。 4.4.结果计算 0001)/(0001＝1

2111×××V V m A X ……………………………………………(1) 式中：X 1——样品中六六六、滴滴涕及其异构体或代谢物的单一含量，mg/kg；

A 1——样液中六六六或滴滴涕及其异构体或代谢物的单一含量，ng；

V 1——样品净化液体积，mL；

V 2——样液进样体积，μL；

m 1——样品质量，g。

结果的表述：报告平行测定的算术平均值的二位有效数。

4.3.3.色谱图

出峰顺序：1、2、3、4为α-666、β-666、γ-666、δ-666，5、6、7、8为p，p’-DDE、o，p’-DDT、P，P’-DDD、p，p’-DDT

4.3.4.允许差

相对偏差≤15％。

方法二：薄层色谱法

5.原理概要

样品中六六六、滴滴涕经有机溶剂提取，并经硫酸处理，除去干扰物质，浓缩，点样展开后，用硝酸银显色，经紫外线照射生成棕黑色斑点，与标准比较，可概略定量。

6.主要仪器和试剂

6.1.主要试剂

除同3.1外，还需以下试剂。

氧化铝G（薄层色谱用）、硝酸银溶液(10g/L)。

硝酸银显色液：称取硝酸银0.050g 溶于数滴水中，加苯氧乙醇10mL，加30％(V/V )过氧化氢溶液10μL，混合后贮于棕色瓶中，放冰箱内保存。

六六六、滴滴涕标准使用液：各吸取六六六、滴滴涕标准溶液(3.1.8)2.0mL，分别移入10mL 容量瓶中，各加苯至刻度，混匀。每毫升含农药20μg。

6.2.仪器

除同3.2外，还需以下仪器。

薄层板涂布器、玻璃喷雾器、微量注射器或血色素吸管。、

玻璃板5cm×20cm。

展开槽：内长25cm，宽6cm，高4cm。

紫外线杀菌灯：15W。

7.过程简述

7.1.提取

同(4.1)。

7.2.净化

10mL 提取液浓缩至1mL，加0.1mL 浓硫酸，盖上试管塞振摇数下，打开塞子放气，再振摇0.5min，于1600r/min，离心15min。上层清液供薄层色谱分析。

7.3.测定

薄层板的制备：称取氧化铝G4.5g，加1mL 硝酸银溶液(10g/L)及6mL 水，研磨至糊状，立即涂在三块5cm×20cm 的薄层板上，涂层厚度0.25mm，于100℃烘0.5h，置于干燥器中，避光保存。

点样：离薄层板底端2cm 处，用针划一标记。在薄层板上点1～10μL 样液和六六六、滴滴涕标准溶液，一块板可点3～4个。中间点标准溶液，两边点样品溶液。也可用滤纸移样法点样。

在展开槽中预先倒入10mL 丙酮-己烷(1＋99)或丙酮-石油醚(1＋99)。将经过点样的薄层板放入槽内。当溶剂前沿距离原点10～12cm 时取出，自然挥干。

显色：将展开后的薄层板喷以10mL 硝酸银显色液，干燥后距紫外灯8cm 处照10～20min，六六六、滴滴涕等全部显现棕黑色斑点。 8.结果计算 000

1)/(0001＝34222×××V V m A X ……………………………………………(2) 式中：X 2——样品中六六六、滴滴涕及其异构体或代谢物的单一含量，mg/kg；

A 2——被测定用样液中六六六或滴滴涕及其异构体或代谢物的单一含量，μg；

V 3——样品浓缩液总体积，mL；

V 4——点板样液体积，μL；

m 2——样品质量，g。

注：①食品中六六六残留量以α-666、γ-666、β-666、δ-666四种异构体总和计，滴滴涕残留量以p，p’-DDE、o，p’-DDT、p，p’-DDD、p，p’-DDT 的总和计。②依比移值大小，斑点出现的顺序为p，p’-DDE、o，p’-DDT、p，p’-DDT、α-666、p，p’-DDD、γ-666、β-666、δ-666。

9.允许差

相对偏差≤15％。

10.来源：

中国国家标准：GB/T5009.19—1996