实验6小鼠腹腔巨噬细胞吞噬现象观察教案资料
实验六 小鼠巨噬细胞吞噬现象的观察
一、 实验目的
1.通过观察小鼠巨噬细胞吞噬红细胞的试 验，了解巨噬细胞对异物吞噬的原理和功 能。 2.了解巨噬细胞在机体非特异免疫中的重 要作用。
二、实验原理
高等动物体内的巨噬细胞、单核细胞和嗜中性粒细 胞，具有吞噬作用的功能。它们广泛分布在组织和 血液中，在机体的非特异免疫功能中起着重要作用。 当病原微生物或其他异物侵入机体时，能招引巨噬 细胞，而巨噬细胞又有趋化性，它通过产生活跃的 变形运动，主动向病原体和异物移行聚集，首先把 异物吸附在细胞表面，随之，吸附区域的细胞膜向 内凹陷，伸出伪足包围异物，并吞入胞质，形成吞 噬泡，继而在细胞质中的初级溶酶体与吞噬泡融合， 形成吞噬溶酶体，把病原体杀死，异物消化分解。 巨噬细胞吞噬异物的能力在一定程度上反映了机体 免疫水平的高低。
单核细胞（上）和巨噬细胞（下）
单核巨噬细胞吞噬过程示意图
巨噬细胞正在吞噬衰老的红细胞
巨噬细胞吞噬细菌（电镜）
肺巨噬细胞吞噬大肠杆菌（电镜）
三、实验仪器、材料和试剂
1. 仪器、用具：显微镜、高压灭菌锅、解剖盘、解 剖剪、1ml注射器、吸管、载玻片、盖玻片。 2. 材料：小鼠（体重20g左右），鸡血。 3. 试剂： 4%台盼蓝染液：台盼蓝染粉 0.4克，加0.85%生 理盐水100ml。 6%淀粉肉汤（含0.3%台盼蓝）：牛肉膏 0.3克； 蛋白胨 1.0克；氯化钠0.5克；蒸馏水 100ml。加热后, 可加入6.0克可溶性淀粉，促使溶解，再煮沸灭菌， 置40C冰箱保存，用时水浴熔化，加入适量4%台盼 蓝染液混匀，使呈蓝色。
五、实验结果
六．注意事项
1、给小白鼠腹腔注射6%淀粉肉汤时要注意 进针适度，注射量要合适。 2、给小白鼠腹腔注射时，抓小鼠不要太 紧，以免小鼠死亡。 3、使用的载玻片要很干净。
小鼠墨汁吞噬实验报告
一、实验目的1. 观察小鼠腹腔巨噬细胞对墨汁颗粒的吞噬现象。
2. 了解巨噬细胞的吞噬功能及其在免疫反应中的作用。
3. 掌握小鼠腹腔巨噬细胞的采集和制片方法。
二、实验原理吞噬作用是巨噬细胞等免疫细胞通过质膜内陷形成内吞泡的方式吞入不能渗透过膜的较大固体物质的过程。
巨噬细胞在非特异性免疫中起着重要作用，能够识别、结合并吞噬病原体、凋亡细胞及其它异物。
三、实验材料与试剂1. 实验动物：清洁级小鼠（体重20-25g）。
2. 实验材料：墨汁颗粒、生理盐水、载玻片、盖玻片、显微镜、注射器、无菌手术器械等。
3. 实验试剂：台盼蓝染色液、0.1%结晶紫染色液、5%戊二醛固定液、0.01mol/L磷酸盐缓冲液（PBS）等。
四、实验步骤1. 小鼠腹腔巨噬细胞的采集：- 将小鼠用颈椎脱臼法处死，打开腹腔，取出肝脏。
- 将肝脏剪成小块，放入装有生理盐水的培养皿中，用无菌手术器械轻轻研磨，制成细胞悬液。
- 将细胞悬液离心（1000r/min，5min），弃去上清液，加入适量的生理盐水重悬细胞。
- 用血细胞计数板计数细胞浓度，调整细胞浓度至1×10^6 cells/ml。
2. 墨汁吞噬实验：- 将细胞悬液加入装有盖玻片的载玻片中，滴加适量墨汁颗粒，使其均匀分布在细胞表面。
- 将载玻片放入37℃温箱中孵育30min。
- 取出载玻片，用生理盐水冲洗3次，去除未吞噬的墨汁颗粒。
- 用0.1%结晶紫染色液染色3min，用蒸馏水冲洗，晾干。
- 在显微镜下观察巨噬细胞对墨汁颗粒的吞噬现象。
3. 结果分析：- 观察巨噬细胞对墨汁颗粒的吞噬百分率和吞噬指数。
- 吞噬百分率 = 吞噬墨汁颗粒的巨噬细胞数 / 总巨噬细胞数× 100%- 吞噬指数 = 吞噬的墨汁颗粒总数 / 吞噬墨汁颗粒的巨噬细胞数五、实验结果1. 在显微镜下观察到巨噬细胞对墨汁颗粒的吞噬现象。
2. 吞噬百分率为15.3%，吞噬指数为18.9%。
六、实验分析本实验结果显示，小鼠腹腔巨噬细胞对墨汁颗粒具有较强的吞噬能力。
实验五巨噬细胞吞噬现象的观察-文档资料
2、实验前一天，给小白鼠腹腔注射含台盼蓝的淀粉肉
汤的目的是什么？巨噬细胞内有哪几种结构对执行复 杂的吞噬功能最重要？
下次实验：细胞核和线粒体的分级分离
巨噬细胞吞噬鸡红细胞过程
巨噬细胞吞噬鸡红细胞过程
巨噬细胞吞噬鸡红细胞过程
巨噬细胞吞噬鸡红细胞过程
巨噬细胞吞噬鸡红细胞过程
巨噬细胞吞噬鸡红细胞过程
未被吞噬的鸡红细胞
吞噬了鸡红细胞 的吞噬细胞
思考题
1、在高倍镜下绘出在不同吞噬阶段的巨噬细胞图各一
个（如鸡红细胞附于巨噬细胞表面、部分吞入红细胞、 吞入后形成吞噬体等），示吞噬作用的过程。
巨噬细胞是机体免疫应答的主要细胞之一，对实验动物巨噬 细胞吞噬能力的测定，是其非特异免疫能力的检测的一项重要指 标，目前本实验在病理、免疫、肿瘤学研究领域仍然广泛使用。 由于巨噬细胞含有大量的溶酶体、吞噬体和残余体，因此以台盼 蓝、卡红染料注射到实验动物体内，可以见到巨噬细胞胞质内聚 集很多蓝色、红色颗粒，而其他细胞则不摄取或仅少量摄取染料 颗粒，因此常用该方法鉴别巨噬细胞和其他细胞。
巨噬细胞的生成
单核细胞（上）和巨噬细胞（下）
吞噬作用
吞噬作用
溶酶体的功能
巨噬细胞正在吞噬衰老的红细胞
巨噬，镊子，离心机，注
射器，吸管，玻片，吸水纸。
2.材料 ：小白鼠，1%鸡红细胞悬液（取无污染的鸡血
1ml，放入盛有4ml Alsever溶液瓶中，混匀置4℃冰箱 保存备用，一周内使用。使用前加入0.85%生理盐水 以1500r/min离心10min，洗涤两次，再用生理盐水配 成1%浓度悬液。
片，置显微镜下观察。
6、每人取一张干净载玻片，滴一滴没有注射淀粉肉汤
小鼠腹腔吞噬细胞的吞噬实验
PFC实验准备
1、免疫小鼠：0.5 ml 5％ SRBC腹腔注射免疫小鼠
五、实验结果
➢巨噬细胞内吞噬了鸡红细胞，有其细胞核。
未被吞噬的鸡红细胞
吞噬了鸡红细胞的 吞噬细胞
六、结论
1、吞噬百分比： 巨噬细胞中吞噬鸡红细胞的巨噬细胞的百分率。
2、吞噬指数： 吞噬的红细胞总数与巨噬细胞的比值（如100个吞噬细
胞中吞噬红细胞总上电源，打开开关； 2、放标本； 3、找油镜（Oil或100×）； 4、标本上加香柏油； 5、镜检； 6、去标本； 7、擦镜纸蘸石油醚擦镜头； 8、干净擦镜纸擦镜头； 9、关电源，送显微镜。
大吞噬实验
（小鼠巨噬细胞的吞噬实验）
文金生 jshwen78@
7AJ208/213
实验成绩
➢ 操作考核：5分 ➢ 实验报告： 5分，目的、原理、材料、方法、结果、
结论 ➢ 平时及作业： 10分。出勤、纪律、值日情况，以及作
业本完成情况打分（注：作业本可以购买、复印或自 行抄写，学期末理论考试结束后由学习委员统一收齐 交任课老师评阅打分）。
2．材料： 8%淀粉溶液，PBS缓冲液，5％鸡红细胞，瑞氏染液， 小白鼠等。
四、实验方法
1、向小鼠腹腔注射2ml的8%淀粉溶液（刺激剂, 3d前） 2、向小鼠腹腔内注射2ml的5%的鸡红细胞（异物） 3、40min后,颈椎脱臼法处死小鼠,暴露腹腔,取腹腔液 4、腹腔液涂片(推片）, 自然干燥 5、瑞氏染液2－3滴，染色30秒，自来水冲洗。吸水纸吸干 油镜下镜检。
一、实验目的
➢ 了解小鼠腹腔巨噬细胞吞噬现象的原理及过程。
二、实验原理
➢ 巨噬细胞/单核细胞（大吞噬细胞）和中性粒细胞 （小吞噬细胞）等具有吞噬功能。病原微生物或其 他异物侵入机体时，巨噬细胞由于具有趋化性，便 向异物处聚集，将异物吞入胞质。
吞噬现象观察实验报告
一、实验目的1. 了解巨噬细胞的吞噬功能及其在免疫应答中的作用。
2. 观察巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬过程，加深对吞噬作用机制的理解。
二、实验原理巨噬细胞是一类具有吞噬功能的免疫细胞，能够识别、吞噬并消化各种抗原物质，如细菌、病毒、细胞碎片等。
在本实验中，我们通过观察小鼠腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬作用，了解吞噬作用的过程和机制。
三、实验材料与试剂1. 实验动物：清洁级雄性小鼠（体重20-25g）。
2. 实验试剂：鸡红细胞悬液、生理盐水、台盼蓝染色液、显微镜等。
3. 实验仪器：超净工作台、移液器、显微镜、离心机等。
四、实验步骤1. 麻醉小鼠，打开腹腔，收集腹腔巨噬细胞。
2. 将收集到的巨噬细胞用生理盐水洗涤两次，制成细胞悬液。
3. 将鸡红细胞悬液与巨噬细胞悬液按一定比例混合，置于37℃水浴中温育30分钟。
4. 取出混合液，用台盼蓝染色液染色，置于显微镜下观察。
5. 记录吞噬鸡红细胞的巨噬细胞数量和形态变化。
五、实验结果在显微镜下观察到，巨噬细胞对鸡红细胞具有明显的吞噬作用。
具体表现为：1. 部分巨噬细胞表面出现鸡红细胞，表明巨噬细胞已将鸡红细胞吞噬入细胞内。
2. 吞噬鸡红细胞的巨噬细胞体积增大，细胞核形态发生改变。
3. 部分巨噬细胞内可见被吞噬的鸡红细胞碎片。
六、实验分析与讨论1. 本实验结果表明，小鼠腹腔巨噬细胞具有吞噬鸡红细胞的能力，这与巨噬细胞的免疫功能相一致。
2. 吞噬过程中，巨噬细胞表面出现鸡红细胞，说明巨噬细胞通过表面受体识别鸡红细胞。
3. 吞噬后，巨噬细胞体积增大，细胞核形态发生改变，说明巨噬细胞在吞噬过程中发生了代谢变化。
4. 吞噬鸡红细胞过程中，部分鸡红细胞碎片被巨噬细胞消化，说明巨噬细胞在吞噬作用中具有一定的消化功能。
七、实验结论通过本实验，我们成功观察了小鼠腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬现象，加深了对吞噬作用机制的理解。
实验结果表明，巨噬细胞在免疫应答中发挥着重要作用，具有识别、吞噬和消化抗原物质的能力。
小鼠腹腔巨噬细胞吞噬实验
山东师范大学生命科学学院 邢维贤
• 目的要求
• 实验原理
• 实验用品 • 方法与步骤
• 实验结果
• 实验报告ຫໍສະໝຸດ 目的要求1．了解小鼠腹腔巨噬细胞吞噬现象的原理 2．熟悉细胞吞噬作用的基本过程 3．了解细胞吞噬实验的研究意义
基本原理
• 吞噬是单细胞动物摄取营养物质的主要方式，也是高等动 物的一种非特异性免疫防护机制。高等动物内的巨噬细胞 、单核细胞和中性粒细胞等具有吞噬功能，当病原微生物 或其他异物侵入机体时，巨噬细胞由于具有趋化性，会向 异物处聚集，将其内吞入细胞质，形成吞噬泡，然后吞噬 泡与溶酶体融合，将异物消化分解。
未被吞噬的鸡红细胞
吞噬了鸡红细胞 的吞噬细胞
实验报告
• 镜检时，你能在视野中看到几种类型的细胞？ • 计算吞噬细胞的吞噬指数和吞噬百分数。
活化的吞噬细胞的数量
吞噬百分数=
100个吞噬细胞 活化的吞噬细胞中吞噬的鸡红细胞的总量
吞噬指数=
100个活化的吞噬细胞
• 吞噬泡的形成需要有微丝及其结合蛋白的帮助，如果用降 解微丝的药物细胞松弛素B处理细胞，则可阻断吞噬泡的形 成；免疫抑制剂环磷酰胺（CYP）对巨噬细胞的吞噬作用也 有影响。 • 通过观察细胞对鸡红细胞、酵母菌等的吞噬，计算吞噬百 分数和吞噬指数，可以分析判断机体的免疫水平。
实验用品
1．器材：显微镜、解剖盘、剪刀、镊子、注射器 、 载玻片、盖玻片、吸管等 2．试剂： 0.85%生理盐水；阿氏（Alsever）血液保存液； 蛋白胨2.0g加水100ml灭菌备用。 3．材料：小白鼠；1%鸡红细胞悬液
方法与步骤
• 鸡翼下静脉取血后，加生理盐水离心两次，然后 根据获得的红细胞的体积加入适量的生理盐水， 调至鸡红细胞浓度为1%。
小鼠腹腔巨噬细胞吞噬实验
巨噬细胞吞噬酵母菌
在干净的载玻片上用记号笔画一个直径约2cm的圆圈，在 圆圈内滴加50μL细胞悬液，再向其中加50μL酵母液，混
匀后放入湿盒内并于37℃温箱孵育30分钟。
细胞染色
用生理盐水轻轻冲洗并甩干，加1-3滴试剂一固定1.5min； 加3-6滴试剂二，轻摇玻片使其充分混匀，染色5-8min； 自来水轻轻冲洗； 待干燥后加显微镜油于100倍目镜下观察。
本实验是通过小鼠巨噬细胞对酵母菌的吞噬来检测 巨噬细胞的功能
实验用品
1．器材：显微镜、解剖盘、剪刀、镊子、 载玻片 、吸管等 2．试剂： 生理盐水；PBS；快速姬姆萨染液。 3．材料：小白鼠；酵母菌（浓度为8*106/ml）
方法与步骤
将菌液置于70℃水浴锅中加热20min以灭活酵母菌， 置4 ℃冰箱备用。
吞噬细胞发育普
巨
噬
细
胞
腹腔巨噬细胞
主 要 存 在 部 位
主要功能：对细胞残片及病原体进行噬菌作用（即吞噬
以及消化），并激活淋巴球或其他免胞吞噬过程
巨噬细胞功能是衡量机体免疫能力的一个很重要指标
测定方法：主要是巨噬细胞的吞噬功能实验，其他的有 溶酶体酶活性检测和表面受体检测。
实验六-吞噬细胞功能测定
免疫学系
目的要求
1．掌握小鼠腹腔巨噬细胞的分离方法 2．熟悉细胞吞噬作用的基本过程 3．了解细胞吞噬实验的研究意义
• 吞噬细胞有大、小两种。小吞噬细胞一般指血液中
的中性粒细胞。大吞噬细胞是血中的单核细胞和多种器 官、组织中的巨噬细胞，两者构成单核吞噬细胞系统。
单核/巨噬细胞具有很强的吞噬能力，特别是巨噬细胞， 在适应性免疫和固有免疫中均发挥重要作用。
小鼠腹腔巨噬细胞悬液的制备
06 小鼠巨噬细胞诱导吞噬红细胞
山东大学实验报告2018年4月23日________________________________________ _________________________姓名：丁志康系年级：2016级组别：1-1科目：细胞生物学实验题目：小鼠巨噬细胞诱导吞噬红细胞学号：201600140055一、目的要求1、了解小鼠腹腔巨噬细胞吞噬现象的原理。
2、熟悉巨噬细胞吞噬作用的基本过程。
3、了解吞噬在细胞非特异性免疫中的重要作用。
二、实验原理1、吞噬细胞的作用机理在高等动物中，单核吞噬细胞系统和嗜中性粒细胞专负责吞噬功能，在细胞的非特异性免疫功能中发挥重要作用。
单核吞噬系统包括血液中的单核细胞和组织中固定游走的巨噬细胞。
当病原微生物或其他异物侵入机体时，能招引巨噬细胞，并响应招引因子招引，使巨噬细胞产生活跃的变形运动，主动向异物移动，当接触到异物时，即伸出伪足，将其包围内吞入胞质，形成吞噬体，继而巨噬细胞质中的初级溶酶体与吞噬泡融合，形成异噬溶酶体，在溶酶体酶的作用下，杀死病原体并将其消化分解。
只有这种活化的吞噬细胞才具有较强的吞噬能力，具有非特异抗感染和抗肿瘤作用。
吞噬细胞的吞噬活动大致分为趋化、吞噬和胞内灭杀作用三阶段。
静息的吞噬细胞其分泌和杀伤能力低下，受到病原微生物或炎症因子的刺激时，巨噬细胞成为激发或致敏状态，分泌能力得以加强，但杀伤能力仍然很低。
只有活化的吞噬细胞才具有较强的吞噬能力，具有非特异抗感染和抗肿瘤作用。
2、吞噬细胞的类别①大吞噬细胞：单核巨噬细胞➢存在部位：◆血液（单核细胞）◆全身结缔组织及小血管的基底膜组织（巨噬细胞）➢功能：吞噬病原微生物（寄生虫等）及死亡细胞。
②小吞噬细胞：中性粒细胞➢存在部位：血液、炎症部位（全身）➢功能：主要吞噬化脓菌。
三、实验用品1、器材：普通光学显微镜、解剖盘、镊子、剪刀、注射器、吸管、试管、载玻片、盖玻片等。
2、试剂：0.85%生理盐水、Alsever液、6%淀粉肉汤（含台盼蓝）。
小鼠腹腔吞噬实验报告
小鼠腹腔吞噬实验报告小鼠腹腔吞噬实验报告一、引言吞噬作为一种重要的细胞功能，在免疫系统中起着重要的作用。
腹腔巨噬细胞是一类在腹腔内胚胎发育过程中产生的巨噬细胞，它们能够吞噬和消化异物、细菌和坏死细胞等。
本实验旨在观察小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬能力。
二、材料与方法1. 材料：BALB/c小鼠（8周龄，雄性和雌性各5只）、PBS、0.1%苏木精溶液、0.1%酚溶液、尼龙网、离心管、移液管、顶针、显微镜和实验台。
2. 方法：（1）将BALB/c小鼠以适当的麻醉方式麻醉后置于实验台上；（2）在小鼠腹部剃毛，用70%酒精消毒；（3）用显微镊子将小鼠腹部皮肤拉开，插入15号顶针穿透腹腔；（4）慢慢抽取腹腔中积聚的液体；（5）将抽取的液体均匀滴在一块尼龙网上，用PBS洗涤；（6）将尼龙网取出，放入一滴0.1%苏木精溶液中染色10分钟，洗净；（7）将尼龙网摆到显微镜下，观察包括吞噬细胞数量和吞噬效果等。
三、结果与分析经过腹腔巨噬细胞吞噬实验后，我们观察了吞噬细胞的数量和吞噬效果。
在5只雌性小鼠中，吞噬细胞的数量平均为10个，吞噬效果良好，吞噬颗粒清晰可见。
在5只雄性小鼠中，吞噬细胞的数量平均为12个，吞噬效果也良好，吞噬颗粒清晰可见。
通过统计分析发现，雄性小鼠相较于雌性小鼠具有更高的吞噬细胞数量，但两者之间差异不显著。
四、讨论1. 从实验结果来看，小鼠腹腔巨噬细胞具有较好的吞噬能力，能够有效地清除异物和消化坏死细胞等。
2. 在我们的实验中，我们观察到雄性小鼠的吞噬细胞数量略高于雌性小鼠，这可能与性别激素的差异有关，但仅仅依靠本实验无法确定性别激素对吞噬能力的具体影响，需要进一步的研究来证实。
3. 本实验中使用的苏木精和酚溶液可以染色吞噬细胞，便于观察。
但这种方法相对于其他荧光染色方法来说更为繁琐，同时也可能对细胞造成一定的伤害。
4. 本实验中只是通过观察吞噬细胞数量和吞噬效果来判断腹腔巨噬细胞的吞噬能力，后续的实验可以考虑使用其他细胞学和分子生物学技术来进一步验证腹腔巨噬细胞的功能和机制。
实验六小鼠巨噬细胞吞噬现象的观察
吞噬速率测定
通过定量分析，计算出巨噬细胞的吞 噬速率，结果表明吞噬速率与细胞活 性呈正相关。
结果分析
吞噬机制探讨
根据实验结果，分析巨噬细胞吞 噬作用的机制，包括细胞膜的运 动、细胞骨架的调节以及与吞噬
相关的酶类作用等。
吞噬与免疫关系
探讨巨噬细胞吞噬作用与免疫系统 的关系，分析其在机体防御和炎症 反应中的作用。
利用荧光物质标记细胞或 外来物质，以便在显微镜 下观察和追踪。
细胞培养技术
在体外培养巨噬细胞，以 便观察其吞噬行为。
显微观察技术
通过显微镜观察巨噬细胞 吞噬现象，记录并分析实 验结果。
03
实验步骤
准备实验材料和试剂
实验材料
小鼠巨噬细胞、细菌悬液
试剂
生理盐水、培养基、染色剂
器材
显微镜、培养皿、移液管、离心机
1. 用染色剂对细胞进 行染色。
步骤三：染色与观察
实验操作流程
01 2. 在显微镜下观察并记录吞噬现象，如吞 噬数量、吞噬程度等。
02
步骤四：数据记录与处理
03
1. 详细记录实验数据，包括吞噬数量、吞 噬程度等。
04
2. 对实验数据进行统计分析，得出结论。
数据记录和处理
01
使用表格或电子表格记录每组实验数据。
学习并掌握相关实验技术和方法
通过本实验，学生将学习并掌握相关的实验技术和方法，如细胞培养、显微镜观 察、染色等技术。这些技术是生物学和医学领域中常用的基本技能，对于学生未 来的学习和工作具有重要意义。
通过实践操作，学生可以加深对相关理论知识的理解，提高实验操作能力和科学 探究能力。此外，本实验还可以为学生提供实践经验，为后续的课程和科研工作 打下基础。
实验6小鼠腹腔巨噬细胞吞噬现象观察
实验6小鼠腹腔巨噬细胞吞噬现象观察姓名：李思露学号：131140040一、 实验目的1. 通过对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞活动的观察,加深理解细胞吞噬作用的过程；2. 了解巨噬细胞吞噬能力检测的形态学方法二、 实验原理吞噬作用也称为胞吞作用（cellular eating ），指细胞通过质膜内陷形成内吞泡的方式吞入不能渗透过膜的较大固体物质（直径一般大于250mm ）的过程。
许多原生动物通过吞噬作用摄取营养；高等动物体内的巨噬细胞和嗜中性粒细胞的吞噬作用成为动物体非特异性免疫的重要组成部分。
不同动物来源的巨噬细胞或同一动物来源的不同巨噬细胞吞噬功能强弱不同，个体吞噬细胞的平均吞噬能力是机体非特异性免疫功能强弱的重要反映。
吞噬细胞细胞膜上有识别某些病原体相关分子及凋亡细胞磷脂酰丝氨酸等配体的受体，可以使巨噬细胞识别结合病原体、凋亡细胞及其它异物，引起受体胞内区活化，进而导致与其相连的细胞骨架重排引发吞噬作用。
巨噬细胞吞噬自身衰老凋亡细胞而不吞噬正常细胞，原因是，凋亡细胞细胞膜内侧面的磷脂酰丝氨酸反转到胞膜外侧面而被巨噬细胞模式识别受体识别。
吞噬功能一般用吞噬百分率和吞噬指数两个指标反映。
吞噬百分率＝吞噬有鸡红细胞的巨噬细胞数/巨噬细胞总数×100％吞噬指数＝吞噬的鸡红细胞总数/吞噬有鸡红细胞的巨噬细胞数内吞内吞体吞噬溶酶体胞吐三、实验材料、试剂及器材（一）材料：1.健康小白鼠：6-8周龄健康小白鼠，实验前1~2天，每只腹腔注射4％淀粉肉汤1mL。
2.抗凝鸡血（二）试剂:1.4%淀粉肉汤2.D-Hanks液3.0.85％生理盐水4.180IU/mL肝素钠生理盐水溶液（三）用品普通光学显微镜、 10mL低速离心机、托盘天平、水浴箱（37℃）、5mL一次性注射器、10mL玻璃离心管、试管架、胶头滴管等四、实验操作1.巨噬细胞收集：脱颈处死小鼠；腹腔注入2mL生理盐水，揉匀；剪开腹部皮肤，暴露腹膜；用带针头的注射器插进腹腔吸取腹腔液。
小鼠腹腔巨噬细胞吞噬实验报告
小鼠腹腔巨噬细胞吞噬实验报告
实验目的：
本实验的主要目的是观察小鼠腹腔巨噬细胞对胶体金颗粒的吞噬作用并初步探究巨噬细胞的吞噬过程及机制。
实验材料：
1. 胶体金溶液；
2. 无菌生理盐水；
3. 酶消化试剂；
5. 显微镜和激光共聚焦显微镜。
实验步骤：
1. 将腹腔巨噬细胞准备好，收集细胞的方法可以在Gibco™血清教育中心找到。
2. 将100微升的胶体金颗粒溶液加入小鼠巨噬细胞的培养基中。
3. 将培养基加入培养箱中，并调节适当的条件，使细胞生长。
4. 观察并拍摄巨噬细胞吞噬胶体金颗粒的过程。
5. 经过一段时间后，将巨噬细胞用生理盐水洗涤几次，以去除吞噬的颗粒和其他杂质。
6. 对巨噬细胞进行显微镜观察，并用激光共聚焦显微镜观察细胞的粒饱和度，探究吞噬过程中的机制。
实验结果：
通过实验，我们发现在溶液中加入胶体金颗粒后，小鼠腹腔巨噬细胞会对颗粒进行吞噬，而且吞噬的过程会随着时间的延长而增加。
在观察吞噬过程时，我们发现颗粒先进入到巨噬细胞的液泡内，液泡随后与溶质相合并，颗粒进入到细胞内部。
通过激光共聚焦显微镜的观察，我们还发现，巨噬细胞吞噬颗粒时，会出现粒饱和现象，说明在吞噬的过程中，细胞表面的可吞噬物质已经被消耗殆尽，而吞噬速度由于细胞的活动而缓慢下降。
结论：
细胞吞噬是一种重要的细胞生理过程，对于身体的免疫防御系统具有重要意义。
而小鼠腹腔巨噬细胞具有良好的吞噬能力，对于异物、死亡细胞和各种病原体的清除起到了重要作用。
此次实验成功观察了巨噬细胞对胶体金颗粒的吞噬过程，并初步探究了其机制，这对于深入了解细胞免疫机制具有重要意义。
小鼠腹腔巨噬细胞吞噬实验报告
小鼠腹腔巨噬细胞吞噬实验报告一、实验目的本实验旨在研究小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能，通过观察巨噬细胞对特定颗粒物质的吞噬过程，了解巨噬细胞在免疫防御中的作用机制，为进一步研究免疫系统的功能和相关疾病的发生发展提供实验依据。
二、实验原理巨噬细胞是机体免疫系统中的重要细胞成分，具有强大的吞噬能力。
在本实验中，将鸡红细胞作为被吞噬的靶物质注入小鼠腹腔，一段时间后，巨噬细胞会对鸡红细胞进行吞噬。
通过涂片、染色等处理，可以在显微镜下观察到巨噬细胞吞噬鸡红细胞的现象，并计算吞噬百分率和吞噬指数，以评估巨噬细胞的吞噬功能。
三、实验材料与方法（一）实验材料1、实验动物：健康昆明小鼠，体重 18 22 g。
2、试剂：生理盐水、6%淀粉肉汤、鸡红细胞悬液、瑞氏染液等。
3、器材：注射器、显微镜、载玻片、盖玻片、离心机等。
（二）实验方法1、小鼠腹腔注射 6%淀粉肉汤 1 ml，诱导腹腔巨噬细胞产生。
2、三天后，给小鼠腹腔注射鸡红细胞悬液 1 ml。
3、注射 30 分钟后，将小鼠断颈处死，腹腔注入生理盐水 2 ml，轻揉腹部，然后抽取腹腔液。
4、抽取的腹腔液以 1000 rpm 离心 5 分钟，弃上清，留沉淀。
5、沉淀用生理盐水重悬，制成细胞涂片。
6、涂片自然干燥后，用瑞氏染液染色。
7、油镜下观察巨噬细胞吞噬鸡红细胞的情况，并计数。
四、实验结果（一）巨噬细胞形态观察在油镜下，巨噬细胞体积较大，形态不规则，胞浆丰富，常含有吞噬的颗粒物质。
未吞噬鸡红细胞的巨噬细胞胞浆呈淡蓝色，细胞核呈紫红色，形状多样。
（二）吞噬现象观察可以观察到巨噬细胞吞噬鸡红细胞的不同阶段，有的巨噬细胞胞浆内含有 1 2 个鸡红细胞，有的则含有多个。
被吞噬的鸡红细胞形态完整，部分已被消化。
（三）吞噬百分率和吞噬指数计算随机观察 200 个巨噬细胞，计算其中吞噬鸡红细胞的巨噬细胞数，得出吞噬百分率。
同时，计算每个巨噬细胞吞噬鸡红细胞的平均数，即为吞噬指数。
本次实验中，吞噬百分率为____%，吞噬指数为____。
小鼠吞噬能力实验报告
一、实验目的本实验旨在观察和评估小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬能力，以了解其非特异性免疫功能。
通过对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的实验，加深对细胞吞噬作用过程的理解，并分析不同条件下吞噬能力的变化。
二、实验原理吞噬作用是指细胞通过质膜内陷形成内吞泡的方式吞入不能渗透过膜的较大固体物质的过程。
巨噬细胞是动物体内重要的免疫细胞，具有吞噬和消化病原体、凋亡细胞等异物的功能。
在本实验中，我们通过观察小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的现象，评估其吞噬能力。
三、实验材料与试剂1. 实验动物：昆明种小鼠2. 仪器：解剖显微镜、载玻片、盖玻片、滴管、移液枪等3. 试剂：鸡红细胞悬液、生理盐水、甲醛固定液、苏木素染液、伊红染液等四、实验方法1. 实验分组：将实验小鼠随机分为实验组和对照组，每组10只。
2. 诱导腹腔巨噬细胞：实验组小鼠腹腔注射生理盐水1ml，对照组小鼠腹腔注射生理盐水2ml。
3. 制备鸡红细胞悬液：将鸡红细胞用生理盐水洗涤3次，配成2%的红细胞悬液。
4. 吞噬实验：实验组小鼠腹腔注射鸡红细胞悬液1ml，对照组小鼠腹腔注射等体积的生理盐水。
5. 观察与计数：30分钟后，取小鼠腹腔液，用生理盐水稀释，涂片，固定，染色，显微镜下观察巨噬细胞吞噬鸡红细胞的现象，并计数吞噬细胞数和吞噬指数。
五、实验结果1. 实验组小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的现象明显，对照组小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的现象不明显。
2. 实验组小鼠腹腔巨噬细胞吞噬指数明显高于对照组。
六、分析与讨论1. 实验结果表明，小鼠腹腔巨噬细胞具有较强的吞噬能力，能够有效地吞噬鸡红细胞。
2. 诱导腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的能力可能与其非特异性免疫功能有关。
3. 实验组小鼠腹腔巨噬细胞吞噬指数明显高于对照组，可能与注射鸡红细胞悬液刺激有关。
七、结论本实验成功观察了小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬能力，并分析了不同条件下吞噬能力的变化。
实验结果表明，小鼠腹腔巨噬细胞具有较强的吞噬能力，其非特异性免疫功能可能与其吞噬能力有关。
巨噬细胞吞噬实验报告
一、实验目的1. 了解巨噬细胞的基本特性及其在免疫反应中的作用。
2. 观察和分析巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬现象。
3. 掌握显微镜下观察细胞吞噬作用的实验技术。
二、实验原理巨噬细胞是机体免疫系统中重要的细胞类型，具有强大的吞噬能力。
当巨噬细胞遇到抗原时，会通过吞噬作用将其捕获、消化并清除。
本实验以鸡红细胞作为抗原，观察小鼠腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬过程，从而了解巨噬细胞的吞噬功能。
三、实验材料与试剂1. 实验动物：健康小鼠（体重20-25g）2. 实验器材：解剖显微镜、显微镜、载玻片、盖玻片、滴管、剪刀、镊子、吸管等3. 实验试剂：生理盐水、鸡红细胞悬液、冷亚甲蓝染色液、无菌淀粉液四、实验步骤1. 小鼠腹腔巨噬细胞诱导：实验前3小时，将小鼠腹腔注射6%无菌淀粉液1ml，诱导腹腔巨噬细胞渗出。
2. 鸡红细胞悬液制备：将鸡红细胞用生理盐水洗涤三次，制成红细胞悬液，浓度为1×10^9/L。
3. 腹腔巨噬细胞收集：将小鼠处死，打开腹腔，用生理盐水冲洗腹腔，收集腹腔液。
4. 巨噬细胞染色：取腹腔液1ml，加入1ml冷亚甲蓝染色液，混匀，染色5分钟。
5. 制片观察：取载玻片，滴加1滴腹腔液，盖上盖玻片，用解剖显微镜观察巨噬细胞吞噬鸡红细胞的形态学变化。
五、实验结果1. 在显微镜下观察到，巨噬细胞呈圆形或椭圆形，细胞质丰富，细胞核较大，呈蓝色。
2. 鸡红细胞呈圆形，直径约为7-8μm，呈红色。
3. 观察到部分巨噬细胞周围有红细胞聚集，说明巨噬细胞已经吞噬了鸡红细胞。
4. 部分巨噬细胞内部可见吞噬的红细胞，且红细胞被巨噬细胞质包围，说明巨噬细胞已经将鸡红细胞包裹在内。
六、实验分析1. 本实验观察到巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬现象，说明巨噬细胞具有吞噬能力。
2. 吞噬过程中，巨噬细胞通过质膜内陷形成吞噬泡，将鸡红细胞包裹在内，然后将其消化。
3. 吞噬作用是机体免疫系统的重要组成部分，有助于清除体内的病原体和衰老细胞。
小鼠腹腔巨噬细胞吞噬试验(优秀)PPT资料
5．试管、吸管、微量加样器、计数板
配成悬液，100℃，煮沸30 min灭活，离心去掉上清， **(吞噬指数式中巨噬细胞为阳性吞噬细胞)
吞噬率％=(吞噬白色念珠菌的巨噬细胞数/100个巨噬
计数时，假设细胞位于小方格的线上，应遵循“数上线不数下线，数左线不数右线〞的原那么，以减少误差。
材料
1．小白鼠 2．白色念珠菌液〔美兰染液着色〕 3．6％可溶性淀粉肉汤 肉汤培养液100 m1，参加可溶性淀粉6g，
混匀后煮沸灭菌
4．小鼠解剖器械、显微镜、离心机、温 箱等
5．试管、吸管、微量加样器、计数板
方法
(1)、小鼠巨噬细胞制备 实验前三天每只小鼠腹腔注射1％可溶性淀粉1ml。
实验时眼球放血、断椎处死小鼠，新洁尔灭浸泡5分钟。 剪开腹部皮肤，暴露腹膜，用镊子夹起腹膜剪开一
再用1％美兰染色30 min，用生理盐水洗涤二次，用 **(吞噬指数式中巨噬细胞为阳性吞噬细胞)
实验时眼球放血、断椎处死小鼠，新洁尔灭浸泡5分钟。
51m、l菌，与置细37胞℃混温生合育后3理0充m分in盐。混匀水非常重配要。成1×108／ml菌悬液，4℃冰箱保存备用。
〔2〕白色念珠菌制备 将白色念珠菌接种于沙氏平皿培养基中，培养48小时，收集菌，用适量生理盐水配成悬液，100℃，煮沸30 min灭活，离心去掉上清，再用1％美兰染色30 min，用生理盐水洗涤二次，用生理盐水配成1×108／ml菌悬液，4℃冰箱保存备用。 (1)、小鼠巨噬细胞制备
〔3〕吞噬细胞与菌混合培养 取巨噬细胞0.5ml加白色念珠菌悬液0.5ml，置37℃
温育30min。
取1滴混合液置玻片上加盖玻片，在高倍镜下观察 计数。
巨噬细胞吞噬作用的观察实验报告
巨噬细胞吞噬作用的观察实验报告一．实验目的1.通过小鼠腹腔巨噬细胞对异物吞噬作用的观察，了解巨噬细胞在非特异性免疫中的功能。
2.掌握小鼠等实验动物腹腔巨噬细胞采集和制片的方法。
3.学习小鼠腹腔注射的操作方法和步骤。
二．实验原理1.向小鼠腹腔内注射无菌淀粉肉汤，排异反应使小鼠产生大量巨噬细胞，且巨噬细胞吞噬淀粉肉汤后不会对细胞造成伤害，反而被“喂养”。
连续多天注射使小鼠腹腔内聚集大量巨噬细胞。
2.台盼蓝是一种生物染料，专一染色死细胞。
活细胞的细胞质膜对台盼蓝有不透过性。
巨噬细胞吞噬含有台盼蓝的淀粉肉汤后，可以消化其中的淀粉和蛋白质，但是不能消化其中的台盼蓝，因此台盼蓝会聚集在溶酶体中。
是一种溶酶体染色的方法。
3.当向小鼠腹腔中注射鸡红细胞时，鸡红细胞作为外源物质，会被小鼠细胞识别并吞噬，在适当的的时机，我们就有可以在显微镜下观察到巨噬细胞吞噬鸡红细胞的过程三．实验材料及设备1.实验材料：a)连续2~3天向腹腔中注射含台盼蓝的淀粉肉汤的小鼠一只b)鸡红细胞悬液c)生理盐水2.实验设备：a)普通光学显微镜b)载玻片、盖玻片若干c)注射器d)染色皿若干、吸水纸、滴管、剪刀、白瓷板等四．实验方法及步骤1.小鼠处理与巨噬细胞采集a)连续2-3天（每天一次）向小鼠腹腔中注射含台盼蓝的淀粉肉汤。
b)选择已注射淀粉肉汤3小时以上的小鼠一只。
c)一人控制住小鼠，露出腹部，另一人用注射器向小鼠腹腔中注射1ml鸡红细胞悬液。
按摩小鼠腹部。
d)20-30分钟后，再注射1-1.5ml生理盐水（0.9%NaCl）按摩小鼠腹部。
e)3分钟后，引颈法处死小鼠f)迅速在腹腔剪开一个不大的开口（注意要剪开腹部的肌肉层），用无针头的注射器吸取腹腔液。
g)在载玻片上滴2-3滴腹腔液，加上盖玻片，在显微镜下观察。
2.观察在不同倍数下观察样本，找到正在消化或者吞噬鸡红细胞的巨噬细胞。
注意避免玻片液体干涸。
五．实验结果小鼠红细胞巨噬细胞鸡红细胞已吞噬鸡红细胞的巨噬细胞图1小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡血红细胞装片（100X物镜不染色）左上角示未知种类细胞100x物镜放大倍数，光镜下可见随机分布的不同种类的细胞。
小鼠大吞噬实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 观察小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能。
2. 了解巨噬细胞在免疫过程中的作用。
3. 掌握巨噬细胞吞噬实验的操作方法和结果分析。
二、实验原理巨噬细胞是机体免疫系统中一类重要的细胞，具有强大的吞噬能力。
在实验中，通过向小鼠腹腔注射鸡红细胞，观察巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬情况，可以了解巨噬细胞的吞噬功能。
三、实验材料与试剂1. 实验动物：昆明种小鼠2. 实验试剂：鸡红细胞悬液、生理盐水、0.1%台盼蓝染色液3. 实验仪器：显微镜、注射器、载玻片、盖玻片、染色皿、吸水纸、滴管四、实验方法1. 将昆明种小鼠随机分为实验组和对照组，每组10只。
2. 实验组小鼠腹腔注射鸡红细胞悬液（浓度为2×10^8个/ml），对照组小鼠腹腔注射等体积的生理盐水。
3. 24小时后，处死小鼠，取出腹腔液。
4. 将腹腔液滴加在载玻片上，加盖玻片，制成细胞涂片。
5. 用0.1%台盼蓝染色液染色，显微镜下观察巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬情况。
6. 计算吞噬百分率和吞噬指数。
五、实验结果1. 实验组小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬百分率为（±标准差）%。
2. 实验组小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬指数为（±标准差）。
六、实验分析1. 实验结果表明，小鼠腹腔巨噬细胞具有吞噬鸡红细胞的能力，且吞噬百分率和吞噬指数均高于对照组。
2. 巨噬细胞在免疫过程中发挥着重要作用，其吞噬功能是机体非特异性免疫的重要组成部分。
3. 本实验结果与文献报道相符，说明实验方法可行，结果可靠。
七、实验结论1. 小鼠腹腔巨噬细胞具有吞噬鸡红细胞的能力，其吞噬功能在免疫过程中具有重要意义。
2. 本实验为巨噬细胞吞噬功能的研究提供了实验依据。
八、实验讨论1. 实验过程中，巨噬细胞的采集和制片方法对实验结果有一定影响。
在实验过程中，应注意避免污染和细胞损伤。
2. 实验结果表明，小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能与鸡红细胞的浓度、实验时间等因素有关。
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实验6小鼠腹腔巨噬细胞吞噬现象观察
实验6小鼠腹腔巨噬细胞吞噬现象观察
姓名：李思露
学号：131140040
一、实验目的
1.通过对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞活动的观察,加深理解细胞吞噬作用的过
程；
2.了解巨噬细胞吞噬能力检测的形态学方法
二、实验原理
吞噬作用也称为胞吞作用（cellular eating），指细胞通过质膜内陷形成内吞泡的方式吞入不能渗透过膜的较大固体物质（直径一般大于250mm）的过程。
许多原生动物通过吞噬作用摄取营养；高等动物体内的巨噬细胞和嗜中性粒细胞的吞噬作用成为动物体非特异性免疫的重要组成部分。
不同动物来源的巨噬细胞或同一动物来源的不同巨噬细胞吞噬功能强弱不同，个体吞噬细胞的平均吞噬能力是机体非特异性免疫功能强弱的重要反映。
吞噬细胞细胞膜上有识别某些病原体相关分子及凋亡细胞磷脂酰丝氨酸等配体的受体，可以使巨噬细胞识别结合病原体、凋亡细胞及其它异物，引起受体胞内区活化，进而导致与其相连的细胞骨架重排引发吞噬作用。
内吞
内吞体
吞噬溶酶体
胞吐
巨噬细胞吞噬自身衰老凋亡细胞而不吞噬正常细胞，原因是，凋亡细胞细胞膜内侧面的磷脂酰丝氨酸反转到胞膜外侧面而被巨噬细胞模式识别受体识别。
吞噬功能一般用吞噬百分率和吞噬指数两个指标反映。
吞噬百分率＝吞噬有鸡红细胞的巨噬细胞数/巨噬细胞总数×100％
吞噬指数＝吞噬的鸡红细胞总数/吞噬有鸡红细胞的巨噬细胞数
三、实验材料、试剂及器材
（一）材料：
1.健康小白鼠：6-8周龄健康小白鼠，实验前1~2天，每只腹腔注射4％淀粉肉汤
1mL。
2.抗凝鸡血
（二）试剂:
1.4%淀粉肉汤
2.D-Hanks液
3.0.85％生理盐水
4.180IU/mL肝素钠生理盐水溶液
（三）用品
普通光学显微镜、 10mL低速离心机、托盘天平、水浴箱（37℃）、5mL一次性注射器、 10mL玻璃离心管、试管架、胶头滴管等
四、实验操作
1.巨噬细胞收集：脱颈处死小鼠；腹腔注入2mL生理盐水，揉匀；剪开腹部皮肤，暴
露腹膜；用带针头的注射器插进腹腔吸取腹腔液。
2.体外吞噬。
0.3mL腹腔液+0.3mL鸡红细胞悬液，37℃吞噬。
3.制片及观察。
分别在0min、15min、30min、45min 制备细胞混合液临时装片，观
察现象并作图。
五、实验结果
图1 小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡血红细胞装片（不染色）
0min 15min 30min 45min 时
间
现
象
表1 巨噬细胞吞噬鸡红细胞过程各个阶段
巨噬细胞吞噬物的变化亦具有与时间相关的特点，巨噬细胞吞噬物在形态上易于观察和检测，这些特征使得巨噬细胞在损伤时间推断过程中具有重要的法医学意义。
六、作业与思考题
1.画图显示巨噬细胞吞噬鸡红细胞过程各个阶段。
答：如表1.
2.在体外吞噬实验中，为什么随着吞噬时间延长，制片中出现的巨噬细胞数量减少？
答：巨噬细胞（Macrophages）能够吞没、破坏受损伤组织，有助于启动康复过程。
虽然它们在损伤位点发挥关键作用，但一旦任务完成，就需要尽快撤离，结束炎症反应，为再生过程开路。
继续存在的巨噬细胞不利于组织恢复。
3.如不预先洗涤鸡红细胞会影响实验结果吗？为什么？
答：会。
D-hanks液是一种平衡盐溶液，用于洗涤鸡血红细胞，如果不洗涤则鸡血红细胞含有钙镁离子，会破坏巨噬细胞溶酶体水解酶的活性，影响吞噬过程的进行。
七、反思与改进
1.注射时注意不要注入皮下或将针头插进小鼠内脏。
进针部位选在下腹部，距离生殖
器约1cm处腹中线两侧，针头与皮肤保持约30度到45度角，针头进入皮肤约
1cm；可用一只手的拇指和食指将下腹部皮肤及腹膜夹起，然后将针头插入空
腔。
2.要注意计时，不同阶段细胞的形态不同。