临床常用血清酶研究共64页文档
临床诊断中常用的血清酶类及其同工酶
临床诊断中常用的血清酶类及其同工酶临床医师多从疾病出发，将酶测定结果和其它各种检查结果综合起来，分清主次，辨证地加以应用；对一个检验医师而言，单从这方面考虑显然是不够的，还应对具体每个酶有一个较全面的了解，这样才能为临床提供咨询，解释好各项测定的临床应用价值。
本文以常用的具体酶为中心，系统介绍该酶在临床论断中的应用，包括该酶的作用、性质特点、组织分布与其临床应用价值。
一、肌酸激酶（CK）及其同工酶肌酸激酶（CK）催化下列反应：以前临床常习惯将此酶称为肌酸磷酸激酶（CPK），此名称不确切，目前国外已摒弃不用。
此反应逆向反应速度约为正向反应速度6倍，与大多数激酶一样，Mg2+为它的辅基，需双硫键维持酶的分子结构。
测定酶活性时必须加入巯基化合物，N-乙酰半胱氨酸（NAC）是目前最常用的激活剂。
CK作用生成的磷酸肌酸含高能磷酸键，是肌肉收缩时能量的直接来源，在3种肌组织和脑组织中含量最高。
CK是由两种不同亚基（M和B）组成的二聚体，这样正常人体组织常含3种同工酶，按电泳速率快慢顺序分别为：CK-BB（CK1），CK-MB（CK2）和CK-MM（CK3）。
除细胞质外，在心肌、骨骼肌和脑等组织细胞的线粒体内还存在另一种结构不同的CK，它也是二聚体，常简写为CK-MiMi，电泳时速度最慢，故命名为CK4。
【组织分布】CK主要存在于骨骼肌、心肌、脑组织中，此外还存在于一些含平滑肌的器官如胃肠道，子宫内。
而在肝、红细胞中含量极微或者没有。
骨骼肌无论在每克组织含量（328U/G湿重）还是绝对含量上都大大超过其它组织和器官。
其中主要为CK-MM，不含CK-BB，仅有少量CK-MB（＜3％）。
心肌中CK虽只有骨骼肌的1/10（313U/G湿重），但CK-MB占CK总量的14％-42％，这在人体中是绝无仅有的。
脑组织以及其中含平滑肌器官中的CK则几乎全部是CK-BB，它同时也是人胚胎中CK 的主要存在形式。
【生理变异】年龄、性别和种族对CK含量都有一定影响。
血清谷丙转氨酶测定设计实验
03 实验材料
CHAPTER
实验动物
健康成年小鼠
用于正常血清谷丙转氨酶水平的测定 。
肝损伤小鼠模型
通过给予一定剂量的化学物质或病毒 ，建立肝损伤模型，用于测定血清谷 丙转氨酶水平。
试剂和器材
血清采集管和分离胶
用于小鼠血清的采集和分离。
谷丙转氨酶试剂盒
血清谷丙转氨酶测定设计实验
• 实验目的 • 实验原理 • 实验材料 • 实验步骤 • 结果分析 • 实验结论
目录
CONTENTS
01 实验目的
CHAPTER
了解血清谷丙转氨酶测定的意义
• 谷丙转氨酶（Alanine Aminotransferase，简称ALT） 是肝细胞内的一种重要酶类，当 肝细胞受损时，ALT会释放到血 液中，导致血清ALT水平升高。 通过测定血清ALT水平，可以反 映肝细胞损伤的程度，对于肝脏 疾病的诊断、治疗和预后评估具 有重要意义。
数据分析
根据实验目的和数据结果，进行数 据分析，得出结论。
03
02
数据整理
将记录的数据进行整理，计算平均 值、标准差等统计指标。
结果报告
撰写实验报告，将实验结果和结论 呈现出来。
04
05 结果分析
CHAPTER
正常值范围
正常值范围
根据不同年龄和性别，血清谷丙转氨酶的正常值范围有所差异。通常，成人男性正常值为5-40 U/L，成人女性正 常值为5-35 U/L。
临床意义
结合受试者的临床资料，我们对谷丙转氨酶活性的变化进行了临床解释和评估。
对实验的评价与建议
实验优缺点
01
在本次实验中，我们总结出了实验的优点和不足之处。
临床免疫学检验技术PPT(共64页)
• 江西省胸科医院：熊国亮
一、概述
• 免疫学检验是研究免疫学技术及其在医学 检验领域应用的一门学科。免疫检验技术 则重点阐述各类免疫学技术的基本原理、 方法类型和临床应用。19世纪末相继建立 了凝集试验、沉淀试验和补体结合试验等 三大经典血清学试验，用于检测病原微生 物的抗原或抗体对传染病的诊断起到重要 作用。
三、酶联免疫吸附试验（enzy发展，放射 免疫技术、荧光免疫技术、酶免疫技术、 化学发光免疫技术、流式细胞免疫分析技 术等免疫标记技术应用于临床免疫学检验， 加快了免疫学检验的自动化、标准化进程， 极大地提高了免疫学检验的灵敏度，拓展 了免疫学检测范围，从检测免疫相关物质 （抗原、抗体、补体、免疫活性细胞和细 胞因子等）到检测体液中的微量物质（激 素、酶、血浆微量蛋白、血药浓度、微量 元素等）。
三、酶联免疫吸附试验（enzymelinked immunosorbent assay,ELISA）
• 此法常用多孔聚苯乙烯反应板作为固相载 体，读取结果需用酶标仪。标记抗原或抗 体所用的酶常选择辣根过氧化物酶（HRP）、 碱性磷酸酶（AP）等，HRP常用的底物有 邻苯二胺（OPD）或四甲基联苯胺 （TMB），碱性磷酸酶一般采用对硝基苯 磷酸酯（P-NPP）作为底物，产物为黄色的 对硝基酚，在405nm波长处有最高吸收峰。
二、免疫检验技术在临床免疫学 检验的应用
• 3.免疫球蛋白、循环免疫复合物和补体的测 定 包括测定五类免疫球蛋白的含量、血清 总补体活性及补体成分的含量和在多种疾 病时血清中升高的循环免疫复合物。
二、免疫检验技术在临床免疫学 检验的应用
• 4. 细胞免疫相关指标测定 检测淋巴细胞亚 群和淋巴细胞的功能以及白细胞介素—2等 多种细胞因子，用于判断机体细胞免疫功 能状况。
常用生化检验项目参考值及异常结果分析-64页精选文档
成人血清无机磷 0.97～1.62mmol/L 儿童血清无机磷 1.29～2.10mmol/L 成人尿液无机磷 22～48mmol/24h 儿童尿液无机磷 22～48mmol/24h 【异常结果分析】 无机磷与体内钙代谢密切相关，并受相应激素的控制，彼此相 互制约。 血磷增高： 常见于甲状旁腺功能减退，Vit D过量，肾功能不全。 血磷降低： 常见于甲状旁腺功能亢进、佝偻病或软骨病、长期腹泻、吸收 不良等。
镁（Magnesium,Mg）
【标本采集】 静脉采血2ml，（防止溶血，勿用枸橼酸盐、EDTA抗凝）分离
血清进行测定。 【正常参考值】 原子吸收分光光度法或Galmagite比色法。 血清镁 0.65～1.05mmol/L 尿 镁 3～5mmol/24h 【异常结果分析】 镁是人体必需的微量元素之一，在维持多种酶活性中起重要作
常用生化检验项目参考值及 异常结果分析
黑龙江省医院检验科 冯恩航
（1）钾
（2）钠
离
（3）氯化物
子 类
（4）钙
（5）磷
（6） 镁
（7） co2结合力
（1）肌酐 肾
（2）尿素氮 功
（3）β2微球蛋白
（1） 谷草( ALT）
（2） 谷丙 (AST)
（3） 血清碱性磷酸酶
（4） 血氨
肝
（5） 血清总胆红素 和直接胆红素
态平衡，钙离子主要功能是维持神经肌肉的兴奋性及作为Ⅳ因子参 与凝血。
血钙增高： 常见于甲状旁腺功能亢进，骨肿瘤或大量使用Vit D治疗。
血钙降低：
血钙降低： 1.甲状旁腺功能低下。 2.Vit D缺乏症、婴儿手足抽搐症及骨软化症。 3.钙吸收障碍如营养不良、乳糜泻。 4.肾脏疾病、尿毒症等。 5．大量输枸橼酸盐抗凝血
临床生物化学测试题与参考答案
临床生物化学测试题与参考答案一、单选题（共66题，每题1分，共66分）1.血气分析标本使用的抗凝剂应为（）A、草酸钠B、肝素C、枸橼酸钠D、氟化钠正确答案：B2.下列尿黑酸尿症，说法错误的是：（）A、尿黑酸还原酶缺陷可引起该病B、因尿放置后变黑色，因此常会引起注意而被发现C、目前本症没有满意的治疗方法D、服用维生素正确答案：B答案解析：NAD 乳酸 L H NADH 丙酮丙酮谷氨 L 酮戊二酸α 丙氨 L LDH ALT 酸酸酸酸第 9 页共 91 页3.同工酶分析方法中，临床常规中最为常用的是（）A、电泳法B、免疫分析法C、质谱法D、层析法正确答案：A4.进行 TDM 的标本多采用（）A、全血B、血清C、尿D、唾液正确答案：B5.下列脂蛋白中蛋白质含量比例最高的是（）A、CMB、VLDLC、IDLD、LDL正确答案：D6.下列脂蛋白中密度最高的是（）A、CMB、VLDLC、IDLD、HDL正确答案：D7.加样针上的探测感应器功能不包括（）A、防碰撞报警功能B、液面感应功能C、样品性状（溶血、黄疸、脂浊）检测功能D、随量跟踪功能正确答案：C8.答案： ( ) 。
(异位 ACTH 综合征，就是临床上的库欣综合征。
是由于多种原因引起的肾上腺皮脂层长期分泌过多皮脂而引起的 ,患者身体上会明显出现色素沉着、高血压、水肿以及严重的低血钾、糖尿病等 ) 下列哪项是异位 ACTH 综合征的生化特征 ?（）A、血钾、血氯降低B、血钾、血氯增高C、血钠升高D、血钠降低正确答案：A9.对同工酶描述错误的是（）A、可由不同基因编码B、同工酶基因不可能会相同C、可由等位基因编码D、可由同一基因编码正确答案：B10.（）是一种反映肾小球滤过率（ GFR ）变化的理想的内源性标志物A、血尿酸B、血尿素C、血肌酐D、血胱抑素正确答案：D11.下列哪种方法不是微量元素常用的检测方法（）A、放射免疫法B、中子活化分析法C、原子吸收光谱法D、紫外可见吸收光谱法正确答案：A12.关于甘油三酯，下列叙述中错误的是（）A、甘油三酯以B、血浆甘油三酯升高是冠心病发生的一个独立危险因素C、水平升高D、富含甘油三酯的脂蛋白在动脉粥样硬化中起重要作用E、高甘油三酯血症常伴正确答案：E13.根据阴离子隙水平的高低有助于判断（）A、代谢性酸中毒B、呼吸性碱中毒C、代谢性碱中毒D、呼吸性酸中毒正确答案：A14.血清 ALB 是评价蛋白质营养状况的一项重要指标，长期蛋白质摄入不足时下降。
试论肝脏病常用实验室检查(ppt 64页)
A
40-55 g/L
G
20-30 g/L
3）球蛋白 (G，globulin) (TP-A=G) , 其
A/G
中包括含量较多的免疫球蛋白和补体、各种糖蛋
白,脂蛋白、金属结合蛋白和酶类等。
1.5-2.5 : 1
4）A/G比值 ＜1 称A/G比值倒置
临床意义
1. 总蛋白
1）血液浓缩，见于重度腹泻、 呕吐、高热、 休克等
胆汁酸肠肝 循环的过程
正常值
总胆汁酸 胆酸 脱氧胆酸 甘氨胆酸
0-10 umol/L 0.08-0.91 umol/L 0.23-0.89 umol/L 0.05-1.0 umol/L
临床意义
1）肝细胞损害：急性肝炎、慢性活动性肝 炎、中毒性肝病、肝硬化、和肝癌时TBA 显著升高，尤其肝硬化时,TBA阳性率高 于其他指标。
④凝血和纤溶因子、纤溶抑制因子的生成及对活性凝血因子的 清除等。
故有人体“中心实验室”或“物质代谢中枢”之称
物质代谢功能 生物转化作用 分泌排泄功能
肝功能实验
LIVER FUNCTION TEST
肝脏疾病 1．蛋白质代谢功能的检查 检查 2．脂类代谢功能的检查
3．胆红素代谢功能的检查 4．胆汁酸代谢的检查 5．摄取和排泄功能 6．酶学检查 7．肝纤维化检查 8．病毒标志物的检查 9．肿瘤标志物的检查
原理：免疫比浊法
PAB + 相应的抗 PA抗体
复合物 （形成一定浊度）
正常值： 250-400mg/L
PAB的意义
营养不良
肝炎早期
慢性肝炎、肝硬化、肝癌、重症肝炎
PAB平均下降 >50%
慢性肝炎的监测PABPABBiblioteka 预后较好PAB持续
常用血清酶检测
常用血清酶检测
常用血清酶检测:
谷丙转氨酶（ALT）：5-40 U/L（单位/升）
谷草转氨酶（AST）：8-40 U/L
ALT /AST≤1
1.急性病毒性肝炎ALT与AST均显著增高，常可达参考值上限的20~50倍以上（甚至达100倍），但以ALT升高更明显，ALT/AST>1。
通常在肝炎病毒感染后1~2周转氨酶达高峰，3~5周逐渐下降，ALT/AST比值恢复正常。
如急性病毒性肝炎恢复期ALT和 AST仍不能恢复正常或再上升，提示急性肝炎转为慢性。
急性重症肝炎，病程初期即表现出AST升高比AL T升高更明显，说明肝细胞损伤严重（有线粒体损伤）；急性重症肝炎病情恶化时，可出现黄疸加重，胆红素明显升高，但转氨酶却减低，即“胆酶分离”现象，提示肝细胞严重坏死，预后不佳。
2.慢性病毒性肝炎血清转氨酶轻度升高或正常，ALT/AST>1；如AST升高较ALT明显，则提示慢性肝炎可能转为活动期。
3.非病毒性肝病药物性肝炎、脂肪肝和肝癌等非病毒性肝病时，转氨酶轻度升高或正常，并且ALT/AST ＤＮＡＰ活性值测定能较好地反映血液的ＨＢＶ含量，在临床上用于下述目的：(1)作为血液传染性的一项指标；(2)作为观察乙型肝炎病情变化的指标，慢性肝炎活动时，ＤＮＡＰ急剧升高；(3)作为慢性乙型肝炎抗病毒疗法疗效判断的指标，如抗病毒疗法有效，则１周后ＤＮＡＰ活性迅速下降。
血清临床检测指标
血清临床检测指标血清酶血清生化血清蛋白血清激素一、血清酶AＬT: 丙氨酸氨基转移酶(谷丙转氨酶)ASＴ: 天门冬氨酸氨基转移酶(谷草转氨酶)ＡＬＰ(AＬKP): 碱性磷酸酶GGT:γ－谷氨酰转肽酶ＣＫ: 肌酸激酶ＬDH: 乳酸脱氢酶ＡMＹL: 淀粉酶ＬIPＡ:脂肪酶Ａrginase: 精氨酸酶１、AＬT:丙氨酸氨基转移酶(Alaｎinｅａmｉnｏtrａｎｓfｅｒase )来源:大量存在于犬与猫得肝细胞浆内,肝脏疾病时,ALT逸至血清中且超过正常得3倍;横纹肌里也含有此酶,横纹肌损伤,ALT不会超过正常得3倍作用:丙氨酸磷酸吡多醛谷氨酸↓↑ALT(肝内)↓↑丙酮酸磷酸吡多胺α-酮戊二酸犬正常值:8 — 75 (＜6个月);10－100 (成)Ｕ/L猫正常值:12－1１5 (〈６个月);12—13０(成)U／Ｌ升高评价:200～400U／L中等程度肝坏死,400以上表明肝脏严重坏死、肝细胞坏死或损伤停止后此酶仍升高１～３周、此酶半衰期犬6０ｈ,猫３、５h。
检查适应症:腹泻、黄疸、腹水、精神不振与厌食,以及难以诊断得疼痛时,应检验此酶。
ALT值升高:肝病:见于肝坏死、肝肿瘤(癌)、脂肪肝及肝炎(原发及继发)、肝硬化、肝脓肿与肝胆炎时。
肝脏损伤(自然、手术、外伤)药物:氯丙嗪、利福平、红霉素、氯霉素、四环素、庆大霉素、皮质类固醇抗惊厥药(扑癫酮、苯巴比妥)等药物。
中毒:四氯化碳,铅、汞等重金属,砒霜等中毒传染病:犬传染性肝炎、猫传染性腹膜炎、马传贫。
肝脓肿与肝胆炎、钩端螺旋体病、败血症。
其她疾病:肾炎,肺炎,败血症,脑炎,脑膜炎,肌肉发炎,胆囊炎,胆结石,胆管梗阻,甲亢,风湿病,消化道疾病,尿毒症,骨骼疾病、蛔虫、肝片吸虫等时也升高。
严重休克肝脏灌流不足。
ＡLT值在肝损害一周以上才持续升高。
当肝细胞千分之一有炎症时,血清转氨酶含量就会增高一倍以上。
生理:妊娠、过度劳累、剧烈活动(乳酸在体内大量生成、积聚,使机体相对缺氧及低血糖,致使肝细胞膜通透性增加,引起转氨酶升高)、代谢紊乱与继发性肝疾病:急性胰腺炎、糖尿病、应激、肾上腺皮质机能亢进、肾病综合征、毒血症、饥饿或长期厌食、不吸收综合症、酮血病与各种原因引起得肝脂肪沉积症(肥胖猫多见)、猫甲状腺机能亢进、循环紊乱与继发肝病:心肌炎、心脏机能不足、心肌梗死、心力衰竭、严重贫血、缺氧、休克。
临床常用血清酶
某些血清酶可作为疾病预后的指标，有助于评估 患者的康复状况和生存期。
血清酶的分类与特性
转氨酶类
如谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶 （AST），主要存在于肝细胞中，用于
反映肝脏功能。
脂肪酶类
如脂肪酶（LPS）、酰基甘油水解酶 （ACHE），参与脂肪代谢，可用于
诊断胰腺炎等疾病。
肌酶类
如肌酸激酶（CK）、肌酸激酶同工酶 （CK-MB），主要存在于骨骼肌中， 用于反映肌肉损伤。
提高检测准确性与灵敏度的方法
标准化操作
制定血清酶检测的标准化操作流程，确保检测结果的可靠性和一 致性。
质量控制
加强实验室内部和外部的质量控制，定期进行比对和校准，确保检 测结果的准确性。
新型检测方法
研究和发展新型的血清酶检测方法，如电化学发光、质谱分析等， 提高检测的灵敏度和特异性。
个性化医疗与血清酶检测
CK-MB是心肌梗死的特异性指标，其升高 对于心肌梗死的诊断具有很高的敏感性和特
异性。
肿瘤诊断与监测
要点一
α-L-岩藻糖苷酶（AFU）
AFU升高常见于肝癌等肿瘤疾病，对于肝癌的诊断和监测 具有一定的参考价值。
要点二
癌胚抗原（CEA）
CEA是一种广谱性肿瘤标志物，可在多种肿瘤中表达升高 ，对于结直肠癌、肺癌、乳腺癌等肿瘤的诊断和监测具有 一定的意义。
根据不同年龄、性别和生理状态， 血清酶的正常范围有所不同。医 生会根据个体情况给出正常参考 值。
结果解读
医生会根据检测结果，结合临床 表现和其他检查结果，综合分析 血清酶活性变化的意义，为诊断 和治疗提供依据。
报告发放
检测报告应包括检测方法、正常 参考值、检测结果及医生对结果 的解读和建议。患者应妥善保存 报告，以便日后复查和就诊时使 用。
第24章 连续监测法测定酶活性浓度
第二十四章 连续监测法测定酶活性浓度
（二）常用方法
GPDA催化底物甘氨酰脯氨酰对硝基苯胺水解，生成甘氨 酰脯氨酸和黄色的对硝基苯胺，后者在405nm波长下吸光度 的升高，吸光度升高速率与GPDA活性成正比。
甘氨酰脯氨酰对硝基苯 胺 GPDA 甘氨酰脯氨酸 对硝基苯胺
第28页
L-γ-谷氨酰-3-羧 基-4-硝基苯胺为
底物
IFCC推荐方 法
第12页
第二十四章 连续监测法测定酶活性浓度
（二）IFCC推荐的测定方法
以色素原GCNA为底物，甘氨酰甘氨酸为受体，GGT催化γ谷氨酰基团从GCNA转移至甘氨酰甘氨酸上，并游离出2-硝基 -5-氨基苯甲酸。后者的生成量与样品中的GGT活性成正比关 系，故测定405nm处的吸光度增量可计算出GGT的活性。
③以L-γ-谷氨酰-3-羧基-4-硝基苯胺（GCNA）为底物，GGT催化生成 的对硝基苯胺在碱性环境下呈黄色。第11页第来自十四章 连续监测法测定酶活性浓度
（一）测定方法概述
γ-L-谷氨酰对硝 基苯胺为底物
L-γ-谷氨酰-α（β） -萘胺为底物
方法灵敏度低， 底物溶解度差， 受溶血干扰较 大
可以连续监 测，有较好 的灵敏度和 准确性，但 底物溶解度 差
布氏法： ALP 作用于β-甘油磷酸钠产生磷酸根，定量磷 测定酶活性。少用 金-阿法：以磷酸苯二钠为底物， 经ALP作用生成酚，定 量酚测定活性。少用 皮-劳法：以4-硝基酚磷酸钠盐为底物，水解生成对硝基 酚，碱性条件下呈黄色，连续监测。
第8页
第二十四章 连续监测法测定酶活性浓度
（二）IFCC推荐的测定方法
GCNA 双甘氨酸 pGHG7T.72 硝基 5 氨基苯甲酸 L 谷氨酰 甘氨酰甘氨酸
血清临床检测指标
血清临床检测指标血清酶血清生化血清蛋白血清激素一、血清酶ALT：丙氨酸氨基转移酶（谷丙转氨酶）AST：天门冬氨酸氨基转移酶（谷草转氨酶）ALP（ALKP）：碱性磷酸酶GGT：γ-谷氨酰转肽酶CK：肌酸激酶LDH：乳酸脱氢酶AMYL：淀粉酶LIPA：脂肪酶Arginase：精氨酸酶1、ALT：丙氨酸氨基转移酶（Alanine aminotransferase ）来源：大量存在于犬和猫的肝细胞浆内，肝脏疾病时，ALT逸至血清中且超过正常的3倍；横纹肌里也含有此酶，横纹肌损伤，ALT不会超过正常的3倍作用：丙氨酸磷酸吡多醛谷氨酸↓↑ALT （肝内）↓↑丙酮酸磷酸吡多胺α-酮戊二酸犬正常值：8 - 75 (<6个月)；10-100 (成)U/L猫正常值：12-115 (<6个月)；12-130 (成)U/L升高评价：200~400U/L中等程度肝坏死，400以上表明肝脏严重坏死。
肝细胞坏死或损伤停止后此酶仍升高1~3周。
此酶半衰期犬60h，猫3.5h。
检查适应症：腹泻、黄疸、腹水、精神不振和厌食，以及难以诊断的疼痛时，应检验此酶。
ALT值升高：肝病：见于肝坏死、肝肿瘤（癌）、脂肪肝及肝炎（原发及继发）、肝硬化、肝脓肿和肝胆炎时。
肝脏损伤（自然、手术、外伤）药物：氯丙嗪、利福平、红霉素、氯霉素、四环素、庆大霉素、皮质类固醇抗惊厥药（扑癫酮、苯巴比妥）等药物。
中毒：四氯化碳，铅、汞等重金属，砒霜等中毒传染病：犬传染性肝炎、猫传染性腹膜炎、马传贫。
肝脓肿和肝胆炎、钩端螺旋体病、败血症。
其他疾病：肾炎，肺炎，败血症，脑炎，脑膜炎，肌肉发炎，胆囊炎，胆结石，胆管梗阻，甲亢，风湿病，消化道疾病，尿毒症，骨骼疾病、蛔虫、肝片吸虫等时也升高。
严重休克肝脏灌流不足。
ALT值在肝损害一周以上才持续升高。
当肝细胞千分之一有炎症时，血清转氨酶含量就会增高一倍以上。
生理：妊娠、过度劳累、剧烈活动（乳酸在体内大量生成、积聚，使机体相对缺氧及低血糖，致使肝细胞膜通透性增加，引起转氨酶升高）。
血清酶测定实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 了解血清酶测定的原理和方法。
2. 掌握常用血清酶的测定方法及其临床意义。
3. 学会运用分光光度法、电化学法等方法进行血清酶活性测定。
二、实验原理血清酶测定是临床生化检验的重要项目，通过检测血清中酶的活性，可以了解人体脏器的功能状态，对疾病的诊断、治疗和预后评估具有重要意义。
实验原理主要包括以下几种：1. 酶催化反应：酶作为生物催化剂，在适宜的条件下，可以催化底物发生特定的化学反应，产生特定的产物。
2. 底物消耗法：在酶催化反应中，底物被消耗的速率与酶活性呈正相关，通过测定底物消耗的速率，可以计算出酶活性。
3. 产物生成法：在酶催化反应中，产物生成的速率与酶活性呈正相关，通过测定产物生成的速率，可以计算出酶活性。
4. 分光光度法：利用酶催化反应产生的特定产物或底物，在特定波长下对光有吸收作用，通过测定吸光度值，可以计算出酶活性。
5. 电化学法：利用酶催化反应产生的电子转移，通过测定电流或电位变化，可以计算出酶活性。
三、实验材料1. 实验仪器：分光光度计、电化学分析仪、恒温水浴箱、移液器、试管等。
2. 实验试剂：底物溶液、酶标抗体、酶联免疫吸附剂、酶活性测定试剂盒等。
3. 实验对象：健康志愿者、患有肝脏疾病、心肌疾病等患者。
四、实验方法1. 标本采集：采集实验对象的静脉血，分离血清。
2. 酶活性测定：（1）底物消耗法：取一定量的底物溶液和血清，在恒温水浴箱中孵育一定时间，测定底物消耗的速率，计算出酶活性。
（2）产物生成法：取一定量的底物溶液和血清，在恒温水浴箱中孵育一定时间，测定产物生成的速率，计算出酶活性。
（3）分光光度法：取一定量的底物溶液和血清，在特定波长下测定吸光度值，根据标准曲线计算出酶活性。
（4）电化学法：取一定量的底物溶液和血清，在电化学分析仪上测定电流或电位变化，根据标准曲线计算出酶活性。
3. 结果分析：比较实验对象和正常对照组的酶活性，分析其临床意义。
五、实验结果1. 正常对照组血清酶活性：（1）谷丙转氨酶（ALT）：10-40 U/L（2）谷草转氨酶（AST）：8-28 U/L（3）碱性磷酸酶（ALP）：35-125 U/L（4）乳酸脱氢酶（LDH）：100-180 U/L2. 患者组血清酶活性：（1）肝脏疾病患者：ALT：100-200 U/LAST：50-100 U/LALP：150-300 U/L（2）心肌疾病患者：ALT：20-50 U/LAST：40-80 U/LLDH：200-300 U/L六、实验结论1. 血清酶测定是临床生化检验的重要项目，可以反映人体脏器的功能状态。
医学检验--血清酶基本知识
血清酶（一）血清酶的分类（二）血清酶生理变异及其病理生理机制（三）酶活性和质量测定方法及其评价（四）酶活力测定的影响因素（五）工具酶（六）标本采集要点及酶活性表示法（七）同工酶和亚型测定的临床意义血清酶的分类根据酶的来源及其在血清中发挥催化功能的情况，可将血清酶分为两大类。
1.血浆特异酶在血浆中发挥特定催化作用的酶。
如凝血酶、纤溶酶、胆碱酯酶（CHE）、脂蛋白脂肪酶、铜氧化酶等。
特点：（1）大多在肝内合成；（2）以酶原状态分泌入血，在一定的条件下被激活；（3）有的可以作为肝功能试验的一部分。
血浆特异酶活性的改变，除了反映血液功能外，还反映来源器官的功能。
2.非血浆特异酶在血浆中浓度很低，且无功能，又可分为两种。
（1）分泌酶：指来源于外分泌腺的酶。
如α-淀粉酶（AMY）、前列腺酸性磷酸酶（ACP）、脂肪酶（LPS）、胃蛋白酶、胰蛋白酶、ALP等。
在血液中的浓度和其分泌腺体的功能活动和疾病有关，来源增加或排泄受阻时，血浆中此类酶活性增高。
例如，急性胰腺炎时，血淀粉酶就会升高。
（2）细胞酶：存在于细胞内，参与细胞内新陈代谢的酶。
正常时这些酶存在于组织细胞中，随细胞的不断更新和破坏经常释出极少量进入血液，血浆中酶活性很低。
细胞内、外浓度差异悬殊。
当酶来源的组织细胞发生病变，细胞内酶大量进入血浆，导致血浆酶活性显著增高。
这一类酶临床应用较多，如转氨酶、乳酸脱氢酶、肌酸激酶等，它们在肝病、心脏疾病时都可能出现变化。
血清酶生理变异及其病理生理机制1.生理变异：（1）性别：多数酶无性别差异，CK和GGT都是男性高于女性，因此不能以一个参考值作为判断标准。
（2）年龄：如新生儿的CK和LD活性常为成人的2～3倍，ALP和GGT到老年时可能有轻度升高。
（3）进食：酗酒可引起GGT明显升高。
（4）运动：剧烈运动可引起血清中多种酶升高，如CK、LD、AST等。
（5）妊娠与分娩：妊娠时ALP（因有胎盘ALP同工酶）升高，分娩时可能有CK、CK-BB、LD升高。
临床常用血清酶
(3)肝酶谱： 主要是用来判断有无肝实质细胞损伤、
肝内外胆汁淤积等肝胆疾病。
(4)肿瘤酶谱： 具有器官特异性的有ACP及其同工酶、
ALP及其同工酶、γ-GT及其同工酶、AFU、 AMY及其同工酶、LPS等；非器官特异性的 有ALT、CK同工酶、ALD同工酶、LD同工酶 等。
重症肝炎时由于大量ຫໍສະໝຸດ 细胞坏死，血中ALT 逐渐下降，而胆红素却进行性升高，出现所谓 “酶胆分离”现象，常是肝坏死的前兆。
AST主要存在于心肌，以往多用于AMI的诊断。AMI 发病6～8h即升高，48～60h达到高峰，4～5d恢复正常。 但由于AST在AMI时升高迟于CK，恢复早于LD，故诊断 AMI价值不大。在急性肝炎时，AST虽亦显著升高，但 升高程度不及ALT，而在慢性肝炎，特别是肝硬化时， AST升高程度超过ALT。胆道疾患时AST亦可升高。
其含量以肝脏为最多，其次为肾脏、胎盘、小肠、 骨骼等。血清中ALP主要来自肝脏和骨骼。生长期 儿童血清内ALP大多数来自成骨母细胞和生长中的 骨软骨细胞，少量来自肝。尿中ALP并非来自血液， 而是直接来自肾小管细胞。人体各组织ALP同工酶 可分为3大类，即胎盘ALP、肠ALP和肝／骨／肾 ALP同工酶。
氨酰转肽酶，是一种线粒体酶。组织分布以肾脏 含量最多，其次为胰、肺、肝等。
血清中的γ-GT则主要来自肝胆，红细胞中 几乎无γ-GT，因此溶血对其测定影响不大。γGT催化γ-谷氨酰基从谷胱甘肽(GSH)或其他含 γ-谷氨酰基物质中转移到另一肽或氨基酸分子 上。
(二)测定方法
γ-GT的测定方法有数种，目前国内外 多采用连续监测法测定血清γ-GT活性。
临床常用血清酶研究共66页文档
ห้องสมุดไป่ตู้
60、人民的幸福是至高无个的法。— —西塞 罗
46、我们若已接受最坏的，就再没有什么损失。——卡耐基 47、书到用时方恨少、事非经过不知难。——陆游 48、书籍把我们引入最美好的社会，使我们认识各个时代的伟大智者。——史美尔斯 49、熟读唐诗三百首，不会作诗也会吟。——孙洙 50、谁和我一样用功，谁就会和我一样成功。——莫扎特
临床常用血清酶研究
56、极端的法规，就是极端的不公。 ——西 塞罗 57、法律一旦成为人们的需要，人们 就不再 配享受 自由了 。—— 毕达哥 拉斯 58、法律规定的惩罚不是为了私人的 利益， 而是为 了公共 的利益 ；一部 分靠有 害的强 制，一 部分靠 榜样的 效力。 ——格 老秀斯 59、假如没有法律他们会更快乐的话 ，那么 法律作 为一件 无用之 物自己 就会消 灭。— —洛克