烟草植物组织培养实验报告2223
烟草植物组织培养
烟草植物组织培养实验实验目的一学习和掌握植物组织培养技术，理解植物细胞的全能性。
实验原理二年代初期发展起来的一项生物技术。
由于其拥有占地世纪30植物组织培养是从20少、繁殖系数大等特点，现以在全世界的园林植物尤其是花卉的种苗繁育上得到广泛应用。
本文着重介绍组织培养技术的理论原理、操作过程、生产技术以及经济核算等方面的内容，使大家对组织培养在园林植物尤其是花卉的种苗繁育的应用有所了解，为以后的实际操作提供依据。
在植物组织培养中，主要目标是诱导愈伤组织形成和形态发生，使一个离体的细胞、一块组织或一个器官的细胞，通过脱分化形成愈伤组织，并由愈伤组织再分化形成植物体。
从一块外植体形成典型的愈伤组织，大致要经历三个时期：起动期、分裂期和形成期。
①起动期是指细胞准备进行分裂的时期。
用于接种的外植体的细胞，通常都是成熟细胞，处在静止状态。
起动期是通过一些刺激因素（如机械损伤、改变光照强度、增加氧等）和激素的诱导作用，使外植体细胞的合成代谢活动加强，迅速进行蛋白质和核酸的合成。
机械损伤能诱导植物体细胞开始分裂，如伤口上会出现愈伤组织。
在植物组织培养中沿用了愈伤组织这一名词，但是植物组织培养中诱导外植体细胞分裂形成的愈伤组织，大都不是损伤的结果。
外源的生长素类物质对诱导细胞开始分裂效果很好，因此生长素类物、萘乙4-D4-二氯苯氧乙酸2，，质在植物组织培养中得到广泛应用，常用的有生长素（2）细胞分裂素IBA、吲哚丙酸IPA和吲哚丁酸NAA酸、萘乙酰胺NAD和吲哚乙酸IAA））等。
分裂期是，KT-30CPPU糠氨基嘌呤（KT）氯吡苯脲（6-（苄氨基嘌呤6-BA、6-指外植体细胞经过诱导以后脱分化，不断分裂、增生子细胞的过程。
处于分裂期的愈伤组织的特点是：细胞分裂快，结构疏松，颜色浅而透明。
外植体的脱分化因植物种类、器官来源及其生理状况的不同而有很大差别。
例如，烟草、胡萝卜等植物的脱分化比较容易，禾本科植物的脱分化比较难；花的脱分化比较容易，茎、叶的脱分化比较难；幼嫩组织的脱分化比较容易，成熟的老组织脱分化比较难。
烟草植物组织培养
烟草植物组织培养实验一实验目的学习和掌握植物组织培养技术，理解植物细胞的全能性。
二实验原理植物组织培养是从20世纪30年代初期发展起来的一项生物技术。
由于其拥有占地少、繁殖系数大等特点，现以在全世界的园林植物尤其是花卉的种苗繁育上得到广泛应用。
本文着重介绍组织培养技术的理论原理、操作过程、生产技术以及经济核算等方面的内容，使大家对组织培养在园林植物尤其是花卉的种苗繁育的应用有所了解，为以后的实际操作提供依据。
在植物组织培养中，主要目标是诱导愈伤组织形成和形态发生，使一个离体的细胞、一块组织或一个器官的细胞，通过脱分化形成愈伤组织，并由愈伤组织再分化形成植物体。
从一块外植体形成典型的愈伤组织，大致要经历三个时期：起动期、分裂期和形成期。
①起动期是指细胞准备进行分裂的时期。
用于接种的外植体的细胞，通常都是成熟细胞，处在静止状态。
起动期是通过一些刺激因素（如机械损伤、改变光照强度、增加氧等）和激素的诱导作用，使外植体细胞的合成代谢活动加强，迅速进行蛋白质和核酸的合成。
机械损伤能诱导植物体细胞开始分裂，如伤口上会出现愈伤组织。
在植物组织培养中沿用了愈伤组织这一名词，但是植物组织培养中诱导外植体细胞分裂形成的愈伤组织，大都不是损伤的结果。
外源的生长素类物质对诱导细胞开始分裂效果很好，因此生长素类物质在植物组织培养中得到广泛应用，常用的有生长素（2，4-二氯苯氧乙酸2，4-D、萘乙酸NAA、萘乙酰胺NA D和吲哚乙酸IAA、吲哚丙酸IP A和吲哚丁酸IBA）细胞分裂素（6-苄氨基嘌呤6-BA、6-糠氨基嘌呤（K T）氯吡苯脲（KT-30，CPPU））等。
分裂期是指外植体细胞经过诱导以后脱分化，不断分裂、增生子细胞的过程。
植 物 组 培实验报告
实验报告实验名称：烟草植物组织培养班级：姓名：学号：烟草植物组织培养一、实验目的1、学习植物组织培养技术的基本原理；2、掌握培养基配制方法、步骤及培养环节中，外植体灭菌、接种、培养观察等技术环节；3、了解外植体脱分化及再生过程。
二、实验原理1、植物细胞全能性（totipotency）指植物的每个细胞都包含着该物种的全部遗传信息，从而具备发育成完整植株的遗传能力。
在适宜条件下，任何一个细胞都可以发育成一个新个体。
植物细胞全能性是植物组织培养的理论基础。
2、植物细胞表现出全能性的条件（1）离体状态；（2）有一定的营养物质，激素和其他外界条件（如无菌、温度、pH ）；（3）选择性能优良、细胞全能性表达充分的基因型；3、组织培养组织培养(Tissue culture)是指在无菌条件下，分离并在培养基中培养离体植物组织(器官或细胞)的技术。
广义的组织培养：包括器官培养，组织培养，胚胎培养，细胞培养，原生质培养，花药培养等；狭义的组织培养是指植物离体快繁技术卸微型繁殖(Mieropropagation)或试管繁殖技术。
4、常用的培养基植物组织培养常用培养基为MS基本培养基。
凝固剂常用琼脂粉，它最主要的作用是使液体培养基凝固，琼脂本身并不提供任何营养，它只是一种高分予的碳水化合物，从海藻中提取出来，仅溶解于热水，成为溶胶，冷却后(40℃以下)即凝固为固体状凝胶。
琼脂的用量一般在4—10克／升之间。
琼脂的凝固能力除与原料、厂家的加工方式等有关外，还与高压灭菌时的温度、时间、pH值等因素有关，长时间的高温会使凝固能力下降，过酸过碱加之高温会使琼脂发生水解而丧失凝固能力，存放时间过久，琼脂变褐，也会逐渐失去凝固能力。
5、植物激素（1）培养基中添加的激素是植物激素，是植物新陈代谢中产生的天然化合物，它能以极微小的量影响到植物的细胞分化、分裂、发育，影响到植物的形态建成、开花、结实、成熟、脱落、衰老和休眠等许许多多的生理生化活动。
普生实验报告烟草幼苗培养
普生实验报告
实验名称烟草幼苗的组织培养
实验目的：
1.掌握植物组织培养中无菌操作技术。
2.学习用生长调节剂对植物器官发生的诱导方法。
记录一：周次：14
6-BA:NAA=1:5 2-4D
6-BA:NAA=5:1 对照组
记录二：周次：15
6-BA:NAA=1:5 2-4D
6-BA:NAA=5:1 对照组
记录三：周次：16
6-BA:NAA=1:5 2-4D
6-BA:NAA=5:1 对照组
作用：6-BA ：促进芽的形成,诱导愈伤组织发生。
NAA ：促进细胞分裂与扩大，诱导形成不定根。
差异：培养基中生长素、细胞分裂素浓度不同，可以诱导烟草幼片生根或生芽。
细胞的全能性：植物组织当中原本已经分化的细胞，一旦脱离原有的机体环境，成为离体状态，在适宜的营养和外界条件下，就会表现出全能性，从已经分化的细胞发生脱分化，成为重新具有分裂能力的细胞，并能重新生长发育成完整的植株。
烟草植物组织培养实验报告2223
烟草叶片的组织培养一、实验目的本实验通过配制3种不同的培养基来实现烟草种子苗叶片诱导、分化及植株再生从而深刻理解植物细胞的全能性、学习和掌握植物组织培养技术，二、实验原理植物组织培养是从20世纪30年代初期发展起来的一项生物技术。
由于其拥有占地少、繁殖系数大等特点，现以在全世界的园林植物尤其是花卉的种苗繁育上得到广泛应用。
本文着重介绍组织培养技术的理论原理、操作过程、生产技术以及经济核算等方面的内容，使大家对组织培养在园林植物尤其是花卉的种苗繁育的应用有所了解，为以后的实际操作提供依据。
在植物组织培养中，主要目标是诱导愈伤组织形成和形态发生，使一个离体的细胞、一块组织或一个器官的细胞，通过脱分化形成愈伤组织，并由愈伤组织再分化形成植物体。
从一块外植体形成典型的愈伤组织，大致要经历三个时期：起动期、分裂期和形成期。
培养基配方设计是组培法育苗中的关键步骤。
根据理论与实际经验，对不同种类的花卉及不同的取材部位，需设计出相适应的配方，并从中筛选出最佳者。
继代芽增殖培养：很多花卉植物经过2-6 周的培养即可分化出大量的不定芽。
根据情况可以将这些增殖了大量新芽的外植体重新分割进行几代培养，以扩大繁殖规模直至满足繁殖需要为止。
三、实验材料植物材料：烟草植株药品：激素（2,4-D、NAA、6-BA浓度均可）、1N NaOH、1N HCl 蒸馏水、 70%酒精、 0.01%升汞仪器：1 玻璃杯、1玻璃棒、1pH试纸(5.5-9.0) 1瓶无菌水、1个无菌烧杯、1包无菌滤纸、 1个无菌白瓷板、培养瓶若干移液器、微波炉、灭菌器、超净工作台、酒精灯、解剖刀、镊子四、实验方法与步骤4.1 MS培养基母液的配制注意：1．大量元素按照使用时高10倍的数值称取，分别将各种化合物称量后，除CaCl2·2H2O 单独配制外，其余化合物混合在500ml烧杯中加适量蒸馏水溶解，用玻璃棒搅拌促溶，倒入1000ml容量瓶中用蒸馏水定容至刻度，置小口瓶中保存，贴上标签注明化合物名称（或编号），浓缩倍数，配制日期和配制者姓名，CaCl2·2H2O配制同上置于另一小口瓶中。
烟草幼苗的组织培养
烟草幼苗的组织培养
一、目的与要求
掌握植物组织培养中无菌操作技术 学习用生长调节剂对植物器官发生的诱导方法
二、 实验原理
植物组织培养 在无菌条件下，将植物体的一部分细胞、组织、器 官切割下来，接种到营养介质上，使其增殖成一群细胞、组织、器官， 甚至完整植物体的实验技术。
植物细胞全能性 植物体的每个活细胞都有相同的遗传组成，在适
当条件下具有繁殖出完整植株的能力。 脱分化 已经分化的细胞，发生生理、生化的改变，退回到胚性 细胞的过程。 再分化 经过退分化的细胞或组织再次获得分化成不同功能的细 胞、组织、器官或完整植物体。 改变生长素NAA和细胞分裂素6-BA浓度比例，可以决定烟草幼苗从 叶片直接分化生成根或芽。 2，4-D能够诱导生成愈伤组织。
1% 1% 1% 3%
3个实验组 5.8 0.8%
Step1: 配大瓶培养基(无激素)
500 ml
Step 2: 分瓶,加激素, 调PH=5.8
125ml
ctrl
NAA:6-BA=1:5
NAA:6-BA=5:1 2,4-D
Step 3:分装,加琼脂
30ml
四、操作步骤
1.灭菌：
(1)器具灭菌： 剪、镊、培养皿，诱导培养基， 120℃，高压灭菌15-20min；
五、无菌操作注意事项
1.
2.
无菌操作时不要讲话，以免污染；
用酒精对双手消毒时，务必待酒精彻底挥发后再靠近酒 精灯火焰，以免火焰伤手。
烟草育种学实习报告（推荐五篇）
烟草育种学实习报告（推荐五篇）第一篇：烟草育种学实习报告烟草育种生产实习报告一、实习目的：通过烟草育种生产实习，进一步了解烟草的生长习性，将理论知识渗透到实践中。
强化理论和实践相结合，提高自身对现代烟草育种的理解和基本技能；提高和培养理论联系实际、独立分析和解决问题的能力，懂得根据市场需求变化来组织管理和经营农业生产。
二、实习时间：2012年3月10日到2012年9月30日三、实习内容：不论是直播还是催芽播种，烟草在播种之前要对种子进行处理。
通过种子处理，清除种子中的夹杂物，淘汰不饱满的种子，对提高种子的发芽势和发芽率有着显著作用。
同时通过药剂处理可以杀灭种皮上附着的病菌和病毒，有效地地减轻苗床期烟草病害的发生。
播前烟草种子处理主要包括以下几方面内容：（1）种子精选：目的是清除种子的夹杂物，淘汰不饱满的种子。
生产上多采用水选法。
将种子倒入盛有清水的小缸或其他器皿内。
烟草种子粒小而轻，比重明显比水小（烟籽比重约为0.9，水比重为1），初放入时种子到多漂浮在水面，应搅拌，使之浸泡均匀。
放置4-6小时后，饱满的种子下沉，不好的种子及夹杂物漂浮在水面，将漂浮物捞出，选留沉下去的种子。
水选后的种子晒干备用或随即消毒催芽。
（2）晒种：水选后的种子含水比较多，第一天要晒干种子表面水分，以手抓能松散为宜，在15-20℃下晒2-3天即可。
若气温超过20℃，采用间歇晒种方法，即每次晒几小时收藏起来，第二天再晒几小时，连晒2-3天。
（3）灭菌：清毒利用药剂杀灭烟种皮上附着的病菌和病毒。
常用药剂是稀释一千倍的硝酸银溶液，或稀释一百倍的硫酸铜溶液，或稀释五十倍的福尔马林溶液。
将需消毒的种子装入纱布袋内，浸入上述浓度的药液（温度为20℃左右）中，浸泡十五分钟。
浸泡时，将种子袋药液提出药液，再放入，重复几次，以使袋内种子充分接促药液。
取出种子袋占用清水充分冲洗净。
否则，易发生药害。
（4）催芽：催芽方法有布袋催芽和盆钵催芽。
布袋催芽要求装入种子的数量约为袋子容量的一半，布袋以能装0.25-0.5公斤干种大小为宜。
烟草幼苗的组织培养实验报告
烟草幼苗的组织培养实验报告一，实验名称：烟草幼苗的组织培养二，实验原理：植物组织培养是指在无菌条件下，分离并在培养基中培养立体植物组织（器官和细胞）的技术。
植物组织培养的理论基础是植物细胞具有全能型。
植物组织当中原本已经分化的细胞，在脱离原有机体环境成为离体状态，在适宜的营养和外界条件下，就会表现出全能性，从已经分化的细胞发生脱分化，成为重新具有分裂能力的细胞（本实验中用到的是愈伤组织，是由植物的一个离体的细胞，一块组织或一个器官的细胞脱分化形成的），并重新生长发育成完整的植株。
生长素，细胞分裂素浓度之间的平衡可以决定烟草组织幼苗的叶片或茎髓将产生根，茎或仅仅是愈伤组织。
三，实验材料和用具：1、材料：烟草幼茎2、用具：超净工作台、高压灭菌锅、培养箱、电子天平、移液器、手术器械、20ml量筒、PH试纸、烧杯、玻璃棒、三角烧瓶、封口膜、高压橡皮筋。
3、试剂：MS培养基、NAA、6-BA四，实验步骤：1、培养基的配置成分实际称取量大量元素（10×）40 ml蒸馏水300 ml微量元素（100×） 4 ml有机成分（100×） 4 ml铁盐（100×） 4 ml蔗糖12 g定容至400 ml激素（1 mg/ml）每130 ml MS加：生根6-BA=13 μl NAA=65 μl生芽6-BA=65 μl NAA=13 μl对照组（不加激素）pH值 5.8分瓶30 ml/瓶琼脂0.24 g2、培养基、剪子、镊子、枪头需在高压灭菌锅120摄氏度灭菌20分钟。
3、接种前打开无菌间和超净台紫外灯照射30分钟4、肥皂洗手和手腕，关闭无菌间棚顶紫外灯，打开超净台风机，并关掉超净工作台上的紫外灯。
再用百分之七十的酒精喷手。
5、点燃酒精灯6、将橡皮筋解开（不掀开封口膜），放到无菌风道侧面。
将镊子见到放到酒精灯外焰灼烧，冷却后剪取外肢体。
迅速用另一手持三角瓶，去下封口膜，瓶口略倾斜，在酒精灯外焰上灼烧数秒。
烟草的组织培养技术研究
烟草的组织培养技术研究一、概述烟草作为重要的经济作物，在全球范围内广泛种植。
随着生物技术的不断发展，组织培养技术在烟草育种、种质资源保存和生物反应器等领域的应用日益广泛。
烟草组织培养技术是指通过无菌操作，将烟草的离体组织或细胞，在人工控制的环境条件下进行培养，使其再生成为完整植株的技术。
该技术具有繁殖速度快、遗传稳定性好、不受季节限制等优点，对于提高烟草的产量和品质具有重要意义。
烟草组织培养技术的研究始于上世纪中叶，随着培养条件的优化和技术的不断创新，现已发展成为一项成熟且高效的生物技术手段。
烟草组织培养技术的研究重点主要集中在培养基的优化、外源基因的导入与表达、以及培养过程中的生理生化变化等方面。
通过深入研究这些关键技术，有望为烟草产业的可持续发展提供新的技术支撑和动力。
烟草组织培养技术也面临着一些挑战和问题，如培养过程中的污染问题、遗传变异的风险以及培养成本较高等。
未来烟草组织培养技术的研究还需要进一步探索新的培养方法、提高培养效率、降低培养成本，并加强与其他生物技术的结合，以推动烟草产业的持续健康发展。
1. 烟草产业的重要性及面临的挑战烟草产业在全球经济中占有重要地位，它不仅是许多国家的税收主要来源，同时也为农民提供了稳定的收入来源。
随着社会对健康问题的日益关注，烟草产业面临着前所未有的挑战。
从经济角度看，烟草产业对全球经济的贡献不容忽视。
烟草制品的销售为各国政府带来了可观的税收收入，这些资金被用于支持国家的各项公共事业。
烟草种植也是许多发展中国家农民的主要经济来源，对于提高农民生活水平、促进农村经济发展具有重要意义。
烟草产业也面临着诸多挑战。
最为突出的是健康问题的挑战。
越来越多的研究表明，吸烟对人体健康具有极大的危害，可导致多种疾病，如肺癌、心血管疾病等。
这使得社会对烟草产业的质疑声越来越大，许多国家和地区开始实施严格的控烟政策，限制烟草制品的生产和销售。
烟草产业还面临着环境保护和可持续发展的挑战。
烟草组织培养实验方案
烟草组织培养实验方案摘要本实验通过配制四种培养基来实现烟草种子萌发，种子苗叶片诱导、分化及植株再生，从而获得课题所需要的基因受体植株。
关键词烟草组织培养前言组织培养不仅是一种植物快速繁殖的手段,同时也是植物改良、种质保存和次生物质生产的理想途径。
烟草是典型的基因工程模式植物,易于进行组织培养,容易得到再生的转化植株。
一实验植物：华烟6号二实验材料：华烟6号种子三实验方法与步骤1．培养基的配制本次实验使用（1）种子萌发培养基：MS培养基+GA30.7mg/L；（2）愈伤组织诱导及其幼芽分化培养基:MS+2,4-D 0.5 mg/L +6-BA 1.0 mg/L；（3）幼芽增殖培养基：MS+6-BA 1.0 mg/L +NAA 0.2 mg/L；（4）生根培养基：MS+NAA 0.2 mg/L。
上述培养基均附加3%蔗糖，0.8%琼脂，pH5.8，培养温度25±2℃，光照强度2 000 lx。
2. 培养基的灭菌——高压蒸汽灭菌（湿热灭菌法）3. 无菌苗的获得把烟草种子用市售丝袜（或纱布）包好，先分别用75%乙醇或无菌水浸泡30 s，用无菌水洗净表面抑制种子萌发的药物，待洗涤的水清澈透明，然后将烟草种子用70%酒精浸泡1 min, 10%NaClO消毒10 min,经无菌水漂洗后，在超净工作台处（紫外灭菌20～30min）接种于以配置好的（1）培养基,放入(27±1)℃的光照培养架中培养。
光照周期为10 h(8:00~18:00)光照,12 h暗培养。
种子苗具4~5叶时继代扩繁备用。
4. 烟草叶片愈伤诱导及不定芽分化在超净工作台上取上述烟草无菌苗幼嫩叶片1~2片于无菌培养皿中，将叶片切成1.0～1.5平方厘米的小方块，接入（2）中培养。
约2～3d后，叶片外植体卷曲、增厚、膨胀，15d后外植体脱分化形成疏松絮状浅黄绿色的愈伤组织，愈伤组织诱导率为100%。
30d后，从叶片外植体产生的疏松愈伤组织上分化出许多浅黄绿色芽点。
植物组织培养实验报告
植物组织培养实验报告一、实验目的通过植物组织培养的实验，了解植物组织培养的基本原理和操作技术，进一步加深对植物生长发育过程的理解。
二、实验过程1、材料准备：细菌清洁大气箱、琼脂、化学药剂、手套、移液管、离心管、耗材、显微镜等。
2、实验步骤：1）将无性系别品种叶片、幼茎和根部按照不同的方式处理，如用药物浸泡和切成小块备用。
2）选用适合无菌培养的营养基质，如MS培养基、B5培养基、WPM培养基等，加入琼脂并调整pH值至5.8。
3）将处理过的植物组织放入含有培养基的离心管中，并密封后在细菌清洁大气箱内进行培养。
4）观察培养物的生长情况，记录培养物的数量、形态及生长周期等指标，以得出结论。
5）实验完成后，清洗实验器材，消毒措施要做到位，以防止污染环境和传染病菌。
三、实验结果1、不同植物组织的培养结果：对叶片、幼茎和根部不同组织进行组织培养后，叶片的成活率最高，幼茎次之，根部最低，一定比例药物处理的组织培养效果要更好。
2、不同营养基质的培养效果：不同种类的营养基质对于组织培养效果有较大的影响。
在MS培养基中，叶片和幼茎的生长速度较快，根系生长周期更长；在B5培养基中，叶片和幼茎的生成周期较长，根系生长速度更快；在WPM培养基中，叶片和幼茎的生长效果较好，根系生长速度和周期一般。
3、同一营养基质对于不同植物组织的培养效果：同一营养基质对于不同植物组织的生长效果有所差别。
例如在MS培养基中，处理过药物的叶片组织培养效果最优，成活率高，而未处理过的幼茎组织生长速度较快，成活率也较高。
四、实验结论1、植物组织培养技术是一种重要的植物生物技术，可以通过组织培养的方法扩大繁殖种类，为植物栽培和遗传改良提供基础。
2、在植物组织培养中，药物处理和不同营养基质的选取可以影响组织的生长效果，必须根据不同的需要来选择合适的培养方法。
3、在实验操作过程中，要加强对实验器材和环境的消毒措施，以保证实验过程的无菌性，减少实验中的污染和误差，得到更为准确的实验结果。
彭勇 烟草组织培养实验报告
烟草组织培养 实验报告单位：华中师大一附中姓名：彭 勇完成时间：2016.10.14烟草组织培养（彭 勇 华中师大一附中）一 实验目的1．熟悉植物组织培养技术的基本原理2．掌握培养基制备、外植体处理、接种、培养观察等技术方法3．理解外植体脱分化及再分化过程二 实验原理植物体细胞具有细胞全能性。
在无菌且光照、温度、营养等培养条件适宜的情况下，离体的植物组织会经过脱分化过程形成愈伤组织，经再分化形成丛芽、生根最终发育成新的幼苗。
三 实验材料、药品及仪器1．实验材料：脱毒烟草幼苗（川布兰公司提供）2．实验药品：70%酒精、超纯水、MS培养基试剂盒等（试剂盒包含MS培养基干粉、pH试纸、激素A/B，川布兰公司提供）3．仪器设备：微波炉、高压蒸汽灭菌锅、光照培养箱、电子天平、pH计、超经工作台、酒精灯等4．器械及用具：镊子、手术剪、酒精灯、记号笔等5．玻璃器皿：培养瓶（川布兰公司提供）、量筒、容量瓶、烧杯、培养皿等四 实验简要过程与操作1．操作间超净工作台的准备将组培室操作间、超净工作台、光照培养箱等打扫清理干净，并用70%酒精对超净工作台等设备进行擦拭消毒，然后将操作间和超净工作台的紫外灯和风机打开，消毒30-60min。
2．培养基的制备按照试剂盒附带说明书称量、溶解培养基干粉并用微波炉煮沸，定容后浓度浓度为42g/L；然后调节pH至6.0。
其中用叶片诱导愈伤组织时，1L培养基需添加激素A 2mL、激素B 20μL；愈伤组织诱导丛芽、根的分化，以及用带芽的茎段直接诱导培养幼苗时，则无需添加激素A和B。
3．培养基的分装将煮沸并定容后的培养基（呈现澄清透明状），冷却至约50℃（不烫手）时分装至培养瓶，每瓶分装约20-30mL，适当拧紧培养瓶盖。
4．器具及培养基的高压蒸汽灭菌将分装好的培养瓶以及用牛皮纸包好的镊子、手术剪、培养皿等一并放入高压蒸汽灭菌锅内，121℃加热20min；灭菌完成后取出置于消毒好的超净工作台，待其自然冷却，培养基灭菌后在瓶底有少量铁锈色颗粒沉淀。
植物组织培养实习报告
一、前言植物组织培养技术是现代生物技术的一个重要分支，具有广泛的应用前景。
通过在无菌条件下，对植物组织进行培养，可以繁殖植物、保存植物种质资源、研究植物生长发育规律等。
为了提高自己的实践操作能力和对植物组织培养技术的了解，我参加了植物组织培养实习。
以下是我对本次实习的总结和体会。
二、实习目的1. 掌握植物组织培养的基本原理和方法；2. 学会无菌操作技术；3. 了解植物组织培养在植物繁殖、种质资源保存等方面的应用；4. 培养动手能力和团队协作精神。
三、实习内容1. 无菌操作技术在实习过程中，我们首先学习了无菌操作技术。
无菌操作是植物组织培养的基础，确保培养过程的顺利进行。
我们学习了无菌室的使用方法、消毒液的配制、无菌器械的清洗和灭菌等。
2. 植物组织培养基本原理植物组织培养的原理是利用植物细胞的全能性，将植物器官、组织或细胞在人工控制的条件下，诱导分化成完整的植株。
我们学习了植物组织培养的基本流程，包括外植体选择、消毒、接种、培养等。
3. 植物组织培养实践操作在实习过程中，我们进行了植物组织培养的实践操作。
具体步骤如下：（1）外植体选择：选择健康的植物器官或组织作为外植体，如茎尖、叶片、愈伤组织等。
（2）外植体消毒：将外植体放入75%酒精中浸泡30秒，然后用无菌水冲洗干净，再放入5%次氯酸钠溶液中浸泡10分钟，最后用无菌水冲洗干净。
（3）接种：将消毒后的外植体接种到含有适宜培养基的培养皿中。
（4）培养：将培养皿放入培养箱中，控制适宜的温度、光照和湿度，观察外植体的生长情况。
4. 植物组织培养的应用植物组织培养在植物繁殖、种质资源保存、新品种培育等方面具有广泛的应用。
我们了解了植物组织培养在这些领域的应用实例，如无病毒苗木的培育、转基因植物的研究等。
四、实习体会1. 植物组织培养技术是一门实践性很强的学科，需要我们掌握无菌操作技术、培养基配制、接种、培养等基本操作。
2. 在实习过程中，我们学会了如何观察和记录外植体的生长情况，提高了自己的观察能力和分析能力。
烟草栽培学实验报告
烟草栽培学综合实验报告烟草学院学号:2011312916不同烤烟品种烟苗素质比较摘要：本实验对烤烟K326、云烟85漂浮育苗的烟苗进行了比较研究。
其中根系活力测定采用了甲烯蓝吸附法，光合色素测定采用分光光度法。
从本试验可以看出，K326烤烟品种的烟苗素质在每个方面都比云烟85品种有优势，云烟85的烟苗总质量、叶片质量和根系质量均小于K326的，云烟85的根系吸收面积、活跃吸收面积、跟的重量、比表面面积，叶片的色素浓度均小于K326的；而云烟85的叶绿素a含量大于K326的。
关键词：不同烟苗；甲烯蓝溶液；吸附；分光光度计前言：植物根系是活跃的吸收器官和合成器官，根的生长情况和活力水平既可作为植物吸水和吸肥的指标，又可作为生长和营养指标[2]。
叶绿素能吸收、传递和转换光能，与光合色素及氮素营养密切相关，是科学施肥、育种、光合、衰老及植物病理研究中的重要指标[1]。
根系活力测定采用甲烯蓝吸附，它的吸附量可根据吸附前后甲烯蓝浓度的改变算出，甲烯蓝的浓度可用比色法测定[3]。
已知1mg甲烯蓝成单分子层时占有的面积为1.1㎡，据此可算出根系的总吸收表面积，从解吸后继续吸附的甲烯蓝量，即可算出根系活跃的吸收面积，可作为根系活力的指标；光合色素的测定，当一束单色光通过有色溶液时，因溶液的吸收而使光强下降，当液层与光强一定时，溶液的浓度与吸光度成正比，叶绿素a吸收峰为663nm,叶绿素b吸收峰为646nm，类胡萝卜素吸收峰为470nm，可计算出具体含量。
[4]1、材料与方法1.1根系活力测定材料：K326、云烟85烟苗的根系方法：甲烯蓝吸附法1.2叶绿素含量测定材料：K326、云烟85烟苗的烟叶方法：分光光的法2、结果与分析2.1 不同烤烟品种生育期记载生育期记载表品种苗龄（d）剪叶次数云85 65 4K326 65 42.2 不同烤烟品种生物性状比较不同品种生物性状比较品种根重（g）云85 3.426K326 4.2102.3 不同烤烟品种根系活力比较标准曲线：y=0.1486x+0.0747不同品种根系活力比较2.4 不同烤烟品种光合色素比较不同品种光合色素比较3、讨论根部农艺性状比较得出，两个烤烟品种的根系活力、茎干重差异性不显著；表明云烟85地下部分农艺性状素质较K326差。
植物组织定植实验报告(3篇)
第1篇一、实验背景植物组织培养技术是现代生物技术的一个重要分支，它通过在人工控制条件下培养植物细胞、组织和器官，实现了植物繁殖的新途径。
植物组织定植实验是植物组织培养的一个重要环节，旨在将已经培养好的愈伤组织或细胞分化为完整的植株。
本实验旨在通过植物组织定植技术，将愈伤组织转化为具有生长潜力的植株，并探讨影响定植成功的关键因素。
二、实验目的1. 掌握植物组织定植的基本操作步骤。
2. 了解影响定植成功的关键因素，如培养基成分、激素配比、光照条件等。
3. 观察和记录愈伤组织分化为植株的过程，分析实验结果。
三、实验原理植物组织培养过程中，愈伤组织经过脱分化、再分化阶段，最终形成具有生长潜力的植株。
定植是将愈伤组织转移到新的培养基上，促进其继续生长和分化。
实验过程中，通过调节培养基成分、激素配比、光照条件等，可以影响愈伤组织的生长和分化。
四、实验材料与仪器1. 实验材料：豌豆愈伤组织、MS培养基、2,4-D、6-BA、蔗糖、琼脂、超净工作台、培养皿、剪刀、镊子等。
2. 实验仪器：高压灭菌锅、水浴锅、显微镜、分析天平、培养箱等。
五、实验步骤1. 愈伤组织诱导：将豌豆愈伤组织接种于MS培养基中，添加适量的2,4-D和6-BA，置于培养箱中培养。
2. 愈伤组织筛选：在诱导过程中，定期观察愈伤组织的生长情况，选择生长良好的愈伤组织进行下一步实验。
3. 培养基配制：按照实验设计，配制不同成分和激素配比的培养基。
4. 定植操作：将筛选出的愈伤组织切成小块，接种于不同配比的培养基中，置于培养箱中培养。
5. 观察与记录：定期观察愈伤组织的生长和分化情况，记录实验数据。
6. 统计分析：对实验数据进行统计分析，得出结论。
六、实验结果与分析1. 愈伤组织生长情况：经过诱导培养，豌豆愈伤组织生长良好，形成了大量的愈伤组织块。
2. 定植成功率：不同配比的培养基对愈伤组织的定植成功率有显著影响。
其中，添加适量2,4-D和6-BA的培养基，愈伤组织的定植成功率较高。
烟草根部组织培养及药物分析研究
烟草根部组织培养及药物分析研究烟草是一种广泛种植及使用的作物，其根部组织含有大量有益成分，如挥发油、黄酮类化合物等。
因此，对烟草根部组织的培养及药物分析研究具有重要意义，可以为医药、化妆品及食品等领域的研究提供重要的基础。
一、烟草根部组织培养技术烟草的根部组织可以进行组织培养，即将其分离、培养，以获得大量的细胞或组织材料。
烟草的组织培养技术被广泛应用于植物遗传转化、组织工程等研究领域。
1. 培养基的配制烟草根部组织的培养需要一定的培养基，其配方一般为：MS 培养基+植物生长素+蔗糖。
其中，植物生长素促进细胞分裂及生长，而蔗糖则提供营养。
2. 培养过程将烟草根部通过消毒处理后，分离出细胞或组织，并在培养基中进行培养。
在培养过程中，需要定期更换培养基、调整植物生长素和蔗糖的浓度等。
培养成功后，可用于烟草药物成分的提取及分析，也可以进行基于基因工程的遗传转化等研究。
二、烟草根部药物分析1. 提取方法烟草根部中的药物成分主要是挥发油、黄酮类化合物等。
提取这些化合物的方法一般为：全浸法、超声波提取法等。
其中，超声波提取法操作简便、提取率高，被广泛使用。
2. 分析方法烟草根部中的化合物含量分析可通过高效液相色谱法、气相色谱法等进行。
这些分析方法对药物成分进行准确、可靠的定量分析，有助于研究烟草根部中的药物成分在医药、化妆品及食品等领域的应用。
三、烟草根部组织培养及药物分析的应用烟草根部的培养及药物分析对医药、化妆品及食品等领域具有重要意义。
在医药领域中，烟草根部中的化合物被广泛应用于抗炎、抗菌、镇痛等方面。
同时，在化妆品及食品领域，烟草根部的化合物也有很好的应用前景。
总之，烟草根部组织培养及药物分析是对烟草进行深入研究及利用的重要手段。
其可以为医药、化妆品及食品等领域的研究提供重要的基础，对于推动相关产业的发展具有重要作用。
细胞工程实验-烟草叶片的组织培养.
细胞工程学实验报告专业：_ 09级生物技术一班__ 姓名：___ __ 学号：____ _ _实验一实验室的设计及基本设备一、实验室的设计1、实验室设计的原因：植物细胞工程实验室的流程是：清洗玻璃器皿、配制培养基、高压气灭菌、无菌操作、培养室培养植物、植物材料的检测。
因此实验室需要有清洁器皿和配制培养基的准备室，无菌操作室或超净工作台，供培养材料用的培养室，检查培养情况并做记录的实验室。
一般在设计上，每个组分最好按工作的自然程序连续排列，如：准备室、灭菌室、无菌操作室、植物材料培养室、检测室。
实验室的安排应合理简洁，并要求无尘、灭菌、光洁、清净。
2、实验室的布局要求：（1）准备室准备室可以是一大间或几小间，主要用于进行一切与实验有关的准备工作：完成所使用的各种药品的贮备、称量、溶解、器脿醮涤、培养基配制与分装、培养基和培养器皿的灭菌、培养材料的预处理等。
必要的设备有:准备室应具备实验台、药品柜、水池、仪器、药品、防尘橱（放置培养容器）、冰箱、天平、蒸馏水器、酸度计及常用的培养基配制用玻璃仪器等。
洗涤灭菌区功能：完成各种器具的洗涤、干燥、保存、培养基的灭菌等。
要求：洗涤灭菌室根据工作量的大小决定其大小，一般面积控制在30-50m2。
在实验室的一侧设置专用的洗涤水槽，用来清洗玻璃器皿。
中央实验台还应配置2个水槽，用于清洗小型玻璃器皿。
如果工作量大，可以购置一台洗瓶机。
准备1-2个洗液缸，专门用于洗涤对洁净度要求很高的玻璃器皿，地面应耐湿并排水良好。
设备：水池、落水架、中央实验台、高压灭菌锅、超声波清洗器、干燥灭菌器（如烘箱）等。
（2）无菌室（接种室）进行植物细胞、组织培养操作的关键是无菌条件。
室内的墙壁要求光滑平整；地面为光洁的水磨石，平坦无缝，避免灰尘积累，便于清扫。
紫外灯一般在3到4平方米内安装1到2只；在工作台下安置紫外灯紫外灯可使灭菌彻底。
同时，工作台上方安装平板玻璃，以防操作时落灰。
条件不好时，用无菌箱代替无菌室，箱内用紫外灯灭菌。
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30d后，从叶片外植体产生的疏松愈伤组织上分化出 许多浅黄绿色芽点；
60d后，不仅从愈伤组织上分化出越来越多幼芽，芽 诱导频率(芽数/块愈伤组织)为25～35，而且还可观察 到，该愈伤组织较早分化产生的幼芽叶片呈现不同程度 白化（或缺绿）。但此时若将此缺绿幼芽切下，转接至 不加2,4-D的幼芽增殖培养基（2）上，
继代芽增殖培养：很多花卉植物经过2-6 周的培养即可分 化出大量的不定芽。根据情况可以将这些增殖了大量新芽的外 植体重新分割进行几代培养，以扩大繁殖规模直至满足繁殖需 要为止。
三、实验材料
植物材料：烟草植株
药品： 激素（2,4-D、NAA、6-BA浓度均可）、 1N NaOH、 1N HCl 蒸馏水 、 70%酒精、 0.01%升汞 仪器：1 玻璃杯 、1玻璃棒、1pH试纸(5.5-9.0) 1瓶无菌水、1 个无菌烧杯、1包无菌滤纸、 1个无菌白瓷板 、 培养瓶若干 移液器、 微波炉、 灭菌器、 超净工作台、 酒精灯、 解剖 刀、 镊子
按要求浓缩100倍的数值称取，分别将各种化合物称量除铁盐 （FeSO4·7H2O和Na2-EDTA.2H2O）作为一组单独配制外，其余化合物 可混合置于烧杯内加少量蒸馏水溶解后，定容在1000ml容量瓶中，置小 口瓶中保存，贴上标签。 3．铁盐配制将FeSO4·7H2O和Na2-EDTA.2H2O分别溶于450ml蒸馏水 中，加热，（很重要）不断搅拌，溶解后，两液混合，调PH至5.5加水 定容至1000ml，置于小口瓶中，贴上标签。 4．有机物母液配制，按母液要求浓缩50倍，除蔗糖按3%单独临时称量 外，其余分别称量后，溶解，定容在500ml容量瓶中，置于小口瓶中保 存，贴上标签。
将上述溶液全部混合于琼脂与蔗糖溶液中，混合均匀后，加热至 80℃左右，用酸度计或精密PH试纸测定培养基的PH一般要求5.8~6.0， 过酸过碱则用1N NaoH和1N HCL调整。 二．分装：用一个接有胶管的分装器趁热装培养基，1000ml培养基分装
到25-30个三角瓶中，每个三角瓶约30ml左右（一般占试管、三角瓶容 量1/4~1/3左右）注：培养基勿碰瓶壁。 三. 包装：分装好的三角瓶用封口膜包扎好，标明培养基代号即可进 行灭菌。
为了操作方便，节约时间，生长调节剂也可如同配制母液一样，先配 成原液，这样配制培养基时只要稍加计算，按需要量取即可。
不同药品在配制时若不溶于水，可用少量不同的溶剂先溶解，萘乙酸 （NAA），吲哚乙酸（IAA）,赤霉素（GA3），2，4-D等生长素和玉米 素（ZT）可先用少量95%酒精溶解，然后加水，如溶解不完全再加热。 激动素（KT）和6-苄基嘌呤（BA）可溶于少量1mol/L的盐酸中，叶酸 需用少量稀氨水溶解。 称取50mg生长调节物质，溶解后，在100ml的容量瓶中定容，配制的母 液每毫升则含有生长调节物质0.5mg，配制后一般要求在低温（0~4℃） 保存，配制培养基时如每升（1000ml）需添加的生长调节剂物质为 0.5mg时，则取1ml母液即可。
CuSO4.5H2O4 0.025 100 2.5
CoCL2.6H2O 0.025 100 2.5
4 铁 Na2-EDTA 盐 FeSO4.4H2O
37.3 100 3730 27.8 100 2780
甘氨酸
5 有 盐酸吡哆醇 机 物 盐酸硫铵素
烟酸
2.0 100 100 0.5 100 25 0.1 100 5 0.5 100 25
灭菌高压锅有大型卧式、中型立式、小型手提式等多种型号和规格， 无论哪种型号，操作的步骤都很相近。
进水→放进培养基→盖紧锅盖→关上放汽阀→检查安全阀→接上加热 源→待压力升至0.05MPa时排锅内冷空气，关上放气阀 →0.11MPa(121℃)下灭菌20~25分钟，保持稳定压力→除热源→逐渐打 开放气阀→锅内空气排除完后→开放锅盖→稍冷后取出培养基。
4.3植物材料表面灭菌——消毒剂灭菌
从外界或室内选取的植物材料，都不同程度地带有各种微生物。这些污 染源一旦带入培养基，便会造成培养基污染。因此，植物材料必须经严
格的表面灭菌处理，再经无菌操作手续接到培养基上，这一过程叫做接 种。 1.接种步骤： 第一步：清理材料→→流水冲洗→→加入吐温（或洗衣粉）清洗 →→ 自来水冲洗 第二步：对材料的表面浸润灭菌 ： 70%酒精浸10-30秒→→无菌水 第三步：灭菌剂处理→→ 0.1-1%升汞5-8 min（或其他灭菌剂） 第四步：无菌水进行冲洗 注意事项： １.灭菌剂一般要临时配制，现配现用．升汞可以短期储存． ２.对去除较容易的灭菌剂灭菌后无菌水冲洗３-４次，升汞一般５-８ 次，每次不少于３min ３.灭菌时要轻轻的搅拌，消除气泡，使消毒更彻底． ４.灭菌时间是从倒入消毒液开始，至倒入无菌水时为止。 ５.灭菌液要充分浸没材料 2.无菌操作可按以下步骤进行： （1）在接种3天前用甲醛熏蒸接种室，并于接种前3小时打开其内紫外 线灯进行杀菌； （2）在接种前20分钟，打开超净工作台的风机以及台上的紫外线灯； （3）接种员先洗净双手，在缓冲间换好专用实验服，并换穿拖鞋等； （4）上工作台后，用酒精棉球搽拭双手，特别是指甲处。然后搽拭工 作台面； （5）先用酒精棉球搽拭接种工具，再将镊子和剪刀从头至尾过火一 遍，然后反复过火尖端处，对培养皿要过火烤干； （6）接种时，接种员双手不能离开工作台，不能说话、走动和咳嗽 等； 材料吸干后，一手拿镊子、一手拿剪刀或解剖刀，对材料进行适当的切 割。（如叶片切成0.5cm2的小块；茎切成含有一个节的小段。微茎尖要 剥成只含1-2片叶原基）在接种过程中要经常灼烧接种器械，防止交叉 污染。 （7）接种完毕后要清理干净工作台，可用紫外线灯灭菌30分钟，若连 续接种，每5天要大强度灭菌一次。
6
肌酸
100 100 5000
1000 10 500 10 500 10
注意： 1．大量元素按照使用时高10倍的数值称取，分别将各种化合物称量 后，除CaCl2·2H2O单独配制外，其余化合物混合在500ml烧杯中加适量 蒸馏水溶解，用玻璃棒搅拌促溶，倒入1000ml容量瓶中用蒸馏水定容至 刻度，置小口瓶中保存，贴上标签注明化合物名称（或编号），浓缩倍 数，配制日期和配制者姓名，CaCl2·2H2O配制同上置于另一小口瓶中。 2．微量元素母液的配制
(三) 配制培养基（1000ml） 1. 琼脂: 称取5~7g琼脂，加入300ml蒸馏水，加热溶解直至完全 溶解为止. 2. 蔗糖3%用质量较好的白糖代替，称取30g白糖，溶于溶有琼 脂的300ml蒸馏水中。 3. 各种母液的吸取（培养基1L） （1） 用50ml量筒量取大量元素母液（A）和CaCl2·2H2O母 液（B）各100ml （2） 分别用10ml移液管或吸管吸取微量元素（C），铁盐 （D）母液各10ml （3） 用10ml移液管或吸管吸取有机物（H）10ml （4） 移取激素
在植物组织培养中，主要目标是诱导愈伤组织形成和形态 发生，使一个离体的细胞、一块组织或一个器官的细胞，通过 脱分化形成愈伤组织，并由愈伤组织再分化形成植物体。从一 块外植体形成典型的愈伤组织，大致要经历三个时期：起动 期、分裂期和形成期。
培养基配方设计是组培法育苗中的关键步骤。根据理论与 实际经验，对不同种类的花卉及不同的取材部位，需设计出相 适应的配方，并从中筛选出最佳者。
5．母液最好在2~4℃的冰箱中贮存，特别是有机类物质，贮存时间不宜 过长，无机盐母液最好在一个月内用完，如发现有霉菌和沉淀产生，就 不能再使用。
1． 制备母液和营养培养基时，所用蒸馏水或无离子水必须符合标准 要求，化学药品必须是高纯度的（分析纯）。
2． 称量药物采用高灵敏度的天平，每种药品专用一药匙。 ．生长调节剂母液配制：
母液浓缩倍数
培养基要求的含量 公式2：母液吸取量= ———————————（各种生长调节剂）
母液每CC的含量
（二） 各种母液按顺序编号排列 A. 大量元素；B.CaCl2.2H2O； C.微量元素 ；D.铁盐； E.有机 物； F．生长素萘乙酸（NAA）：配制0.5mg/ml的NAA称取50mg ， NAA 用少量95% 酒精溶解后加蒸馏水定容至1000ml；G..细胞分裂素、 激动素（KT）配制0.5mg/ml的KT 称50mgKT用少量1N HCL溶解后, 加蒸馏水定容至100ml。
浓缩 倍数
称取量 （mg）
母液 体积 （ml）
配制1 升培 养基 吸取 量定 容
10 19000 10 16500 1000
100 10 3700
10 1700
10 4400 1000 100
100 2230
100 860
100 620 100 83
1000 10
素 Na2MoO4·7H2O 0.25 100 25
4.2 培养基配制和灭菌
4.2.1培养培养基配制程序
本次实验使用 （1）愈伤组织诱导及其幼芽分化培养基:MS+2,4D 0.5 mg/L +6-BA 1.0 mg/L； （2）幼芽增殖培养基：MS+6-BA 1.0 mg/L +NAA 0.2 mg/L； （3）生根培养基：MS+NAA 0.2 mg/L。
用具清理和洗涤：各种母液按原位置摆整齐，用过的量筒，移液管、 烧杯、铝锅等用水洗涤干净，然后按次序放回原处。
4.2.2 培养基的灭菌——高压蒸汽灭菌（高压蒸汽灭
菌锅的使用方法）
具体操作步骤： 1. 高压锅放水至平把架； 2. 把包扎好的培养基装入高压锅; 3. 盖上热压锅盖,上紧螺帽(注意对角拧紧螺帽)关上气阀和安全阀. 4. 然后接通电源. 5. 压力计升至0.05MPa时，打开放气阀,排除冷空气(此步很重要)。 6. 排除冷空气后,关闭放气阀，待压力升到0.11MPa位置时，开始计算灭 菌时间，具体方法：当压力锅指针升至0.12MPa时，关闭电源，待指针 下降至0.11MPa时接通电源，不断重复此操作过程，维持20分钟。 7. 灭菌时间达到20分钟后，除去电源，打开放气阀(注意要逐渐放气)待 高压锅内的空气完全排除后，打开热压灭菌锅盖(注意对角扭松螺帽)稍 待冷后再把培养基取出。 8. 经过灭菌的营养培养基不宜放置太长，应尽早使用，但为了在使用 前能检查培养基有无微生物污染，可将培养基置于25℃下保存4天，如 果培养基需要贮存较长时间，可在4℃低温下保存。