小鼠肺泡灌洗液收集

小鼠肺泡灌洗液收集

20161008

实验材料

1. 1.5mL 离心管

2.5mL 流式管

3.18-G滞留针

4.眼科器械

5.EDTA-生理盐水/PBS/HBSS

6.3-4%福尔马林（甲醛）溶液

实验步骤

1.小鼠眼球取血

2.处死小鼠，剪开胸廓，暴露气管

3.气管上切开小口，将滞留针插入气管，滞留针头伸入一半长度（切忌过度伸

入，以防刺穿肺脏）

4.注射器中吸入0.5mL EDTA-生理盐水，接上滞留针头，注射入肺内

5.轻按摩胸腔10s，吸出EDTA-生理盐水，加入1.5mL离心管

6.重复一次，加入同一个1.5 mL 离心管

7. 1.5mL 离心管离心：300g 5min。收集沉淀细胞用于流式检测，上清用于细

胞因子和Ig检测

8.重复抽吸8次，加入5mL 流式管同样离心细胞与之前混合后细胞计数备用

9.1/2肺脏加入3-4%福尔马林溶液，作为切片染色样本

10.½肺脏用于组织裂解，流式染色

11.