支气管肺泡灌洗液检查
间质性肺疾病的支气管肺泡灌洗检查讲解
间质性肺疾病的支气管肺泡灌洗检查支气管肺泡灌洗（bronchoalveolar lavage ,BAL）是经纤维支气管镜获取下呼吸道主要是肺泡来源的细胞与生化成分，分析探讨肺疾病病理学过程的一种比较安全而实用的技术。
自从20世纪70年代开始应用BAL的操作技术，还是支气管肺泡灌洗（bronchoalveolar lavage fluid,BALF）的检测手段，检测项目及其应用范围都有了长足的进步。
许多国家的医学团体包括我国还先后制定并发表了指南性意见，规范了BAL技术操作及BALF实验室处理过程，使其结果更加标准可靠，从而进一步促进了BAL的发展和应用，使其作为研究肺疾病的一种检查手段得到了广泛的认可。
最新发布的关于结节病和特发性肺纤维化（idiopathic pulmonary fibrosis,IPF）的诊断和治疗的国际性联合声明也将BAL推荐为常规诊断手段。
一、支气管支气管肺泡灌洗的应用指征因为相对无创，没有明显的并发症，患者容易耐受，所以BAL目前已经成为肺活检的替代或补充手段，用于各种原因引起的弥漫性实质性肺疾病的临床诊断、疗效判断与预后评价以及病理和发展机制的研究。
临床上BAL检查主要用于感染性原因、非感染性原因（包括免疫性原因和肿瘤性原因）引起的弥漫性实质性肺部疾病（diffuse parenchyma lung disease,DPLD）或间质性肺疾病（interstitial lung disrase,ILD）的诊断和鉴别诊断（表6-1）。
在ILD的诊断过程中，BAL结果对于提示或除外某些疾病，缩小鉴别诊断范围确定具有非常重要的意义。
这些疾病主要包括结节病、外源性过敏性肺泡炎（extrinsic allergic alveolitis,EAA）、闭塞性细支气管炎伴机化性肺炎（bronchoaliotltis obliterans organizing pneumonia,BOOP）、慢性嗜酸性粒细胞肺炎（chronic rosinophilic pnrumonia,CEP）、特发性肺纤维化，药物性肺损伤、结缔组织疾病（connective tissue disease,CTD）等。
支气管肺泡灌洗液细胞形态学检验
二、标本采集与接收
（二）标本接收
标本送达检验科后,由工作人员在Iis系统扫码登记接收,对标 识不明、采集量不足等不合格的标本,执行标本拒收程序。接 收标本后应及时检验,室温可保存4h,分析后的标本保存24h,不 建议将标本保存24h后再应用于检测分析。
对于部分不合格标本,可执行让步接收与让步检验,与临床进 行沟通,并在报告单中备注,说明标本状况对检验结果的影响。
制作涂片4~6张。
三、检验程序
（六）仪器法制片
采用细胞离心机( Cytospin)甩片,按仪器操作说明书规范操作。 应用此方法制片,细胞分布均匀,结构清晰,利于形态辨识,可提 高病变成分检出率。若标本有核细胞数显著增高时,使用生理 盐水适当稀释标本,将悬液有核细胞数稀释至(100~200)× 106/L为宜,有的标本稀释可达10~200倍。
四、报告
（五）涂片保存
发出报告后,对涂片进行分类归档,妥善保管,保存时限按各实 验室标准操作规程进行处置,一般保存3~5年。
四、报告
（六）生物参考区间
有核细胞数(90~260)× 106/L,肺泡巨噬细胞85%~96%,淋巴细 胞6%~15%,中性粒细胞≤3%,嗜酸粒细胞<1%,鳞状上皮细胞/ 纤毛柱状上皮细胞≤5%。
要>30%。 ➢ ②不可混入血液,红细胞应<10%,上皮细胞应<5%。 ➢ ③多部位灌洗时,注明灌洗部位;注明灌洗液或冲洗液;较多时
弃去第1管。 ➢ ④儿童BALF标本采集应严格按相应标准要求施行。
二、标本采集与接收
（一）标本采集
根据检测目的分装于不同的无菌试管或洁净试管中。用于病 原学分析的标本需用无菌容器收集。常规细胞学分析需选择 硅化的塑料容器或玻璃容器以减少细胞的黏附,采集标本量成 人应不少于l0ml,儿童应不少于3ml。如考虑为大气道疾病时, 建议第1管吸回收液单独处理;非大气道疾病时,可将所有标本 混合后送检。标本采集结束后,贴好标本信息标签,室温2h内 送检。
支气管镜肺泡灌洗液(BALF)采集技术规范
支气管镜-肺泡灌洗液(BALF)采集技术规范患者咽喉局部麻醉后，导入纤维支气管镜。
通过纤维支气管镜对病灶所在支气管以下肺段或亚肺段水平，用37。
C或室温无菌生理盐水多次灌洗，每次注入20~60πιl(常规进行4~5次)，直到总共灌洗100~300ml,并充分吸引回收，从回收液中取出IOml标本，放入无菌管中，旋紧盖子，即刻送达实验室的技术。
【适应证】1.对于疑似肺炎患者，若有机会进行气管镜检查，则可同时采集肺泡灌洗液进行培养。
2.不能进行深部咳痰的患者，也可考虑通过气管镜获取标本。
【禁忌证】不能耐受支气管镜检查者。
【目的】采集肺泡灌洗液进行检测，可减少口咽部菌群的污染，提高检测结果的准确性。
【制度与依据】1.本规范理论部分主要依据：中华预防医学会医院感染控制分会发表于2018年第28卷第20期中华医院感染学杂志的《临床微生物标本采集和送检指南》。
感染性疾病的正确诊治需要以正确的病原学检测作为指导，而正确的病原学检测其前提是采集和送检合格标本。
因此，必须规范微生物标本的采集和运送，避免因标本的不合格，产生错误的病原学检测结果而误导临床治疗。
2.本规范操作部分主要依据：中华人民共和国国家卫生健康委员会2018年12月11日发布，2019年6月1日实施的《临床微生物学检验标本的采集和转运》，是中华人民共和国卫生行业标准，WS/T640—2018o本标准是按照GB/TL1—2009给出的规则起草；起草单位：北京大学人民医院、中日友好医院、安徽省立医院、首都医科大学附属北京友谊医院、北京医院、北京市垂杨柳医院；主要起草人：王辉、刘颖梅、张正、马筱玲、苏建荣、胡云建、宁永忠、王晓娟。
【准备】1.用物准备：医嘱单、痰液标本化验单或标本条形码、负压吸引装置1套、痰液收集器1个、生理盐水500ml、50ml注射器1个，无菌纱布2块，无菌手套、手消液，检查用物的有效期，物品处于备用状态。
2.环境准备：病室安静整洁，光线充足，适宜操作，关闭门窗（或窗帘），请无关人员回避，保护患者隐私。
支气管肺泡灌洗液微生物学检查
操作方法
1.涂片法
进行正确取材，将灌洗液沉淀物均匀平铺在载玻片上，不能聚集，晾干后进行革兰染色或抗酸染色，用显微 镜观察，对结核分支杆菌的检查有较大意义。
2.细菌培养
严格无菌操作，采灌洗液沉淀物进行增菌培养或取其沉淀物直接分离培养，是检查支气管和肺部感染的重要 方法，不仅适用于对细菌和真菌等检查，也适用于对支原体的培养和病毒分离，当培养的细菌为105CFU/mL时被 认为有诊断意义，但标本采集方法复杂。在无菌环境下，将采集的灌洗液或者经过离心后的沉淀物接种在血琼脂 平板上，在37℃环境中培养24～48小时，若有典型的菌落生长，再挑取菌落作涂片染色后进行显微镜检查。
支气管肺泡灌洗液微生物学检查
介绍
目录
检查前准备
03 临床意义
02 操作方法 04 注意事项
支气管肺泡灌洗液微生物学检查是指利用支气管肺泡灌洗术进行灌洗后，采集肺泡表面衬液，进行微生物学 的检查。可对感染性下呼吸道疾病进行诊断定位、观察病情及判断预后。
检查前准备
检查前向患者解释检查目的、意义、方法等，以消除紧张情绪；检查前应禁饮食4～6小时以防呕吐物误吸； 完善血常规、凝血等实验室检查；使用纤维支气管镜采集支气管肺泡灌洗液，离心后取灌洗液沉淀物进行检查。
临床意义
涂片支气管肺泡灌洗液的非病原性杂菌很少，因此，涂片检查病原菌的意义较大，如进行革兰染色与抗酸染 色，可进行结核分枝杆菌的检查；细菌培养是检查支气管和肺部感染的重要方法，不仅适用于对细菌和真菌等检 查，也适用于对支原体的培养和病毒分离。支气管肺泡灌洗液微生物学检查在下呼吸道感染的检查中占有重要的 地位，可以收集较大范围肺实质的肺泡表面衬液标本，可进行原虫、病毒及细菌学等检查。对于普通细菌感染者 其细菌培养≥105CFU/mL时为确定感染的阈值。但对于某些特殊感染，如在支气管肺泡灌洗液中分离出结核分枝 杆菌、军团菌即可做出诊断。支气管肺泡灌洗液微生物学检查对免疫功能低下合并肺感染的诊断也很有帮助，如 对巨细胞病毒感染的敏感性达96%。
支气管灌洗液的GM检测
［７］ 孙文逵，张峰，徐小勇，等．血清半乳甘露聚糖检测诊断侵袭性曲霉病价值的荟萃分析［J］ ，中华结核和呼 吸杂志，２０１０ ，３３（１０） ：７５８‐７６５ ．
［８］ Franquet T ，Müller NL ，Giménez A ，et al ．Spectrum ofpulmonary aspergillosis ：histologic ，clinical ，and radiologicfindings［J］ ．Radiographics ，２００１ ，２１（４） ：８２５‐８３７ ．
［９］ Greene RE ，Schlamm HT ，Oestmann JW ，et al ．Imagingfindings in acute invasive pulmonary aspergillosis ：
12
clinicalsignificance of the halo sign［J］ ．Clin Infect Dis ，２００７ ，４４ （３） ：
目前欧洲癌症研究和治疗组织／侵袭性真菌感染 协作组（EORTC／MSG）指南推荐同一标本连续２ 次GM 阳性为微生物诊断标准 ，阳性阈值０ ．５ 。 文献报道６５％ IA 宿主血清GM 阳性早于出现呼吸 道症状５ ～ ８ 天，１００％ 早于真菌培养阳性。
6
曲霉菌半乳甘露聚糖检测（GM试验）
血清GM 应用于IA 的诊断仍存在一些问题，首先，GM只 有在曲菌侵袭血管内皮细胞，生长时才释放入血液和局部病 灶 ，临床上并不是所有IA 伴血管侵犯：另外侵袭性肺曲霉 病（ invosive pulmonaryaspergillosis ，IPA ）患者影像学上 有halo 征仅见６１％ 患者，而影像学上无halo 征的IPA 患者，
［３］ De Pauw B ，Walsh TJ ，Donnelly JP ，et al ．Revised definitions
支气管肺泡灌洗液检查
支气管肺泡灌洗液检查痰液检查虽可对呼吸道疾病的诊断提供帮助，但不够灵敏与特异且对疾病定位帮助不大。
支气管肺泡灌洗术（bronchoalceolar lavage,BAL）中在纤维支气管镜基础上发展起来的一项新技术。
BAL是应用纤维支气管镜进行支气管肺泡灌洗，采取肺泡表面衬液进行炎症与免疫细胞及可溶性物质检查的方法。
与支气管冲洗少量液体注入支气管信灌注大量的液体进行支气管肺泡灌洗不同，利用支气管肺泡灌洗液进行细胞学、微生物学、寄生虫学和免疫学等方面的各项检验，对一些下呼吸道疾病和诊断、病情观察和预后判断开辟了一条新途径。
支气管肺泡灌洗术分全肺灌洗和肺段亚肺段灌洗。
前者多用于治疗，后者多用于采集检验标本。
一、标本采集和处理通常于局部麻醉后将纤维支气管镜插入右肺中叶或左肺舌段的支气管，将其项端契入支气管分支开口，经气管活检孔缓缓少入37摄氏度灭菌生理盐水，每次30-50毫升，总量100-250毫升，不应超过300毫升。
每次注液后以-13.3~-19.95kpa负压吸出，要防止负压过大，过猛。
分别收集于用硅油处理进的容器中，容器周围宜用冰块包围，并及时送检。
记录回收液量，至少应回收30-40%以上，BALF方能进行分析。
分别注入的液体每次回收后混合一起进行试验。
第一份回收的标本往往混支气管内成分，为防止其干扰，也可将第一份标本与其它标本分开检查。
首先用单层纱布过滤以除去粘液，将滤液离心后分离上清液供生化检查和免疫学测定，沉淀物供细胞检查。
微生物学检查的标本须严格遵守无菌操作；合适的BALF应要求：①达到规定的回收比例；②不混有血液，红细胞数小于10%；③不应混有多量的上皮细胞（一般小于3%）。
二、细胞学检查1．有核细胞计数和分类计数：计数除上皮细胞及红细胞以外的所有细胞，经每毫升回收液的细胞总数表示。
细胞分类可用沉淀物制定涂片或用细胞离心器进行，正常非吸烟者BALF细胞数见表13-1，正常人的BALF含有核细胞为（5-10）×106/L。
2021年ICU患者支气管肺泡灌洗液采集、送检、检测及结果解读规范(全文)
2021年ICU患者支气管肺泡灌洗液采集、送检、检测及结果解读规范（全文）支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid，BALF）的规范化采集和送检流程，是获得正确BALF微生物学和细胞学结果的前提，而通过不恰当的操作方式获得的结果易误导临床诊疗。
1999年欧洲呼吸学会颁布了"支气管肺泡灌洗技术规范化操作和非细胞成分检测指南"，2012年美国胸科医师协会颁布了"BALF的细胞学分析在肺间质性疾病中的临床应用"，2017年中华医学会呼吸病学分会颁布了"肺部感染性疾病支气管肺泡灌洗病原体检测中国专家共识"，均对支气管肺泡灌洗规范化操作流程提出具体指导意见，但上述指南或共识并不适用于重症监护病房（intensive care unit，ICU）这一特殊医疗单元，亟需制定针对ICU危重症患者的BALF标本留取、送检及临床应用的操作规范。
为此，中华医学会呼吸病学分会呼吸危重症医学学组及中国医师协会呼吸医师分会危重症医学工作委员会联合制定了本规范，以期为ICU患者的BALF采集、送检及临床应用提供标准化流程。
一、适应证与禁忌证（一）适应证1．危重症患者支气管-肺疾病的诊断及鉴别诊断。
2．明确重症肺炎的病原学。
3．明确支气管-肺部疾病的病因、发病机制等需要获取标本者。
4．下呼吸道疾病的内镜治疗（气道阻塞，黏痰或痰栓的清除等）。
（二）禁忌证危重患者接受支气管镜下肺泡灌洗无绝对禁忌证。
相对禁忌证如下，并建议有经验的医师进行操作。
1．严重的低氧血症：鼻导管吸氧、面罩吸氧、经鼻高流量氧疗及无创呼吸机的患者吸氧浓度（FiO2）为0.9~1.0不能维持脉搏氧饱和度>90%；经气管插管机械通气患者呼气末正压>15 cmH2O(1 cmH2O=0.098 kPa)；气道峰压>35 cmH2O或PaO2/ FiO2比值<80 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa)，气管插管内径过小（<7 mm）。
痰液与支气管肺泡灌洗液检查
鉴别病毒种类
通过对痰液或支气管肺泡灌洗液 中的病毒进行分离培养和基因检 测，可鉴别不同种类的病毒，为
临床治疗提供依据。
鉴别真菌种类
通过对痰液或支气管肺泡灌洗液 中的真菌进行分离培养和形态学 观察，可鉴别不同种类的真菌，
为临床治疗提供依据。
监测治疗效果
监测抗生素疗效
通过对痰液或支气管肺泡灌洗液中的病原菌进行药物敏感试 验，可监测抗生素的治疗效果，指导临床合理用药。
显微镜检查是通过对支气管肺泡 灌洗液进行涂片和染色，然后在 显微镜下观察细胞和微生物的一
种方法。
通过显微镜检查，医生可以了解 灌洗液中细胞成分的种类和数量， 以及是否存在异常细胞或微生物。
显微镜检查对于诊断肺部感染、 炎症、肿瘤等疾病具有重要意义，
可以为后续治疗提供依据。
支气管肺泡灌洗液的细菌学检查
对于异常结果，应进一步检查 或复查，以排除误差或假阳性 结果。
对于检查结果的解读，应由专 业医生进行，避免误判或漏诊。
THANKS FOR WATCHING
感谢灌 洗液中的微生物，以确定是否存在细 菌、真菌、结核分枝杆菌等病原体的 一种方法。
细菌学检查对于诊断肺部感染具有较 高的敏感性和特异性，尤其对于一些 难以确诊的感染病例具有重要意义。
细菌学检查通常采用定量培养法，即 对灌洗液中的微生物进行计数，并根 据计数结果判断是否存在感染。
监测病情变化
通过对痰液或支气管肺泡灌洗液中的病原菌数量和种类进行 动态监测，可了解病情的变化情况，为调整治疗方案提供依 据。
04 注意事项
适应症与禁忌症
适应症
痰液检查适用于肺部感染、肺癌等疾病的诊断；支气管肺泡灌洗液检查适用于肺 部炎症、肺泡蛋白沉积症等疾病的诊断。
支气管肺泡灌洗液检验
严格无菌操作获得的肺泡灌洗液中应无病原微生物检出。支气管肺泡灌洗液对卡氏肺孢子虫、卫氏并殖吸虫 的检出率高。
临床意义
临床意义
肺泡灌洗液检验可用于评价间质性肺疾病的炎症反应分期，诊断肺部疾病，鉴别病原菌，确定感染的复发或 持续病程，发现呼吸道原发性或继发性恶性肿瘤。肺部感染时，肺泡灌洗液细胞数可达800×106/L以上；化脓性 感染时，肺泡灌洗液中性粒细胞增多；外源性变态反应性肺泡炎时，淋巴细胞增多。结节病时，肺泡灌洗液有大 量CD4+细胞，CD4+/CD8+比值增大；外源性反应性肺泡炎时，肺泡灌洗液细胞总数增加，CD8+细胞大量聚集， CD4+/CD8+比值减小；特发性间质纤维化时肺泡灌洗液以中性粒细胞增多为主，并伴有嗜酸性粒细胞增多。严格 无菌操作获得的肺泡灌洗液中检出寄生虫及其他致病微生物即可明确诊断。
支气管肺泡灌洗液检验
介绍
目录
01 检查前准备
03 正常参考值
02 检查内容 04 临床意义
基本信息
肺泡灌洗液检验是指通过微生物学及化学方法对肺泡灌洗液进行分析并获得检验结果。应用纤维支气管镜对 支气管以下肺段和亚肺段进行灌洗后，采集肺泡表面衬液可获得肺泡灌洗液，对其进行实验室检查可为临床诊断、 鉴别诊断、治疗效果评价和判断预后提供参考。
正常参考值
正常参考值
1.细胞学检查
（1）有核细胞计数和分类：正常支气管肺泡灌洗液有核细胞为（5～10）×106 /L，肺泡吞噬细胞96%±3%， 淋巴细胞3%±2%，中性粒细胞1%±1%，嗜酸性粒细胞<1%。
（2）淋巴细胞亚群：T细胞约占2/3，T淋巴细胞亚群CD4+/CD8+<1.7，吸烟者此项比值显著降低。
支气管肺泡灌洗液检测腺苷脱氨酶诊断不典型肺结核临床分析
支气管肺泡灌洗液检测腺苷脱氨酶诊断不典型肺结核临床分析肺结核是呼吸系统常见疾病，目前肺结核的诊断金标准仍是痰菌阳性，而痰菌阴性的不典型肺结核的诊断常缺乏明确依据。
我们采用检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中的腺苷脱氨酶(ADA)含量，并与BALF结核菌涂片检查、实时荧光定量PCR（FQ-PCR）检测比较，以评价检测BALF中ADA在不典型肺结核诊断中的价值。
1 资料与方法1.1 资料选取我院已经临床确诊的住院肺结核患者38例，依据结核中毒症状，细菌学或病理学检查，结合胸部X线、CT表现及(或)抗结核治疗，随诊2～4个月病灶逐渐吸收而确诊。
另选35例本院住院的非结核肺部疾病患者作为对照，其中支气管炎6例，肺炎17例，支气管扩张症合并感染3例，肺部肿瘤9例，所有病例诊断均依据病史、痰细菌学检查、病理组织学检查、抗感染治疗2～3周后复查胸部X线检查示病灶完全或基本吸收确诊，肿瘤有病理诊断。
1.2 方法所有病例结合肺CT按病变部位选择灌洗肺段，应用电子支气管镜常规检查,并按照中华医学会呼吸病学分会制定的肺泡灌洗液常规检查方法行经支气管镜防污染支气管肺泡灌洗术（PBAL），经负压吸引收集支气管肺泡灌洗液,并对所取标本做ADA含量检测、结核菌FQ-PCR检测、涂片查结核分支杆菌。
1.3 检测方法支气管肺泡灌洗液分别做检测ADA含量、FQ-PCR检测、涂片抗酸染色镜检，ADA检测仪为日立7600，试剂由浙江东瓯生物技术有限公司生产，检测法为连续监测法；涂片抗酸染色镜检按照中国防痨协会结核病细菌学检测方法进行；FQ-PCR检测的结核分枝杆菌核酸扩增荧光检测试剂盒，由中山大学达安基因股份有限公司生产，FQ-PCR仪为美国MX3000P基因扩增仪，操作步骤严格按照说明进行；电子支气管镜采用OLYMPUS CV260型；消毒方法：全自动消毒清洗机清洗。
1.4 统计学方法采用X2检验。
P＜0.05具有统计学意义。
2 结果结核组与非结核组BALF三种方法检测结果：肺结核组患者ADA浓度增高例数58%（22例），BALF结核菌涂片、FQ-PCR的阳性率则分别为2.6%（1例）、50%（19例）。
肺泡灌洗活检报告
肺泡灌洗活检报告简介肺泡灌洗活检（Bronchoalveolar lavage，简称BAL）是一种用于诊断和评估肺部疾病的常见方法。
通过将生理盐水或其他溶液注入患者的气管和支气管，并将肺内液体吸出，以收集肺部细胞和分泌物，进而进行细胞学和生化学分析。
本报告将对BAL样本的分析结果进行详细解读。
患者信息•姓名：XXX•性别：女•年龄：XX岁样本处理收集到的肺泡灌洗液样本首先进行以下处理： 1. 保持样本的完整性和温度，避免细胞变形和降解。
2. 样本离心，以分离细胞和液体成分。
3. 收集上清液，进行生化学指标检测。
4. 细胞沉淀用来制备细胞涂片，进行细胞学分析。
生化学分析pH值样本的pH值用于评估肺泡灌洗液的酸碱平衡。
正常肺泡灌洗液的pH值一般在7.35-7.45之间，反映了肺泡内胶体渗透压、电解质浓度和气体交换等因素的平衡状态。
蛋白质检测肺泡灌洗液中的蛋白质含量，有助于评估肺内炎症和病变程度。
异常增加的蛋白质含量可能与感染、炎症和肿瘤等相关。
炎症细胞分析通过细胞学分析，统计和鉴定肺泡灌洗液中不同类型的炎症细胞，如中性粒细胞、淋巴细胞和嗜酸性粒细胞等。
炎症细胞的数量和比例可以提示肺部炎症的性质和严重程度。
细胞分类将细胞涂片进行染色，通过显微镜观察和计数，将细胞分为上皮细胞、淋巴细胞、中性粒细胞、嗜酸性粒细胞和巨噬细胞等，以检测细胞的比例和细胞类型的异常。
结果解读根据上述分析，以下是对肺泡灌洗活检样本的结果解读：1.pH值：患者的肺泡灌洗液pH值为7.42，处于正常范围内，未观察到酸碱平衡紊乱的现象。
2.蛋白质：肺泡灌洗液中的蛋白质含量增加，提示可能存在肺部炎症或其他病理情况。
3.炎症细胞分析：炎症细胞以中性粒细胞为主，其中淋巴细胞和嗜酸性粒细胞数量正常。
中性粒细胞占总细胞数的比例较高，可能与感染或炎症反应相关。
4.细胞分类：细胞分类结果显示，上皮细胞、淋巴细胞和巨噬细胞比例正常；中性粒细胞和嗜酸性粒细胞较多，支持炎症反应的存在。
痰及支气管肺泡灌洗液检查
痰及支气管肺泡灌洗液检查概述
要点1：痰液常见颜色改变原因及临床意义
痰液性状改变及临床意义
要点2：显微镜检查
痰液中常见有形成分及临床意义
要点3：支气管肺泡灌洗液检查
一般需要行纤维支气管镜检查时采集。
经过单层纱布过滤，再经过800r/min离心10min后，上清液用于化学和免疫学检查。
沉淀物用于显微镜检查。
1.细胞学检查
有核细胞计数和分类计数
正常支气管肺泡灌洗液有核细胞为（5～10）×106/L，肺泡吞噬细胞96%±3%，淋巴细胞3%±2%，中性粒细胞1%±1%，嗜酸性粒细胞＜1%。
中性粒细胞增多见于细菌感染；淋巴细胞增多见于病毒性感染等；嗜酸性粒细胞增多见于支气管哮喘、嗜酸性粒细胞增高性肺炎等。
2.微生物学检查
（1）涂片
支气管肺泡灌洗液的非病原性杂菌很少。
因此，涂片检查病原菌的意义较大。
（2）培养
适应细菌、真菌、支原体和病毒的培养。
3.寄生虫检查
支气管肺泡灌洗液对卡氏肺孢子虫、卫氏并殖吸虫的检出率高。
肺泡灌洗液标准
肺泡灌洗液（Bronchoalveolar Lavage Fluid, BALF）的检查标准可以从几个方面来描述：
1.样本采集和处理标准：
o支气管肺泡灌洗术（Bronchoalveolar lavage, BAL）应当按照临床实践指南进行，确保样本获取的正确性。
o标准化的采集流程包括达到规定的灌洗液回收量，通常期望的回收率在50%以上，总量取决于灌洗液注入和回收的体积。
o灌洗液应当尽可能纯净，不混有血液（红细胞比例不超过一定限度，如10%以内），避免过多的上皮细胞（通常<3%）和其他非肺实质
细胞成分。
2.细胞学分类标准：
o正常肺泡灌洗液的细胞分类百分比通常为：
▪巨噬细胞 >85%
▪淋巴细胞≤15%
▪中性粒细胞≤3%
▪嗜酸性粒细胞≤1%
3.细胞总数标准：
o正常肺泡灌洗液中的细胞总数正常范围一般为7000-20000个细胞/微升（cells/μL）。
4.微生物学检查标准：
o微生物检测结果应结合临床表现和影像学证据，没有明显微生物感染的肺泡灌洗液不应检出病原微生物。
5.生化及其他实验室指标：
o可通过肺泡灌洗液检测蛋白含量、乳酸脱氢酶、溶菌酶、免疫球蛋白等生化指标，这些指标异常可能提示肺部疾病的存在。
请注意，不同文献和实验室可能对正常范围的具体数值略有差异，而且随着医疗技术和研究进展，这些正常范围可能会有所更新。
在进行肺泡灌洗液的采集、送检和结果解读时，应参照最新的临床指南和实验室手册。
在实际临床工作中，医师会结合患者的实际情况和检测结果，对可能存在的肺部疾病做出诊断和治疗决策。
支气管肺泡灌洗液细胞学检测技术规范（草案）
支气管肺泡灌洗液细胞学检测技术规范（草案）诊治方案?支气管肺泡灌洗液细胞学检测技术规范（草案）中华医学会呼吸病学分会支气管肺泡灌洗（BAL）能直接获取肺内炎症免疫效应细胞，是探讨肺局部免疫病理过程的一种比较安全和有用的检查方法。
对某些肺疾病，特别是弥漫性间质性肺疾病（如特发性肺纤维化、结节病、外源性过敏性肺泡炎、肺泡蛋白沉积症、风湿性疾病伴肺纤维化和Langerhans组织细胞增生症等）、肺部肿瘤以及免疫受损患者的肺部感染等，BAL已成为辅助临床诊断和预后判断的重要检测手段。
近20年间支气管肺泡灌洗液（BALF）检测无论从检测范围和检测项目上都有了长足的进展。
由于BALF检测受诸多因素的影响，如BAL操作时混血，大气道分泌物混入，吸引负压大小，灌洗量，回收量，灌洗液在肺内停留时间的长短以及肺泡上皮通透性的改变等不同，所得结果亦有一定差异。
因此，建立标准化和规范化的BAL操作和BALF实验室检测程序是获得准确结果的关键和前提。
现将BAL操作及BALF实验室检查技术做一原则规范。
支气管肺泡灌洗操作方法一、术前准备同纤维支气管镜（纤支镜）术前准备，常规在纤支镜气道检查后于活检刷检前做BAL。
局部麻醉剂为2%利多卡因。
二、BAL操作技术1.灌洗部位选择：对弥漫性间质性肺疾病选择右肺中叶（B4或B5）或左肺舌段，局限性肺病变则在相应支气管肺段进行BAL。
2.BAL操作步骤：（1）首先在要灌洗的肺段经活检孔通过一细硅胶管注入2%利多卡因1～2ml，做灌洗肺段局部麻醉；（2）然后将纤支镜顶端紧密楔入段或亚段支气管开口处，再经活检孔通过硅胶管快速注入37℃灭菌生理盐水。
每次25～50ml，总量100～250ml，一般不超过300ml；（3）立即用50～100mm Hg（1mm Hg=0.133kPa）负压吸引回收灌洗液，通常回收率为40%～60%；（4）将回收液体立即用双层无菌纱布过滤除去粘液，并记录总量；（5）装入硅塑瓶或涂硅灭菌玻璃容器中（减少细胞粘附），置于含有冰块的保温瓶中，立即送往实验室检查。
《支气管肺泡灌洗液细胞形态学检验中国专家共识(2020)》要点
《支气管肺泡灌洗液细胞形态学检验中国专家共识（2020）》要点支气管肺泡灌洗液（BALF）是通过纤维支气管镜对支气管以下肺段、亚肺段水平用无菌生理盐水反复灌洗，回收获取的肺泡表面衬液样本。
BALF 的细胞形态学、病原学、免疫学及分子生物学等一系列检查，在呼吸系统疾病，尤其是下呼吸道疾病的诊断、疗效观察、预后判断及发病机制研究等方面有着重要的意义。
1 检验目的计数BALF中细胞数量（红细胞、有核细胞）及各类有核细胞所占百分比，准确识别BALF中各类细胞、寄生虫、结晶，发现细菌或真菌及其它有形成分，为临床对疾病的诊断、鉴别诊断、治疗效果和预后评估提供检验诊断依据。
2 标本采集BALF由临床医生采集，在常规纤维支气管镜检查气道后，在活检和刷检前获得。
标本采集结束后，贴好标本信息标签，室温2h内送检。
3 标本接收与处理3.1 标本接收3.2 标本处理4 检验程序4.1 标本预处理4.2 理学检查及细胞计数4.3 标本离心4.4 制片4.5 染色4.6 阅片及细胞分类5 报告5.1 报告名称及模式5.2 报告内容5.3 BALF常规报告5.4 BALF细胞学报告5.5 有条件的单位推荐出具BALF常规细胞学检查图文报告5.6 让步检验报告5.7 主动及时报告6 涂片保存7 生物参考区间有核细胞数（90～260）×106/L，肺泡巨噬细胞85%～96%，淋巴细胞6%～15%，中性粒细胞≤3%，嗜酸粒细胞<1%，鳞状上皮细胞/纤毛柱状上皮细胞≤5%。
8 生物安全防护8.1 BALF标本的采集、运送必须符合生物安全要求，防止溢出。
8.2 检验人员在处理BALF标本时，需做好个人防护，严格执行生物安全管理程序，对表明有传染性疾病的BALF 标本按级别进行防护。
9 临床意义9.1 淋巴细胞计数>15%，中性粒细胞>3%，嗜酸性粒细胞>1%，或肥大细胞>0.5%，则分别称为BALF淋巴细胞增多型（即淋巴细胞为主型）、中性粒细胞增多型（即中性粒细胞为主型）、嗜酸性粒细胞增多型（即嗜酸性粒细胞为主型）和肥大细胞增多型（即肥大细胞为主型）。
支气管肺泡灌洗液相关实验室操作
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BALF标本病原体实验室检测
真菌培养： BALF标本1500～1800×g，离心15～20min，沉淀 物混匀后接种于沙保平板上，30℃和35℃孵育7d，怀 疑双相真菌时应使用带螺帽的培养基，孵育6周。 特殊病原菌培养： BALF离心后的沉淀物还可用于分枝杆菌、军团菌 及病毒等的培养。
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BALF标本病原体实验室检测
核酸检测： 用于病毒、军团菌、肺孢子菌或分枝杆菌等的检 测。 真菌抗原： 半乳甘露聚糖试验（GM试验）主要用于曲霉的检 测；目前有关BALF检测隐球菌荚膜抗原的研究证据较 少，可考虑作为诊断的补充手段。
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BALF标本病原体实验室检测
BALF
涡旋震荡30～60 s
接种10μl BALF
适量BALF标本600~1 000r/min离 心10~20 min
一般细菌培养（定量培养）： （1）涡旋震荡BALF标本30～60s。 （2）定量接种：用经校准的加样器（或定量接种环） 取10μl 的BALF标本，分别点种于血平板和巧克力平 板上且密集划线，有条件时最好采用灭菌L型玻棒涂布 平板。还可取100μlBALF接种于麦康凯或中国蓝培养 基。 （3）孵育：将接种的平板放在二氧化碳培养箱（5%～ 10%CO2）中，35℃培养48 h。
军团菌
真菌
曲霉
无菌容器，室温，≤2 h 肺孢子菌 4℃，≤24 h
隐球菌
分枝杆菌
无菌容器，室温，≤2 h
4℃，≤24 h
涂片抗酸染色(萋-尼染色、荧光染色) 分枝杆菌培养 核酸检测（Xpert MTB/RIF） 核酸检测 病毒抗原检测（DFA、胶体金法） 分离培养 直接镜检 核酸检测 抗原检测（ELISA、ICT）
标本包括：BALF和保护性毛刷（PSB）
支气管肺泡灌洗(BAL)的临床应用与实验室检查
支气管肺泡灌洗(BAL)的临床应用与实验室检查一．定义：支气管肺泡灌洗（bronchoalveolar lavage,BAL）是一种经纤维支气管镜获取肺泡的细胞与生化成份的广为实用而安全的方法。
注意: BAL的操作规范BAL灌洗液的处理规范BAL的非细胞成份指标尚不能作为有用的临床参考二．用途：●疾病诊断：特异性诊断；重要诊断工具。
●疗效与预后评价●治疗●研究➢对于某些特殊疾病，BAL可以做出特异性的诊断●机会性肺部感染：卡氏肺囊虫性肺炎，巨细胞病毒性肺炎，肺结核，肺真菌感染●尘肺，石棉肺，肺出血●铍肺（阳性淋巴细胞转换试验）●支气管肺泡细胞癌，恶性淋巴瘤等（肿瘤细胞）●肺泡蛋白沉着症（对氨基水扬酸－阳性小体）●组织细胞增多症 X (Histiocytosis X)➢对于一些间质性肺病，BAL是重要诊断手段结节病，外源性过敏性肺泡炎，闭塞性细支气管炎伴机化性肺炎（BOOP），特发性肺纤维化(IPF)，慢性嗜酸细胞肺炎等。
三．应用指征1.间质性渗出改变：结节病，外源性过敏性肺泡炎，药物性肺泡炎，特发性肺纤维化，胶原血管疾病，组织细胞增多症 X，尘肺，癌性淋巴管炎等。
2.肺泡渗出改变：肺炎，肺泡出血，肺泡蛋白沉着症，BOOP，嗜酸细胞肺炎等3.免疫缺陷病人并肺渗出病变：HIV感染，化疗或放疗，免疫抑制剂治疗，器官移植四．BAL副反应：发生率为0-2.3%，当同时进行经支气管镜肺活检(TBLB)，副反应为7%，尚无因 BAL死亡报道，因TBLB死亡0.2%，因开肺活检(OLB)死亡1.8%。
1.副反应发生形式与时间2.副反应的预防：副反应随着灌注量及灌注肺段的增加而增加，仔细操作，特别注意能使并发症减少到最小程度。
●全面了解病史，进行肺功能试验，血气分析，血小板计数，出凝血时间，心电图，胸部放射片●ECG，氧饱和度监测并予吸氧●BAL后24小时观察●限制灌洗量到最小需要量●适当的操作前用药，必要时使用ß-受体激动剂等●特殊病人严格掌握适应征3.BAL时副反应发生的危险因素●>50%的肺野渗出实变PaO2<60mmHg●SaO2<90%，支气管反应性PC20<2ug/ml乙酰甲胆碱●FEV1<60%预计值，或FEV1<1L Prothrombin time<50%●血小板计数低于20,000/ml 明显异常的ECG●对镇静剂敏感或不能耐受严重的伴发症PC20：FEV1降低20%所需的最低乙酰甲胆碱浓度五．ＢＡＬ操作绝大多数在局麻下使用纤维支气管镜进行。
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支气管肺泡灌洗液检查
痰液检查虽可对呼吸道疾病的诊断提供帮助，但不够灵敏与特异且对疾病定位帮助不大。
支气管肺泡灌洗术（bronchoalceolar lavage,BAL ）中在纤维支气管镜基础上发展起来的一项新技术。
BAL 是应用纤维支气管镜进行支气管肺泡灌洗，采取肺泡表面衬液进行炎症与免疫细胞 及可溶性物质检查的方法。
与支气管冲洗少量液体注入支气管信灌注大量的液体进行支气管肺泡灌洗不同，利用支气管肺泡灌洗液进行细胞学、微生物学、寄生虫学和免疫学等方面的各项检验，对一些下呼吸道疾病和诊断、病情观察和预后判断开辟了一条新途径。
支气管肺泡灌洗术分全肺灌洗和肺段亚肺段灌洗。
前者多用于治疗，后者多用于采集检验标本。
一、标本采集和处理
通常于局部麻醉后将纤维支气管镜插入右 肺中叶或左肺舌段的支气管，将其项端契入支气管分支开口，经气管活检孔缓缓少入37摄氏度灭菌生理盐水，每次30-50毫升，总量100-250毫升，不 应超过300毫升。
每次注液后以-13.3~-19.95kpa 负压吸出，要防止负压过大，过猛。
分别收集于用硅油处理进的容器中，容器周围宜用冰块包 围，并及时送检。
记录回收液量，至少应回收30-40%以上，BALF 方能进行分析。
分别注入的液体每次回收后混合一起进行试验。
第一份回收的标本往往混 支气管内成分，为防止其干扰，也可将第一份标本与其它标本分开检查。
首先用单层纱布过滤以除去粘液，将滤液离心后分离上清液供生化检查和免疫学测定，沉淀 物供细胞检查。
微生物学检查的标本须严格遵守无菌操作；合适的BALF 应要求：①达到规定的回收比例；②不混有血液，红细胞数小于10%；③不应混有多量 的上皮细胞（一般小于3%）。
二、细胞学检查
1．有核细胞计数和分类计数：计数除上皮细胞及红细胞以外的所有细胞，经每毫升回收液的细胞总数表示。
细胞分类可用沉淀物制定涂片或用细胞离心器进行，正常非吸烟者BALF 细胞数见表13-1，正常人的BALF 含有核细胞为（5-10）×106/L 。
2．淋巴细胞亚群分析：BALF 中淋巴细胞增多，可用单克隆抗体进行淋巴细胞亚群分析。
例如CD 3、CD 4、CD 8、HLA-DR 等以有助于发病机制的研究。
正常人非吸烟者BALF 中淋巴细胞表面抗原表型见表13-2。
3．癌细胞：支气管肺癌患者的BALF 沉淀物检出癌细胞，有助于肺癌诊断。
表13-1 正常非吸烟者BALF 细胞 作者
年
例数
注入量 回收量（%） 总细胞数（× 106） 细胞
（×106/ml ）
Mac
Lym
Neut
Eos
Hunninghske 1983 8 100 52 14．0 26．9 93 7 0 0 北医大三院 1987 10 150 62 13．4 14．7 86 13 0．9 0．05 Ettensohn 1988
78
120
63
7．3
9．4
95
4
1
注：Mac 巨噬细胞；Lym 淋巴细胞；Nuet 中性粒细胞；Eos 噬酸性细胞
表13-2 正常非吸烟者BALF 中淋巴细胞表面抗原表型
Yamada 1986 25 13．8 63．0 45．4 25．3 1．90 5．3 Wallaert 1987 12 7．7 66．4 48．4 27．5 1．8 ?/FONT>
三、可溶性物质检查
BALF离心液的上清液中含有复杂的可溶性成份，例如各种蛋质、酶类、脂类等（表13-3）。
这些成分的来源有：①被动漏出者（如白蛋白、血清类粘蛋白）；②主动转运者；③局部产生分泌成分。
这些物质反映肺泡表面衬液成份，其测定对了解某些肺部疾病的病变特征，研究发病机制提供重要手段。
表13-3 BALF检测的可溶性物质
溶质浓度近似值溶质浓度近似值
总蛋白70μg/ml 纤维连接蛋白30-150ng/ml
白蛋白70μg/ml白细胞弹性蛋白酶+
免疫球蛋白胶原酶+
IGG 2.5-10μg/ml血管紧张素转换酶+
IGA 2.5-6μg/ml极性脂质78μg/ml
IGM 100ng/ml 非极性脂质45μg/ml
IGE 0.06-0.3μg/ml前列腺素E 200-2000pg/ml -抗胰α蛋白酶1-2μg/ml血栓素B 25-85pg/ml
α
1
-巨球蛋白0.04μg/ml
α
2
癌胚抗原0.8ng/ml
转铁蛋白4μg/ml
四、微生物学检查
1．涂片BALF不像痰液那样易受上呼吸道杂菌的污染，也不含气管和左右大支气利害的分泌物，含非病原性阿菌很少，故其涂片检菌的意义较大。
取BALF沉淀物进行本兰氏染色与抗酸染色检查，对结核分支杆菌的检查有较大意义。
2．培养：严格无菌操作采BALF进行增菌培养或取其沉淀物直接分离培养，是检查支气管和肺部感染的重要方法，不仅适用于对细菌和真菌等检查，也适用于对支原体的培养和病毒分离，当培养的细菌为105CGU/ml时被认为有诊断意义。
但标本采集方法复杂。
五、寄生虫学检查
1．卡氏肺孢子虫：人类一般受感染后多无明显症状。
但若患者的免疫功能低下，特别是AIDS患者和大量使用免疫抑制剂的患者易受感染，并可引起严重的间质性肺炎。
于患者痰中不易查到寄生虫，而BALF沉淀物检出的阳性率较高。
2．卫氏并殖吸虫卵：轻型肺吸虫病患者痰中可能查不到虫卵，而可从BALF沉淀物中查到。
除以上各项检查外，还可检查BALf 中有无其它异特。
若在BALf 沉淀物中查到石棉小体，有助石棉肺的诊断。
六、临床应用
由于BAl 能获取肺泡表面衬液，因此对其内容物的检查有助于肺部疾病的诊断、治疗、预后判断及发病机制研究。
其应用范围越来越广，此处钗做重点介绍：
1．肺部感染的病原学诊断：BAL检查在下呼吸道感染的检查中占有重要的地位。
BAL可以收集较大范围肺实质的肺泡表面衬液标本，可进行原虫、病毒及细菌学等检查。
对于普通
细菌感染者其细菌培养大于等于105cfu/ml时为确定感染的阈值。
但对于某些特殊感染，如在BALF中分离出结核分支杆菌、军团菌即可做出诊断。
BALF对免疫功能低下合并肺感染的诊断也很有帮助，如对巨细胞病毒感染的敏感性达96%，对肺孢子虫的感染敏感性为85-90%。
2．BALf 检查：诊断呼吸道原发性或继发性恶性肿瘤有较好效果，也包括周围性肺癌、弥漫性肺恶性肿瘤（如支气管肺泡癌）、小细胞肺癌等。
但BALF检查结果受癌类型和肿瘤大小的影响，以腺癌和肺泡癌阳性率最高。
3．对间质肺疾病的诊断、治疗评价及预后提供帮助
（1）外源性变应性肺泡炎：急性期BALF细胞总数明显增加，达对照组4倍。
急性期早期肥大细胞增多，恢复后降至正常。
淋巴细胞亦明显增多，其亚群以CD8+增多为主，CD4/CD8比值降低，CD57+和CD16+也增加。
临床上认为BAl 是外源性变应性肺泡炎最敏感的检测手段。
优于X线胸片及肺功能检查。
（2）结节病：BALF细胞总数增高，主要为T细胞增多，以CD4+为主。
CD4/CD8比值明显增高，这些变化有重要的诊断意义。
中性粒细胞和肥大细胞的增多预示病人闰变的有可能发展为纤维化。
（3）特发性肺间质纤维化：BALF中主要为中性粒细胞增多，嗜酸性粒细胞也可能增加，据此与以淋巴细胞增多为主的其它崩牙肿肺疾病鉴别。
BAL做为一种特殊的检查方法对某些其它肺疾患如支气管哮喘，成人呼吸窘迫综合征、弥漫性肺出血、肺泡蛋白沉着症（BALF外观呈乳状）等的临床意义也处于研究和观察之中。
BALF检查中细胞计数和分类包括T淋巴细胞亚群分类，经过多年的研究已基本标准化了，但对可溶性物质检查还存在某些问题，主要是灌洗液量与方法不同，对肺衬液稀释程度影响测定结果，尚须进一步的研究。
BAL应用越来越广泛，虽然其操作复杂，有上些生理性改变及轻度并发症，但只要选好适应的证，操作正确，还是一种安全有效的检查方法。
进行BAL检查的禁忌证有：①严重的肺功能损害者；②新近发生急性心肌梗死患者；③新近发生大咳血者；④活动性肺结核未经治疗者等。
本文来自检验在线。