肺泡灌洗液细胞计数

肺结核患者支气管肺泡灌洗液中细胞因子的检测及意义

肺结核患者支气管肺泡灌洗液中细胞因子的检测及意义目的：通过检测肺结核患者支气管肺泡灌洗液中细胞因子水平，探讨支气管肺泡灌洗液中细胞因子对肺结核的诊断意义。

方法：应用ELISA方法检测肺结核患者抗结核治疗前后及健康对照组支气管肺泡灌洗液中TNF-α、IL-6、IL-10三项指标的含量，进行对比分析。

结果：对照组TNF-α（pg/ml）为11.9±2.55，IL-6（pg/ml）为8.42±3.15，IL-10（pg/ml）为10.52±2.42；肺结核患者治疗前TNF-α为31.6±4.08，IL-6为42.5±10.26，IL-10为20.4±5.22；肺结核患者治疗后TNF-α为14.3±3.52，IL-6为11.4±2.34，IL-10为19.5±4.58。

肺结核患者治疗前与对照组比较、与治疗后比较差异均有统计学意义，P＜0.05；肺结核患者治疗后与对照组比较差异无统计学意义，P>0.05。

结论：肺结核患者支气管肺泡灌洗液中细胞因子TNF-α、IL-6、IL-10的水平可以作为肺结核臨床诊断及疗效评价的参考指标。

标签：肺结核；支气管肺泡灌洗液；细胞因子；TNF-α；IL-6；IL-10【文献标识码】B【文章编号】1004-4949（2014）12-0265-01肺结核是由结核分枝杆菌引起的慢性传染病，可入侵患者的许多脏器。

排菌者是其重要的传染源。

人体感染结核病菌后，不一定会立刻发病，当患者的抵抗力下降或者是细胞介导的变态反应过强时，才可能发病。

结核分枝感染人体后引起T细胞免疫应答，并诱发许多细胞因子如TNF-α、IL-6、IL-10水平等明显升高。

本研究通过检测肺结核患者支气管肺泡灌洗液中细胞因子水平，并探讨其临床意义，期望能够为肺结核的临床诊断及疗效评估等提供参考依据。

1 资料与方法1.1 一般资料选择2011年3月--2013年2月我科收治的继发型肺结核患者28例，均未经抗结核治疗，定义为治疗前组；予异烟肼、利福平、吡嗪酰胺、乙胺丁醇抗结核治疗两周后定义为治疗后组；选择同期前来我院检查无病的健康人员29例为对照组。

支气管肺泡灌洗(BAL)的临床应用与实验室检查

支气管肺泡灌洗(BAL)的临床应用与实验室检查一．定义：支气管肺泡灌洗（bronchoalveolar lavage,BAL）是一种经纤维支气管镜获取肺泡的细胞与生化成份的广为实用而安全的方法。

注意: BAL的操作规范BAL灌洗液的处理规范BAL的非细胞成份指标尚不能作为有用的临床参考二．用途：●疾病诊断：特异性诊断；重要诊断工具。

●疗效与预后评价●治疗●研究➢对于某些特殊疾病，BAL可以做出特异性的诊断●机会性肺部感染：卡氏肺囊虫性肺炎，巨细胞病毒性肺炎，肺结核，肺真菌感染●尘肺，石棉肺，肺出血●铍肺（阳性淋巴细胞转换试验）●支气管肺泡细胞癌，恶性淋巴瘤等（肿瘤细胞）●肺泡蛋白沉着症（对氨基水扬酸－阳性小体）●组织细胞增多症 X (Histiocytosis X)➢对于一些间质性肺病，BAL是重要诊断手段结节病，外源性过敏性肺泡炎，闭塞性细支气管炎伴机化性肺炎（BOOP），特发性肺纤维化(IPF)，慢性嗜酸细胞肺炎等。

三．应用指征1.间质性渗出改变：结节病，外源性过敏性肺泡炎，药物性肺泡炎，特发性肺纤维化，胶原血管疾病，组织细胞增多症 X，尘肺，癌性淋巴管炎等。

2.肺泡渗出改变：肺炎，肺泡出血，肺泡蛋白沉着症，BOOP，嗜酸细胞肺炎等3.免疫缺陷病人并肺渗出病变：HIV感染，化疗或放疗，免疫抑制剂治疗，器官移植四．BAL副反应：发生率为0-2.3%，当同时进行经支气管镜肺活检(TBLB)，副反应为7%，尚无因 BAL死亡报道，因TBLB死亡0.2%，因开肺活检(OLB)死亡1.8%。

1.副反应发生形式与时间2.副反应的预防：副反应随着灌注量及灌注肺段的增加而增加，仔细操作，特别注意能使并发症减少到最小程度。

●全面了解病史，进行肺功能试验，血气分析，血小板计数，出凝血时间，心电图，胸部放射片●ECG，氧饱和度监测并予吸氧●BAL后24小时观察●限制灌洗量到最小需要量●适当的操作前用药，必要时使用ß-受体激动剂等●特殊病人严格掌握适应征3.BAL时副反应发生的危险因素●>50%的肺野渗出实变PaO2<60mmHg●SaO2<90%，支气管反应性PC20<2ug/ml乙酰甲胆碱●FEV1<60%预计值，或FEV1<1L Prothrombin time<50%●血小板计数低于20,000/ml 明显异常的ECG●对镇静剂敏感或不能耐受严重的伴发症PC20：FEV1降低20%所需的最低乙酰甲胆碱浓度五．ＢＡＬ操作绝大多数在局麻下使用纤维支气管镜进行。

支气管肺泡灌洗液细胞形态学检验

二、标本采集与接收
（二）标本接收
标本送达检验科后,由工作人员在Iis系统扫码登记接收,对标识不明、采集量不足等不合格的标本,执行标本拒收程序。接收标本后应及时检验,室温可保存4h,分析后的标本保存24h,不建议将标本保存24h后再应用于检测分析。
对于部分不合格标本,可执行让步接收与让步检验,与临床进行沟通,并在报告单中备注,说明标本状况对检验结果的影响。
制作涂片4~6张。
三、检验程序
（六）仪器法制片
采用细胞离心机( Cytospin)甩片,按仪器操作说明书规范操作。应用此方法制片,细胞分布均匀,结构清晰,利于形态辨识,可提高病变成分检出率。若标本有核细胞数显著增高时,使用生理盐水适当稀释标本,将悬液有核细胞数稀释至(100~200)× 106/L为宜,有的标本稀释可达10~200倍。
四、报告
（五）涂片保存
发出报告后,对涂片进行分类归档,妥善保管,保存时限按各实验室标准操作规程进行处置,一般保存3~5年。
四、报告
（六）生物参考区间
有核细胞数(90~260)× 106/L,肺泡巨噬细胞85%~96%,淋巴细胞6%~15%,中性粒细胞≤3%,嗜酸粒细胞<1%,鳞状上皮细胞/ 纤毛柱状上皮细胞≤5%。
要>30%。 ➢ ②不可混入血液,红细胞应<10%,上皮细胞应<5%。 ➢ ③多部位灌洗时,注明灌洗部位;注明灌洗液或冲洗液;较多时
弃去第1管。 ➢ ④儿童BALF标本采集应严格按相应标准要求施行。
二、标本采集与接收
（一）标本采集
根据检测目的分装于不同的无菌试管或洁净试管中。用于病原学分析的标本需用无菌容器收集。常规细胞学分析需选择硅化的塑料容器或玻璃容器以减少细胞的黏附,采集标本量成人应不少于l0ml,儿童应不少于3ml。如考虑为大气道疾病时, 建议第1管吸回收液单独处理;非大气道疾病时,可将所有标本混合后送检。标本采集结束后,贴好标本信息标签,室温2h内送检。

改良支气管肺泡灌洗液细胞分类计数制片及染色法

改良支气管肺泡灌洗液细胞分类计数制片及染色法徐佳;黄媛;吴卫;董玉香;崔京涛;崔巍【摘要】目的改良支气管肺泡灌洗液细胞分类制片及染色方法,并对其临床实用性进行验证.方法随机抽取50例门诊及住院患者肺泡灌洗液标本,分别用改良的自动化瑞氏吉姆萨染色法及传统手工HE染色法染色,由两名具有专业技术能力的检验人员分别进行显微镜下细胞分类计数,评估两种制片方法检测结果的可比性.结果两种方法对肺泡灌洗液中吞噬细胞、中性粒细胞、淋巴细胞和嗜酸性粒细胞计数一致性较好,相关系数(r)均＞0.95.改良法染色的细胞形态完整,细胞核和细胞浆分辨清楚,可见颗粒、空泡等细微结构;而传统法染色后的细胞固缩明显,细胞体积变小,细胞核和细胞浆分辨清晰度下降,颗粒和空泡等细胞结构辨认不清.改良法比传统法省去了滤液离心富集细胞的过程(6 min),并且使用自动化瑞氏吉姆萨染色法(20 min)代替了手工HE染色法(30 min),每份标本至少节省了15～20 min的制片和染色时间.结论改良的自动化瑞氏吉姆萨染色法优于手工HE染色法,更适用于支气管肺泡灌洗液细胞分类计数,尤其是批量检测.【期刊名称】《临床检验杂志》【年(卷),期】2014(032)002【总页数】4页(P98-101)【关键词】支气管肺泡灌洗液;细胞分类计数;瑞氏吉姆萨染色;HE染色【作者】徐佳;黄媛;吴卫;董玉香;崔京涛;崔巍【作者单位】北京协和医院检验科,北京100730;北京协和医院检验科,北京100730;北京协和医院检验科,北京100730;北京协和医院检验科,北京100730;北京协和医院检验科,北京100730;北京协和医院检验科,北京100730【正文语种】中文【中图分类】R446支气管肺泡灌洗(bronchoalveolar lavage，BAL)技术是一种通过纤维支气管镜对支气管以下肺段或亚肺段以无菌生理盐水反复灌洗、回收、获取样本，并进行检查与分析的技术[1]。

支气管肺胞灌洗液细胞学检测方法的改良

支气管肺胞灌洗液细胞学检测方法的改良马兴生;贺晓英;张晓琦;刘光福;杨国儒【摘要】目的针对支气管肺胞灌洗液(BALF)下标本处理过程中细胞退化变形问题进行改良.方法分别用常规方法与改良方法(BALF标本离心后的沉渣按2:1比例加入血清或血浆)对标本涂片染色,在相同显微镜下观察细胞形态,计算正常形态中性粒细胞的百分率.结果两种涂片方法检出的正常形态中性粒细胞百分率差异有统计学意义(P＜0.01).结论改良方法可较好地在室温下保持BALF标本中的细胞形态,避免细胞退化.【期刊名称】《临床检验杂志》【年(卷),期】2017(035)002【总页数】2页(P105-106)【关键词】肺泡灌洗液;细胞退化;血清;血浆【作者】马兴生;贺晓英;张晓琦;刘光福;杨国儒【作者单位】潍坊呼吸病医院检验科,山东潍坊261041;潍坊呼吸病医院检验科,山东潍坊261041;潍坊呼吸病医院检验科,山东潍坊261041;潍坊呼吸病医院检验科,山东潍坊261041;潍坊呼吸病医院检验科,山东潍坊261041【正文语种】中文【中图分类】R446按照目前的支气管肺胞灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid，BALF)操作规范[1-3]对标本涂片处理，在实际临床操作过程中常遇到细胞严重退化变形的问题。

通过在临床工作中不断实践与摸索，找到一种在室温条件下能较好解决细胞退化变形问题的新方法，现介绍如下以供同行交流。

1.1 仪器与试剂 DM2500型光学显微镜(德国LEICA公司)，SC-3610型低速离心机(安徽中科中佳科学仪器公司)，HYC-310型医用冷藏箱(青岛海尔特种电器公司)，MS3BS25型漩涡振荡器(德国IKA公司)，病理级高级载玻片(南通海伦生物医学器材制造公司)，12×100塑料试管(淄博来绪医用器材公司)，300目尼龙滤网(昆山鑫泰筛网滤网公司)，瑞氏-姬姆萨染色液(珠海贝索生物技术公司)，AB型血清或血浆。

支气管镜肺泡灌洗在重症肺部感染应用及灌洗液培养结果分析

支气管镜肺泡灌洗在重症肺部感染应用及灌洗液培养结果分析【摘要】目的：观察重症肺部感染患者临床治疗过程中支气管镜肺泡灌洗疗效，分析灌洗液培养结果，探讨致病菌与耐药性。

方法：于2021年08月--2022年08月就诊于本院46例重症肺部感染患者作为临床治疗对象，按照患者采取的治疗措施而设为实验组（支气管镜肺泡灌洗）、参照组（常规对症治疗），各23例。

结果：实验组退热时间、止咳时间、气喘缓解时间、白细胞计数、PaCO2、PaO2较参照组更优（P<0.05）。

经过灌洗液培养，从实验组重症肺部感染患者23例中分离出41株致病菌，其中78.05%（32/41）为革兰阴性杆菌，对氨苄西林、左氧沙星、阿莫西林等常用抗菌药物具有较高耐药性。

结论：重症肺部感染患者临床治疗中支气管镜肺泡灌洗具有确切疗效，灌洗时选用敏感性较高的抗生素，以确保临床疗效。

【关键词】重症肺部感染；灌洗液培养；支气管镜重症肺部感染存在复杂的发病因素，临床治疗难度大、致死风险高，需要临床尽快使用抗菌药物进行抗感染治疗[1]。

现如今，抗菌药物种类逐渐增多，以致于抗生素应用不合理、滥用等现象日益严重，不仅降低了肺部感染控制效果，而且还容易增多耐药菌，导致最后无药可用[2]。

支气管镜肺泡灌洗治疗方法是当代临床控制重症患者肺部感染的有效手段，可以帮助患者清除气道异物，减轻对气道的堵塞程度[3]，现已成为重症肺部感染患者预后改善的重要措施[4]。

故而本研究纳入46例重症肺部感染患者作为临床治疗对象，对照观察了支气管镜肺泡灌洗疗效，以供参考。

1.一般资料与方法1.1一般资料本研究46例重症肺部感染患者纳入于2021年08月--2022年08月，根据患者采取的治疗措施而设置对照小组，名为实验组、参照组，各23例。

实验组13例男性、10例女性，年龄24-62岁，均龄（43.83±12.96）岁；参照组12例男性、11例女性，年龄23-61岁，均龄（43.79±12.87）岁。

辛苍滴鼻凝胶剂对哮喘大鼠血、肺泡灌洗液中IL-4、IFN-γ及嗜酸性粒细胞计数的影响

组：常组、型组、苍滴鼻凝胶组、苍汤组、塞米松正模辛辛地
组，组７只。除正常组外，余各组大鼠参考文献【］每其２的方法制备大鼠哮喘动物模型。鼠于第ｌ腹腔注射含卵蛋白大天１０ｇ氢氧化铝１ｒ０ｍ＋５ｇ的生理盐水混悬液（ａ自配）ｍｌＬ致敏，第８天再次致敏，１第５天雾化吸人５％卵蛋白生理盐水溶液４ｍｉ发哮喘，续激发７天，解７天，激发７天。正０ｎ激连缓再常组在同一时间均用生理盐水致敏和激发哮喘。大鼠出现以烦躁不安、喷嚏、嗽、息等症状说明大鼠模型制备成打咳喘
成清膏；夷油２５Ｌ，Ｈ — — Ｄ包合，包合物用适量辛．ｍ用ＰＢＣ将
蒸馏水溶解后加入上述清膏中备用；卡波姆９１Ｎｇ取７ＰＦ６，加入适量蒸馏水使溶胀，入苯甲酸钠６，加入上述混加Ｅ再
１００６炒苍耳子（粒）批号１００９江阴天江药业有０８９，颗，０９８，
辛苍汤组给予生理盐水Ｉ０Ｌ，侧５ｐＯ￣每０￣鼻，日３次；Ｌ滴每
灌胃辛苍汤４２／ｇ．ｇ，每日１。地塞米松组给予生理盐水ｋ次
文章编号１７ — ９Ｘ（０２０ — ０２０６２３７２１）１０７ — ３

支气管肺泡灌洗液中性粒细胞比例对于肺部细菌感染的诊断价值

支气管肺泡灌洗液中性粒细胞比例对于肺部细菌感染的诊断价值【摘要】目的：探讨支气管肺泡灌洗液（BALF）中性粒细胞比例对诊断肺部细菌感染价值。

方法：回顾性分析60例送检肺部细菌感染者BALF标本，根据感染情况分类，绘制ROC曲线分析BALF中性粒细胞比例对诊断肺部细菌感染的价值。

结果：45例为肺部细菌感染，15例非肺部细菌感染，感染组在中性粒细胞比例与巨噬细胞比例高于非感染组（P＜0.05），ROC曲线分析BALF中性粒细胞比例诊断肺部细菌感染，诊断阈值25%，敏感度0.844，特异度0.969，曲线下面积0.899。

结论：针对肺部细菌感染，检测BALF中性粒细胞比例对诊断疾病的价值高，辅助疾病早期干预。

【关键词】肺部细菌感染；支气管肺泡灌洗液；中性粒细胞比例；诊断肺部细菌感染属于常见的一种现象，可影响心肺健康以及呼吸道健康，发病通常与不合理饮食、长期抽烟等因素相关[1]。

肺部细菌感染的病原体主要是细菌，因此诊断上需明确细菌感染情况。

支气管肺泡灌洗液（BALF）被称作为液体活检，使感染病原体测定重要标本，对于细菌感染者，BALF中性粒细胞比例可出现变化，然而目前国内外相关研究对肺部细菌感染者BALF中性粒细胞比例特点无统一标准[2]。

本次研究采取回顾性分析方法，分析测定BALF中性粒细胞比例对诊断肺部细菌感染价值，现报告如下。

1 资料与方法1.1一般资料回顾性分析2019年2月-2022年6月送检的60例肺部细菌感染者的BALF标本检测结果。

送检标本病例资料上，男37例，女23例；年龄30～68岁，平均（47.12±2.46）岁。

本次研究经医院医学伦理委员会批准同意（批准号：1584715）。

1.2方法BALF标本送至检验室做对应处理，观察灌洗液颜色、性状以及总量。

标本在离心机下离心获得上清液，作为可溶性成分的测定。

（1）细胞计数在Neubauer 细胞计数板中进行，在显微镜低倍镜或高倍镜下时，计数除上皮细胞以外的所有细胞，以每升回收液的细胞数表示。

支气管肺泡灌洗液淋巴细胞亚群对肺部病变的诊断意义

支气管肺泡灌洗液淋巴细胞亚群对肺部病变的诊断意义张杜超１,刘㊀佳１,伍江平２,黄爱本１,潘㊀磊１(首都医科大学附属北京世纪坛医院,１．呼吸与危重症医学科,２．肿瘤研究室,北京１０００３８)D O I :１０．１１７４８/b j m y ．i s s n ．１００６－１７０３．２０２１．０４．００４收稿日期:２０２１Ｇ０１Ｇ２１;修回日期:２０２１Ｇ０３Ｇ０７基金项目:科研基金资助项目(编号:z １５５０８００００００４)作者简介:张杜超㊁刘佳为共同第一作者.通讯作者:潘磊.摘要:目的㊀比较肺部感染,肺恶性肿瘤及间质性肺病患者支气管肺泡灌洗液细胞计数及淋巴细胞亚群的表达水平,评价其临床意义.方法㊀选取２０１７年５月至２０１９年１２月收治的９８例患者,其中肺部感染５６例,肺恶性肿瘤１８例,间质性肺疾病２４例,检测肺泡灌洗液计数及淋巴细胞亚群水平.结果㊀肺部感染组中性粒细胞百分比及总N K 细胞百分比显著升高,巨噬细胞百分比显著减少,与其他两组比较差异有统计学意义.肺恶性肿瘤组C D ３＋T 淋巴细胞㊁C D ４＋T 淋巴细胞及C D ４＋/C D ８＋T 淋巴细胞比值显著减低,与感染组相比,差异有统计学意义(P ＜０．０５).间质性肺病组C D ８＋T 淋巴细胞及抑制性T 淋巴细胞(C D ８＋C D ２８－)显著升高,与其他两组相比,差异有统计学意义(P ＜０．０５).结论㊀检测支气管肺泡灌洗液细胞分类及淋巴细胞亚群水平,对于鉴别肺部病变㊁评估免疫功能及预后有一定的临床价值.关键词:肺部感染;㊀肺恶性肿瘤;㊀间质性肺病;㊀肺泡灌洗液;㊀淋巴细胞亚群中图分类号:R ５６３㊀㊀文献标识码:AT h eD i a g n o s t i cV a l u e o fL y m p h o c yt e S u b s e t s i nB r o n c h o a l v e o l a r L a v a g eF l u i d f o rL u n g Di s e a s e s Z H A N G D u c h a o ,L I UJ i a ,WUJ i a n g p i n g,H U A N G A i b e n ,P A N L e i (１．D e p a r t m e n t o fP u l m o n a r y a n dC r i t i c a l C a r eM e d i c i n e ,２．D e p a r t m e n t o fO n c o l o g y ,B e i j i n g S h i j i t a nH o s pi t a l ,C a p i t a lM e d i c a lU n i v e r s i t y ,B e i j i n g １０００３８,C h i n a )A b s t r a c t :O b j e c t i v e T oc o m p a r e t h ec e l l c o u n t a n d l y m p h o c y t e s u b s e t s e x pr e s s i o n s i nb r o n c h o a l v e o l a r l a v a g e f l u i d (B A L F )o f p a t i e n t sw i t h p u l m o n a r y i n f e c t i o n ,l u n g c a n c e r a n d i n t e r s t i t i a l l u n g d i s e a s e ,a n d t oe v a l u a t e i t s c l i n i c a l s i g n i f i c a n c e ．M e t h o d s ９８p a t i e n t s f r o m M a y,２０１７t oD e c e m b e r ,２０１９w e r e s e l e c t e d f o r t h e s t u d y ,i n c l u d i n g ５６c a s e so f p u l m o n a r y i n f e c t i o n ,１８c a s e so f l u n g m a l i g n a n t t u m o r a n d ２４c a s e s o f i n t e r s t i t i a l l u n g d i s e a s e ．R e s u l t s I nt h e p u l m o n a r y i n f e c t i o n g r o u p ,t h e p e r c e n t a geo f n e u t r o p h i l s a n d t o t a lN Kc e l l sw e r e s i g n i f i c a n t l y i n c r e a s e d ,w h i l e t h e p e r c e n t a g e o fm a c r o p h a ge sw a s s i g n if i c a n t l y d e c r e a s e d ,a n d t h e d i f f e r e n c ew a s s t a t i s t i c a l l y s ig n i f i c a n twh e n c o m pa r e dw i t h t h e o t h e r t w o g r o u p s ．I n t h e l u n g c a n c e r g r o u p ,C D ３＋T l y m p h o c y t e s ,C D ４＋T l y m p h o c yt e s a n dC D ４＋/C D ８＋T l y m p h o c y t e sw e r e s i g n i f i c a n t l y l o w e r t h a n t h o s e i n t h e i n f e c t i o n g r o u p (P ＜０．０５)．I n t h e i n t e r s t i t i a l l u n g d i s e a s e g r o u p ,C D ８＋T l y m p h o c y t e sa n di n h i b i t o r y T l y m p h o c yt e s (C D ８＋C D ２８－)w e r e s i g n i f i c a n t l y i n c r e a s e d ,w h e nc o m p a r e d w i t ht h eo t h e r t w o g r o u p s ,t h ed i f f e r e n c ew a s s t a t i s t i c a l l y s i g n i f i c a n t (P ＜０．０５)．C o n c l u s i o n D e t e c t i o n o f c e l l c l a s s i f i c a t i o n a n d l y m p h o c yt e s u b s e t si n b r o n c h o a l v e o l a r l a v a g ef l u i dh a sc e r t a i nc l i n i c a l v a l u e s f o rd i f f e r e n t i a t i n g l u n g d i s e a s e s ,e v a l u a t i n gi m m u n e f u n c t i o na n d p r o gn o s i s ．K e y w o r d s :L u n g i n f e c t i o n ;㊀L u n g c a n c e r ;㊀I n t e r s t i t i a l l u n g d i s e a s e ;㊀A l v e o l a rl a v a gef l u i d ;㊀L y m p h o c yt e s u b s e t s ４５５L a b e l e d I mm u n o a s s a y s&C l i n M e d ,A pr ．２０２１,V o l ．２８,N o ．４㊀㊀支气管肺泡灌洗是一种经支气管镜直接获取细胞及生化成分的常用检查方法,对于探讨肺局部免疫及病理过程有重要意义[１].近年来随着流式细胞术的应用,通过检测肺泡灌洗液(b r o n c h o a l v e o l a r l a v a g e f l u i d,B A L F)细胞亚群成分,对于疾病的辅助临床诊断及预后评估具有重要意义[２].本研究通过比较肺部感染㊁肺恶性肿瘤及间质性肺病患者B A L F细胞计数及淋巴细胞亚群的表达水平,评价其临床意义.材料和方法㊀㊀１㊀一般资料㊀㊀２０１７年５月至２０１９年１２月在首都医科大学附属北京世纪坛医院呼吸内科收治的９８例患者,其中肺部感染组５６例㊁肺恶性肿瘤组１８例(其中小细胞肺癌２例㊁非小细胞肺癌１６例)㊁间质性肺疾病２４例.㊀㊀入组标准:肺部感染诊断依据中华医学会呼吸病学分会制定的«中国成人社区获得性肺炎诊断和治疗指南(２０１６年版)»[３];肺恶性肿瘤及间质性肺疾病诊断依据胸部影像及组织病理学证实.㊀㊀２㊀研究方法㊀㊀２．１㊀临床资料㊀收集患者临床资料,包括年龄㊁性别㊁基础疾病㊁临床症状㊁实验室检查,包括血常规㊁C反应蛋白(CＧr e a c t i v e p r o t e i n,C R P)㊁降钙素原(p r o c a l c i t o n i n,P C T).㊀㊀２．２㊀肺泡灌洗液收集及计数㊀电子支气管镜末端紧密嵌人病变所在的段或亚段支气管开口处,经活检孔分次注入３７ħ生理盐水(总量１００m L),以５０~１００mmH g负压吸引收集B A L F,回吸收量约４０~６０m L,送检细胞计数及淋巴细胞亚群分析.㊀㊀２．３㊀细胞分类检测㊀B A L F离心后沉渣采用计数池法行细胞计数,细胞分类计数涂片的制备采用涂片法,沉渣涂片后以瑞氏染色法染色,光学显微镜每张涂片计数２００个细胞,计数两张涂片并取平均值.㊀㊀２．４㊀流式细胞术检测淋巴细胞亚群㊀利用肿瘤研究室流式细胞仪(贝克曼F C５００)测定总T细胞(C D３＋)百分比㊁T辅助/诱导细胞(C D４＋)百分比㊁T抑制/细胞毒细胞(C D８＋)百分比㊁总N K细胞(C D３－C D１６＋C D５６＋)百分比㊁N K样T细胞(C D３＋C D１６＋C D５６＋)百分比㊁总B细胞(C D１９＋)百分比㊁调节性T细胞(r e g u l a t o r y T l y m p h o c y t e,T r e g,C D４＋C D２５＋C D１２７＋)百分比㊁抑制性T细胞(s u p p r e s s o rTl y m p h o c y t e,T s, C D８＋C D２８－)百分比㊁细胞毒T细胞(c y t o t o x i cT l y m p h o c y t e,T c,C D８＋C D２８＋)百分比㊁髓性树突状细胞(m a r r o w d e n d r i t i cc e i l,M D C)百分比㊁淋巴细胞性树突状细胞(l y m p h o c y t e d e n d r i t i c c e l l,L D C)百分比.㊀㊀３㊀统计学处理㊀㊀统计处理采用S P S S１７．０软件进行.定量资料经正态性检验及方差齐性检验后,三组间采用F检验,两组间采用t检验;经检验后不符合正态分布的资料,采用非参数秩和检验比较.定性资料采用卡方检验;若理论频数＜５,采用校正卡方;若理论频数小于１,采用确切概率法.以P＜０．０５为差异具有统计学意义.结㊀㊀果㊀㊀１㊀三组患者一般资料比较㊀㊀本研究共入组９８例患者,其中肺部感染组５６例㊁肺恶性肿瘤组１８例(其中小细胞肺癌２例㊁非小细胞肺癌１６例)㊁间质性肺疾病２４例,三组间年龄分布及性别构成差异无统计学意义.见表１.表１㊀三组患者基本资料项目肺部感染(n＝５６)肺恶性肿瘤(n＝１８)间质性肺疾病(n＝２４)P值男/女２８/２８８/１０１１/１３０．８９３年龄(岁)６１．５ʃ１３．７６１．２ʃ１６．０５９．９ʃ１４．１０．７８３㊀㊀２㊀三组间临床表现及外周血炎症指标比较㊀㊀肺部感染组主要表现为发热㊁咳痰,白细胞㊁C R P及P C T水平升高,与肺恶性肿瘤及肺间质性疾病组两两比较,差异有统计学意义.肺恶性肿瘤组可表现为咳嗽㊁咳痰伴胸痛㊁咯血,炎症指标无明显升高.间质性肺疾病组主要表现为干咳伴呼吸困难,炎症指标无明显升高.见表２.５５５标记免疫分析与临床㊀２０２１年４月第２８卷第４期表２㊀三组间临床表现及外周血炎症指标比较[n(％)]项目肺部感染(n＝５６)肺恶性肿瘤(n＝１８)间质性肺疾病(n＝２４)发热５６(１００．０)b c０(０．０)a０(０．０)a咳嗽５６(１００．０)１６(８８．９)２２(９１．７)咳痰５６(１００．０)b c４(２２．２)a０(０．０)a呼吸困难８(１４．３)c２(１１．１)c１８(７５．０)a b胸痛０(０．０)b５(２７．８)a c０(０．０)b咯血０(０．０)２(１１．１)０(０．０)白细胞升高(＞１０ˑ１０９/L)５６(１００．０)b c０(０．０)２(８．３) P C T升高(＞０．０５n g/m L)１８(３２．１)b c０(０．０)０(０．０)C反应蛋白升高(＞６m g/L)５６(１００．０)b c３(１６．７)２(８．３)㊀㊀㊀注:与感染组比较,a P＜０．０５;与肺恶性肿瘤组比较,b P＜０．０５;与间质性肺疾病组比较,c P＜０．０５㊀㊀３㊀三组患者B A L F中细胞分类计数结果比较㊀㊀肺部感染组与肺恶性肿瘤及肺间质性病变组两两比较,肺部感染组中性粒细胞百分比显著升高,巨噬细胞百分比显著减少,与其他两组比较差异有统计学意义.详见表３.表３㊀三组B A L F中细胞分类比较[xʃs,M(P２５~P７５)]项目肺部感染(n＝５６)肺恶性肿瘤(n＝１８)间质性肺疾病(n＝２４)回收量(m L)１２．０ʃ５．７１３．０(５．０~２０．０)１２．５(６．０~２０．５)细胞数(ˑ１０６/L)１９１．０(８５．５~１７５．０)９８．３(８１．０~１２８．０)１３９．８(８０．０~１４０．０)巨噬细胞(％)２６．５(９．５~７０．０)b c５４．０ʃ１６．１a４６．５ʃ１３．７a中性粒细胞(％)３２．５(１０．０~７５．５)b c３．０(２．０~２６．０)a７．０(３．０~３４．５)a淋巴细胞(％)３５．４ʃ１３．４３６．６ʃ１４．５３７．３ʃ１２．４嗜酸性粒细胞(％)０．０(０．０~１．０)０．０(０．０~１．０)０．０(０．０~１．０)㊀㊀㊀注:与感染组比较,a P＜０．０５;与肺恶性肿瘤组比较,b P＜０．０５;与间质性肺疾病组比较,c P＜０．０５㊀㊀４㊀三组患者B A L F中淋巴细胞亚群结果比较㊀㊀三组进行两两比较,肺部感染组C D４＋T淋巴细胞,C D４＋/C D８＋T淋巴细胞及总N K细胞(C D３－C D１６＋C D５６＋)显著升高,与其他两组相比,差异有统计学意义(P＜０．０５).间质性肺病组C D８＋T淋巴细胞及抑制性T淋巴细胞(T s,C D８＋C D２８－)百分比显著升高,与其他两组相比,差异有统计学意义.三组间N K样T细胞(C D３＋C D１６＋C D５６＋)百分比㊁总B细胞(C D１９＋)百分比㊁调节性T细胞(T r e g,C D４＋C D２５＋C D１２７＋)百分比㊁细胞毒T细胞(T c,C D８＋C D２８＋)百分比㊁树突状细胞百分比差异无统计学意义.详见表４.表４㊀三组B A L F中淋巴细胞亚群比较[xʃs,M(P)２５~P７５)]项目肺部感染(n＝５６)肺恶性肿瘤(n＝１８)间质性肺疾病(n＝２４)C D３＋(％)８１．６ʃ１４．２b６２．６(４２．２~８３．５)a７１．２(４８．３~８５．５)C D４＋(％)４２．２ʃ１８．３b c２７．２(１２．８~３６．７)a２９．６ʃ１３．１aC D８＋(％)２９．７ʃ１５．５c２９．５(１７．６~３８．４)c３９．３ʃ１５．６a bC D４＋/C D８＋１．９ʃ０．４b c０．８(０．７~１．５)a０．８(０．７~１．５)aC D３－C D１６＋C D５６＋(％)５．６(３．２~８．６)b c３．４(２．０~５．７)a３．２(１．９~５．８)aC D３＋C D１６＋C D５６＋(％)６．９(３．１~９．７)６．９(２．９~１１．２)７．２(３．２~１１．５)C D１９＋(％)１．８(１．１~２．７)１．４(０．９~２．７)１．６(１．０~２．６)C D４＋C D２５＋C D１２７＋(％)１．２(０．５~２．０)１．３(０．５~２．５)１．３(０．５~２．９)C D８＋C D２８－(％)２１．１(１２．６~３１．８)c１５．６(７．７~３４．９)c３３．２ʃ１３．６a bC D８＋C D２８＋(％)７．４(３．７~９．２)７．２(２．６~９．７)５．３(２．７~８．７)M D C(％)０．０３(０．０１~０．１１)０．０１(０．０１~０．０７)０．０１((０．０１~０．０７)L D C(％)０．０２(０．０１~０．０４)０．０１(０．０１~０．０３)０．０１(０．０１~０．０３)㊀㊀㊀注:与感染组比较,a P＜０．０５;与肺恶性肿瘤组比较,b P＜０．０５;与间质性肺疾病组比较,c P＜０．０５６５５L a b e l e d I mm u n o a s s a y s&C l i n M e d,A p r．２０２１,V o l．２８,N o．４讨㊀㊀论㊀㊀支气管肺泡灌洗作为一种相对无创的检查手段,患者容易耐受且并发症相对较少,留取B A L F是肺组织病理的重要补充,同时通过对B A L F中的细胞组分及淋巴细胞亚群分析,对于肺部病变的鉴别诊断具有重要意义[４Ｇ６].㊀㊀淋巴细胞是机体重要的免疫细胞,主要分为T 淋巴细胞,B淋巴细胞以及N K细胞.其中T淋巴细胞主要介导细胞免疫,按表型分为C D４＋和C D８＋T淋巴细胞.C D４＋T淋巴细胞可进一步分化为辅助性T细胞(T h１和T h２)㊁T h１７和调节性T淋巴细胞(T r e g),参与调节抗感染㊁肿瘤免疫等病理过程.C D８＋T淋巴细胞可分化为细胞毒T淋巴细胞(T c)和抑制性T淋巴细胞(T s),T c细胞主要参与抗肿瘤㊁抗病毒免疫等;T s细胞的主要通过分泌抑制性因子参与免疫应答的活化阶段,抑制T h细胞活性,从而间接抑制B细胞的分化和T c细胞的杀伤功能,对体液免疫和细胞免疫起负向调节作用.正常情况下,T淋巴细胞各个亚群维持在一定水平, C D４＋/C D８＋T淋巴细胞比值可以反映机体的免疫状态.淋巴细胞亚群在不同肺部病变中的发病机制不同,其淋巴细胞亚群变化特点也不尽相同[７Ｇ９].㊀㊀在肺恶性肿瘤患者中,普遍存在免疫功能低下,其中细胞免疫是抗肿瘤免疫的关键因素,既往研究[１０]显示,肺恶性肿瘤患者,处于免疫抑制状态, C D３＋显著下降,尤其以C D４＋和C D４＋/C D８＋比例下降最为明显.本组研究结果示肺恶性肿瘤组肺泡灌洗液中C D３＋T细胞㊁C D４＋T细胞及C D４＋T细胞/C D８＋T细胞显著减低,与感染组相比,差异有统计学意义(P＜０．０５).提示在肺恶性肿瘤患者中,病变部位局部免疫功能低下,从而有利于肿瘤细胞快速生长及播散.㊀㊀在肺部感染患者中,炎症反应的早期中性粒细胞发挥重要作用,在微生物病原体侵袭机体后可因趋化作用快速到达炎症部位,将细菌㊁细胞碎片等吞噬包围,防止病原微生物扩散[１１].本研究显示肺部感染组肺泡灌洗液中的中性粒细胞百分比显著高于其他两组,提示中性粒细胞在肺部感染中具有重要的免疫防御功能.C D４＋T淋巴细胞在抗感染中发挥重要作用,且C D４＋/C D８＋比值可以反映机体免疫状态[１２].本研究中感染患者C D４＋T淋巴细胞及C D４＋/C D８＋T淋巴细胞比值显著高于其他两组,提示与肺恶性肿瘤及间质性疾病组相比,肺部感染组局部细胞免疫功能相对稳定.N K细胞作为介导天然免疫的重要靶细胞,在肺部感染组显著高于肺恶性肿瘤组及间质性肺疾病组,提示在肺部感染的免疫防御阶段,N K细胞同样发挥重要作用,在一项关于肺炎克雷伯杆菌所致肺部感染的动物实验研究表明,N K细胞参与宿主防御及产生I LＧ２２介导免疫应答[１３].㊀㊀既往研究[１４]显示,间质性肺病患者C D８＋T细胞显著升高,C D５６＋细胞(N K细胞)数显著降低.本研究与既往研究一致,间质性肺病组C D８＋T细胞显著升高,N K细胞显著降低,与感染组比较差异有统计学意义.此外,本研究同样发现间质性肺病组T s细胞显著升高,与其他两组相比,差异有统计学意义,提示T s细胞可能参与间质性肺疾病的特异性免疫炎症反应及组织损伤过程[１５].㊀㊀临床表现及外周血炎症指标分析结果显示,肺部感染组临床表现为发热㊁咳痰伴炎症指标(白细胞㊁C R P㊁P C T)显著升高,与其他两组比较差异有统计学意义.肺恶性肿瘤组可表现为咳嗽伴胸痛㊁咯血;间质性肺疾病组主要表现为干咳伴呼吸困难,后两组的炎症指标无明显升高.㊀㊀综上,结合患者临床表现,通过对B A L F的细胞组分及淋巴细胞亚群分析,在一定程度上可以区分肺部感染㊁肺恶性肿瘤及间质性肺疾病,同时了解肺部病变的免疫功能,对于疾病的诊断及预后提供依据.参考文献[１]中华医学会呼吸病学分会．支气管肺泡灌洗液细胞学检测技术规范草案[J]．中华结核和呼吸杂志,２００２,２５(７):３９０Ｇ３９１．[２]杨红,鹿英英,张中．流式细胞术检测肺泡灌洗液淋巴细胞免疫表型的临床意义探讨[J]．中国实用医药,２０１５,１０(１７):１４Ｇ１５．[３]中华医学会呼吸病学分会．中国成人社区获得性肺炎诊断和治疗指南(２０１６年版)[J]．中华结核和呼吸杂志,２０１６,３９(４):２５３Ｇ２７９．[４]K H A N U,G H A Z A N F A R H．T l y m p h o c y t e s a n d a u t o i m m u n i t y[J]．I n tR e vC e l lM o l B i o l,２０１８,３４１:１２５Ｇ１６８．[５]顾国平,朱雪明,冯萍．探讨肺部感染患者肺泡灌洗液中淋巴细胞亚群的临床意义[J]．中国血液流变学杂志,２００９,１９(１):１１４Ｇ１１６．[６]洪燕燕,杨芝红．流式细胞术检测肺泡灌洗液淋巴细胞亚群的诊断价值[J]．检验医学与临床,２０１７,１４(１４):２０５１Ｇ２０５３．[７]马锡慧,肖漓．淋巴细胞亚群成员研究进展[J]．中华细胞与干细胞杂志(电子版),２０１７,７(３):１６８Ｇ１７２．[８]李鹤,刘双．肺部疾病的淋巴细胞亚群特点与免疫干预进展[J]．中国继续医学教育,２０１９,１１(１０):１１３Ｇ１３５．[９]L E E W,C HU N G W S,HO N G KS,e t a l．C l i n i c a l u s e f u l n e s s o f b r o n c h o a l v e o l a r l a v a g e c e l l u l a r a n a l y s i s a n d l y m p h o c y t e s u b s e t s i nd i f f u s e i n t e r s t i t i a l l u n g d i s e a s e s[J]．A n nL a b M e d,２０１５,３５(２):２２０Ｇ２２５．(下转第５９５页)７５５标记免疫分析与临床㊀２０２１年４月第２８卷第４期A L P㊁G G T水平为肝功能异常的危险因素,而本研究结果同样证实血清A L P㊁G G T水平升高与a l l oＧH S C T患者a G V H D发生密切相关,因此临床上需积极监测a l l oＧH S C T患者血清A L P㊁G G T水平,对降低患者a G V H D发生风险至为关键.㊀㊀综上所述,本文初步证实a l l oＧH S C T并发a G V H D患者的血清A L P㊁G G T水平异常增高,且年龄ȡ４０岁㊁H L A配型不全相合㊁血清A L P㊁G G T水平高的a l l oＧH S C T患者a G V H D发生风险高,未来工作中或可从这些方面制定合理的防治措施.但由于本文为回顾性分析,并且受时间和经费限制,对血清学指标的分析仅对比了A L P㊁G G T的差异,加之本研究样本量较小,相关结论及A L P㊁G G T影响异基因造血干细胞移植患者预后的具体机制有待后续深入探究.参考文献[１]B U R I L L OＧS A N ZS,MO R A L E SＧC AMA C HO R M,T E R E S AC A B A L L E R OＧV E LÁZ Q U E Z,e t a l．M L LＧr e a r r a n g e d a c u t em y e l o i dl e u k e m i a:I n f l u e n c e o ft h e g e n e t i c p a r t n e ri n a l l oＧH S C Tr e s p o n s e a n d p r o g n o s t i c f a c t o r o fM L L３ r e g i o nm R N Ae x p r e s s i o n[J]．E u r JH a e m a t o l,２０１８,１００(５):４３６Ｇ４４３．[２]M E N G G,WA N GJ,WA N G X,e ta l．R u x o l i t i n i bt r e a t m e n tf o rS RＧa G V H Di n p a t i e n t s w i t h E B VＧH L H u n d e rg o i n g a l l oＧH S C T[J]．A n nH e m a t o l,２０２０,９９(２):３４３Ｇ３４９．[３]蒋淑慧,侯畅,陈楠,等．异基因造血干细胞移植治疗伴M L L 基因重排急性髓系白血病４７例预后分析[J]．中华血液学杂志,２０１８,３９(７):５５８Ｇ５６２．[４]黄晓兵,李成龙,王春森,等．异基因造血干细胞移植治疗急性髓系白血病单中心临床疗效分析[J]．重庆医学,２０１８,４７(３):３０２Ｇ３０５．[５]杨军,罗玉香,胡晓凤．大型生化分析仪和急诊生化仪用于肝功能常规项目检测结果的比较研究[J]．中国全科医学,２０１８,２１(１):５０Ｇ５３．[６]饶露蓓,刘来成,刘曼,等．干化学法建立重庆地区健康儿童肝功能指标参考区间值的横断面调查[J]．中国循证儿科杂志,２０１９,１３(４):２６０Ｇ２６５．[７]张之南．血液病学．第２版[M]．北京:人民卫生出版社,２０１１．[８]B A C I G A L U P O A．A c u t e g r a f tＧv e r s u sＧh o s t d i s e a s e[J]．I mm u n o t h e r a p y,２０１１,３(１２):１４１９Ｇ１４２２．[９]杨兰,刘杰．A l l oＧH S C T治疗急性淋巴细胞白血病对患者近远期疗效和B C L６㊁N C L基因表达的影响探究[J]．标记免疫分析与临床,２０１８,２５(９):１３７２Ｇ１３７６．[１０]尹琎,曹阳,周剑峰,等．外周血半乳糖凝集素９水平对异基因造血干细胞移植急性移植物抗宿主病的预测作用[J]．中华血液学杂志,２０２０,４１(１):２３Ｇ２７．[１１]J I N GZ HA O,X I N GＧC H E N Y A N G,MA S A Y U K I F U J I N O,e t a l．S a l v i a n o l i c a c i dB a m e l i o r a t e s l i v e r i n j u r y i n am u r i n e a G v H Dm o d e l b y d e c r e a s i n g i n f l a mm a t o r y r e s p o n s e s v i a u p r e g u l a t i o no f HOＧ１[J]．T r a n s p l I mm u n o l,２０１９,５５:１０１２０３．[１２]S A L E H N A S A BC,HA J I F A T HA L I A,A S A D I F,e t a l．M a c h i n el e a r n i n g c l a s s i f i c a t i o n a l g o r i t h m st o p r e d i c ta G v H D f o l l o w i n g A l l oＧH S C T:as y s t e m a t i cr e v i e w[J]．M e t h o d sI n fM e d,２０１９,５８(６):２０５Ｇ２１２．[１３]王柔嘉,王紫薇,赵潇溟,等．异基因造血干细胞移植后小鼠共刺激分子表达与急性移植物抗宿主病的关系[J]．第二军医大学学报,２０１９,４０(６):５９５Ｇ６０１．[１４]陈育红,黄晓军,郭乃榄,等．异基因造血干细胞移植后急性移植物抗宿主病的发生及其危险因素的探讨[J]．中华血液学杂志,２００３,２４(２):６１Ｇ６３．[１５]杨凯,管世鹤,张浩,等．血清甲胎蛋白评估慢性乙型肝炎患者肝脏显著炎症的临床应用[J]．安徽医科大学学报,２０１９,５４(７):１１４６Ｇ１１４９．[１６]顾益．异基因造血干细胞移植后肝功能损害的病因㊁危险因素及预后分析[D]．上海:上海交通大学,２００８．[１７]赵琦,王兵,李振方,等．肝功能异常对急性胰腺炎病因和病情分级判定的临床意义[J]．临床肝胆病杂志,２０１８,３４(１):１５２Ｇ１５６．(上接第５５７页)[１０]谢诤,江莲,侯昕珩．支气管肺泡灌洗液中淋巴细胞亚群检测在肺癌诊断中的价值[J]．浙江临床医学,２０１０,１２(１０):１２１２Ｇ１２１３．[１１]P R E H E I M L C,G E N T R Y M J,S N I T I L Y M U．P u l m o n a r y r e c r u i t m e n t,a d h e r e n c e,a n d c h e m o t a x i so f n e u t r o p h i l s i na r a t m o d e l o f c i r r h o s i s a n d p n e u m o c o c c a l p n e u m o n i a[J]．J I n f e c t D i s,１９９１,１６４(６):１２０３Ｇ１２０６．[１２]F E N G H X,C H E N GY,Z HU W,e t a l．TＧl y m p h o c y t e s u b s e t s a s a p r e d i c t i v eb i o m a r k e r f o rs t r o k eＧa s s o c i a t e d p n e u m o n i a[J]．A mJT r a n s lR e s,２０１８,１０(１２):４３６７Ｇ４３７５．[１３]X UX,W E I S S ID,Z H A N G H H,e t a l．C o n v e n t i o n a l N Kc e l l s c a n p r o d u c e I LＧ２２a n d p r o m o t e h o s t d e f e n s ei n K l e b s i e l l a p n e u m o n i a e p n e u m o n i a[J]．J I mm u n o l,２０１４,１９２(４):１７７８Ｇ１７８６．[１４]刘培培,姜悦垚,侯松萍．淋巴细胞免疫分型对间质性肺病变的临床分析[J]．中国实验诊断学,２０１５,１９(１２):２０６６Ｇ２０６８．[１５]黄慧,邵池,徐作军．美国胸科协会官方指南支气管肺泡灌洗液的细胞学分析在间质性肺疾病中的临床应用摘译本[J]．中华结核和呼吸杂志,２０１２,３５(９):６５０Ｇ６５４．５９５标记免疫分析与临床㊀２０２１年４月第２８卷第４期。

RED-C-001.03-V1.0肺泡灌洗液标本采集的标准操作规程(优质参考)

文件名称支气管肺泡灌洗液标本采集的标准操作规程编码RED-C-001.03-V1.0文件类型标准操作规程文件页数共4页编订部门呼吸内科专业编订人编订日期年月日审核部门呼吸内科专业审核人审核日期年月日批准人批准日期年月日颁发部门GCP办公室生效日期年月日分发部门本文件为郑州市第一人民医院产权所有机密；未经相关部门许可, 不得擅自使用、泄露、公布及出版目录1. 目的： (2)2. 范围： (2)3. 责任人 (2)4. 依据： (2)5. 定义： (2)6. 内容： (2)7. 附件： (3)1.目的：建立支气管镜检查肺泡灌洗术标准操作规程，使检查过程规范化，保证支气管镜检查及肺泡灌洗治疗的进行，保肺泡灌洗液检验结果的可靠性。

2.范围：适用于II~IV期所有临床试验中支气管镜检查中操作3.责任人：专业负责人4.依据：支气管镜术指南（2009版）及科室相关标准操作规程。

5.定义：利用肺泡灌洗术治疗肺部疾病及明确病因6.内容：6.1灌洗方法：➢术前与家属谈话，告知支气管镜检查目的、检查可能引起的风险后果、应对措施，以及不同意检查后的替代治疗方法及后果，并由法定监护人或法定监护人授权委托人签署知情同意书。

填写支气管镜检查申请单。

➢术前3-4h禁食。

术前口服可待因0.06g，有条件时刻雾化吸入利多卡因0.1g，将患者、相应病历、检查结果、影像学检查原件带入内镜中心气管镜室。

床边检查者，于床边进行上述步骤。

➢术前核对患者姓名、性别、年龄、住院号，核对申请单及确认知情同意书。

打开支气管镜检查工作电脑及工作站，登入患者信息后进入检查图像获取界面，确认工作情况良好。

➢患者术前用2%利多卡因鼻腔、气道局部粘膜喷洒或滴入麻醉。

➢将患者平躺于检查床，予床单或约束带固定，吸氧鼻导管口放入左鼻孔，用医用透明胶带固定，眼部用单层消毒纱布覆盖，以免水及其他液体滴入眼中。

并接心电监护仪，确认氧饱和度>90%（氧饱和度具体数值视患者病情轻重程度而定）。

支气管肺泡灌洗(BAL)的临床应用与实验室检查

支气管肺泡灌洗(BAL)的临床应用与实验室检查一．定义：支气管肺泡灌洗（bronchoalveolar lavage,BAL）是一种经纤维支气管镜获取肺泡的细胞与生化成份的广为实用而安全的方法。

注意: BAL的操作规范BAL灌洗液的处理规范BAL的非细胞成份指标尚不能作为有用的临床参考二．用途：●疾病诊断：特异性诊断；重要诊断工具。

●疗效与预后评价●治疗●研究➢对于某些特殊疾病，BAL可以做出特异性的诊断●机会性肺部感染：卡氏肺囊虫性肺炎，巨细胞病毒性肺炎，肺结核，肺真菌感染●尘肺，石棉肺，肺出血●铍肺（阳性淋巴细胞转换试验）●支气管肺泡细胞癌，恶性淋巴瘤等（肿瘤细胞）●肺泡蛋白沉着症（对氨基水扬酸－阳性小体）●组织细胞增多症 X (Histiocytosis X)➢对于一些间质性肺病，BAL是重要诊断手段结节病，外源性过敏性肺泡炎，闭塞性细支气管炎伴机化性肺炎（BOOP），特发性肺纤维化(IPF)，慢性嗜酸细胞肺炎等。

三．应用指征1.间质性渗出改变：结节病，外源性过敏性肺泡炎，药物性肺泡炎，特发性肺纤维化，胶原血管疾病，组织细胞增多症 X，尘肺，癌性淋巴管炎等。

2.肺泡渗出改变：肺炎，肺泡出血，肺泡蛋白沉着症，BOOP，嗜酸细胞肺炎等3.免疫缺陷病人并肺渗出病变：HIV感染，化疗或放疗，免疫抑制剂治疗，器官移植四．BAL副反应：发生率为0-2.3%，当同时进行经支气管镜肺活检(TBLB)，副反应为7%，尚无因 BAL死亡报道，因TBLB死亡0.2%，因开肺活检(OLB)死亡1.8%。

1.副反应发生形式与时间2.副反应的预防：副反应随着灌注量及灌注肺段的增加而增加，仔细操作，特别注意能使并发症减少到最小程度。

●全面了解病史，进行肺功能试验，血气分析，血小板计数，出凝血时间，心电图，胸部放射片●ECG，氧饱和度监测并予吸氧●BAL后24小时观察●限制灌洗量到最小需要量●适当的操作前用药，必要时使用ß-受体激动剂等●特殊病人严格掌握适应征3.BAL时副反应发生的危险因素●>50%的肺野渗出实变PaO2<60mmHg●SaO2<90%，支气管反应性PC20<2ug/ml乙酰甲胆碱●FEV1<60%预计值，或FEV1<1L Prothrombin time<50%●血小板计数低于20,000/ml 明显异常的ECG●对镇静剂敏感或不能耐受严重的伴发症PC20：FEV1降低20%所需的最低乙酰甲胆碱浓度五．ＢＡＬ操作绝大多数在局麻下使用纤维支气管镜进行。

肺泡灌洗液标准

肺泡灌洗液（Bronchoalveolar Lavage Fluid, BALF）的检查标准可以从几个方面来描述：
1.样本采集和处理标准：
o支气管肺泡灌洗术（Bronchoalveolar lavage, BAL）应当按照临床实践指南进行，确保样本获取的正确性。

o标准化的采集流程包括达到规定的灌洗液回收量，通常期望的回收率在50%以上，总量取决于灌洗液注入和回收的体积。

o灌洗液应当尽可能纯净，不混有血液（红细胞比例不超过一定限度，如10%以内），避免过多的上皮细胞（通常<3%）和其他非肺实质
细胞成分。

2.细胞学分类标准：
o正常肺泡灌洗液的细胞分类百分比通常为：
▪巨噬细胞 >85%
▪淋巴细胞≤15%
▪中性粒细胞≤3%
▪嗜酸性粒细胞≤1%
3.细胞总数标准：
o正常肺泡灌洗液中的细胞总数正常范围一般为7000-20000个细胞/微升（cells/μL）。

4.微生物学检查标准：
o微生物检测结果应结合临床表现和影像学证据，没有明显微生物感染的肺泡灌洗液不应检出病原微生物。

5.生化及其他实验室指标：
o可通过肺泡灌洗液检测蛋白含量、乳酸脱氢酶、溶菌酶、免疫球蛋白等生化指标，这些指标异常可能提示肺部疾病的存在。

请注意，不同文献和实验室可能对正常范围的具体数值略有差异，而且随着医疗技术和研究进展，这些正常范围可能会有所更新。

在进行肺泡灌洗液的采集、送检和结果解读时，应参照最新的临床指南和实验室手册。

在实际临床工作中，医师会结合患者的实际情况和检测结果，对可能存在的肺部疾病做出诊断和治疗决策。

支气管肺泡灌洗液细胞学检测技术规范（草案）

支气管肺泡灌洗液细胞学检测技术规范（草案）诊治方案?支气管肺泡灌洗液细胞学检测技术规范（草案）中华医学会呼吸病学分会支气管肺泡灌洗（BAL）能直接获取肺内炎症免疫效应细胞，是探讨肺局部免疫病理过程的一种比较安全和有用的检查方法。

对某些肺疾病，特别是弥漫性间质性肺疾病（如特发性肺纤维化、结节病、外源性过敏性肺泡炎、肺泡蛋白沉积症、风湿性疾病伴肺纤维化和Langerhans组织细胞增生症等）、肺部肿瘤以及免疫受损患者的肺部感染等，BAL已成为辅助临床诊断和预后判断的重要检测手段。

近20年间支气管肺泡灌洗液（BALF）检测无论从检测范围和检测项目上都有了长足的进展。

由于BALF检测受诸多因素的影响，如BAL操作时混血，大气道分泌物混入，吸引负压大小，灌洗量，回收量，灌洗液在肺内停留时间的长短以及肺泡上皮通透性的改变等不同，所得结果亦有一定差异。

因此，建立标准化和规范化的BAL操作和BALF实验室检测程序是获得准确结果的关键和前提。

现将BAL操作及BALF实验室检查技术做一原则规范。

支气管肺泡灌洗操作方法一、术前准备同纤维支气管镜（纤支镜）术前准备，常规在纤支镜气道检查后于活检刷检前做BAL。

局部麻醉剂为2%利多卡因。

二、BAL操作技术1.灌洗部位选择：对弥漫性间质性肺疾病选择右肺中叶（B4或B5）或左肺舌段，局限性肺病变则在相应支气管肺段进行BAL。

2.BAL操作步骤：（1）首先在要灌洗的肺段经活检孔通过一细硅胶管注入2%利多卡因1～2ml，做灌洗肺段局部麻醉；（2）然后将纤支镜顶端紧密楔入段或亚段支气管开口处，再经活检孔通过硅胶管快速注入37℃灭菌生理盐水。

每次25～50ml，总量100～250ml，一般不超过300ml；（3）立即用50～100mm Hg（1mm Hg=0.133kPa）负压吸引回收灌洗液，通常回收率为40%～60%；（4）将回收液体立即用双层无菌纱布过滤除去粘液，并记录总量；（5）装入硅塑瓶或涂硅灭菌玻璃容器中（减少细胞粘附），置于含有冰块的保温瓶中，立即送往实验室检查。

小鼠支气管肺泡灌洗液(balf)中的白细胞分类

小鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）中的白细胞分类在研究小鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）中的白细胞分类之前，我们首先需要了解BALF的概念和特点。

BALF是一种常用的实验方法，通过向小鼠气道灌注生理盐水，然后通过肺部灌洗的方式收集肺泡灌洗液。

在收集到的BALF中，包含了众多细胞成分，其中白细胞是其中之一。

而白细胞的分类对于研究小鼠肺部疾病的病理过程和免疫反应有着重要的意义。

在BALF中，白细胞主要分为淋巴细胞、中性粒细胞、嗜酸性粒细胞和单核细胞。

这些不同类型的白细胞在小鼠肺部免疫应答中起着不同的作用，因此对它们进行准确的分类和分析，有助于科学家深入了解小鼠肺部疾病的发生和发展机制。

我们来谈谈淋巴细胞。

BALF中的淋巴细胞是一种重要的免疫细胞，它们主要参与体液免疫反应。

淋巴细胞的分类又可以分为T淋巴细胞和B淋巴细胞，它们在抗体介导的免疫应答和细胞介导的免疫应答中起着重要作用。

在研究小鼠支气管肺泡灌洗液中的淋巴细胞时，需要准确地区分T淋巴细胞和B淋巴细胞，并分析它们在肺部免疫过程中的作用和数量变化。

中性粒细胞在BALF中也是一个重要的细胞类型。

它们是免疫系统中的重要组成部分，主要参与细胞因子介导的免疫反应和炎症过程。

中性粒细胞的增多和活化常常伴随着肺部炎症性疾病的发生，因此对BALF中的中性粒细胞进行分类和分析，可以帮助科学家更全面地了解小鼠肺部疾病的免疫炎症过程，为疾病的诊断和治疗提供重要依据。

嗜酸性粒细胞和单核细胞在BALF中也具有重要意义。

嗜酸性粒细胞是一类主要参与过敏反应和寄生虫感染的免疫细胞，它们的数量变化可以反映小鼠肺部的过敏炎症情况。

而单核细胞则是一类具有多功能性的免疫细胞，它们可以分化为巨噬细胞和树突状细胞，参与免疫调节和抗原递呈过程。

在研究小鼠支气管肺泡灌洗液中的白细胞时，对嗜酸性粒细胞和单核细胞的分类和分析同样具有重要意义。

对BALF中的白细胞进行准确的分类和分析，可帮助科学家全面了解小鼠肺部的病理过程和免疫反应。

238例支气管肺泡灌洗液细胞病理学结果分析与临床意义

238例支气管肺泡灌洗液细胞病理学结果分析与临床意义李龙萍;匡晓燕;李化梅;邓飞【摘要】目的通过对2012年3月至2014年11月贵阳市第五人民医院238例支气管肺泡灌洗液(bronchoalvelar lavage fluid,BALF)细胞病理学检查结果分析,探讨其在临床肺部疾病诊治中的意义.方法留取支气管肺泡灌洗液15～20mL,所有标本用ThinPrep液基细胞学技术涂片后行HE染色、过碘酸-雪夫(PAS)染色、六胺银(GMS)染色、抗酸染色.结果 238例BALF标本中查见异常成分的80例(33.6％);其中卡氏肺囊虫47例,分枝杆菌15例,真菌8例,巨细胞病毒2例,复合感染3例,查见肿瘤细胞5例.结论本院送检支气管肺泡灌洗液标本异常检出率高,细胞病理学检查为肺部疾病诊断提供方便快捷的形态学依据,有重要临床应用价值.【期刊名称】《遵义医学院学报》【年(卷),期】2015(038)001【总页数】5页(P80-84)【关键词】支气管肺泡灌洗液;细胞病理学;异常检出率【作者】李龙萍;匡晓燕;李化梅;邓飞【作者单位】贵阳市第五人民医院病理科,贵州贵阳550004;遵义医药高等专科学校附属医院病理科,贵州遵义563002;遵义医药高等专科学校附属医院病理科,贵州遵义563002;遵义医学院附属医院病理科,贵州遵义563099【正文语种】中文【中图分类】R734.2近年来，随着纤维支气管检查术的改进，在纤维支气管镜应用基础上发展起来的支气管肺泡灌洗(brongchoalvelar lavage fluid,BALF)常规细胞病理学检查，在临床的应用越来越广泛。

有人将支气管肺泡灌洗(BALF)称为“液性肺活检”。

其操作简便，安全，损伤小，且能收集到下呼吸道表面覆盖的细胞以及纤维支气管镜所不能探及的细胞学标本进行诊断，因此在临床上应用越来越广泛。

采用ThinPrep液基细胞学涂片技术可以使细胞单层平铺不重叠、形态清晰、背景干净易于观察。

肺泡灌洗液涂片合格标准

肺泡灌洗液涂片合格标准1.引言1.1 概述概述部分的内容可以按照以下方式编写：引言部分的目的是为了向读者介绍本文的主题以及内容结构，同时概述肺泡灌洗液涂片合格标准的背景和重要性。

肺泡灌洗液涂片在肺部疾病的诊断和治疗中扮演着重要的角色。

通过收集肺泡灌洗液样本并制备涂片，医生可以观察和分析其中的细胞和病理变化，从而帮助判断疾病类型、确定治疗方案。

然而，在目前的临床实践中，肺泡灌洗液涂片的质量控制存在着一些问题和挑战。

由于缺乏统一的合格标准，不同实验室和医疗机构所采用的涂片制备方法、染色技术和评估标准存在差异，导致了结果的不一致性和可比性的下降。

为了提高肺泡灌洗液涂片的质量和规范，制定和执行统一的合格标准显得尤为重要。

通过建立涂片制备、染色和评估等方面的标准化指南，可以确保各个实验室和医疗机构在肺泡灌洗液涂片制备过程中遵循相同的规范，从而提高结果的准确性和可靠性。

本文将就肺泡灌洗液涂片合格标准的必要性进行探讨，并根据相关研究和经验提出一些建议。

希望能为医疗界提供一个统一的参考框架，促进肺泡灌洗液涂片的质量控制和临床应用的进一步改进。

1.2 文章结构文章结构部分的内容可以包括以下内容：文章结构部分的主要目的是为读者提供关于本文的整体组织和内容安排的信息。

通过明确的结构，读者可以更好地理解和阅读本文，并能够更方便地找到他们感兴趣的内容。

本文按照以下结构进行组织：第一部分是引言部分，包括概述、文章结构和目的。

- 概述部分将对肺泡灌洗液涂片合格标准的重要性进行介绍，并简要说明其在临床实践中的应用和意义。

同时，概述部分还将概括本文的主要内容和结构安排。

- 文章结构部分（本文的当前部分）将详细介绍本文的整体结构，包括各个部分的标题和内容安排。

这样，读者在阅读文章时就可以清晰地了解到每个部分所涵盖的主题和内容。

- 目的部分将明确本文的目标和意图，解释为什么有必要进行肺泡灌洗液涂片合格标准的研究和制定，并对本文的贡献进行概要性说明。

COPD患者支气管肺泡灌洗液中IL—22的检测及意义

COPD患者支气管肺泡灌洗液中IL—22的检测及意义目的：检测慢性阻塞性肺病（COPD）患者急性肺炎链球菌感染后支气管肺泡灌洗液（BALF）IL-22的含量，并探讨其临床意义。

方法：采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测30例急性肺炎链球菌感染的COPD患者（COPD组）和15例急性肺炎链球菌感染性支气管炎（SP）患者（SP组）BALF上清中IL-22的含量，并对10例患者进行了治疗后跟踪检测，另选取15例健康志愿者作为健康对照組（HC组）。

结果：COPD组、SP组患者BALF中IL-22的含量均明显高于健康对照组（P＜0.001）；且SP组患者BALF中IL-22的含量明显高于COPD 组（P＜0.01）。

治疗后，COPD组患者BALF中IL-22的含量明显下降，吸烟患者IL-22的含量明显高于不吸烟患者（P＜0.01）。

COPD患者IL-22的含量与中性粒细胞在BALF中的比例呈正相关关系（P＜0.01）。

COPD患者IL-22的含量与FEV1%呈负相关关系（P＜0.01）。

结论：COPD患者BALF中IL-22的含量增加与COPD的发生与发展密切相关。

據WHO统计，慢性肺阻塞性肺疾病（chronic obstructive pulmonary disease，COPD）是导致人类死亡的第三大原因。

COPD主要的表现是肺功能失常和气道的重建，而吸烟是COPD的主要危险因素，当然还有其他的因素，包括环境的污染及个体基因差异。

吸烟通过改变气道的功能及免疫失调导致炎症进展，从而利于感染的发生[1-2]。

COPD患者的急性反应与患者气道功能的下降、气道过敏反应及机体炎症反应增强相关[3]。

在这些原因中，各种细菌、病毒和吸烟都起到的重要作用[4-5]，但是为什么COPD更容易感染的机制还不明确，需要进一步阐明其机制。

在抗细菌反应中，IL-22起到了重要的作用[6-7]。

该因子通过固有免疫和适应性免疫的各种细胞得到分泌，其中包括常规的T细胞、NK细胞，还有非常规的T细胞：γδT细胞、NKT细胞和3型固有淋巴细胞（innate lymphoid cell 3，ILC3）[8-9]。