细胞迁移or侵袭实验分析——LumaScope活细胞成像系统

细胞迁移/侵袭实验分析

——LumaScope活细胞成像系统

细胞迁移实验是普遍应用于评价损伤修复、贴壁肿瘤细胞转移或血管再生等的典型实验。传统方法是应用无菌枪头（Tip）在细胞培养容器上划痕来实现。但是此种方法无法实现在不同孔中划出同样大小的划痕。Oris TM迁移/侵袭试剂盒能够提供更加精确的方法，在培养容器中生成一个圆形区域。这种方法同样适用于观察不同方向的细胞迁移。LumaScope活细胞成像系统具备传统显微镜的功能，可应用于细胞或组织培养实验室的日常细胞观察。如细胞状态实时检测、远程传送和监控、细胞计数、形态观察、染色观察等。LumaScope可放置于培养箱中实现细胞的长时间的连续成像和定点监测。这种应用大大提高了实验过程检测的便捷性和结果的准确性。

本文将描述如何结合LumaScope与Oris TM迁移/侵袭试剂盒来实现细胞迁移/侵袭实验。实验结果可通过Image J软件来进行分析，最终得到细胞迁移的数量和速度数据。

细胞迁移分析：

Day 1：am 9:00插入Stoppers，接种细胞；

pm 4:00（根据细胞贴附状况），拔除stoppers，PBS洗一遍后加入新鲜培养液。Day 2：根据要观察的时间点设置LumaScope成像参数进行成像，并进行量化分析。

细胞侵袭分析：

Day 1：am 9:00包被薄层BME（用无血清培养液制备），插入stoppers，接种细胞；

pm 4:00 （根据细胞状况），拔除stoppers，包被厚层BME（含血清生长因子），再在第二层gel上面加上一层无血清培养液

Day 2：根据要观察的时间点设置LumaScope成像参数进行成像，并进行量化。

一、材料

●Oris TM迁移/侵袭试剂盒

●细胞、培养容器和培养液

●CO2培养箱

●LumaScope活细胞成像系统

●Image J软件（含Mtracking插件）

二、操作方法

1、根据上述Oris TM迁移/侵袭试剂盒使用说明培养细胞；

2、75%乙醇消毒LumaScope系统及相关部件；

3、将LumaScope系统放入CO2培养箱中，并连接到控制电脑（建议使用10倍或20倍

物镜）

4、将培养容器置于LumaScope载物台上，聚焦并找到目标视野；

5、设置Time Lapse程序（包括光源、成像参数和保存路径等），建议成像间隔时间为

20-30min；

6、启动程序，系统将自动运行，直至结束；

7、实验结果可通过Image J软件进行分析。

Lumascope成像系统于培养箱中成像

三、实验结果

LumaScope系统能够自动化获取并保存用户所设置的不同时间点的细胞照片。避免了反复开关培养箱来观察细胞的麻烦，并且能够保证整个成像过程环境条件的均一性。通过Image J的阈值和界限设置功能，计算圆形区域内的细胞数。

四、结论

LumaScope活细胞成像系统是应用于活细胞成像研究的一款小巧、紧凑和智能的系统。Oris TM迁移/侵袭试剂盒能够在不同的细胞培养孔中形成精确大小的区域。利用LumaScope能够轻松获取不同时间点的细胞照片。LumaScope与Image J软件的联合应用是一种非常经济和便捷的分析细胞迁移/侵袭实验的方法。

LumaScope显微镜产品详细信息可浏览：

Etaluma公司网页/products/lumascope

吉泰公司网页/product/inst.aspx