大鼠雌激素诱导蛋白(PS2)酶联免疫分析
雌激素诱导蛋白pS2 表达与ER 阳性原发乳腺癌患者辅助内分泌治疗疗效的关系

死于 f管疾病等其他原因;7例 (33 出现复 5a , 2 3.%)
发转移。 随访期间死于其他原因、 凡 失访或研究截止 者, 均计为删失数据。
1 试 剂和 方法 采用 免疫组化 S P法 , - 3 . 石蜡 切片
用微波进行抗原修复 。 一抗 为 鼠抗 p2单克隆抗体 S ( y d 司 )工作浓度为 1: 0 , 育 4。过夜 。 Zme 公 , 10孵 I = 检测 系统 为 L A S B试 剂盒 ( y e 公 司 ) 检 测程 序 Zm d , 按说 明书进行 , 色剂为 D B 显 A 。阴性对 照用 T S代 B
因素分 析均 表 明 p2是预 测 0 S s的独 立预后 因子 。 同时 p2对 D s 具有 独 立预 后价 值 ( = . 3 。 S F也 P O 2 ) 0
结论 :S p 2是 预 测 E R阳性 乳腺 癌 患者辅助 内分泌 治疗疗效 的独 立指 标 。 关键 词 : 乳腺 癌 ; 雌激 素诱 导蛋 白 p2 内分泌治疗 ; S; 预后
例 ≥1 %; ) 5 6 术后行规范 的 T M辅助治疗 。 A 1 临床 资料 . 2 符 合上 述条 件 的病 例共 8 例 , 1 平 均年 龄 ( 71 08 岁 , 4. ±1. ) 中位 4 . 2 5 岁 。8 7 0( 9 7 ) 0 例患 者行 根治术或 改 良根治术或 扩大 根治术 , 例 l 患者行保乳手术加腋 窝淋巴结 清扫术 。手术时有同
1 资 料 与 方 法
经前妇女 服 T M前先 行双侧 卵巢切除 。本研 究 中 A 有3 3例患者 曾先 在外 院行辅 助化疗 ,化疗方 案主
要为环磷 酰胺 ( T 、. C X) 5 氟尿 嘧啶 ( . u 。8 例 5F ) 1 患 者 平 均 随访 ( . ± .) , 中 位 随 访 6 7 4 3 a 7 . 7 ( . 1 .) 。 0 3 a 本研究 到随访截止 日期 ( 0 1 4 9 9 2 0 年 月
大鼠血清雌激素水平测定方法总结

1、酶联免疫吸附实验(ELISA)即将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面,使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行的技术。
该技术可用于检测大分子抗原和特异性抗体等,具有快速、灵敏、简便、载体易于标准化等优点。
2、放射免疫分析(英语:radioimmunoassay,缩写为RIA)简称放免或放免法,是一种在无须采用生物测定方法的情况下,用于检测抗原(例如血清之中激素的水平)的实验室测定方法。
这一方法是由罗莎琳·萨斯曼·耶洛和Solomon Aaron Berson于1950年代创建的。
通过抽取的少量血液或病人标本,利用放射性核素标记的抗原和未标记的抗原(两者的免疫原性相同)对专一抗体的竞争性相结合反应,来分析测定体内抗原的含量。
放射免疫分析法具有灵敏性高(可达10-12g~10-15g)。
3、免疫荧光法(免疫荧光技术(Immunofluorescence technique )FIA)是标记免疫技术中发展最早的一种。
用荧光抗体示踪或检查相应抗原的方法称荧光抗体法;用已知的荧光抗原标记物示踪或检查相应抗体的方法称荧光抗原法。
主要缺点是:非特异性染色问题尚未完全解决,结果判定的客观性不足,技术程序也还比较复杂。
4、化学发光免疫分析(CLIA)亦称化学发光标记免疫测定,是用化学发光剂直接标记抗原或抗体(化学发光剂标记物),与待测标本中相应抗体或抗原、磁颗粒性的抗原或抗体反应,通过磁场把结合状态(沉淀部分)和游离状态的化学发光剂标记物分离开来,然后加入发光促进剂进行发光反应,通过对发光强度的检测进行定量或定性检测。
5、时间分辨荧光分析法也叫时间分辨荧光免疫分析(time-resolvedfluoroimmunoassay, TRFIA)是以具有独特荧光特性的镧系元素及其螯合剂作为示踪物,建立的一种新型的非放射性微量分析技术。
自从1983年Pettersso n等采用时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)法定量测定hCG以来,TRFIA方法学研究和临床应用发展迅速,成为继RIA之后标记免疫分析发展的一个新的里程碑,国内外相继研制了多种TRFIA仪和配套的商品化试剂盒。
大鼠雌二醇(E2)说明书

大鼠雌二醇(E2)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。
检测范围:96T3ng/L -80ng/L使用目的:本试剂盒用于大鼠血清,血浆及相关液体样本中雌二醇(E2)含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠雌二醇(E2)水平。
用纯化的大鼠雌二醇(E2)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入雌二醇(E2)再与HRP标记的雌二醇(E2)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的雌二醇(E2)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中大鼠雌二醇(E2)浓度。
试剂盒组成标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。
加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
雌激素对β淀粉样蛋白(25-35)诱导大鼠皮质神经元细胞凋亡的影响

R sl : 3 2  ̄ 3 )id cd cl d ah a d a o ts n p i r ut r o a o t a n uo s t eut A1 5 5 n u e el et n p po i i r s ( s may c l e frtc ri l e rn .I u 抑 制 p 粉 样 蛋 白 ( ) 导 大 鼠 神 经 细 胞 凋 亡 的 作 用 机 制 。 方 法 通 过 乳 酸 脱 氢 酶 淀 Ap 诱
( DH) 放 率 的 测 定 及 膜 联蛋 白 V/ 化 丙 啶 双 染色 流 式 细 胞 术 观 察 1 雌 二 醇 ( 7- z对 Ap 2 ~ 3 ) 导 的 大 脑 皮 质 神 L 释 碘 7 1  ̄E ) ( 5 5诱 经 元 细 胞 死 亡 及 凋 亡 的 影 响 , 半 定 量 逆 转 录一 合 酶 链 反 应 ( T P R) 法 检 测 B l 用 聚 R -C 方 c 2在 转 录 水 平 的 表 达 。 结 果 Ap 一
维普资讯
・ 1 ・ 3 8
生殖医学杂志 20 0 6年 1 o月第 1 第 5期 5卷
雌激素对 l 3 淀粉样 蛋 白( 诱导 大 鼠 2  ̄3 ) 5 5 皮质神经元 细胞凋亡 的影 响
周磷 任 慕 兰 ,
(.南 京市 妇 幼 保 健 院 妇 产 科 , 苏南 京 1 江 2 0 0 ;2 10 4 .东南 大 学 附 属 中 大 医 院 妇 产 科 , 苏 南 京 2 0 0 ) 江 1 0 9
大鼠雌激素受体(ER)酶联免疫分析试剂盒 说明书

大鼠雌激素受体(ER)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用预期应用ELISA法定量测定大鼠血清、血浆、细胞培养物上清或其它相关液体中雌激素受体(ER)含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中雌激素受体水平。
用纯化的抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入雌激素受体、生物素化的抗大鼠雌激素受体抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。
TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的雌激素受体呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制1.酶联板:一块(96孔)2.标准品(冻干品):2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为20000pg/mL,做系列倍比稀释后,分别稀释成20000pg/mL,10000pg/mL,5000pg/mL,2500pg/mL,1250pg/mL,625pg/mL,312pg/mL,其原液直接作为最高标准浓度,样品稀释液直接作为标准浓度0pg/mL,临用前15分钟内配制。
如配制1000pg/mL标准品:取0.5ml20000pg/mL的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3.样品稀释液:1×20ml/瓶。
4.检测稀释液A:1×10ml/瓶。
5.检测稀释液B:1×10ml/瓶。
6.检测溶液A:1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液A1:100稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100ul),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。
如1ul 检测溶液A加99ul检测稀释液A的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。
7.检测溶液B:1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液B1:100稀释。
乳腺癌标志物对评估预后意义

乳腺癌标志物对评估预后的意义发表日期:2003年5月17日出处:Internet 作者:张涛已经有98位读者读过此文张涛综述,张保宁审校(中国医学科学院中国协和医科大学肿瘤医院,北京100021)近些年乳腺癌发病率呈上升趋势, 发病高峰提前,严重危害女性健康,在乳腺癌的治疗中,筛选出高危患者进行相应的放疗和(或)化疗,会使治疗更加有的放矢。
目前临床广泛应用的预后指标如下:淋巴结转移状况、原发肿瘤大小、组织学分型及分级、年龄、绝经状态、类固醇受体等等,但这些指标远不能满足临床的需要,所以人们一直在寻找其它更好的预后标志物,本文将对国内外在这方面的研究进展做一概述。
1Her-2/neuHer-2/neu位于17q21,编码分子量为185kD的跨膜蛋白,该蛋白与EGFR高度同源,具有细胞内酪氨酸激酶样活性,可以促进细胞分裂和蛋白水解酶的分泌,并增强细胞的运动能力,从而促进肿瘤侵袭和转移。
高表达者表示细胞增殖旺盛,侵袭力强。
在正常乳腺组织中,Her-2/neu呈低表达,当呈高表达时有致癌性,该基因的激活仅是数量上的增加,并无基因的突变,在乳腺癌中的高表达率约为20%~40%[1]。
Her-2/neu高表达与瘤组织分级高、淋巴结转移、分期晚呈正相关,与ER、PR呈负相关,且表达越高,预后越差[2];另外Her-2/neu的表达情况还可以预测对化疗和内分泌治疗的疗效[3],高表达预示着对化疗尤其是CMF方案的抵抗,而对以阿霉素为基础的联合化疗方案相对有效,且呈量效关系[4];ER(+)病人服用三苯氧胺,Her-2/neu(-)时有效率为48%,Her-2/neu(+)时为20%,因此对Her-2/neu高表达者,应加大治疗强度。
2PS2PS2是Masialowski于1982年从激素依赖性乳腺癌MCF-7细胞株中提取出来的雌激素诱导蛋白之一,在乳腺癌中表达阳性率约为43%~58%,其基因位于21 q ,该蛋白由84个氨基酸组成,富含半胱氨酸,其结构与胰岛素样生长因子(IGF)相似,与细胞分化有关。
乳腺癌组织pS2与雌激素和孕激素受体的关系及预后意义

乳腺癌组织pS2与雌激素和孕激素受体的关系及预后意义罗仁峰
【期刊名称】《亚太传统医药》
【年(卷),期】2008(4)7
【摘要】目的:探讨乳腺癌组织中ER与PR、pS2表达的临床意义及对预后的判断意义.方法:采用免疫组化S-P法检测53例术前未接受过化疗的原发性乳腺癌中ER 与PR、pS2、的表达,采用x2检验进行统计学处理.结果:pS2、ER、PR的表达与组织学分级呈负相关,随乳腺癌分级级别升高而降低;随乳腺癌病人术后生存期的延长而升高;pS2的表达与ER相关.结论:ER、PR、pS2联合运用可作为乳腺癌预后诊断的可靠指标.
【总页数】2页(P11-12)
【作者】罗仁峰
【作者单位】江汉大学医学院,湖北,武汉,430056
【正文语种】中文
【中图分类】R737.9
【相关文献】
1.乳腺癌组织中雌孕激素受体、c-erbB-2、p53、bcl-2 及pS2 的表达及意义 [J], 姜楠;颜承平;刘晋红;张宗明
2.乳腺癌组织中C-erbB-2与雌激素和孕激素受体的关系及意义 [J], 华平;古吉敏;李天永;徐祥富
3.Ps2蛋白雌激素受体孕激素受体表达与乳腺癌组织学分级预后的关系 [J], 田秀
娟
4.乳腺癌中C-erbB2癌基因与雌、孕激素受体和PS2的关系及其预后意义 [J], 杨金巧;陈琳;幸天勇
5.乳腺癌组织PS2与雌激素和孕激素受体的关系及预后意义 [J], 杨金巧;陈琳;范伟
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大鼠白细胞介素2IL2酶联免疫分析

大鼠白细胞介素2(IL-2)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。
检测范围:96T100ng/L-1800ng/L使用目的:本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本白细胞介素2(IL-2)含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠白细胞介素2(IL-2)水平。
用纯化的大鼠白细胞介素2(IL-2)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入白细胞介素2(IL-2),再与HRP标记的白细胞介素2(IL-2)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的白细胞介素2(IL-2)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中大鼠白细胞介素2(IL-2)浓度。
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。
加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
大鼠α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)酶联免疫分析

大鼠α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。
检测范围:96T2.5ng/ml-80ng/ml使用目的:本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠人α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)水平。
用纯化的大鼠人α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入α平滑肌肌动蛋白(α-SMA),再与HRP标记的α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB 在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中大鼠α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)浓度。
试剂盒组成1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。
加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
PS2蛋白在乳腺浸润性导管癌组织中的表达及意义

性 表达与临床病理 因素 间的关系采用 检验 。
及其 与临床病 理 因素 的关 系进 行观察 , 旨在探讨 P 2 S 在乳腺浸润性导管癌的预后判断及 内分泌治疗 方面的 临床应用价值 。
1 资 料 与 方 法
2 1 P 2与 E P . S R、R在 乳腺浸 润性 导管癌表 达的 关 系 全组 5 7例乳腺浸润性导管 癌组织 中 ,S P2阳性率 为 4 .0 ( 45 , R、 R 阳 性 表 达 分 别 为 4 2 1 % 2/ 7) E P 1例
13 方法 .
采用 S—P免疫 组化 染色法 , 作步 骤参 操
照试剂盒说明书进行 , 将乳腺癌组织蜡块 4 m厚切片 经脱蜡 、 水化后 , 0 0 o L柠檬酸盐缓 冲溶 液 ( H 置 . 1m l / p
=
疗都具 有十分重要 的地位 , 以降低复发 和死亡 的风 可 险 。雌激素受体 ( R) E 和孕激素受体 ( R 作为乳腺 P) 癌预后 判断和 内分 泌治疗指 标的价值 已得到公认 , 但 单独依据 E R或 P R来判断 乳腺癌 的预后 和指 导 内分 泌治疗并 不十分可靠 , 临床上 大约有 4 % E 0 R阳性 和 2% ~ 0 E P 0 3 % R、R均 阳性 的患者 对 内分 泌治疗 无效
者均阴性 的 比例 为 8 3 % (/ 4 ; . 3 22 ) 两组 比较差异有 统 计学意义 ( 0 0 ) P< . 1 。在 E R阳性和 阴性病 例 中, S P2 阳性 率 分 别 为 5 . 1 ( 14 ) 1.5 ( /6) 12 % 2 / 1 和 87 % 3 1
采 用 20 0 3版 WH O制 定 的乳 腺癌
组织学分级标 准。根据腺 管形成 、 细胞分 化及核 分裂 像 等 3项 9分 的评 定 标准 , 行组 织 学分 级 : 进 I级 8 例, Ⅱ级 3 2例 , Ⅲ级 1 7例 。 16 统计 学方法 .
雌激素对去卵巢大鼠不同脑区APPβ位点裂解酶表达的影响

雌激素对去卵巢大鼠不同脑区APPβ位点裂解酶表达的影响郭宗君;金丽英;杜芳;张伟;姜长青【期刊名称】《中国老年学杂志》【年(卷),期】2005(25)12【摘要】目的观察内外源雌激素对卵巢切除大鼠大脑皮层、海马CA1区APPβ位点裂解酶(BACE)表达的影响.方法 21只雌性Wistar大鼠随机分为假手术对照组、卵巢切除组(OVX组)、卵巢切除后补充外源性雌激素组(E2组).放免法测量大鼠血中雌激素含量.免疫荧光标记细胞化学法计数皮层区、海马CA1区BACE蛋白表达阳性细胞.结果与对照组和E2组比较,OVX组大鼠皮层区、海马CA1区BACE阳性细胞数显著增加(P均<0.01),血液雌激素含量显著降低(P均<0.01).E2组与对照组比较,两组之间各观察部位BACE表达阳性细胞数和血液雌激素含量无显著差异(P均>0.05).结论体内外雌激素含量的变化可影响大鼠皮质和海马区域BACE表达.【总页数】3页(P1522-1524)【作者】郭宗君;金丽英;杜芳;张伟;姜长青【作者单位】青岛大学医学院附属医院脑血管病研究所,山东,青岛,266003;青岛大学医学院附属医院脑血管病研究所,山东,青岛,266003;青岛大学医学院附属医院脑血管病研究所,山东,青岛,266003;青岛市市立医院急诊内科;青岛市市立医院病理科【正文语种】中文【中图分类】R741.02【相关文献】1.穹窿海马伞切断和卵巢切除对大鼠不同脑区雌激素受体α与淀粉样β蛋白前体蛋白β位点裂解酶共存表达的影响 [J], 金丽英;郭宗君;崔红波2.雌激素对去卵巢大鼠不同脑区胆碱乙酰化转移酶表达的影响 [J], 张伟;郭宗君;辛萍;金丽英3.雌激素对去卵巢大鼠不同脑区酪氨酸激酶A表达的影响 [J], 金丽英;郭宗君;辛萍;张伟;杜芳4.去卵巢及穹窿海马伞切断复合模型大鼠不同脑区雌激素α受体mRNA的表达及倍美力的干预作用 [J], 赵珩;贾晓静;张昱;李晶5.雌激素对去卵巢大鼠不同脑区淀粉样β蛋白前体蛋白β位点裂解酶表达的影响[J], 郭宗君;金丽英;杜芳;张伟;姜长青因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
大鼠白细胞介素2IL-2酶联免疫分析

大鼠白细胞介素2(IL-2)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。
检测范围:96T100ng/L-1800ng/L使用目的:本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本白细胞介素2(IL-2)含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠白细胞介素2(IL-2)水平。
用纯化的大鼠白细胞介素2(IL-2)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入白细胞介素2(IL-2),再与HRP标记的白细胞介素2(IL-2)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的白细胞介素2(IL-2)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中大鼠白细胞介素2(IL-2)浓度。
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。
加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
雌激素诱发大鼠免疫器官退化及与P物质关系的研究

雌激素诱发大鼠免疫器官退化及与P物质关系的研究
刘晓萍
【期刊名称】《郑州大学学报(医学版)》
【年(卷),期】1995(000)004
【摘要】为探讨雌激素对大鼠免疫器官的影响及其机理,用形态方法观察了雌二醇对大鼠淋巴器官的影响,用放射免疫方法(RIA)测定大鼠脑,内分泌腺及血浆中P物质的含量,结果:雌二醇对中枢淋巴器官胸腺和周围淋巴官器均具有明显的抑制与致退化使用,显著抑制巨噬细胞吞噬功能;并使大鼠垂体重量显增加,而肾上腺的结构与重量未见明显改变,使大鼠下丘脑和延髓中P物质含量显著升高(而海马,垂体,肾上腺及血浆P物质含量显著性降低(:
【总页数】1页(P393)
【作者】刘晓萍
【作者单位】不详;不详
【正文语种】中文
【中图分类】R977.12
【相关文献】
1.实验性脾虚证大鼠回肠电-机械活动变化与P物质及血管活性肠肽的关系研究[J], 郭华;曲瑞瑶;常延傧;李利生;王伟;曾文红;曲柏林;孟?
2.大鼠动情周期中雌激素水平与纹状体听觉诱发电位P50关系的研究 [J], 孔淑贞;杨黎江;马元怡;何敏
3.雌激素与大鼠内脏高敏感关系的实验研究 [J], 钟杰;祝金泉
4.结扎大鼠冠状动脉诱发心肌及背根神经节内P物质变化的研究 [J], 张建文;郭政
5.雌性大鼠生殖轴中P物质与卵巢激素关系的研究 [J], 姜岩
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Ps2蛋白 雌激素受体 孕激素受体表达与乳腺癌组织学分级预后的关系

Ps2蛋白雌激素受体孕激素受体表达与乳腺癌组织学分级预后的关系田秀娟【期刊名称】《山西医药杂志》【年(卷),期】2005(034)004【摘要】目的探讨乳腺癌雌激素诱导蛋白pS2、雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)与乳腺癌组织学分级及术后生存期的关系.方法标记的链亲和素-生物素-过氧化物酶法(LSAB)检测pS2、ER、PR在52例乳腺癌中的表达,采用χ2检验进行统计学处理.结果 pS2、ER、PR的表达与组织学分级呈负相关,随乳腺癌分级级别升高而降低,在乳腺癌Ⅰ级和Ⅲ级间,Ⅰ级和Ⅱ级间差异有统计学意义(P<0.01).pS2、ER、PR的表达随乳腺癌病人术后生存期的延长而升高,在5年以上组和5年以下组间差异有统计学意义(P<0.01).pS2的表达与ER有关联.结论 pS2与ER、PR一样,是判断乳腺癌病人预后,指导临床内分泌治疗的有用指标.【总页数】3页(P283-285)【作者】田秀娟【作者单位】大同市第五人民医院,037006【正文语种】中文【中图分类】R737.9【相关文献】1.雄激素受体表达与老年乳腺癌患者肿瘤大小、组织学分级、淋巴结转移、雌激素受体、孕激素受体、CerBb-2的相关性 [J], 屈海鸥;李小雷2.乳腺癌钼靶X线特征与雌激素受体、孕激素受体表达的关系及诊断价值 [J], 刘代良;张诚3.乳腺癌nm23基因和雌孕激素受体的表达与组织学分级及预后关系的研究 [J], 熊晓平;陈修己;杜丽英4.雌激素受体阴性乳腺癌中人表皮生长因子受体2与孕激素受体表达的关系 [J], 王宁;王斌;薛春燕;王雅杰5.PS2蛋白与乳腺癌组织学分级及预后的关系 [J], 高琨;刘静贤;宋桂云因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
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大鼠雌激素诱导蛋白(PS2)酶联免疫分析
试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用。
检测范围:96T
5ng/L - 180 ng/L
使用目的:
本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中雌激素诱导蛋白(PS2)含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠雌激素诱导蛋白(PS2)水平。
用纯化的大鼠雌激素诱导蛋白(PS2)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入雌激素诱导蛋白(PS2),再与HRP标记的雌激素诱导蛋白(PS2)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的雌激素诱导蛋白(PS2)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中大鼠雌激素诱导蛋白(PS2)浓度。
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤
1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀
释。
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、
待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。
加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此
重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色
10分钟.
10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。
测定应在加终止
液后15分钟以内进行。
操作程序总结:
计算
以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标
准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
注意事项
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。
一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4.请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。
如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
保存条件及有效期
1.试剂盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6个月。