生物化学期末考试试题

《生物化学》期末考试试题A注： 1. 本试卷总分100分；2. 学生的总成绩＝平时30％ + 期末70％一、名词解释（12分，每个分）1. Bohr效应：具有氧传递能力的血红蛋白在水溶液或血液中时，如果CO2分压升高或pH降低，此时即使O2分压没有变化，O2饱和度也会减少，O2易从传递体上脱离，这种现象称为波耳效应，是由波耳（N．H．D．Bohr）发现的。

这些效应有利于载运O2的血红蛋白在CO2多的体内组织中放出O2，在肺部与血红蛋白的氧合相配合而适于放出CO2。

2. 增色效应：指DNA在变性后在紫外260nm处吸光值增加的现象，增色效应与DNA解链程度有一定的比例关系，是观察DNA是否发生变性的一个重要指标。

3. H-DNA：又叫tsDNA，三链DNA的缩写符号。

两种类型：嘌呤－嘌呤－嘧啶 (Pu-Pu-Py)型和嘧啶－嘌呤－嘧啶(Py-Pu-Py)型。

中间一条链必须是多聚嘌呤。

三链中，双螺旋的两条正常配对，而第三条链与中间链碱的配对为Hoogsteen配对，即Pu-Pu-Py中形成A-A-T和G-G-C配对，在Py-Pu-Py中形成C+-G-C和T-A-T配对。

4. 必需氨基酸：指人体自己不能合成或合成效率较低的aa，必需从外界食物所获取的aa。

主要有异亮、亮、色、苏、苯丙、赖、甲硫（蛋）、缬、精、组。

5. 活性中心：指在一级结构相距甚远，或者是位于不同肽链上的AA残基通过盘绕折叠而在三级结构上相互靠近，形成一个能与底物结合并起催化作用的位于酶表面的特化的空间区域。

6. 核酸的变性与复性：在某些理化因素作用下，核酸分子的互补碱基对间的氢键断裂，变成单链结构而导致理化性质及生物学性质发生改变的过程为核酸的变性。

在外界因素被去除后，核酸分子有可恢复其双链结构的过程。

7. 三羧酸循环的回补反应：在有氧情况下，葡萄糖酵解产生的丙酮酸氧化脱羧形成乙酰CoA。

乙酰CoA经一系列氧化、脱羧，最终生成CO2和H2O并产生能量的过程，又称TCA循环。

8. 酶原的激活：酶原在一定条件下转化为有活性的酶的过程称为酶原的激活。

二、填空（30分，每空分）1.在SDS-PAGE电泳中，蛋白质的迁移率与其__等电点___无关，只与其___分子量___有关。

2.稳定蛋白质胶体的因素是____表面水化膜____和____表面电荷_______。

3.鉴定蛋白质多肽链氨基末端常用的方法有____FDNB法（2,4-二硝基氟苯法）______和_____Edman降解法（苯异硫氢酸酯法）___。

4.在糖异生途径中，催化3个不可逆反应的酶分别为：___葡萄糖-6-磷酸酶___、___果糖-1，6-二磷酸酶____和____丙酮酸羧化酶__和___磷酸烯醇式丙酮酸羧基酶 ___。

5.单糖与强酸共热脱水而生成___糠醛____类化合物，后者与α－萘酚可生成紫色物，此为糖类的共同显色反应称为__α－萘酚（Molisch）_反应。

6.植物细胞壁骨架的主要成分是___纤维素__，细菌细胞壁骨架的主要成分是__肽聚糖__，虾壳的主要成分是__壳聚糖（几丁质）_。

7.磷脂的基本骨架是__甘油__，鞘脂的基本骨架是__鞘氨醇__。

8.糖酵解过程中有3个不可逆的酶促反应，这些酶是____己糖激酶_____、 ___果糖磷酸激酶_____ 和____丙酮酸激酶_____。

9.磷酸戊糖途径可分为2阶段，分别称为___氧化脱羧阶段______和____非氧化阶段___，其中两种脱氢酶是__6-磷酸葡萄糖脱氢酶_____和____6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶___，它们的辅酶是____ NADP ___。

10.乙醛酸循环中不同于TCA循环的两个关键酶是___异柠檬酸裂解酶______和____苹果酸合成酶____。

11.B型DNA双螺旋的螺距为________，每匝螺旋有___10____对碱基，每对碱基的转角是____36°__。

12.影响酶促反应速度的因素有[E] 、[S]、pH、T（温度）、I（抑制剂）和A（激活剂）。

13.酶促动力学的双倒数作图（Lineweaver-Burk作图法），得到的直线在横轴的截距为-1/K m，纵轴上的截距为1/V max。

14.根据国际系统分类法，所有的酶按所催化的化学反应的性质可分为六类氧化还原酶类、转移酶类、水解酶类、裂合酶类、异构酶类和合成酶类。

15.两类核酸在细胞中的分布不同，DNA主要位于_细胞核___中，RNA主要位于__细胞质__中。

16.核酸的基本结构单位是_核苷酸____，其特征元素为__P__。

17.生物膜的组成主要包括__脂类__和__蛋白质__，此外还有少量的糖类，无机盐，水和金属离子等。

脂类是构成生物膜总体结构的主要成分，其中以__磷脂__为主，其次是糖脂和胆固醇。

18.在DNA分子中，一般来说G-C含量高时，比重_大_，T m（熔解温度）则_高___，分子比较稳定。

19.DNA样品的均一性愈高，其熔解过程的温度范围愈__窄___。

20.与酶催化的高效率有关的因素有邻近效应和定向效应、共价催化、活性中心酸碱催化、张力学说、酶活性部位的低介电区等。

21.GSH的中文名称是____谷胱甘肽 ______，它的活性基团是_____巯基_____。

22.谷氨酸的pK1(α-COOH)＝, pK2 (α-NH+3 ) = , pK R(R基)= ,谷氨酸的等电点为。

三、选择题（21分，每个分）1. 双链DNA的T m较高是由于下列哪组核苷酸含量较高所致：A．A+G B．C+T C．A+T E．A+C2. 在生理条件下，下列哪种基团既可以作为H+的受体，也可以作为H+的供体：B．Lys的ε氨基 C．Arg的胍基 D．Cys的巯基3. DNA变性后理化性质有下述改变：A．对260nm紫外吸收减少C．磷酸二酯键断裂 D．核苷酸断裂4. 含有稀有碱基比例较多的核酸是：A．胞核DNA B．线粒体DNA D． mRNA5. hnRNA是下列哪种RNA的前体？A．tRNA B．rRNA D．SnRNA6. 竞争性抑制剂作用特点是：A．与酶的底物竞争激活剂C．与酶的底物竞争酶的辅基 D．与酶的底物竞争酶的必需基团；7. 哪一种情况可用增加[S]的方法减轻抑制程度：A．不可逆抑制作用 C．非竞争性可逆抑制作用D．反竞争性可逆抑制作用 E．无法确定8. 糖的有氧氧化的最终产物是：B．乳酸 C．丙酮酸 D．乙酰CoA 9. SDS凝胶电泳测定蛋白质的分子量是根据各种蛋白质_____A.在一定pH下所带净电荷的不同C.分子极性不同D.溶解度不同10. 下列哪一项不是蛋白质的性质之一？A．处于等电状态时溶解度最小 B．加入少量中性盐溶解度增加D．有紫外吸收特性11. 下列氨基酸中哪一种是非必需氨基酸？A．亮氨酸 C．赖氨酸 D．蛋氨酸12. 在下列检测蛋白质的方法中，哪一种取决于完整的肽链？A．凯氏定氮法 C．紫外吸收法 D．茚三酮法13. 在有氧条件下，线粒体内下述反应中能产生FADH2步骤是：A．琥珀酸→延胡索酸 B．异柠檬酸→α-酮戊二酸D.苹果酸→草酰乙酸14. TCA循环中发生底物水平磷酸化的化合物是？A．α-酮戊二酸 B．琥珀酰 D．苹果酸四、是非题（10）( 对) 1. 糖酵解过程在有氧无氧条件下都能进行。

( 对) 2. K m是酶的特征常数，只与酶的性质有关，与酶浓度无关。

( 错)3. 从鼠脑分离的己糖激酶可以作用于葡萄糖（K m=6×10-6mol/L）或果糖（K m=2×10-3mol/L），则己糖激酶对果糖的亲和力更高。

( 对) 4. 当底物处于饱和水平时，酶促反应的速度与酶浓度成正比。

( 错) 5. mRNA是细胞内种类最多、含量最丰富的RNA。

( 对) 6. DNA复性（退火）一般在低于其T m值约20℃的温度下进行的。

( 错) 7．脱氧核糖核苷中的糖环3’位没有羟基。

( 错) 8．磷脂是中性脂。

( 对) 9．多数氨基酸有D-和L-两种不同构型，而构型的改变涉及共价键的破裂。

(错) 10．氨基酸与茚三酮反应都产生蓝紫色化合物。

五、. 完成反应式（6分，每空分）1．丙酮酸 + CoASH + NAD+→乙酰CoA + CO2 +（NADH ）+ H+催化此反应的酶和其它辅因子：（丙酮酸脱氢酶）；TPP 、FAD+、Mg22．α-酮戊二酸 + NAD+ + CoASH →（琥珀酰-S-CoA ）+ NADH + CO2催化此反应的酶和其它辅因子：（α-酮戊二酸脱氢酶）；TPP 、FAD+、Mg23．7-磷酸景天庚酮糖 + 3-磷酸甘油醛→ 6-磷酸-果糖 + （4-磷酸赤藓糖）催化此反应的酶：（转醛酶）4．丙酮酸 + CO2 + （ATP） + H2O →（草酰乙酸） + ADP + P i + 2H催化此反应的酶：（丙酮酸羧化酶）5．（UDPG ） + F-6-P →磷酸蔗糖 + UDP催化此反应的酶是：（蔗糖磷酸合酶）6. 异柠檬酸→（乙醛酸）+ 琥珀酸催化此反应的酶是：异柠檬酸裂解酶六、简答题（21分）1. 八肽组成为Asp、Ser、Gly、Ala、Met、Phe、Lys2。

（4分）（1）FDNB与之反应再酸水解，得DNP-Ala；（2）胰凝乳蛋白酶消化后分出一个四肽，其组成为Asp、Gly、Lys、Met，此四肽与FDNB反应生成DNP-Gly；（3）胰蛋白酶消化八肽后，得到组成为Lys、Ala、Ser及Phe、Lys、Gly的两个三肽及一个二肽，此二肽别CNBr 处理游离出Asp。

请写出八肽的顺序及推理过程。

答：由结果（1）得知此肽N－端是Ala；由结果（2）得知此肽C－端四肽分别是Gly－Lys－Met－Asp；由结果（3）得知N端的三肽序列为Ala－Ser－Lys；中间的肽段序列为Phe－Gly－Lys，二肽被CNBr处理后游离出自由Asp，提示这二肽的顺序为Met－Asp，且没有碱性残基。

因此，八肽的完整顺序为：Ala－Ser－Lys－Phe－Gly－Lys－Met－Asp2. 请例举三种蛋白质分子量的测定方法，并简要说明其原理。

（6分）答：方法很多：如渗透、扩散速率、沉降分析法、凝胶过滤法、SDS-PAGE法等。

3. 下列试剂和酶常用于蛋白质化学的研究中：CNBr、异硫氰酸苯酯、丹黄酰氯、脲、6mol/L HCl、β-巯基乙醇、水合茚三酮、过甲酸、胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶。

其中哪一个最适合完成以下各项任务？（6分）（1）测定小肽的氨基酸序列。

（a）异硫氢酸苯酯；（2）鉴定肽的氨基末端残基。

（b）丹黄酰氯；（3）不含二硫键的蛋白质的可逆变性；如有二硫键存在时还需加什么试剂？（c）脲、β-巯基乙醇；（4）在芳香族氨基酸残基羧基侧水解肽键。