卡式法技术介绍
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1 微柱凝胶免疫分析技术(MGIA)的简介
一、微柱凝胶免疫分析技术
1990年,法国人Y. Lapierre发表文章*介绍了一项免疫学检测新技
术:将抗原抗体反应与凝胶分子筛技术相结合,即微柱凝胶免疫实验。
该技术的本质是血凝试验,即红细胞抗原抗体在微柱腔内的凝胶介质中
发生肉眼可见的免疫凝集反应。
微柱凝胶免疫反应的本质是红细胞凝集试验,也可称之微柱凝胶
血凝试验(Microcolumn Gel Heamagglutination Assay,MGHA),在
微柱凝胶管中,红细胞和相应抗体结合后,形成红细胞凝集团块。在一
定离心力下,该凝集团块位于胶表面或胶中;而如果红细胞未和相应抗
体结合,仍为分散的红细胞,在同样的离心力下,红细胞沉降到微柱管
尖底部。
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二、微柱凝胶法的较其他方法的优势
微柱凝胶法是一种新的血型血清学技术,用于常规血型鉴定及抗体
筛检时,由于其具有易于标准化、反应结果可靠、特异性强、灵敏度高
等特点,已在欧美等发达国家作为常规红细胞血型血清学检测技术应用
于临床。美国FDA也已于1994年批准微柱凝胶技术作为红细胞抗体检测
及ABO和RhD血型鉴定的选用方法。
相比传统的玻片法和试管法都有自己的独特优势。
1、相比玻片法有以下优点:
1)准确、敏感,可以检测到微弱的红细胞凝集,并在易于肉眼观
察,防止误判。
2)标本用量少,每个测试孔只需0.8%人红细胞悬液50微升,同时
也减少了污染。
3)判读结果客观,减少了人为因素的干扰,减少人为误差。
3
4)相对密闭系统,保护工作人员免遭感染。
5)结果稳定可保存达一周以上,便于工作人员事后查对,溯源。
6)12份标本可一次离心出结果,有利于临床大量标本检测。
7)在检测混合凝集方面有独特优势。
由于在微柱凝胶法因为抗原抗体量是恒定的,操作标准化,并采取
了特殊的分子筛技术,所以检测到抗原抗体弱反应的强度高于传统的试
管法1,2,具有独特的优势,目前国内也已逐步应用于临床。
还有研究显示3微柱凝胶法对混合凝集(即在一个反应体系中同时
出现阴性、阳性两种反应结果)的呈现在发现ABO血型亚型方面具有明显
的技术优势(许多亚型红细胞在与标准血清反应呈现混合视野凝集,在
传统的玻片法和试管法中不便于发现)。
三、微柱凝胶免疫分析技术的血型检测方面的应用
ABO.RhD血型定型检测卡(单克隆抗体)
该检测卡可让红细胞血型正反定型检测及RhD抗原检测结果在同
一张卡上实现,涵盖国家输血规范血型检测的基本项目,方便快捷。
结果示例如下:下图为一例(A型,RhD阳性)的检测结果:
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案例:海某某,长春某医院患者,用微柱凝胶卡定型为AB型RH(D)
为混合凝集,抗筛阴性(O型RH阳性筛检细胞,患者还未产生抗-D抗体)。
该患一周前在某区医院输入1800ccRH阳性血(经该医院证实),其本人确
为阴性血。这一检测为病人下一步诊断和治疗提供了有力提示,保障病
人安全。
总之:在做ABO血型鉴定时,临床广泛应用的玻片法虽操作简单、
方便快捷,但在临床实际工作中却时有发生血型鉴定错误现象,而且往
往是在患者需要输血治疗申请配血时被发现错定血型,导致临床科室对
检验科产生不良印象,认为检验质量差,检验结果不准确、不可靠。对检
验科工作会产生很大的负面影响。试管法是传统经典的ABO、RhD血型鉴
定方法,其结果准确可靠,但与微柱凝胶法相比,敏感性较差,操作难以
规范化、自动化、检测结果不易保存,而微柱凝胶法用于ABO、RhD血型
鉴定易于自动化、标准化、结果准确可靠,特异性强等优点被许多大医
院所采用。
另外,在输血前相容性检测方面,MGIA技术应用于常规的红细胞
5 血型血清学检测已在国内越来越多地引起关注,各地也都不同程度地开
展了一些MGIA法的相关实验。经过不断地与其它方法对比分析,不论从
血型鉴定,交叉配血,不规则抗体筛检还是Coombs试验来看,所有结果充
分表明MGIA优越于传统抗球蛋白法、木瓜酶法以及凝聚胺法。由于MGIA
法的灵敏度高,特异性好,结果准确,操作简便快速,为其它方法所不能
比拟。在发达国家,MGIA法早已常规应用于红细胞血型血清学检测,而在
国内由于进口试剂价格等方面的原因,阻碍了其全面推广的速度,因此
国产试剂盒的早日推广是适应国内医疗卫生事业发展的趋势。不管怎么说,MGIA法可为临床进一步提供可靠的诊断依据,为早日治愈病患者创
造有利条件。
参考文献:
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定中的应用[J].蚌埠医学院学报,2005,30(1):72-73.
2 周小玉,许进明,华岚,等.微柱凝胶法鉴定ABO血型正反定型不一致原因分析
[J].临床输血与检验,2007,9(4):366-367.
3 于洋,冯倩,林子林,等.全自动微柱凝胶技术在ABO、RhD血型鉴定中的应用
研究[J].北京医学,2008,30(3):165-167.