高效液相色谱仪操作规程
(完整)Waters高效液相色谱仪标准操作规程
1.目的描述 Waters 高效液相色谱仪标准操作规程。
2.适用范围化验室3.责任者化验员应严格遵照该操作规程 , QC 主管负责监督本规程的实施。
4.定义HPLC High Performance Liquid Chromatography , 高效液相色谱仪。
5.安全注意事项5.1有机溶媒有害健康，各溶剂瓶口应封严。
5.2注意检查废液桶中废液应避光，防止废液桶满外溢。
6.规程6.1.Waters HPLC的组成：贮液器输液泵自动进样器分离柱 (柱温箱 )紫外检测器控制及数据处理系统 (Millennium 32化学工作站 )。
6.2. HPLC系统的打开及关闭顺序6.2.1打开顺序•对于分体式：请按泵、进样器、柱温箱、检测器的顺序打开开关，待各部分分别显示初始化完毕后，最后打开M i l l e nn i um32化学工作站。
泵与色谱工作站的连接：对于 510 泵，因为此泵与色谱工作站是单向联系，如要使泵在 Remote 状态下由工作站控制，首先要在泵的键盘上按 Menu 键，待显示屏切换至 Mode 状态下，其状态是Loca ，按 Edit/Enter 键，在 Local 的L 前有闪动的光标显示，按键，Local 转换成Rem，再按Edit/Enter 键，此命令已输入进去, 最后按Stop/Run 键，使泵处于Run 状态这时泵和工作站的连接即告成功。
泵的任何动作都可由工作站来控制。
还应注意这一步工作在每次开机时都要进行。
对于 Alliance 2690 系统：先打开 Alliance 2690 主机、检测器电源开关，待初始化完毕后，再进入 Millennium 32化学工作站。
对于流动相的要求：对于液体试剂应尽量采用色谱纯试剂；对于所用到的固体试剂应采用分析纯试剂；对于水，应采用经纯水机处理过的超纯水；流动相在使用前一定要经 0.45m 的滤膜（滤膜分为水相膜与有机相膜，确保使用正确的滤膜，参见附表 ) 过滤、超声真空脱气方可使用，严禁含盐的流动相未经过滤直接使用。
高效液相色谱仪标准操作规程
目的：建立高效液相色谱仪的标准操作程序，以使操作者正确使用。
范围：本文件适用于高效液相色谱仪的标准操作。
职责：质量管理部QC化验员负责本文件的起草、修订及实施。
程序：1接通电源，打开电脑。
按LC-20AT 上“POWER”键及RID-10A上“POWER”键，接通电源。
接通柱温箱的电源，并设置柱温箱温度为40℃。
2 双击电脑桌面上“LC Solution”，点击“1”进入采集窗口。
3 点击“Advanced”进行高级设置。
在“Pump”项中选择“Flow”模式；流速设置为0.5ml/min，泵压0～1.5MPa；在“Detector A”中选择“Analytical”模式，柱温设置为40℃。
设置完成后点击保存图标。
4 点击“Download”下载该方法。
5 将LC-20AT上旋钮“Draw”逆时针旋转180°，按Purge键，仪器自动清洗泵头，约3分钟后听到提示音（轻微长鸣声）后，顺时针旋转“Draw”180°至原位。
6 按LC-20AT上“Pump”键启动泵。
7 点击“R Flow ON/OFF”图标，系统开始运行，约20—30分钟后，点击“Balance RID （Detector A）”平衡系统。
8 基线平稳后，点击“◇”进行样品信息设置，设置完成后点击“确定”。
9 在进样器中吸入样品后插入手动进样口，将进样阀手柄调至“Load”位置，迅速将样品注入液相色谱仪，再将进样阀手柄调至“Inject”位置，开始采集数据。
10 分析完成后，点击红色的“〇”停止分析。
11 分析不同样品时，可重复“8-10”的操作，直至所有的样品均分析完毕。
12 所有的样品均分析完毕后，将流动相换成水继续运行至基线平稳，将色谱柱及系统中残留的物质清洗干净。
13 点击“R Flow ON/OFF”图标，系统停止运行，关闭采集页面。
按LC-20AT上“POWER”键及RID-10A上“POWER”键，关闭电源。
高效液相色谱仪操作规程
高效液相色谱仪操作规程高效液相色谱仪（HPLC）是一种重要的分析仪器，广泛应用于化学、生命科学、环境监测等领域。
为了保证色谱仪的正常运行和准确分析结果，需要遵守以下操作规程：1. 准备工作a. 首先，确保色谱仪及其附件的电源已接通，并确认仪器处于正常工作状态。
b. 检查溶剂桶内的溶剂是否充足并无杂质，并确认管路连接正常。
c. 检查流动相液位是否正常，并调整泵的流速和梯度程序参数。
2. 样品制备和准备a. 样品应充分溶解并过滤净化，以避免样品中的杂质对色谱分离产生干扰。
b. 选择合适的进样方式（自动或手动），并根据进样方式调整进样器的参数。
3. 进样器操作a. 将样品注射器插入进样口，并注意不要损坏色谱柱。
b. 设置进样体积和进样速度等参数，并进行一次空白进样以清洗进样器。
4. 色谱柱准备a. 定期检查色谱柱是否损坏，并根据需要更换。
b. 根据实验需要选择合适的色谱柱，并注意记录色谱柱的批号和使用次数。
5. 柱温控制a. 根据分析需要选择合适的柱温，并使用温度控制系统保持恒定。
b. 注意避免温度突变和波动，以保证分析结果的准确性和重复性。
6. 检测器操作a. 根据需要选择合适的检测器，如紫外-可见光检测器（UV-Vis）、荧光检测器、电导检测器等。
b. 设置检测器的参数，如波长、增益和灵敏度，并进行基线校准。
7. 数据采集与处理a. 启动数据采集系统，并设置采集参数，如采样率、数据类型和运行时间等。
b. 对采集到的数据进行处理和分析，如峰识别、定量分析和峰面积计算。
8. 清洗和维护a. 实验结束后，关闭色谱柱和进样器的阀门，并用溶剂清洗色谱柱和进样器，以防止堵塞和降低杂质残留。
b. 清洗完成后，注意关闭色谱仪的电源，并按照要求对色谱柱和进样器进行维护和保养。
总结：高效液相色谱仪的操作规程包括准备工作、样品制备、进样器操作、色谱柱准备、柱温控制、检测器操作、数据采集与处理以及清洗与维护等。
遵守这些规程可以确保色谱仪的正常运行和准确分析结果，提高实验效率。
高效液相色谱法标准操作规程
高效液相色谱法标准操作规程1. 目的建立高效液相色谱法标准操作规程，规范高效液相色谱法检验操作，保证检验操作规范化。
2. 范围适用于高效液相色谱法检验操作。
3. 术语或定义N/A4. 职责质量控制部对本规程的实施负责。
5. 程序5.1依据《中国药典》2020年四部及2019年版《中国药品检验标准操作规范》。
5.2 简述高效液相色谱法系采用高压输液泵将规定的流动相泵入装有填充剂的色谱柱，对供试品进行分离测定的色谱方法。
注入的供试品，由流动相带入柱内，各组分在柱内被分离，并依次进入检测器，由积分仪或数据处理系统记录和处理色谱信号。
5.3 对仪器的一般要求所用的仪器为高效液相色谱仪，由输液泵、进样器、色谱柱、检测器和色谱数据处理系统组成，仪器应按现行国家技术监督局“液相色谱仪检定规程”定期检定并符合有关规定。
5.3.1色谱柱最常用的色谱柱填充剂为化学键合硅胶。
反相色谱系统使用非极性填充剂，以十八烷基硅烷键合硅胶最为常用，辛基硅烷键合硅胶和其他类型的硅烷键合硅胶（如氰基键合硅烷和氨基键合硅烷等) 也有使用。
正相色谱系统使用极性填充剂，常用的填充剂有硅胶等。
离子交换色谱系统使用离子交换填充剂; 分子排阻色谱系统使用凝胶或高分子多孔微球等填充剂；对映异构体的分离通常使用手性填充剂。
填充剂的性能（如载体的形状、粒径、孔径、表面积、键合基团的表面覆盖度、含碳量和键合类型等）以及色谱柱的填充，直接影响供试品的保留行为和分离效果。
孔径在15nm(lnm=10A)以下的填料适于分析分子量小于2000的化合物，分子量大于2000的化合物则应选择孔径在30nm以上的填料。
除另有规定外，分析柱的填充剂粒径一般在3～10μm之间。
粒径更小(约2μm)的填充剂常用于填装微径柱（内径约2mm) 。
使用微径柱时，输液泵的性能、进样体积、检测池体积和系统的死体积等必须与之匹配；如有必要，色谱条件也需作适当的调整。
当对其测定结果产生争议时，应以品种正文规定的色谱条件的测定结果为准。
高效液相色谱仪操作手册(戴安全自动)
液相色谱操作规程-U3000(全自动)一、操作前准备:1.1流动相的配制:1.1.1根据所供试品的性质、相关的文献资料、工作经验等按比例配制流动相。
1.1.2根据流动相的性质确定采用有机膜(0.45um)还是水相膜(0.45um)对流动相进行过滤。
1.1.3将过滤后的流动相进行超声脱气10~15分钟。
1.2对照品供试品处理:1.2.1称取或量取适量的对照品或供试品,用适当的溶剂(最好采用流动相或流动相的主成分)进行充分溶解(也可借助超声波进行超声溶解),使其浓度为0.1~1mg/mL(根据检测结果再适当调节溶液的浓度)。
1.2.2根据对照品或供试品的性质确定采用有机针头滤膜(0.45um)还是水相针头滤膜(0.45um)进行过滤。
1.3色谱柱的选择:根据样品的性质选择适当的色谱柱。
二、开机:2.1打开电源,打开仪器接线板电源开关;2.2打开电脑显示器电源,打开电脑主机电源,启动电脑;2.3依次打开泵、自动进样器、柱温箱、检测器的电源;等待各个部件自检完成2.4双击屏幕右下角“服务管理器”快捷图标,出现对话界面后点击“启动仪器控制器”启动,等显示“本地仪器控制器运行空闲”,关闭界面。
2.5双击在桌面上的Chromeleon 7图标(工作站主程序)。
2.6在左下方点击仪器,则在右边会自动显示该仪器控制面板2.7 旋开泵上的排液阀(两圈以上);设置A通道为100%,点击“冲洗”,然后再出现的对话框中点击“忽略并执行”;(默认冲洗5分钟);然后用同样的方法分别“冲洗”流路中其他通道气泡;排完气泡后关闭排液阀;2.8设置流动相的比例及流速后,点击“马达”。
此时泵自动会以设置的流速进行运行。
2.9在控制面板“自动进样器”控制框中,分别执行“灌注注射器”,“清洗缓冲环”,“清洗针外壁”,执行“到进样位置”;(操作过程中注意注射器有没有气泡。
如有先机器排气,如果不行手动拆除排气泡。
)3.0 在控制面板“柱温箱”控制框中,设置准备分析样品所使用的柱温箱温度。
高效液相色谱仪的操作规程
高效液相色谱仪的操作规程
说明：高效液相色谱仪应安装在有强力通风的实验室中，实验室的高处和低处应设置两个通风口，以利于低沸点和高沸点有机溶剂蒸汽的排放，以保证实验室工作
人员的安全。
一．目的：提供通用的高效液相色谱仪的操作规程
二．范围：适用于侨昌化学有限公司高效液相色谱仪的操作
三．操作规程
1.准备好用作流动相的各种溶剂，经过滤（通过≤0.5um的滤膜）、脱气后，按比例配好
置于储液罐中。
梯度洗脱时，每种溶剂置于一个储液罐中，将溶剂过滤器插入储液罐底部，
2.将选用的高效液相色谱柱安装在流路中，拧紧连接的柱接头。
3.检查并连接好电路，将检测器输出信号线与数据处理系统连接好。
4.打开高压输液泵电源开关，调节色谱流动相流量 1.0ml/min。
（对内径 4.6mm、柱长
10—25cm色谱柱，填充5—10um填料，柱前压约6—15MPa）。
5.PURGE,冲洗泵头3-5MIN
6.开泵，平衡色谱柱系统。
7.打开可变波长紫外吸收检测器电源，调节好检测波长，排除吸收池中的气泡，待检测器
输出的基线稳定后，就可进行分析。
8.检测
9.若使用折光指数检测器，打开电源后，首先确定检测器温度，待恒温后，再选定待测的
折光指数间隔，待基线稳定后可进行分析。
10.如欲进行梯度洗脱，可由梯度控制单元设定欲进行的梯度洗脱程
序，进样后就可按梯度洗脱程序进行分析。
11.分析结束后，继续用流动相清洗进样阀和检测器约10—20min。
12.依次关闭检测器、梯度洗脱装置，高压输液泵的电源。
高效液相色谱仪操作规程
高效液相色谱仪操作规程1．开关机顺序●开机顺序：打开LC各单元电源－控制器电源－电脑－LC-Solution工作站，开机后能听到“哔”声。
●关机顺序：与开机顺序相反，即先关闭LC-Solution工作站－控制器－LC各单元电源2．流动相及样品的准备●流动相配制所用的有机相必须是色谱级的，所用的水必须是双重蒸馏水。
流动相必须经0.45um 的微孔滤膜过滤后方能进入LC系统。
水和有机相所用的微孔滤膜不同，有机相（如甲醇）的过滤用F膜，水用水膜。
●样品溶液亦必须用0.45um 的微孔滤膜过滤后才能进样。
3．工作站的进入及系统的开启●双击桌面上的“labsolution”图标，选择“operation”项并单击，在弹出窗口后按OK进入工作站。
●首先打开A、B泵上的排空阀（open方向旋转180度）。
然后按二泵面板上的“purge”键开始自动清洗A、B流路3分钟，然后在分析参数设置页中设置流速1ml/min，BCONC 0％，并设置合适的检测波长，柱温，停止时间。
在完成后点击“Download”将分析参数传输至主机。
●分析方法的保存：选择file－save method file as－取名保存文件●系统的启动：点击“instrument on/off”键开启系统（此时泵开始工作。
4．进样准备●观察基线及柱压，待基线平直（－5～80mv），压力稳定（0.5Mpa内）时方可进样。
5. 进样●点击助手栏中的“single start”键，弹出对话框，在对话框中输入“sample name”“method”“data file”等。
●填完后点击“start”，出现触发窗口，进样，仪器开始自动采样分析。
6. 数据文件的调用及查看●点击助手栏中的“Postrun analysis”键，打开数据处理窗口。
●打开文件搜索器，定位至数据文件所在文件夹，选择文件的类型，双击文件名即可打开数据文件（此时可以查看峰面积、保留时间等参数）。
Agilent1100高效液相色谱仪操作规程
Agilent1100高效液相色谱仪操作规程Agilent 1100高效液相色谱仪操作规程一、引言Agilent 1100高效液相色谱仪是一种常用的分析仪器，广泛应用于生物医药、环境监测、食品安全等领域。
本文将详细介绍Agilent 1100高效液相色谱仪的操作规程，以帮助用户正确、高效地使用该仪器。
二、仪器准备1. 检查仪器是否处于正常工作状态，包括电源是否连接、仪器是否通电等。
2. 检查仪器各部件的完整性，如进样器、泵、柱箱、检测器等。
3. 检查进样器的进样针是否干净，如有污染应及时清洗。
4. 检查溶剂瓶是否充足，必要时更换。
三、样品准备1. 根据实验要求准备样品，并确保样品的纯度和浓度符合要求。
2. 准备样品溶液，注意溶解度和稳定性。
3. 如需稀释样品，请使用纯净溶剂，并按照一定比例稀释样品。
四、仪器操作1. 打开Agilent 1100高效液相色谱仪的电源，确保仪器处于正常工作状态。
2. 打开色谱软件，并进行系统初始化。
3. 在色谱软件中设置实验方法，包括进样量、流速、梯度程序等。
4. 打开进样器盖，将样品注射器插入样品瓶中，吸取适量的样品溶液。
5. 关闭进样器盖，将样品注射器插入进样器，并按下进样按钮进行进样。
6. 打开泵的开关，调节流速至所需数值。
7. 检查柱箱的温度设置，根据实验要求进行调节。
8. 打开检测器，并设置检测器的参数，如波长、灵敏度等。
9. 开始实验运行，观察色谱图的变化并记录实验数据。
10. 实验结束后，关闭泵、检测器等设备。
11. 关闭色谱软件，并保存实验数据。
五、日常维护1. 每次使用后，及时清洗进样器和柱箱，避免样品残留。
2. 定期检查泵的密封件，如有磨损应及时更换。
3. 定期校准检测器，确保准确性和稳定性。
4. 定期更换柱子，避免柱子老化影响实验结果。
5. 清洗仪器外壳，保持仪器的整洁。
六、故障排除1. 若发现仪器无法正常启动，检查电源和连接线是否正常。
2. 若发现进样器无法正常工作，检查进样针是否堵塞或损坏。
高效液相色谱仪使用与操作规程
4 、检查仪器各部件的电源线、数据线和输液管道是否连接正
常。
第二步、开 机
接通电源，依次开启不间断电源、四 元泵、自动进样器、柱温箱、检测器，待 泵和检测器自检结束后，打开电脑显示器、
主机，最后打开色谱工作站。
一）参数设定
1、 波长设定： 2 、流速设定： 3 、流动相规定的流动相冲洗系统，一般最少需6倍柱体积
的流动相。
检查各管路连接处是否漏液，如漏液应予以排除。
观察泵控制屏幕上的压力值，压力波动应不超过1MPa。如
超过则可初步判断为柱前管路仍有气泡，按检查管路后再操
作。
观察基线变化。如果冲洗至基线漂移<0.01mV/min，噪声
二、样品
1、采用过滤或离心方法处理样品，
确保样品中不含固体颗粒； 2、用流动相或比流动相弱（若为反
相柱，则极性比流动相大；若为
正相柱，则极性比流动相小）的 溶剂制备样品溶液，尽量用流动
相制备样品液；
3、手动进样时，进样量尽量小，使 用定量管定量时，进样体积应为 定量管的3～5倍；
第四步、注意事项
人的方法及实验结果；
3、使用手动进样器进样时，在进样前和进样后都需用洗针液洗净进样针筒， 洗针液一般选择与样品液一致的溶剂，进样前必须用样品液清洗进样针
筒3遍以上，并排除针筒中的气泡；
4、溶剂瓶中的沙芯过滤头容易破碎，在更换流动相时注意保护，当发现过 滤头变脏或长菌时，不可用超声洗涤，可用 5%稀硝酸溶液浸泡后再洗
四、出现肩峰或分叉
1.样品体积过大
1.用流动相配样,总的样品体积小于第一峰 的15% 2.样品溶剂过强 3.柱塌陷或形成短路通道 4.柱内烧结不锈钢失效 2.采用较弱的样品溶剂 3.更换色谱柱,采用较弱腐蚀性条件
高效液相色谱仪操作规程
高效液相色谱仪操作规程高效液相色谱仪（High-performance liquid chromatography, HPLC）是一种对样品进行分离、检测的仪器。
对于化学、生物等领域的研究者来说，熟练掌握HPLC 的操作规程非常重要。
本文将详细介绍高效液相色谱仪的操作流程和注意事项。
设备准备在操作HPLC仪器之前，需要先对设备进行准备。
首先，需要检查仪器周围的环境是否清洁整洁。
注意检查废液罐、洗涤液罐的液位，以免在后续的使用中发生意外。
其次，需要准备好各种试剂和标准品，确保它们的适用性和相应的浓度范围。
需要使用高纯度的溶剂，在使用之前应先过滤，去除其中的杂质，保证后续操作的准确性和稳定性。
最后，对仪器进行预热操作。
通常情况下，需要对色谱柱和检测器进行预热，保证它们的温度稳定。
样品的制备样品的制备是至关重要的一步。
通常情况下，为了提高样品的净化程度和浓度，需要使用不同的制备方法，如提取、稀释、过滤等。
在进行样品制备时，需要注意以下几点：1.确认样品是否熔点低于所用的溶剂的沸点；2.确认样品是否需要进行提取或加强洗涤效果；3.对于样品的稀释和过滤操作，需要注意其可能带来的影响。
色谱柱的选择选择合适的色谱柱对于操作效果的影响很大，需要充分考虑实验的目的和测试要求进行选择。
选择色谱柱时，应注意以下几点：1.选择合适的材料和孔径；2.确认所选柱是否能够满足测量要求；3.确认所选柱的分离效应是否满足实验要求。
操作流程1.开机操作：根据仪器所得操作指南进行开机操作。
2.准备工作：将所需样品移至自动进样器，调整电量，并确认流速和溶剂比例是否正确。
3.洗涤操作：洗涤色谱柱，将废液排出废液罐中。
4.样品进样：按照操作指南将样品注入样品进样器中。
5.柱温控制：调节色谱柱的温度以控制柱的温度稳定。
6.流速控制：根据样品要求调节流速。
7.数据收集操作：实时收集并记录数据，如果需要，可以修改柱温、流速等操作参数。
8.数据处理：对数据进行处理和分析。
UltiMate 3000 高效液相色谱仪标准操作规程
目的：正确掌握和运用UltiMate 3000高效液相色谱仪标准操作规程标准操作规程。
范围：适用于UltiMate 3000高效液相色谱仪标准操作规程。
职责：QC操作人员操作步骤：1、接通所有电源。
2、设置泵流速（一般为1.00ml/min）3、设置цV波长（一般为254nm）。
4、色谱条件需要设置柱温时要设置柱温（一般情况下不需要），然后oven。
5、启动泵，打开在线色谱工作站。
6、方法6.1 采样控制：采样时间的设置；选采样结束自动积分；自选动方式—前缀+计时；设置文件前缀；最后采样。
6.2 积分：选面积；选归一法，设置最小峰面积，最后采用。
6.3 谱图显示：设置时间显示范围最大值与采样结束时间一致，最小值为0；设置电压显示范围；最大值由峰高决定，最小值一般为1/10最大值为宜；最后采用。
7、数据采集：开液相约半小时后，цv校正零点，单击零点校正。
8、进样：自动进样，把样品放进指定的区域，在运行栏里写上对应编码。
9、选积分，把归一法换成外标法（或其他方法），最后采用。
9.1 选组分表，选谱图，双击样品，双击所需谱图，选全选，设置峰名，最后采用，选OK，选校正，选组分含量，输入标准含量，选ok ,加入标样，打开谱图，校正完毕。
10、测试完毕，选着甲醇通道进行清洗。
11、关闭系统：先关闭电脑，然后关掉灯，泵和柱温，最后关电源。
12、保养及注意事项12.1 要经常使用空调，控制高效液相色谱的温度和湿度。
12.2 启动泵压力一定不要过大，正常一般在4MPA左右。
12.3 使用前后，要清洗系统，要清洗进样针。
12.4 流动相和样品溶液一定要经超声.过滤处理后使用。
高效液相色谱仪操作规程
高效液相色谱仪操作规程1 溶剂输送泵操作1.1 安装后的准备1.1.1 在烧杯中装入大约100mL异丙醇，在烧杯中放入吸滤器，将一段SUS 管的一端连接在泵出口，而另一端放入烧杯中。
1.1.2 将排液管的一端连接到排液管接口上，另一端放入废液瓶中。
1.1.3 打开电源ON，显示初始屏幕。
1.1.4 逆时针方向转动排液阀180度，打开排液阀。
按purge键，泵开始运行，指示灯亮。
1.1.5 冲洗完毕后，按一次func键，进入流速设定状态，并且设定流速1mL/min。
1.1.6 将排液阀旋钮顺时针方向旋转到底，关闭排液阀。
1.1.7 按pump键，泵启动，指示灯亮。
大约3--5分钟后，再按pump键，泵停止运行，指示灯灭，完成操作准备。
1.2 运行的检查1.2.1 开始运行前务必确保：储液瓶中装有流动相，并且吸滤器已经放入储液瓶中。
排液管的另一端已经放入废液瓶中。
1.2.2 将排液阀旋钮逆时针方向旋转180度，打开排液阀。
1.2.3 按CE 键返回到初始屏幕。
按pump键，泵大约以1ml/min的流速运行（指示灯亮）。
1.2.4 观察流动相流出排液管大约10秒钟。
在此期间，流动相应连续流出并且无气泡出现。
1.2.5 再按pump或purge键，泵停止运行，指示灯灭。
1.3 上面两步完成后仪器进入工作状态。
2 紫外—可见检测器操作2.1 按下电源开关，打开仪器，将发生如下情况。
2.1.1 显示板上所用光点及指示灯亮。
自动检查内存，瞬间显示控制程序的版本号。
2.1.2 预热大约20sec，仪器的单色器找到其初始位置（大约1分钟）。
2.1.3 （使用氘灯的亮线（656nm）自检波长的准确性（大约10 sec）。
2.1.4 如果没有检查出错误，显示正确信息，几秒钟后，由初始屏幕代替原信息2.1.5 如果自检没有错误，屏幕显示正确，此时可以进行操作。
为初始状态，将显示初始屏幕。
2.2 设定测定波长2.2.1 按CE键。
高效液相操作规程
高效液相操作规程一、目的本操作规程旨在规范高效液相色谱（HPLC）的使用流程，确保实验的准确性和重复性，同时保障操作人员的安全。
二、适用范围本规程适用于所有使用高效液相色谱仪进行分析的实验室人员。
三、操作步骤1. 准备工作a. 确保所有使用的试剂纯度符合要求，且无污染。
b. 检查并清洁色谱柱，保证无残留物影响分析结果。
c. 根据实验要求准备流动相，并调整至适当比例。
2. 仪器开机a. 打开电源，预热仪器至工作温度。
b. 检查并确保所有管道连接正确无漏液现象。
c. 启动色谱软件，进行系统自检。
3. 样品准备a. 根据实验要求，准确称量并溶解样品。
b. 通过适当方式（如过滤或离心）去除样品中的不溶物。
4. 样品注射a. 使用适当的注射器抽取样品。
b. 打开注射口，准确注射样品，然后封闭注射口。
5. 分析运行a. 根据实验方法设置流动相流速、柱温等参数。
b. 启动分析程序，实时监控色谱图谱。
c. 记录并保存分析数据。
6. 结束操作a. 关闭分析程序，停止流动相输送。
b. 清洗系统，包括色谱柱和注射器。
c. 关闭仪器电源，清理工作台面。
四、注意事项1. 在操作过程中应穿戴适当的实验室防护装备。
2. 避免直接接触有毒或腐蚀性的试剂和样品。
3. 定期对仪器进行维护和校准，确保分析结果的准确性。
4. 遇到任何异常情况，应立即停止操作并报告给实验室负责人。
五、安全措施1. 熟悉并遵守实验室安全规程。
2. 操作过程中应使用防护眼镜、实验服和手套。
3. 对于易挥发或有毒溶剂，应在通风良好的环境下操作。
4. 紧急情况下，立即启动紧急冲淋设备，并寻求医疗救助。
六、记录与报告1. 记录所有操作参数和样品分析结果。
2. 对于任何偏离标准操作的情况，应详细记录并报告。
3. 定期对操作记录进行审核，以优化操作流程和提高分析质量。
高效液相色谱仪操作规程
高效液相色谱仪操作规程
《高效液相色谱仪操作规程》
一、实验目的
本实验旨在通过高效液相色谱仪分析样品，准确测定目标化合物的含量，并学习高效液相色谱仪的操作方法和技巧。
二、实验设备
1. 高效液相色谱仪
2. 注射器
3. 色谱柱
4. 移液管
5. 色谱仪软件
三、操作步骤
1. 打开高效液相色谱仪的电源并进行系统初始化，启动色谱仪软件。
2. 调整流速，进样量等参数，使得实验条件符合要求。
3. 将样品通过移液管注入色谱柱中，注意避免样品泡沫和气泡的产生。
4. 设置色谱条件，如梯度洗脱，流速等，启动色谱分析。
5. 记录实验数据和结果，并进行数据处理和分析。
6. 清洗色谱仪，保持设备清洁。
四、实验注意事项
1. 在操作色谱仪时，要严格按照操作步骤进行，严禁随意更改参数。
2. 在进行样品进样时，要小心操作，避免产生气泡和样品泡沫。
3. 在进行色谱分析时，注意梯度洗脱条件的设置，保证分析结果准确。
4. 在实验结束后，及时清洗色谱仪，保持设备干净。
五、实验结果
根据实验数据和结果，可以得出目标化合物的含量和纯度，并进行结果的解释和分析。
通过《高效液相色谱仪操作规程》的学习，使我们更加熟悉高效液相色谱仪的操作方法和技巧，能够准确进行样品分析，为科研工作的开展提供了重要的技术支持。
高效液相色谱法操作规程与注意事项
⾼效液相⾊谱法操作规程与注意事项⾼效液相⾊谱法操作规程与注意事项1.程序1.1.仪器及性能要求：所⽤的仪器为⾼效液相⾊谱仪，由泵系统，进样系统，⾊谱柱，检测器和⾊谱数据处理系统组成。
1.1.1.泵系统：HPLC泵系统通过⾼压⼒管和设备从溶剂瓶中吸取计量的流动相到柱⼦中。
现⾏的泵系统有⼀元或多元计算机控制的计量泵组成，这些泵可以按照梯度洗脱的要求改变流动相的⽐例或者是按等度洗脱的要求混合流动相。
1.1.2.进样系统：化合物被溶解在流动相或合适的溶剂中，可以通过⼿动进样器或定量环，或⾃动进样器转移到流动相中。
⾃动进样器由可存放进样瓶的卡盘组成，进样瓶的顶部有⼀个可以刺⼊的隔膜，进样针通过这个隔膜将样品转移到⼀个定量环中然后输送到⾊谱系统中。
1.1.3.⾊谱柱：最常⽤的⾊谱柱填充剂为化学键合硅胶。
反相⾊谱系统使⽤⾮极性填充剂，以⼗⼋烷基硅烷键合硅胶最为常⽤，⾟基硅烷键合硅胶和其他类型的硅烷键合硅胶（如氰基键合硅胶和氨基键合硅胶）也有使⽤。
正相⾊谱系统使⽤极性填充剂，常⽤的填充剂有硅胶等。
离⼦交换⾊谱系统使⽤离⼦交换填充剂量；分⼦排阻⾊谱系统凝胶或系统⾼分⼦多孔微球等；对映异构体的分离通常使⽤⼿性柱。
除另有规定外，柱温为室温。
1.1.4.检测器：常⽤的检测器包括紫外分光检测器，⽰差折光检测器，⼆极管阵列检测器。
固定波长检测器在单⼀波长下运⾏，典型的波长是254nm，通过低压⼒的汞灯发射。
可变波长的检测器包含持续的能源，例如氘灯或⾼压⼒氙灯，通过单⾊器或⼲涉过滤器产⽣⼀定波长的单⾊光。
1.2.系统适⽤性试验1.2.1.为了确定最终运⾏系统的有效性，应当进⾏系统适⽤性试验。
整个系统可以⽤以下指标来评价：信噪⽐、理论塔板数，分离度，重复性，拖尾因⼦，其指标及计算⽅法应在相关分析⽅法中予以规定，如果没有专门的规定，按以下⽅法进⾏计算：信噪⽐：⽤于评价⾊谱系统检测微量物质的能⼒，美国药典的计算公式：S/N=2H/h，H为峰顶到基线的距离，h为基线中噪声峰最⼤值与最⼩值的差，该段基线需取≥5倍半峰⾼宽的距离，如果有可能，⽬标峰两侧取相等的距离（如图1）。
高效液相色谱（HPLC）操作规程
高效液相色谱（HPLC）操作规程一操作1.准备工作⑴流动相的准备应根据实验选择合适的流动相，所有流动相原则上应选择HPLC级别，水应选择超纯水，并应保持新鲜。
所有流动相在进行实验前应经过相应的脱气处理，脱气时间应根据流动相的量相应增加，但一般超声脱气不应少于20min。
在实验过程中应保证足够的流动相，流动相的量与流速、洗脱时间等有关，应根据具体情况进行准备。
⑵样品的准备对于待测的样品，在进样之前应经过滤膜过滤，根据样品的不同选择不同种类、不同直径的滤膜。
2. 排气打开purge阀，键入stop→prime，直到无气泡停止stop。
B泵同样操作。
关闭purge阀。
3. 开机打开电脑主机和显示器，点击Galaxie，进入工作站。
选择系统，点击Agilent HPLC.点击overview，可观察仪器各部分状态。
打开泵及检测器的电源。
二 分析方法建立1.进入工作站系统界面。
点击数据，文件→新建→方法，出现视窗，点击前进即可。
键入方法名和相应描述→点击ok后出现方法文档。
2.210的设定点击控制→210图标→Elution。
选择流动相A和B的种类。
Compressibility、Pressure Constant以及Refill Time属于内置参数无需设定。
设置A、B流动相的比例，通过改变B的比例设定。
如需梯度洗脱，则根据方法对Equilibrium Time 和Hold Time进行设定。
点击Misscellaneous。
Start Mode选择Inject Trigger on Pump A。
End of Sequence 选择Leave Pump on。
210设定结束。
3.325的设定点击325图标，选择Signal。
其中Detector Bunch Rate建议设置成2（10Hz），Noise Monitor Length建议设定成64，Response Time建议设定0.5。
根据方法设定相应波长。
waters高效液相操作规程
Waters 高效液相操作规程1. 简介高效液相色谱（High-performance liquid chromatography，HPLC）是一种广泛应用于化学、生物、医药等领域的分析技术。
Waters 公司是高效液相色谱仪器和耗材的主要供应商之一，本文将介绍 Waters 高效液相操作规程，以确保用户能正确、高效地操作 Waters 高效液相色谱仪器。
2. 仪器准备在进行高效液相色谱操作之前，首先需要准备好仪器。
以下是准备步骤：2.1 仪器检查检查仪器是否处于正常工作状态，确保所有液体泵、进样器、检测器等部件均正常联通。
2.2 操作软件启动启动 Waters 高效液相色谱仪器的操作软件，并连接仪器。
确保软件能够正常与仪器通讯。
2.3 样品准备根据分析目的，准备好待测样品溶液，并根据需要进行适当稀释或前处理。
3. 方法设置3.1 选择方法根据分析目的选择合适的方法。
在 Waters 高效液相色谱仪器操作软件中，点击“Method”（方法）选项卡，选择已有方法或新建方法。
3.2 参数设置根据分析需求设置方法参数，包括流速、柱温、分析时间等。
在操作软件的方法设置界面中进行参数设置。
3.3 样品进样选择进样器类型（自动或手动），设置进样体积和进样方式。
将样品溶液注入进样器，并进行相关设置。
4. 色谱柱操作4.1 切换柱根据需要，选择合适的色谱柱，并确保柱已经连通到色谱系统中。
4.2 柱平衡对于新柱，需要首先进行柱平衡。
在操作软件中选择柱平衡功能，根据提示进行操作。
5. 运行实验5.1 实验开始确认实验条件设置正确后，点击操作软件中的“Run”按钮，开始实验运行。
5.2 监控运行在实验运行过程中，密切监控柱压、流速和检测器信号等参数，确保实验正常进行。
5.3 数据记录实验运行结束后，保存实验数据。
点击操作软件中的“Save”按钮，选择保存路径和文件名。
6. 仪器关闭6.1 实验结束实验完成后，点击操作软件中的“Stop”按钮，停止实验运行。
高效液相色谱仪标准操作规程
高效液相色谱仪标准操作规程1目的建立高效液相色谱仪(Waters2695-2996Allianee)标准操作规程，为了使操作者操作高效液相色谱仪(Waters2695-2996Allianee)更规范，保证结果更精确。
2范围适用于高效液相色谱仪(Waters2695-2996Allianee)标准操作规程。
3职责操作者。
4程序4.1开机4.1.1打开Allianee电源开关，仪器进入自检状态。
4.1.2打开检测器，“STATUS”闪烁，4分钟后“LAMP”亮，仪器正常。
4.1.3点击menu/Status进入“STATUS”界面，按direactfunction，选择dryprime后，选择“A/B/C/D”四个泵，点击“Enter”，管道快速充满液体。
4.1.4打开电脑，点击“Empower”登陆，输入帐户“system”，密码“manage”，进入“EmpowerPro”。
4.1.5在配置系统中新建一项目。
4.1.6点击“运行样品”，选择“项目”，3分钟后仪器进入运行界面。
4.2样品检测4.2.1点击“编辑”，编辑仪器方法并保存方法名。
4.2.2点击“新建方法组”，编辑方法组名。
(要求方法组与仪器方法同名)4.2.3标识样品名、进样品/进标准品、样品位置、进样体积、运行时间后，于“file”中保存参数4.2.4点击“准备”，仪器显示“准备进样”后，点击进样。
4.2.5点击鼠标右键，选择“波长”和“正好运行时间”，保存参数4.3数据处理4.3.1点击“浏览项目”，于“进样”栏中双击所选的样品名，进入“通道”栏，双击所选的样品名，进入样品数据主窗口4.3.2选择波长，点击“提取色谱”后，积分或以处理方法向导处理数据，保存处理方法后，于“file”“保存”中保存“全部”。
4.4打印报告4.4.1于所选“浏览项目”结果栏中，选择已处理好的数据（如果没有，点击更新），点击右键，选择预览报告。
4.4.2选择报告方法，确定后，进入报告预览状态。
高效液相色谱仪操作规程
高效液相色谱仪操作规程
一、所需流动相经过滤、脱气处理后待用。
安装好色谱柱。
二、检查供电电源是否稳定，各部件连接是否牢固。
三、开启仪器检测器和泵电源，待检测器电源指示灯由黄灯变成绿灯后，开启
仪器工作站，即双击桌面上图标LCwin1.0。
四、点击工作站中控制采集，点击开启，待仪器自检通过后，进入仪器控制采
集界面。
五、依次用甲醇、甲醇：水=2：8、流动相进行冲洗色谱系统，每次更换更换溶
液时，均需拧开放空阀，选择菜单泵下的快速冲洗模式，选定合适的时间进行冲洗，赶走泵内气泡。
确定泵内无气泡后，停止冲洗模式，关闭放空阀。
六、更换换上流动相后，按样品分析条件设置选择合适的流速、波长。
待色谱
设备达到平衡状态（柱压稳定，工作站基线稳定，一般需30-40min）后，即可进样分析。
七、分析完毕后，流动相中存在缓冲盐等溶剂，需先用甲醇：水=2:8，进行冲洗
至少30min，再用甲醇冲洗，待柱压降至正常值（依色谱柱而定，即柱压稳定后），停泵。
柱压降为零后关闭检测器和泵的电源。
八、样品分析应做好原始纪录，内容包括分析样品名称、送样时间、分析时间、
样品编号、检测数据、报告结果、报告时间、送样单位、分析员以便统计和查阅。
九、仪器如出现故障，应及时报告专业维修单位或专职维修人员，未经专业维
修培训或未取得维修资格证书的不能进行维修工作。
十、仪器室内严禁吸烟或进行任何无关明火操作。
仪器室内应配备二氧化碳灭
火器，分析人员应能正确操作使用。
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高效液相色谱仪操作规程
1开机
先打开电脑，再依次接通2695分离单元、检测器和打印机的电源（注：在打开2424蒸发光散射检测器电源之前，先开启气体供应）。
接通2695分离单元后，约20秒仪器自检，约1分钟后，显示主屏幕，此时继续各部件的初始化，待主屏幕上主标题区出现“Idle”仪器自检通过，进入待命状态。
2溶剂管理系统的准备
2.1流动相的脱气
确认所有溶剂管路都充满溶剂，按[Menu/Status]，进入“Status（1）”屏幕，光标选“Degasser”按[Enter]显示选项屏幕，Mode为“on”。
2.2启动溶剂管理系统
2.2.1干启动
当溶剂的管路是干的或是需要更换溶剂时，在“Status（1）”屏幕下，按[Direct Function]，光标选中“Dry Prime”，按[Enter]，显示“Dry Prime”屏幕，按欲启动的溶剂管路的屏幕键，如[Open A]，光标选“Duration”，按数字键输入时间（一般为5分钟），按[Continue]，待限定时间结束后，重复操作，使实验所需的各溶剂管路均启动、排气并充满流动相。
2.2.2湿启动
在“Status（1）”屏幕下，光标选“Composition”中欲使用的流动相，输入100%，按[Direct Function]，光标选“Wet prime”，按“Enter”，显示Wet prime”屏幕，输入流速和时间（5ml/min和5min）按[OK]。
待限定时间结束后，对每种流动相重复操作。
3样品管理系统的准备
A管带黄色标记、B管带蓝色标记号、C管带红色标记、D管带绿色标记，绿色管为冲洗泵头用，白色管为冲洗进样器用，所用溶剂均为甲醇：水=50%（v/v）。
将样品瓶插到样品盘合适的位置，打开样品仓门，显示“Door is Open”屏幕，装入样品盘，按[Next]，直至所有样品盘装毕，关仓门。
4编辑分析方法及执行样品分析表
4.1创建项目
双击电脑桌面图标“Empower”，用户名输入“system”密码输入“manager”选中操作项目和色谱系统→确定。
在菜单栏“管理”→创建新项目→选择父项目→下一步→输入表空间值→按“下一步”逐步设置→完成→管理→改变/项目，在该窗口切换项。
4.2编辑方法组
调用方法组编辑向导→新建→设置检测器参数→2695主机参数（流量、柱温、流动相比例、系统压力上下限等）→保存仪器方法→选择同使用该方法组的数据有关的仪器方法→选择处理方法、报告方法→下一步→完成。
4.3监视基线和单次进样
点击“平衡系统/监视基线”图标→载入仪器方法→平衡监视器，开始按设置方法平衡基线。
待基线平衡、压力平稳后→单次进样，当要对分析方法做修改时，通过中断运行样→方法组仪器随时改变方法→另存或覆盖→平衡监视→执行新方法，可重复至最佳分析方法确定。
4.4运行样品组
使用样品组向导逐步建立样品表，可在编辑好的样品表最后一行添加关机方法（功能为：平衡色谱柱）设置自动关机→保存样品组方法→运行当前样品组方法。
5处理数据并打印报告
浏览项目→通道→双击打开图谱→文件→新建处理方法→逐步点击“下一步”选中所需参数→输入方法名→完成→处理参数→保存处理方法→浏览项目→选中需处理的图谱→右击鼠标→选中使用指定的处理方法→确定→浏览项目→结果→更新。
选中图谱→预览→采用所需报告模板打印。
6关机
使用完毕，按规定用适当的溶剂冲洗色谱柱、系统管路，填写使用记录。
具体步骤如下：
6.1实验结束后，首先关闭检测器电源；
6.2缓冲盐管路用超纯水取代，做wet prime；
6.3选择合适的流动相清洗色谱柱约60分钟；
6.4Prime seal wash：Diag→Prime seal wash清洗泵头约1分钟；
6.5Prime needle wash：Diag→Prime needle wash，清洗进样针1-2次；
6.6Purge injection：Direct Function→Purge injection；
6.7降低流速至0，待系统压力回零后，关闭2695电源；
6.8关闭计算机及显示器电源。
附
一、清洗流路系统：
1、如果流动相有无机盐或缓冲液，在开机后、排空前，预先设置好低流速的纯水为流动相的分析方法，待排空气完成后，即可执行冲柱20分钟后,再换上并更改为应用的流动相平衡柱。
2、如果使用缓冲液，先用水更换缓冲液，清洗1小时，然后更换甲醇清洗40分钟。
3、如果使用有机溶剂，直接更换甲醇清洗50分钟即可。
二、2424检测器注意事项：
1、关闭2424检测器：
从色谱柱和检测器中排除所有缓冲剂→让未经缓冲剂处理的流动相通过系统→关闭泵→让雾化气体通过检测器10分钟，以排干蒸发管和检测室→停止气体流动→关闭检测器的电源。
2、要执行定期维护：
提示：为防止损坏色谱柱，在从液体通路中排除流动相之前，应移开色谱柱。
（1）将漂移管温度设置为适当的退溶温度。
提示：对于大多数溶剂来说，50℃是适当的退溶温度。
（2）用100%超纯水替换缓冲流动相，以3mL/min的流量将系统冲洗10分钟。
3、清洗漂移管
开启气体供应，设置漂移管温度100°C，用100%HPLC级水整夜冲洗。
三、根据实际工作的情况，可固定个管路使用溶剂如下：A为甲醇、B为乙腈，C 为超纯水、D为分析用流动相、R为50%甲醇。
当分析样品时可把D瓶换上流动相，C换上新过滤并脱过气的超纯水，适当的流动相比例可随时调整，当分析结束后，C瓶和D换上甲醇并排气。
四、两个冲洗色谱柱的时间程序供参考
（1）甲醇洗机方法LC时间程序（流动相不含缓冲盐时选用）
时间流速A B C D
1.0100%000
50分钟100%000
(2)水-甲醇洗机LC时间程序（流动相含有缓冲盐时选用，D管为纯水）时间流速A B C D
1.0000100%
60分钟 1.0000100%
65分钟 1.0100%000
105分钟0.0100%000。