土壤速效磷含量的测定

实训十
0.5mol/LNaHCO
3 浸提-钼锑抗比色法）
一、目的要求
土壤速效磷也称土壤有效磷，包括水溶性磷和弱酸溶性磷，其含量是
判断土壤供磷能力的一项重要指标。

测定土壤速效磷的含量，可为合理分
配和施用磷肥提供理论依据。

实验要求了解测定土壤速效磷的基本原理，掌握其测定方法。

二、方法原理
用pH8.5 的0.5mol/L 的NaHCO
3 作浸提剂处理土壤，由于碳酸根的存
在抑制了土壤中的碳酸钙的溶解，降低了溶液中Ca2+
浓度，乡音的提高了
3+3+
磷酸钙的溶解度。

由于浸提剂的pH较高，抑制了Fe和Al的活性，有利
-3-2-
于磷酸铁和磷酸铝的提取。

此外，溶液中存在着OH、HCO、CO
3 等阴离
子，也有利于吸附态磷的置换。

用NaHCO
3 作浸提剂提取的有效磷与作物
吸收磷有良好的相关性，其适应范围也广泛。

浸出液中的磷，在一定的酸度下，用硫酸钼锑抗还原显色成磷钼蓝，蓝色的深浅在一定浓度范围内与磷的含量成正比，因此，可以用比色法测定其含量。

三、主要仪器
震荡机、分光光度计或光电比色计、天平（O.OIg）、三角瓶（250ml）、容
量
瓶（50ml）、漏斗、无磷滤纸、移液管（10ml）。

四、试剂配制
1.0.5mol/L 的NaHCO
3 （pH8.5）浸提液称取化学纯NaHCO
342.0g 溶于800ml
蒸馏水中，以4mol/L NaOH溶液调节pH至8.5 （用pH计测定），然后稀释至1000ml，保存在试剂瓶中。

如果贮存期超过1个月，是用时应重新调整pH。

2•无磷活性炭将会活性炭先用1:1（V/V ）的盐酸浸泡过夜，在布氏漏斗- 上抽滤，用蒸馏水冲洗多次至无Cl为止，在用0.5mol/L NaHCO
3 溶液浸泡过夜，在布氏漏斗上抽滤，用蒸馏水洗尽NaHCO 3，检查至无磷为
止，烘干
备用。

3.7.5mol/L硫酸钼锑抗贮存液在1000ml烧杯中加入400ml蒸馏水，蒋烧
杯浸在冷水中，然后缓慢注入208.3ml 浓硫酸（分析纯），并不断搅拌，冷
却至室温。

另称取分析纯钼酸铵20g溶于60C的150ml蒸馏水中，冷却。

再将硫酸溶液慢慢倒入钼酸铵溶液中，不断搅拌，最后加入1000ml0.5%酉石酸锑钾溶液，用蒸馏水稀释至1000ml，摇匀，贮存于棕色试剂瓶中，避光保
存。

4. 钼锑抗混合显色剂称取1.50g抗坏血酸（左旋，旋光度+12〜+22,分析纯）溶
于100ml钼锑抗贮存液中，混匀。

此试剂有效期为24h，宜用前配
制，
随配随用。

5. 磷标准液准确称取在105C烘箱中烘干2h的分析纯KH
2PO
40.2195g,溶
于400ml蒸馏水中。

加浓硫酸5ml，转入1000ml容量瓶中，加蒸馏水定容至刻度，摇匀，此溶液为50mg/L 磷标准液，此溶液不易久贮。

6. 磷标准曲线绘制分别吸取50mg/L 磷标准液
0、1 、
2、3、
4、5 （ml）于
50ml 容量瓶中，各加入0.5mol/L 的NaHCO
3 浸提液1ml 和钼锑抗显色剂5ml，
除尽气泡后定容，充分摇匀，即为
0、0.
1、0.
2、0.
3、0.
4、0.5mol/L 的
磷的系列标准液。

30min 后与待测液同时进行比色，读取吸光度值。

再方格坐标纸上以吸光度值为纵坐标，磷mol/L 为横坐标便绘制成磷标准曲线。

五、操作步骤
1•待测液的制备称取通过1mm筛孔的风干土样5.00g置于250ml三角瓶
中，加入一小勺无磷活性炭和0.5mol/L 的NaHCO
3浸提液100ml，塞紧瓶
塞，在震荡机上震荡30min，取出后立即用干燥漏斗和无磷滤纸过滤，滤液用另一只三角瓶盛接。

同时作空白试验。

2•测定吸取滤液10ml （对含P
2O
51%以下的样品吸取10ml，含磷高的可
改为5ml或2ml，但必须用0.5mol/L的NaHCO
3补足至10ml），于50ml容
量瓶中，加钼锑抗混合显色剂5ml，小心摇动。

30min后，在721或722型
分光光度计上用波长660nm （光电比色计用红色滤光片）比色，以空白液
的
吸收值为0,读出待测的吸光度值。

六、结果计算
土壤速效磷（mg/L）二待测液（mg/kg）待测液体积
烘干土重（分取倍数
mg/kg）
式中：
待测液mg/L――从标准曲线上查得待测液浓度；
待测液体积一一50ml;
分取倍数——浸提液总体积（ml）为吸取浸出液体积（ml）的倍数
（）；
烘干土重一一风干土重乘以水分系数。

七、注意事项
（1）钼锑抗混合显色剂的加入量要准确。

（2）加入混合显色剂后，即产生大量的CO
2气体，由于容量瓶口小，CO
2气
体不易逸出，在混匀的过程中易造成试液外溢，造成测定误差，因此必须小心慢慢加入，同时充分摇动排出CO
2，以避免CO
2 的存在影响比色结果
-(3)活性炭一定要洗至无Cl 反应，否则不能使用。

(4)此法温度影响很大，一般测定应在20~25C的温度下进行。

如室温低
于20C，可将容量瓶放在30~40C的热水中保温20min,取出冷却后进行比色。

( 5) 0.5mol/L 的NaHCO
3 测土壤有效磷分级可参考下列指示
土壤速效磷的含
量V 10~20> 20
( mg/kg)
土壤供磷水平低中等高
八、复习思考题
1. 为什么报告有效磷测定结果时,必须同时说明所用的测定方法？
2. 测定过程中,如要获得比较准确的结果,应注意哪些问题？。