常用缓冲液配方
缓冲溶液的配置
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二、缓冲液免疫细胞化学中应用的缓冲液种类较多,即使是同种缓冲液,其浓度、pH、离子强度等也常不同。
在此介绍几种最常用缓冲液的配制。
1、0.2mol/L pH7.4磷酸盐缓冲液(Phosphate Buffer,PB)试剂:NaH2PO4·2H2O、Na2HPO4·12H2O。
配制方法:配制时,常先配制0.2mol/L的NaH2PO4和0.2mol/L的Na2HPO4,两者按一定比例混合即成0.2mol/L的磷酸盐缓冲液(PB),根据需要可配制不同浓度的PB和PBS。
(1)0.2mol/L的NaH2PO4;称取NaH2PO4·2H2O 31.2 g 或NaH2PO4·H2O 27.6g加重蒸水至1000ml溶解。
(2)0.2mol/L的Na2HPO4:称取Na2HPO4·12H2O 71.632g(或Na2HPO4·7H2O 53.6g或Na2HPO4·2H2O 35.6g)加重蒸水至1000ml溶解。
(3)0.2mol/L pH7.4的PB的配制:取19ml 0.2mol/L的NaH2PO4和81ml 0.2mol/L的Na2HPO4·12H2O,充分混合即为0.2mol/L的PB(pH约为7.4~7.5)。
若pH偏高或偏低,可通过改变二者的比例来加以调整,室温保存即可。
2、0.01mol/L磷酸盐缓冲生理盐水(Phosphate Buffered Saline, PBS)试剂:0.2 mol/L PB50mlNaCl 8.5~9g(约0.15mol/L)重蒸水至1000ml配制方法:称取NaCl8.5~9g及0.2mol/L的PB50ml,加入1000ml的容量瓶中,最后加重蒸水至1000ml,充分摇匀即可。
若拟配制0.02mol/L的PBS,则PB量加倍即可,依此类推。
PB和PBS是免疫细胞化学实验中最为常用的缓冲液,0.01mol/L的PBS主要用于漂洗组织标本、稀释血清等,其pH应在7.25~7.35之间,否则需要调整。
最全常用缓冲液配方及缓冲范围
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最全常用缓冲液配方及缓冲范围缓冲液是一种能够维持溶液pH值相对稳定的溶液。
它可以减少酸碱反应的影响,使物质在酸碱环境中保持稳定。
在生命科学实验室和工业生产中,常用的缓冲液有许多种。
下面是最常用的一些缓冲液配方及其缓冲范围。
1. Phosphate缓冲液:Phosphate缓冲液通常由磷酸二氢盐和磷酸氢二盐组成。
它的pH范围为2.1-7.4,在生物化学和细胞生物学实验中得到广泛应用。
配方1:-0.1M磷酸二氢盐,pH2.0-2.8-0.2M磷酸氢二盐,pH5.8-7.4配方2:-0.1M磷酸二氢盐,pH2.1-3.1-0.2M磷酸氢二盐,pH5.6-7.42. Tris缓冲液:Tris缓冲液由三羟甲基氨基甲烷(Tris)和其酸盐组成。
它的pH范围为7-9,在分子生物学和生化实验中广泛使用。
配方:- 1 M Tris HCl,pH 7.4-9.0- 1 M Tris base,pH 7.0-9.23.MES缓冲液:MES缓冲液是一种针对中性pH值(5.5-6.7)的缓冲液,常用于细胞生物学和酶活性实验。
配方:-0.1MMES,pH5.5-6.74.HEPES缓冲液:HEPES缓冲液是一种适用于细胞培养和酶活性实验的缓冲液,其pH 范围为6.8-8.2配方:-0.1MHEPES,pH6.8-8.25.CAPS缓冲液:CAPS缓冲液是一种适用于生化实验的缓冲液,其pH范围为9.7-11.1配方:-0.1MCAPS,pH9.7-11.1这些是最常用的缓冲液配方及其缓冲范围,可以根据实验的需要选择合适的缓冲液。
需要注意的是,在配制缓冲液时应使用高纯度的化学品,并根据实验要求精确控制缓冲液的pH值。
此外,在实验过程中应注意缓冲液的保存和稳定性,以确保实验结果的准确性。
实验室常用试剂和缓冲液配方
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实验室常用试剂和缓冲液配方实验室中常用的试剂和缓冲液配方有很多种,下面将介绍一些常用的试剂和缓冲液的配方:一、试剂的配方1. Tris缓冲液:- 3 M Tris-Cl,pH 7.4(准备方法:将121.1 g Tris粉末溶解在800 mL去离子水中,使用HCl调节pH值至7.4,并将溶液体积加至1 L)2.NaCl溶液:-5MNaCl(准备方法:将287.7gNaCl溶解在800mL去离子水中,并将溶液体积加至1L)3.验血试剂:-4%NaOH溶液(准备方法:将40gNaOH溶解在900mL去离子水中,并将溶液体积加至1L)-5%CuSO4溶液(准备方法:将50gCuSO4溶解在900mL去离子水中,并将溶液体积加至1L)-2%K4[Fe(CN)6]溶液(准备方法:将20gK4[Fe(CN)6]溶解在900mL去离子水中,并将溶液体积加至1L)4.PBS缓冲液(磷酸盐缓冲液):-10×PBS缓冲液(准备方法:将80gNaCl,2gKCl,11.5gNa2HPO4,2gKH2PO4溶解在800mL去离子水中,并将溶液体积加至1L。
pH值可以调节至7.4左右)5. Tris-EDTA缓冲液(TE缓冲液):- 10 mM Tris-HCl,1 mM EDTA,pH 8.0(准备方法:将12.1 gTris溶解在800 mL去离子水中,然后加入0.37 g EDTA,使用HCl调节pH值至8.0,并将溶液体积加至1 L)二、缓冲液的配方1. Tris-HCl缓冲液:- 50 mM Tris-HCl,100 mM NaCl,1% Triton X-100,pH 7.4(准备方法:将6.05 g Tris,5.8 g NaCl,0.1 g Triton X-100溶解在800mL去离子水中,使用HCl调节pH值至7.4,并将溶液体积加至1 L)2. Tris-Borate缓冲液(TBE缓冲液):- 89 mM Tris,89 mM boric acid,2 mM EDTA,pH 8.3(准备方法:将10.81 g Tris,5.49 g boric acid,3.72 g EDTA溶解在800 mL去离子水中,使用NaOH或HCl调节pH值至8.3,并将溶液体积加至1 L)3. Tris-Glycine缓冲液:- 25 mM Tris,192 mM glycine,0.1% SDS,pH 8.3(准备方法:将3.03 g Tris,14.35 g glycine溶解在800 mL去离子水中,使用HCl调节pH值至8.3,并将溶液体积加至1 L)4. Tris-Acetate缓冲液(TAE缓冲液):- 40 mM Tris,20 mM acetic acid,1 mM EDTA,pH 8.3(准备方法:将4.84 g Tris,1.86 g acetic acid,0.37 g EDTA溶解在800 mL去离子水中,使用NaOH或HCl调节pH值至8.3,并将溶液体积加至1 L)5. Phosphate缓冲液:- 100 mM sodium phosphate,pH 7.0(准备方法:根据目标pH值使用磷酸二氢钠和磷酸氢二钠调节溶液pH至7.0,并将溶液体积加至1 L)以上只是一些常用的试剂和缓冲液的配方,并不是全部。
常用缓冲溶液的配制方法
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常用缓冲溶液的配制方法1. 磷酸氢二钠–柠檬酸缓冲液 (2)2.柠檬酸–柠檬酸钠缓冲液(0.1 mol/L) (2)3.甘氨酸–盐酸缓冲液(0.05 mol/L) (3)4.邻苯二甲酸–盐酸缓冲液(0.05 mol/L) (3)5.乙酸–乙酸钠缓冲液(0.2 mol/L) (3)6.磷酸盐缓冲液 (3)7.磷酸二氢钾–氢氧化钠缓冲液(0.05M) (4)8.巴比妥钠-盐酸缓冲液(18℃) (4)9.硼酸–硼砂缓冲液(0.2M硼酸根) (5)10.甘氨酸–氢氧化钠缓冲液(0.05M) (5)11.碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液(0.1M) (5)12.Tris–盐酸缓冲液(0.05M,25℃) (6)13.硼砂-氢氧化钠缓冲液(0.05M硼酸根) (6)14.PBS缓冲液 (6)15. B-R缓冲溶液配制 (7)16. 常用pH缓冲溶液的配制和pH值 (7)1. 磷酸氢二钠–柠檬酸缓冲液pH0.2mol/LNa2HPO4(mL)0.1mol/L 柠檬酸(mL)pH0.2mol/LNa2HPO4 (mL)0.1mol/L柠檬酸(mL)2.2 2.4 2.62.83.0 3.2 3.4 3.63.84.0 4.2 4.4 4.64.85.0 0.401.242.183.174.114.945.706.447.107.718.288.829.359.8610.3019.6018.7617.8216.8315.8915.0614.3013.5612.9012.2911.7211.1810.6510.149.705.25.45.65.86.06.26.46.66.87.07.27.47.67.88.010.7211.1511.6012.0912.6313.2213.8514.5515.4516.4717.3918.1718.7319.1519.459.288.858.407.917.376.786.155.454.553.532.611.831.270.850.55Na2HPO4分子量= 14.98,0.2 mol/L溶液为28.40克/升。
各种缓冲液配制方法
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各种缓冲液配制方法缓冲液是一种用于调节溶液的pH值的溶液,常用于实验室中的生物化学和分子生物学实验中。
根据所需的pH范围和实验目的,可以使用不同的缓冲液配制方法。
以下是一些常见的缓冲液配制方法:1.磷酸盐缓冲液(PBS)磷酸盐缓冲液是一种常见的生物学实验中使用的缓冲液。
它的制备方法如下:-取一个容器,加入8克氯化钠(NaCl),0.2克磷酸二氢钠(NaH2PO4),和1.44克磷酸氢二钠(Na2HPO4)。
-加入适量的去离子水,搅拌溶解。
-将溶液转移到一个容量为1升的烧杯中。
-用去离子水补足体积至1升,并用1升体积瓶准确稀释至1升。
2. Tris缓冲液Tris缓冲液适用于pH 7-9范围内的实验。
制备方法如下:- 取一个容器,加入121.14克Tris(羟甲基氨基甲烷)。
-加入适量的去离子水,搅拌溶解。
-将溶液转移到一个容量为1升的烧杯中。
-用去离子水补足体积至1升,并用1升体积瓶准确稀释至1升。
3.醋酸盐缓冲液醋酸盐缓冲液适用于pH3-5范围内的实验。
制备方法如下:-取一个容器,加入20毫升醋酸钠三水合物(NaC2H3O2·3H2O)。
-加入6毫升醋酸。
-加入适量的去离子水,搅拌溶解。
-将溶液转移到一个容量为1升的烧杯中。
-用去离子水补足体积至1升,并用1升体积瓶准确稀释至1升。
4.磷酸缓冲液磷酸缓冲液适用于pH2-8范围内的实验。
制备方法如下:-取一个容器,加入0.126克磷酸二氢钾(KH2PO4)。
-加入0.680克磷酸二氢钠(Na2HPO4)。
-加入适量的去离子水,搅拌溶解。
-将溶液转移到一个容量为1升的烧杯中。
-用去离子水补足体积至1升,并用1升体积瓶准确稀释至1升。
5.碳酸氢盐缓冲液(HEPES缓冲液)HEPES缓冲液适用于pH6-8范围内的实验。
-取一个容器,加入10克HEPES。
-加入适量的去离子水,搅拌溶解。
-将溶液转移到一个容量为1升的烧杯中。
-用去离子水补足体积至1升,并用1升体积瓶准确稀释至1升。
常用缓冲液及培养基配方
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常用缓冲液及培养基配方常用缓冲液及培养基配方LB液体培养基:Bacto-蛋白胨10g酵母抽提物5g氯化钠10g加950ml蒸馏水溶解,用5N氢氧化钠调pH至7.0,定容至1000ml,高压灭菌后保存。
LB固体培养基:每升LB液体培养基中加入12g琼脂粉,高压灭菌后保存。
SOB液体培养基Bacto-蛋白胨20g酵母抽提物5gNaCl 0.5g加950 ml水溶解,加入250mmol/L KCl 溶液10ml,用5 N NaOH调pH至7.0,定容至1000 ml,高压灭菌后保存。
使用前加入5ml经灭菌的2mol/LMgCl2。
SOC液体培养基SOB中加入经灭菌的葡萄糖溶液至终浓度为20mmol/L。
麦康凯固体培养基每1000ml水中加52g培养基粉,煮沸溶解后分装,高压灭菌。
NA固体培养基牛肉浸膏3g酵母浸膏1g蛋白胨蔗糖琼脂粉5g 10g 15g加950ml蒸馏水溶解,调pH至7.0,定容至1000ml,高压灭菌后保存。
TB培养基:将下列组分溶解在0.9L水中:Bacto-蛋白胨12g酵母抽提物24g甘油4ml各组分溶解后高压灭菌。
冷却到60℃,再加100ml灭菌的170mmol/L KH2PO4/ 0.72 mol/L K2HPO4的溶液。
高压灭菌或用0.22um的滤膜过滤除菌。
溶液Ⅰ葡萄糖2.25 g 50mmol/L1mol/L Tris·Cl(pH8.0) 6.25ml 20mmol/L0.5mol/L EDTA(pH8.0) 5ml 10mmol/L调pH至8.0后,用水定容至250 ml,高压灭菌后保存。
溶液Ⅱ10 mol/L NaOH 2ml10% SDS 10ml用水定容至100 ml,现配现用。
溶液Ⅲ5 mol/L 醋酸钾60ml冰醋酸11.5ml水28.5ml高压灭菌后保存。
高盐TE缓冲液10mmol/L Tris.Cl, pH 8.0*0.1mmol/L EDTA, pH 8.0*1mol/L NaCl于室温保存(可在几年内保持稳定)CTAB抽提液2%(w/v)CTAB(古立烷基三乙基溴化铵)100mmol/L Tris.Cl,pH 8.0 *1.4mol/L NaCl于室温保存(可在几年内保持稳定)CTAB/NaCl 溶液(10% CTAB/0.7mol/L NaCl)在80ml H2O中溶解4.1g NaCl,缓慢加入10一CTAB(十六烷基三乙基溴化铵),同时加热并搅拌。
实验室常用试剂和缓冲液配方
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实验室常用试剂和缓冲液配方PBS(磷酸盐缓冲液)是一种常用的生物化学缓冲液,用于洗涤和稀释生物化学试样。
配方:-NaCl:8g-KCl:0.2g-Na2HPO4:1.42g-KH2PO4:0.24g将上述物质溶解在1升蒸馏水中,调节pH值至7.4、用1M(摩尔浓度)盐酸或1M氢氧化钠进行调节。
2. Luria-Bertani (LB) 培养基配方LB培养基是微生物学研究中常用的培养基,适用于大多数细菌和酵母菌的培养。
配方:- 水解酪蛋白(tryptone):10 g- 酵母粉(yeast extract):5 g-NaCl:10g将上述物质溶解在1升蒸馏水中,用1M盐酸或1M氢氧化钠调节pH 至7.0。
可以选择添加洗涤剂Tween-20(0.1%)以提高溶解度。
SSC缓冲液广泛用于核酸杂交实验等生物学研究中。
配方:-NaCl:175.3g- Na3Citrate·2H2O:88.2 g-EDTA:37.2g将上述物质溶解在1升蒸馏水中,调节pH值至7.0-7.2、可以选择添加DEPC(二硫酰二甲酯)处理,增强其功能。
4.甲醛溶液甲醛溶液常用于生物样品固定以及染色实验。
配方:-甲醛:37%-PBS或水将适量的甲醛加入PBS或水中,制备所需浓度的甲醛溶液。
5. β-羟丁酸钠(β-Hydroxybutyrate)溶液β-羟丁酸钠是一种常用的减少剂,用于生物化学实验中。
配方:-β-羟丁酸钠:1M根据需求将适量的β-羟丁酸钠溶解在合适的溶剂中。
这里只是列举了几个常见的试剂和缓冲液配方,实验室试剂和缓冲液种类丰富多样,具体使用取决于研究目的和实验要求。
在进行实验之前,建议仔细阅读相关文献和制造商提供的说明书,并按照正确的比例和步骤配制试剂和缓冲液。
实验常用试剂缓冲液的配制方法
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实验常用试剂缓冲液的配制方法实验室中经常使用各种试剂和缓冲液进行实验。
下面我将介绍一些常用试剂和缓冲液的配制方法。
1.磷酸盐缓冲液磷酸盐缓冲液一般有三种类型的配方:PBS(磷酸盐缓冲盐溶液)、PBST(含Tween-20的磷酸盐缓冲盐溶液)和TBS(三氯甲烷缓冲盐溶液)。
配制PBS缓冲液:-加入适量的8.0g/L氯化钠和0.2g/L磷酸氢二钠到1L去离子水中。
-调整pH值至7.4,采用10M氢氧化钠(NaOH)或者盐酸(HCl)。
-用去离子水稀释至1xPBS。
配制PBST缓冲液:-配制1xPBS。
- 加入0.1%(v/v)Tween-20。
-混合均匀。
配制TBS缓冲液:-加入2.42g/L三氯甲烷到1L去离子水中。
-加入20g/L三甲基氯化胺到溶液中。
-调整pH值至8.0,采用盐酸(HCl)。
-用去离子水稀释至1xTBS。
2.毛细管电泳缓冲液毛细管电泳缓冲液的配制方法取决于电泳类型,一般包括凝胶和毛细管电泳。
配制凝胶电泳缓冲液:-加入8g/L琼脂糖和0.4g/L硼酸到1L去离子水中。
-用热板搅拌器加热,搅拌至溶解。
-冷却至室温后,调整pH值至8.3,采用盐酸(HCl)或氢氧化钠(NaOH)。
-用去离子水稀释至所需浓度。
配制毛细管电泳缓冲液:-加入10mM氢氧化钠(NaOH)和1mM二硼酸氢钠到500mL去离子水中。
-调整pH值至9.2,采用盐酸(HCl)。
-加入1mM十二烷基硫酸钠。
-用去离子水稀释至所需浓度。
3.蛋白质含量测定蛋白质含量测定一般采用BCA法、Lowry法或Bradford法。
BCA法配制试剂:-在15mL玻璃试管中加入BCA试剂(提取液A)。
-加入0.1M硫酸(提取液B)。
-混合提取液A和提取液B,即得到试剂。
Lowry法配制试剂:-加入白蛋白标准品和Na2CO3/NaOH缓冲液(A液)到250mL锥形瓶中。
-混合硫酸/磷酸/酒精试剂(B液)。
-将A液倒入B液中混合,待用。
Bradford法配制试剂:-加入试剂A到450mL去离子水中。
缓冲液的配制
![缓冲液的配制](https://img.taocdn.com/s3/m/9248355dad02de80d4d84015.png)
Elisa 相关试剂的配制1、抗体或免疫球蛋白稀释液0.01mol/L pH7.2PBSNaH2PO4·2H2O——0.39克;Na2HPO4——1.27克;NaCl——0.85克;NaN3——200 mg;H2O(蒸馏水)至1000ml2、ELISA洗液及HRP标记抗体稀释液PH7.4,PBSTNaCl——2.0克;KH2PO4——0.2克;Na2HPO4·12H2O——2.9克;KCl——0.2克;NaN3——0.2克;H2O至1000ml 吐温(Tween)20 0.5ml;4°C保存备用3、包被液(简称CB)pH9.6Na2CO3——1.59克;NaHCO3——2.93克;NaN3——0.2克;H2O至1000ml 密封盖好,4°C存放备用4、ELISA底物液(可溶性底物)磷酸-柠檬酸缓冲液pH5.00.1mol/L柠檬酸(21.014克/100ML)——24.3ml;0.2mol/L Na2 HPO4(28.4克/L)——25.7ml;H2O ——50ml;4°C存放备用5、DAB底物液(不溶性底物,组化病理等)0.05mol/L pH7.6 tris-HCLTris——6.05克;HCL(36%)——3.15克(约2.7ml浓HCL);H2O 至1000ml DAB为3´,3´二氧基联苯胺,不溶性底物,呈棕红色ELISA试剂配制及实验流程是酶联接免疫吸附剂测定(( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的简称。
以双抗体夹心法举例说明。
试剂配制:(1) 包被缓冲液(PH9.6 +0.2 0.05M碳酸盐缓冲液): Na2CO3——1.59g ;NaHCO3 ——2.93g ;加蒸馏水至1000ml。
(用时稀释成1x,加0.1%BSA)(2)洗涤缓冲液(PH7.4 0.15M PBST):0.05%Tween-20——0.5ml;加在PBS缓冲液1000ml 中。
常见缓冲液的配方
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一.常用贮液与溶液1mol/L 亚精胺( Spermidine ): 溶解2.55g 亚精胺于足量的水中,使终体积为10ml。
分装成小份贮存于-20 Co1mol/L精胺(Spermine ):溶解3.48g精胺于足量的水中,使终体积为10ml。
分装成小份贮存于-20 Co10mol/L 乙酸胺( ammonium acetate ):将77.1g 乙酸胺溶解于水中,加水定容至1L 后,用0.22um 孔径的滤膜过滤除菌。
10mg/ml牛血清蛋白(BSA):加100mg的牛血清蛋白(组分V或分子生物学试剂级,无DNA 酶)于9.5ml 水中(为减少变性,须将蛋白加入水中,而不是将水加入蛋白) ,盖好盖后,轻轻摇动,直至牛血清蛋白完全溶解为止。
不要涡旋混合。
加水定容到10ml ,然后分装成小份贮存于-20Co1mol/L二硫苏糖醇(DTT):在二硫苏糖醇5g 的原装瓶中加32.4ml 水,分成小份贮存于-20 Co或转移100mg的二硫苏糖醇至微量离心管,加0.65ml的水配制成1mol/L二硫苏糖醇溶液。
8mol/L 乙酸钾( potassium acetate ):溶解78.5g 乙酸钾于足量的水中,加水定容到100ml o1mol/L氯化钾(KCI):溶解7.46g氯化钾于足量的水中,加水定容到100ml o3mol/L 乙酸钠( sodium acetate ):溶解40.8g 的三水乙酸钠于约90ml 水中,用冰乙酸调溶液的pH 至5.2,再加水定容到100ml o0.5mol/L EDTA:配制等摩尔的Na2EDTA 和NaOH 溶液(0.5mol/L ),混合后形成EDTA的三钠盐。
或称取186.1g的Na2EDTA?2H2O和20g的NaOH ,烧杯中,用磁力搅拌器搅拌直至完全溶解。
用水定容至1L o 并溶于水中,定容至 1L 。
1mol/L HEPES:将 23.8gHEPES 溶于约 90ml 的水中,用 NaOH 调 pH6.8-8.2 ),然后用水定容至 100ml 。
实验室几种缓冲溶液的配制方法
![实验室几种缓冲溶液的配制方法](https://img.taocdn.com/s3/m/53f8777f001ca300a6c30c22590102020740f2b0.png)
几种溶液的配制方法1、PBS:取ZLI-9061 PBS溶于1000ml的蒸馏水中,混匀,测pH 值应在7.2~7.4之间,若偏离此范围,请用0.1N的HCL 或NaOH调整。
2、TBS:2.1 Tris缓冲液配方:(0.5 M pH7.6)Tris(三羟甲基氨基甲烷)60.57g1N HCL 约420ml双蒸水加至1000mlTris缓冲液配制方法:先以少量双蒸水(300~500ml)溶解Tris,加入HCl后,用HCl(1N)或NaOH(1N)将pH调至7.6,最后双蒸水加至1000ml。
此液为储备液,4℃冰箱中保存。
2.2 TBS配方:Tris-HCI缓冲液(0.5M pH7.6)100mlNaCI 8.5~9g (0.15mol/L)双蒸水加至1000mlTBS配制方法:先以少量双蒸水溶解NaCl,再加入Tris-HCl 缓冲液,最后加双蒸水至1000ml,充分摇匀。
3、枸橼酸盐缓冲液(Citrat e buffer):3.1 储存液:A. 0.1M枸橼酸溶液:称取21.01g枸橼酸(C6H8O7·H20)溶于1000ml蒸馏水中。
B. 0.1M枸橼酸钠溶液:称取29.41g枸橼酸钠(C6H5Na3O7·2H20)溶于1000ml蒸馏水中。
3.2 工作液:取9ml A液和41ml B液加入450ml蒸馏水中,溶液pH值应为6.0±0.14、胰酶(Trypsin):4.1 ZLI-9011胰蛋白酶消化液:常用浓度为0.125%,即使用前将一滴试剂1胰酶溶液和三滴试剂2胰酶稀释液均匀混合(1:3稀释),则可直接滴加使用。
胰酶的最终浓度可以根据使用者的要求进行调整,浓度范围可以从0.05%(1:10稀释)至0.25%(1:1稀释)。
4.2 ZLI-9010胰蛋白酶:取0.05g或0.1g胰蛋白酶加入到100ml 0.05%或0.1% pH7.8的无水氯化钙水溶液中,溶解即可。
各种浓度各种的缓冲液配制
![各种浓度各种的缓冲液配制](https://img.taocdn.com/s3/m/889e0c2d8e9951e79a89274d.png)
一、PBS缓冲液
母液的配制:
0.2M Na2HPO4:称取 71.6g Na2HPO4-12H2O,溶于 1000ml 水0.2M NaH2PO4:称取 31.2g NaH2PO4-2H2O,溶于1000ml 水不同PH值PBS配制
各种PH值的 PBS(100ml)配方:
pH NaH2PO4(ml) Na2HPO4(ml)
?
92 8 ?
90 10
?
85 15
?
?
?
?
?
?
51 49
45 55
38 62
33 67
28 72
23 77
19ml 81ml
16 84
13 87
?
?
7 93
以配制100ml PBS为例,先配制母液,按照配方表分别取19ml L的 NaH2PO4和81ml L 的Na2HPO4,混合即可。
不同浓度PBS的配制
只需将 PBS按相应比例适当稀释即可,如:
PBS(PH=):取 500ml PBS,加水稀释至 1000ml 即可。
PBS(PH=):取50ml PBS,加水稀释至 1000ml 即可。
PBS(PH=):取100ml M PBS,加水稀释至 1000ml 即可。
若需要 NaCl的话,加入 NaCl 至%(g/100ml)即可。
二、Tris-HCl缓冲液
某一特定pH值的L Tris缓冲液的配制:将50ml L Tris碱溶液与配方表中所示相应体积(单位:ml)的L HCl混合,加水将体积调至100ml 即可。
(至于配制0.1M HCl 就是浓盐酸用蒸馏水定容到1000ml啦)。
常用电泳试剂配制方法
![常用电泳试剂配制方法](https://img.taocdn.com/s3/m/079593a44bfe04a1b0717fd5360cba1aa9118c73.png)
常用电泳试剂配制方法电泳试剂是在蛋白质或核酸电泳实验中使用的一系列化学试剂。
常用的电泳试剂包括缓冲液、凝胶、加载缓冲液、电泳盐溶液等。
以下是常用电泳试剂的配制方法。
一、缓冲液的配制方法:1.TAE缓冲液TAE缓冲液配方:0.04M缩醛酸,0.001M乙酸,0.001MEDTA,pH8.0。
配制方法:将缩醛酸溶解在适量的蒸馏水中,调节pH值为8.0,加入乙酸和EDTA,再用蒸馏水稀释至适量。
2.TBE缓冲液TBE缓冲液配方:0.089M缩醛酸,0.089M硼酸,0.002MEDTA,pH8.3配制方法:将缩醛酸溶解在适量的蒸馏水中,调节pH值为8.3,加入硼酸和EDTA,再用蒸馏水稀释至适量。
3. Tris-EDTA缓冲液 (TE缓冲液)TE缓冲液配方:10mM缩醛酸,1mMEDTA,pH8.0。
配制方法:将缩醛酸溶解在适量的蒸馏水中,调节pH值为8.0,然后加入EDTA,再用蒸馏水稀释至适量。
二、凝胶的配制方法:1.聚丙烯酰胺凝胶聚丙烯酰胺凝胶配方:30%丙烯酰胺,0.8%季铵盐,1M缓冲液,10%过硫酸铵。
配制方法:将丙烯酰胺溶解在适量的蒸馏水中,加入季铵盐,搅拌均匀后加入缓冲液,最后加入过硫酸铵,混合均匀后注射到凝胶板中,等待凝固。
2.熔融琼脂糖凝胶熔融琼脂糖凝胶配方:1%琼脂糖,1×TAE缓冲液。
配制方法:将琼脂糖溶解在适量的蒸馏水中,加热至完全融化,冷却至60-70°C后加入TAE缓冲液,混合均匀后倒入凝胶板中,等待凝固。
三、加载缓冲液的配制方法:1.6×加载缓冲液6×加载缓冲液配方:40%甘露醇,0.25%溴酚蓝,一定量的TAE或TBE缓冲液。
配制方法:先将甘露醇溶解在适量的蒸馏水中,加入溴酚蓝,搅拌均匀后加入适量的TAE或TBE缓冲液,混合均匀后即可。
四、电泳盐溶液的配制方法:1.DNA电泳盐溶液DNA电泳盐溶液配方:1×TAE缓冲液。
常用pH缓冲液配置方法及注意事项
![常用pH缓冲液配置方法及注意事项](https://img.taocdn.com/s3/m/650f343c8762caaedc33d447.png)
常用pH缓冲溶液的配制和pH值一、常用溶液的配制(一)溶液配制注意事项1.药品要有较好的质量试剂分为优级纯(保证试剂,Guaranteed reagent,G.R.)、分析试剂(Antalytical reagent,A.R.)化学纯(Chemical pure,C.P.)和实验试剂(Laboratory reagent,L.R.)等等。
工业用的化学试剂,杂质较多,只在个别情况下应用,如配洗液用的硫酸、配干燥剂的氯化钙等。
2.药品称量要精确。
3.配制试剂用水应用新鲜的去离子水或双蒸馏水,比电阻值在50万欧姆以上,pH在5.5~7.0之间才可应用,在组织培养等特殊用途时应注意此项要求,配制一般化验用溶液只要求用双蒸馏水或去离子水。
4.配好后的溶液,应立即除菌处理(如高压灭菌、抽滤或加抑菌物质),以防杂菌生长。
(二)0.067(1/15)Mol/L磷酸缓冲液1.1/15Mol/L磷酸二氢钾溶液的配制:称取磷酸二氢钾(KH2PO4,A.R.)9.08g,用蒸馏水溶解后,倾入1000ml容量瓶内,再稀释至刻度(1000ml)。
2.1/15Mol/L磷酸二氢钠溶液的配制:称取无水磷酸氢二钠(Na2HPO4,A.R.)9.47g(或者Na2HPO4·2H2O 11.87g)用蒸馏水溶解后,放入1000ml容量瓶内,再加蒸馏水稀释至刻度(1000ml)。
3.按附表的比例,配制成不同pH值的缓冲溶液。
(三)0.15Mol/L PB液Na2HPO4·2H2O分子量=175.05 0.15Mol/L溶液含26.7g/L。
Na2HPO4·12H2O分子量=358.22 0.15Mol/L溶液含53.7g/L。
NaH2PO4·H2O分子量=138.00 0.15Mol/L溶液含20.7g/L。
NaH2PO4·2H2O分子量=156.03 0.15Mol/L溶液含23.4g/L。
各种缓冲液配方范文
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各种缓冲液配方范文缓冲液是一种在化学、生物学和其他实验室应用中常用的溶液,用于稳定试剂的pH值,以保持实验条件的稳定性。
下面列举了几种常见的缓冲液配方。
1. Tris缓冲液Tris缓冲液是一种非常常见的缓冲液,常用于酶反应和核酸电泳。
它的配方如下:- 200 mM Tris-相应量的盐酸(pH值调节)2.PBS缓冲液PBS缓冲液是一种用于细胞培养和免疫试剂的常用缓冲液。
它的配方参考如下:-137mMNaCl-2.7mMKCl-10mMNa2HPO4-2mMKH2PO4-(pH值调节)3.HEPES缓冲液HEPES缓冲液是一种用于细胞培养和生化实验的常用缓冲液。
它的配方如下:-25mMHEPES-115mMNaCl-5mMKCl-1mMMgCl2-1mMCaCl2-(pH值调节)4.MES缓冲液MES缓冲液是一种用于生化实验和电泳的常用缓冲液。
它的配方如下:-50mMMES- 50 mM Tris-1mMEDTA-相应量的盐酸(pH值调节)5.ACES缓冲液ACES缓冲液是一种用于生化实验和细胞培养的常用缓冲液。
它的配方如下:-10mMACES- 5 mM Tris-10mMCaCl2-(pH值调节)6.TE缓冲液TE缓冲液是一种用于DNA和RNA实验的常用缓冲液。
它的配方如下:- 10 mM Tris-1mMEDTA-(pH值调节)以上列举的是一些常见的缓冲液配方,具体的配方和浓度可能会因实验目的和样品类型而有所不同。
在制备缓冲液时,应该按照实验要求仔细调节pH值,并使用高质量的试剂和纯水来制备缓冲液。
此外,一些缓冲液可能需要在特定的温度下保存或使用,因此在实验之前要对缓冲液的相关要求进行仔细了解和准备。
各种缓冲液的配制方法-
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各种缓冲液的配制方法-本页仅作为文档封面,使用时可以删除This document is for reference only-rar21year.March各种缓冲液的配制方法Na2HPO4-柠檬酸钠缓冲液24。
2柠檬酸. H2O,分子量= L溶液含L2柠檬酸钠. 2H2O,分子量=;L溶液含 g/L2(1)醋酸盐溶液的配制:醋酸-醋酸钠缓冲液取醋酸钠,加冰醋酸20ml,再加水稀释至250ml,即得。
醋酸-醋酸钠缓冲液取无水醋酸钠20g,加水300ml溶解后,加溴酚蓝指示液1ml及冰醋酸60~80ml,至溶液从蓝色转变为纯绿色,再加水稀释至1000ml,即得。
醋酸-醋酸钠缓冲液取2mol/L醋酸钠溶液13ml与2mol/L醋酸溶液87ml,加每1ml含铜1mg的硫酸铜溶液,再加水稀释至1000ml,即得。
醋酸-醋酸钠缓冲液取醋酸钠18g,加冰醋酸,再加水稀释至1000ml,即得。
醋酸-醋酸钠缓冲液取醋酸钠,加水50ml使溶解,用冰醋酸调节pH值至,再加水稀释至100ml,即得。
醋酸-醋酸钠缓冲液取醋酸钠,加1mol/L醋酸溶液20ml溶解后,加水稀释至500ml,即得。
用醋酸和醋酸钠配制的缓冲溶液的PH=PKa+lg[C(NaAc)/C(HAc)](在此,C(HAc)指醋酸的浓度,C(NaAc)指醋酸钠的浓度,Ka是醋酸的解离常数=*10-5(乘10的-5次方),PKa=-lgKa=,将PH=代入,可得C(NaAc)/C(HAc)= 通常我们配制时会使C(HAc)=L,或是C(HAc)=L等。
若是配制C(HAc)=L,则C(NaAc)=L 称量醋酸钠固体质量为82*=46克量取冰醋酸体积为*1000/=。
将称好的醋酸钠和量好的冰醋酸加入1000mL水中溶解、搅拌均匀即可。
当然若想配制其它的浓度,也可照公式计算即可,通常缓冲溶液不能配的太稀,否则缓冲能力要下降,太浓的话又浪费试剂。
水中,稀释至500ml。
最全常用缓冲液配方及缓冲范围
![最全常用缓冲液配方及缓冲范围](https://img.taocdn.com/s3/m/fff3dda70875f46527d3240c844769eae009a3e3.png)
最全常用缓冲液配方及缓冲范围缓冲液是一种能够帮助控制溶液酸碱性的化学物质,它可以通过接受或释放氢离子来防止溶液的pH值发生剧烈变化。
缓冲液在许多科学实验、生物学研究、工业生产以及医药领域中都有广泛应用。
常用的缓冲液配方包括以下几种:1.乙二胺四乙酸(EDTA)缓冲液:EDTA缓冲液是一种用来稳定金属离子浓度、防止金属离子的沉淀和垢痕形成的缓冲液。
其配方如下:-0.1MEDTA(乙二胺四乙酸)溶液10mL- 0.2 M Tris-HCl缓冲液(pH 8.0) 90 mL-蒸馏水900mL2.乙醇胺缓冲液:乙醇胺缓冲液通常用于DNA或RNA的电泳和杂交实验中。
其配方如下:-1M乙醇胺9mL-0.5MEDTA1mL-蒸馏水90mL将乙醇胺缓冲液通过添加适量的盐酸来调节pH值至所需的范围。
3.乙二醇缓冲液:乙二醇缓冲液常用于蛋白质的纯化和储存过程中。
其配方如下:-0.2M乙二醇10mL- 0.1 M Tris-HCl 缓冲液(pH 7.0) 90 mL按需添加其他添加剂如蛋白酶抑制剂或抗菌剂。
4.磷酸盐缓冲液:磷酸盐缓冲液是一种常用的生物学缓冲液,适用于酶反应、DNA/RNA杂交等实验。
常用的三种pH值的配方如下:-pH5.8:0.05MNa2HPO4溶液和0.05MNaH2PO4溶液的体积比为1:4-pH7.0:0.1MNa2HPO4溶液和0.1MNaH2PO4溶液的体积比为1:9-pH8.0:0.2MNa2HPO4溶液和0.2MNaH2PO4溶液的体积比为1:95.PBS缓冲液:PBS缓冲液是一种常用的生物学缓冲液,适用于细胞培养、免疫染色、蛋白质浸泡实验等。
其配方如下:-8gNaCl-0.2gKCl-1.44gNa2HPO4-0.24gKH2PO4-蒸馏水1L将以上成分溶解在蒸馏水中,调节pH至7.4这些缓冲液可以满足大多数实验和应用的需求,每种缓冲液的最佳使用范围可能略有不同。
在实验前应该仔细阅读相关文献,了解所使用缓冲液的特点和最适宜的pH范围。
缓冲溶液的配制
![缓冲溶液的配制](https://img.taocdn.com/s3/m/f774c11f650e52ea55189833.png)
一、常用溶液的配制(一)溶液配制注意事项1.药品要有较好的质量试剂分为优级纯(保证试剂,Guaranteed reagent,G.R.)、分析试剂(Antalytical reagent,A.R.)化学纯(Chemical pure,C.P.)和实验试剂(Laboratory reagent,L.R.)等等。
工业用的化学试剂,杂质较多,只在个别情况下应用,如配洗液用的硫酸、配干燥剂的氯化钙等。
2.药品称量要精确。
3.配制试剂用水应用新鲜的去离子水或双蒸馏水,比电阻值在50万欧姆以上,pH在5.5~7.0之间才可应用,在组织培养等特殊用途时应注意此项要求,配制一般化验用溶液只要求用双蒸馏水或去离子水。
4.配好后的溶液,应立即除菌处理(如高压灭菌、抽滤或加抑菌物质),以防杂菌生长。
(二)0.067(1/15)Mol/L磷酸缓冲液1.1/15Mol/L磷酸二氢钾溶液的配制:称取磷酸二氢钾(KH2PO4,A.R.)9.08g,用蒸馏水溶解后,倾入1 000ml容量瓶内,再稀释至刻度(1 000ml)。
2.1/15Mol/L磷酸二氢钠溶液的配制:称取无水磷酸氢二钠(Na2HPO4,A.R.)9.47g(或者Na2HPO4·2H2O 11.87g)用蒸馏水溶解后,放入1 000ml容量瓶内,再加蒸馏水稀释至刻度(1 000ml)。
3.按附表的比例,配制成不同pH值的缓冲溶液。
附表1 磷酸盐缓冲液配制法(单位:毫升)pH 1/15Mol/L Na2HPO4 1/15Mol/L KH2PO4 pH 1/15Mol/L Na2HPO4 1/15Mol/L K H2PO45.8 8.0 92.0 7.1 66.6 23.45.9 9.9 90.1 7.2 72.0 28.06.0 12.2 87.8 7.3 76.8 23.26.1 15.3 84.77.3 80.8 19.26.2 18.6 81.47.5 84.1 15.96.3 22.4 77.6 7.6 87.0 13.06.4 26.7 73.37.7 89.4 10.66.5 31.8 68.27.8 91.58.56.6 37.5 62.5 7.9 93.2 6.86.7 43.5 56.5 8.8 94.7 5.36.8 49.6 50.4 8.1 95.8 4.26.9 55.4 44.6 8.2 97.0 3.07.0 61.1 38.9 8.4 98.0 2.0(三)0.15Mol/L PB液附表2 0.15Mol/LPB液配制法pH 0.15Mol/L Na2HPO4(ml)0.15Mol/L NaH2PO4(ml)6.4 26.5 73.56.6 37.5 62.56.8 49.0 51.07.0 61.0 39.07.2 72.0 28.07.4 81.0 19.07.6 87.0 13.0Na2HPO4·2H2O分子量=175.05 0.15Mol/L溶液含26.7g/L。
常用缓冲溶液的配制
![常用缓冲溶液的配制](https://img.taocdn.com/s3/m/5be216bd710abb68a98271fe910ef12d2bf9a970.png)
常用缓冲溶液的配制缓冲溶液是一种可以稳定溶液pH值的溶液,广泛应用于化学、生物学、药学等领域。
在实验研究和工业生产中,常用的缓冲溶液有磷酸盐缓冲溶液、醋酸缓冲溶液、碳酸氢盐缓冲溶液等。
本文将介绍这几种常用缓冲溶液的配制方法和相关注意事项。
一、磷酸盐缓冲溶液的配制磷酸盐缓冲溶液可通过调节磷酸二氢盐和磷酸氢二盐的比例来控制溶液的pH值。
以下是磷酸盐缓冲溶液的配制方法:1. 磷酸盐缓冲液的配方:- 磷酸二氢盐(KH2PO4):用量根据所需pH值确定。
- 磷酸氢二盐(Na2HPO4):用量根据所需pH值确定。
- 蒸馏水:适量。
2. 步骤:- 根据所需pH值选择合适的磷酸二氢盐和磷酸氢二盐的比例。
- 将磷酸二氢盐和磷酸氢二盐称量并溶解在适量的蒸馏水中。
- 将溶液pH值调整至所需值,可以使用pH计进行准确调节。
二、醋酸缓冲溶液的配制醋酸缓冲溶液是一种酸性缓冲溶液,可以维持酸性环境下的稳定pH值。
以下是醋酸缓冲溶液的配制方法:1. 醋酸缓冲液的配方:- 醋酸(CH3COOH):用量根据所需pH值确定。
- 乙酸钠(CH3COONa):用量根据所需pH值确定。
- 蒸馏水:适量。
2. 步骤:- 根据所需pH值选择合适的醋酸和乙酸钠的比例。
- 将醋酸和乙酸钠称量并溶解在适量的蒸馏水中。
- 将溶液pH值调整至所需值,可以使用pH计进行准确调节。
三、碳酸氢盐缓冲溶液的配制碳酸氢盐缓冲溶液可用于调节中性或弱碱性环境下的溶液pH值。
以下是碳酸氢盐缓冲溶液的配制方法:1. 碳酸氢盐缓冲液的配方:- 碳酸氢钠(NaHCO3):用量根据所需pH值确定。
- 碳酸钠(Na2CO3):用量根据所需pH值确定。
- 蒸馏水:适量。
2. 步骤:- 根据所需pH值选择合适的碳酸氢钠和碳酸钠的比例。
- 将碳酸氢钠和碳酸钠称量并溶解在适量的蒸馏水中。
- 将溶液pH值调整至所需值,可以使用pH计进行准确调节。
注意事项:1. 在配制缓冲溶液过程中,应严格按照所需pH值确定各种缓冲盐的比例。
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常用缓冲溶液的配制方法
1.甘氨酸–盐酸缓冲液(0.05mol/L)
2.邻苯二甲酸–盐酸缓冲液(0.05 mol/L)
邻苯二甲酸氢钾分子量= 204.23,0.2 mol/L邻苯二甲酸氢溶液含40.85克/升3.磷酸氢二钠–柠檬酸缓冲液
24
Na2HPO4·2H2O分子量= 178.05,0.2 mol/L溶液含35.01克/升。
C4H2O7·H2O分子量= 210.14,0.1 mol/L溶液为21.01克/升。
4.柠檬酸–氢氧化钠-盐酸缓冲液
① 使用时可以每升中加入1克克酚,若最后pH 值有变化,再用少量50% 氢氧化钠溶
液或浓盐酸调节,冰箱保存。
5.柠檬酸–柠檬酸钠缓冲液(0.1 mol/L )
6872柠檬酸钠Na 3 C 6H 5O 7·2H 2O :分子量294.12,0.1
mol/L 溶液为29.41克/升。
6.乙酸–乙酸钠缓冲液(0.2 mol/L )
Na 2Ac·3H 2O 分子量 = 136.09,0.2 mol/L 溶液为27.22克/升。
7.磷酸盐缓冲液
242Na 2HPO 4·12H 2O 分子量 = 358.22,0.2 mol/L 溶液为
71.64克/升。
Na 2HPO 4·2H 2O 分子量 = 156.03,0.2 mol/L 溶液为31.21克/升。
(2)磷酸氢二钠–磷酸二氢钾缓冲液(1/15 mol/L )
242KH 2PO 4分子量 = 136.09,1/15M 溶液为9.078克/升。
8.磷酸二氢钾–氢氧化钠缓冲液(0.05M )
9.巴比妥钠-盐酸缓冲液(18℃)
10.Tris
–盐酸缓冲液(0.05M ,25℃)
50毫升0.1M 三羟甲基氨基甲烷(Tris )溶液与X 毫升0.1N 盐酸混匀后,加水稀释至100三羟甲基氨基甲烷(Tris )HOCH2 CH2OH C
HOCH2 NH2
分子量=121.14;
0. 1M 溶液为12.114克/升。
Tris 溶液可从空气中吸收二氧化碳,使用时注意将瓶盖严。
11.硼酸–硼砂缓冲液(
0.2M 硼酸根)
2472硼酸H 2BO 3,分子量=61.84,0.2M 溶液为12.37克/升。
硼砂易失去结晶水,必须在带塞的瓶中保存。
硼砂Na 2B 4O 7·10H 2O,分子量=381.43;0.05M 溶液(=0.2M 硼酸根)含19.07克/升。
硼酸H 2BO 3,分子量=61.84, 0.2M 溶液为12.37克/升。
硼砂 易失去结晶水,必须在带塞的瓶中保存。
12.甘氨酸–氢氧化钠缓冲液(0.05M )
甘氨酸分子量=75.07;0.2M 溶液含15.01
克/升。
13.硼砂-氢氧化钠缓冲液(0.05M 硼酸根)
2472
14.碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液(0.1M )
2+、Mg 2+存在时不得使用
222N 2HCO 3分子量=84.0;0.1M 溶液为8.40克/升。
15.“PBS”缓冲液。