基因工程试题

基因工程试题

一、选择题（每题1分，共15分）

1、下列有关基因的叙述，错误的是【A 】

A 蛋白质是基因表达的唯一产物

B 基因是DNA 链上具有编码功能的片段

C 基因也可以是RNA

D 基因突变不一定导致其表达产物改变结构

2、基因工程的单元操作顺序是【B 】

A 增，转，检，切，接 C 接，转，增，检，切 3、生物工程的上游技术是【A 】

A 基因工程及分离工程 C 基因工程及酶工程 4、下列各组专业术语中，含义最为接近的是 【C 】

6、T 4 -DNA 连接酶是通过形成磷酸二酯键将两段DNA 片段连接在一起， 其底物的关键基团是【D 】

A 2' -OH 和 5' -P

B 2' -OH 和 3' -P

C 3' -OH 和 2' -P

D 5' -OH 和 3' -P

7、下列有关连接反应的叙述，错误的是【A 】

A 连接反应的最佳温度为37 ℃

B 连接反应缓冲体系的甘油浓度应低于10%

C 连接反应缓冲体系的ATP 浓度不能高于1mM

D 连接酶通常应过量2-5倍

8、原生质体转化方法不大适用于【A 】

A 大肠杆菌

B 枯草杆菌

C 酵母菌

D 链霉菌

9、下列各常用载体的装载量排列顺序，正确的是【A 】

A Cosmid >X-DNA > Plasmid

B 九-DNA > Cosmid > Plasmid

C Plasmid >X -DNA > Cosmid

D Cosmid > Plasmid >X-DNA

10、若某质粒带有lacZ 标记基因，那么与之相匹配的筛选方法是在筛选培 养基中加入【D 】

A 半乳糖

B 异丙基巯基-B-半乳糖苷（IPTG ）

C 蔗糖

D 5-溴-4-氯-3-吲哚基邛-D-半乳糖苷（X-gal ） 11、下列各组用于外源基因表达的受体细胞及其特点的对应关系中，错误的 是【C 】 A 大肠杆菌一繁殖迅速 B 枯草杆菌一分泌机制健全 C 链霉菌一遗传稳定 D 酵母菌一表达产物具有真核性

12、分子杂交的化学原理是形成【D 】

A 共价键

B 离子键

C 疏水键

D 氢键 B 切，接，转，增，检 D 切，接，增，转，检

B 基因工程及发酵工程 D 基因工程及细胞工程

A 终止子与终止密码子 C DNA 退火与DNA 复性

5、根据酶切活性对盐浓度的要

求，

B 基因表达与基因转译

D 重组子与转化子 限制性核酸内切酶可分成【B 】 C 4大类 D 5大类

13、某一重组DNA （6.2 kb ）的载体部分有两个SmaI酶切位点。用SmaI

酶切后凝胶电泳上出现四条长度不同的带子，其长度总和与已知数据吻

合，该重组分子插入片段上的SmaI酶切位点共有【D】

A 4个B3个C 2个D 至少2个14、下列设计的探针中，最佳的是【D】

A ACATTAAATTATT

B GGGCA

C ACCTTGATAAGGT

D CGGACTTGACCATC

15、cDNA法获得目的基因的优点是【A】

A成功率高B不含内含子C操作简便D表达产物可以分泌二、名词解释（每题2分，共20分）

1、Southern blotting:Southern印迹：Southern发明的一种影印转移物质的方法。

2、Cosmid vector:黏粒载体：含有cos位点的质粒载体。

3、cDNA library:cDNA文库：是指某生物某一发育时期所转录形成的cDNA片段与某种载体连接而成的克隆的集合。

4、RACE:是一种通过PCR进行cDNA末端快速克隆的技术，是以mRNA为模板反转录成cDNA第一链后用PCR技术扩增出某个特异位点到3,或5,端之间未知序列的方法。

5、Probe:探针：指被标记物质标记了的核酸。

6、RT-PCR逆转录PCR：先用逆转录酶作用于mRNA，以寡聚dT为引物合成cDNA第一链，然后用已知一对引物，扩增嵌合分子，这种方法称为逆转录PCR。

7、Insert inactivation:插入失活，基因工程载体上的某些选择标记基因常常含某种或某几种限制性内切酶的单一酶切位点，在该位点用相应的限制性内切酶处理，并将外源DNA片段插入该位点，则插入的外源DNA片段将破坏原有基因的读码框，往往导致原有的选择标记基因无法翻译表达，或即使翻译表达，形成的也是丧失了原有生物活性的蛋白质，这一现象称为插入失活。。

8、S-D Sequence:S-D序列：在大肠杆菌mRNA的核糖体结合位点上，含有一个转译起始密码子及同16S核糖体RNA 3,末端碱基互补的序列，该序列最初由Shine、Dalgarno发现，故后来命名为Shine—Dalgarno序列，简称S-D序列。

9、Shuttle plasmid vector:穿梭质粒载体：指一类由人工构建的具有两种不同复制起点的选择标记，因而可在两种不同宿主细胞中存活和复制的质粒载体。10、MCS:指载体上人工合成的含有紧密排列的多种限制核酸内切酶的酶切位点的DNA片段。

三、简答题（每题5分，共25分）

1、理想质粒载体的必备条件？

答：⑴具有较小的分子质量和较高的拷贝数。

⑵具有若干限制性核酸内切酶的单一酶切位点。

⑶具有两种以上的选择标记基因。

⑷缺失mob基因。

⑸插入外源基因的重组质粒较易导入宿主细胞并自制和表达。

2、核酸操作的基本技术有哪些？

答：①核酸提取与纯化

②核酸的检测与保存