沙门氏菌检验(现用)
沙门氏菌检验
沙门氏菌检验一、培养基和试剂：1、缓冲蛋白胨水（BP）：按GB4789.28中4.12规定2、氯化镁孔雀绿（MM）增菌液：按GB4789.28中4.13规定3、四硫酸钠煌绿（TTB）增菌液：按GB4789.28中4.14、4.15规定4、亚硒酸盐胱氨酸（SC）增菌液：GB4789.28中4.16规定5、亚硫酸铋琼脂（BS）：按GB4789.28中4. 19规定6、DHL琼脂：按GB4789.28中4. 20规定7、HE琼脂：按GB4789.28中4.21规定8、WS琼脂：按GB4789.28中4.23规定9、SS琼脂：按GB4789.28中4.22规定10、三糖铁琼脂：按GB4789.28中4.26、27规定11、蛋白胨水靛基质试剂：按GB4789.28中3.13规定12、尿素琼脂（Ph7.2）：按GB4789.28中3.15规定13、氰化钾（KCN）培养基：按GB4789.28中3.16规定14、氨基酸脱羧酶试验培养基：按GB4789.28中3.12规定15、糖发酵管：按GB4789.28中3.2规定16、ONPC培养基：按GB4789.28中3.3规定17、半固体脂：按GB4789.28中4.30规定18、丙二酸钠培养基：按GB4789.28中3.7规定19、沙门氏菌因子血清：按26种用于初步分型；57种用于进一步分型；163种用于详细分型。
二、沙门氏菌检验程序：三、操作步骤：（一）、前增菌和增菌冻肉、蛋品、乳品及其他加工食品均应经过前增菌。
各称取检样25g，加在装有255ml缓冲蛋白胨水的500ml广口瓶内。
固体食品可先应用均质器以8000~100000r/min打碎1min，或用乳钵加灭菌砂磨碎，粉状食品用灭菌匙或玻棒研磨使乳化，于36±1℃培养4h（干蛋品培养18~24h）移取10ml，转种于100ml氯化镁孔雀绿增菌液或四硫酸钠煌绿增菌液内，于42℃培养18~24h。
同时，另取10ml，转种于100ml亚硒酸盐胱氨酸增菌液内，于36±1℃培养18~24h.。
沙门氏菌的检验方法
沙门氏菌的检验方法沙门氏菌是一种主要引起食物中毒的致病菌，其检验方法主要包括培养分离、生化检测和分子生物学方法等。
下面是关于沙门氏菌检验方法的相关参考内容。
1. 培养分离沙门氏菌可以通过在选择性培养基上进行培养分离来检测。
常用的选择性培养基包括XLD培养基、SS培养基和BS培养基等。
将待检样品接种于选择性培养基上，并采用适当的温度和培养时间进行培养。
沙门氏菌在培养基上形成红色或无色的菌落，可以通过形态特征进行初步判断。
2. 生化检测生化检测是通过检测沙门氏菌代谢产物或酶活性来进行的。
常用的生化检测方法包括气体产生试验、亚甲蓝试验和尿嘧啶酸试验等。
气体产生试验通过观察沙门氏菌在培养基中是否产生氢气或硫化氢气体来判断其存在。
亚甲蓝试验则是通过观察沙门氏菌对亚甲蓝的还原作用来进行检测。
尿嘧啶酸试验则是通过检测沙门氏菌产生的尿嘧啶酸来进行。
3. 血清学检测血清学检测是通过检测人体血清中对沙门氏菌特异性抗体的存在来进行的。
常用的血清学检测方法包括凝集试验、间接荧光抗体试验和酶联免疫吸附试验等。
在这些方法中，沙门氏菌抗原与患者血清中的抗体结合，形成可见的凝集物或荧光产物，从而判断是否感染沙门氏菌。
4. 分子生物学方法分子生物学方法是通过检测沙门氏菌特异性基因序列来进行的。
常用的分子生物学方法包括聚合酶链式反应（PCR）、核酸杂交和基因测序等。
PCR方法可以通过特异性引物扩增沙门氏菌基因的特定片段，从而进行检测。
核酸杂交可以通过与沙门氏菌特异性探针结合，形成杂交信号来进行检测。
基因测序则可以直接检测沙门氏菌菌株中的特定基因序列，确定其身份。
总结：沙门氏菌的检验方法主要包括培养分离、生化检测、血清学检测和分子生物学方法等。
这些方法通过不同的途径检测沙门氏菌的存在，可以提供准确鉴定和检测结果。
在实际应用中，结合多种方法的综合应用可以提高检测结果的准确性和可靠性。
沙门氏菌检验程序
沙门氏菌检验程序沙门氏菌是一种常见的致病微生物，能引起人类和动物的感染疾病。
因此，在食品、水源、环境等方面对沙门氏菌的检测尤其重要。
下面我们将介绍一下沙门氏菌检验的步骤和方法。
1. 样品采集对于食品、水源等样品的采集需要遵守严格的规定。
例如，食品样品需要在加工、贮存和分配之前采集，以确保沙门氏菌检验的准确性。
样品应当在采集之后尽快送到实验室进行检测。
2. 样品处理根据不同的样品类型和特性，采用不同的处理方法。
例如，对于牛奶、鸡蛋等液态食品，需要进行破坏性处理，以确保沙门氏菌的释放。
对于土壤、粪便等样品，需要进行外层细菌的去除处理。
3. 培养培养基选择含有适当氧气和营养物质的培养基，如SS（Salmonella-Shigella）培养基、XLD（Xylose-Lysine-Desoxycholate）培养基等。
将样品分别接种到不同的培养基上。
4. 培养将分别接种的培养基放入恒温箱中进行培养。
将温度设定为37°C至42°C，进行18小时至24小时的培养。
在培养过程中观察样品的生长和变化。
5. 分离取出培养好的样品进行观察。
将预处理样品浸泡在缓冲液中，将溶液过滤。
过滤的溶液留下来，转移到盘子上。
用肉眼观察菌落的形态，观察不同菌落的特点。
根据菌落的特点进行分离。
6. 鉴定在鉴定步骤中，需要进行各种化学试剂处理，如氧化氢酶测试、葡萄糖测试等。
同时需要使用专业仪器，如API试剂盒、ELISA试剂盒等。
通过这些鉴定手段，确定检测出的菌落是否为沙门氏菌。
7. 结论最后，根据检测结果得出客观和准确的结论，以便针对食品、水源或环境污染等问题采取相应的措施。
总之，沙门氏菌的检验程序是一个非常复杂和严谨的过程，需要专业的实验室和技术人员进行操作。
我们应当高度重视沙门氏菌检验的重要性，以确保我们的食品质量和健康安全。
沙门氏菌鉴定流程
沙门氏菌的检测方式主要包括血常规检查、便常规检查、ELISA法检查等，能够判断疾病的严重程度。
1、血常规检查：感染沙门氏菌时，多数患者的白细胞、中性粒细胞以及嗜酸性粒细胞计数出现偏低的情况，大儿童的白细胞计数通常出现升高的现象，该项结果可以辅助诊断沙门菌病。
2、便常规检查：感染沙门氏菌以后，部分患者可能会出现黏液样变或血便的情况，通过明确患者急性胃肠炎的症状来辅助诊断沙门菌病。
3、ELISA法检查：检测患者血清中沙门菌抗原、抗体是否出现异常的情况，有助于沙门菌感染的诊断。
除此之外，沙门氏菌的检测方式还包括B超检查、肥达试验等，如果自身的病情比较严重，建议应及时到正规医院的感染病科进行检查并治疗，以免延误病情。
沙门氏菌检验
食品安全检验技术（微生物部分）
沙门氏菌检验
（4）三糖铁琼脂培养基中亦
含有硫代硫酸钠作为产生硫 化氢之基质，且含硫酸亚铁 作为检测此无色产物之指示 剂，经接种培养后，若微生
物有硫化氢产生，会与亚铁
离子作用生成不溶性硫化亚 铁之沉淀，进而使培养基变 黑。 培养基变黑
食品安全检验技术（微生物部分）
沙门氏菌检验
沙门氏菌属在三糖铁琼脂和赖氨酸脱羧酶试 验培养基内的反应结果
食品安全检验技术（微生物部分）
沙门氏菌检验
沙门氏菌属生化反应有尽有初步鉴别表
食品安全检验技术（微生物部分）
沙门氏菌检验
丙二酸盐试验 阳性（兰） 阴性（不变）
ONPG试验 阳性（黄） 空白
食品安全检验技术（微生物部分）
沙门氏菌检验
第一天 前增菌培养
食品安全检验技术（微生物部分）
沙门氏菌检验
（3）斜面碱性（红色-）底部碱性（红色-）或无变化（橘 红色）：表示无糖类发酵。而蛋白质则于有氧或厌氧条件
下进行代谢产生氨，而使培养基呈碱性反应，如有氧与厌
氧均发生蛋白质分解，则斜面与底部均呈碱性反应。 为使结果准确，应于接种培养18-24小时内观察结果，以 确保糖类尚未用尽，且蛋白质分解之碱性终产物尚未产生。
食品安全检验技术（微生物部分）
沙门氏菌检验
• 第二天 增菌培养
食品安全检验技术（微生物部分）
沙门氏菌检验
• 第三天 接种BS和沙门氏显色平板进行分 离培养
食品安全检验技术（微生物部分）
沙门氏菌检验 第四天 观察分离结果、生化试验
从平板上挑取可疑菌落接种到：三糖铁琼脂和赖氨素 脱羧酶试验管及对照，并同时在营养琼脂平板上划线分离 培养。
欧盟沙门氏菌检验标准
沙门氏菌(Salmonella)是一种常见的食源性病原菌，可以导致食物中毒。
为了确保食品安全，许多国家和地区都有相关的食品和饲料中沙门氏菌的检验标准。
欧盟是全球食品安全监管最为严格的地区之一，其对于沙门氏菌的检验标准非常严格。
以下是欧盟对于食品和饲料中沙门氏菌的一般检验标准：
1. 检测方法:欧盟推荐使用ISO 6579:2002、ISO 6579:2007或ISO 6579:2017等国际标准进行沙门氏菌的检测。
2. 样品数量:每个食品或饲料样品的检测数量至少为25克。
3. 检测频率:对于某些高风险食品，如生肉、家禽、蛋类和蛋制品，欧盟推荐在生产、加工、储存和销售过程中进行定期检测。
4. 阳性判定:如果在一个样品中检测到沙门氏菌，那么这个样品必须被视为阳性。
5. 报告:如果在一个食品或饲料样品中检测到沙门氏菌，那么必须立即报告给相关的监管机构。
6. 处理:如果在一个食品或饲料样品中检测到沙门氏菌，那么这个样品必须被销毁，并且相关的生产或加工设备必须进行清洁和消毒。
需要注意的是，具体的欧盟沙门氏菌检验标准可能会根据食品的种类、来源、加工方法等因素有所不同。
沙门氏菌血清学鉴定的原理及检验流程
沙门氏菌血清学鉴定的原理及检验流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
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沙门氏菌检验及分析
沙门氏菌检验及分析沙门氏菌是一类常见的细菌，通常存在于一些动物体内，例如家禽和家畜的肠道内。
它们也有可能通过食物和水传播到人体内，导致沙门氏菌感染。
本文将介绍沙门氏菌检验及分析的相关内容。
1. 沙门氏菌的检验方法（1）血清凝集反应法以沙门氏菌的特异性抗原与沙门氏菌患者血清反应，观察血清凝集是否发生，来判断患者是否感染了沙门氏菌。
这种方法快速简便，但准确度较低。
（2）细菌培养法将患者样本培养在含有沙门氏菌生长所需营养物的培养基上，观察是否出现菌落，来判断是否感染了沙门氏菌。
这种方法耗时较长，但准确度较高。
沙门氏菌的感染对人体健康有很大影响，因此对沙门氏菌的分析也非常重要。
（1）简单的感染症状一般情况下，沙门氏菌感染的症状包括腹泻、呕吐、发热等。
这些症状通常在感染后1-3天内出现，并可持续数日至数周不等。
（2）食品检测沙门氏菌通常通过食物途径传播，因此食品检测是非常重要的。
食品中是否存在沙门氏菌可通过简单的生化方法来鉴定。
（3）抗生素敏感性测试对于沙门氏菌感染的治疗，抗生素是常用的治疗手段之一。
在使用抗生素前，应进行抗生素敏感性测试，以确保所选择的抗生素对沙门氏菌有效。
3. 沙门氏菌感染的预防（1）注意卫生沙门氏菌多数存在于家禽和家畜的肠道内，因此在处理家禽和家畜时应注意卫生，避免沙门氏菌感染。
食品加工时应注意卫生，使用新鲜食材，逐层消毒，避免沙门氏菌感染。
（3）加强个人卫生个人卫生习惯也是预防沙门氏菌感染的重要措施。
包括勤洗手，不用食指挖鼻孔和耳朵等行为，不用手接触眼睛、口鼻、食物等等。
4. 总结以上就是沙门氏菌检验及分析的相关内容。
沙门氏菌属于一类较为常见的细菌，引起的感染对人体健康有很大的危害。
因此，对沙门氏菌进行检验及分析，以及采取预防措施是非常必要的。
沙门氏菌检验及分析
沙门氏菌检验及分析沙门氏菌是一类常见的食源性病原微生物，引起的沙门氏菌感染会导致沙门氏菌病，主要症状包括腹泻、发热、恶心呕吐等。
为了确保食品安全，对食品中沙门氏菌的检验及分析显得尤为重要。
沙门氏菌的检验方法主要有传统培养法和分子生物学方法。
传统培养法是将食品样品转移到含有适当营养物质的培养基上进行培养，通过观察形状、颜色及生长情况来鉴别沙门氏菌的存在。
分子生物学方法则是借助PCR技术，通过特定引物扩增沙门氏菌的DNA片段，进而进行检测与鉴定。
沙门氏菌的分析主要包括对菌株的鉴定与分型。
鉴定主要通过形态学、生理特性及生化试验等方法，确定该菌株是否为沙门氏菌。
分型则是通过分子生物学方法，如多重引物随机扩增多态性DNA分析（MLVA）、多重引物PCR分型（MLST）等，对沙门氏菌进行分型，进一步了解其遗传多样性及流行病学相关信息。
沙门氏菌的检验标准主要参考国家标准或行业标准，如《食品安全国家标准沙门氏菌检验》（GB 4789.4-2016）、《食品微生物学沙门氏菌检验方法 GB/T 4789.5-2013》等。
这些标准明确了样品的采集方法、培养条件及检测指标等，确保了检验结果的准确性。
在食品安全监测中，沙门氏菌的检验通常应用于肉制品、蛋制品、禽肉及水产品等食品中。
在取样时，应注意避免污染或交叉感染，同时需确保样品代表性。
样品取回后，应尽快送达实验室进行检测，避免菌落生长过于旺盛，影响检验结果。
沙门氏菌的检验结果的解读需要参考相关标准。
通常来说，如果样品中沙门氏菌的检出数目超过规定标准，则判定为阳性，表示该样品存在沙门氏菌污染，不符合食品安全要求。
反之，如果检测结果未能检出沙门氏菌，则判定为阴性，表示该样品符合食品安全要求。
沙门氏菌的检验与分析是确保食品安全的重要环节。
通过合适的检验方法和分析技术，能够准确判断食品样品是否存在沙门氏菌污染，并提供科学依据来保障大众健康。
沙门氏菌的检验步骤
沙门氏菌的检验步骤沙门氏菌是一种常见的食物中毒细菌，它可以引起沙门氏菌属感染。
所谓的沙门氏菌属包括两个物种：Salmonella enterica和Salmonella bongori。
这两个物种又包含了超过2,500种不同的血清型。
为了检测食物或其他样本中是否存在沙门氏菌，通常需要进行以下步骤：1.样本收集：收集来自可疑食物或其他可能被污染的样品，如肉、蛋、奶制品、水果、蔬菜或动物粪便。
确保采集样品的方法是无菌的，以避免污染。
2.前处理：对样本进行适当的前处理，以提高沙门氏菌的检测效果。
这可能包括样品的预处理、样品的培养基中添加抑菌剂等。
3. 培养：将样品接种于适宜的培养基上，如XLD（Xylose Lysine Deo某ycholate Agar）或SS（Salmonella Shigella Agar）等。
这些培养基可以选择性地识别并培养Salmonella属的细菌。
4.孵育：将培养皿放入恒温培养箱，通常是在37℃左右，孵育时间一般为24至48小时。
5.形态特征观察：观察培养基上菌落的形态特征，如形状、颜色、大小等。
沙门氏菌通常形成呈灰白色、圆形、凹陷的菌落。
6.血清型鉴定：对沙门氏菌进行血清学鉴定以确定其血清型。
这通常涉及到使用抗体和相应的血清反应，以确定菌株的亚型。
7.生化测试：对阳性菌落进行生化测试，如甲烷糖发酵试验和硫化氢产生试验，以进一步确认其鉴定。
8.PCR检测：PCR是目前常用的沙门氏菌检测方法之一、它利用聚合酶链反应（PCR）技术，检测样品中的沙门氏菌DNA。
9.分子的子类型分析：通过分子生物学技术，如基因测序、脉冲场凝胶电泳（PFGE）或肽核酸类似程序分析（AFLP），确定沙门氏菌的亚型。
总之，沙门氏菌的检验步骤包括：样本收集、前处理、培养、孵育、形态特征观察、血清型鉴定、生化测试、PCR检测和分子的子类型分析。
这些步骤的目的是确认样品中是否存在沙门氏菌，并确定其类型和亚型，以便采取相应的预防和控制措施。
沙门氏菌检验及分析
沙门氏菌检验及分析沙门氏菌是一种常见的细菌，它是一种肠道中存在的病原菌，也是一种会引起食物中毒的细菌。
因此，对食品中是否含有沙门氏菌的检测显得尤为重要。
本文将讨论沙门氏菌的检验及分析。
一、沙门氏菌的检测方法1、培养方法：沙门氏菌可以在常规的培养基上培养，最常用的是含有胆汁、钠氯和肉汤的液体培养基。
为了增强提取沙门氏菌的准确性和产出，一些特定的选择性平板可以使用，例如MacConkey平板、SS平板或XLD平板。
2、分子生物学方法：PCR检测法是最常见的分子生物学方法之一，它能够检测出非常小的沙门氏菌种群，而不用传统的培养方法。
PCR检测法在物质的检测、生命科学和分子检测等方面发挥着巨大的作用，因此在沙门氏菌检测中也是一个十分重要的检测方法。
二、沙门氏菌的分析方法1、食物检测法：针对某些食品如肉制品、低酸奶、蛋制品等，一般采用已经证实的正式方法来进行检测。
一些具有特异性和高敏感性的方法包括文化方法、免疫学方法和分子生物学方法等。
2、环境检测法：针对食品制作过程中的环境样品进行检测。
这些样品中可能包括牛奶或鸡蛋残留的菌种和接触制造食品的各种人员的手、口腔及袍子等菌群。
检测方法类似于食物检测法，包括文化方法、免疫学方法和分子生物学方法。
需要注意的是，一些细菌可能不能够在环境样品中明显存在，这会使得结果有所偏差。
三、沙门氏菌的风险控制方法1、仔细洗涤食品：消费者在购买食品时应仔细阅读标签，确保食品是新鲜的。
同时，食品应洗涤干净以去除可能存在的菌群。
2、食品加热：食品加热是消灭沙门氏菌最常用的方法。
保健专家建议将肉品煮至中间部位温度达到160°F（71°C），这可确保煮熟并杀死存在的细菌。
3、储存要注意：沙门氏菌喜欢在潮湿、潮湿的环境中繁殖。
所以，消费者最好将食品储存在干燥的地方，并注意食品的过期日期。
结论：消费者和食品业者在选择食品时，应该提高对食品中是否存在沙门氏菌的警惕性，并采取措施来防止感染。
沙门氏菌检验及分析
沙门氏菌检验及分析沙门氏菌是一种能够引起食物中毒的细菌，它会在食品生产和加工过程中引起污染，导致食品中毒事件的发生。
对食品中的沙门氏菌进行检验及分析是非常重要的，可以保障食品安全，保护消费者的健康。
一、沙门氏菌的检验方法1. 检验样品的选择要进行沙门氏菌的检验，首先需要选择检验样品。
常见的样品包括生鲜肉类、禽类、蛋类、奶制品、水产品、蔬菜和水果等。
2. 检验方法沙门氏菌的检验方法主要有传统培养法和分子生物学方法。
传统培养法：通过在适宜的培养基上培养样品中的沙门氏菌，并进行培养时间、培养温度和培养后的观察来进行检验。
分子生物学方法：包括PCR、实时荧光PCR、蛋白质芯片技术等。
3. 检验过程（1）样品的制备：将样品进行预处理，如样品减容、均质化、稀释等。
（2）沙门氏菌的分离：将样品在培养基上进行分离培养，并进行相应的筛选和鉴定。
（3）菌落的计数：通过计数方法，对沙门氏菌的数量进行测定。
（4）沙门氏菌的鉴定：对分离出的沙门氏菌进行鉴定，确认其种属和毒力类型。
4. 结果分析通过检验分析得到的结果，对样品是否超标、是否存在沙门氏菌污染等进行判断和分析。
二、沙门氏菌的分析意义2. 生产质量对食品中的沙门氏菌进行检验和分析，可以对生产工艺进行控制，确保生产过程的卫生安全，保障产品的质量。
3. 公共卫生及时对食品中的沙门氏菌进行检验和分析，可以帮助卫生监管部门掌握食品安全情况，及时采取措施，有效保护公共卫生。
4. 营养健康保障食品安全，避免食品中毒事件的发生，对促进人们的营养健康具有重要意义。
三、沙门氏菌的预防控制为了有效预防和控制沙门氏菌污染，可以采取以下措施：1. 生产环节控制合理设计食品生产线，加强生产卫生管理，确保生产过程中的卫生安全。
2. 原料筛选选择优质原料，确保原料的卫生安全性。
3. 加工控制加强食品加工的卫生监管，保障食品加工过程中的卫生安全。
4. 检验监控加强对食品中沙门氏菌的检验监控，确保食品质量和食品安全。
沙门氏菌的检验步骤
沙门氏菌的检验步骤
沙门氏菌检验是检测沙门氏菌的一种检验方法，经常运用于疾病诊断
或科学研究。
沙门氏菌是一种引起众多腹泻疾病的细菌。
这些疾病也被称
为沙门菌性腹泻，通常伴有发热、腹痛、腹泻和腹部肿胀等症状。
沙门氏
菌检验的目的是检测沙门氏菌以及其他可能引起腹泻的病原体，以更准确
地诊断病原体的鉴别及抗菌素抗性测定。
沙门氏菌检验的样本可以是水样
或者肠道样本，包括拇指印中的粪便、血清或其他体液样本。
一、样本采集及筛选
样本采集是沙门氏菌检验的第一步。
沙门氏菌检测的样本可以是尿液、粪便和血液。
在采集样本时，应注意样品的温度和容器表面的消毒。
在采
集血样本时，要避免及时进行处理，以免影响检测结果。
粪便样本应采集
大肠，下肢肚皮，以确保收集到完整的沙门氏菌病症。
采集完样本后，应及时运送至实验室，对样本进行及时清洗和处理，
有效防止细菌的落入和繁殖。
样本筛选时，应根据患者的急迫程度和症状，结合所有信息，判断是否有必要对样本进行检测。
二、检测方法
沙门氏菌检测的常用技术有显微镜、光学显微镜、流式细胞仪、荧光
免疫检测和细菌培养等。
2024版沙门氏菌检验实验解析PPT
增加“无菌量筒：容量50mL、无菌均质杯、无菌均质袋、无菌广口瓶：容量500mL、无菌试管15mm×150mm、18mm×180mm、无菌接种环：10μL（直径约3mm）、1μL以及接种针”
对检验用器具规格明确，方便实验室选用
增加“生物安全柜”
对于实验室开展活菌操作、样本检测实验室生物安全等级需“BSL-2”，因此，增加此设备是生物安全必须。
明确接种菌液浓度为“0.5麦氏浊度”，接种量“2滴~3滴”，避免接种量过大导致假阳性；还有增加"接种混匀后滴加一层无菌液体石蜡进行密封"由于氰化钾不稳定容易分解失效，因此，加石蜡密封避免造成假阳性反应。
“符合表3中A1者，为沙门氏菌典型的生化反应”后面补充“进行血清学鉴定后报告结果”
明确的指出符合沙门氏菌典型的生化反应需要进行血清学鉴定后报告结果
调整可疑菌落初筛流程
流程图更清晰易懂
TTB选择性增菌改为：低背景菌36 ℃±1 ℃，高背景菌42 ℃±1 ℃原因：验证试验发现，对于生鲜样品，TTB 42℃比 TTB 36℃的选择性好，所以继续沿用；对于深加工样品，TTB 36℃比 TTB 42℃生长好，所以低背景菌采用36℃±1℃培养。如有需要，可将预增菌的培养物在2 ℃~8 ℃冰箱保存不超过72h，再进行选择性增菌。
2016版“必要时按表5进行沙门氏菌生化群的鉴定”修改为2024版中“必要时,按表5进行沙门氏菌种和亚种的生化鉴定”
“生化群”用“种和亚种”替代，更易懂;
在表5沙门氏菌种和亚种的生化鉴定中增加“肠炎沙门氏菌、邦戈尔沙门菌种名”以及肠炎沙门氏菌种内对应的6个亚种和生化群分型”;生化反应项增加“明胶酶、L(+)-酒石酸盐、半乳糖醛等8项”
主要变化
章节
新标准变更内容
沙门氏菌检验（现用）
沙门⽒菌检验（现⽤）沙门⽒菌得检验1.⽬得规范沙门⽒菌检测⽅法,使产品检验有据可依。
2.消毒灭菌要求微⽣物检测⽤得玻璃仪器、⾦属⽤具及培养基、被污染与接种得培养物等,必须经灭菌后⽅能使⽤、注:本实验采⽤湿热灭菌法,吸管、培养⽫、培养基等盖好塞⼦并包好瓶⼝在⾼压灭菌锅中按要求得温度与压⼒灭菌,⼀般就是１2１℃(１。
5MＰa)下灭菌2０min。
３.原理沙门⽒菌得检验分四个连续阶段:４.操作步骤4。
1 准备⼯作配制实验所需得缓冲蛋⽩胨⽔、亚硒酸盐胱氨酸培养基(⽆需灭菌)、HＥ培养基、三糖铁培养基等,并将准备好得均质杯、吸管、培养⽫、⼤试管等⼀起灭菌。
4、2 前增菌在⽆菌环境下,称取25ｇ待检样品放⼊盛有2２5ml灭菌好得缓冲蛋⽩胨⽔中,然后放到36±1℃得恒温培养箱内进⾏前增菌４—6h;4、3 增菌在⽆菌环境下,⽤灭菌好得吸管吸取1０mｌ前增菌液接种与100ｍl亚硒酸盐胱氨酸培养基中进⾏⼆次增菌,恒温培养箱３6±1℃,培养18-2４h;4、4 分离培养将增菌培养液摇匀,以⽆菌操作,⽤直径3mm得接种环挑取⼀环,划线于表⾯⽆凝结⽔得ＢS与SS琼脂平板各⼀个,于３6±1℃培养１8－24h。
观察各个平板上有⽆典型或可疑沙门⽒菌属得菌落、如⽆典型或可疑菌落,应再继续培养2４±２ｈ。
然后观察培养得平板(黄⾊得菌落就是⼤肠杆菌;蓝绿⾊或蓝⾊,产硫化氢,菌落中⼼⿊⾊或⼏乎全⿊⾊为可疑沙门⽒菌)。
沙门⽒菌属各亚属在其她选择性琼脂平板得菌落特征4。
5 ⽣化实验⽤灭菌好得接种针在培养平板上挑取可疑得沙门⽒菌单菌落,接种到三糖铁培养基上,恒温培养箱3６±１℃,培养１８-２4h; 典型沙门⽒菌培养物斜⾯显红⾊(碱性),底端显黄⾊(酸性),有⽓体产⽣,形成硫化氢(琼脂变⿊)。
三糖铁培养基变化表肠杆菌科各属在三糖铁琼脂内得反应结果同时将三糖铁培养基上可疑得菌株,做⽣化实验,将可疑得沙门⽒菌落分别接种于尿素、赖氨酸脱羧等发酵管中恒温培养箱36±1℃,培养18－24h(根据上表进⾏判定),将可疑得沙门⽒菌补做进⼀步得⽣化试验,如下表:三糖铁琼脂与赖氨酸脱羧酶培养基筛选备注:K－—产碱;A--产酸;+-—阳性反应,－-阴性反应,(—)少见反应,＋/--阳性或阴性反应三糖铁琼脂与尿素酶琼脂筛选备注:Ｋ-—产碱;A--产酸;+—-阳性反应,－—阴性反应,(-)少见反应,+/－—阳性或阴性反应沙门⽒菌属反应接种后在恒温培养箱3６±1℃,培养1８—2４h,形成红⾊表明就是阳性反应; B、尿素反应接种后在恒温培养箱36±１℃,培养2-24h,发现颜⾊变红表明就是阳性反应;沙门⽒菌⽣化实验鉴定结果4.6 ⾎清学实验在⼲净得培养⽫上,⽤灭菌好得接种环沾取两环AFO多价⾎清,取适量得菌种制成菌悬液,将玻⽚轻轻摇动30-６0s,观察反应,如菌体彼此相凝集成明显或⽐较明显⼩颗粒状物,则认为菌体与ＡFO多价⾎清凝结,反之不凝结;不凝结就是认为检验样品中不含沙门⽒菌,如果凝结,在洁净得波⽚上加⼀滴⽣理盐⽔,将待试培养物混合于⽣理盐⽔滴内,使成为均⼀性得混浊悬菌液。
沙门氏菌方法验证报告
沙门氏菌方法验证报告沙门氏菌是一种常见的细菌，它可以引起人体的食物中毒和感染。
因此，在食品加工和生产过程中，需要对沙门氏菌进行检测和验证。
本文将介绍沙门氏菌方法验证报告。
一、实验目的本实验的主要目的是验证所使用的方法是否能够准确地检测出样品中的沙门氏菌，并确定该方法的灵敏度和特异性。
二、实验材料与仪器1. 沙门氏菌标准品2. 无菌生理盐水3. 培养基：XLD培养基、SS培养基、EB培养基4. 灭菌好的试管、移液管、显微镜等实验器材三、实验步骤1. 准备样品：从食品中取出适量样品，加入适量无菌生理盐水，混合均匀。
2. 检测方法：(1) XLD培养基法：将混合好的样品涂布在XLD培养基上，放置在37℃恒温箱中培养24小时。
观察培养基上是否有红色或黑色小斑点形成。
(2) SS培养基法：将混合好的样品涂布在SS培养基上，放置在37℃恒温箱中培养24小时。
观察培养基上是否有黑色小斑点形成。
(3) EB培养基法：将混合好的样品涂布在EB培养基上，放置在37℃恒温箱中培养24小时。
观察培养基上是否有蓝色或绿色小斑点形成。
3. 结果判断：(1) XLD培养基法：如果在XLD培养基上出现红色或黑色小斑点，则说明样品中存在沙门氏菌。
(2) SS培养基法：如果在SS培养基上出现黑色小斑点，则说明样品中存在沙门氏菌。
(3) EB培养基法：如果在EB培养基上出现蓝色或绿色小斑点，则说明样品中存在沙门氏菌。
四、实验结果经过实验验证，三种方法均能够准确地检测出样品中的沙门氏菌，并且具有较高的特异性和灵敏度。
其中，XLD和EB两种方法对沙门氏菌的检测效果更为明显，能够更快地形成小斑点，因此在实际应用中更为常用。
五、实验结论本实验采用的三种方法均可用于沙门氏菌的检测和验证，具有较高的特异性和灵敏度。
在实际应用中，可以根据样品类型和检测要求选择合适的方法进行检测。
同时，为了确保检测结果的准确性，应严格控制实验条件，并使用标准品进行对照验证。
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沙门氏菌的检验
1．目的
规沙门氏菌检测方法，使产品检验有据可依。
2．消毒灭菌要求
微生物检测用的玻璃仪器、金属用具及培养基、被污染和接种的培养物等，必须经灭菌后方能使用。
注：本实验采用湿热灭菌法，吸管、培养皿、培养基等盖好塞子并包好瓶口在高压灭菌锅中按要求的温度和压力灭菌，一般是121℃（1.5MPa）下灭菌20min。
3．原理
沙门氏菌的检验分四个连续阶段：
4．操作步骤
4.1 准备工作
配制实验所需的缓冲蛋白胨水、亚硒酸盐胱氨酸培养基（无需灭菌）、HE培养基、三糖铁培养基等，并将准备好的均质杯、吸管、培养皿、大试管等一起灭菌。
4.2 前增菌
在无菌环境下，称取25g待检样品放入盛有225ml灭菌好的缓冲蛋白胨水中，
然后放到36±1℃的恒温培养箱进行前增菌4-6h;
4.3 增菌
在无菌环境下，用灭菌好的吸管吸取10ml前增菌液接种与100ml亚硒酸盐胱氨酸培养基中进行二次增菌，恒温培养箱36±1℃，培养18-24h;
4.4 分离培养
将增菌培养液摇匀，以无菌操作，用直径3mm的接种环挑取一环，划线于表面无凝结水的BS和SS琼脂平板各一个，于36±1℃培养18-24h。
观察各个平板上有无典型或可疑沙门氏菌属的菌落。
如无典型或可疑菌落，应再继续培养24±2h。
然后观察培养的平板（黄色的菌落是大肠杆菌；蓝绿色或蓝色，产硫化氢，菌落中心黑色或几乎全黑色为可疑沙门氏菌）。
沙门氏菌属各亚属在其他选择性琼脂平板的菌落特征
4.5 生化实验
用灭菌好的接种针在培养平板上挑取可疑的沙门氏菌单菌落，接种到三糖铁培养基上，恒温培养箱36±1℃，培养18-24h; 典型沙门氏菌培养物斜面显红色（碱性），底端显黄色（酸性），有气体产生，形成硫化氢（琼脂变黑）。
三糖铁培养基变化表
肠杆菌科各属在三糖铁琼脂的反应结果
同时将三糖铁培养基上可疑的菌株，做生化实验，将可疑的沙门氏菌落分别接种于尿素、赖氨酸脱羧等发酵管中恒温培养箱36±1℃，培养18-24h（根据上表进行判定）,将可疑的沙门氏菌补做进一步的生化试验，如下表：
三糖铁琼脂和赖氨酸脱羧酶培养基筛选
备注：K--产碱；A--产酸；＋--阳性反应，－—阴性反应，（－）少见反应，＋/－—阳性或阴性反应
三糖铁琼脂和尿素酶琼脂筛选
备注：K--产碱；A--产酸；＋--阳性反应，－—阴性反应，（－）少见反应，＋/－—阳性或阴性反应
A、靛基质反应
接种后在恒温培养箱36±1℃，培养18-24h，形成红色表明是阳性反应；B、尿素反应
接种后在恒温培养箱36±1℃，培养2-24h，发现颜色变红表明是阳性反应；
沙门氏菌生化实验鉴定结果
4.6 血清学实验
在干净的培养皿上，用灭菌好的接种环沾取两环AFO多价血清，取适量的菌种制成菌悬液，将玻片轻轻摇动30-60s,观察反应，如菌体彼此相凝集成明显或比较明显小颗粒状物，则认为菌体与AFO多价血清凝结，反之不凝结；
不凝结是认为检验样品中不含沙门氏菌，如果凝结，在洁净的波片上加一滴生理盐水，将待试培养物混合于生理盐水滴，使成为均一性的混浊悬菌液。
将玻片轻轻摇动30～60s。
观察反应，如菌体彼此相凝集成明显或比较明显小颗粒状物，即认为有自凝性，反之无自凝性。
有自凝性的菌株可排除；无自凝性的菌株，做以下实验：
1、O抗原检查：用认为无自凝力的纯菌落，用1滴O型血清（例如O4、O5、O16、O12等）代替生理盐水，对该菌株进行排查，如发生凝集，判为阳性，对照国标的附表判定是什么菌种。
2、H抗原检查：如果O抗原不能确定是何种菌株，按照表用上述同样的方法测试H抗原，如发生凝集，判为阳性，对照国标的附表判定是什么菌种。
3、Vi抗原检查：若以上还不能检定菌种，则取大量菌种和生理盐水制成浓的菌悬液在酒精灯上煮沸，然后按照上述方法做Vi 抗原实验，如发生凝集，判为阳性，对照国标的附表判定是什么菌种。
生化试验鉴定结果
5.结果报告
5.1报告阳性结果：“发现沙门氏菌”或“发现亚桑娜菌”或“发现沙门氏菌和亚利桑那菌”。
5.2报告阴性结果：“未发现沙门氏菌”或“未发现亚桑娜菌”或“未发现沙门
氏菌和亚利桑那菌”。