沙门氏菌检验标准操作规程
简述沙门氏菌的检验流程
简述沙门氏菌的检验流程
当然可以，让我用更简单的话说说怎么检查沙门氏菌吧：
唤醒细菌：首先，从食物或者其他样本里取一点点（比如一小块肉或者一些蔬菜），放到一种能让细菌“醒过来”和长大的特殊水里。
然后，让它们在适合的温度下美美地“睡”上一晚。
帮好菌壮大多起来：第二天，从第一步得到的溶液里取点液体，转移到两种特别设计的“营养餐”里，一种是让沙门氏菌特别喜欢的，另一种是考验它们的。
接着，再让它们各自在一个暖暖的地方长一长。
找不同：等细菌长得差不多了，挑一点出来涂在几种颜色不一样的“细菌专属培养皿”上，这些盘子能帮助我们看清楚哪些是沙门氏菌。
确认身份：在培养皿上，我们会看到各种小点点，这些是细菌长出来的。
挑几个可疑的小点，做些小实验，看看它们的行为像不像沙门氏菌，甚至用专门的“血液测试”来确认是不是真的沙门氏菌家族的。
高科技快速验证（如果需要）：有时候，为了更快更准，我们会用一种叫做PCR的技术，直接检查细菌的DNA，就像用指纹一样确定它们的身份。
整个过程就像是在众多的细菌中找出沙门氏菌这个“嫌疑犯”，确保我们的食物安全，或者帮助医生诊断疾病。
沙门氏菌检验
沙门氏菌检验一、培养基和试剂：1、缓冲蛋白胨水（BP）：按GB4789.28中4.12规定2、氯化镁孔雀绿（MM）增菌液：按GB4789.28中4.13规定3、四硫酸钠煌绿（TTB）增菌液：按GB4789.28中4.14、4.15规定4、亚硒酸盐胱氨酸（SC）增菌液：GB4789.28中4.16规定5、亚硫酸铋琼脂（BS）：按GB4789.28中4. 19规定6、DHL琼脂：按GB4789.28中4. 20规定7、HE琼脂：按GB4789.28中4.21规定8、WS琼脂：按GB4789.28中4.23规定9、SS琼脂：按GB4789.28中4.22规定10、三糖铁琼脂：按GB4789.28中4.26、27规定11、蛋白胨水靛基质试剂：按GB4789.28中3.13规定12、尿素琼脂（Ph7.2）：按GB4789.28中3.15规定13、氰化钾（KCN）培养基：按GB4789.28中3.16规定14、氨基酸脱羧酶试验培养基：按GB4789.28中3.12规定15、糖发酵管：按GB4789.28中3.2规定16、ONPC培养基：按GB4789.28中3.3规定17、半固体脂：按GB4789.28中4.30规定18、丙二酸钠培养基：按GB4789.28中3.7规定19、沙门氏菌因子血清：按26种用于初步分型；57种用于进一步分型；163种用于详细分型。
二、沙门氏菌检验程序：三、操作步骤：（一）、前增菌和增菌冻肉、蛋品、乳品及其他加工食品均应经过前增菌。
各称取检样25g，加在装有255ml缓冲蛋白胨水的500ml广口瓶内。
固体食品可先应用均质器以8000~100000r/min打碎1min，或用乳钵加灭菌砂磨碎，粉状食品用灭菌匙或玻棒研磨使乳化，于36±1℃培养4h（干蛋品培养18~24h）移取10ml，转种于100ml氯化镁孔雀绿增菌液或四硫酸钠煌绿增菌液内，于42℃培养18~24h。
同时，另取10ml，转种于100ml亚硒酸盐胱氨酸增菌液内，于36±1℃培养18~24h.。
食品沙门氏菌测试方法标准
食品沙门氏菌测试方法标准
食品沙门氏菌测试方法标准主要包括以下步骤：
1.样品采集：从待检测的食品中采集适量样品，确保样品的代表性。
2.样品处理：将采集的样品进行适当处理，如破碎、研磨等，以便后续的
检测操作。
3.增菌培养：将处理后的样品接种到选择性培养基中，进行增菌培养。
选
择性培养基可以抑制其他微生物的生长，促进沙门氏菌的增殖。
4.分离培养：将增菌培养后的样品划线接种到鉴别培养基上，进行分离培
养。
鉴别培养基可以进一步筛选出沙门氏菌，并对其进行鉴别。
5.生化鉴定：对分离培养得到的沙门氏菌进行生化鉴定，以确定其是否为
沙门氏菌。
常用的生化鉴定方法包括API 20E、三糖铁试验等。
6.血清学鉴定：对生化鉴定为沙门氏菌的菌株进行血清学鉴定，以确定其
具体血清型。
常用的血清学鉴定方法包括玻片凝集试验、试管凝集试验等。
7.药敏试验：对分离得到的沙门氏菌进行药敏试验，以确定其对不同药物
的敏感性，为临床治疗提供参考。
需要注意的是，食品沙门氏菌测试方法标准可能因不同国家和地区而有所差异。
因此，在实际操作中，应根据当地的标准和法规进行相应的调整和操作。
沙门氏菌实验标准操作程序
关键控制点
1、操作台的卫生；
2、操作时房间风扇的开关，超净台的风扇开微风。
3、操作过程中注意无菌操作，冲枪后连枪头带里面的液体一并打入垃圾桶，并用酒精棉球清洗移液器枪口，切勿将液体打回原试管或三角瓶中。
注意事项
无菌操作将样品转至500 mL锥形瓶中，如使用均质袋，可直接进行培养，于36℃±1℃培养8 h～18h。
如为冷冻产品,应在45℃以下不超过15 min,或2～5℃不超过18 h解冻。
5、增菌轻轻摇动培养过的样品混合物，取1 mL，转种于10 mL亚硒酸盐胱氨酸增菌液SC内，于36℃±1℃培养18 h～24 h。同时，另取取1 mL，转种于10 mL TTB内，于42℃±1℃培养。
2、亚硒酸盐胱氨酸增菌液（SC）：称取23g亚硒酸盐胱氨酸增菌液溶于1000mL蒸馏水中，加热煮沸灭菌，不要过度加热，定量分装备用，勿需高压灭菌。
3、四硫磺酸钠煌绿增菌液（TTB）：称取93.5g四硫磺酸钠煌绿增菌液溶于1000mL蒸馏水中，121℃高压灭菌20min,临用前按每100ML加入碘液一支和P-73 0.1%煌绿一支，混匀后分装。现配先用，不宜久留。
沙门氏菌实验标准操作程序
岗位名称
检验员
执行人员
检验员
技能要求
掌握实验技能
监控人员
检验员
监控频率
实验过程
检验方法
对照试验
作业条件
在无菌室内操作
作业步骤
1、超净工作台与无菌室紫外灯照射半小时，通风半小时后进入无菌室操作；
2、样品用75%酒精喷洒后放入传递窗，在无菌室操作台按顺序摆放后再用75%酒精均匀喷洒；
0040沙门氏菌生化试验检验操作规程
目的建立沙门氏菌生化检验操作规程，确保检验数据的准确性。
依据《中国药典》2000版一部附录XIIIC-（80-81页）。
范围本标准适用于沙门氏菌生化检验操作。
责任人QC负责人、化验员。
内容1使用仪器、玻璃器皿、培养基、染色剂及试剂。
1.1仪器：托盘天平1.2玻璃器皿：150ml锥开瓶、试管、载玻片1.3试液：1.3.1靛基质试液：取对二甲基苯甲醛5.0g，加入乙醇75ml，充分振摇，使完全溶解后，再取浓盐酸25ml徐徐滴入（边滴边振摇，以免骤热使溶液色泽变深）即得。
1.3.2 0.9%氯化钠溶液：取氯化钠0.9g，加入蒸馏水100ml，微热使溶解，121℃灭菌30分钟，放冷，备用。
1.4染色剂：1.4.1结晶紫染液：取结晶紫1.0g，加入95%乙醇20ml使溶解，加1%草酸铵水溶液80ml，混匀，静置48小时使用，置密闭棕色瓶中贮存。
1.4.2碘液：取碘化钾2.0g，加水3-5ml使溶解，加入碘片1.0g，使全部溶解后加水稀释至300ml，置密闭棕色瓶贮存。
1.4.3沙黄试液：取沙黄0.25g，加95%乙醇10ml，使完全溶解后，加水100ml。
1.5培养基：1.5.1营养肉汤增菌液：取营养肉汤试药22g，加蒸馏水1000ml微热使溶解，按每瓶100ml分装，121℃灭菌15分钟，备用。
1.5.2四硫磺酸盐增菌液：取四硫磺酸盐试药4.6g，加蒸馏水100ml微热使溶解，121℃灭菌30分钟，备用。
1.5.3胆盐硫化琼脂培养基：取胆盐硫化琼脂培养基试药48g，加蒸馏水1000ml加热溶化后，116℃灭菌30分钟，冷却至60℃灭菌，倾注平皿，备用。
1.5.4曙红亚甲蓝琼脂培养基：取营养琼脂培养基（取营养琼脂试药4g，加水100ml，116℃灭菌备用）加热溶化后，取100ml，冷至60℃按无菌操作加入灭菌的20%乳糖溶液5 ml，曙红钠指示液2ml和亚甲蓝指示液1.5ml，摇匀，倾注平皿。
1.5.5沙门、志贺菌属琼脂：取沙门、志贺菌属琼脂试药60g，加蒸馏水1000ml，放置20分钟，用石棉网微火煮沸使完全溶解，冷至50℃左右倾入无菌平皿中凝固后，备用。
沙门氏菌检测操作规程
沙门氏菌检测操作规程1 原理沙门氏菌的检测需要四个连续的阶段见下图：1.1 用非选择性液体培养基预增菌将试料接种到缓冲蛋白胨水（BPW），在36℃±1℃下培养16~20h。
（样品中可能存在少量的沙门氏菌却含大量的肠杆菌科的其他菌，所以选择性增菌是必须的；为了检测受伤的沙门氏菌，常须进行预增菌。
）1.2 在选择性液体培养基上增菌将1.1中的培养物接种到四硫磺酸钠煌绿（TTB）增菌液和亚硒酸盐胱氨酸（SC）增菌液中。
于TTB增菌液内42℃±1℃培养18h～24h；SC 增菌液内36℃±1℃培养18h～24h。
1.3 初步筛选将1.2的培养物接种到以下两个选择性培养基：亚硫酸铋（BS）琼脂、木糖赖氨酸脱氧胆盐（XLD）琼脂，于36℃±1℃分别培养40h～48h（BS 琼脂平板）或18h～24h（XLD 琼脂平板），根据菌落特性，辨别可疑沙门氏菌菌落。
1.4再次筛选挑出1.3中的可疑沙门氏菌菌落，在沙门氏菌显色培养基中培养再次筛选，再用合适的生化和血清学试剂进行鉴定。
2 试剂与仪器2.1所用器具三角烧瓶、玻璃珠、具塞试管、培养皿、1000μL枪头、5mL枪头、称量勺、接种环、接种针2.2 仪器：分析天平、恒温培养箱、微型振荡器、超净工作台、高压灭菌锅2.3 所用试剂和培养基2.3.1缓冲蛋白胨水培养基（BPW）称取BPW培养基20.1g，加入蒸馏水1L，搅拌加热煮沸至完全溶解，以90mL/瓶分装到各锥形瓶，并于121℃灭菌15 min，冷至常温。
2.3.2 四硫磺酸钠煌绿（TTB）增菌液取TTB增菌液基础93.6g，加入蒸馏水1L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装于锥形瓶中，每瓶100mL。
将锥形瓶放入灭菌锅中，121℃灭菌20min；冷至30℃，每100mL基础培养基中加入TTB配套试剂碘液和煌绿各一支（开启前用75%酒精棉消毒西林瓶表面），混合均匀。
2.3.3 亚硒酸盐胱氨酸（SC）增菌液取SC培养基23g，加入蒸馏水1L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装锥形瓶，冷至常温备用。
沙门氏菌检验国标检验步骤及接种方式
沙门氏菌检验国标检验步骤及接种方式沙门氏菌是一种常见的细菌引起的食源性疾病，可能会导致严重的胃肠道感染。
为了保障食品安全，确保公众的健康，我们需要进行沙门氏菌的国标检验。
下面是一份生动、全面且有指导意义的文章，详细介绍了沙门氏菌检验的国标检验步骤和接种方式。
第一步：样品准备在进行沙门氏菌检验之前，我们首先需要准备样品。
常见的样品包括食品、水、动物排泄物等，可能携带沙门氏菌。
样品应该收集自具有代表性的地点，并采取无菌采样容器进行收集。
收集样品时要注意避免污染，并确保样品的数量足够进行检验。
第二步：样品处理样品处理的目的是将潜在的沙门氏菌分离出来，并进行后续的检测。
可以采用不同的方法进行样品处理，常见的方法包括富集培养和选择性培养。
富集培养是将样品放入富集培养基中，利用培养基中的营养物质以及特定条件促使沙门氏菌生长。
选择性培养则是利用培养基中的特殊抑制剂抑制其他细菌的生长，从而使沙门氏菌生长出来。
第三步：菌落鉴定在样品处理后，我们需要对培养基上的菌落进行鉴定，确认是否为沙门氏菌。
常见的鉴定方法包括形态学鉴定、生理生化鉴定和分子生物学鉴定。
形态学鉴定主要通过观察菌落的形状、颜色和大小等特征来判断细菌的种类。
生理生化鉴定则是通过检测菌落对特定物质的代谢情况来确定细菌的种类。
分子生物学鉴定是利用特定的DNA序列来识别沙门氏菌的基因，通常使用PCR技术进行检测。
第四步：抗菌药敏试验沙门氏菌的抗菌药敏性检测是为了确定对何种抗生素具有敏感性。
通过抗菌药敏试验，我们可以选择合适的药物来治疗感染。
可以使用各种常见的抗生素盘进行试验，然后观察沙门氏菌对不同抗生素的反应。
根据抗生素的抑菌效果，可确定沙门氏菌的耐药性情况。
第五步：结果分析与报告最后一步是对检验结果进行分析，并撰写检验报告。
检验结果要结合国家标准进行评估，确定样品是否合格。
如果样品中检测到沙门氏菌，还需要评估其数量以及对公众健康可能造成的风险。
在撰写报告时，需要详细记录样品的来源、处理方法、检验步骤和结果，以及相应的建议和措施。
沙门氏菌检验标准操作规程
沙门氏菌检验标准操作规程1目的purpose规范888物料、产品的沙门氏菌检验操作，确保检验结果的可靠性。
2范围scope适用于888物料、产品的沙门氏菌检验工作。
3责任responsibility微生物检验员严格执行本规程，品质部负责人监督执行。
4程序procedure4.1定义和原理沙门氏菌广为存有于动物的肠道和内脏，以及被粪便污染的水和土壤中，就是细菌性食物中毒的主要病因。
本方法利用沙门氏菌呈圆形辛酸酯酶阳性，而氧化酶和脂肪酶均呈圆形阴性的特性，对物料、产品展开沙门氏菌检验。
4.2材料和设备4.2.1紫外灯：波长366nm，功率不小于6w。
4.2.2放大镜：3至4倍。
4.2.3毛细滴管。
4.2.4lx-b35l压力蒸汽杀菌锅。
4.2.5无菌的培养皿。
4.2.6无菌的注射环路。
4.3培养基和试剂4.3.1scdlp液体培养基：按《化妆品卫生规范》（2021版）或使用商品培养基干粉配制。
4.3.2四硫磺酸钠煌蓝（ttb）减菌液：按gb4789.4—2021第三章a.5酿制或采用商品试剂。
4.3.3ss琼脂培养基（含1%蔗糖）：牛肉浸膏(或牛肉粉)5.0g，蛋白胨5.0g，乳糖10.0g，蔗糖10.0g，胆盐no.38.5g，柠檬酸钠8.5g，硫代硫酸钠1.0g，柠檬酸铁1.0g，煌绿1.0g，中性红0.025g，琼脂13.5g，蒸馏水1000ml。
4.3.4he琼脂培养基：按gb4789.4—2021第三章a.5或采用商品培养基干粉酿制。
4.3.5玉米油维多利亚蓝琼脂培养基：灭菌后的基础培养基冷却至50℃左右，边摇边加入玉米油乳化液。
倾注平皿，制成平板。
基础培养基及玉米油乳化液配方如下：a）基础培养基：蛋白胨5g，酵母浸粉3g，氯化钠5g，琼脂13g，水900ml，ph7.8-8.0。
将各成分重新加入水中，冷却熔化。
调节ph7.8-8.0，116℃15min高压杀菌。
b）玉米油乳化液：玉米油100ml，0.1%维多利亚蓝水溶液100ml，0.5%琼脂溶液80ml，吐温801ml。
微生物检验实验室沙门菌属标准操作规程
微生物检验实验室沙门菌属标准操作规程1.概述沙门菌属是一大群寄生于人和动物肠道中的形态、培养特性、生化反应和抗原构造相似的革兰阴性杆菌，其血清型别繁多、抗原复杂的肠道病原菌，分为6个亚属、2200种以上的血清型。
伤寒沙门菌属亚属I，多价O抗血清D群，是临床上最为重要的沙门菌。
2.标本类型粪便、血液等额标本。
3.鉴定3.1 形态与染色：革兰阴性杆菌，菌体细长，大小为（0.7~1.5um）×（2~5um）。
有周鞭毛，无芽胞，无荚膜。
3.2 培养特性：在麦康凯琼脂平板上形成无色、透明的菌落；SS琼脂平板上呈无色、透明，但大部分菌落中央呈黑色（产H2S）；在XLD琼脂平板上也产生中央黑色的菌落（产H2S）；HE琼脂平板上菌落呈蓝绿色。
CHROMagar显色培养基上呈紫色菌落。
半固体琼脂中均匀混浊生长，无穿刺线。
3.3 生化反应：氧化酶试验阴性，TSI为K/A；发酵葡萄糖，不发酵乳糖；IMViC-+--或-+-+，H2S试验阳性或阴性，动力、赖氨酸脱羧酶和硝酸盐还原试验阳性，鸟氨酸脱羧酶、尿素酶试验阴性，氰化钾（KCN）培养基不生长。
3.4 鉴别要点：3.4.1 本菌特征：鉴别平板上无色透胆或半透明的菌落，TSI为K/A，H2S阳性或阴性，有动力，IMViC-+--或-+-+，尿素酶试验阴性。
符合上述特性者，可通过血清凝集试验）作出诊断。
3.4.2 与志贺菌属的鉴别：少数伤寒沙门菌在TSI上H2S阴性，动力不明显，易与志贺菌属混淆，可用血清凝集反应相鉴别。
3.5 操作步骤3.5.1 观察菌落特征，挑取可疑菌落，做TSI试验。
参见细菌鉴定标准操作构规程。
3.5.2 血清学鉴定参见沙门菌血清学检测标准操作规程。
3.5.3 鉴定从SS琼脂平板上挑取可疑菌落，用微生物鉴定仪或传统生化法进行细菌鉴定。
4. 药敏参见药物敏感性试验标准操作规程及CLSI M100-S20最新版本文件。
5. 质量控制参见质量管理程序。
沙门氏菌的鉴定流程
沙门氏菌的鉴定流程
沙门氏菌的鉴定流程一般如下：
1. 根据临床病例的表现和样品来源等信息，初步判断可能为沙门氏菌感染。
2. 采集患者样品，包括血液、尿液、粪便、呕吐物等，或者食品、水等环境样品。
3. 进行细菌分离和培养，采用通常的细菌培养基，如MacConkey培养基、血液琼脂培养基等，在37℃下培养24小时以上。
4. 进行生化鉴定，根据沙门氏菌的生化特性进行鉴定，常用的包括氧化氢酶试验、半胱氨酸脱脲酶试验、甲基红反应等。
5. 检测血清学指标，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）或血凝试验（Widal试验）等，检测患者血清中抗体水平的变化和滴度。
6. DNA分型鉴定，通过PCR技术扩增沙门氏菌的特定片段进行分型鉴定。
综合上述方法，结合临床表现和病史等信息，可以初步确认是否为沙门氏菌感染，进一步确定病情和治疗方案。
沙门氏菌检验详细流程
新的血清型名称的批准必须有巴斯德研究所、德国汉 堡卫生研究所及美国CDC 3个实验室的一致同意。
精品课件
沙门氏菌检验程序
精品课件
前增菌
目的：修复损伤的细菌细胞； 方法：25 g（mL）样品＋225 mL BPW的无菌均
57个O抗原 116个H抗原 Vi抗原
被分成2500多个血清型 。
Vi抗原 O抗原 H抗原
精品课件
沙门氏菌命名与书写方式
目前的命名方法规定：
肠道沙门菌肠道亚种（亚种Ⅰ）给予专用名，并采用 标本分离地址的地名。菌名的第一个字母需大写，且 亚种Ⅰ的所用菌名不能用斜体。例如：肠道沙门菌鼠 伤寒血清型应书写为Salmonella enterica subsp.enterica serotype Typhimurium，但在实际工 作中，可简写为S. Typhimurium。
精品课件
血清学鉴定时的注意要点：
做血清凝集时，同时应用生理盐水做对照。 O血清不凝集时，可将菌株转接于琼脂量较高(如
2.5%-3%)的斜面上，再做凝集。 如果由于Vi抗原的存在而阻止了O抗原的凝集反应
时，应挑取菌苔于1mL生理盐水中做成菌悬液。煮 沸后再检查。(常见于伤寒沙门菌)。 有极少数的二相沙门菌会同时出现2相H抗原，也 有一些沙门氏菌在培养过程中H抗原会出现第1项 和第2项之间的转变，所以血清诱导实验要用新鲜 的培养物进行诱导。
GB 4789.4-2010 食品安全国家标准 食品微生物学检验 沙门氏菌检验
精品课件
沙门菌概况
沙门菌是1885年由Salmon氏等在猪霍乱流行 时，分离出的猪霍乱沙门菌，由于Salmon氏 对本属细菌的发现贡献卓越，故定名为沙门 菌属。
沙门氏菌临床检测质量控制指标及标准操作程序
沙门氏菌临床检测质量控制指标及标准操作程序1. 引言1.1 概述本文旨在介绍沙门氏菌临床检测质量控制指标及标准操作程序。
沙门氏菌是一种常见的食源性致病菌，它可以引发沙门氏菌感染，导致人们出现食物中毒等健康问题。
为了确保食品安全和公共卫生，对沙门氏菌进行准确可靠的检测非常关键。
1.2 文章结构本文分为引言、正文、沙门氏菌临床检测质量控制指标、标准操作程序和结论五个部分。
正文将详细介绍沙门氏菌的相关知识，包括其生物学特性、传播途径以及潜在风险。
随后，我们将重点探讨如何进行沙门氏菌的临床检测，并提供相应的质量控制指标和标准操作程序。
1.3 目的本文目的是提供临床实验室从事沙门氏菌检测工作所需的正确操作步骤和相关质量控制指标。
通过遵循标准程序并确保质量控制准则的合规性，临床实验室可以提高检测的准确性和可靠性，从而更好地服务于食品安全和公共卫生领域。
以上是“1. 引言”部分的内容，主要涵盖了概述、文章结构和目的。
通过引言部分的介绍，读者能够对本文要讨论的内容有一个整体的了解，并明确阅读该文的价值所在。
2. 正文沙门氏菌（Salmonella），又称沙门氏埃希菌，是一种常见的致病性细菌。
它可以通过食物、水源以及接触感染等途径传播给人体，引发沙门氏菌肠道感染或伤寒等严重疾病。
因此，对于沙门氏菌的临床检测质量控制非常重要。
在进行沙门氏菌的临床检测时，需要遵循一系列标准操作程序以确保结果的准确和可靠性。
这些操作程序包括但不限于样本采集、处理和分析过程中的相关步骤。
首先，在样本采集时，应该选择合适的标本类型。
一般来说，粪便、血液、尿液等可以作为潜在的沙门氏菌感染标本类型。
采集样本应注意无菌操作，避免污染和交叉感染。
其次，在处理样本前，需要进行适当的预处理。
这包括将样本进行离心分离，并使用合适的缓冲液稀释。
此外，在进行培养前应彻底混匀样品，确保细菌均匀分布。
接下来是沙门氏菌的检测。
传统方法主要是通过进行培养和鉴定来确定有无沙门氏菌的存在。
沙门氏菌检验国标检验步骤及接种方式
沙门氏菌检验国标检验步骤及接种方式沙门氏菌是一种革兰氏阴性杆菌,广泛存在于食品、环境中,尤其是在沙门氏菌感染的食品中。
沙门氏菌检验是食品安全检测中的重要一环,其准确性和可靠性对保障公众健康至关重要。
下面将介绍沙门氏菌检验国标的检验步骤及接种方式。
一、检验步骤
1.原料准备:准备待检样品,包括食品、环境样品等。
2.样品采集:采集样品时应使用一次性餐具或清洁用具,确保样品的完整性和真实性。
3.样品处理:对采集的样品进行初步处理,包括去除杂质、研磨成粉末等。
4.检验样品:将处理后的样品放入含有适当浓度的试剂管中,进行沙门氏菌检验。
5.结果判断:根据检验结果判断样品是否存在沙门氏菌感染。
二、接种方式
1.沙门氏菌疫苗接种:在食品安全检测中,一般使用沙门氏菌疫苗进行接种。
疫苗接种后,人体免疫系统会产生针对沙门氏菌的抗体和免疫记忆,从而有效地预防沙门氏菌感染。
2.样品接种:对于食品样品,可以使用沙门氏菌疫苗进行接种。
在样品处理过程中,可以通过加入疫苗,使样品受到沙门氏菌的感染,进而进行检测以判断样品是否存在感染。
三、注意事项
1.接种疫苗前,应进行体检,确保没有患有其他疾病或感染。
2.接种疫苗后,应严格按照操作规程进行样品处理和检测,以确保检验结果的准确性和可靠性。
3.疫苗接种后可能会出现短暂的发热、乏力等症状,正常现象,不应影响检测结果。
沙门氏菌检验国标的检验步骤及接种方式非常重要,可以确保食品安全检测的准确性和可靠性。
在食品安全检测中,应严格遵守操作规程,确保疫苗接种的安全和有效性,以保证公众健康安全。
沙门氏菌检验详细流程
沙门氏菌属各生化群的鉴别
必要时按此表进行沙门菌生化群鉴定
项目
Ⅰ
Ⅱ
Ⅲ
Ⅳ
Ⅴ
Ⅵ
卫矛醇 ＋
＋
－
－
＋
－
山梨醇 ＋
＋
＋
＋
＋
－
水杨苷 －
－
－
＋
－
－
ONPG －
－
＋
－
＋
－
丙二酸 －
＋
＋
－
－
－
盐
KCN
－
－
－
＋
＋
－
注：＋表示阳性; －表示阴性。
沙门菌的其他鉴定
• API 20E • VITEK32 GNI＋ 卡片
沙门菌的血清学鉴定
无菌均质袋
选择性增菌与分离
• 轻轻摇动培养过的样品混合物，移取1 mL, 转种 于10 mL TTB 内, 于42 ±1 ℃培养18 ～24 h。 同时, 另取1 mL, 转种于10 mL SC内, 于36 ±1 ℃培养18 ～24 h。
• 分别用接种环取增菌液1环, 划线接种于一个BS琼 脂平板和一个XLD琼脂平板（或HE琼脂平板或显色 培养基平板）。于36 ±1 ℃分别培养18 ～24 h (XLD琼脂平板、HE琼脂平板、显色培养基平板) 或40 h～48 h (BS琼脂平板)，观察各个平板上生 长的菌落。
生化试验
• 自选择性琼脂平板上分别挑取2个以上典型 或可疑菌落，分别接种三糖铁（TSI）琼脂、 赖氨酸脱羧酶试验培养基和营养琼脂平板； 取菌落一部分于斜面划线后穿刺底层。
• 接种针在接种TSI后不要灭菌，直接接种赖 氨酸脱羧酶试验培养基和营养琼脂平板， 于36 ℃培养18 ～24 h，必要时可延长至 48 h。
食品中沙门氏菌检验操作规范(已完)
食品中沙门氏菌检验操作规范1 检验依据本方法参照GB4789.4-2010《食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验》。
2 设备和材料除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下：2.1 冰箱：2 ℃～5 ℃。
2.2 恒温培养箱：36 ℃±1 ℃，42 ℃±1 ℃。
2.3 均质器。
2.4 振荡器。
2.5 电子天平：感量0.1 g。
2.6 无菌锥形瓶:容量500 mL，250 mL。
2.7 无菌吸管：1 mL（具0.01 mL 刻度）、10 mL（具0.1 mL 刻度）或微量移液器及吸头。
2.8 无菌培养皿：直径90 mm。
2.9 无菌试管：3 mm×50 mm、10 mm×75 mm。
2.10 无菌毛细管。
2.11 pH 计或pH 比色管或精密pH 试纸。
2.12 全自动微生物生化鉴定系统。
3 培养基和试剂（按说明书配置或灭菌）3.1 缓冲蛋白胨水（BPW）；3.2 四硫磺酸钠煌绿（TTB）增菌液；3.3 亚硒酸盐胱氨酸（SC）增菌液；3.4 亚硫酸铋（BS）琼脂；3.5 HE 琼脂；3.6 木糖赖氨酸脱氧胆盐（XLD）琼脂；3.7 沙门氏菌属显色培养基；3.8 三糖铁（TSI）琼脂；3.9 蛋白胨水、靛基质试剂；3.10 尿素琼脂（pH 7.2）；3.11 氰化钾（KCN）培养基；3.12 赖氨酸脱羧酶试验培养基；3.13 糖发酵管；3.14 邻硝基酚β-D 半乳糖苷（ONPG）培养基；3.15 半固体琼脂；3.16 丙二酸钠培养基；3.17 沙门氏菌O 和H 诊断血清；3.18 生化鉴定试剂盒。
4 检验程序沙门氏菌检验程序见图1。
图1 沙门氏菌检验程序5 操作步骤5.1 前增菌称取25 g（mL）样品放入盛有225 mL BPW 的无菌均质杯中，以8 000 r/min～10 000 r/min 均质1 min～2 min，或置于盛有225 mL BPW 的无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打1 min～2 min。
沙门氏菌检验
沙门氏菌的检验1. 目的规范沙门氏菌检测方法，使产品检验有据可依。
2. 消毒灭菌要求微生物检测用的玻璃仪器、金属用具及培养基、被污染与接种的培养物等必须经灭菌后方能使用。
注：本实验采用湿热灭菌法，吸管、培养皿、培养基等盖好塞子并包好瓶口在高压灭菌锅中按要求的温度与压力灭菌,一般就是121C （1、5MPa下灭菌20min。
3. 原理沙门氏菌的检验分四个连续阶段：4. 操作步骤4、1准备工作配制实验所需的缓冲蛋白胨水、亚硒酸盐胱氨酸培养基（无需灭菌）、HE培养基、三糖铁培养基等，并将准备好的均质杯、吸管、培养皿、大试管等一起灭菌。
4、2前增菌在无菌环境下,称取25g待检样品放入盛有225ml灭菌好的缓冲蛋白胨水中, 然后放到36±「C的恒温培养箱内进行前增菌4-6h;4、3增菌在无菌环境下，用灭菌好的吸管吸取10ml 前增菌液接种与100ml 亚硒酸盐胱 氨酸培养基中进行二次增菌,恒温培养箱36± 1C ,培养18-24h; 4、4分离培养将增菌培养液摇匀，以无菌操作，用直径3mm 的接种环挑取一环，划线于表面 无凝结水的BS 与SS 琼脂平板各一个，于36± 1C 培养18-24h 。
观察各个平板上 有无典型或可疑沙门氏菌属的菌落。
如无典型或可疑菌落 ，应再继续培养24 ± 2h 。
然后观察培养的平板（黄色的菌落就是大肠杆菌；蓝绿色或蓝色，产硫化氢, 菌落中心黑色或几乎全黑色为可疑沙门氏菌）。
沙门氏菌属各亚属在其她选择性琼脂平板的菌落特征4、5生化实验用灭菌好的接种针在培养平板上挑取可疑的沙门氏菌单菌落，接种到三糖铁 培养基上,恒温培养箱36 ± 1C ,培养18-24h;典型沙门氏菌培养物斜面显红色（碱性）,底端显黄色（酸性），有气体产生，形成硫化氢（琼脂变黑） 三糖铁培养基变化表肠杆菌科各属在三糖铁琼脂内的反应结果斜面底层产气硫化氢可能的菌属和种/沙门氏葡属.弗劳地氏柠檬酸杆菌、变形+ + +杆嚙属、缓慢爱徳华氏苗沙门氏菌皿、弗劳地氐拧樣酸杆菌、普通+ + +变形杆菌_ 沙门氏菌属、大肠埃希氏菌*蜂窝哈夫尼+ +■亚曲、摩根氏曲、普罗菲登斯菌属伤寒沙门氏菌、鸡沙门氏莆、志贺氏葡属S + - - 大肠埃希氏曲、蜂窝哈夫尼亚菌•摩很氏菌"普罗菲登斯菌属大肠埃希氏菌、肠杆菌属、克雷伯氏菌+ +■属.沙雷氏菌属•弟劳地氏拧檬酸杆菌注：+表示阳性；-表示阴件；+/ -表示多数阳性.少数阴性。
国标法检测沙门氏菌流程
国标法检测沙门氏菌流程今天咱们来了解一下国标法检测沙门氏菌的流程呀。
沙门氏菌可不能小瞧它呢。
就像有一群小坏蛋藏在食物里，我们得把它们找出来。
检测沙门氏菌就像是一场侦探游戏。
最开始呀，要采集样品。
比如说，要是检测超市里的鸡肉有没有沙门氏菌，工作人员就会从好多鸡肉里选取一部分作为样品。
这就像从一堆宝藏里先挑出几个小盒子，看看里面有没有坏东西。
拿到样品后，要进行前增菌。
这就像是给那些可能存在的沙门氏菌喂点吃的，让它们快快长大。
把样品放到一种特殊的营养液里，然后放在合适的温度下，就像把小种子种到肥沃的土里，等着它发芽。
接着是选择性增菌呢。
这个时候呀，就像是把前面养大的细菌都放到一个新的环境里，这个环境是专门为沙门氏菌打造的。
其他的细菌可能在这个环境里就长不好啦，只有沙门氏菌能够茁壮成长。
这就好比是在一个特别的小岛上，只有特定的小动物才能生存。
然后就是分离培养啦。
把经过选择性增菌的东西放到一种特殊的平板上，这个平板就像一个大操场，沙门氏菌在上面会长成一个个小点点，就像操场上的小朋友们各自站在自己的位置上。
这些小点点的样子和其他细菌的小点点可能不一样哦。
之后就是生化鉴定啦。
这就像是给那些小点点做个小测试。
看看它们是不是真的沙门氏菌。
工作人员会用一些特殊的东西去和这些小点点反应，如果反应对了，那就很可能是沙门氏菌啦。
就像我们在学校做小实验，把醋倒在小苏打上会冒泡泡，这就是一种特殊的反应。
最后呀，还要进行血清学鉴定。
这就像是给可能是沙门氏菌的小点点再做一次身份确认。
如果所有的检测都表明这个小点点就是沙门氏菌，那我们就找到了这个藏在食物里的小坏蛋啦。
通过这样的流程，我们就能知道食物里有没有沙门氏菌这个小坏蛋啦。
这样我们就能吃到安全放心的食物啦。
是不是很有趣呢？就像一场特别的寻宝游戏，只不过我们找的是坏细菌。
沙门氏菌的检验步骤
沙门氏菌的检验步骤
沙门氏菌检验是检测沙门氏菌的一种检验方法，经常运用于疾病诊断
或科学研究。
沙门氏菌是一种引起众多腹泻疾病的细菌。
这些疾病也被称
为沙门菌性腹泻，通常伴有发热、腹痛、腹泻和腹部肿胀等症状。
沙门氏
菌检验的目的是检测沙门氏菌以及其他可能引起腹泻的病原体，以更准确
地诊断病原体的鉴别及抗菌素抗性测定。
沙门氏菌检验的样本可以是水样
或者肠道样本，包括拇指印中的粪便、血清或其他体液样本。
一、样本采集及筛选
样本采集是沙门氏菌检验的第一步。
沙门氏菌检测的样本可以是尿液、粪便和血液。
在采集样本时，应注意样品的温度和容器表面的消毒。
在采
集血样本时，要避免及时进行处理，以免影响检测结果。
粪便样本应采集
大肠，下肢肚皮，以确保收集到完整的沙门氏菌病症。
采集完样本后，应及时运送至实验室，对样本进行及时清洗和处理，
有效防止细菌的落入和繁殖。
样本筛选时，应根据患者的急迫程度和症状，结合所有信息，判断是否有必要对样本进行检测。
二、检测方法
沙门氏菌检测的常用技术有显微镜、光学显微镜、流式细胞仪、荧光
免疫检测和细菌培养等。
请述疑为沙门杆菌感染患者的标本的微生物检验程序
请述疑为沙门杆菌感染患者的标本的微生物检验程序现如今人们越来越重视食品安全,很多鸡鸭等家禽会感染沙门氏菌,导致禽流感,如果有人吃了感染了沙门氏菌的家禽,同样也会被感染,会出现发热,腹泻等症状,这是就需要及时就医,否则将会有生命危险。
所以有人就会问那如何检测沙门氏菌,具体步骤是什么?下面就介绍一下沙门氏菌检验程序的步骤。
1、前增菌:在盛有90MLBPW的无菌均质杯中放入10g(mL)样品,用拍击式均质器拍打1min ~ 2min ,在36°C +1°C的温度中培养8h ~ 18h。
2、增菌:将培养过的样品混合物轻轻摇动,移取1mL ,种于10 ML TTB内,在42°C士1°C的温度中培养18h~ 24h。
同时,另取1mL,种于10mLSC内,在36°C+ 1'C的温度中培养18h ~ 24h。
3、分离:分别在一个BS琼脂平板和一一个H琼脂平板用接种环取增菌液1环。
在36°C土1°C的温度中分别培养18h ~ 24h(HE 琼脂平板、沙门氏菌属显色培养基平板)或40h ~ 48h(BS琼脂平板) ,在各个平板上观察生长的菌落。
4、生化试验:三糖铁琼脂和赖氨酸脱羧酶试验:分别在选择性琼脂平板上挑取2个以上典型或可疑菌落,接种三糖铁琼脂,先在斜面划线,再在底层穿刺;接种针不要灭菌,直接在试验培养基和营养琼脂平板接种赖氨酸脱羧酶,在36°C土1°C的温度中培养18h ~ 24h ,在必要的时候可延长至48h。
系列生化反应试验:在试验培养基接种三糖铁琼脂和赖氨酸脱羧酶的同时,可直接接种蛋白胨水(供做靛基质试验)、尿素琼脂(pH7.2)、氰化钾(KCN)培养基,也可在初步判断结果后,从营养琼脂平板上挑取可疑菌落接种。
在36°C土1'C的温度中培养18h ~ 24h ,必要的时候可延长至48h ,按表3判定结果。
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1目的P URPOSE
规范888物料、产品的沙门氏菌检验操作，确保检验结果的可靠性。
2范围SCOPE
适用于888物料、产品的沙门氏菌检验工作。
3责任RESPONSIBILITY
微生物检验员严格执行本规程，品质部负责人监督执行。
4程序PROCEDURE
定义和原理
沙门氏菌广泛存在于动物的肠道和内脏，以及被粪便污染的水和土壤中，是细菌性食物中毒的主要病因。
本方法利用沙门氏菌呈辛酸酯酶阳性，而氧化酶和脂肪酶均呈阴性的特性，对物料、产品进行沙门氏菌检验。
材料和设备
紫外灯：波长366nm，功率不小于6W。
放大镜：3至4倍。
毛细滴管。
LX-B35L压力蒸汽灭菌锅。
无菌的培养皿。
无菌的接种环。
培养基和试剂
SCDLP液体培养基：按《化妆品卫生规范》（2007版）或使用商品培养基干粉配制。
四硫磺酸钠煌绿（TTB）增菌液：按—2010附录配制或使用商品试剂。
SS琼脂培养基（含1%蔗糖）：牛肉浸膏(或牛肉粉)，蛋白胨，乳糖，蔗糖，胆盐，柠檬酸钠，硫代硫酸钠，柠檬酸铁，煌绿，中性红，琼脂，蒸馏水1000mL。
HE琼脂培养基：按—2010附录或使用商品培养基干粉配制。
玉米油维多利亚蓝琼脂培养基：灭菌后的基础培养基冷却至50℃左右，边摇边加入玉米油乳化液。
倾注平皿，制成平板。
基础培养基及玉米油乳化液配方如下：
a）基础培养基：蛋白胨5g，酵母浸粉3g，氯化钠5g，琼脂13g，水900mL，。
将
各成分加入水中，加热溶解。
调节，116℃15min高压灭菌。
b）玉米油乳化液：玉米油100mL，%维多利亚蓝水溶液100mL，%琼脂溶液80mL，
吐温801mL。
玉米油加维多利亚蓝水溶液混合，边振动边在沸水中加热溶化。
然后，
放入分液漏斗中，弃去蓝色水部分，再将着色的脂肪用水洗1-2次。
将着色脂肪20mL
加入810mL琼脂溶液中，再加1mL吐温80，116℃15min高压灭菌。
冷却后用超声
波乳化。
MUCAP试剂：取MUCAP 100mg，加纤维溶解剂溶解，再加Triton X-100 ，贮存于4℃冰箱。
使用时用的L醋酸盐缓冲液稀释10倍。
氧化酶试纸：将甲液与乙液等量混合。
取定性滤纸，浸透混合液后，于70-80℃烘箱烘干，剪成大小适当的纸条，密封于塑料袋或瓶中，贮存于4℃冰箱备用。
甲液：1% α-萘酚乙醇液；乙液：1% 二甲基对苯二胺草酸盐水溶液。
检验步骤
增菌和前增菌
取样品按SOP-QM-B017制备1：10稀释的检液。
取10mL加到90mLSCDLP液体培养基
中，置培养箱36℃±1℃培养18h～24h。
移取10mL，转接种于100mL四硫酸钠煌绿
（TTB）增菌液内，42℃±1℃培养18h～24h。
分离培养
分别用接种环取增菌液1 环，划线接种于一个SS 琼脂平板（含1%蔗糖）和一个HE琼脂平板。
SS琼脂平板于36 ℃±1 ℃培养24～30h，HE平板于36 ℃±1 ℃
培养40～48h。
沙门氏菌菌落特征：
a）在SS 琼脂平板上：无色半透明，菌落中心带黑色的菌落；或者菌落为粉红
色，中心带黑色，但有时不明显。
b）在HE平板上：无色半透明，菌落中心带黑色或几乎全黑色；或者菌落呈粉
红色，中心带黑色。
试验
从培养的分离培养基或显色培养基上挑选疑似沙门氏菌的菌落，尽量选较大、分离较好的单个菌落，用中性笔做好标记并编号。
用毛细滴管吸取MUCAP试剂，加一滴于编号的菌落上(覆盖整个菌落)。
将一个平板的被检可疑菌落全部都滴加试剂后，将平板置于366nm紫外灯下检视10至15
分钟。
发蓝色荧光的为MUCAP试验阳性，将阳性菌落编号记录下来。
氧化酶试验
用接种环挑取MUCAP阳性菌落，涂于氧化酶试纸上，观察涂菌点是否变蓝色。
在10min内变蓝色为氧化酶试验阳性，不变色为阴性。
脂肪酶试验
将SS琼脂或HE琼脂上，MUCAP阳性且氧化酶试验阴性的菌落，用接种环挑取划
线接种至玉米油维多利亚蓝琼脂培养基平板于36 ℃±1 ℃培养40～48h。
观察长出的菌落，脂肪酶阳性菌菌落呈蓝色；阴性菌菌落则呈无色或粉红色。
（注：氧化酶试验和脂肪酶试验顺序可以交换，或同时进行。
）
记录和检验结果报告
在检验原始记录上详细记录观察结果。
菌落的MUCAP试验阳性，且氧化酶试验与脂肪酶试验均为阴性，判定为沙门氏菌，报告沙门氏菌阳性。
其它情况均报告阴性。
检验出阳性结果的培养基平板要保存至少1个月。