体液免疫球蛋白测定课件
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《体液蛋白质检验》PPT课件
• 营养监测:
前白蛋白、白蛋白、视黄醇结合蛋白、转铁蛋白、铁蛋白
• 出 / 凝血疾病:
纤维蛋白原、AT3、纤溶酶原
• 贫血:
触珠蛋白、转铁蛋白、铁蛋白、可溶精性选P转PT铁蛋白受体
3
检验学部属于蛋白质的实验项目
生化室：总蛋白，白蛋白，球蛋白，载脂蛋白A1，载脂蛋
白B，前白蛋白，脂蛋白（a），高密度脂蛋白，低密度脂蛋 白，极低密度脂蛋白，血清蛋白电泳（白蛋白，α1、α2 、 β 、γ球蛋白），血尿β2微球蛋白，糖化血红蛋白，肌钙 蛋白-T，24小时尿蛋白定量，尿微量白蛋白，酶类。
蛋白质的分离
透析、沉淀、盐析、电泳、层析、超速离心
血浆蛋白质的分类
精选PPT
8
3、血浆蛋白质的分类
• 根据分离方法： ①盐析法：白蛋白和球蛋白两大类（各种蛋白
质的亲水性和所带的电荷均有差别。） ②电泳法（醋酸纤维素薄膜）：白蛋白、α1－
球蛋白 、 α2 － 球蛋白、 β －球蛋白、纤维 蛋白原、γ－球蛋白。
精选PPT
10
根据生理功能分类：
精选PPT
11
二、一些临床常检测血浆蛋白质
1、白蛋白（albumin , Alb)
肝实质细胞合成，分子量66 458，
半衰期15～19天，是血浆中含量最多的蛋白质，占40～60％。 在肝细胞中没有贮存。
•
分子结构1975年阐明，含585个氨基酸残基的单链多肽，
分子量66458，含17个二硫键（—S—S—），不含糖的组分。
精选PPT
28
7、 1抗胰蛋白酶（1-AT）
• 是具有蛋白酶抑制作用的一种急性时相反应蛋白，分子量 为5.5万，P1值4.8，含有10%-12%糖。在醋酸纤维薄膜 或琼脂糖电泳中泳动于α1区带，是这一区带的主要组分。 区带中的另2个主要组分；α1-酸性糖蛋白含糖量特别高， α1-脂蛋白含脂类特别高，因此蛋白质的染色都很浅。
免疫球蛋白检测及应用PPT课件
（三）注意事项 1. 部分单克隆冷球蛋白可在低于 10 ℃时 发生沉淀，故取标本时要保温 2. 部分冷球蛋白在冷的条件下可迅速沉淀， 但有的需要数天，故此应放置一周 3. 正常人血清也可含有冷球蛋白，但属多 克隆冷球蛋白的性质，且含量低 4. 冷纤维蛋白原、 C 反应蛋白 - 蛋白复 合物和肝素沉淀蛋白等也具有冷沉淀特性， 实验时应加以区别
思考题： 1．IgG、IgA、IgM的测定技术 2．体液中IgG、IgA、IgM测定的临床应用 3．IgE、IgD、的测定技术 4．异常免疫球蛋白的检测技术来自THANKYOU
SUCCESS
2019/4/14
（一）定性分析 分离血清作二支分装，一支置 4℃， 一支置37℃，直立，一般于24～72小时， 4℃一管可出现沉淀 （二）定量分析 将沉淀用冷 pH7.0 ， 0.05mol/L 磷酸 盐缓冲液洗涤，然后将沉淀再溶解于 10 倍体积的 pH8.6 的 0.05mol 巴比妥 / 巴 比妥钠缓冲液中，置 37 ℃ 30min，进行 免疫电泳或免疫固定电泳进行型别鉴定
THANK
YOU
SUCCESS
2019/4/14
第四节 异常免疫球蛋白的检测
一、 M 蛋白的检测与鉴定 M 蛋白是一种异常单克隆免疫球蛋白，多 见于多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症、恶性淋 巴瘤。
（一）血清蛋白区带电泳 IgG 型多位于 α 区与慢 γ 区 IgA 型多位于慢 γ 区与 β 区 IgM 型多位于 β 2 区或 γ 区 IgD 型多位于 β 区或 γ 区 但最终鉴定需用特异性抗体，在轻链病 时 M 蛋白呈淡染区带常在 β 或 γ 区， 需与尿中本周蛋白检测或尿蛋白电泳同时 观察。
第三节 IgE 和 IgD 的测定
一、 IgE 的测定方法 1 、放射免疫法：固相抗 -IgE+IgE+ 125 I 标记抗人 IgE 2 、化学发光免疫分析法：固相抗 IgE+IgE+ 酶标抗 IgE+ 底物 3 、乳胶颗粒免疫浊度法 4 、酶免疫试验
临床免疫学检验-课件-第17章 体液免疫球蛋白测定
五类免疫球蛋白具有具有相同的V区，可识别相同的抗原 五类免疫球蛋白具有具有不同的C区，发挥不同生物学功能
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一、免疫球蛋白的异质性
一 、免疫球蛋白的类型
重链铰链C区分5类：
IgG、IgA、IgM、IgD、IgE 亚类:IgG分为4个IgG1-4；IgA1-2；IgM1-2；IgD、IgE未发现
第二节 IgG、IgM、IgA测定及临床意义
一、测定方法
单向扩散
耗时长，灵敏度低，重复性差，结果不准确，较少用
酶联免疫吸附试验（ELISA）
时间长，批量检测
放射免疫试验（RIA） 免疫固定电泳
M蛋白检测
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免疫比浊法：
免疫透射比浊法:灵敏度比单扩高5~10倍，结果准确，操作简单， 适合基层单位使用
检测方法
单向扩散、免疫透射比浊、免疫散射比浊 免疫固定电泳、免疫球蛋白测定
临床意义
反映机体的免疫功能、疾病诊断（自身免疫疾病）及预后判 断
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第一节 免疫球蛋白的生物学功能
Ig的结构
两条重链和轻链构成的二聚体
重链H 轻链L
两区
V：抗原特异结合部位 C：功能结合区(结合补体、吞噬细胞、ADCC等）
同种型
同一种属所有个体C区共有的抗原特异性标志，如沙门菌属（A-F)
同种异性
同一种属不同个体C区含不同抗原特异性标志，如沙门菌A群（O）
独特型
同一种属同一个体V区含独特的抗原表位，如沙门菌特异型因子
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二、免疫球蛋白的功能
IgG
血清中含量最高的免疫球蛋白，血液和细胞外液中的主要抗 体
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一、免疫球蛋白的异质性
一 、免疫球蛋白的类型
重链铰链C区分5类：
IgG、IgA、IgM、IgD、IgE 亚类:IgG分为4个IgG1-4；IgA1-2；IgM1-2；IgD、IgE未发现
第二节 IgG、IgM、IgA测定及临床意义
一、测定方法
单向扩散
耗时长，灵敏度低，重复性差，结果不准确，较少用
酶联免疫吸附试验（ELISA）
时间长，批量检测
放射免疫试验（RIA） 免疫固定电泳
M蛋白检测
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免疫比浊法：
免疫透射比浊法:灵敏度比单扩高5~10倍，结果准确，操作简单， 适合基层单位使用
检测方法
单向扩散、免疫透射比浊、免疫散射比浊 免疫固定电泳、免疫球蛋白测定
临床意义
反映机体的免疫功能、疾病诊断（自身免疫疾病）及预后判 断
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第一节 免疫球蛋白的生物学功能
Ig的结构
两条重链和轻链构成的二聚体
重链H 轻链L
两区
V：抗原特异结合部位 C：功能结合区(结合补体、吞噬细胞、ADCC等）
同种型
同一种属所有个体C区共有的抗原特异性标志，如沙门菌属（A-F)
同种异性
同一种属不同个体C区含不同抗原特异性标志，如沙门菌A群（O）
独特型
同一种属同一个体V区含独特的抗原表位，如沙门菌特异型因子
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二、免疫球蛋白的功能
IgG
血清中含量最高的免疫球蛋白，血液和细胞外液中的主要抗 体
免疫球蛋白PPT优秀课件
免疫球蛋白PPT优秀课件
概述
概念
抗体（antibody，Ab）— 是介导体液免疫的重要效应分子,
是B细胞接受抗原刺激后增值分化为浆细胞所产生的球蛋白 （蛋白质），存在于血清等体液中通过与相应抗原特异性结 合发挥体液免疫功能。
免疫球蛋白（immunoglobulin，Ig）— 指具有抗体活性
或化学结构与抗体相似的球蛋白。可分为分泌型（sIg）和 膜型（mIg）。前者存在于体液中，即抗体，后者存在于B 细胞膜上， 即BCR。
同种型
同种异型
独特型抗原表位
（一）同种型 (isotype)
是存在于同种抗体分子中的抗原表位， 是同一种属所有个体Ig分子共有的抗原特异 性标志，为种属型标志，存在于Ig的C区。
据H链C区的不同又分为五个大类，每一类 又分若干亚类；按L链C区的不同分为两型， 每型又分为若干亚型。
（二）同种异型 (Allotype)
二、外源因素所致的异质性
物质基础： 多样性抗原的存在
三、内源因素所致的异质性 免疫球蛋白的血清型
将Ig作为抗原在异种、同种异体或自身体内 进行免疫，均能诱导机体发生免疫应答，产 生相应的抗体，这些抗体可用血清学方法进 行检测，因此称为Ig的血清型。
免疫球蛋白可激发机体产生特异性免疫应答。 其结构基础是在免疫球蛋白分子中包含有多种不 同的抗原表位，呈现出不同的免疫原性。免疫球 蛋白分子中有三类不同的抗原表位，分别为:
chain，H) 和两条相同的轻链2.5×104(light chain，L）
，借链间二硫键而彼此连接在一起的四肽链结构分子。
功能区
借助免疫球蛋白的两 条H、L链内二硫键的 相互作用，又将肽链 折叠成几个具有特殊 生物学功能的球形结 构 ， 叫 Ig 的 功 能 区 （结构域）。
概述
概念
抗体（antibody，Ab）— 是介导体液免疫的重要效应分子,
是B细胞接受抗原刺激后增值分化为浆细胞所产生的球蛋白 （蛋白质），存在于血清等体液中通过与相应抗原特异性结 合发挥体液免疫功能。
免疫球蛋白（immunoglobulin，Ig）— 指具有抗体活性
或化学结构与抗体相似的球蛋白。可分为分泌型（sIg）和 膜型（mIg）。前者存在于体液中，即抗体，后者存在于B 细胞膜上， 即BCR。
同种型
同种异型
独特型抗原表位
（一）同种型 (isotype)
是存在于同种抗体分子中的抗原表位， 是同一种属所有个体Ig分子共有的抗原特异 性标志，为种属型标志，存在于Ig的C区。
据H链C区的不同又分为五个大类，每一类 又分若干亚类；按L链C区的不同分为两型， 每型又分为若干亚型。
（二）同种异型 (Allotype)
二、外源因素所致的异质性
物质基础： 多样性抗原的存在
三、内源因素所致的异质性 免疫球蛋白的血清型
将Ig作为抗原在异种、同种异体或自身体内 进行免疫，均能诱导机体发生免疫应答，产 生相应的抗体，这些抗体可用血清学方法进 行检测，因此称为Ig的血清型。
免疫球蛋白可激发机体产生特异性免疫应答。 其结构基础是在免疫球蛋白分子中包含有多种不 同的抗原表位，呈现出不同的免疫原性。免疫球 蛋白分子中有三类不同的抗原表位，分别为:
chain，H) 和两条相同的轻链2.5×104(light chain，L）
，借链间二硫键而彼此连接在一起的四肽链结构分子。
功能区
借助免疫球蛋白的两 条H、L链内二硫键的 相互作用，又将肽链 折叠成几个具有特殊 生物学功能的球形结 构 ， 叫 Ig 的 功 能 区 （结构域）。
免疫球蛋白测定方法与影响因素课件
1、标准液对测定结果的影响
• • • 1.1 标准液中Ig类型的不均一性： 1.2 标准液中Ig分子大小的不均一性 那么要求Ig标准液能代表健康人群平均水 平的Ig类型和分子大小，基质效应要小。
• • • •
1.3 Ig的国际标准： 1.3.1 WHO 67/97 定义：每瓶含100IU的血浆蛋白冻干品 WHO 67/97的明显缺限:
见表1
方
法
原
理
标本类型 血清 血清
简 要 评 价 慢，非特异性，不能 分类Ig，方法过时 慢，不能分类Ig，是 检测单克隆Ig的筛选 方法 较准确，慢
盐沉淀（金沉淀） Ig在某些盐（金化合物）溶液中形成沉淀，再用总 蛋白测定法测定Ig含量 电泳 蛋白分离成Alb和各种球蛋白;Ig在γ带
免疫扩散（ （彩扩法） ） 免疫荧光
BN II的抗原过剩检测
预反应检测抗原过量 抗原过量
特殊项目的预反应- 避免抗原过量，增加结果的可靠性
IgM为例说明BN II的抗原过量检测原理
• 因此BN II在检测IgA和IgM时，能将抗原过 剩的风险降到最低！ • 但是， BN II的抗原过量不能完全消除， 在极少数情况下，非常高的免疫球蛋白浓 度可能会产生错误的低结果。尤其是单克 隆免疫球蛋白可能会显示与多克隆标准品 不同的反应，在个别情况下，这可能会导 致结果降低的假象或导致非线性结果。
决定定抗原抗体复合物光学性质的因素; 光线透射与散射的数量及特性取决于 复合物的直径(d), 发射光的波长()， 检测器与发射光的角度， 介质的折射系数有关。
•
•
•
①大多数蛋白质分子比光的波长要小得多( 510nm), 只产生Rayleigh 散射。 ②在直接抗原抗体反应期间，最初形成的小复 合物会通过交联而增大，到达大约3 x 10 E6 Da 大小的限度，产生Rayleign-Debye 散射。 ③在另一些反应中，抗体附着于大的颗粒上 (IgE)，再和抗原形成的不可溶复合物，其大小 较光的波长要大得多。在这些情况下出现的是 Mie 散射
免疫球蛋白PPT课件
3）骨架区 VH和VL各有4个FR。
2. 恒定区（constant region,C区)： Ig 分子的C端，在轻链1/2和重
链3/4处，氨基酸的组成和排列比较恒 定。
Ig的类别
1）类：根据CH氨基酸组成排列不同分为五大类
γμαδ
ε
IgG IgM IgA IgD IgE
亚类：IgG1~4；IgM1~2; IgA1~2
2）型：根据CL氨基酸组成排列不同分为两型
κ型和λ型
2、铰链区（Hinge region）
特点：位于CH1和CH2之间，富含 脯氨酸，极富弹性。
功能： 1.有利于Ab与Ag的结合； 2.有利于Ig补体功能区的暴露。
3、连接链（J链）和分泌片段
J链：由浆细胞合成的富含半胱氨酸的 多肽链。起连接及稳定多聚体结构的 作用。
分泌片（SP）：由黏膜上皮细胞合成 和分泌的含糖肽链。起保护sIgA及介 导其主动运输的作用。
二、免疫球蛋白的结构
（一）基本结构（以IgG为例） （二）功能区 （三）水解片段
（二）免疫球蛋白的功能区
1、定义：Ig的多肽链分子可折叠成若干个链
内由二硫键连接的球形结构。每个球形结构约由 110个氨基酸组成，具有一定的功能，故称功能区。
IgA的特征和功能
1、特征 产生—部位：MALT； 时间：出生后3-6月始合成； 存在—形式：单体血清型和二聚体分泌型； 部位：唾液、泪液、乳汁及呼吸道、
消化道、泌尿道的分泌液中和粘膜表面； 时间：半衰期，6天左右； 浓度：血清中Ig含量 10%-20%
2、功能
1）血清型：同IgG，但不重要
2）分泌型：粘膜局部抗感染免 疫的重要因素（又称局部免疫抗 体）。
(一) 识别并特异性结合抗原 （二）激活补体 （三）通过Fc段结合具有FcR的细胞
优选免疫比浊法检测免疫球蛋白Pptppt(共23张PPT)
样品 光电计
滤光片 光源
透射比浊法的缺陷：
(1)溶液中存在的抗原－抗体复合物分子应足够大，分
增浊剂浓度和反应时间掌握不当；
— 是测定抗原子抗体太结合小反应则的动阻态过挡程。不了光线的通过。
不足的是灵敏度和精密度均不够理想，所需的抗血清量大，检测的周期较长。
快在速光(源不的(必2光达路)平溶方衡向）（液00）中的抗原－抗体复合物的数量要足够多。如果
100 % 0%
时间
速率散射比浊法
（一）基本原理
— 是测定抗原抗体结合反应的动态过程。
— 所谓速率，是在单位时间内抗原抗体结合形成
复合物的速度。将各单位时间内形成复合物的
速率及测定的散射信号连接在一起，即是动态 的速率比浊分析。 — 当仪器测定到某一时
间内形成速率下降时，
即出现速率峰，该峰
值的高低，即代表所
读数以吸收单位（A）或OD值表示，A值反映了入射光和透射光的比率。 增浊剂浓度和反应时间掌握不当；
1.免疫球蛋白试剂A,M,G 免疫比浊法检测免疫球蛋白
光通量是每单位时间到达、离开或通过曲面的光能数量 2、散射比浊的优点是灵敏度、精密度均较高，检测快速。
值复的合高 物低的，速即度代。2表.所免疫球蛋白试剂A,M,G校准品，蒸馏水
2、散射比浊的优点是灵敏度、精密度均较高，检测快速。其 缺点是需特定的分析仪器，试剂价格高。
免疫浊度法测定中应注意的问题
1、伪浊度的影响 伪浊度形成原因很复杂，主要是抗血清含有非特异性
的交叉反应性杂抗体成分；增浊剂浓度和反应时间掌握不 当；样品本身的浊度处理不当；试剂的污染和变质；器材 尤其是比色杯等不够清洁等因素。 2、非特异性散射光的影响
免疫浊度法经常受内源性光散射的干扰，为避免这些 非特异性光散射的影响，应用透射比浊法时需保证抗体组 分在3％以下，散射比浊法需保证在 ％以下。
滤光片 光源
透射比浊法的缺陷：
(1)溶液中存在的抗原－抗体复合物分子应足够大，分
增浊剂浓度和反应时间掌握不当；
— 是测定抗原子抗体太结合小反应则的动阻态过挡程。不了光线的通过。
不足的是灵敏度和精密度均不够理想，所需的抗血清量大，检测的周期较长。
快在速光(源不的(必2光达路)平溶方衡向）（液00）中的抗原－抗体复合物的数量要足够多。如果
100 % 0%
时间
速率散射比浊法
（一）基本原理
— 是测定抗原抗体结合反应的动态过程。
— 所谓速率，是在单位时间内抗原抗体结合形成
复合物的速度。将各单位时间内形成复合物的
速率及测定的散射信号连接在一起，即是动态 的速率比浊分析。 — 当仪器测定到某一时
间内形成速率下降时，
即出现速率峰，该峰
值的高低，即代表所
读数以吸收单位（A）或OD值表示，A值反映了入射光和透射光的比率。 增浊剂浓度和反应时间掌握不当；
1.免疫球蛋白试剂A,M,G 免疫比浊法检测免疫球蛋白
光通量是每单位时间到达、离开或通过曲面的光能数量 2、散射比浊的优点是灵敏度、精密度均较高，检测快速。
值复的合高 物低的，速即度代。2表.所免疫球蛋白试剂A,M,G校准品，蒸馏水
2、散射比浊的优点是灵敏度、精密度均较高，检测快速。其 缺点是需特定的分析仪器，试剂价格高。
免疫浊度法测定中应注意的问题
1、伪浊度的影响 伪浊度形成原因很复杂，主要是抗血清含有非特异性
的交叉反应性杂抗体成分；增浊剂浓度和反应时间掌握不 当；样品本身的浊度处理不当；试剂的污染和变质；器材 尤其是比色杯等不够清洁等因素。 2、非特异性散射光的影响
免疫浊度法经常受内源性光散射的干扰，为避免这些 非特异性光散射的影响，应用透射比浊法时需保证抗体组 分在3％以下，散射比浊法需保证在 ％以下。
免疫球蛋白检测与临床意义Vppt课件
序列，发现VH和VL各有3个区域的氨基酸组成和排
免
列顺序特别易变化，这些区域称为高变区。三个高 变区共同组成Ig的抗原结合部位，该部位也称为互
疫
补性决定区。
球
蛋
白 结
恒定区 重链和轻链的C区分别称为CH和CL， 不同类Ig的重链CH长度不一，同一种属动物
构
中，同一类别Ig分子C区氨基酸的组成和排列
顺序比较恒定。
IgG-CH2 IgM-CH3
具有部分 同种异型 的遗传标 志
.
位于CH1与 CH2之间， 含有丰富的 脯氨酸，因 此易伸展弯 曲，而且易 被木瓜蛋白 酶、胃蛋白 酶等水解。
CH3 CH4
CH、CL
IgG的CH3可结合 细胞表面的FcR， IgE的CH2和CH3可 与肥大细胞和嗜 碱性粒细胞的IgE Fc受体结合
用于传染病的早期诊断 ➢IgM是B细胞抗原受体的主要成分
➢也可参与II、III型超敏反应
2020/7/11
.
12
IgM增加：病毒、细菌和寄生虫感染、肝脏疾病、类风
IgM 湿关节炎、硬皮病、巨球蛋白血症等。
临 IgM降低：先天性和获得性免疫缺陷病、蛋白丢失性肠 床 病、肾病综合征、皮肤烧伤等。 意 义
免疫球蛋白简述
2013-05-16
2020/7/11
.
大家好
1
免疫球蛋白定义
免疫球蛋白结构
免疫球蛋白功能区
免疫球蛋白分类
免疫球蛋白测定
Q&A
2020/7/11
.
2
免疫球蛋白（Immunoglobulin，Ig）
免 是指具有抗体活性或化学结构与抗体相似的球蛋白。
疫
球 抗体（antibody,Ab)是B细胞识别抗原后增殖分化为桨细
免疫球蛋白优秀课件
抗独特型抗体（anti-idiotype antibody，AId）： 是指独特型可刺激异种、同种异体以及自体产 生相应抗体。
根据AId反应特点分为：Ab2、 Ab2、 Ab2 和Ab2四种。
独特型及抗独特型网络（ Id- AId）
Id表位具有自身免疫原性，体内存在能识别 自身Id的淋巴细胞，可产生抗独特型抗体， 进行免疫调节。
应答；
对免疫应答有正、负调节作用
C区的功能
• 激活补体： IgM、IgG1~3 激活补体经典途径 凝聚的IgA或IgG4 激活补体经典途径
• 与细胞表面FcR结合： 1）调理作用（opsonization)； IgFc段与吞噬细胞表面FcR结合促吞噬； 2）抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用 （Ab-dependent cell-mediated cytotoxicity,ADCC) 3) 介导I型超敏反应
刺激小鼠
抗原
带有多个表位
针对不同表位 的B细胞
克隆增殖
多种抗体的混合物 （多克隆抗体）
单克隆抗体
monoclonal antibody, mAb 借助小鼠B细胞杂交瘤（hybridoma）技术， 所制备的高度均一（属同一类、亚类、型 别）、单一特异性（仅针对特定抗定抗 原 表位）的抗体。 MAb的优点是：高效价，可大量生产
IgG的CH3：
结合单核/巨噬细胞表面FcR 应
不同生物学效
免疫球蛋白的异质性
Ig的类别
类：根据CH抗原性的不同分为五大类 γμαδε IgG IgM IgA IgD IgE
亚类：IgG1~4； IgA1~2 型：根据CL抗原性的不同分为两个型：κ型和λ型 亚型： 根据链个别氨基酸的差异，分为1-4。
IgE FcR I
根据AId反应特点分为：Ab2、 Ab2、 Ab2 和Ab2四种。
独特型及抗独特型网络（ Id- AId）
Id表位具有自身免疫原性，体内存在能识别 自身Id的淋巴细胞，可产生抗独特型抗体， 进行免疫调节。
应答；
对免疫应答有正、负调节作用
C区的功能
• 激活补体： IgM、IgG1~3 激活补体经典途径 凝聚的IgA或IgG4 激活补体经典途径
• 与细胞表面FcR结合： 1）调理作用（opsonization)； IgFc段与吞噬细胞表面FcR结合促吞噬； 2）抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用 （Ab-dependent cell-mediated cytotoxicity,ADCC) 3) 介导I型超敏反应
刺激小鼠
抗原
带有多个表位
针对不同表位 的B细胞
克隆增殖
多种抗体的混合物 （多克隆抗体）
单克隆抗体
monoclonal antibody, mAb 借助小鼠B细胞杂交瘤（hybridoma）技术， 所制备的高度均一（属同一类、亚类、型 别）、单一特异性（仅针对特定抗定抗 原 表位）的抗体。 MAb的优点是：高效价，可大量生产
IgG的CH3：
结合单核/巨噬细胞表面FcR 应
不同生物学效
免疫球蛋白的异质性
Ig的类别
类：根据CH抗原性的不同分为五大类 γμαδε IgG IgM IgA IgD IgE
亚类：IgG1~4； IgA1~2 型：根据CL抗原性的不同分为两个型：κ型和λ型 亚型： 根据链个别氨基酸的差异，分为1-4。
IgE FcR I
免疫球蛋白的PPTPPT课件
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ析。
03
酶联免疫法
利用酶标记的抗原或抗体与免疫球蛋白结合，通过酶促反应放大信号，
进行定量或定性检测。该方法具有灵敏度高、特异性强、操作简便等优
点，适用于大量样本的检测。
临床应用
感染性疾病诊断
免疫球蛋白检测可用于诊断感染性疾病，如细菌性感染、病毒性感染等。通过检测免疫球 蛋白水平的变化，有助于判断感染类型、病情严重程度及预后。
自身免疫性疾病诊断
自身免疫性疾病是指机体对自身抗原发生免疫反应而导致自身组织损害的疾病。免疫球蛋 白检测有助于诊断自身免疫性疾病，如类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮等。
血液系统疾病诊断
血液系统疾病是指发生在血液及造血器官内的疾病。免疫球蛋白检测有助于诊断血液系统 疾病，如多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症等。
分布与来源
分布
免疫球蛋白广泛分布于体液中，如血清、尿液、唾液、泪液等，以及细胞表面， 如B细胞、吞噬细胞等。
来源
免疫球蛋白由浆细胞分泌而来，浆细胞是B淋巴细胞在接受抗原刺激后分化形成 的。
02
免疫球蛋白的作用
免疫防御
抵御外来病原体入侵
免疫球蛋白能特异性地结合抗原，在体内形成抗体，阻止病原体与靶细胞表面相 应抗原的结合，从而防止病原体入侵。
mRNA进入核糖体，并指导合成免疫 球蛋白的氨基酸序列。
分泌机制
01
02
03
囊泡的形成
合成的免疫球蛋白分子被 包裹在囊泡中，这些囊泡 随后离开细胞。
囊泡的运输
囊泡通过胞吐作用释放到 细胞外，并运输到特定的 组织或器官。
免疫球蛋白的功能
在组织或器官中，免疫球 蛋白与相应的抗原结合， 发挥免疫防御作用。
免疫球蛋白的检测与临床应用PPT课件
（二）临床意义
1.I型变态反应性疾病，如特发性哮喘、特发性皮炎、过 敏性鼻炎等IgE常升高。 2.非变态反应性疾病，如IgE骨髓瘤、寄生虫感染等IgE升 高。 3.急性或慢性肝炎、SLE、类风湿关节炎等疾病IgE可升高。 4. IgE降低见于原发性无丙种球蛋白血症、肿瘤及化疗药 物应用后。
（一）测定方法
1.总IgE的测定方法
有化学发光免疫分析法、放射免疫分析法、乳胶颗粒免疫比 浊法及酶联免疫吸附试验等。在临床上用化学发光免疫分析 法和酶联免疫吸附试验测定总IgE较为常见。 2.特异性IgE的检测方法
主要有免疫斑点法和酶联免疫吸附试验。商品化的试剂盒提
供了多种特异性的变应原，包括食物、吸入物以及药物过敏 原，利用这些特异性变应原就可以检测血清中特异性IgE。
（一）测定方法 IgD的测定方法有放射免疫分析法，乳胶颗粒免疫 比浊分析法、酶联免疫吸附试验。在临床用得最多 的是酶联免疫吸附试验测定IgD。 （二）临床意义 目前IgD的生物功能尚未完全阐明，血清中IgD升高 主要见于妊娠末期，IgD型骨髓瘤，甲状腺炎和大 量吸烟。IgD降低见于原发性无丙种球蛋白血症、 肺硅沉着病（矽肺）、细胞毒药物治疗后。
本周氏蛋白 血清蛋白电泳 免疫固定电泳 免疫比浊法检测游离轻链
高敏感性：可达到5-10mg/L 高特于性 高检测速率 定量检测：可同时检测κ型和λ型轻链的水平以及两者 的比值，有利于鉴别诊断和监测病情的变化
Κ型游离轻链或λ型游离轻链中某一个指标浓度异常 增高和比值异常，常提示有单克隆类疾病，如多发 性骨髓瘤，巨球蛋白血症，原发性淀粉样变性，轻 链沉积病等。 Κ型或λ型游离轻链同时增高，可能原因有感染，肾 功能受损或结缔组织类疾病。
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体液免疫球蛋白测定
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一、IgD的测定及临床意义
测定方法：放免、免疫比浊、ELISA(常用) 临床意义：血液中含量波动范围大，各实
验室最好使用固定的试剂盒，建立自己的 参考范围
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二、IgE的测定及临床意义
测定方法：
总IgE测定：放射免疫分析法 化学发光免疫分析法(常用) 免疫比浊法 酶联免疫吸附法(常用)
第四节 M蛋白测定及临床意义
M蛋白：
B淋巴细胞或浆细胞单克隆异常增殖产生的 一种在氨基酸组成及顺序上十分均一的异常单 克隆免疫球蛋白 临床上多见于多发性骨髓瘤、高丙种球蛋白 血症、恶性淋巴瘤、重链病、轻链病等
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M蛋白测定
蛋白区带电泳：经典方法 计算蛋白含量和百分比
免疫比浊法： 免疫球蛋白定量 准确性高、快速
特异性IgE测定：免疫斑点法 酶联免疫吸附法
临床意义： 增高：变态反应性疾病、寄生虫感染、病毒感染、自身免疫 性疾病。 降低：意义不大
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第三节 血清IgG亚类测定及临床意义
Ig亚类：IgG1、IgG2、IgG3、IgG4，其含量依次下降 测定方法：
单向免疫扩散法 免疫比浊法（常用） 放射免疫分析法 酶联免疫吸附法（常用） 临床意义： IgG亚类可能和感染复发、免疫缺陷和自身免疫性疾病 有关，因而测定IgG亚类对上述疾病有重要意义。即使 当总IgG水平在正常范围内，IgG的亚类分配也可能发生 紊乱
判断肾小球滤膜受损程度：选择性蛋白尿指数SPI 可根据尿内Ig增高的类型帮助鉴别诊断肾小球疾病的种类 尿中游离轻链的检测对诊断轻链病和MM有重要意义
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三、脑脊液免疫球蛋白测定的临床意义
生理情况下，Ig根据其分子量大小，通过血 脑屏障的难易度不同，IgG、IgA、IgM在 脑脊液中的浓度递减。病理状态时，血脑屏 障通透性增加，脑脊液组分发生改变。
免疫电泳： M蛋白分型 免疫固定电泳： M蛋白分型及鉴定，分辨
测定方法
单向环状免疫扩散法(耗时、重复性差)
免疫浊度法（速率散射比浊）常用
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一、血液免疫球蛋白测定的临床意义
年龄：血液Ig随年龄、性别、血型、种族及测定 方法不同有所差别，各实验室要建立自己的参 考范围
高Ig血症 多克隆Ig增高（感染） 单克隆Ig增高（免疫增殖病）
穿过胎盘
+++ + ++
结合吞噬细胞
+++ +++
+ + +
结合肥大细胞和嗜
碱粒细胞
+++
与 SPA 结合
NK 细 胞 介 导 的 ADCC 免疫作用
+ ++ ++ ++
抗感染、自身抗体
早期防 御作用
粘膜局部 免疫
B细 I型
胞成 超敏
熟标 志
反应
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免疫球蛋白分类及特性
❖ 重链性质，Ig分5类：IgG(γ)、IgA(α)、IgM(μ)、 IgD(δ)、IgE(ε)
❖ 轻链性质，Ig分2型：κ、λ ❖ Ig占血浆蛋白总量：20%
❖ Ig含量：血清 IgG、IgA、IgM：g/L、 IgD、IgE：mg/L 体液 IgG、IgA、IgM：mg/L
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第一节 体液中IgG、IgA、IgM 测 定的临床应用
体液免疫球蛋白测定主要指对人体的血液、尿 液、脑脊液等样本中的IgG、IgA、IgM 定量检 测，由于免疫球蛋白IgG、IgA、IgM 在人体体 液中含量相对较高，测定快速，临床意义明确， 临床应用较广泛
IgG是血清中含量最高(占80%)的免疫球蛋白，是血液 和细胞外液中的主要抗体，也是机体再次免疫的主要抗体。 IgA分为血清型A1和分泌型A2，是参与黏膜局部免疫的 主要抗体，主要存在于胃肠道和支气管分泌液、初乳、唾 液和泪液中。 IgM是分子量最大的免疫球蛋白，是个体发育过程中最 早合成和分泌的抗体，也是抗原刺激诱导的体液免疫应答 中最早出现的抗体。
几个概念
抗体（antibody,Ab)：是B细胞识别抗原后
增殖分化为浆细胞所产生的能与相应抗原特 异性地结合球蛋白。(生物学功能上的概念) 抗体主要存在于血清等体液中，故将抗体介 导的免疫称为体液免疫。
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免疫球蛋白（immunoglobulin，Ig）：具有抗
低Ig血症: 先天性低Ig血症（免疫缺陷病） 获得性低Ig血症(蛋白丢失、淋巴系统肿瘤、 使用免疫抑制剂)
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二、尿液免疫球蛋白测定的临床意义
正常人尿液中的Ig含量甚微，当机体的免疫功 能异常或炎症反应引起肾脏疾病时，可导致 肾小球滤过膜分子屏障破坏或电荷屏障受损， 从而引起球蛋白及其他大分子蛋白质漏出增 多。
❖ 检测意义：反应机体的免疫功能、诊断疾病
五类免疫球蛋白的特点和功能
IgG1 IgG2 IgG3 IgG4 IgM IgA1 IgA2 IgD IgE
重链 主要存在形式
1 2 3 4 1 2
单体 单体 单体 单体 五聚体 单体、双体 单体 单体
经典途径活化补体 ++ + +++ +++
体活性或化学结构与抗体相似的球蛋白。 （化学结构上的概念）
分泌型（secreted Ig，sIg）：存在于血清等体液
中，如Ab
膜型（membrane Ig，mIg）是B细胞上的抗原受
体。
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Ab与Ig的联系
1. 所有的Ab都是Ig
2. Ig并非都是Ab
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Ig的基本结构： 四肽链结构,所有Ig的基本单位都是四条肽链的对 称结构。两条重链（H）和两条轻链（L）。每条 重链和轻链分为氨基端和羧基端。
血脑屏障受损程度：白蛋白商值、CSF-IgG指数 增高有临床意义：多发性硬化症、中枢神经系统感染
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第二节血液IgD和IgE的测定及临床应用
正常人血液中IgD含量很低（0.2%）， 目前生物学功能尚不清楚
IgE是正常人血清中含量最少的免疫球蛋 白，主要由黏膜下淋巴组织中的浆细胞 分泌，为亲细胞抗体，引起I型超敏反应； 与机体抗寄生虫免疫也可能有关。