稀释接种法测定水质BOD实验过程的若干注意事项
BOD5测定时要注意些什么
BOD5测定时要注意些什么BOD5的测定通常采纳标准稀释接种法（HJ5052023）。
其操作为，经中和及除去毒性物质并经稀释后的水样（必要时加入适量含好氧微生物的接种液）置入培育瓶中，20℃避光培育5天，通过测定培育前后水样中溶解氧的含量，计算出5天内的耗氧量，再依据稀释倍数得到BOD5。
BOD5的测定是生物和化学作用的共同结果，必需严格依照操作规范进行。
更改任何一个条件都会影响测定结果的精准性和可比性。
影响BOD5测定的条件包括pH值、温度、微生物种类和数量、无机盐含量、溶解氧和稀释倍数等。
用于检测BOD5的水样必需装满并密封在取样瓶中，并储存在2至5°C的冰箱中直至分析。
一般应在取样后6小时内进行检验。
在任何情况下，水样的保存时间都不应超过24小时。
在测量工业废水的BOD5时，由于工业废水通常含有较少的溶解氧，且大部分成分是可生物降解的有机物质，为了保持培育瓶中的好氧状态，必需对水样进行稀释（或接种稀释），这个操作是标准稀释法的比较大的特点。
为保证测量结果的牢靠性，稀释水样培育5天后耗氧量必需大于2mg/L，残留溶解氧必需大于1mg/L。
放入接种液的目的是保证肯定量的微生物降解水中的有机物，接种液的量以使5天耗氧0.1mg/L以下为佳。
使用金属蒸馏器制备的蒸馏水作为稀释水时，应注意检查其中金属离子的含量，以免抑制微生物的繁殖和新陈代谢。
为保证稀释水中的溶解氧接近饱和，必要时可通入净化空气或纯氧，然后置于20℃培育箱中肯定时间，以使与空气中氧分压达到平衡。
稀释倍数的确定以培育第5天耗氧量大于2mg/L，剩余溶解氧大于1mg/L为原则。
稀释系数太大或太小都会导致测试失败。
而且由于BOD5的分析周期较长，一旦显现仿佛情况，也无法原封不动地补充。
测量某工业废水的BOD5时，可先测量其CODCr，然后参考现有水质相近废水的相关监测数据，初步确定待测水样的BOD5/CODCr值，然后计算BOD5的大致范围，并确定稀释系数。
bod5测定方法 国标稀释与接种法
bod5测定方法国标稀释与接种法国标稀释与接种法是一种常用的水质检测方法，广泛应用于环境监测、水处理和水质评价等领域。
本文将介绍国标稀释与接种法的原理、步骤和操作注意事项。
国标稀释与接种法是一种基于微生物生长原理的检测方法。
其原理是将待测水样进行稀释，然后接种特定的微生物菌种，通过观察菌落的生长情况来判断水质的好坏。
具体操作步骤如下：1. 准备试剂和设备：包括培养基、蒸馏水、标准菌种、无菌培养皿、移液器、吸管等。
2. 取一定体积的待测水样，按照一定比例稀释。
稀释的目的是使水样中的微生物浓度降低到适合观察的范围，一般为10^-1到10^-6倍稀释。
3. 取稀释液，加入培养基中，制备接种液。
4. 取一定体积的接种液，均匀涂布在无菌培养皿上。
5. 将培养皿倒置，放在恒温培养箱中进行培养。
培养温度一般为35℃，培养时间根据不同的菌种和要求而定，一般为24小时到48小时。
6. 培养结束后，观察培养皿上菌落的形态、数量和颜色等特征。
根据国家标准或相关规定，判断水样的微生物浓度和水质等级。
在进行国标稀释与接种法时，需要注意以下几点：1. 所有使用的器皿、培养基和试剂必须经过高温高压灭菌处理，保证实验的无菌性。
2. 操作过程中要注意个人防护，避免接触待测水样和接种液。
3. 接种液的制备要严格按照国家标准和相关规定进行，避免人为误差。
4. 培养过程中要保持恒温恒湿的环境，避免外界环境对实验结果的影响。
5. 观察菌落时要仔细，根据国家标准或相关规定进行判断，避免主观误差。
国标稀释与接种法是一种简单、快速、经济的水质检测方法。
通过这种方法可以对水样中微生物的浓度和种类进行初步判断，为后续的水质评价和处理提供依据。
然而，需要注意的是，该方法只能对水质中的某些特定微生物进行检测，不能全面评价水质。
因此，在实际应用中，还需要结合其他水质检测方法和指标进行综合分析。
国标稀释与接种法是一种常用的水质检测方法，具有操作简单、结果可靠的特点。
稀释与接种法生化需氧量(BOD5)指标的检测规程
稀释与接种法生化需氧量（BOD5）指标的检测规程1 定义、原理1.1 定义生化需氧量（BOD5）：在规定条件下，水中有机物和无机物在生物氧化作用下所消耗的溶解氧（以质量浓度表示）。
1.2 方法原理将水样注满培养瓶，塞好瓶塞不通气，将培养瓶放入20±1℃的培养箱进行培养5天；培养前后分别测定水样的溶解氧浓度，由两者的差值可算出每升水消耗掉氧的质量，即BOD5值。
由于多数水样中含有较多的需氧物质，其需氧量往往超过水中可利用的溶解氧（DO）量，因此在培养前应对水样进行稀释，使培养后剩余的溶解氧（DO）符合规定。
一般水质监测所测BOD5只包括含碳物质的耗氧量和无机还原性物质的耗氧量。
有时需要分别测定含碳物质耗氧量和硝化作用的耗氧量。
常用区别含碳和氮的硝化耗氧的方法是：向培养瓶中投加硝化抑制剂，加入适量硝化抑制剂后，所测出的耗氧量即为含碳物质的耗氧量。
在5天培养时间内，硝化作用的耗氧量取决于是否存在足够数量的能进行此种氧化作用的微生物，原污水或初级处理的出水中这种微生物的数量不足，不能氧化显著量的还原性氮，而许多二级生化处理的出水和受污染较久的水体中，往往含有大量硝化微生物，因此测定这种水样时应抑制其硝化反应。
在测定BOD5的同时，需用葡萄糖和谷氨酸标准溶液完成验证监测。
2 试剂除非另有说明，监测时所用试剂均为符合国家标准的分析纯试剂，监测用水均为蒸馏水或同等纯度的水。
水中含铜不应高于0.01mg/l，并不应有氯、氯胺、苛性碱、有机物和酸类。
2.1 接种水如监测样品本身不含有足够的合适性微生物，应采用下述方法之一，以获得接种水①城市废水，取自污水管或取自没有明显工业污染的住宅区污水管。
（这种水在使用前应倾出上清液备用）。
②在1L水中加入100g花园土壤，混合并静置10min。
取上清液备用。
③含有城市污水的河水或湖水。
④污水处理厂出水。
⑤当待分析水样为含难降解物质的工业废水时，取自待分析水排放口下游约3～8km的水或所含微生物适宜于待分析并经化验室培养过的水。
稀释接种法测定水质BOD实验过程的若干注意事项
稀释接种法测定水质BOD实验过程的若干注意事项摘要本文主要阐述了如何运用稀释接种法准确地测定水质BOD，介绍了采样、样品保存、试剂配制、方法选择、实验分析、数据报告及废液处理整个过程需要注意的若干方面。
关键词水质监测；释接种法；测定；BOD；注意事项0 引言所谓的BOD是生化需氧量（也称生化耗氧量）的英文单词（biochemical oxygen demand）的缩写，是指在一定条件下，微生物氧化分解水中的有机物所进行的生物化学过程中所消耗的氧的量，以氧的mg/L表示。
它是反映水体需氧污染物质含量的一个综合指标，也是评价水质好坏的一项重要参数，其值越高，说明水中耗氧性有机污染物质越多，污染程度也就越严重。
制糖、食品、造纸、皮革、纤维等工业废水及生活污水中存在的大量碳氢化合物、蛋白质、油脂、木质素等均为有机污染物，可经好氧菌的生物化学作用而分解。
若这类污染物质未经妥善处理大量排入水体，将造成水体严重贫氧，同时，有机物又可通过水中厌氧菌的分解引起腐败现象，产生甲烷、硫化氢、硫醇和氨等恶臭气体，使水体发臭变质，导致严重污染。
污水中各种有机物得到完会氧化分解的时间，总共约需一百天，为了缩短监测时间，一般将待测水样在20℃左右恒温培养，五天内的耗氧量为代表，称其为五日生化需氧量。
测定水质BOD的经典方法是稀释接种法，该法准确度高，但对测试条件的要求较高，实验时间长，实验步骤也较多，需要分析人员具备一定的操作经验。
1 内容1）采样：（1）取样之前应按规范将采样器和采样瓶等玻璃器皿彻底清洗，先用洗涤剂浸泡清洗，再用稀盐酸浸泡，最后用自来水、蒸馏水多次冲洗；（2）准备几套专用容器，分别用于一般污染物和特定污染物的监测，以减少交叉污染；（3）水样必须采用溶解氧瓶盛装，盛装时应沿瓶壁注入，装满瓶内空间，不得带入空气也不得留有气泡，并用水封口；（4）采样量不得少于500mL，且不可用同一瓶水样监测不同的污染项目；（5）取样的同时要做好记录，贴好标签；运输过程还要注意避免玻璃瓶之间互相碰撞，要尽量减少样品减少对光、热的暴露时间。
稀释接种法测BOD5考核样品的一些注意点
定量 新 制备 的蒸 馏水 于小 口容器 中 ，瓶 口用纱 布
盖 住 ，于 ２ ￣ ０Ｃ的恒 温 箱 中放 置 ７ ，此 时 测 得 的 溶 ｄ 解 氧 控 制 在 ８ ｇ Ｌ左 右 ，溶 解 氧 达 到 饱 和 状 态 。 ｍ／ 此两 种方 法制 得 的稀 释水均 可使 用 ，可 根据 实验 室 条件 选取 。具体情 况 见表 １ 。
生 化需 氧量 是 指在 规定 条件 下 ，微生 物 分解存
在 水 中的某 些 可氧 化物 质 ，特别 是有 机 物所进 行 的 生 物化 学过 程 中消 耗溶解 氧 的量 。此 过程 进行 的时
洗 涤 晾干 的纱 布 ，置 于 ２ ℃ 培养 箱 中放 置 １ ，使 ０ ｄ
水 中的溶 解 氧 含 量 达 到 ８ ／ ｍｇ Ｌ左 右 。方 法 二 ，取
通 常需 要接 种 ，可 以取 Ｂ Ｄ 值 小 ，细 菌种 类 多 的 Ｏ 地 面水 进 行 接 种 （ 者 取 常 熟 的 尚 湖 水 进 行 接 笔 种） ，测得 的 Ｂ Ｄ Ｏ 空 白值 在 ０３～ ． ｍ ／ 。配 置 ． ０ ７ ｇＬ 好 的稀释 接种 水充 分摇 匀静 置 片刻 后开 始ｉ 定 ，稀 贝 ０ 释水 的放 置 时 间不 应超 过 ８ 。 ｈ ２ 根据 Ｃ Ｄ Ｏ 的值 推 算 出 Ｂ Ｄ Ｏ 的大 致稀释 比 选取 稀释 倍 数 是 Ｂ Ｄ Ｏ 分 析 的一 个 关 键 环 节 ，
表 １ 两 种 稀 释水 充 氧 方 法 和 Ｂ Ｄ Ｏ 分析 结 果 （ ， ｍｇＬ） ／
此进 行考 核 实验按 照 国家 标准 （ ０ ２０ ） 来 ＨＪ ５— ０ ９ ５
进 行测 定 ，把 按 照适 当 比例稀 释 的样 品置 于密 闭 的
溶 解 氧瓶 内 ，于 ２ ￣ ０Ｃ±１ 的恒温 箱 内放置 ５ ，根 ℃ ｄ
BOD5的检测方法
BOD5的检测方法一、实验目的1、了解生化需氧量（BOD5）。
2、掌握五日培养法测定生化需氧量的基本原理。
3、熟练掌握碘量法测定DO的操作技术。
4、明确化学需氧量和生化需氧量的相关性。
二、验原理1、五日培养法也称标准稀释法或稀释接种法。
2、其测定原理是：水样经稀释后，在20℃±1℃条件下培养5天，求出培养前后水样中溶解氧含量，二者的差值为BOD5。
如果水样五日生化需氧量未超过7mg/L，则不必进行稀释，可直接测定，多较清洁的河水就属于这一类水。
溶解氧测定方法一般用碘量法。
三、验仪器、设备1、20℃±1℃恒温培养箱；2、5～20L细口玻璃瓶；3、250mL溶解氧瓶：带有磨口玻璃塞；4、1000mL量筒；5、玻璃搅拌棒：棒长应比所用量筒高度长20cm，棒的底端固定一个直径比量筒直径略小，并有几个小孔的硬橡胶板；6、虹吸管：分取水样和添加稀释水。
四、实验试剂1、磷酸盐缓冲溶液：0.85g磷酸二氢钾（KH2PO4）、2.175g磷酸氢二钾（K 2HPO 4）、3.34g 磷酸氢二钠（Na 2HPO 4·7H 2O ）和0.17g 氯化铵（NH 4Cl ）溶于水中，稀释至100mL 。
此溶液的pH 应为7.2。
2、硫酸镁溶液：将2.25g 硫酸镁（MgSO 4·7H 2O ）溶于水中，稀释至100mL 。
3、氯化钙溶液：将2.75g 无水氯化钙溶于水中，稀释至100mL 。
4、氯化铁溶液：将0.025g 氯化铁（FeCl 3·6H 2O ）溶于水中，稀释至100mL 。
5、盐酸溶液（0.5mol/L ）：将4mL （）盐酸溶于水，稀释至100mL 。
6、氢氧化钠溶液（0.5mol/L ）：将2g 氢氧化钠溶于水，稀释至100mL 。
7、亚硫酸钠溶液（）：将0.1575g 亚硫酸钠溶于水，稀释至100mL 。
此溶液不稳定，需当天配制。
8.萄糖—酸标准溶液：萄糖（）和谷氨酸（HOOC -CH 2-CH 2-CHNH 2-COOH ）在103℃干燥1h 后，各称取15mg 溶于水中，移入100mL 容量瓶内并稀释至标线，混合均匀。
BOD测定仪的操作及注意事项
BOD测定仪的操作及注意事项bod测定仪如何使用是一些刚使用仪器时候会有的疑问，随着科技的进展BOD测定仪的显现带给我们环境检测带来极大的便利，这一个仪器能快速的测定出水样BOD，下面给大家带来BOD测定仪的操作及注意事项。
一、BOD测定仪电解池的准备1、用2mL左右饱和K2SO4注入洗净备用的电解池钨棒（指示负极）内充液腔内。
（内充液面离电极石英砂芯底部约70mm处）2、用2mL左右3mol/L硫酸溶液注入单铂丝（电解阳极）内充液腔内。
3、将电解池静置10min，察看内充液是否有明显漏失现象，如有应在试验前适时补充。
4、将电解池置于主机右侧搅拌器上。
5、用电解线红夹子接单铂丝引线端子（电解阳极）；6、用电解线黑夹子接双铂片引线端子（电解阴极）；7、用信号线红夹子接单铂片引线端子（指示正极）；8、用信号线黑夹子接钨棒引线端子（指示负极）。
9、将电解线和信号线插头分别插入主机后座对应插座内。
二、BOD测定仪开始操作：1、在干净消解杯内加入45mL蒸馏水和17mL浓硫酸，冷却后，加入7mL的硫酸铁溶液，加入1.0mLK2Cr2O7溶液，并放入搅拌子。
2、将消解杯置于搅拌器凹板上，按仪器操作步骤中“电解池的准备”；连接好电极。
3、打开电源，调整搅拌器调整电位器，选择适当的搅拌速度（电解液起旋，但无气泡）。
4、按“空白/样品”；使仪器处于空白档，选择电解电流为“20mA”；。
5、按“启动”；键，仪器自动电位补偿后，电解指示灯亮，仪器开始电解并作信号时间图，到尽头后，蜂鸣器报警，电解电流自动切断，显示COD值。
6、舍去第一次数据后在同一消解杯中再加入1mLK2Cr2O7标准溶液进行测定，重复3～4次，重现性误差在±2%以内，平均数据在“40”左右，说明仪器工作正常，且仪器精度及重现性均能达到要求。
BOD测定仪的注意事项1、玻璃器皿应彻底洗净。
先用洗涤剂浸泡清洗，然后用稀盐酸浸泡，最后依次用自来水、蒸馏水洗净。
HJ505-2009 水质 五日生化需氧量(BOD5)的测定 稀释与接种法
HJ505-2009 水质五日生化需氧量(BOD5)的测定稀释与接种法HJ505-2009 水质五日生化需氧量(BOD5)的测定稀释与接种法一、引言二、仪器与试剂2.1 仪器：常见的实验室分析仪器如培养箱、恒温槽、平衡瓶等。
2.2 试剂材料：主要包括硫酸、盐酸、钠硫代硫酸钠、亚硝酸钠、硝酸钠、硝酸亚铁等。
三、样品处理3.1 样品采集：按照标准要求，在适当的位置采集水样。
3.2 样品保存：采集的水样需进行冷藏保存，并在24小时内进行测定。
四、实验步骤4.1 样品稀释：将样品与适量的稀释水按比例混合，使其BOD5浓度在20～200mg/L之间。
4.2 接种液的制备：根据实际需要，准确称取合适的细菌接种液，通常为2mL左右。
4.3 接种：将接种液加入已稀释的样品中并充分混合。
4.4 容器准备：将接种后的样品倒入装有塔形或柱形瓶的容器中，注意容器的密封性。
4.5 曝气：通过定时连续通入氧气或用专用的密闭曝气系统对样品进行曝气处理，以提供微生物呼吸所需的溶解氧。
4.6 控制条件：将容器置于恒温槽中，在20±1℃条件下进行培养，培养时间为五日。
4.7 氧的测定：在培养结束后，使用溶解氧电极或其他适当的方法测定样品中剩余氧的浓度。
五、结果的记录与计算5.1 记录容器的初始和末端溶解氧浓度，并计算其差值。
5.2 根据实际情况，可以通过一定的修正计算方法，得到BOD5的浓度。
5.3 结果的单位为mg/L。
六、实验注意事项6.1 样品应在24小时内进行测定。
6.2 样品与稀释水的比例应根据实际情况调整，以保证BOD5浓度在标准范围内。
6.3 曝气过程中，需注意氧气的充分供应，并注意容器的密封性。
6.4 实验过程中应注意安全，避免操作失误导致意外事故的发生。
结论通过稀释与接种法可以准确测定水样中的BOD5浓度，从而评价水体有机污染程度。
实验中需严格按照标准要求进行操作，以保证结果的准确性和可比性。
该方法操作简单、操作时间较短，适合用于水质监测工作中。
BOD测定仪如何校准及测量注意事项
BOD测定仪如何校准及测量注意事项1、标准溶液的制备葡萄糖谷氨酸标准溶液：将葡萄糖（C6H12O6）和谷氨酸（HOOCCH2CH2CHNH2COOH）在103℃干燥1小时后，各取150mg溶于稀释水，加510mL接种液，然后用稀释水稀释至1000mL，混匀。
2、仪器校准取葡萄糖谷氨酸标准溶液167mL，选择0～400mg/L量程，按BOD5检测步骤操作。
检测到的BOD浓度应在180mg/L至230mg/L之间。
否则需要检查接种液或试验过程是否有问题，仪器使用是否有问题。
稀释水应预先保持20℃的恒温，并曝气或搅拌使溶解氧饱和。
3、注意事项①装瓶时水样温度为20℃左右。
不要偏离太多。
②为保证水中的溶解氧含量，应将水样鼓泡曝气1小时或置于敞口烧杯中用磁力搅拌器搅拌半小时以上，使水样的溶解氧可以饱和。
影响bod测定仪测量的因素1、溶解氧由于测试温度设定在20℃，冬季采集的样品会显现溶解氧过饱和，夏季采集的样品在20℃时可能会显现溶解氧欠饱和。
因此，这些样品应在BOD5测定前进行搅拌和曝气，以便使溶解氧调整至约20℃的饱和点。
2、PH值测试水样的pH值应调整为6.7～7.5（pH7.2）。
BOD5读数的下降可能是由于被测样品的pH值超出此范围。
对于含有大量酸或碱的样品，BOD5读数可能低于实际含量。
酸性或碱性水样应用适当浓度的氢氧化钠溶液或稀盐酸中和。
所用调整溶液的体积不应超过水样体积的0.5%。
假如超过，可以加添调理液的酸碱浓度，以削减调理液的体积。
3、温度试验时将主机放置在20℃±１℃的培育箱中。
BOD的测定也能超出这一温度范围，例如，有试验证明在35℃测定BOD所需要的时间可以缩短为2.5天，其测定结果与五日20℃相像。
提高温度所获得的BOD值与五日20℃条件下测定的结果有很好的相关性。
假如在采样时样品温度超过20℃，或样品温度不足20℃，可将样品放在培育箱中恒温。
在样品测定前要求对样品进行处理。
bod稀释法
bod稀释法
BOD（生化需氧量）是指水中可以被微生物在一定条件下降解的有机物所消耗的氧气量，是衡量水体有机物质污染程度的一种指标。
在实验室中，要测定水样的BOD，则需要使用BOD稀释法，下面我们来详细讲解BOD稀释法的步骤。
步骤一：取样
首先需要去采集要测试的水样，这里要注意取样的地点和方式，要在水体流动情况下取，可以使用专业的水样采集器或手动取样。
步骤二：制样
将取得的水样，在洁净的条件下进行制样，拿一个无菌瓶，先将瓶放入水中，填满瓶内约2/3，然后快速拧紧瓶盖，防止空气进入。
步骤三：设定消耗氧气量
使用自来水或蒸馏水，将水样进行稀释，将水样分别稀释10倍、100倍和1000倍。
步骤四：让水样进行自我消耗氧气量
将制样好的水样分别倒入3个不同的烧结瓶中，插上汞柱，封闭好瓶口，放置在20℃左右的恒温振荡器中，在5天（120小时）的时间范围内，可达到最大稳定需氧量消耗。
步骤五：测量剩余氧气量
在5天（120小时）后，通过溶氧仪测定烧结瓶内溶解氧的质量，计算出生化需氧量（BOD）的数值。
步骤六：计算BOD值
根据稀释水样的倍数，分别乘上BOD值，得到每升原水的BOD值，再根据实际水样的含量，通过计算得出每升水样中的BOD值。
总之，BOD稀释法是一种用于测定水体污染的方法，其步骤繁琐、技术要求高，但通过BOD稀释法可以得出科学客观的数据，为水环境保护提供依据。
BOD5测定稀释与接种法关键技术(精)
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BOD5测定稀释与接种法关键技术
2.稀释与接种法原理
BOD5是指水样充满完全密闭的溶解氧瓶中，在（20±1）℃的暗 处培养5d分别测定培养前后水样中溶解氧的质量浓度DO1和DO2，则：
BOD5（mg/L）= DO1−DO2 ①稀释：有机物含量过高（BOD5>6 mg/L）的样品需适当稀释后测定； ②接种：不含或含微生物少的工业废水（如酸性废水、碱性废水、高温 废水、冷冻保存废水和氯化处理废水等）应接种后测定BOD5以引进能 分解废水中有机物的微生物。
BOD5测定稀释与接种法关键技术
10.空白试样
（1）稀释法测定：空白试样为稀释水，需要时每升稀释水中加 入2ml丙烯基硫脲硝化抑制剂； （2）稀释接种法测定：空白试样为接种稀释水，必要时每升接 种稀释水中加入2 ml丙烯基硫脲硝化抑制剂。
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BOD5测定稀释与接种法关键技术
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BOD5测定稀释与接种法关键技术
6.BOD5水样采集
（1）水样应充满并密封于棕色玻璃瓶中，样品量>1000 ml； （2）密封于棕色玻璃瓶的水样应在0～4℃的暗处运输和保存， 并于24 h内尽快分析； （3）24 h内不能分析的水样应冷冻保存，分析前样品需解冻、 均质化和接种。
定前均需将样品搅拌均匀。
（4）除藻类：含大量藻类的样品，测定前要用1.6μm滤孔的滤膜过滤。
（5）补充营养盐：电导率<125μS/cm的原水样，需加入适量等体积的四种营养
盐溶液，使其电导率大于125μS/cm 。
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水质 五日生化需氧量(BOD5)的测定稀释与接种法
水质五日生化需氧量（BOD5）的测定稀释与接种法HJ505-20091. 适用范围1.1 本方法适用于地表水、工业废水和生活污水中五日生化需氧量（BOD5）的测定。
1.2 本方法的检出限为0.5mg/L，方法的测定下限为2 mg/L，非稀释法和非稀释接种法的测定上限为6mg/L，稀释与接种法的测定上限为6000mg/L。
2. 术语和定义五日生化需氧量是指在规定条件下，微生物分解存在水中的某些可氧化物质，特别是分解有机物所进行的生物化学过程中消耗溶解氧的量。
条件为（20±1）℃培养5天，分别测定样品培养前后的溶解氧，两者之差即为BOD5值，以氧的毫克/升表示。
3. 方法原理将水样充满完全密闭的溶解氧瓶中，在（20±1）℃的暗处培养5d±4h或（2+5）d±4 [先在0~4℃的暗处培养2d，接着在（20±1）℃的暗处培养5d，即培养（2+5）d]，分别测定培养前后水样中溶解氧的质量浓度，由培养前后溶解氧的质量浓度之差，计算每升样品消耗的溶解氧量。
若样品中的有机物含量较多，BOD5的质量浓度大于6mg/L，样品需适当稀释后测定；对不含或含微生物少的工业废水，如酸性废水、碱性废水、高温废水、冷冻保存的废水或经过氯化出力等的废水，在测定BOD5时应进行接种，以引进能分解废水中有机物的微生物。
当废水中存在难以被一般生活污水中的微生物以正常的速度降解的有机物或含有剧毒物质是，应将驯化后的微生物引入水样中进行接种。
4. 试剂和材料分析时，只采用公认的分析纯试剂和蒸馏水或同等纯度的水（在全玻璃装置中蒸馏的水或去离子水），水中含铜不应高于0.01mg/L，并不应有氯、氯胺、苛性碱、有机物和酸类。
4.1 接种液取POL YSEED 胶囊1 粒溶于装有250ml稀释水的烧杯中。
将烧杯置于磁力搅拌器上搅拌曝气1h。
曝气结束，放置0.5h后倾出全部清液，将该清液置于磁力搅拌器上搅拌，此接种液最多能放置二天。
HJ505-2009 水质 五日生化需氧量(BOD5)的测定 稀释与接种法
HJ505-2009 水质五日生化需氧量(BOD5)的测定稀释与接种法HJ505-2009 水质五日生化需氧量(BOD5)的测定稀释与接种法引言水是人类生活中不可或缺的重要资源，保持水体的水质良好对于人类的生存和健康至关重要。
五日生化需氧量(BOD5)是评估水体有机物含量和有机污染的重要指标之一。
本文将介绍HJ505-2009标准中所规定的水质五日生化需氧量的测定方法，主要包括稀释与接种法。
一、试剂和仪器（不含人名）1. 试剂：- 无菌蒸馏水- 稀释液- 接种物2. 仪器：- 恒温水浴器- 生化需氧量测定仪二、方法步骤1. 样品采集：在需要测定的水体中采集适量的水样，并尽快将其送至实验室。
2. 样品准备：- 如果水样中有悬浮物，需要通过过滤将其去除。
- 将样品的温度调整至适合接种的温度范围（一般为20℃-30℃）。
3. 稀释：- 将适量的水样取出，按照一定的比例用无菌蒸馏水稀释。
- 稀释液的浓度根据样品的预估BOD5值确定。
4. 接种：- 在稀释液中加入适量的接种物。
- 接种物的选择应根据样品的特性和预估BOD5值来确定。
5. 试管设置：- 取一定数量的试管，根据实验要求分别设置不同的对照组和样品组。
- 每个试管中加入相应的稀释液和接种物。
6. 水浴培养：- 将试管放置于恒温水浴器中，控制温度在指定的范围内。
- 培养时间一般为5天。
7. BOD5测定：- 利用生化需氧量测定仪测定试管中的BOD5值。
- 测定时注意保持试管的环境与空气隔绝，避免氧气对结果的影响。
8. 数据处理：- 计算每个样品组和对照组的BOD5值。
- 根据实验需要进行数据统计和分析。
三、实验注意事项1. 样品采集时要避免污染和外界干扰，尽量减少样品与空气接触的时间。
2. 实验过程要严格按照标准操作，避免操作失误对结果的影响。
3. 样品和试剂的操作要在无菌条件下进行，避免细菌污染。
4. 温度的控制是保证结果准确性的重要因素，要使用恒温水浴器进行控制。
稀释接种法注意事项
稀释接种法
注意事项:
适用于Bod5大于或等于2mg/L, 且不超过6000 mg/L的水样。
实验结果可能被水中存在的某些对微生物有毒的物质干扰，如杀毒剂，有毒金属或游离氯等，会产生生化抑制作用。
水中的藻类或硝化微生物也可能造成虚假的偏高结果。
多数水样中含有较多的需氧物质，需氧量往往超过水中可利用的溶解氧量，培养前需对水样稀释。
测定bod5的同时，需用葡萄糖谷氨酸标准溶液完成验证实验。
分析时，只采用公认的分析纯试剂和蒸馏水或等同纯度的水，水中含铜不应高于0.01mg/L,并不应有氯，氯胺，苛性碱，有机物和酸类。
玻璃器皿必须清洁
样品需充满并密封与瓶中，置于2~5摄氏度保存到分析时。
一般在采样后6小时内检验。
如果样品的pH不在6~8之间，先做单独实验，确定需要用的盐酸溶液（4.5）或氢氧化钠溶液（4.6）的体积，在中和样品，不管有无沉淀生成。
对含游离氯或结合氯的样品，加入所需体积的亚硫酸钠溶液（4.7）使游离氯和结合氯失效注意避免加过量。
在试验样品的准备时，将实验样品温度升至20摄氏度，然后在般充满的容器内摇动样品，以便消除可能存在的过饱和氧。
稀释样品是避免夹杂空气泡。
得到的bod5应在180~230之间，否则应检查接种水，如果必要还应检查分析人员的技术。
稀释接种法测定水质BOD5的若干注意事项
稀释接种法测定水质BOD5的若干注意事项边建美齐河县环境保护监测站DOI:10.32629/eep.v2i6.305[摘 要]生化需氧量是反映水质受有机物污染程度的一个综合性指标,本文根据实际分析工作经验,总结了用稀释接种法测定水质BOD5的过程中,从样品采集、保存、试剂配制、方法选择、实验分析、数据报告到废液处理等整个过程中需要注意的若干方面。
[关键词]水质监测；稀释接种法；测定；BOD5；注意事项随着我国的经济的发展,环境问题也日益加剧,生化需氧量不仅是环境监测中的一个常规指标,也是反映水体需氧污染物质含量的一个综合性指标,在水质监测和评价方面有实际操作意义。
1 BOD概述所谓的BOD是生化需氧量(也称生化耗氧量)的英文单词(biochemical oxygen demand)的缩写,是指在一定条件下,微生物分解水中的可生化降解的有机物所进行的生物化学反应过程中所消耗的溶解氧的数量,以氧的mg/L表示。
它是反映水体需氧污染物质含量的一个综合指标,也是评价水质好坏的一项重要参数,其值越高说明水中耗氧性有机污染物质越多,污染程度也就越严重。
制糖、食品、造纸、皮革、纤维等工业废水及生活污水中存在的大量碳氢化合物、蛋白质、油脂、木质素等均为有机污染物,可经好氧菌的生物化学作用而分解。
若这类污染物质未经妥善处理大量排入水体,将造成水体严重贫氧,同时有机物又可通过水中厌氧菌的分解引起腐败现象,产生甲烷、硫化氢、硫醇和氨等恶臭气体,使水体发臭变质,导致严重污染。
污水中各种有机物得到完全氧化分解的时间,总共约需一百天,为了缩短检测时间,一般生化需氧量以将待测水样在20℃恒温培养五天内的耗氧量为代表,称为五日生化需氧量,简称BOD5。
测定水质 BOD5的经典方法是稀释接种法,该法准确度高,但对测试条件的要求较高,实验时间长,实验步骤也较多,需要分析人员具备一定的操作经验。
2 稀释接种法测定水中BOD52.1采样(1)取样之前应按规范将采样器和采样瓶等玻璃器皿彻底清洗,先用洗涤剂浸泡清洗,再用稀盐酸浸泡,最后依次用自来水、蒸馏水多次冲洗；(2)准备几套专用容器,分别用于一般污染物和特定污染物的监测,以减少交叉污染；(3)水样必须采用溶解氧瓶盛装,盛装时应沿瓶壁注入,装满瓶内空间,不得带入空气也不得留有气泡,并用水封口；(4)采样量不得少于1000mL,且不可用同一瓶水样监测不同的污染项目；(5)取样的同时要做好记录,贴好标签；运输过程还要注意避免玻璃瓶之间互相碰撞,要尽量减少样品减少对光、热的暴露时间。
bod的测定方法及标准
bod的测定方法及标准一、概述BOD，即生物需氧量，是指水中有机物在微生物作用下进行氧化分解所需消耗的溶解氧量。
它是衡量水体中有机物污染程度的重要指标之一。
本文将介绍BOD的测定方法及标准。
二、测定方法1.采集水样：选择具有代表性的水样进行测定。
采集的水样应避免受到光照、浊度等影响，通常采用密封的采样容器进行采集。
2.接种培养：将采集的水样接种到培养基中，并给予适宜的温度和光照条件，使微生物繁殖生长。
根据需要，可以在培养液中加入一定的活性物质，以加速微生物的生长繁殖。
3.测定溶解氧：在接种培养后的合适时间，测定水样中的溶解氧含量。
通常采用化学试剂与溶解氧结合形成易于测定的化合物的原理进行测定。
4.生物氧消耗量测定：根据溶解氧的测定结果，计算水样中BOD 的含量，即有机物在微生物作用下消耗的溶解氧量。
三、标准1.《地表水环境质量标准》（GB3838-2002）：该标准规定了我国地表水环境质量评价的各项指标及其限值，其中包括BOD的测定标准。
2.《水质生物需氧量测定方法》（HJ640-2018）：该标准详细介绍了BOD的测定方法及操作步骤，为实际操作提供了指导，同时规定了测定的准确性和精密度的要求。
四、注意事项1.操作规范：在进行BOD测定时，应遵循相关操作规范，确保测定的准确性和可靠性。
2.质量控制：为了确保测定的准确性和可靠性，应采取有效的质量控制措施，如平行样分析、空白样分析等。
3.实验室环境：保持实验室环境的适宜温度和湿度，避免微生物繁殖对测定结果产生影响。
4.数据记录：对测定过程和结果进行详细记录，为后续的分析和报告提供依据。
五、总结BOD的测定方法及标准对于了解水体中有机物的污染程度具有重要意义。
在实际操作中，应按照相关标准和规范进行操作，并采取有效的质量控制措施，以确保测定的准确性和可靠性。
同时，我们应加强对于水环境质量的监测和管理，保护水资源，维护生态平衡。
稀释法检测水中BOD时需要注意的问题
稀释法检测水中BOD时需要注意的问题水样采集与处理时需要注意的问题1.BOD5大于6000mg/L的水样仍可用本方法,但由于稀释会造成误差,有必要要求对测定结果做慎重的说明。
2.本试验的结果可能会被水中存在的某些物质所干扰,那些对微生物有毒的物质,如杀菌剂、有毒金属或游离氯等,会抑制生化作用。
水中的藻类或硝化微生物也可能造成虚假的偏高结果。
3.水中含铜不应高于0.01mg/L,并不应有氯、氯胺、苛性碱、有机物和酸类。
4.BOD5值低时,最好用玻璃容器采样。
采样时不得充氧采样,采样管应完全浸没于水中,避开吸进气体,使水样渐渐流入采样瓶内,必需注满容器,并要溢流出瓶体积的1/2左右,不留空间,并用水封口。
5.水样中如有游离的酸和碱,应中和后再进行稀释培育,可用麝香草酚蓝作指示剂,用盐酸溶液（1mol/L）或碳酸钠溶液中和。
检测操作时需要注意问题1.玻璃器皿应洗净。
先用洗涤剂浸泡清洗,然后用稀盐酸浸泡,最后依次用自来水、三级试剂水洗净。
2.曝气设备建议用压缩空气瓶或采纳吸入的空气不与任何润滑油接触的压缩机（隔膜泵压缩机）。
空气在用前应过滤和洗涤。
3.如采纳压缩空气钢瓶,气体钢瓶运输使用过程中要避开受热、撞击、日晒、烘烤。
运输时不许在地面上滚动。
压缩氧气瓶阀不得与油类接触。
4.在两个或三个稀释比的样品中,凡消耗溶解氧大于2mg/L和剩余溶解氧大于1mg/L,计算结果时应取平均值。
若剩余溶解氧小于1mg/L甚至为零时,应加大稀释比。
溶解氧消耗量小于2mg/L,有两种可能,一是稀释倍数过大；另一种可能是微生物菌种不适应,活性差,或含毒物质浓度过大。
这时可能显现在几个稀释比中,稀释倍数较大的溶解氧消耗反而较多的现象。
5.稀释水样超过100倍时,应经多步稀释后,达到预定的稀释倍数。
6.稀释比一般是在溶解氧消耗量为40%70%范围内,在此范围内分级愈多愈精准。
7.稀释水的温度为20℃左右,冬季低于20℃应预热,夏季高于20℃应冷却。
测量BOD5时配制稀释水注意事项
测量BOD5时配制稀释水注意事项稀释水的质量对BOD5测量的精准性具有紧要意义。
因此，稀释水空白的5天耗氧量必需小于0.2mg/L，小于0.1mg/L是比较好的。
接种稀释水应在0.3～1.0mg/L之间。
保证稀释水水质的关键是掌控有机物含量比较低，抑制微生物繁殖的物质含量比较低。
因此，使用蒸馏水作为稀释水比较好。
用离子交换树脂制成的纯水不适合作为稀释水，由于去离子水往往含有从树脂中分别出来的有机物。
假如用于制备蒸馏水的自来水中含有某些挥发性有机化合物，为了防止它们残留在蒸馏水中，蒸馏前应进行去除有机化合物的预处理。
用金属蒸馏器制成的蒸馏水应注意检查其中金属离子的含量。
假如使用的稀释水因存在有机物而达不到要求，可加入适量曝气池接种物，在室温或20℃下保存肯定时间予以除去。
接种量以5天耗氧量0.1mg/L为原则。
为防止藻类大量繁殖，必需在暗室中进行储存。
假如储存后的稀释水中有沉淀物，仅使用上清液过滤除去沉淀。
为保证稀释水中的溶解氧接近饱和，必要时可用真空泵或喷水器吸入净化空气，或用微型空压机注入净化空气，氧气瓶可用于注入纯氧，然后充氧。
将稀释后的水置于20℃培育箱中肯定时间，使溶解氧达到平衡。
冬季放置在较低室温的稀释水可能含有过多的溶解氧，而在酷热的夏季则相反。
因此，当室温与20℃相差较大时，必需在培育箱中放置一段时间，使其与培育环境的氧分压保持平衡。
测定BOD5时如何确定稀释倍数？稀释倍数过大或过小都可能导致5d耗氧量过小或过多，超过正常耗氧量范围则试验失败。
但是，由于BOD5的测量周期较长，一旦显现这种情况，就不能按原样补充。
因此，必需高度重视稀释因子的确定。
虽然工业废水成分多而杂，但BOD5值与CODCr值之比通常在0.2～0.8之间。
造纸、印染、化工等行业的废水比例较低。
一些含有颗粒有机物的废水，如酒糟废水等，在测定其BOD5时，会因培育瓶底部的颗粒物沉淀而无法参加生化反应，导致显着下降。
较低的比率。
环保讲义：BOD测定操作中注意事项
BOD测定操作中应注意：
(1)为了测定可靠，同时培养2～3瓶，从测定值算出平均值。
(2)稀释⽤的量器及BOD培养瓶要充分洗净，因为⾼倍稀释时，即使轻微的污染，也能影响BOD值。
(3)样品稀释时，⽔样及稀释⽔⽤虹吸管插⼊容器底部，轻轻流⼈防⽌产⽣⽓泡。
(4)BOD培养瓶中装⼊样品时瓶内不能有⽓泡，盖瓶塞和封瓶⼝后，瓶内不可存在⽓泡。
⼀般认为稀释过的培养液在20℃温度下，经培养5天后溶解氧减少40～70%较为合适。
减少量过多或过少都会带来较⼤误差，所以⼀份⽔样应同时做2～3稀释度，最后只采⽤溶解氧降低在40%～70%之间的平均值为测定结果。
稀释与接种法测BOD5考核样品注意事项
稀释与接种法测BOD5考核样品注意事项
蔡丽;张波浪
【期刊名称】《山西化工》
【年(卷),期】2022(42)6
【摘要】主要阐述了如何用稀释与接种法准确地测定BOD5考核样品,介绍了稀释接种水的制备、接种液的选取、稀释倍数的确定以及样品分析过程中若干注意事项等。
【总页数】2页(P172-173)
【作者】蔡丽;张波浪
【作者单位】四川省内江生态环境监测中心站;内江市生态环境局
【正文语种】中文
【中图分类】X832
【相关文献】
1.稀释接种法测BOD5考核样品的一些注意点
2.模型公式法在确定BOD5样品稀释系数中的应用
3.利用稀释与接种法快速有效测定BOD5的探讨
4.稀释接种法进行五日生化需氧量(BOD5)测试方法探讨
5.稀释接种法快速准确测定BOD5标准样品的技术探讨
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稀释接种法测定水质BOD实验过程的若干注意事项
作者：黄志清
来源：《科技传播》2012年第04期
泉州市丰泽区环境监测站，福建泉州362000
摘要本文主要阐述了如何运用稀释接种法准确地测定水质BOD，介绍了采样、样品保存、试剂配制、方法选择、实验分析、数据报告及废液处理整个过程需要注意的若干方面。
关键词水质监测；释接种法；测定；BOD；注意事项
中图分类号X8 文献标识码A 文章编号 1674-6708（2012）61-0153-01
0 引言
所谓的BOD是生化需氧量（也称生化耗氧量）的英文单词（biochemical oxygen demand）的缩写，是指在一定条件下，微生物氧化分解水中的有机物所进行的生物化学过程中所消耗的氧的量，以氧的mg/L表示。
它是反映水体需氧污染物质含量的一个综合指标，也是评价水质好坏的一项重要参数，其值越高，说明水中耗氧性有机污染物质越多，污染程度也就越严重。
制糖、食品、造纸、皮革、纤维等工业废水及生活污水中存在的大量碳氢化合物、蛋白质、油脂、木质素等均为有机污染物，可经好氧菌的生物化学作用而分解。
若这类污染物质未经妥善处理大量排入水体，将造成水体严重贫氧，同时，有机物又可通过水中厌氧菌的分解引起腐败现象，产生甲烷、硫化氢、硫醇和氨等恶臭气体，使水体发臭变质，导致严重污染。
污水中各种有机物得到完会氧化分解的时间，总共约需一百天，为了缩短监测时间，一般将待测水样在20℃左右恒温培养，五天内的耗氧量为代表，称其为五日生化需氧量。
测定水质BOD的经典方法是稀释接种法，该法准确度高，但对测试条件的要求较高，实验时间长，实验步骤也较多，需要分析人员具备一定的操作经验。
1 内容
1）采样;：（1）取样之前应按规范将采样器和采样瓶等玻璃器皿彻底清洗，先用洗涤剂浸泡清洗，再用稀盐酸浸泡，最后用自来水、蒸馏水多次冲洗；（2）准备几套专用容器，分
别用于一般污染物和特定污染物的监测，以减少交叉污染；（3）水样必须采用溶解氧瓶盛装，盛装时应沿瓶壁注入，装满瓶内空间，不得带入空气也不得留有气泡，并用水封口；（4）采样量不得少于500mL，且不可用同一瓶水样监测不同的污染项目；（5）取样的同时要做好记录，贴好标签；运输过程还要注意避免玻璃瓶之间互相碰撞，要尽量减少样品减少对光、热的暴露时间。
2）样品保存; ：（1）样品采回实验室后应尽快测定，防止存放过程由于物理的、化学的、生物的作用而发生不同的改变。
为了抑制这种变化，必须采取有效的保存措施。
如采样后应尽快分析，如果不能马上分析应置于1℃~5℃暗处冷存，并在24小时内测定；（2）对于溶解氧高、有机物少的水样可以考虑现场加固定剂。
3）试剂配制;：（1）运用碘量法测定溶解氧时需用基准或优级纯的重铬酸钾标准溶液来标定硫代硫酸纳溶液的浓度，重铬酸钾标准溶液配制之前必须在120℃烘干2小时，配制过程中还要做到动作迅速称量准确；（2）BOD标准溶液的配制：将无水葡萄糖、谷氨酸置于103℃干燥1小时，取出冷却至室温后，各准确称取0.1705g溶于0.005mol/L的磷酸盐缓冲溶液，并用此溶液稀释至1 000mL，混匀。
该溶液BOD浓度为250mg/L。
根据实验需要配制相应浓度的BOD标准溶液。
4）实验分析：（1）水样取出来分析前必须将其温度上升至室温20℃左右，并轻轻摇动，消除可能存在的过饱和氧。
另外要注意五天培养前后分析时的室温应尽量保持在20℃左右；（2）水样若呈强酸性或强碱性，可加入少量氢氧化钠或硫酸溶液进行调节，使其pH呈中性；（3）分析全过程都必须注意防止带入气泡，否则会造成实验误差；（4）试剂及样品移取之前一定要充分摇匀，保证有效物质的浓度均匀。
并且要将移液管插入液面下，以避免带入空气泡；（5）样品培养前后溶解氧的测定应采用同一种国标方法；（6）如果用碘量法测定溶解氧，那么每次实验时都必须标定硫代硫酸钠溶液的浓度，因为不同的贮藏条件下其浓度变化不同;。
滴定操作时速度应掌控好，避免硫代硫酸钠滴过量；（7）如果用溶解氧仪测定溶解氧，那么要记得先让仪器预热稳定充足的时间，然后校准各项参数，注意观察电极探头是否需要更换或电解液是否需要补充；（8）稀释水通常要曝气，使水中溶解氧接近饱和。
曝气时间以2小时~8小时为宜，冬天可稍短，夏天可稍长；（9）曝气后的稀释水应在8小时内使用，为避免受到污染，应盖上两层干净的纱布，置于20℃恒温暗处保存12小时~24小时使溶解氧稳定在8mg/L 左右再取出，加入营养盐和缓冲溶液以保证微生物的生长需要。
这时的稀释水不宜久置，应该尽快使用，以避免沾污，其BOD应≤0.2mg/L；（10）对于有机物含量高，又不含或少含微生物的废水必须进行接种，引入能分解水中有机物的微生物，接种稀释水的BOD应在
0.3mg/L~1.0 mg/L之间；（11）如果对水样的污染物构成没有充分的把握，就应当多做几组稀释比进行比较，当水样稀释倍数超过100倍时，应预先在容量瓶中用蒸馏水初步稀释后，再取适量进行稀释培养。
正确的稀释比是使培养后剩余溶解氧≥1mg/L；消耗的溶解氧≥2mg/L；（12）如果几组不同稀释比的测试结果都能符合要求时，应当多考虑稀释倍数小的那组；（13）配制相应浓度的BOD标准溶液与水样同步分析，以检查试剂的质量和操作人员的技术。
5）数据报告：（1）BOD的测定结果若低于检出限应记为2Lmg/L；若小于100mg/L应保留一位小数；若在100mg/L1 000mg/L应取整数；若大于1 000mg/L应以科学计数法上报；（2）按规定做平行样，取平均值上报，减少实验误差。
6）废液处理; 。
（1）应将多次实验后的BOD 废液集中到一定量后再统一处理，以减少处理次数；（2）调节废液pH为3~4，加入适量铁粉，搅拌30min，然后用氢氧化钠调节p H为9左右，继续搅拌10min，加入硫酸铝或碱式氯化铝混凝剂、进行混凝沉淀，上清液可直接排放，沉淀于废渣方式处理。
2 结论
BOD是一个经验性的常规方法，必须严格按规范操作，必须在严格一致的测试条件下才能获得较好的精确度和较高的重现性，否则就会偏离预期的实验效果。
参考文献
[1]水和废水监测分析方法.4版.中国环境科学出版社，2002.
[2]常见有毒化学品环境事故应急处置技术与监测方法.中国环境科学出版社，2006.
[3]环境保护实用标准汇编（二）.福建省环境保护局编，2007.。