气相色谱方法验证

方案

第1版

顶空气相色谱法测定原料药中溶剂A和溶剂B含量的验证

＊＊＊＊药业有限公司

＊＊＊＊有限公司

方法验证

生效日期：

编写人：日期：

审阅人：日期：

批准人：日期：

QA经理

＊＊＊＊有限公司

方法验证

目录

名称页数1．目的··3

2．范围··3

3．仪器与试剂及色谱条件··3

4．验证实验内容··4

5．最终报告··20

＊＊＊＊有限公司

方法验证

一、目的

1.验证顶空气相色谱法能否准确、精密的测定一定浓度范围内的原料药中溶剂A和溶

剂B的含量。

2.验证顶空气相色谱法测定原料药中溶剂A和溶剂B含量是否具有良好的选择性。

3.验证方法在环境、条件发生一定变化时，能否有一定的耐受性。

二、范围

适用于＊＊＊＊药业有限公司原料药中溶剂A和溶剂B含量的验证，包括：空白试验、精密度、定量限、线性范围、准确度、耐受性等。

三、仪器与试剂及色谱条件

仪器与试剂

GC —HP6890N（FID）

Column：DB-1301（30m×0.32mmI.D.×1μm）

Oven：90℃

Inlet：150℃

Detector: 200℃

Column Pressure:4.8psi

Column flow rate: 0.8ml/min

Split rate: 1:25

Sampler Condition:

＊＊＊＊有限公司

方法验证

Agilent 7694 Head-space Sampler

Equilibration temperature: 80℃

Equilibration time: 45min

Transfer-line temperature: 105℃

Carrier gas: 25ml/min

Pressurisation time: 0.5min

Injection time: 0.20min

移液管：25 ml，10ml，2ml 吸量管：2ml 胶头滴管分析天平顶空瓶（22ml），容量瓶：50ml

微量注射器：25μl

试剂：

DMF（AR）、溶剂B（AR）、溶剂A（AR）、原料药（批号）

无残溶的原料药

四、验证实验内容

1. 空白试验

（1）DMF

用称液管移取2mlDMF于22ml顶空瓶中，加盖，作色谱处理。可接受标准：在溶剂B和溶剂A出峰位置处无干扰峰

验证结果：

结论：

操作者：核对者：

＊＊＊＊有限公司

方法验证

（2）空白

取无残留溶媒（在水相结晶，不用溶媒处理）的普青_____g于22ml顶空瓶中，用移液管加入2mlDMF，加盖，摇匀，作色谱分析。

可接受标准：在溶剂B和溶剂A出峰位置处无干扰峰。

验证结果：

结论：

操作者：核对者：

2. 精密度

2.1 系统适应性

溶液配制

贮备液：向50ml容量瓶中精确加入溶剂B0.05g，溶剂A0.5g，用DMF定容。

标准溶液A：称取贮备液1.2800g于50ml容量瓶中，用DMF溶液定容。

精密称1.0g无残留的原料药于22ml顶空瓶中，加入2ml标准溶液A,加盖作色谱处理，各重复4次，计算4次的平均值，相对标准偏差。

可接受标准：RSD≤5％

验证结果：

1.贮备液配制：称取溶剂B g,溶剂A g，用DMF定容至50ml。

2.标准溶液A:称取贮备液g于50 ml容量瓶中,用DMF溶液定容.

3.称取无残留的原料药, , , ,于22ml顶空瓶中，加入2 ml标准溶液A,加盖作色谱处理。

＊＊＊＊有限公司

方法验证

标准溶液A色谱数据表

结论：

操作者: 核对者:

3. 线性范围：

3.1 线性标准溶液配制：

贮备液a:用移液管移取10ml贮备液于50ml容量瓶中，用DMF定容，摇匀。

1＃标准液：用吸量管移取1.25ml贮备液于50ml容量瓶中，用DMF定容，摇匀，制成1＃贮备

液。然后精密称g无残留的原料药于22 ml顶空瓶中，加入2ml上述溶

液，混匀。（约含500ppm溶剂A及50ppm溶剂B）。

2＃标准液：用移液管移取25ml1＃贮备液于50ml容量瓶中，用DMF定容，摇匀，制成2＃贮备

液。然后精密称g无残留的原料药于22ml顶空瓶中，加入2ml上述溶液，

混匀。（约含250ppm溶剂A及25ppm溶剂B）。

3＃标准液：用移液管移取25ml2＃贮备液于50ml容量瓶中，用DMF定容，摇匀，制成3＃贮备

液。然后精密称g无残留的原料药于22ml顶空瓶中，加入2ml上述溶液，

混匀。（约含125ppm溶剂A及12.5ppm溶剂B）。

＊＊＊＊有限公司

方法验证

4＃标准液：用移液管移取25ml3＃贮备液于50ml容量瓶中，用DMF定容，摇匀，制成4＃贮备

液。然后精密称g无残留的原料药于22ml顶空瓶中，加入2ml上述溶液，

混匀。（约含62.5ppm溶剂A及6.25ppm溶剂B）。

5＃标准液：用移液管移取25ml4＃贮备液于50ml容量瓶中，用DMF定容，摇匀，制成5＃贮备

液。然后精密称g无残留的原料药于22ml顶空瓶中，加入2ml上述溶液，

混匀。（约含31.3ppm溶剂A及3.13ppm溶剂B）。

分别取1＃、2＃、3＃、4＃、5＃线性标准液，加盖作色谱处理。

按照线性标准液1＃～5＃的浓度与其对应的溶剂B及溶剂A的峰面积，作线性回归得到溶剂B和溶剂A的工作曲线。

可接受标准：γ≥0.99

线性范围数据表

＊＊＊＊有限公司

方法验证