阵发性睡眠性血红蛋白尿症研究进展
阵发性睡眠性血红蛋白尿症32例临床分析
阵发性睡眠性血红蛋白尿症32例临床分析作者：马宏杰段泽晔来源：《中国保健营养·中旬刊》2013年第02期【摘要】目的：探讨阵发性睡眠性血红蛋白尿症（PNH）临床特点，诊察方法：回顾分析我院2007-2012年32例阵发性睡眠性血红蛋白尿症临床资料。
结果：首诊诊诊断为PNH13例，占40.6%，有误诊经历19例占59.4%。
结论：阵发性睡眠性血红蛋白尿症起病隐匿，表现复杂易误诊，详细的病史询问，开拓思路，及时行CD55和CD59等检验的筛查，提高PNH早期诊断率。
【关键词】阵发性睡眠性；血红蛋白尿症；早期诊断【中图分类号】R55 【文献标识码】A 【文章编号】1004-7484（2013）02-0037-02阵发性睡眠性血红蛋白尿症（PNH）是一种获得性造血干细胞克隆性疾病，以发作性血管内凝血、静脉血栓形成、骨髓造血功能衰竭为主要表现[1]。
作为一种慢性溶血性疾病，其病程长，临床起病隐匿，表现复杂，早期诊断困难，我们分析了近年我科诊断的32例病例的临床特征，现报道如下。
1 临床资料1.1 一般资料本文报道病例32例，均为我科2007年6月-2012年12月确诊病例，其中男性19例，女性13例，年龄15-80岁，平均年龄52.5岁，病程2个月-16年，均符合张之南主编的《血液病诊断与疗效标准》[2]。
首诊临床表现为酱油色尿13例，面色苍白10例，巩膜黄染5例，血栓性疾病4例。
1.2 误诊情况：首诊为PNH13例，占40.6%，有误诊经历19例，占59.4%.误诊为血栓性疾病4例。
其脑梗塞1例；下肢静脉血栓2例；布-加氏综合症1例；肝炎3例；胃肠道疾病2例；肾脏疾病1例；缺铁性贫血3例；骨髓增生异常综合症2例；再生障碍性贫血4例。
误诊5个月—14年，最长误诊1例14年，一直以贫血待查诊治，后因腹痛发生小肠坏死，行部分小肠切除后，再发脾门静脉血栓经检验CD55和CD59等实验确诊。
1.3 方法：对考虑PNH患者进行CD55和CD59，酸化血清溶血试验，蔗糖溶血试验，尿含铁血黄素试验，铁染色，网织红细胞计数，血常规，及骨髓细胞形态血检测。
FLAER检测及其在阵发性睡眠性血红蛋白尿症诊断中的意义
FLAER检测及其在阵发性睡眠性血红蛋白尿症诊断中的意义刘淑媛;万腊根;闻芳;李欣;张长林【摘要】Objective To investigate the significance of FLAER detection in the diagnosis of paroxysmal nocturnal hemoglobinuria (PNH). Method Expressions of CD55 and CD59 antigens and FLAER in the cell membranes of peripheral blood were detected in 10 cases with PNH and a control group of 37 patients with malnutritional anemia by flow cytometry. Results The negative rates of CD55, CD59 and FLAER in the PNH patients were significantly higher than those in patients in the control group (P<0.05). In 10 cases of PNH patients, the negative rates of FLAER in the granulocyte population and monocyte population was (82.52±25.24)% and(79.84±19.86)% respectively. Compared with the negative rates of CD55 and CD59, a higher percentage of PNH clones was detected by the FLAER-based PNH panel (P<0.05). Conclusion FLAER detection with flow cytometry can im-prove the current methods used in diagnosis of PNH by specifically identifying PNH clones in the granulocyte and monocyte popu-lation.%目的：探讨荧光标记的嗜水气单胞菌溶素变异体(FLAER)检测在阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)诊断中的意义，并与传统的CD55、CD59测定进行比较。
阵发性睡眠性血红蛋白尿(PNH)的诊断指南(流式细胞术)
流式细胞术诊断并监测阵发性睡眠性血红蛋白尿症和相关疾病指南背景：阵发性睡眠性血红蛋白尿症（PNH）是一种特殊的获得性克隆性造血干细胞疾病，该疾病是由于PIGA基因体细胞突变，导致连接细胞膜的GPI相关锚蛋白缺失所致。
流式细胞术是检测GPI相关锚蛋白缺失的方法之一，同时也是诊断PNH所必需的检测指标。
然而到目前为止，对于运用流式细胞术检测GPI相关锚蛋白缺失方法还没有标准化、规范化。
方法：在本论文中，我们将提出一致方案，介绍运用流式细胞术检测PNH的规范程序。
结果：我们通过临床症状和对数据的分析、结果报告对病例提出综合意见。
但分析中，主要集中在对分析过程的重要性。
本文将区分常规分析（定义为：缺失细胞占1％或更多）和高灵敏度的分析（缺失细胞仅占小于0.01％的PNH细胞）。
其中如何设计抗体组合和设门对这两种分析都是非常重要的，本文将做详细介绍。
我们将通过对白细胞和红细胞的检测，以及各自的检测优势来讨论并评估PNH患者人群。
我们目前提供的步骤仍需要进一步完善，使其成为高灵敏度的检测技术，包括需要明确：试剂浓度；PNH克隆细胞在正常人群的发生率（背景），并讨论此技术的缺点，因为此缺陷将可能影响到结果解释。
结论：本论文可适用于对PNH感兴趣和刚开始建立检测PNH克隆细胞的实验室，使其建立一个比较完善的实验流程；也可用于已开展此检测项目，以提高其该实验室检测技术和报告水平。
背景阵发性睡眠性血红蛋白尿（PNH）是一种罕见的造血干细胞疾病，该疾病自19世纪初即被确认为一个具有独特临床症状的疾病（1,2）。
在疾病的发展过程中，PNH有三个显着的临床特点，但是这三个特点的个体差异很大（3-5）。
首先，以补体介导的血管内溶血为主要临床表现，包括：吞咽困难，嗜睡，勃起功能障碍（ED），慢性肾功能衰竭，肺动脉高压，贫血，和血红蛋白尿。
其次，具有形成血栓的倾向，该血栓不仅可发生在四肢，还好发于具有特殊部位，如肝门（Budd - Chiari综合征），脾，肠系膜静脉。
依库珠单抗治疗阵发性睡眠性血红蛋白尿的研究进展
依库珠单抗治疗阵发性睡眠性血红蛋白尿的研究进展作者：杨卫张国香来源：《中国医学创新》2021年第10期【摘要】阵发性睡眠性血红蛋白尿（PNH）源于磷脂酰肌醇多糖A类（PIG-A）基因的体细胞突变引起，该突变导致糖基磷脂酰肌醇锚连蛋白缺乏。
而缺乏这种锚连蛋白（CD55、CD59）之一会导致溶血。
临床表现包括慢性溶血，血栓栓塞性疾病，感染性并发症，慢性肾脏损伤，肺动脉高压和平滑肌功能障碍。
依库珠单抗（Eculizumab）是一种针对末端补体蛋白C5的人源化单克隆抗体，可以使PNH患者的存活率显著提高，并减少并发症。
但带来强大疗效的同时，也面临着许多的难题。
例如：骨髓衰竭、突破性溶血、感染等。
本文回顾了依库珠单抗在PNH治疗中取得的研究进展，并介绍目前尚未解决的难题。
【关键词】阵发性睡眠性血红蛋白尿依库珠单抗Research Progress of Eculizumab in the Treatment of Paroxysmal Nocturnal Hemoglobinuria Review/YANG Wei， ZHANG Guoxiang. //Medical Innovation of China， 2021， 18（10）： -181[Abstract] Paroxysmal nocturnal hemoglobinuria （PNH） is caused by somatic mutations in the phosphatidylinositol polysaccharide class A （PIG-A） gene， which results in glycosylphosphatidylinositol anchoring protein deficiency. The deficiency of one of these ancholectin proteins （CD55， CD59） can lead to hemolysis. Clinical manifestations include chronic hemolysis， thromboembolic disease， infectious complications， chronic kidney injury，pulmonary hypertension， and smooth muscle dysfunction. Eculizumab is a humanized monoclonal antibody against terminal complement protein C5， which can significantly improve the survival rate of PNH patients and reduce complications. But at the same time， it also faces many problems. For example： bone marrow failure， breakthrough hemolysis， infection， etc. This paper reviews the progress of the study of Eculizumab in PNH treatment， and introduces the problems that have not been solved.[Key words] Paroxysmal nocturnal hemoglobinuria EculizumabFirst-author’s address： Changzhi Medical College， Changzhi 046000， Chinadoi：10.3969/j.issn.1674-4985.2021.10.042PNH是由PIG-A基因突變引起，该基因突变阻止糖基磷脂酰肌醇锚连蛋白（GPI-AP）的重要成分N-乙酰氨基葡萄糖磷脂酰肌醇的合成。
临床药师参与1例阵发性睡眠性血红蛋白尿伴血栓患者抗凝治疗药学实践
４３ＣｈｉｎａＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ２０２０年１０月２０日第２９卷第２０期Ｖｏｌ．２９牞Ｎｏ．２０牞Ｏｃｔｏｂｅｒ２０牞２０２０基金项目：中国人民解放军陆军军医大学第二附属医院科研项目犤２０１６ＹＣＬ２５犦；中国人民解放军陆军军医大学科技创新能力提升项目犤２０１９ＸＬＣ３０２３犦。
第一作者：张１，王璇１，邹朗１，巫昕怡２（１．中国人民解放军陆军军医大学第二附属医院药剂科，重庆４０００３７；２．重庆医科大学第一临床学院，重庆４０１３３１）摘要：目的探讨临床药师在血液病伴血栓防治中的作用。
方法临床药师参与１例阵发性睡眠性血红蛋白尿伴血栓的抗凝治疗全过程，包括优化抗凝治疗方案和对患者进行用药指导、药学监护。
结果与结论临床药师参与血液病的血栓防治能增强抗栓疗效，提高患者用药依从性。
临床药师应积极参与血栓性疾病的防治，减少临床血栓性事件的发生。
关键词：阵发性睡眠性血红蛋白尿；血栓性疾病；抗凝治疗管理；临床药师；药学服务中图分类号：Ｒ９５；Ｒ９７３＋．２文献标识码：Ａ文章编号：１００６－４９３１牗２０２０牘２０－００４３－０４ＰａｒｔｉｃｉｐａｔｉｏｎｏｆＣｌｉｎｉｃａｌＰｈａｒｍａｃｉｓｔｓｉｎＡｎｔｉｃｏａｇｕｌａｔｉｏｎＴｈｅｒａｐｙｆｏｒａＰａｔｉｅｎｔｗｉｔｈＰａｒｏｘｙｓｍａｌＮｏｃｔｕｒｎａｌＨｅｍｏｇｌｏｂｉｎｕｒｉａＺＨＡＮＧＺｈｅ１，ＷＡＮＧＸｕａｎ１，ＺＯＵＬａｎｇ１，ＷＵＸｉｎｙｉ２（１．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＰｈａｒｍａｃｙ，ｔｈｅＳｅｃｏｎｄＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＡｒｍｙＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈｏｎｇｑｉｎｇ，Ｃｈｉｎａ４０００３７；２．ＴｈｅＦｉｒｓｔＳｃｈｏｏｌｏｆＣｌｉｎｉｃａｌＭｅｄｉｃｉｎｅ，ＣｈｏｎｇｑｉｎｇＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈｏｎｇｑｉｎｇ，Ｃｈｉｎａ４０１３３１）Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｒｏｌｅｏｆｃｌｉｎｉｃａｌｐｈａｒｍａｃｉｓｔｓｉｎａｎｔｉｃｏａｇｕｌａｔｉｏｎｍａｎａｇｅｍｅｎｔｏｆｔｈｒｏｍｂｏｔｉｃｄｉｓｅａｓｅｓａｃｃｏｍｐａｎｉｅｄｗｉｔｈｈｅｍａｔｏｌｏｇｉｃｄｉｓｅａｓｅ．ＭｅｔｈｏｄｓＣｌｉｎｉｃａｌｐｈａｒｍａｃｉｓｔｓｐａｒｔｉｃｉｐａｔｅｄｉｎｔｈｅａｎｔｉｃｏａｇｕｌａｔｉｏｎｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆａｐａｔｉｅｎｔｗｉｔｈｐａｒｏｘｙｓｍａｌｎｏｃｔｕｒｎａｌｈｅｍｏｇｌｏｂｉｎｕｒｉａ，ｉｎｃｌｕｄｉｎｇｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎｏｆａｎｔｉｃｏａｇｕｌａｔｉｏｎｔｒｅａｔｍｅｎｔｓｃｈｅｍｅ，ｍｅｄｉｃａｔｉｏｎｇｕｉｄａｎｃｅａｎｄｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｃａｒｅ．ＲｅｓｕｌｔｓａｎｄＣｏｎｃｌｕｓｉｏｎＣｌｉｎｉｃａｌｐｈａｒｍａｃｉｓｔｓｃａｎｉｍｐｒｏｖｅｔｈｅｏｕｔｃｏｍｅｏｆａｎｔｉｃｏａｇｕｌａｔｉｏｎｍａｎａｇｅｍｅｎｔ．Ｃｌｉｎｉｃａｌｐｈａｒｍａｃｉｓｔｓｓｈｏｕｌｄａｃ ｔｉｖｅｌｙｐａｒｔｉｃｉｐａｔｅｉｎａｎｔｉｃｏａｇｕｌａｔｉｏｎｍａｎａｇｅｍｅｎｔｔｏｒｅｄｕｃｅｔｈｅｉｎｃｉｄｅｎｃｅｏｆｔｈｒｏｍｂｏｔｉｃｅｖｅｎｔｓ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｐａｒｏｘｙｓｍａｌｎｏｃｔｕｒｎａｌｈｅｍｏｇｌｏｂｉｎｕｒｉａ；ｔｈｒｏｍｂｏｔｉｃｄｉｓｅａｓｅ；ａｎｔｉｃｏａｇｕｌａｔｉｏｎｍａｎａｇｅｍｅｎｔ；ｃｌｉｎｉｃａｌｐｈａｒｍａｃｉｓｔ；ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｃａｒｅ４４ＣｈｉｎａＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ２０２０年１０月２０日第２９卷第２０期Ｖｏｌ．２９牞Ｎｏ．２０牞Ｏｃｔｏｂｅｒ２０牞２０２０药学监护项目出血体征无Ｄ２：小便淡红色Ｄ３：痰中带血丝，小便浓茶色Ｄ５：痰色暗红，小便深黄色Ｄ２：小便淡红色Ｄ３：痰中带血丝，小便浓茶色Ｄ５：痰色暗红，小便深黄色Ｄ８：痰色正常，小便酱油色Ｄ１２：痰色正常，小便深黄色Ｄ１８：痰色正常，小便酱油色Ｄ２２：皮肤现散在少量出血点表１患者住院期间抗凝治疗和药学监护方案时间Ｄ１Ｄ２－Ｄ５Ｄ６－Ｄ７Ｄ８－Ｄ１５Ｄ１６－Ｄ２２Ｄ２３－Ｄ２６药品名称ＬＭＷＨＷＬＭＷＨＷＷＷ剂量０．４ｍＬ５ｍｇ０．４ｍＬ暂停抗凝２．５ｍｇ３ｍｇ３．７５ｍｇ给药途径皮下注射口服皮下注射口服口服口服尿红细胞牗ｍＬ牘Ｄ３：１６０Ｄ４：５４８Ｄ３：１６０Ｄ４：５４８Ｄ６：１２０Ｄ２０：１０６·药学服务·ＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＳｅｒｖｉｃｅｓＩＮＲＤ１：１．０Ｄ２：０．８Ｄ４：３．２Ｄ５：３．９Ｄ２：０．８Ｄ４：３．２Ｄ５：３．９Ｄ６：２．１Ｄ９：１．０Ｄ１５：０．９４Ｄ１９：０．９６Ｄ２５：１．２频次每１２ｈ１次１日１次每１２ｈ１次１日１次１日１次１日１次注：ＬＭＷＨ为低分子肝素钙注射液，Ｗ为华法林钠片。
阵发性睡眠性血红蛋白尿症诊断与治疗中国专家共识
及疗效。例如将ＰＮＨ红细胞根据ＣＤ５５、ＣＤ５９的缺乏程度 可以分为三型：Ｉ型（补体敏感度正常）、Ⅱ型（中度敏感）、
通信作者：邵宗鸿，Ｅｍａｉｌ：ｓｈａｏｚｏｎｇｈｏｎｇ＠ｓｉｎａ．ｃｏｎ
万方数据
guide.Байду номын сангаас
注：Ｇ：粒细胞；Ｍ：单核细胞；ａ分子标志用于检测ＧＰＩ锚链蛋白 缺乏的细胞，其余分子标志用于设门。具体荧光选择可以不同，不同 试剂荧光颜色也可以不同。４色、５色、６色的检测方式敏感性高，效 果良好，如ＦＬＡＥＲ／ＣＤ２４／ＣＤｌ５／ＣＤ４５。如对单核及粒细胞进行５色 分析，则需要准备２个试管。如以ＣＤ４５／ＣＤｌ５／ＳＳＣ标记通常可区分 粒细胞与单核细胞，但若更好在分选单核细胞则需要准备另一支试 管进行ＣＤ３３设门。ＰＮＨ：阵发性睡眠性血红蛋白尿症
史堡直渲堂苤查！！！！生！旦筮丝鲞笠！塑垦！也』旦！坐！！！！：丛！堡！！！！！：！！！：丝。盟旦兰
・标准与讨论・
阵发性睡眠性血红蛋白尿症诊断与治疗中国专家共识
中华医学会血液学分会红细胞疾病（贫血）学组
为进一步提高我国阵发性睡眠性血红蛋白尿症（ＰＮＨ） 的诊治水平，中华医学会血液学分会红细胞疾病（贫血）学组 在广泛征求有关专家意见的基础上，参考国内外有关文献， 达成以下我国ＰＮＨ诊断和治疗共识。 一、ＰＮＨ定义及发病机制 ＰＮＨ是一种由于体细胞ｘｐ２２．１上ＰＩＧ—Ａ基因突变导致 的获得性造血干细胞克隆性疾病。其发病机制包括造血干 细胞ＰＩＧ—Ａ基因突变，使部分或完全血细胞膜糖化磷脂酰肌 醇（ｄｙｃｏｐｈｏｓｐｈａｌｉｄｙｌ—ｉｎｏｓｉｔｏｌ，ＧＰＩ）锚合成障碍，造成血细胞 表面ＧＰＩ锚连蛋白缺失，细胞灭活补体等能力减弱，从而引 起细胞容易被破坏，发生溶血等。临床主要表现为不同程度 的发作性血管内溶血、阵发性血红蛋白尿、骨髓造血功能衰 竭和静脉血栓形成。 二、ＰＮＨ诊断 （一）筛查ＰＮＨ克隆的指征 １．以血红蛋白尿、尿含铁血黄素阳性和（或）血清游离血 红蛋白增高为主要表现的血管内溶血。 ２．无法解释的溶血伴有铁缺乏、腹痛或食管痉挛、血栓 栓塞、血小板减少和（或）白细胞减少。 ３．Ｃｏｏｍｂｓ试验（一）、无明显肝脾肿大、极少见红细胞碎 片、非感染性溶血性贫血。 ４．骨髓衰竭症：①怀疑或确诊的再生障碍性贫血或低增 生性贫血；②难治性血细胞减少伴一系发育异常；③不明原 因的血细胞减少症。 ５．不同寻常的血栓形成：①非常见部位血栓形成：肝静 脉（Ｂｕｄｄ—Ｃｈｉａｒｉ综合征）、其他腹腔内静脉（门静脉、脾静脉 等）、海绵窦、皮肤静脉；②伴有溶血征象的血栓形成；③伴有 全血细胞减少的血栓形成。 （二）需常规随访ＰＮＨ克隆的患者 确诊ＰＮＨ患者，应常规监测ＰＮＨ克隆变化，若病情稳 定，可每年监测１次；出现任何临床或血液学参数变化时应 缩短监测间隔。 出现溶血和血栓，若可靠的实验室检查未证实ＰＮＨ克 隆存在，则无需密切监测ＰＮＨ克隆。 （三）诊断ＰＮＨ的实验室检测项目 １．常规检测项目： （１）血常规及凝血功能：红细胞计数、血红蛋白含量、网 织红细胞百分比；白细胞计数、血小板计数；成熟红细胞形态 ［有无异形和（或）红细胞碎片］、有无幼稚红细胞。血浆纤 维蛋白原、Ｄ一二聚体水平等。 （２）多部位骨髓穿刺：至少包括髂骨，若髂骨骨髓增生不 良，应进行胸骨穿刺。骨髓涂片分析：造血组织增生程度； 粒、红、淋巴细胞形态和不同阶段百分比；巨核细胞数目和形 态；／Ｊ、粒造血细胞面积；是否有异常细胞等。 （３）骨髓活检：至少取２ ｃｍ骨髓组织（髂骨）标本用以评 估骨髓增生程度、各系细胞比例、造血组织分布情况，以及是 否存在骨髓浸润、骨髓纤维化等。 （４）肝功能：特别是血清胆红素（直接、问接）水平及血 清乳酸脱氢酶水平。 （５）肾功能、甲状腺功能、电解质以及病毒学检查（包括 肝炎病毒、ＥＢＶ、ＣＭＶ等）。 （６）血清叶酸和维生素Ｂ１２水平。 （７）尿常规检查及尿含铁血黄素试验（实际检测的是脱 落的肾小管上皮细胞中的含铁血黄素）。 （８）风湿免疫性疾病相关抗体。 （９）血清ＥＰＯ水平。 （１０）细胞遗传学：常规核型分析，必要时进行荧光原位 杂交（ＦＩＳＨ）以及遗传性疾病筛查（儿童或有家族史者推荐 做染色体断裂试验）。 （１１）血浆游离血红蛋白和结合珠蛋白水平。 （１２）特异性补体溶血试验：Ｈａｍ试验、糖水试验、蛇毒因 子溶血试验、微量补体敏感试验，这些试验敏感度和特异度 均不高。 （１３）流式细胞术检测外周血成熟红细胞和成熟粒细胞 ＣＤ５５和ＣＤ５９有无缺失：目前已经发现了２０余种蛋白在 ＰＮＨ患者血细胞表面表达缺乏，如衰变加速因子（ＤＡＦ， ＣＤ５５）、反应性溶血膜抑制物（ＭＩＲＬ，ＣＤ５９）、Ｃ８结合蛋白 （ＨＲＦ）、内毒素受体（ＣＤｌ４）、低亲和力Ｆｃ受体（ＣＤｌ６）及尿 激酶型纤溶酶原激活剂受体（ｕＰＡＲ，ＣＤ８７）等。应用流式细 胞术检测ＧＰＩ锚连蛋白缺失细胞数量是诊断ＰＮＨ最直接、 最敏感的方法。ＰＮＨ克隆累及造血细胞依次为粒细胞、单核 细胞、红细胞、淋巴细胞，骨髓ＰＮＨ克隆出现比外周血早，网 织红细胞略早于成熟红细胞。建立ＰＮＨ诊断至少有一系及 以上细胞的两种ＧＰＩ锚连蛋白缺失。ＣＤ５９敏感度要高于 ＣＤ５５，ＣＤ５９一粒细胞可最早被检出，有早期诊断价值，且不受 输血影响。对ＰＮＨ克隆锚连蛋白的不同缺失程度进行量 化，可以对ＰＮＨ进行分型，以便进一步了解并监测病情进展
7.中国PNH疾病登记研究10152014
References: 1. Borowitz MJ et al; Clinical Cytometry Society. Cytometry B Clin Cytom. 2010;78:211-230. 2. Parker C et al; International PNH Interest Group. Blood. 2005;106:3699-3709.
FLAER- GPI Anchor Binding Marker
80.1% of granulocytes lack GPI proteins
References: Data Source: Dahl-Chase Diagnostic Services.
CD59 – GPI Anchored Protein
References: 1. Borowitz MJ et al; Clinical Cytometry Society. Cytometry B Clin Cytom. 2010;78:211-230. 2. Parker C et al; International PNH Interest Group. Blood. 2005;106:3699-3709.
• 全球发病率仅为1.3/百万人口 • 一个患者承担着其他一百万健康人群的风险 • 我国北方牡丹江地区1985-1994年流行病学调查显示：PNH发
病率仅为每百万人口中1.3-2.8人，患病率为每百万人口9.1人
3
阵发性睡眠性血红蛋白尿症: 一个慢性破坏性、威胁生命的疾病
阵发性睡眠性血红蛋白尿(PNH)的诊断指南(流式细胞术)
流式细胞术诊断并监测阵发性睡眠性血红蛋白尿症和相关疾病指南背景：阵发性睡眠性血红蛋白尿症（PNH）是一种特殊的获得性克隆性造血干细胞疾病，该疾病是由于PIGA基因体细胞突变，导致连接细胞膜的GPI相关锚蛋白缺失所致。
流式细胞术是检测GPI相关锚蛋白缺失的方法之一，同时也是诊断PNH所必需的检测指标。
然而到目前为止，对于运用流式细胞术检测GPI相关锚蛋白缺失方法还没有标准化、规范化。
方法：在本论文中，我们将提出一致方案，介绍运用流式细胞术检测PNH的规范程序。
结果：我们通过临床症状和对数据的分析、结果报告对病例提出综合意见。
但分析中，主要集中在对分析过程的重要性。
本文将区分常规分析（定义为：缺失细胞占1％或更多）和高灵敏度的分析（缺失细胞仅占小于0.01％的PNH细胞）。
其中如何设计抗体组合和设门对这两种分析都是非常重要的，本文将做详细介绍。
我们将通过对白细胞和红细胞的检测，以及各自的检测优势来讨论并评估PNH患者人群。
我们目前提供的步骤仍需要进一步完善，使其成为高灵敏度的检测技术，包括需要明确：试剂浓度；PNH克隆细胞在正常人群的发生率（背景），并讨论此技术的缺点，因为此缺陷将可能影响到结果解释。
结论：本论文可适用于对PNH感兴趣和刚开始建立检测PNH克隆细胞的实验室，使其建立一个比较完善的实验流程；也可用于已开展此检测项目，以提高其该实验室检测技术和报告水平。
背景阵发性睡眠性血红蛋白尿（PNH）是一种罕见的造血干细胞疾病，该疾病自19世纪初即被确认为一个具有独特临床症状的疾病（1,2）。
在疾病的发展过程中，PNH有三个显着的临床特点，但是这三个特点的个体差异很大（3-5）。
首先，以补体介导的血管内溶血为主要临床表现，包括：吞咽困难，嗜睡，勃起功能障碍（ED），慢性肾功能衰竭，肺动脉高压，贫血，和血红蛋白尿。
其次，具有形成血栓的倾向，该血栓不仅可发生在四肢，还好发于具有特殊部位，如肝门（Budd - Chiari综合征），脾，肠系膜静脉。
阵发性睡眠性血红蛋白尿症克隆筛查及补体抑制剂治疗监测中国专家共识(2024年版)解读PPT课件
03
缺乏完善的PNH监测体系，难以对患者病情进行持续、有效的
监测和评估。
未来发展断创新
随着生物技术的不断发展，未来有望出现更为精 准、有效的PNH诊疗技术。
个体化治疗成为趋势
针对不同患者的具体情况，制定个体化的治疗方 案将成为未来PNH治疗的重要方向。
3
政策支持力度加大
03 补体抑制剂治疗原理及药 物选择
补体系统激活机制简述
补体系统是由多种血浆蛋白和细胞膜蛋白组成的复杂网络 系统，可通过经典途径、旁路途径和MBL途径被激活。
补体系统激活后，可产生一系列具有生物学活性的片段， 如C3a、C5a、C5b-9等，参与机体的免疫应答和炎症反应 。
在阵发性睡眠性血红蛋白尿症（PNH）中，由于红细胞膜 上CD59等补体调节蛋白的缺失，导致红细胞对补体攻击 的敏感性增强，从而发生血管内溶血。
争议问题探讨及未来研究方向
争议问题
目前对于PNH的发病机制、诊断标准和治疗方案仍存在一些争议和不确定性。 例如，部分PNH患者可合并再生障碍性贫血（AA），给诊断和治疗带来挑战 。
未来研究方向
未来需要进一步深入研究PNH的发病机制、新型治疗药物的研发和临床试验、 以及针对不同患者群体的个性化治疗方案等。
特异性抗体检测
利用特异性抗体识别异常克隆的造血干细胞或红细胞，提高诊断的 敏感性和特异性。
免疫分型技术
结合多种免疫标记物对细胞进行分型，有助于准确判断克隆性造血 的来源和类型。
新型生物标志物探索
microRNA表达谱分析
检测microRNA在阵发性睡眠性血红蛋白尿症患者中的表达变化，寻 找新的生物标志物。
随着国家对罕见病领域的重视程度不断提高，未 来有望出台更多针对PNH等罕见病的政策支持。
阵发性睡眠性血红蛋白尿症与红细胞输注
阵发性睡眠性血红蛋白尿症与红细胞输注摘要目的：分析pnh患者输注红细胞悬液与洗涤红细胞的差别。
方法：统计5例次pnh患者输注红细胞悬液及洗涤红细胞记录每次输血前、后各1天的血红蛋白、红细胞压积以及是否发生输血反应及溶血反应重点研究输注红细胞悬液与洗涤红细胞是否存在不同。
结果：输注红细胞悬液后hb上升的程度比洗涤红细胞高具有统计学意义但红细胞压积变化相比无差异。
结论：pnh患者输注相同血型的红细胞悬液是安全的并且比洗涤红细胞得到更好的效果。
关键词阵发性睡眠性血红蛋白尿输血红细胞悬液洗涤红细胞阵发性睡眠性血红蛋白尿症（以下称pnh）是后天获得的以持续性血管内溶血为特征的干细胞疾病至今原因未明主要临床表现为严重的贫血和程度不同的白细胞及血小板减少有的患者可出现典型的阵发性的与睡眠相关的酱油色尿有时在短时间内可使血红蛋白急剧下降目前尚无特效的治疗方法输血为延长患者寿命和减轻症状的重要治疗措施。
然而有的学者主张输注洗涤红细胞而有的学者提出输注非洗涤红细胞即红细胞悬液亦可。
本文通过对比两种血制品输注的前后对比证实阵发性睡眠性血红蛋白尿的患者是可以输注红细胞悬液的而且输血效果明显好于输注洗涤红细胞。
资料与方法～1年收治pnh患者5例pnh诊断均符合国内标准。
所有患者输血前均进行abo血型鉴定及交叉配血并输注同型洗涤红细胞7例共5u输红细胞悬液7例共5u。
输血时间均在～小时内输注完毕。
每次输血前给予地塞米松～mg静脉注射或.9氯化钠注射液+1葡萄糖酸钙ml静滴。
输血后均给予.9氯化钠注射液静脉冲道以使血液制品完全输注体内。
方法：分别统计输洗涤红细胞组与输红细胞悬液组输血前后的血红蛋白以及输血反应与溶血反应等进行比较。
统计学处理：数据使用excel软件录入数据分析使用p软件包样本比较用成组t检验检验等方法。
结果血红蛋白上升幅度与血制品的关系：结果表明输红细胞悬液组血红蛋白上升数值辐度较大两组相比明显差异。
见表1。
阵发性睡眠性血红蛋白尿(PNH)的诊断指南(流式细胞术)
流式细胞术诊断并监测阵发性睡眠性血红蛋白尿症和相关疾病指南背景：阵发性睡眠性血红蛋白尿症（PNH）是一种特殊的获得性克隆性造血干细胞疾病，该疾病是由于PIGA基因体细胞突变，导致连接细胞膜的GPI相关锚蛋白缺失所致。
流式细胞术是检测GPI相关锚蛋白缺失的方法之一，同时也是诊断PNH所必需的检测指标。
然而到目前为止，对于运用流式细胞术检测GPI相关锚蛋白缺失方法还没有标准化、规范化。
方法：在本论文中，我们将提出一致方案，介绍运用流式细胞术检测PNH的规范程序。
结果：我们通过临床症状和对数据的分析、结果报告对病例提出综合意见。
但分析中，主要集中在对分析过程的重要性。
本文将区分常规分析（定义为：缺失细胞占1％或更多）和高灵敏度的分析（缺失细胞仅占小于0.01％的PNH细胞）。
其中如何设计抗体组合和设门对这两种分析都是非常重要的，本文将做详细介绍。
我们将通过对白细胞和红细胞的检测，以及各自的检测优势来讨论并评估PNH患者人群。
我们目前提供的步骤仍需要进一步完善，使其成为高灵敏度的检测技术，包括需要明确：试剂浓度；PNH克隆细胞在正常人群的发生率（背景），并讨论此技术的缺点，因为此缺陷将可能影响到结果解释。
结论：本论文可适用于对PNH感兴趣和刚开始建立检测PNH克隆细胞的实验室，使其建立一个比较完善的实验流程；也可用于已开展此检测项目，以提高其该实验室检测技术和报告水平。
背景阵发性睡眠性血红蛋白尿（PNH）是一种罕见的造血干细胞疾病，该疾病自19世纪初即被确认为一个具有独特临床症状的疾病（1,2）。
在疾病的发展过程中，PNH有三个显着的临床特点，但是这三个特点的个体差异很大（3-5）。
首先，以补体介导的血管内溶血为主要临床表现，包括：吞咽困难，嗜睡，勃起功能障碍（ED），慢性肾功能衰竭，肺动脉高压，贫血，和血红蛋白尿。
其次，具有形成血栓的倾向，该血栓不仅可发生在四肢，还好发于具有特殊部位，如肝门（Budd - Chiari综合征），脾，肠系膜静脉。
PNH
• CD55，也称为衰变加速因子，主要作用是加速膜结合C3转化酶的破坏。
• 其他因素导致补体激活（手术、感染、炎症）时溶血加重。
病理生理
PNH临床表现
• 贫血：溶血及骨髓衰竭所致。 • 血栓：最严重的并发症及致死的最常见的病因静脉血栓多于动脉血栓。 常见部位为腹部（肝静脉血栓并发BCS最常见）和大脑静脉。DVT、肺 栓子、皮肤栓塞也较常见。 • 平滑肌肌张力障碍：腹痛、食管痉挛、吞咽困难、勃起障碍等。
阵发性睡眠性血红蛋白尿症 （Paroxysmal Nocturnal Hemaglobinuria, PNH）
北京清华长庚医院血液科 2015.2.25
历史
• 1882年 Dr Paul Strübing描述了以为29岁男性，表现为乏力、腹 痛、严重的夜间发作的血红蛋白尿； Strübing推测溶血发生于 血管内，因为血红蛋白尿发作后患者的血浆会变成红色。 • 1925年， Enneking引入了阵发性睡眠性血红蛋白尿症这一病名。 • 1937年，Thomas Ham报道PNH红细胞在酸化的正常血清中孵育 时会发生溶血反应，这也是第一个PNH的诊断实验 Ham test。
病理生理
病理生理
• GPI锚连蛋白超过150种。 • 造血干细胞上存在超过12种GPI锚连蛋白，包括血型抗原、黏附分子、 补体调节蛋白以及气单胞菌溶素原受体。其中补体调节蛋白CD59和 CD55的缺失是引起PNH相关临床表现的主要原因。 • CD59通过阻断C9的聚集直接抑制膜功击复合物的形成。
室和临床证据(同时伴有骨髓衰竭证据，再障或低危MDS，使用
高敏感的流式细胞检测手段可见<1%的GPI-中性粒细胞)。
PNH治疗
1. 控制和减轻血红蛋白尿发作：泼尼松20-40mg/d。发作 停止后应逐渐减量。持续严重溶血发作者可短期试用泼 尼松1mg/kg/d。 2. 有条件者可使用补体抑制剂。
PNH的名词解释
PNH的名词解释PNH，即“阵发性夜间血红蛋白尿症”（Paroxysmal Nocturnal Hemoglobinuria）是一种罕见的遗传性血细胞疾病。
它的特点是患者的红细胞因体内缺乏特殊的膜蛋白，被免疫系统攻击并破坏，导致血红蛋白泄漏至尿液中，最终导致溶血性贫血等一系列临床表现。
一、PNH的病因PNH是由一种称为“PIGA基因突变”的遗传缺陷引起的。
通常情况下，PIGA基因在骨髓造血细胞分裂过程中会产生一个蛋白，它负责让其他蛋白附着在细胞膜上。
然而，PNH患者的PIGA基因出现突变，导致无法产生这个蛋白，细胞膜失去了固定其他重要蛋白的功能，包括一种称为“糖脂酰磷酰肌醇（GPI）锚”的蛋白，而GPI锚被认为是保护红细胞免受免疫系统攻击的关键。
二、PNH的临床表现PNH的临床表现因患者的骨髓受累程度和溶血程度的不同而有所差异。
其中最典型的症状是阵发性的夜间血红蛋白尿。
正常情况下，健康人的尿液是无色的，而PNH患者在清晨醒来后尿液中会发现红色的血尿，这是由于夜间红细胞破坏导致血红蛋白泄漏所致。
此外，PNH患者还可能出现疲劳、气短、黄疸、腹痛、贫血等症状。
在严重的情况下，溶血性危象可能会导致肾功能受损、衰竭甚至死亡。
三、PNH的诊断和治疗PNH的诊断主要依靠实验室检查，如高灵敏度流式细胞术、凝集素试验等。
其中高灵敏度流式细胞术是目前准确诊断PNH的最标准方法，可以对血细胞膜上的GPI锚进行检测。
在治疗方面，随着研究的不断进展，一些新的治疗手段逐渐展现出潜力。
包括单克隆抗体疗法、免疫调节剂等。
然而，由于PNH是一种罕见病，治疗方法还相对有限，且目前并无根治之法。
四、PNH对患者的影响及应对策略PNH的患者在日常生活中面临着许多不便和困扰。
贫血导致的疲劳和体力下降会影响到工作和生活质量。
溶血危机可能随时发生，给患者和家人带来心理负担。
因此，对于PNH患者来说，积极的心态和健康的生活方式是非常重要的。
在医生的指导下，患者可以适当运动、合理饮食、保持充足的睡眠以及避免潜在的致病因素。
低剂量MP方案治疗难治性阵发性睡眠性血红蛋白尿症的疗效分析
[通讯作者] 陈荣华（1969-），女，硕士，主治医师，研究方向：血液性疾病 的诊断和治疗，郑州人民医院，邮箱：loua nfeng@。
方案药物过敏、有M P方案治疗 禁忌症的患者。 1.2 方法 1.2.1 治疗方案 ① 基础治疗药物[3]：口服碳酸氢钠（3 g /d）碱化 利尿，口服维生E（0.6 g /d）细胞膜稳定剂。②小剂量M P方案联合 化疗：每日泼尼松 0.5 mg / k g、马法兰2～6 mg。治疗 有效患者，逐 渐减少两 药用量或停药。第1疗 程治疗无效患者，间隔1月给 予第2 疗 程 治 疗。③支 持 对 症 治 疗：化 疗 期间所 有患者 均 需 保 护 性 隔 离， 必 要时输注成分血（浓缩血小板、洗涤红细胞），感染者需适当予 以抗 生 素 治 疗 [4]。 1.2.2 疗效观察 观察并记录化疗 前后泼尼松用量、溶血指标及 P N H 克隆 负荷指标的变化，以及 疗 效、疾 病 复 发和不良 反 应情况。 溶血指标：血红蛋白浓度、血清总胆红素（T BI L）、血清间接胆红 素（I BIL）、血清游离血红蛋白（FH b）浓度；PN H 克隆负荷指标： 尿 Rou s试 验、Ha m，s试 验、微量补体 溶血试 验、糖水试 验 及蛇毒 因子溶血 试 验 [5]。比 较 患者 治 疗 前后相 关 参 数的变化。 1.3 统计学处理