乌头碱对心衰细胞强心作用的量-时-效关系的实验研究
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碱 ， 既 是 乌 头 （ 子 ） 主要 有 效 成 分 ， 是 主要 毒性 成分 。 乌 其 附 的 又
头 碱 的 有 效 剂 量 和 中毒 剂 量 相 差 甚 微 ，其 致死 量 为 ３ ４ｍ ， ￣ ｇ 人 （ ｒ— 每 瓶 １ ０ｍｇ 纯 度 ≥９ ％ ， 国 Ｓｇ ａ公 司 ） 二 甲基 亚 Ｂ ｄ Ｕ， ０ ， ９ 美 ｉ ｍ ；
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中 国 中 医急 症 ２ １ ０ ２年 ４月 第 ２ １卷第 ４期 Ｊ Ｔ Ｍ． ｐ． ０ ２ Ｖ １２ ． ． Ｅ Ｃ Ａ ｒ２ １ ． ｏ． １Ｎｏ４
・
实 验 研 究 ・
乌头 碱对 心衰 细胞强 心作 用 的量 一 效 关 系 时一 的实验研究 冰
温善 姗 万海 同 张 宇燕 杨 洁红
见下表 。
细 胞 是 构 成 生 命 的 基 本 单 位 ，任 何 有 害 因子 对 机 体 的 作
用 ，均 可 通 过 细胞 的形 态 与 功 能 的 改 变 表 现 出来 或 检 测 出来 。
专 项 基 金 （ ｏ ０ １３ ２ １０ ２ ２０ ３２ １０ ０ ） 浙 江 省 中 Ｎ ． １ ３ ２ １ ０ ０ ，０ ９ ３ ２ １ ０ １ ； ２ 医药科 技 计 划 项 目（ ｏ ０ ０ Ａ １ ） Ｎ ． １Ｚ ０ ７ ２
△ 通 信 作 者
荡 器 （ 仓 市实 验 设 备 厂 ） 太 。 １ ． 乳 鼠心 肌 细胞 的 原 代 培 养 ４ （） 新生 ２ １取 ４ｈ内 的 Ｓ 大 Ｄ 鼠乳 鼠 ， 超 净 工作 台 内用 ７ ％酒 精 浸 泡 消 毒 １ ， 手 捏 紧 乳 在 ５ ０Ｓ左
１ 实验材料 ． １
心 机 （ 京 京 立 离 心 机 有 限公 司 ）Ｍｏｅ一 ８ 北 ； ｄ ｌ６ ０型 酶 标 仪 （ 国 美
Ｂ ｏ Ｒ ｄ生命 医学 产 品有 限 公 司 ） Ｔ Ｚ Ｃ １ 台式 冷 冻 恒 温 振 ｉ ａ — ；Ｈ — 一 型
浙 江 医 学科 学 院实 验 动 物 中心 ， 格证 号 ：Ｙ Ｋ（ ）０ ８ ０ １。 合 Ｓ Ｘ 浙 ２ ０— １３ １ ． 药物 与 试 剂 乌 头 碱 标 准 品 （ 瓶 １ ｇ 纯 度 ≥９ ％ ， ２ 每 ０ｍ ， ８ 中 国 药 品 与 生 物 制 品 鉴 定 所 ）３％ 过 氧 化 氢 （ 瓶 ５ ０ｍ ， ：０ 每 ０ Ｌ 纯 度 ≥３ ％ ， 海 远 大过 氧化 物有 限公 司 ）５－ 脱 氧 尿 嘧 啶核 苷 ０ 上 ；＇溴 基 金 项 目 ： 家 自然 科 学 基 金 项 目（ ｏ １７ １９ ； 国 Ｎ ． ０ ３ ３ ） 高校 博 点 ８
【 ｂ ｔａｔ ０ｂｅｔ ｅ ｏｏｓｒｅｔｅｄ ｓ－ｉ ｅ ｅ ｅｔｅ ｔ ｎｈｐｉ ａｄａ ｆ ｃ ｏ ｅｒｆｉ ｒ ｃｌ ｄ ｃｄ Ａ ｓｒｃ】 ｊｃｉ ： ｂｅｖ ｏｅ ｔ － ｆ ｃ ｒｌ ｉ ｓｉ ｎｃｒｉ ｅ ｅｔ ｆ ａｔａｕｅ ｅ ｓｎ ｕ ｅ ｖＴ ｈ ｍ ｆ ａｏ ｃ ｈ ｌ ｌｉ
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鼠颈 背 部 皮 肤 以 充 分 展 露 胸 部 ， 后 用 ７ ％的 酒 精 棉 再 次 消 毒 然 ５
胸 部 ；２ 取 眼 科 剪 沿 胸 骨 柄 左 下 缘 向上 剪 开 肋 骨 ， 后 再 在 切 （） 然 口中 间 横剪 胸 骨 ， 手 稍 顶 ， 出 心 脏 ， 后 用 弯 头 眼 科 镊 夹 住 左 挤 然 心 脏 中部 ． 可将 心 室 部 分 夹 下 ， 速 用 预 冷 的 Ｐ Ｓ液 清 洗 ４ ５ 即 迅 Ｂ ～
（ 浙江 中医药大 学 ， 江 杭 州 ３ ０ ５ ） 浙 １０ ３
中图 分 类 号 ： ２５５ 文献 标 志码 ： 文 章 编 号 ：０ ４ ７５ ２ １ ）４ ０ ６ － ３ Ｒ ８． Ａ １０ — ４ Ｘ（０ ２ｒ － ５２ ０ ０
【 要 】 目的 观 察 乌 头 碱 对 Ｈ０ 构建 的心 衰 细 胞模 型 的 强心 作 用 的 量一 效 关 系 。 方 法 利 用 原 代 培 养 的 摘 ２ 时～
砜（ ＤＭＳ 每 板 １ ０ｍｇ， 度 ≥９ ．％ ， 国 Ｓ ｇ Ｏ， ０ 纯 ９５ 美 ｉｍａ公 司 ） 台 盼 ；
蓝（ 每瓶 ５ ， 纯度 Ｉ７ ％ ， 国 Ｓ ｍａ 司 ） 四噻 唑 兰 （ ｒ 每瓶 ｇ ＞ ０ 美 ｉ 公 ｇ ； ＭＩ Ｔ，
口服 ０２ｍ ． ｇ即 导致 中毒 ， 主要 表现 为 心 血 管 系 统 毒性 ｌ。 头碱 １乌 ］
遍 ． 去 心 室 肌 表 面及 血 管 中残 留 的血 细胞 ， 入灭 菌 １ Ｌ小 洗 放 ０ｍ
・
５ ４・ ６
中国 中 医 急症
２１ ０ ２年 ４月 第 ２ ｌ卷 第 ４期 Ｊ Ｔ Ｍ． ｐ ．０ ２ Ｖ １２ ， ｏ４ Ｅ Ｃ Ａ ｒ ２ １ ， ｏ． １ Ｎ ．
２ ． 均 匀统 计 结 果 Ｏ 平 均 值 ２ Ｄ
毒 性 的研 究较 多 ，而 通 过 原 代 心肌 细 胞 研 究 其 强 心作 用 的研 究
１ ， 度 ＞ ８ ， 国 Ｂｏｈｒ 司 ） 胎 牛血 清 （Ｂ ，０ 纯 ｇ ９％ 美 ｉｓａｐ公 。 Ｆ Ｓ １０ｍＬ瓶 ， ／
杭 州 四季 青 生 物 工 程 材 料 有 限 公 司 ）０２ ％胰 酶 ＋ ．２ Ｅ Ｔ ； ．５ ００ ％ Ｄ Ａ
验 证 实 验 也证 实 如 此 。结 论 乌 头 碱 对 心 衰 模 型 有 明 显 强 心 作用 ， 最 佳 量 一 一 组 合 为 ５ ｍ ｌ 其 时 效 ０Ｉ ｏ Ｌ的乌 头 ｘ ／
碱 作 用 与 心 衰模 型 ０５ 。 ． ｈ
【 关键 词 】 乌 头碱
心衰细胞
强心
均匀设计
量～ 效
时一 效
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Ｃ 一 Ｆ 型双 人 单 面 净 化 工作 台 （ Ｊ２Ｄ 苏州 净 化 设 备 有 限公 司 ） ３ １ ；１ １
型Ｃ， Ｏ 培养 箱 （ 国 Ｔ ｅ ｏ公 司 ）Ｌ Ｚ — 美 ｈｒ ｍ ；Ｄ ５ ２型 低 速 自动平 衡 离
动物 ： 生 Ｓ 新 Ｄ大 鼠 （ ４ｈ内 ） 雌 雄 不 限 ， 自 ２ ， 购
报 道 却 较 少 ， 研 究 采 用 Ｈ０ 构 建 新生 Ｓ 本 ： Ｄ大 鼠心 衰模 型 ， 用 并 乌 头 碱 进 行处 理后 ， ＭＩ’ 检 测 心 肌 细 胞 活 力 等 方 面 观 察 乌 从 Ｉ ｆ法 头 碱 对 Ｈ０ 诱 导 的 心 衰 模 型 的 拮 抗 作 用 ， 旨在 探 讨 乌 头 碱 对 ：
Ｈ２ 起 的 心 衰 模 型 的 强 心 作 用量 一 、 一 关 系 ， 乌 头 碱 ０引 效 时 效 为 的开 发 应 用 提 供 科 学实 验 依 据 。
１ 材 料 与 方 法
（ 瓶 １０ｍ ， 国 ＧＢ ｏ公 司 ）高 糖 Ｄ Ｍ 培 养 基 （ 双 抗 ， 每 ０ Ｌ 美 ｉｃ ； ＭＥ 含
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每 瓶 ２ ０ｍ ， 国 Ｇ Ｂ ｏ公 司 ） Ｉ 型 胶 原 酶 （ ０ ｇ瓶 ， 国 ５ Ｌ 美 ｉｃ ；Ｉ １０ｍ ／ 美 Ｇ Ｂ ｏ 司 ）Ｐ Ｓ 每 瓶 ２ ０ｍＬ 吉 诺 生 物 医 药技 术 有 限公 司 ） ｉｃ 公 ：Ｂ （ ５ ， 。 ｌ 仪器 ＿ ３ Ｔ ２０一 Ｅ ０ ０ Ｓ倒 置荧 光 显 微镜 （ 日本 Ｎ ｋ ｎ公 司 ）Ｓ ｉｏ ； Ｗ—
乳 鼠心 肌 细 胞 ， Ｈ２ 建 心 衰模 型 ， 用 均 匀 设 计 ， 别 加 ５ １ 、５ ５ 、０ ｍｏＬ 的乌 头 碱 作 用 ０５ １ 加 ０构 采 分 、０ ２ 、０ １ ０￣ ｌ ／ ．、 、
２ ４ｈ及 ８ 、 ｈ后测 Ｍ１ｒ然 后进 行 验 证 实 验 结 果 均 匀 设 计 预 测 的最 佳 组 合 为乌 头 碱 ５ ｍ ｌ ｒ， ０ ｏ／ 用 ０５ｈ Ｌ作 ． ，
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实 验 研 究 ・
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２１ ０ ２年 ４月 第 ２ ｌ卷 第 ４期 Ｊ Ｔ Ｍ． ｐ ．０ ２ Ｖ １２ ， ｏ４ Ｅ Ｃ Ａ ｒ ２ １ ， ｏ． １ Ｎ ．
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【 关键 词 】 乌 头碱
心衰细胞
强心
均匀设计
量～ 效
时一 效
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１ 材 料 与 方 法
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２ ４ｈ及 ８ 、 ｈ后测 Ｍ１ｒ然 后进 行 验 证 实 验 结 果 均 匀 设 计 预 测 的最 佳 组 合 为乌 头 碱 ５ ｍ ｌ ｒ， ０ ｏ／ 用 ０５ｈ Ｌ作 ． ，