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朱砂烟和普通烤烟烟叶酚类物质差异分析

㊀山东农业科学㊀２０２３ꎬ５５(５):７６~８３ＳｈａｎｄｏｎｇＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ㊀ＤＯＩ:１０.１４０８３/ｊ.ｉｓｓｎ.１００１－４９４２.２０２３.０５.０１２收稿日期:２０２２－０９－１９基金项目:国家自然科学基金项目(２１８０１０６４)ꎻ吉林烟草工业有限责任公司科技项目(ＪＳＺＸ－２０１９－０３)作者简介:齐奎元(１９９８ )ꎬ男ꎬ河南周口人ꎬ硕士研究生ꎬ主要从事烟草栽培生理生化研究ꎮＥ－ｍａｉｌ:ｑｉｋｕｉｙｕａｎ３４＠１６３.ｃｏｍ通信作者:刘鹏飞(１９８１ )ꎬ男ꎬ河南安阳人ꎬ博士ꎬ副教授ꎬ研究方向:烟草化学与品质ꎮＥ－ｍａｉｌ:ｌｉｕｐｅｎｇｆｅｉ５２３＠１２６.ｃｏｍ李玉娥(１９７９ )ꎬ女ꎬ硕士ꎬ工程师ꎬ研究方向:烟叶原料与品质ꎮＥ－ｍａｉｌ:ｌｙｅｃｙｓ＠１６３.ｃｏｍ朱砂烟和普通烤烟烟叶酚类物质差异分析齐奎元１ꎬ赵华武２ꎬ金江华３ꎬ张瑞平１ꎬ张晓平１ꎬ刘鹏飞１ꎬ李玉娥３(１.河南农业大学烟草学院/国家烟草栽培生理生化研究基地ꎬ河南郑州㊀４５０００２ꎻ２.云南中烟工业有限责任公司ꎬ云南昆明㊀６５０２３１ꎻ３.吉林烟草工业有限责任公司ꎬ吉林延吉㊀１３３００１)㊀㊀摘要:为考察朱砂烟(云烟９７变异种)和普通烤烟(云烟９７)及其卷烟烟气中酚类物质含量的差异ꎬ采用气相色谱法和液相色谱法对朱砂烟叶和普通烟叶样品进行分析ꎬ并对两种烟叶卷烟进行感官质量评价ꎮ结果表明ꎬ完善后的福林－酚法测定烟叶总酚含量的最优条件为:样品用量０.５ｍＬꎬ福林－酚试剂用量２.０ｍＬꎬ充分混合后再加入１０％碳酸钠溶液４.０ｍＬꎬ２５ħ下避光放置４０ｍｉｎꎬ之后在７６０ｎｍ波长下测定样品中总酚类物质含量ꎮ同部位烤烟样品中朱砂烟总酚类物质含量较高ꎮ不同烤烟样品的主要多酚类物质总量差异显著ꎬ其中朱砂烟烟叶上特征性红色斑块含量最高ꎬ中㊁上部朱砂烟叶和红色斑块主要多酚类物质总量比云烟９７分别高出１８.７１％㊁２２.７６％和３１.８２％㊁４１.９５％ꎻ不同部位烟叶之间主要多酚类物质含量差异较大ꎬ上部叶含量较高ꎮ朱砂烟叶及红色斑块的黄酮类物质含量处于较高水平ꎬ这也是影响朱砂烟外观特征的因素之一ꎮ朱砂烟中㊁上部叶卷烟中各挥发性酚类物质含量大多高于云烟９７ꎬ总量均高于云烟９７ꎮ朱砂烟卷烟的感官质量评价得分高于云烟９７ꎬ这与该烟叶各酚类物质含量优于云烟９７的结果具有一致性ꎮ该研究结果可为朱砂烟的选用提供相关参考ꎮ关键词:朱砂烟ꎻ高效液相色谱法ꎻ气质联用法ꎻ酚类物质ꎻ黄酮类物质中图分类号:Ｓ５７２.０１㊀㊀文献标识号:Ａ㊀㊀文章编号:１００１－４９４２(２０２３)０５－００７６－０８ＤｉｆｆｅｒｅｎｃｅＡｎａｌｙｓｉｓｏｆＰｈｅｎｏｌｉｃｓｉｎＣｉｎｎａｂａｒＴｏｂａｃｃｏａｎｄＣｏｍｍｏｎＦｌｕｅ￣ＣｕｒｅｄＴｏｂａｃｃｏＬｅａｖｅｓＱｉＫｕｉｙｕａｎ１ꎬＺｈａｏＨｕａｗｕ２ꎬＪｉｎＪｉａｎｇｈｕａ３ꎬＺｈａｎｇＲｕｉｐｉｎｇ１ꎬＺｈａｎｇＸｉａｏｐｉｎｇ１ꎬＬｉｕＰｅｎｇｆｅｉ１ꎬＬｉＹｕｅ３(１.ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＴｏｂａｃｃｏＳｃｉｅｎｃｅꎬＨｅｎａｎＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ/ＮａｔｉｏｎａｌＴｏｂａｃｃｏＣｕｌｔｉｖａｔｉｏｎ＆Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ＆ＢｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙＲｅｓｅａｒｃｈＣｅｎｔｅｒꎬＺｈｅｎｇｚｈｏｕ４５０００２ꎬＣｈｉｎａꎻ２.ＣｈｉｎａＴｏｂａｃｃｏＹｕｎｎａｎＩｎｄｕｓｔｒｉａｌＣｏ.ꎬＬｔｄ.ꎬＫｕｎｍｉｎｇ６５０２３１ꎬＣｈｉｎａꎻ３.ＪｉｌｉｎＴｏｂａｃｃｏＩｎｄｕｓｔｒｉａｌＣｏ.ꎬＬｔｄ.ꎬＹａｎｊｉ１３３００１ꎬＣｈｉｎａ)Ａｂｓｔｒａｃｔ㊀Ｉｎｏｒｄｅｒｔｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｉｎｃｏｎｔｅｎｔｏｆｐｈｅｎｏｌｉｃｃｏｍｐｏｕｎｄｓｉｎｃｉｎｎａｂａｒｔｏｂａｃｃｏ(Ｙａｎｙａｎ９７ｍｕｔａｎｔ)ａｎｄｃｏｍｍｏｎｆｌｕｅ￣ｃｕｒｅｄｔｏｂａｃｃｏ(Ｙｕｎｙａｎ９７)ｌｅａｖｅｓａｎｄｔｈｅｉｒｃｉｇａｒｅｔｔｅｓｍｏｋｅꎬｔｈｅｇａｓｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙａｎｄｌｉｑｕｉｄｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙｗｅｒｅｕｓｅｄｆｏｒｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｓａｍｐｌｅｓꎬａｎｄｔｈｅｓｅｎｓｏｒｙｑｕａｌｉｔｙｏｆｔｈｅｔｗｏｋｉｎｄｓｏｆｃｉｇａｒｅｔｔｅｗａｓｅｖａｌｕａｔｅｄ.Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｏｐｔｉｍａｌｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓｆｏｒｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇｔｈｅｔｏ￣ｔａｌｐｈｅｎｏｌｉｃｃｏｎｔｅｎｔｏｆｔｏｂａｃｃｏｌｅａｖｅｓｂｙｔｈｅｉｍｐｒｏｖｅｄＦｏｌｉｎ￣ｐｈｅｎｏｌｍｅｔｈｏｄｗｅｒｅａｓｆｏｌｌｏｗｓ:０.５ｍＬｏｆｓａｍｐｌｅｄｏｓａｇｅꎬ２ｍＬｏｆＦｏｌｉｎ￣ｐｈｅｎｏｌｒｅａｇｅｎｔꎬ４.０ｍＬｏｆ１０％ｓｏｄｉｕｍｃａｒｂｏｎａｔｅｓｏｌｕｔｉｏｎａｆｔｅｒｆｕｌｌｍｉｘｉｎｇꎬｐｌａｃｉｎｇｉｎｔｈｅｄａｒｋａｔ２５ħｆｏｒ４０ｍｉｎｕｔｅｓꎬａｎｄｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇａｔ７６０ｎｍ.Ｔｈｅｔｏｔａｌｐｈｅｎｏｌｉｃｃｏｎｔｅｎｔｏｆｃｉｎｎａｂａｒｔｏｂａｃｃｏｗａｓｈｉｇｈｅｒｉｎｔｈｅｓａｍｅｐａｒｔｏｆｆｌｕｅ￣ｃｕｒｅｄｔｏｂａｃｃｏｓａｍｐｌｅｓ.Ｔｈｅｔｏｔａｌａｍｏｕｎｔｏｆｍａｊｏｒｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓｉｎｄｉｆｆｅｒｅｎｔｆｌｕｅ￣ｃｕｒｅｄｔｏｂａｃｃｏｓａｍｐｌｅｓｖａｒｉｅｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙꎬａｍｏｎｇｗｈｉｃｈꎬｔｈａｔｏｆｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｒｅｄｆｌｅｃｋｓｏｎｃｉｎｎａｂａｒｔｏ￣ｂａｃｃｏｌｅａｖｅｓｗａｓｔｈｅｈｉｇｈｅｓｔ.Ｔｈｅｔｏｔａｌａｍｏｕｎｔｏｆｍａｊｏｒｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓｉｎｔｈｅｍｉｄｄｌｅａｎｄｕｐｐｅｒｃｉｎｎａｂａｒｔｏｂａｃｃｏｌｅａｖｅｓａｎｄｒｅｄｆｌｅｃｋｓｗｅｒｅ１８.７１％ꎬ２２.７６％ꎬ３１.８２％ａｎｄ４１.９５％ｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｔｈｏｓｅｉｎＹｕｎｙａｎ９７ꎬｒｅｓｐｅｃ￣ｔｉｖｅｌｙ.Ｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆｍａｊｏｒｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓｖａｒｉｅｄｇｒｅａｔｌｙａｍｏｎｇｔｏｂａｃｃｏｌｅａｖｅｓａｔｄｉｆｆｅｒｅｎｔｐｏｓｉｔｉｏｎｓꎬａｎｄｔｈａｔｉｎｕｐｐｅｒｌｅａｖｅｓｗａｓｈｉｇｈｅｒ.Ｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆｆｌａｖｏｎｏｉｄｓｉｎｃｉｎｎａｂａｒｔｏｂａｃｃｏｌｅａｖｅｓａｎｄｒｅｄｆｌｅｃｋｓｗｅｒｅａｔｈｉｇｈｅｒｌｅｖ￣ｅｌｓꎬｗｈｉｃｈｗａｓｏｎｅｏｆｔｈｅｆａｃｔｏｒｓａｆｆｅｃｔｉｎｇｔｈｅａｐｐｅａｒａｎｃｅｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｏｆｃｉｎｎａｂａｒｔｏｂａｃｃｏ.ＴｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆｖｏｌａｔｉｌｅｐｈｅｎｏｌｉｃｓｕｂｓｔａｎｃｅｓｉｎｃｉｎｎａｂａｒｃｉｇａｒｒｅｔｅｗｉｔｈｍｉｄｄｌｅａｎｄｕｐｐｅｒｌｅａｖｅｓｗａｓｍｏｓｔｌｙｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｔｈａｔｏｆＹｕｎｙａｎ９７ꎬａｎｄｔｈｅｔｏｔａｌａｍｏｕｎｔｗａｓａｌｌｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｔｈａｔｏｆＹｕｎｙａｎ９７.ＴｈｅｓｅｎｓｏｒｙｑｕａｌｉｔｙｅｖａｌｕａｔｉｏｎｓｃｏｒｅｏｆｃｉｎｎａｂａｒｃｉｇａｒｅｔｔｅｗａｓｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｔｈａｔｏｆＹｕｎｙａｎ９７ꎬｗｈｉｃｈｗａｓｃｏｎｓｉｓｔｅｎｔｗｉｔｈｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｏｆｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆｐｈｅｎｏｌｉｃｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ.Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｏｆｔｈｉｓｓｔｕｄｙｃｏｕｌｄｐｒｏｖｉｄｅｒｅｆｅｒｅｎｃｅｓｆｏｒｔｈｅｓｅｌｅｃｔｉｏｎａｎｄｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎｏｆｃｉｎｎａ￣ｂａｒｔｏｂａｃｃｏ.Ｋｅｙｗｏｒｄｓ㊀ＣｉｎｎａｂａｒｔｏｂａｃｃｏꎻＨｉｇｈｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｌｉｑｕｉｄｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙꎻＧａｓｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ￣ｍａｓｓｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙｍｅｔｈｏｄꎻＰｈｅｎｏｌｉｃｃｏｍｐｏｕｎｄｓꎻＦｌａｖｏｎｏｉｄｓ㊀㊀朱砂烟是优良烟株在自然生长发育过程中发生自然变异的结果ꎬ其烟叶中烟碱大量转化为去甲基烟碱ꎬ正常调制后叶面特征显著ꎬ呈现樱桃色斑块ꎮ有研究认为ꎬ红色斑块是烟叶中多酚氧化产物在降烟碱作用下产生的樱红色素[１]ꎻ也有学者认为朱砂烟叶上的红色物质是由去甲基烟碱和醌类物质反应而形成ꎬ其具体化学结构至今尚未确定[２ꎬ３]ꎮ烟草中酚类物质含量是生物合成机制的结果ꎬ近年来研究表明烟叶中的酚类化合物作为烟草品质重要影响因素之一ꎬ对烟叶色泽㊁烟草香味和吃味有显著影响[４－９]ꎮ烟叶酚类物质按照羟基数目的不同ꎬ可分为简单酚类和多酚ꎮ简单酚类含量极微ꎬ而多酚含量较高ꎮ现已发现的烟草多酚类化合物包括单宁类㊁香豆素类㊁黄酮类㊁花色素类㊁简单酚类衍生物等ꎮ绿原酸㊁芸香苷和莨菪葶是烟草中多酚化合物的主要成分ꎬ约占烟草中酚类物质含量的８０％以上[１０]ꎬ其中绿原酸是改善烟叶等级最主要的多酚类物质[１１]ꎮ烟叶在烘烤和调制过程中ꎬ非酶促棕色化反应会影响其外观质量ꎬ调制后的干烟叶在贮存㊁陈化及发酵过程中ꎬ酶促棕色化反应会形成醌类聚合物类物质ꎬ使烟叶由黄色逐渐加深ꎬ变为红色㊁棕色以至棕褐色[１２]ꎮ曹建敏等[１３]研究表明ꎬ烟叶颜色是影响烟叶多酚含量的主要因素ꎬ叶片颜色越趋于红棕色ꎬ黄酮类物质含量越低ꎬ莨菪葶含量越高ꎮ黄酮类物质是烟草中多酚类次生代谢产物ꎬ也是影响烟草品质的重要潜香型物质[９ꎬ１４]ꎮ黄酮类化合物在烟叶调制㊁醇化和燃烧过程中可氧化分解ꎬ赋予烟草优雅的清香气味ꎬ并增加香气量ꎬ对烟草制品品质有重要的改善作用ꎮ成熟烟叶中黄酮体糖苷含量较高ꎬ通过裂解和降解等方式得到醇类和呋喃类等香味物质ꎬ可降低苦涩味ꎬ使吸味更加醇和[１０]ꎮ芸香苷和绿原酸在烟草生长㊁调制和燃烧过程中发生多种化学反应ꎬ对烟草香味有直接影响ꎬ同时芸香苷和绿原酸含量与烟叶等级有关ꎬ其在酶的作用下ꎬ易形成淡红色至黑褐色的醌类物质及其聚合物ꎬ影响烟叶颜色[１５]ꎮ目前对朱砂烟酚类物质方面的研究鲜有报道ꎮ本研究采用福林－酚法㊁芦丁法㊁高效液相色谱法和气相色谱法分析朱砂烟和普通烟叶及其卷烟烟气中酚类物质成分ꎬ通过解析朱砂烟酚类物质成分ꎬ探索朱砂烟叶特征性红色斑块与酚类物质的相关性ꎬ分析朱砂烟与普通烤烟酚类物质之间的差异ꎬ以期为朱砂烟的选用提供参考依据ꎮ１㊀材料与方法１.１㊀材料、试剂和仪器材料:供试烟叶为２０２１年云南省曲靖市采收７７㊀第５期㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀齐奎元ꎬ等:朱砂烟和普通烤烟烟叶酚类物质差异分析的中上部烤后朱砂烟(云烟９７变异种)㊁普通烤烟云烟９７及朱砂烟叶上红色斑块ꎮ试剂:甲醇为色谱纯ꎬ二氯甲烷㊁福林－酚试剂㊁苯酚㊁没食子酸㊁芦丁等其它试剂均为分析纯ꎬ均购自天津市大茂化学试剂厂ꎮ仪器:Ａｇｉｌｅｎｔ７８９０Ｂ－５９７７Ａ气相色谱质谱联用仪(ＡｇｉｌｅｎｔＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ产品)ꎻＬＣ－２０ＡＲ高效液相色谱仪(日本岛津公司产品)ꎻＵＶ－５２００紫外分光光度计(上海元析仪器有限公司产品)ꎻＮｉｃｏ￣ｌｅｔｉＳ５０傅里叶变换红外光谱仪(ＴｈｅｒｍｏＮｉｃｏｌｅｔＣｏ产品)ꎻＳＭＬ２０００直线型多通道吸烟机(中国科学院合肥物质科学院合肥众沃仪器有限公司产品)ꎮ１.２㊀测定项目及方法１.２.１㊀总酚类物质的测定㊀各测定环节如下: (１)标准溶液和样品的制备:准确称取０.１０００ｇ焦性没食子酸ꎬ用蒸馏水溶解并定容至１０００ｍＬꎬ没食子酸标准溶液浓度为１００μｇ/ｍＬꎮ准确称取６份０.１ｇ烟样(过１００目筛)ꎬ置于５０ｍＬ锥形瓶内ꎬ分别加入５０％㊁６０％㊁７０％㊁８０％㊁９０％㊁１００％甲醇(分析纯)水溶液ꎬ超声萃取２０ｍｉｎ后静置过滤并定容至５０ｍＬꎮ取１ｍＬ提取液使用ＮｉｃｏｌｅｔｉＳ５０傅里叶变换红外光谱仪进行全波谱扫描ꎬ表明用６０％甲醇(分析纯)水溶液提取的样品在３４０ｎｍ处吸光度较大ꎬ提取的酚类物质较多ꎮ因此采用６０％甲醇对样品进行提取ꎬ提取液备用ꎮ(２)福林比色法条件考察:参照王治同等[１６]的方法并进行适当修改ꎮ１０％碳酸钠溶液用量的确定:准确量取０.５ｍＬ没食子酸标准溶液６份于６支２０ｍＬ试管中ꎬ均加入福林－酚试剂１.５ｍＬꎬ待充分混合后再分别加入１０％碳酸钠溶液１.０㊁２.０㊁３.０㊁４.０㊁６.０㊁８.０ｍＬꎬ之后用蒸馏水补至２０ｍＬꎬ混匀后避光反应ꎬ使用ＵＶ－５２００紫外分光光度计每３０ｍｉｎ在７６０ｎｍ处测定吸光度ꎬ以确定福林－酚试剂与碳酸钠溶液的最佳用量比ꎮ福林－酚试剂用量的确定:准确量取０.５ｍＬ没食子酸标准溶液５份于５支２０ｍＬ试管中ꎬ分别加入福林－酚试剂１.０㊁１.５㊁２.０㊁２.５㊁３.０ｍＬꎬ待充分混合后ꎬ加入１０％碳酸钠溶液４.０ｍＬꎬ其它条件不变ꎬ以确定福林－酚试剂用量对显色效果的影响ꎮ反应温度及时间的确定:准确量取０.５ｍＬ样品溶液４份于４支２０ｍＬ试管中ꎬ分别加入福林－酚试剂２.０ｍＬꎬ待充分混合后ꎬ加入１０％碳酸钠溶液４.０ｍＬꎬ之后用蒸馏水补至２０ｍＬꎬ摇匀后静置ꎬ避光反应ꎬ分别于２５㊁３５㊁４５㊁５５ħ恒温水浴锅中保温ꎬ其它条件不变ꎬ观察温度变化对显色效果的影响ꎮ(３)标准曲线的建立:准确称取０.１００ｇ没食子酸粉末ꎬ用蒸馏水定容至１０００ｍＬꎬ得到浓度为１００μｇ/ｍＬ的没食子酸标准溶液ꎮ分别准确量取０㊁０.２５㊁０.５０㊁０.７５㊁１.２５㊁１.５０ｍＬ没食子酸标准溶液于２０ｍＬ试管中ꎬ加入福林－酚试剂２.０ｍＬꎬ充分混合后再加入１０％Ｎａ２ＣＯ３溶液４.０ｍＬꎬ用蒸馏水定容后再２５ħ下避光静置３０ｍｉｎꎬ以不加样品为空白ꎬ使用ＵＶ－５２００紫外分光光度计于７６０ｎｍ处测定其吸光度ꎮ(４)样品测定:分别量取上述制备样品溶液０.５ｍＬꎬ采用与 (３)标准曲线的建立相同的方法测定样品中总酚类物质含量ꎮ１.２.２㊀多酚含量的测定㊀取上述备用溶液２ｍＬꎬ经０.２２μｍ的有机相滤膜过滤至色谱瓶ꎬ用ＬＣ－２０ＡＲ高效液相色谱仪测定烤烟样品中的绿原酸㊁芸香苷㊁莨菪葶等主要多酚类物质含量ꎮ仪器参数:Ａ流动相为８８％超纯水㊁１０％甲醇㊁２％乙酸ꎬＢ流动相为８８％甲醇㊁１０％超纯水㊁２％乙酸ꎬ流速为１.０ｍＬ/ｍｉｎꎬ进样量为１μＬꎬ检测波长为３４０ｎｍꎮ时间程序:初始流量为１５％ꎬ用３ｍｉｎ升至３０％ꎬ用１５ｍｉｎ升至６０％并保持１０ｍｉｎꎬ用１ｍｉｎ升至１００％ꎮ１.２.３㊀黄酮类物质的测定㊀各测定环节如下: (１)标准溶液的制备:准确称取１２０ħ温度下干燥至恒重的芦丁标准品２０.００ｍｇꎬ用５０％甲醇溶解并定容至１００ｍＬꎬ即得到浓度为０.２ｍｇ/ｍＬ的芦丁标准液ꎮ(２)标准曲线的建立:参照陈爱洋等[１７]的方法进行适当调整ꎮ分别吸取芦丁标准溶液１.０㊁２.０㊁３.０㊁４.０㊁５.０ｍＬ于５个２５ｍＬ比色管中ꎬ用８７㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀山东农业科学㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀第５５卷㊀５０％甲醇均补至６ｍＬꎬ再分别加入５０ｇ/Ｌ亚硝酸钠溶液１ｍＬꎬ摇匀后静置６ｍｉｎ再加入１００ｇ/Ｌ硝酸铝溶液１ｍＬꎬ摇匀后静置６ｍｉｎ再加入２００ｇ/Ｌ氢氧化钠溶液５ｍＬꎬ用蒸馏水定容后摇匀并静置１５ｍｉｎꎬ以空白样为参比ꎬ使用ＵＶ－５２００紫外分光光度计在５１０ｎｍ处测定吸光度ꎮ以吸光度为纵坐标ꎬ加入芦丁试剂相对含量为横坐标ꎬ建立标准曲线ꎮ(３)样品测定:取样品储备液３ｍＬꎬ采用上述方法测定烟叶中黄酮类物质总含量ꎮ１.２.４㊀烟气中挥发性酚类物质的测定㊀各测定环节如下:(１)卷烟样品制备:烟叶经人工去除主脉后切丝(宽度０.８ｍｍ)ꎬ卷制成重量为１ʃ０.１ｇ的评吸烟支ꎬ按ＧＢ/Ｔ１６４４７２００４«烟草及烟草制品调节和测试的大气环境»要求调节烟支水分ꎬ每处理均制备１０支ꎬ使用ＳＭＬ２０００直线型多通道吸烟机在标准吸烟条件下进行抽吸ꎬ并使用剑桥滤片收集ꎮ(２)样品前处理:采用乙酸苯乙酯为内标标准溶液ꎬ浓度为７.９４５ｇ/Ｌꎮ将剑桥滤片置于５０ｍＬ三角锥形瓶中ꎬ加入内标标准溶液５０μＬ于滤片上ꎬ然后再加入甲醇２０ｍＬꎬ超声萃取１０ｍｉｎꎬ萃取液过０.４５μｍ滤膜并定容至５０ｍＬꎬ移取１.５ｍＬ于色谱瓶中ꎬ使用Ａｇｉｌｅｎｔ７８９０Ｂ－５９７７Ａ气相色谱质谱联用仪ꎬ按照工作条件进行测定ꎮ(３)仪器条件:气相条件:进样口温度设定为２５０ħꎻ载气为氦气ꎬ纯度大于９９.９９９％ꎬ载气流速为１ｍＬ/ｍｉｎꎻ采用分流进样方式ꎬ分流比设定为１０ʒ１ꎻ进样量:１μＬꎮ程序升温条件:初始温度１００ħꎬ保持３ｍｉｎꎬ以８ħ/ｍｉｎ的速率升至１５５ħꎬ保持８ｍｉｎꎬ再以２０ħ/ｍｉｎ的速率升至２８０ħꎬ保持８ｍｉｎꎮ离子源温度为２８０ħꎻ接口温度为２８０ħꎻ四极杆温度为１５０ħꎻ采用电子源轰击(ＥＩ)电子源ꎬ电离能量为７０ｅＶꎻ传输线温度设定为２４０ħꎻ溶剂延迟设定为２ｍｉｎꎻ扫描方式为全扫描模式ꎬ扫描范围为３０~４００ａｍｕꎻＭＳ谱库:ＮＩＳＴ１４.１ꎻ采用内标法定量ꎮ１.２.５㊀感官质量评价㊀烟叶经人工去除主脉后切丝ꎬ卷制成重量为(１.０ʃ０.１)ｇ的评吸烟支ꎬ按ＧＢ/Ｔ１６４４７２００４要求调节烟支水分后进行感官质量评价ꎮ由吉林中烟技术中心组织专家以ＹＣ/Ｔ１３８１９９８«烟草及烟草制品感官评价方法»为基础ꎬ按单料烟标度值标准统一进行感官质量评吸鉴定ꎬ并采用九分制标准打分ꎮ１.３㊀数据处理与分析采用Ｏｒｉｇｉｎ２０２１软件进行数据处理与作图ꎬＳＰＳＳ１９.０软件进行统计分析ꎬ差异显著性检验采用邓肯氏法(Ｐ<０.０５)ꎮ２㊀结果与分析２.１㊀不同烤烟样品总酚类物质含量比较２.１.１㊀检测条件筛选㊀由福林－酚法原理可知ꎬ碳酸钠溶液用量对多酚物质显色有一定的影响ꎮ碳酸钠溶液用量少会影响多酚物质的显色ꎬ引起试验误差[１８]ꎮ图１Ａ结果显示ꎬ随着１０％碳酸钠溶液用量增加ꎬ吸光度呈逐渐增加趋势ꎬ加入量增至４.０ｍＬ时反应液的吸光度较大且稳定ꎬ再增加用量ꎬ吸光度变幅太大ꎬ且其过量下反应体系较为浑浊ꎮ因此ꎬ１０％碳酸钠溶液用量选择４.０ｍＬꎮ由福林－酚法原理可知ꎬ福林－酚试剂与多酚类物质在碱性条件下呈蓝色ꎬ福林－酚试剂用量会影响底物是否完全显色[１９]ꎮ由图１Ｂ可知ꎬ福林－酚用量为２.０ｍＬ时ꎬ反应液显色较为稳定且反应体系清澈㊁无碳酸钠结晶ꎬ再增加用量虽然吸光度增大但不稳定ꎮ因此ꎬ福林－酚试剂用量选择２.０ｍＬꎮ由图１Ｃ可知ꎬ当温度为２５ħ时ꎬ吸光度较大ꎬ随着温度的升高ꎬ吸光度逐渐下降ꎮ因此反应温度选择２５ħꎮ综上ꎬ确定优化反应条件为:样品溶液０.５ｍＬꎬ加入福林－酚试剂２.０ｍＬꎬ充分混合后再加入１０％碳酸钠溶液４.０ｍＬꎬ并用蒸馏水定容至２０ｍＬꎬ于２５ħ下避光放置４０ｍｉｎꎬ之后在７６０ｎｍ处检测样品的吸光度ꎮ按该方法测定部分样品并反应３０~４０ｍｉｎ时吸光度较稳定ꎬ因此确定用此方法ꎮ２.１.２㊀总酚类物质含量比较㊀由表１可见ꎬ同部位烤烟样品总酚类物质含量均存在显著差异ꎬ上９７㊀第５期㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀齐奎元ꎬ等:朱砂烟和普通烤烟烟叶酚类物质差异分析图１㊀１０％碳酸钠不同用量(Ａ)㊁福林－酚不同用量(Ｂ)㊀㊀和不同反应温度(Ｃ)对反应体系吸光值的影响㊀㊀表１㊀不同烤烟样品总酚类物质含量部位样品总酚类物质含量(ｍｇ/ｇ)云烟９７６７.７８ʃ０.６７ｃ中部叶朱砂烟６９.１２ʃ１.０１ｂ红色斑块７５.５５ʃ１.４０ａ云烟９７７６.６５ʃ０.２２ｃ上部叶朱砂烟７８.３０ʃ０.３９ｂ红色斑块８０.４０ʃ０.９３ａ㊀㊀注:同部位同列数据后不同小写字母表示处理间差异达到显著水平(Ｐ<０.０５)ꎬ下同ꎮ部叶总酚类物质含量均高于中部叶ꎮ云烟９７上㊁中部叶总酚类物质含量均较低ꎬ朱砂烟处于中等水平ꎬ朱砂烟中红色斑块含量最高ꎬ且显著高于云烟９７和朱砂烟ꎮ２.２㊀不同烤烟样品主要多酚类物质含量比较由表２可知ꎬ不同部位烟叶之间主要多酚类物质含量差异较大ꎬ上部叶含量较高ꎮ红色斑块总量处于最高水平ꎬ中㊁上部朱砂烟叶和红色斑块主要多酚类物质总量分别高出云烟９７１８.７１％㊁２２.７６％和３１.８２％㊁４１.９５％ꎮ就中部叶而言ꎬ绿原酸和芸香苷含量各烟样间差异均显著ꎬ云烟９７绿原酸含量最低ꎬ红色斑块含量最高ꎮ云烟９７与朱砂烟比较ꎬ莨菪葶含量差异不显著ꎬ朱砂烟含量略高ꎻ红色斑块莨菪葶含量显著高于云烟９７和朱砂烟ꎮ上部烟叶中ꎬ云烟９７㊁朱砂烟和红色斑块的绿原酸含量差异显著ꎬ红色斑块绿原酸含量显著高于朱砂烟和云烟９７ꎬ云烟９７含量最低ꎮ红色斑块莨菪葶含量最高ꎬ显著高于云烟９７和朱砂烟ꎬ云烟９７莨菪葶含量最低ꎬ但与朱砂烟不存在显著差异ꎮ红色斑块芸香苷含量最高ꎬ与云烟９７差异显著ꎬ朱砂烟与云烟９７㊁红色斑块间均差异不显著ꎮ㊀㊀表２㊀不同烤烟样品主要多酚类物质含量(ｍｇ/ｇ)部位样品绿原酸莨菪葶芸香苷总量云烟９７１０.６１ʃ０.６０ｃ１.４６ʃ０.０５ｂ７.４６ʃ０.３９ｃ１９.５８ʃ１.１０ｃ中部叶朱砂烟１１.８４ʃ０.５２ｂ１.５７ʃ０.１５ｂ８.４８ʃ０.３６ｂ２３.２４ʃ０.６５ｂ红色斑块１２.８９ʃ０.８３ａ１.８９ʃ０.２２ａ９.１３ʃ０.５１ａ２５.８１ʃ１.１７ａ云烟９７１０.６５ʃ０.９５ｃ１.９５ʃ０.０９ｂ７.９２ʃ０.４７ｂ２０.４８ʃ１.１０ｃ上部叶朱砂烟１３.１８ʃ０.３５ｂ２.１５ʃ０.０９ｂ８.５５ʃ０.４０ａｂ２５.１４ʃ０.４７ｂ红色斑块１４.７９ʃ０.６６ａ２.４１ʃ０.２４ａ９.２６ʃ０.５２ａ２９.０７ʃ１.００ａ２.３㊀不同烤烟样品黄酮类物质总量比较通过全光谱扫描ꎬ确定黄酮类物质的反应体系在５１０ｎｍ处吸光度最大ꎬ因此使用紫外分光光度计检测此处样品中的黄酮类物质含量ꎮ以芦丁为标准品建立标准曲线:ｙ＝１２ｘ＋０.００４６ꎬＲ２＝０.９９９２ꎮ由表３可知ꎬ同部位烟叶之间黄酮类物质总量存在显著性差异ꎬ且云烟９７含量均最低ꎮ中部烟样中ꎬ相比于云烟９７ꎬ红色斑块黄酮类物质总量高出９.０７％ꎬ朱砂烟含量显著低于红色斑块ꎮ上部烟样中ꎬ云烟９７黄酮类物质总量最低ꎬ朱砂烟和红色斑块含量比云烟９７分别高出６.４５％㊁１０.３７％ꎬ红色斑块黄酮类物质总量处于最高水平ꎮ０８㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀山东农业科学㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀第５５卷㊀㊀㊀表３㊀不同烤烟样品黄酮类物质总量(ｍｇ/ｇ)部位样品含量云烟９７５６.１６ʃ０.５３ｃ中部叶朱砂烟５８.０１ʃ０.８７ｂ红色斑块６１.２５ʃ０.６９ａ云烟９７６１.３７ʃ１.００ｃ上部叶朱砂烟６５.３２ʃ０.８７ｂ红色斑块６７.７３ʃ０.５３ａ２.４㊀不同烤烟样品烟气中挥发性酚类物质含量比较酚类化合物是卷烟主流烟气的主要组分之一ꎬ与卷烟的安全性和感官品质密切相关ꎮ由表４可知ꎬ同部位不同烤烟烟气中挥发性酚类物质总量差异较大ꎬ上部叶明显高于中部叶ꎬ朱砂烟上部叶该类总量最大ꎬ且其各酚类物质含量大多高于云烟９７ꎮ朱砂烟卷烟样品烟气中的苯酚㊁对苯二酚含量较高ꎮ２.５㊀不同烤烟样品卷烟感官质量评价由表５可知ꎬ朱砂烟中㊁上部烟叶各感官质量评价指标均优于云烟９７ꎬ其香气质和香气量较好ꎬ余味舒适ꎬ刺激性稍有ꎬ劲头较低ꎬ燃烧性中等ꎬ灰分灰白ꎬ杂气较轻ꎮ同部位同等级烟叶中ꎬ朱砂烟叶感官质量综合评分较高ꎮ㊀㊀表４㊀不同烤烟样品烟气中挥发性酚类物质含量(μｇ/ｇ)酚类化合物中部叶云烟９７朱砂烟上部叶云烟９７朱砂烟苯酚０.０７２９０.１０８４０.０８８００.１３６５对甲酚０.０４３３０.０７２２０.０７９００.１０３１邻甲酚０.０６８５０.０４５４０.０５４００.０４８８间甲酚０.０４４４０.０５１４０.０５７２０.０６４１邻苯二酚０.１４９１０.１４４６０.１５６００.１０７７４－甲基邻苯二酚０.０２７７０.０２９２０.０３３７０.０３５９对苯二酚０.１９５２０.１８１２０.２１５７０.２２３６２－甲基间苯二酚０.０４４１０.０３５８０.０３０３０.０１９５４－乙基间苯二酚０.０３１７０.０４６７０.０３８５０.０５２６４－(２－烯丙基)－邻苯二酚０.０７９５０.０８８３０.０８８７０.１３５８２－乙基苯酚０.０３７９０.０４３５０.０４５００.０５０８４－乙烯基苯酚０.０９２６０.０９６２０.１１１９０.１２１１对乙烯基愈创木酚０.０３１２０.０４９５０.０４４００.０５３９２ꎬ５－二叔丁基酚０.０２５２０.０２５３０.０３７７０.０４１０总量０.９４３３１.０１７６１.０７９７１.１９４５㊀㊀表５㊀不同烤烟样品卷烟感官质量评价结果(分)部位样品香气质香气量浓度刺激性杂气劲头余味燃烧性灰分总计中部叶云烟９７５.０６５.１４５.１９５.５３４.８１５.４７５.３１７.００７.００５０.８３朱砂烟５.７８５.８１５.３１５.２８５.０３５.３１５.６４７.００７.００５２.１４上部叶云烟９７５.０８５.１７５.４７５.６４４.８９５.６１５.５３７.００７.００５１.３９朱砂烟６.００５.９４５.６９５.４４５.１７５.５３５.７２７.００７.００５３.５０３㊀讨论３.１㊀福林－酚法优化酚类物质结构上含有酚羟基ꎬ呈酸性或弱酸性ꎬ不溶于水ꎬ而碳酸钠溶液呈弱碱性ꎬ因此需要控制碳酸钠溶液用量及浓度ꎬ既能使其充分反应ꎬ又可以避免反应体系的不平衡ꎻ碳酸钠溶液受温度影响较大ꎬ温度较低时会析出结晶㊁引起试验误差ꎻ多酚类物质受热易分解ꎬ会导致测定结果偏低ꎬ因此要控制合适的温度ꎻ显色３０~４０ｍｉｎ时ꎬ吸光度均已达到稳定ꎮ通过对１０％碳酸钠溶液用量㊁福林－酚用量㊁反应温度和反应时间的探索优化ꎬ确定福林－酚法测定条件的最优组合为:１０％碳酸钠溶液用量４.０ｍＬ㊁福林－酚用量２.０ｍＬ㊁反应温度２５ħ㊁显色时间４０ｍｉｎꎬ这样总酚的测定结果更加准确ꎮ３.２㊀朱砂烟和普通烤烟酚类物质含量差异分析本研究结果表明ꎬ不同烤烟样品之间总酚类物质含量存在显著性差异ꎻ同部位烤烟中ꎬ朱砂烟叶上红色斑块处总酚类物质含量最高ꎬ云烟９７略低于朱砂烟ꎮ不同烤烟样品间中部叶烤烟主要多酚类物质含量差异较大ꎬ绿原酸㊁芸香苷含量均差异显著ꎮ整体上朱砂烟叶主要多酚类物质含量相对较高ꎬ尤其是朱砂烟叶上红色斑块处ꎮ烟叶调制过程中ꎬ酚类物质发生酶促和非酶促反应形成分子量较大的黄色㊁红色以至棕褐色色素ꎬ影响烟叶的色泽[２０]ꎬ这与朱砂烟独特的色泽有极大关系ꎮ上部叶烤烟中ꎬ不同烤烟样品间绿原酸含量均有显著性差异ꎮ绿原酸是改善烟叶品质最主要的多酚类物质[１０]ꎮ朱砂烟与云烟９７的芸香苷和莨菪葶含量不存在显著性差异ꎬ与红色斑块的芸香苷含量也没有显著性差异ꎬ与其莨菪葶含量相比显著减少ꎮ黄酮类物质为烤烟香气的前体物质之一[９]ꎮ本研究表明ꎬ不同烤烟样品黄酮类物质含量存在１８㊀第５期㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀齐奎元ꎬ等:朱砂烟和普通烤烟烟叶酚类物质差异分析显著性差异ꎻ同部位烤烟样品中朱砂烟叶黄酮类化合物含量较高ꎬ显著高于云烟９７ꎬ显著低于红色斑块ꎮ朱砂烟叶特征性红色斑块的黄酮类物质含量和酚类物质含量最高ꎬ其形成原因可能是烟叶中酚类物质氧化成醌类或其它呈红色的物质ꎬ也可能是黄酮类物质在氧化或调制㊁纯化过程中形成的某种物质ꎮ３.３㊀不同烤烟样品烟气中挥发性酚类物质含量差异分析烟叶中酚类物质在卷烟抽吸时直接进入烟气的量很少ꎬ烟气中酚类物质主要来源于烟叶中多酚类物质的裂解ꎻ卷烟制品抽吸时会发生酸性反应ꎬ中和部分碱性ꎬ使吃味醇和ꎬ对卷烟制品的抽吸品质起着重要作用[２１]ꎬ如２ꎬ６－二甲基苯酚具有增甜和增香的效果ꎬ苯酚具有甜味和药物气味ꎮ本试验通过ＧＣ－ＭＳ对烟草制品进行分析ꎬ结果显示ꎬ同部位卷烟样品中ꎬ朱砂烟的挥发性酚类物质总量较高ꎮ挥发性酚类物质大都具有酚香气ꎬ一些简单酚对烟气香吃味产生愉快的影响ꎬ其中苯酚㊁乙基酚㊁对乙烯基愈创木酚㊁２ꎬ５－二叔丁基苯酚对卷烟香气和吃味有较好影响ꎬ而朱砂烟中这些挥发性酚类物质含量均较高ꎬ这将赋予朱砂烟独特的香气质㊁充足的香气量和较好的吃味ꎮ３.４㊀烤烟样品感官质量分析烤烟感官质量与酚类物质相关ꎬ酚类物质在卷烟燃烧时ꎬ通过热裂解㊁中和等反应ꎬ使吃味更加醇和ꎮ有研究表明ꎬ多酚类物质尤其是绿原酸ꎬ是改善烟草吸食品质的重要因素之一ꎬ与香气质和香气量呈显著正相关[２２ꎬ２３]ꎮ朱砂烟叶中酚类物质尤其是绿原酸含量较高ꎬ赋予其丰满的香气质和充足的香气量ꎮ焦天雷等[２４]研究表明ꎬ相比于普通烤烟ꎬ香气物质含量高可能是朱砂烟风味特征的物质基础ꎮ对烟草制品进行感官质量评价表明ꎬ朱砂烟叶整体质量较高ꎬ其卷烟香气质较好㊁香气量较足㊁吃味更加醇和ꎬ这与前人研究结果具有较高的一致性[２５]ꎮ４㊀结论本研究确定的福林－酚法测定烟叶总酚含量的最优条件为:样品用量０.５ｍＬꎬ福林－酚试剂用量２.０ｍＬꎬ充分混合后再加入１０％碳酸钠溶液４.０ｍＬꎬ２５ħ下避光放置４０ｍｉｎꎬ之后在７６０ｎｍ波长下测定样品中总酚类物质含量ꎮ朱砂烟总酚类物质㊁主要多酚类物质和黄酮类物质含量较高ꎬ且与云烟９７普通烟叶之间大多差异显著ꎬ品质较高ꎮ不同烤烟样品卷烟的挥发性酚类物质含量差异较大ꎬ朱砂烟各挥发性酚类物质含量较高ꎬ具有较好的香气质和吃味ꎬ香气量较足ꎮ整体上看ꎬ朱砂烟较优ꎮ参㊀考㊀文㊀献:[１]㊀ＰｅｎｎＰＴꎬＳｔｅｐｈｅｎｓＲＬꎬＷｅｙｂｒｅｗＪＡ.Ｔｈｅｉｎｖｉｔｒｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓｏｆａｃｈｅｒｒｙｒｅｄｐｉｇｍｅｎｔ [Ｊ].ＴｏｂａｃｃｏＳｃｉｅｎｃｅꎬ１９５８ꎬ２:１０２－１０５.[２]㊀ＷｅｅｋｓＷＷꎬＣａｍｐｏｓＭＰꎬＭｏｌｄｏｖｅａｎｕＳ.Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌａｎｄｍｏｄｅｌｃｈｅｍｉｃａｌｒｅａｃｔｉｏｎｓｆｏｒｔｈｅｂａｓｉｓｏｆｒｅｄｐｉｇｍｅｎｔｉｎｆｌｕｅ￣ｃｕｒｅｄｔｏ￣ｂａｃｃｏ[Ｊ].ＪｏｕｒｎａｌｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌａｎｄＦｏｏｄＣｈｅｍｉｓｔｒｙꎬ１９９３ꎬ４１(８):１３２１－１３２８.[３]㊀ＷｅｅｋｓＷＷꎬＣａｍｐｏｓＭＰꎬＭｏｌｄｏｖｅａｎｕＳ.Ｐｙｒｏｌｙｓｉｓｏｆｃｈｅｒｒｙｒｅｄｔｏｂａｃｃｏａｎｄ１￣ｄｅｏｘｙ￣１￣[(Ｓ)￣２￣(３￣ｐｙｒｉｄｙｌ)￣１￣ｐｙｒｒｏｌｉｄｉ￣ｎｙｌ]￣.ｂｅｔａ.￣Ｄ￣ｆｒｕｃｔｏｓｅ(ｐｙｒａｎｏｓｅａｎｄｆｕｒａｎｏｓｅｉｓｏｍｅｒｓ)ａｍａ￣ｄｏｒｉｐｒｏｄｕｃｔｓｏｆｃｈｅｒｒｙｒｅｄｔｏｂａｃｃｏ[Ｊ].ＪｏｕｒｎａｌｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌａｎｄＦｏｏｄＣｈｅｍｉｓｔｒｙꎬ１９９５ꎬ４３(８):２２４７－２２５３. [４]㊀王爱华.烤烟生长和调制过程中主要多酚类物质代谢动态的研究[Ｄ].郑州:河南农业大学ꎬ２００５.[５]㊀刘静ꎬ侯英ꎬ杨蕾ꎬ等.烟草中多酚热裂解产物研究[Ｊ].化学研究与应用ꎬ２０１１ꎬ２３(１):６３－６５.[６]㊀何志勇.橄榄酚类化合物的分离纯化和结构研究[Ｄ].无锡:江南大学ꎬ２００７.[７]㊀白长敏ꎬ钟科军ꎬ许燕娟ꎬ等.烟草中多酚类物质的指纹图谱及相对含量测定的方法研究[Ｃ]//第十五次全国色谱学术报告会文集(下册).２００５:２８７－２８８.[８]㊀谷风林.酪蛋白美拉德产物的制备㊁性质及在烟草中的应用研究[Ｄ].无锡:江南大学ꎬ２０１０.[９]㊀于存峰ꎬ张峻松ꎬ闫洪洋ꎬ等.烟草中多酚类化合物研究进展[Ｊ].河南农业科学ꎬ２００８(４):１０－１４.[１０]李丛民.植物多酚对烟草制品品质的影响[Ｊ].烟草科技ꎬ２０００(１):２７－２８.[１１]钟庆辉.烟草芳香吃味化学成分指标的探索[Ｊ].烟草科技ꎬ１９８１(４):２１－２３.[１２]张秋芳ꎬ刘奕平ꎬ刘波ꎬ等.烟草主要酚类物质研究进展[Ｊ].福建农业学报ꎬ２００６ꎬ２１(２):１５８－１６３.[１３]曹建敏ꎬ邱军ꎬ杨德廉ꎬ等.不同等级烤烟多酚含量及其规律性分析[Ｊ].中国烟草科学ꎬ２００９ꎬ３０(６):２１－２４. [１４]李富强ꎬ宫长荣ꎬ宋朝鹏ꎬ等.河南浓香型烤烟与进口烟叶的内在品质比较[Ｊ].浙江农业科学ꎬ２００８(６):７８０－７８３. [１５]吕作新ꎬ刘好宝ꎬ刘彩萍ꎬ等.烟叶烘烤过程中的酶促棕色化反应及其调控途径[Ｊ].中国烟草科学ꎬ１９９７ꎬ１８(２):１９－２１.[１６]王治同ꎬ梁瑞ꎬ南海龙.福林－酚法测定成熟期左优红浆果中的总酚含量[Ｊ].食品工业ꎬ２０１８ꎬ３９(８):２８１－２８４. [１７]陈爱洋ꎬ万端极ꎬ汪淑廉ꎬ等.洋葱中总黄酮含量测定方法２８㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀山东农业科学㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀第５５卷㊀的比较研究[Ｊ].食品科技ꎬ２０１６ꎬ４１(８):２７６－２７９. [１８]李巨秀ꎬ王柏玉.福林－酚比色法测定桑椹中总多酚[Ｊ].食品科学ꎬ２００９ꎬ３０(１８):２９２－２９５.[１９]詹莉莉ꎬ章程辉ꎬ常刚ꎬ等.福林酚比色法测定露兜簕果实中的总多酚[Ｊ].广东农业科学ꎬ２０１３ꎬ４０(４):７７－８０. [２０]阎新甫ꎬ韩锦锋.烟草多酚类化合物的研究进展[Ｊ].华北农学报ꎬ１９８７ꎬ２(２):３１－３８.[２１]周恒ꎬ许自成ꎬ赵会纳ꎬ等.烟草多酚类物质的研究进展[Ｊ].浙江农业科学ꎬ２００９(５):９４９－９５３ꎬ９５５.[２２]龙章德ꎬ林顺顺ꎬ田兆福ꎬ等.烟草多酚类化合物对卷烟品质的影响[Ｊ].食品与机械ꎬ２０１３ꎬ２９(６):４１－４４. [２３]沈建平ꎬ陈乾锦ꎬ李小龙ꎬ等.烟叶多酚含量的品种间差异及其与感官质量的关系[Ｊ].中国烟草科学ꎬ２０２１ꎬ４２(４):７３－７７.[２４]焦天雷ꎬ朱杰ꎬ和智君ꎬ等.硃砂烟叶的化学成分分析[Ｊ].中国食品工业ꎬ２０２２(１２):１１５－１１９.[２５]刘哲ꎬ张凤梅ꎬ刘志华ꎬ等.朱砂烟叶和普通烟叶香气成分的ＨＳ－ＳＰＭＥ－ＧＣ/ＭＳ对比分析和感官差异[Ｊ].烟草科技ꎬ２０２０ꎬ５３(７):５４－６１.３８㊀第５期㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀齐奎元ꎬ等:朱砂烟和普通烤烟烟叶酚类物质差异分析。

芦丁在大鼠体内的代谢产物鉴定与代谢途径分析

山东科学ＳＨＡＮＤＯＮＧＳＣＩＥＮＣＥ第３６卷第５期２０２３年１０月出版Ｖｏｌ.３６Ｎｏ.５Ｏｃｔ.２０２３收稿日期:２０２２￣１０￣１９基金项目:国家自然科学基金面上项目(８１４７３５５８)ꎻ山东省自然科学基金(ＺＲ２０２１０２２７０１６７)ꎻ国家科技重大专项(重大新药创制)(ＳＱ２０１７ＺＸ０９１０６４)ꎻ山东省自然科学基金重点项目(ＺＲ２０２０ＺＤ１７)ꎻ山东省医药卫生科技发展计划(２０２１０５０１０４６７)作者简介:王常瞵(１９９６ )ꎬ男ꎬ研究方向为肝藏象病理生理与情志致病机理研究ꎮＥ￣ｍａｉｌ:ｗｃｌ１９９６０１２５＠ｏｕｔｌｏｏｋ.ｃｏｍ∗通信作者ꎬ王杰琼ꎬ女ꎬ副教授ꎬ研究方向为情志病症发病机理及调肝方药药理研究ꎮＥ￣ｍａｉｌ:ｊｉｅｑｉｏｎｇ２０１６＠１２６.ｃｏｍ乔明琦ꎬ男ꎬ教授ꎬ研究方向为肝藏象生理病理与情志致病机制研究ꎮＥ￣ｍａｉｌ:ｑｍｉｎｇｑｉ＠ｓｄｕｔｃｍ.ｃｏｍ芦丁在大鼠体内的代谢产物鉴定与代谢途径分析王常瞵ａꎬ高明周ｂꎬ郭英慧ａꎬ孙亚ｂꎬ于小钧ｃꎬ闫志ｃꎬ王杰琼ｃ∗ꎬ乔明琦ａ∗(山东中医药大学ａ.中医学院ꎻｂ.中医药创新研究院ꎻｃ.药学院ꎬ山东济南２５０３５５)摘要:分析大鼠口服芦丁后血浆㊁尿液和粪便中的代谢产物并评价芦丁在大鼠体内的代谢途径ꎮ大鼠灌胃给予２５０ｍｇ/ｋｇ芦丁后ꎬ采集血浆㊁尿液和粪便ꎬ以固相萃取法处理生物样品ꎬ利用超高效液相色谱￣四级杆￣静电场轨道阱质谱ꎬ以０.０５％甲酸水(Ａ)－０.０５％甲酸乙腈(Ｂ)为流动相梯度洗脱ꎬ分别在正㊁负离子模式下采集各样品数据ꎬ通过高分辨提取离子流图和平行反应监测模式ꎬ结合色谱保留时间㊁质量测量㊁诊断离子等确定芦丁的代谢物并探究芦丁在大鼠体内的代谢途径ꎮ在正㊁负离子模式下共检测和鉴定了２９种芦丁代谢产物ꎬ其主要代谢途径为甲基化㊁葡萄糖醛酸化㊁硫酸酯化及其复合反应等ꎮ建立了芦丁的整体代谢图谱ꎬ为其进一步的药效学评价及开发利用提供了参考依据ꎬ同时也为药物代谢鉴定研究提供了一种综合研究方法ꎮ关键词:芦丁ꎻ超高效液相色谱－四级杆－静电场轨道阱质谱ꎻ代谢产物ꎻ代谢途径中图分类号:Ｒ２８５㊀㊀㊀文献标志码:Ａ㊀㊀㊀文章编号:１００２￣４０２６(２０２３)０５￣０００９￣０８开放科学(资源服务)标志码(ＯＳＩＤ):ＩｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｒｕｔｉｎｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓａｎｄａｎａｌｙｓｉｓｏｆｒｕｔｉｎｍｅｔａｂｏｌｉｃｐａｔｈｗａｙｉｎｒａｔｓＷＡＮＧＣｈａｎｇｌｉｎａꎬＧＡＯＭｉｎｇｚｈｏｕｂꎬＧＵＯＹｉｎｇｈｕｉａꎬＳＵＮＹａｂꎬＹＵＸｉａｏｊｕｎｃꎬＹＡＮＺｈｉｃꎬＷＡＮＧＪｉｅｑｉｏｎｇｃ∗ꎬＱＩＡＯＭｉｎｇｑｉａ∗(ａ.ＳｃｈｏｏｌｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅꎻｂ.ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅＩｎｎｏｖａｔｉｏｎꎻｃ.ＳｃｈｏｏｌｏｆＰｈａｒｍａｃｙꎬＳｈａｎｄｏｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅꎬＪｉｎａｎ２５０３５５ꎬＣｈｉｎａ)ＡｂｓｔｒａｃｔʒＨｅｒｅｉｎꎬｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓｉｎｐｌａｓｍａꎬｕｒｉｎｅａｎｄｆｅｃｅｓｏｆｒａｔｓｗｅｒｅａｎａｌｙｚｅｄａｆｔｅｒｏｒａｌａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎｏｆｒｕｔｉｎａｎｄｔｈｅｍｅｔａｂｏｌｉｃｐａｔｈｗａｙｏｆｒｕｔｉｎｗａｓｅｖａｌｕａｔｅｄ.Ａｆｔｅｒｉｎｔｒａｇａｓｔｒｉｃａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎｏｆ２５０ｍｇ/ｋｇｒｕｔｉｎꎬｐｌａｓｍａꎬｕｒｉｎｅꎬａｎｄｆｅｃｅｓｗｅｒｅｃｏｌｌｅｃｔｅｄａｎｄｔｒｅａｔｅｄｖｉａｓｏｌｉｄｐｈａｓｅｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ.Ｕｌｔｒａ￣ｈｉｇｈｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｌｉｑｕｉｄｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ￣ＱＥｘａｃｔｉｖｅｈｙｂｒｉｄｑｕａｄｒｕｐｏｌｅ￣ｏｒｂｉｔｒａｐｍａｓｓｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ(ＵＰＬＣ￣Ｑ￣ＯｒｂｉｔｒａｐＭＳ)ｗａｓｕｓｅｄｗｉｔｈ０.０５％ｆｏｒｍｉｃａｃｉｄｗａｔｅｒ(Ａ)￣０.０５％ｆｏｒｍｉｃａｃｉｄａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ(Ｂ)ａｓｍｏｂｉｌｅｐｈａｓｅｇｒａｄｉｅｎｔｅｌｕｔｉｏｎ.Ｔｈｅｓａｍｐｌｅｄａｔａｗｅｒｅｃｏｌｌｅｃｔｅｄｉｎｐｏｓｉｔｉｖｅ￣ａｎｄｎｅｇａｔｉｖｅ￣ｉｏｎｍｏｄｅｓ.Ｔｈｅｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓａｎｄｍｅｔａｂｏｌｉｃｐａｔｈｗａｙｏｆｒｕｔｉｎｉｎｒａｔｓｗｅｒｅｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｖｉａｈｉｇｈｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｉｏｎｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙｉｎｔｈｅｐａｒａｌｌｅｌｒｅａｃｔｉｏｎｍｏｎｉｔｏｒｉｎｇｍｏｄｅꎬｃｏｍｂｉｎｅｄｗｉｔｈｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃｒｅｔｅｎｔｉｏｎｔｉｍｅꎬａｃｃｕｒａｔｅｍａｓｓｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔａｎｄｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｉｏｎｓ.Ｔｗｅｎｔｙ￣ｎｉｎｅｒｕｔｉｎｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓｗｅｒｅｄｅｔｅｃｔｅｄａｎｄｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄｉｎｐｏｓｉｔｉｖｅａｎｄｎｅｇａｔｉｖｅｉｏｎｍｏｄｅｓꎬａｎｄｔｈｅｉｒｍａｉｎｍｅｔａｂｏｌｉｃｐａｔｈｗａｙｓｗｅｒｅｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎꎬｇｌｕｃｕｒｏｎｉｄａｔｉｏｎꎬｓｕｌｆａｔｉｏｎａｎｄｔｈｅｉｒｃｏｍｐｏｕｎｄｒｅａｃｔｉｏｎ.Ｔｈｅｓｔｕｄｙｐｒｏｖｉｄｅｄｔｈｅｏｖｅｒａｌｌｍｅｔａｂｏｌｉｃｐｒｏｆｉｌｅｏｆｒｕｔｉｎꎬｗｈｉｃｈｗｉｌｌｐｒｏｖｉｄｅａｒｅｆｅｒｅｎｃｅｆｏｒｆｕｒｔｈｅｒｐｈａｒｍａｃｏｄｙｎａｍｉｃｅｖａｌｕａｔｉｏｎꎬｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔꎬａｎｄｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎｉｎｔｈｅｆｕｔｕｒｅａｎｄｏｆｆｅｒａｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅｒｅｓｅａｒｃｈｍｅｔｈｏｄｆｏｒｄｒｕｇｍｅｔａｂｏｌｉｓｍｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ.ＫｅｙｗｏｒｄｓʒｒｕｔｉｎꎻＵＰＬＣ￣Ｑ￣ＯｒｂｉｔｒａｐＭＳꎻｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓꎻｍｅｔａｂｏｌｉｃｐａｔｈｗａｙｓ㊀㊀芦丁又称为芸香苷ꎬ是一种天然的黄酮苷ꎬ广泛分布于自然界ꎬ尤以豆科植物的槐米㊁芸香科植物的芸香草等含量较高ꎬ常作为提取芦丁的原料[１]ꎮ芦丁具抗氧化㊁止血㊁抗癌㊁抗炎㊁抗菌㊁神经保护等多种药理活性[２￣３]ꎬ在治疗糖尿病㊁低脂血症和各种肿瘤方面也显示出优势[４￣５]ꎮ芦丁在肠道中吸收较差ꎬ但口服后可被肠道菌群大量降解[６]ꎮ基于这一事实ꎬ我们推测芦丁在体内代谢ꎬ主要以代谢物的形式产生多种生物活性ꎮ代谢物的某些活性可能高于母体化合物ꎬ如研究发现芦丁代谢产物比母体化合物具有更强的抗血小板活性和细胞毒作用[７]ꎮ可以肯定的是ꎬ代谢产物在发挥药理作用中起着重要的作用ꎮ周鹏飞等[８]通过体外实验观察人肠道菌群对芦丁代谢的情况ꎬ认为可能的代谢途径有两种:一种是糖苷键断裂转化为槲皮素ꎬ槲皮素经代谢转化为其他成分ꎻ另一种是不经槲皮素直接转化为其他物质ꎬ这不足以解释芦丁在体内的全面代谢及其相应的代谢途径研究ꎮ伍明江等[９]采用ＵＰＬＣ￣Ｑ￣ＴＯＦ￣ＭＳ/ＭＳꎬ在负离子模式下从大鼠血液㊁尿液㊁粪便和胆汁中发现了一定数量的芦丁代谢物ꎬ但缺乏样品正离子模式的采集ꎮ而本研究采用超高效液相色谱￣四级杆￣静电场轨道阱质谱(ＵＰＬＣ￣Ｑ￣ＯｒｂｉｔｒａｐＭＳ)在正㊁负离子模式下对样品进行采集ꎬ并使用４~５个诊断碎片对体内代谢物进行鉴定ꎬ从而增加分析的准确性ꎮ在样品处理方面ꎬ目前大多数研究采用有机溶剂沉淀法[１０￣１１]ꎬ而本研究使用固相萃取柱分离纯化样品ꎮ研究表明固相萃取材料在用于去除污染物时是极好的[１２]ꎬ样品经固相萃取柱分离后ꎬ可避免后续色谱柱堵塞和污染ꎬ能够更好地保护色谱柱[１３]ꎮ近年来ꎬ超高效液相色谱￣高分辨质谱联用(ＵＰＬＣ￣ＨＲＭＳ)技术成功地应用于对未知化合物的代谢研究[１４]ꎮ与其他检测仪器相比ꎬＵＰＬＣ￣ＨＲＭＳ具有分辨率高㊁质量精度高㊁质量范围宽㊁动态范围广等特点ꎬ在梓醇㊁欧前胡素等中药有效成分体内代谢过程分析中发挥着重要的作用[１５￣１６]ꎮ本文采用ＵＰＬＣ￣Ｑ￣ＯｒｂｉｔｒａｐＭＳ系统分析了大鼠血液㊁尿液和粪便中芦丁的代谢产物ꎬ探究芦丁在大鼠体内的代谢途径ꎬ以期扩大含芦丁类药物的开发利用ꎬ并为相关中药的体内代谢研究提供依据ꎮ１㊀仪器与材料１.１㊀实验仪器Ｕｌｔｉｍａｔｅ３０００￣Ｑ￣Ｅｘａｃｔｉｖｅ静电场轨道阱液质联用仪(美国ＴｈｅｒｍｏＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃ公司)ꎻＴＴＬ￣ＤＣＩ氮吹仪(北京同泰联科技发展有限公司)ꎻＳＰＥＣ１８固相萃取柱(６７ｍｇ/ｍＬꎬ泰州市康之达实验器材有限公司)ꎻＸＳ１０５十万分之一电子天平(瑞士ＭｅｔｔｌｅｒＴｏｌｅｄｏ公司)ꎮ１.２㊀实验材料芦丁(批号ＧＲ￣１３７￣２０２００５ꎬ纯度ȡ９８.０％ꎬ南京广润生物制品有限公司)ꎻ乙腈和甲醇(质谱级ꎬ美国ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ公司)ꎻ甲酸(色谱级ꎬ德国Ｍｅｒｃｋ公司)ꎮ１.３㊀实验动物本研究所用动物为ＳＰＦ级健康雄性ＳＤ大鼠ꎬ共８只ꎬ体质量为１８０~２２０ｇꎬ由北京维通利华实验动物技术有限公司提供ꎬ生产许可证号为ＳＣＸＫ(京)２０２１￣００１１ꎮ２㊀实验方法２.１㊀溶液的制备对照品溶液的制备:精密称取芦丁对照品２ｍｇ于１０ｍＬ容量品中ꎬ加适量甲醇超声使其溶解ꎬ甲醇定容至刻度ꎬ过０.２２μｍ微孔滤膜ꎬ即得ꎮ给药样品溶液的制备:精密称取芦丁对照品２５０ｍｇꎬ加入１０ｍＬ０.５％的羧甲基纤维素钠(ＣＭＣ￣Ｎａ)溶液配置成混悬液ꎬ即得ꎮ２.２㊀动物实验所有大鼠适应性喂养７ｄ后ꎬ将其随机分为空白组和药物组ꎬ每组４只ꎮ实验前禁食１２ｈꎬ自由饮水ꎮ药物组大鼠按２５０ｍｇ/ｋｇ剂量进行灌胃ꎬ空白组大鼠给予０.５％ＣＭＣ￣Ｎａ溶液(２ｍＬ)[１５]ꎮ２.３㊀样品收集与制备分别于给药后０.５㊁１㊁２㊁４ｈ从大鼠眼眶静脉丛取血０.５ｍＬꎬ置于肝素钠抗凝的ＥＰ管中ꎬ混合均匀ꎬ每个样品以３５００ｒ/ｍｉｎ离心１５ｍｉｎꎬ各组分别合并不同时间点所得的上清液ꎬ即得血浆样品ꎮ同时收集两组大鼠０~２４ｈ的尿样ꎬ３５００ｒ/ｍｉｎ离心１５ｍｉｎ后取上清液ꎬ即得尿液样品ꎻ收集两组大鼠０~２４ｈ的粪便ꎬ自然晾干后碾碎ꎬ装于离心管中ꎬ即得粪便样品[１７]ꎮ采用固相萃取法对所有生物样品进行前处理ꎮ血浆和尿液样品分别加入预先使用甲醇和去离子水处理过的固相萃取柱中ꎬ然后用去离子水(３ｍＬ)和甲醇(３ｍＬ)依次洗涤固相萃取柱(ＳｏｌｉｄＰｈａｓｅＥｘｔｒａｃｔｉｏｎＣｏｌｕｍｎꎬ简称ＳＰＥ柱)ꎬ收集甲醇洗脱液ꎬ在氮气中室温干燥ꎮ残留物用８０μＬ１０％乙腈重新涡旋溶解ꎬ离心３０ｍｉｎ(１３５００ｒ/ｍｉｎꎬ４ħ)ꎬ将得到的上清液用于后续分析ꎮ与此同时ꎬ取已干燥粉碎的粪便样品１.０ｇꎬ用去离子水(５.０ｍＬ)超声提取１５ｍｉｎ后过滤ꎬ将上清液加入经过处理的固相萃取柱中ꎬ然后进行上述相同的操作ꎬ得到的上清液用于进一步的仪器分析[１８]ꎮ２.４㊀液质联用分析条件色谱条件:ＷａｔｅｒｓＡＣＱＵＩＴＹＵＰＬＣＢＥＨＣ１８色谱柱(１００ｍｍˑ２.１ｍｍꎬ１.７μｍ)ꎬ流速０.３ｍＬ/ｍｉｎꎬ柱温３５ħꎻ进样量５μＬꎮ流动相为含０.０５％甲酸的水(Ａ)和含０.０５％甲酸的乙腈(Ｂ)ꎬ梯度洗脱条件为:０~１ｍｉｎꎬ５％Ｂꎻ１~３ｍｉｎꎬ５％~４０％Ｂꎻ３~１３ｍｉｎꎬ４０％~６５％Ｂꎻ１３~１９ｍｉｎꎬ６５％~９５％Ｂꎻ１９~２１ｍｉｎꎬ９５％Ｂꎻ２１~２３ｍｉｎꎬ９５％~５％Ｂꎮ质谱条件:检测模式为正离子和负离子模式ꎻ离子源参数为氮气(纯度ȡ９９.９９％)分别作为鞘气和辅助气体ꎬ流速分别为４５㊁１０ꎬ辅助气流量１０ｍＬ/ｍｉｎꎬ裂解电压为３.００ｋＶꎻ毛细管温度３５０ħꎬ离子传输管温度为３２０ħꎬ辅助器温度为３５０ħꎻ扫描模式:ＦｕｌｌＭＳ/ｄｄ￣ＭＳ２ꎻＦｕｌｌＭＳ分辨率为７００００ꎬｄｄ￣ＭＳ２分辨率１７５００ꎻ质谱质量扫描范围ｍ/ｚ８０~１２００ꎻ碰撞能１０㊁３０㊁５０ｅＶꎮ２.５㊀数据处理收集的数据集由ＴｈｅｒｍｏＸｃａｌｂｕｒ２.２工作站记录和处理ꎮ为了获得尽可能多的碎片离子ꎬ我们选择强度在１００００以上的信号峰来鉴定代谢物ꎮ通过设置参数:Ｃ[０￣３０]ꎬＨ[０￣３５]ꎬＯ[０￣２０]ꎬＳ[０￣５]和环不饱和双键数(ＲＤＢ)[０￣１５]ꎬ用公式预测器计算了选定峰的所有母离子的化学式的准确质量ꎮ准确的质量测量设置在(－５~５)ˑ１０－６的质量误差内ꎮ３㊀实验结果３.１㊀分析策略的建立本研究建立了一套系统有效的方法ꎬ用于快速分析ＳＤ大鼠口服给药后尿液㊁血浆和粪便中芦丁的代谢谱ꎮ当分辨率为７００００时ꎬ首先进行全质量扫描ꎮ然后将高分辨提取离子流图(ＨＲＥＩＣ)与平行反应监测模式(ＰＲＭ)相结合ꎬ在正㊁负离子模式下捕获原始数据中的芦丁代谢物ꎮ根据色谱保留时间㊁准确的质量测量㊁诊断离子(ＤＰＩｓ)等确定了芦丁的代谢物ꎮ最后ꎬ根据已鉴定的代谢物提出了芦丁的代谢途径[１６]ꎮ整个分析过程以简明的示意图显示在图１中ꎮ图１㊀芦丁代谢物检测和鉴定分析策略简图Ｆｉｇ.１㊀Ｓｕｍｍａｒｙｄｉａｇｒａｍｏｆｔｈｅａｎａｌｙｔｉｃａｌｓｔｒａｔｅｇｙｆｏｒｄｅｔｅｃｔｉｎｇａｎｄｉｄｅｎｔｉｆｙｉｎｇｒｕｔｉｎｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓ３.２㊀芦丁的裂解规律分析芦丁为黄酮苷类化合物ꎬ已有文献报道了该类化合物的质谱裂解规律[１９￣２０]ꎮ其主要质谱裂解途径为糖基的中性丢失形成苷元离子[２１]以及苷元离子丢失ＣＯ和发生Ｃ环的ＲＤＡ裂解[２２]ꎮ在负离子模式下ꎬ芦丁的准分子离子峰为ｍ/ｚ６０９.１４６４８[Ｍ－Ｈ]－ꎬ二级质谱图中可检测到碎片离子ｍ/ｚ３０１ꎬｍ/ｚ２７３ꎬｍ/ｚ１７９ꎬｍ/ｚ１５１ꎬｍ/ｚ１０７ꎬ见图２ꎮ芦丁可能的裂解途径见图３ꎮ芦丁的特征碎片离子为ｍ/ｚ３０１ꎬ其产生主要源于芸香糖基(Ｃ１２Ｈ２０Ｏ９)的中性丢失ꎮｍ/ｚ３０１进一步的碎片裂解途径主要包括丢失ＣＯ和ＲＤＡ裂解ꎬ从而产生ｍ/ｚ２７３[Ｍ－Ｈ－Ｃ１２Ｈ２０Ｏ９－ＣＯ]－㊁ｍ/ｚ１７９[Ｃ８Ｈ３Ｏ５]－㊁ｍ/ｚ１５１[Ｃ７Ｈ３Ｏ４]－㊁ｍ/ｚ１０７[Ｃ６Ｈ３Ｏ２]－等一系列碎片离子[２３]ꎮ图２㊀芦丁二级质谱图(负离子模式)Ｆｉｇ.２㊀ＥＳＩ￣ＭＳ２ｓｐｅｃｔｒｕｍｏｆｒｕｔｉｎ(ｎｅｇａｔｉｖｅ￣ｉｏｎｍｏｄｅ)图３㊀芦丁可能的裂解途径Ｆｉｇ.３㊀Ｐｏｓｓｉｂｌｅｍａｓｓｆｒａｇｍｅｎｔａｔｉｏｎｐａｔｈｗａｙｓｏｆｒｕｔｉｎ３.３㊀芦丁体内代谢产物分析采用Ｘｃａｌｉｂｕｒ软件分析空白组和给药组大鼠血浆㊁尿液㊁粪便中芦丁的代谢产物ꎬ通过两组间的数据对比ꎬ初步明确芦丁代谢物ꎮ根据化合物的实验分子量和理论分子量的误差((－５~５)ˑ１０－６)以及色谱保留时间ꎬ确定代谢产物的存在ꎮ同时ꎬ诊断离子可以从上述芦丁对照品的裂解模式中推断出来ꎮ例如ꎬ根据芦丁质谱图中的ｍ/ｚ６０９[Ｍ－Ｈ]－㊁ｍ/ｚ３０１[Ｍ－Ｈ－Ｃ１２Ｈ２０Ｏ９]－等位置的片段离子ꎬ推导出ｍ/ｚ６８９[ｍ/ｚ６０９＋ＳＯ３]－㊁ｍ/ｚ３８１[ｍ/ｚ３４３.０８＋ＳＯ３]－位置诊断离子的出现ꎬ初步证实了芦丁硫酸酯化产物的身份ꎮｍ/ｚ３０１[Ｍ－Ｈ－Ｃ１２Ｈ２０Ｏ９]－和ＲＤＡ裂解片段ｍ/ｚ１７９[Ｃ８Ｈ３Ｏ５]－㊁ｍ/ｚ１５１[Ｃ７Ｈ３Ｏ４]－可以用来进一步识别芦丁硫酸酯化产物ꎮ因此ꎬ在ｍ/ｚ６０９ʃｘꎬｍ/ｚ３０１ʃｘꎬｍ/ｚ３０１ꎬｍ/ｚ１５１ꎬｍ/ｚ１７９(ｘ为Ｏ(１６)ꎬＣＨ２(１４)ꎬＳＯ３(８０)等取代基分子量)处的产物离子可用于代谢物的鉴定ꎮ基于上述筛选和鉴别的研究思路ꎬ共鉴定了包括原型在内的２９个代谢产物ꎬ其中在血浆㊁尿液㊁粪便中分别检测到１１㊁２６㊁８个代谢产物ꎬ部分代谢产物见表１和表２(全表见ＯＳＩＤ科学数据与内容附表１~２)ꎮ表１㊀芦丁在大鼠体内可能的代谢产物信息Ｍ１Ｎ３.４９Ｃ２８Ｈ２７Ｏ１９６６７.１１４１０６６７.１１５４２２.７８３ˑ１０－６３１５(１００.００)ꎬ６６７(７１.９９)ꎬ４９１(５１.７４)ꎬ３０１(１７.５９)ꎬ１５１(０.６１)ꎬ１７９(０.５８)Ｍ２Ｎ３.５２Ｃ２７Ｈ２９Ｏ１９Ｓ６８９.１０１８２６８９.１０３５８１.０１５ˑ１０－６６８９(１００.００)ꎬ３０１(４２.８９)ꎬ３８１(３５.２８)ꎬ１７９(３.９６)ꎬ１５１(３.０７)Ｍ３Ｎ３.７９Ｃ２１Ｈ１７Ｏ１６Ｓ５５７.０２３１８５５７.０２３８００.８７３ˑ１０－６３０１(１００.００)ꎬ５５７(５０.７９)ꎬ４７７(１６.４６)ꎬ１５１(５.７６)ꎬ１７９(４.８９)Ｍ４Ｎ４.４１Ｃ１７Ｈ１３Ｏ７３２９.０６５５７３２９.０６３４０－４.６５０ˑ１０－６３２９(１００.００)ꎬ１６５(１.３３)ꎬ１２１(０.７３)Ｍ５Ｎ４.４６Ｃ１６Ｈ１１Ｏ１０Ｓ３９５.００６７４３９５.００７５４２.０１６ˑ１０－６３１５(１００.００)ꎬ３９５(４０.５２)ꎬ１５１(６.６９)ꎬ３０１(５.１７)表１(续)Ｍ６Ｎ４.６９Ｃ１８Ｈ１５Ｏ７３４３.０８１２２３４３.０８２８５３.４６８ˑ１０－６(０.２８)ꎬ１２１(０.１５)Ｍ７Ｎ６.０９Ｃ２９Ｈ３３Ｏ１６６３７.１７６３１６３７.１７７１６０.４２８ˑ１０－６３２９(１００.００)ꎬ６３７(４.６９)ꎬ１７９(１.５０)ꎬ２０７(０.５０)㊀㊀注:ｔＲ为保留时间ꎬＰ为正离子模式ꎬＮ为负离子模式ꎮ表２㊀大鼠尿㊁血浆和粪便中芦丁可能的代谢物的鉴定和化学结构Ｍ０芦丁＋＋＋Ｍ１甲基槲皮素二葡萄糖醛酸＋－－Ｍ２∗芦丁硫酸酯化产物－＋＋Ｍ３∗槲皮素葡萄糖醛酸的硫酸酯化产物＋－－Ｍ４∗二甲基槲皮素－＋－Ｍ５甲基槲皮素硫酸酯＋－－Ｍ６∗三甲基槲皮素＋－－Ｍ７∗二甲基芦丁＋＋－㊀㊀注:ｇｌｕＡ为葡萄糖醛酸ꎬ∗为新发现的可能的芦丁代谢物ꎮＭ７在正离子模式下产生准分子离子ｍ/ｚ６２５.１７７２９ꎬ保留时间为４.００ｍｉｎꎬ推测其分子式为Ｃ２８Ｈ３３Ｏ１６ꎬ误差为０.４５２ˑ１０－６ꎮ其分子式与芦丁相比多了一个亚甲基ꎬ在正离子模式下产生ｍ/ｚ３１７[Ｍ＋Ｈ－Ｃ１２Ｈ２０Ｏ９]＋的碎片ꎬ与芦丁丢失一个芸香糖基(Ｃ１２Ｈ２０Ｏ９)产生槲皮素的过程相同ꎬ推测Ｍ７为芦丁的甲基化产物ꎮ在此基础上ꎬＭ２６在负离子模式下的准分子离子分别为ｍ/ｚ６３７.１７７１６ꎬ推测其分子式为Ｃ２９Ｈ３３Ｏ１６ꎬ误差分别为０.４２８ˑ１０－６ꎬ其分子式与芦丁相比多了两个亚甲基ꎮ碎片离子ｍ/ｚ３２９[Ｍ－Ｈ－Ｃ１２Ｈ２０Ｏ９]－为丢失一个芸香糖基所致ꎬ结合黄酮类化合物ＲＤＡ裂解碎片ｍ/ｚ１７９[Ｃ７Ｈ３Ｏ４＋２ＣＨ２]－和ｍ/ｚ２０７[Ｃ８Ｈ３Ｏ５＋２ＣＨ２]－ꎬ推测该化合物为二甲基芦丁且两个甲基均结合在Ａ环上ꎮＭ２㊁Ｍ１７和Ｍ１９在负离子模式下准分子离子分别为ｍ/ｚ６８９.１０３５８㊁ｍ/ｚ６８９.１９２０８和ｍ/ｚ６８９.１９３４８ꎬ保留时间分别为３.５２㊁４.７２和５.０４ｍｉｎꎮ推测可能的分子式为Ｃ２７Ｈ２９Ｏ１９Ｓꎬ三者误差分别为１.０１５ˑ１０－６㊁０.３９６ˑ１０－６和０.８１１ˑ１０－６ꎮ与Ｍ０芦丁相比ꎬ三者均多了ＳＯ３ꎬ根据碎片离子ｍ/ｚ３８１[Ｍ－Ｈ－Ｃ１２Ｈ２０Ｏ９]－㊁ｍ/ｚ３０１[Ｍ－Ｈ－Ｃ１２Ｈ２０Ｏ９－ＳＯ３]－及ＲＤＡ裂解特征碎片离子ｍ/ｚ１７９[Ｃ８Ｈ３Ｏ５]－和ｍ/ｚ１５１[Ｃ７Ｈ３Ｏ４]－ꎬ推测三者为芦丁的硫酸酯化产物ꎮＭ１５在正㊁负离子模式下分别在ｍ/ｚ３０３.０４９９２(Ｃ１５Ｈ１１Ｏ７ꎬ误差ɤ５ˑ１０－６)和ｍ/ｚ３０１.０３４２７(Ｃ１５Ｈ９Ｏ７ꎬ误差ɤ５ˑ１０－６)下具有相同的理论[Ｍ＋Ｈ]＋/[Ｍ－Ｈ]－离子ꎮ根据碎片离子ｍ/ｚ２７５[Ｍ＋Ｈ－ＣＯ]＋㊁ｍ/ｚ２７３[Ｍ－Ｈ－ＣＯ]－及ＲＤＡ裂解特征碎片离子ｍ/ｚ１７９[Ｃ８Ｈ３Ｏ５]－和ｍ/ｚ１５１[Ｃ７Ｈ３Ｏ４]－ꎬ推测其为槲皮素ꎮＭ２１和Ｍ２７在正离子模式下准分子离子分别为ｍ/ｚ３１７.０６５５７㊁ｍ/ｚ３１７.０６５５７ꎬ保留时间为５.１７ｍｉｎ和６.６４ｍｉｎꎬ推测其可能的分子式为Ｃ１６Ｈ１３Ｏ７(误差分别为－２.９６２ˑ１０－６和－３.０５７ˑ１０－６)ꎻＭ２８在负离子模式下准分子离子为ｍ/ｚ３１５.０５１３９ꎬ推测其可能的分子式为Ｃ１６Ｈ１５Ｏ７(误差为４.６３７ˑ１０－６ꎬ保留时间为８.８７ｍｉｎ)ꎮ根据正离子模式ｍ/ｚ３０３[Ｍ＋Ｈ－ＣＨ２]＋和负离子模式ｍ/ｚ３０１[Ｍ－Ｈ－ＣＨ２]－碎片以及ＲＤＡ裂解特征碎片离子ｍ/ｚ１８１[Ｃ８Ｈ５Ｏ５]＋㊁１７９[Ｃ８Ｈ３Ｏ５]－和ｍ/ｚ１５３[Ｃ７Ｈ５Ｏ４]＋㊁１５１[Ｃ７Ｈ３Ｏ４]－ꎬ推测三者为甲基槲皮素ꎮＭ１１在负离子模式下的准分子离子为ｍ/ｚ３２９.０６３４０ꎬ推测其可能的分子式为Ｃ１７Ｈ１３Ｏ７ꎬ误差为－４.６５０ˑ１０－６ꎬ其分子式与槲皮素Ｍ１５相比多了两个亚甲基ꎮ负离子模式下ꎬ根据ＲＤＡ裂解碎片ｍ/ｚ１６５[Ｃ７Ｈ３Ｏ４＋ＣＨ２]－㊁ｍ/ｚ１２１[Ｃ６Ｈ３Ｏ２＋ＣＨ２]－等碎片离子可推测Ｍ１１为二甲基槲皮素并且一个甲基结合在Ａ环上ꎮＭ１６在负离子模式下的准分子离子为ｍ/ｚ３４３.０８２８５ꎬ推测其可能的分子式为Ｃ１８Ｈ１５Ｏ７ꎬ误差为３.４６８ˑ１０－６ꎬ其分子式与槲皮素Ｍ１５相比多了三个亚甲基ꎮ在其二级质谱图中ꎬ根据碎片离子ｍ/ｚ３１３[Ｍ－Ｈ－ＣＨ２Ｏ]－和ｍ/ｚ２９９[Ｍ－Ｈ－ＣＨ２Ｏ－ＣＨ２]－以及ＲＤＡ裂解碎片ｍ/ｚ１６５[Ｃ７Ｈ３Ｏ４＋ＣＨ２]－㊁ｍ/ｚ１２１[Ｃ６Ｈ３Ｏ２＋ＣＨ２]－等可推测Ｍ１６为三甲基槲皮素并且一个甲基结合在Ａ环上ꎮＭ６在负离子模式下准分子离子为ｍ/ｚ４７７.０６７３２ꎬ推测其可能的分子式为Ｃ２１Ｈ１７Ｏ１３(误差为１.９９８ˑ１０－６)ꎬ负离子模式下ꎬｍ/ｚ３０１与ｍ/ｚ４７７相比丢失ｍ/ｚ１７６ꎬ证明该结构中存在葡萄糖醛酸ꎬ同时根据ｍ/ｚ２７３以及ＲＤＡ裂解碎片离子ｍ/ｚ１５１㊁ｍ/ｚ１７９等推测Ｍ６为槲皮素葡萄糖醛酸ꎮ在此基础上ꎬＭ４在负离子模式下的准分子离子分别为ｍ/ｚ６５３.０９９６１ꎬ推测其分子式为Ｃ２７Ｈ２５Ｏ１９ꎬ误差为３.２７５ˑ１０－６ꎮ负离子模式下ꎬ从ｍ/ｚ６５３到ｍ/ｚ４７７再到ｍ/ｚ３０１连续丢失ｍ/ｚ１７６ꎬ证明该结构中存在２个葡萄糖醛酸ꎬ同时根据ｍ/ｚ１５１㊁ｍ/ｚ１７９等ＲＤＡ裂解碎片离子推测Ｍ４为槲皮素二葡萄糖醛酸ꎮＭ１３与Ｍ２４在负离子模式下的准分子离子分别为ｍ/ｚ３８０.９９２１３和ｍ/ｚ３８０.９９２００ꎬ推测其可能的分子式为Ｃ１５Ｈ９Ｏ１０Ｓꎬ二者误差分别为２.７２０ˑ１０－６㊁２.３７９ˑ１０－６ꎬ保留时间分别为４.４７和５.６１ｍｉｎꎮ负离子模式下ꎬｍ/ｚ３０１与ｍ/ｚ３８１相比相对分子质量减少ｍ/ｚ８０ꎬ提示该结构中磺酸基团的存在ꎬ结合ｍ/ｚ２７３以及ｍ/ｚ１５１㊁ｍ/ｚ１７９㊁ｍ/ｚ１０７等ＲＤＡ裂解碎片离子等推测其为槲皮素硫酸酯ꎮＭ８㊁Ｍ９㊁Ｍ１０在负离子模式下准分子离子分别为ｍ/ｚ４９１.０８２０９㊁ｍ/ｚ４９１.０８４１６和ｍ/ｚ４９１.０８３２８ꎬ推测可能的分子式为Ｃ２２Ｈ１９Ｏ１３ꎬ三者误差分别为０.１４９ˑ１０－６㊁４.３８２ˑ１０－６和２.５７２ˑ１０－６ꎮ负离子模式下ꎬｍ/ｚ３１５与ｍ/ｚ４９１相比丢失ｍ/ｚ１７６ꎬ证明该结构中存在葡萄糖醛酸ꎬ同时ｍ/ｚ３０１与ｍ/ｚ３１５相比丢失ｍ/ｚ１４ꎬ证明该分子中存在甲基ꎻ在正离子模式下ꎬＭ８准分子离子为ｍ/ｚ４９３.０９８２４ꎬ推测可能的分子式为Ｃ２２Ｈ２１Ｏ１３ꎬ误差为１.１６２ˑ１０－６ꎬ存在与上述相同的裂解方式ꎬ产生ｍ/ｚ３１７㊁ｍ/ｚ３０３等碎片离子ꎬ由此推测三者均为甲基槲皮素葡萄糖醛酸ꎮＭ１㊁Ｍ３㊁Ｍ２３在负离子模式下准分子离子分别为ｍ/ｚ６６７.１１５４２㊁ｍ/ｚ６６７.１１５６６和ｍ/ｚ６６７.１１４９９ꎬ推测可能的分子式为Ｃ２８Ｈ２７Ｏ１９ꎬ三者误差分别为２.７８３ˑ１０－６㊁４.２９５ˑ１０－６和１.３９２ˑ１０－６ꎬ保留时间分别为３.４９㊁３.６６和５.２７ｍｉｎꎮ与Ｍ８㊁Ｍ９㊁Ｍ１０相比ꎬ增加了ｍ/ｚ１７６ꎬ证明了比其增加了一个葡萄糖糖醛酸ꎮ负离子模式下ꎬ从ｍ/ｚ６６７到ｍ/ｚ４９１再到ｍ/ｚ３１５连续丢失ｍ/ｚ１７６ꎬ证明该结构中存在２个葡萄糖醛酸ꎻ同时ｍ/ｚ３０１与ｍ/ｚ３１５相比丢失ｍ/ｚ１４ꎬ证明该分子中存在甲基ꎻ结合ＲＤＡ裂解碎片ｍ/ｚ１７９和ｍ/ｚ１５１推测三者均为甲基槲皮素二葡萄糖醛酸ꎮＭ１２㊁Ｍ１４㊁Ｍ１８和Ｍ２０在负离子模式的下准分子离子分别为ｍ/ｚ３９５.００７５４㊁ｍ/ｚ３９５.００７６６㊁ｍ/ｚ３９５.００７７８和ｍ/ｚ３９５.００７７５ꎬ推测其可能的分子式为Ｃ１６Ｈ１１Ｏ１０Ｓ(误差分别为２.０１６ˑ１０－６㊁２.３２０ˑ１０－６㊁２.６２４ˑ１０－６㊁２.５４８ˑ１０－６ꎬ保留时间分别为４.４６㊁４.６４㊁４.８２㊁５.０４ｍｉｎ)ꎮ负离子模式下ꎬｍ/ｚ３１５与ｍ/ｚ３９５相比丢失ｍ/ｚ８０ꎬ证明该结构中存在磺酸基团ꎬ同时ｍ/ｚ３０１与ｍ/ｚ３１５相比丢失ｍ/ｚ１４ꎬ证明该分子中存在甲基ꎻ结合ＲＤＡ裂解碎片ｍ/ｚ１５１推测上述化合物均为甲基槲皮素硫酸酯ꎮＭ５㊁Ｍ２２㊁Ｍ２５在负离子模式下准分子离子分别为ｍ/ｚ５５７.０２３８０㊁ｍ/ｚ５５７.０２４１７和ｍ/ｚ５５７.０２４２３ꎬ推测可能的分子式为Ｃ２１Ｈ１７Ｏ１６Ｓꎬ三者误差分别为０.８７３ˑ１０－６㊁２.６３９ˑ１０－６和２.８１４ˑ１０－６ꎬ保留时间分别为３.７９㊁５.２３和５.８３ｍｉｎꎮ与Ｍ７相比增加１个ＳＯ３ꎬ推测相比Ｍ７增加一个磺酸基团ꎮ负离子模式下ꎬｍ/ｚ３０１与ｍ/ｚ４７７相比丢失ｍ/ｚ１７６ꎬ证明该分子中存在葡萄糖醛酸ꎬ结合ＲＤＡ裂解碎片ｍ/ｚ１７９和ｍ/ｚ１５１推测三者均为槲皮素葡萄糖醛酸的硫酸酯化产物ꎮ３.４㊀芦丁体内代谢途径分析芦丁在大鼠体内存在多途径代谢ꎬ其主要代谢途径见图４ꎬ其中槲皮素及槲皮素的葡萄糖醛酸结合㊁甲基结合等代谢途径已得到相关文献的佐证[８￣９]ꎮ图中揭示了芦丁苷元槲皮素首先是由母体药物经过Ⅰ相代谢反应水解生成的ꎬ随后发生了一系列的Ⅱ相代谢反应包括葡萄糖醛酸化㊁甲基化㊁硫酸酯化等ꎮ此外ꎬ还发现了大量的复合反应ꎬ其中以Ⅱ相代谢反应为主ꎮ此外ꎬ在大鼠粪便中发现和检测到了丰富的代谢物ꎬ这表明肠道中存在肠道微生物区系ꎬ肠道可能是芦丁的主要代谢器官之一ꎮ图４㊀芦丁在大鼠体内可能的代谢通路Ｆｉｇ.４㊀Ｐｏｓｓｉｂｌｅｒｕｔｉｎｍｅｔａｂｏｌｉｃｐａｔｈｗａｙｓｉｎｒａｔｓｉｎｖｉｖｏ４㊀结论本研究采用ＳＤ大鼠一次性口服芦丁的方法ꎬ研究了芦丁在正负离子模式下的尿液㊁血浆和粪便中的代谢规律ꎮ根据碎裂模式㊁准确的质量测定㊁色谱保留时间和相关药物生物转化知识ꎬ共发现包括原型药物在内的２９种代谢物ꎬ并对其进行了表征ꎮ芦丁进入大鼠体内后ꎬ在血浆中检测到１１种代谢产物ꎬ在尿液中检测到２６种代谢产物ꎬ在粪便中检测到８种代谢产物ꎬ提示芦丁主要从尿液中进行排泄ꎬ尿液样本可能是鉴定芦丁代谢物的有力指标ꎮ药物进入机体后能够水解为槲皮素发生Ⅰ相代谢反应ꎬⅡ相代谢反应产物以芦丁和槲皮素的甲基化产物㊁葡萄糖醛酸结合产物㊁硫酸酯化产物及复合反应产物为主ꎮ芦丁进入体内进行代谢的过程中ꎬ在血浆㊁尿液和粪便中均检测到芦丁原型ꎬ与文献报道一致[９]ꎮ目前大多数的研究主要集中在芦丁本身的药理活性和作用机制中ꎬ对其体内代谢产物的药理活性研究较少ꎮ随着越来越多的药物代谢产物被鉴定和表征ꎬ可以对其进行合成并加强相应药理活性的研究ꎬ为临床安全性和扩大已知药物的应用范围提供指导ꎬ也为新药的开发提供参考ꎮ此外ꎬ对已证实的代谢产物进行药代动力学研究ꎬ提供其吸收㊁分布㊁代谢和排泄的信息ꎬ能够为临床应用提供新的治疗方案ꎮ参考文献:[１]马溶ꎬ庞广昌.芦丁对现代文明病的作用[Ｊ].食品科学ꎬ２０１３ꎬ３４(７):３０７￣３１１.[２]ＡＬ￣ＤＨＡＢＩＮＡꎬＡＲＡＳＵＭＶꎬＰＡＲＫＣＨꎬｅｔａｌ.Ａｎｕｐ￣ｔｏ￣ｄａｔｅｒｅｖｉｅｗｏｆｒｕｔｉｎａｎｄｉｔｓｂｉｏｌｏｇｉｃａｌａｎｄｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ[Ｊ].ＥＸＣＬＩＪｏｕｒｎａｌꎬ２０１５ꎬ１４:５９￣６３.ＤＯＩ:１０.１７１７９/ｅｘｃｌｉ２０１４￣６６３.[３]ＭＡＵＬＵＤＩＮＲꎬＭÜＬＬＥＲＲＨꎬＫＥＣＫＣＭ.Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆａｎｏｒａｌｒｕｔｉｎｎａｎｏｃｒｙｓｔａｌｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ[Ｊ].ＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌＪｏｕｒｎａｌｏｆＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓꎬ２００９ꎬ３７０(１/２):２０２￣２０９.ＤＯＩ:１０.１０１６/ｊ.ｉｊｐｈａｒｍ.２００８.１１.０２９.[４]ＷＥＢＳＴＥＲＲＰꎬＧＡＷＤＥＭＤꎬＢＨＡＴＴＡＣＨＡＲＹＡＲＫ.Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅｅｆｆｅｃｔｏｆｒｕｔｉｎꎬａｆｌａｖｏｎｏｌｇｌｙｃｏｓｉｄｅꎬｏｎｔｈｅｃａｒｃｉｎｏｇｅｎ￣ｉｎｄｕｃｅｄＤＮＡｄａｍａｇｅａｎｄｒｅｐａｉｒｅｎｚｙｍｅｓｉｎｒａｔｓ[Ｊ].ＣａｎｃｅｒＬｅｔｔｅｒｓꎬ１９９６ꎬ１０９(１/２):１８５￣１９１.ＤＯＩ:１０.１０１６/Ｓ０３０４￣３８３５(９６)０４４４３￣６.[５]ＮＥＧＡＨＤＡＲＩＲꎬＢＯＨＬＯＵＬＩＳꎬＳＨＡＲＩＦＩＳꎬｅｔａｌ.Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｂｅｎｅｆｉｔｓｏｆｒｕｔｉｎａｎｄｉｔｓｎａｎｏｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎｓ[Ｊ].ＰｈｙｔｏｔｈｅｒａｐｙＲｅｓｅａｒｃｈꎬ２０２１ꎬ３５(４):１７１９￣１７３８.ＤＯＩ:１０.１００２/ｐｔｒ.６９０４.[６]ＣＡＲＢＯＮＡＲＯＭꎬＧＲＡＮＴＧ.Ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎｏｆｑｕｅｒｃｅｔｉｎａｎｄｒｕｔｉｎｉｎｒａｔｓｍａｌｌｉｎｔｅｓｔｉｎｅ[Ｊ].ＡｎｎａｌｓｏｆＮｕｔｒｉｔｉｏｎ＆Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍꎬ２００５ꎬ４９(３):１７８￣１８２.ＤＯＩ:１０.１１５９/００００８６８８２.[７]ＹＡＮＧＪꎬＱＩＡＮＤＷꎬＪＩＡＮＧＳꎬｅｔａｌ.ＩｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｒｕｔｉｎｄｅｇｌｙｃｏｓｙｌａｔｅｄｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓｐｒｏｄｕｃｅｄｂｙｈｕｍａｎｉｎｔｅｓｔｉｎａｌｂａｃｔｅｒｉａｕｓｉｎｇＵＰＬＣ￣Ｑ￣ＴＯＦ/ＭＳ[Ｊ].ＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙＢꎬＡｎａｌｙｔｉｃａｌＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓｉｎｔｈｅＢｉｏｍｅｄｉｃａｌａｎｄＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅｓꎬ２０１２ꎬ８９８:９５￣１００.ＤＯＩ:１０.１０１６/ｊ.ｊｃｈｒｏｍｂ.２０１２.０４.０２４.[８]周鹏飞ꎬ王建壮ꎬ庞小雄ꎬ等.离体培养人肠道菌群对芦丁代谢的研究[Ｊ].广东药学院学报ꎬ２０１１ꎬ２７(６):５８２￣５８６.ＤＯＩ:１０.３９６９/ｊ.ｉｓｓｎ.１００６￣８７８３.２０１１.０６.００８.[９]伍明江ꎬ吴晓磊ꎬ张德芹ꎬ等.ＵＰＬＣ￣Ｑ￣ＴＯＦ/ＭＳ鉴定芦丁在大鼠体内的代谢产物[Ｊ].中国实验方剂学杂志ꎬ２０１７ꎬ２３(１７):９１￣９７.ＤＯＩ:１０.１３４２２/ｊ.ｃｎｋｉ.ｓｙｆｊｘ.２０１７１７００９１.[１０]邓志鹏ꎬ张喆ꎬ周红燕ꎬ等.异绿原酸Ｃ大鼠体内代谢产物鉴定[Ｊ].世界科学技术￣中医药现代化ꎬ２０２２ꎬ２４(５):２０７１￣２０７８.[１１]吴励萍ꎬ张祎盈ꎬ冯一帆ꎬ等.杞菊景明颗粒在大鼠血浆㊁胆汁㊁尿液㊁粪便中代谢产物的鉴定[Ｊ].中成药ꎬ２０２２ꎬ４４(６):１７２５￣１７３１.ＤＯＩ:１０.３９６９/ｊ.ｉｓｓｎ.１００１￣１５２８.２０２２.０６.００１.[１２]ＴＡＭÁＳＫꎬＷＡＣＨＴＥＲ￣ＫＩＳＳＥꎬＫＯＲＭÁＮＹＲ.ＨｙｄｒａｚｉｎｅｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｉｎａｌｌｏｐｕｒｉｎｏｌｕｓｉｎｇｄｅｒｉｖａｔｉｚａｔｉｏｎａｎｄＳＰＥｆｏｒｓａｍｐｌｅｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ[Ｊ].ＪｏｕｒｎａｌｏｆＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌａｎｄＢｉｏｍｅｄｉｃａｌＡｎａｌｙｓｉｓꎬ２０１８ꎬ１５２:２５￣３０.ＤＯＩ:１０.１０１６/ｊ.ｊｐｂａ.２０１８.０１.０３５. [１３]ＪＡＧＡＤＥＥＳＡＮＫＫꎬＲＯＳＳＥＴＴＩＣꎬＡＢＤＥＬＱＡＤＥＲＡꎬｅｔａｌ.Ｆｉｌｔｅｒｐｌａｔｅ￣ｂａｓｅｄｓｃｒｅｅｎｉｎｇｏｆＭＩＰＳＰＥｍａｔｅｒｉａｌｓｆｏｒｃａｐｔｕｒｅｏｆｔｈｅｂｉｏｍａｒｋｅｒｐｒｏ￣ｇａｓｔｒｉｎ￣ｒｅｌｅａｓｉｎｇｐｅｐｔｉｄｅ[Ｊ].ＳＬＡＳＤｉｓｃｏｖｅｒｙ:ＡｄｖａｎｃｉｎｇＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅｓＲ＆Ｄꎬ２０１７ꎬ２２(１０):１２５３￣１２６１.ＤＯＩ:１０.１１７７/２４７２５５５２１６６８９４９４.[１４]ＷＡＮＧＦꎬＣＡＯＧＳꎬＬＩＹꎬｅｔａｌ.ＣｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎｏｆｆｏｒｓｙｔｈｏｓｉｄｅＡｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓｉｎｒａｔｓｂｙａｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎｏｆＵＨＰＬＣ￣ＬＴＱ￣Ｏｒｂｉｔｒａｐｍａｓｓｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｅｒｗｉｔｈｍｕｌｔｉｐｌｅｄａｔａｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ[Ｊ].ＢｉｏｍｅｄｉｃａｌＣｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙꎬ２０１８ꎬ３２(５):ｅ４１６４.ＤＯＩ:１０.１００２/ｂｍｃ.４１６４.[１５]ＸＩＡＮＧＺＤꎬＷＡＮＧＳＰꎬＬＩＨＲꎬｅｔａｌ.Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎａｎｄｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｃａｔａｌｐｏｌｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓｉｎｔｈｅｒａｔｐｌａｓｍａꎬｕｒｉｎｅａｎｄｆａｅｃｅｓｕｓｉｎｇｕｌｔｒａ￣ｈｉｇｈｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｌｉｑｕｉｄｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ￣Ｑｅｘａｃｔｉｖｅｈｙｂｒｉｄｑｕａｄｒｕｐｏｌｅ￣ｏｒｂｉｔｒａｐｈｉｇｈ￣ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎａｃｃｕｒａｔｅｍａｓｓｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ[Ｊ].ＣｕｒｒｅｎｔＤｒｕｇＭｅｔａｂｏｌｉｓｍꎬ２０２１ꎬ２２(３):１７３￣１８４.ＤＯＩ:１０.２１７４/１３８９２００２２１９９９２０１１２５２０５５１５. [１６]崔议方ꎬ王红ꎬ阮健ꎬ等.基于ＵＨＰＬＣ￣Ｑ￣ＥｘａｃｔｉｖｅＯｒｂｉｔｒａｐＭＳ鉴定欧前胡素在大鼠体内的代谢产物[Ｊ].中国中药杂志ꎬ２０２２ꎬ４７(１５):４２０２￣４２１３.ＤＯＩ:１０.１９５４０/ｊ.ｃｎｋｉ.ｃｊｃｍｍ.２０２２０３０７.２０３.[１７]ＪＩＡＮＧＳꎬＷＡＮＧＳＰꎬＤＯＮＧＰＰꎬｅｔａｌ.Ａｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅｐｒｏｆｉｌｉｎｇａｎｄｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｌｉｑｕｉｒｉｔｉｎｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓｉｎｒａｔｓｕｓｉｎｇｕｌｔｒａ￣ｈｉｇｈ￣ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｌｉｑｕｉｄｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙｃｏｕｐｌｅｄｗｉｔｈｌｉｎｅａｒｉｏｎｔｒａｐ￣ｏｒｂｉｔｒａｐｍａｓｓｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｅｒ[Ｊ].Ｘｅｎｏｂｉｏｔｉｃａꎬ２０２１ꎬ５１(５):５６４￣５８１.ＤＯＩ:１０.１０８０/００４９８２５４.２０２０.１８５４３６６.[１８]ＤＯＮＧＰＰꎬＳＨＩＬꎬＷＡＮＧＳＰꎬｅｔａｌ.ＲａｐｉｄｐｒｏｆｉｌｉｎｇａｎｄｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｖｉｔｅｘｉｎｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓｉｎｒａｔｕｒｉｎｅꎬｐｌａｓｍａａｎｄｆａｅｃｅｓａｆｔｅｒｏｒａｌａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎｕｓｉｎｇａＵＨＰＬＣ￣Ｑ￣ｅｘａｃｔｉｖｅｏｒｂｉｔｒａｐｍａｓｓｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｅｒｃｏｕｐｌｅｄｗｉｔｈｍｕｌｔｉｐｌｅｄａｔａ￣ｍｉｎｉｎｇｍｅｔｈｏｄｓ[Ｊ].ＣｕｒｒｅｎｔＤｒｕｇＭｅｔａｂｏｌｉｓｍꎬ２０２１ꎬ２２(３):１８５￣１９７.ＤＯＩ:１０.２１７４/１３８９２００２２１９９９２１０１０１２３２８４１.[１９]ＬＩＵＭＨꎬＴＯＮＧＸꎬＷＡＮＧＪＸꎬｅｔａｌ.ＲａｐｉｄｓｅｐａｒａｔｉｏｎａｎｄｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｍｕｌｔｉｐｌｅｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓｉｎｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅｍｅｄｉｃｉｎｅｆｏｒｍｕｌａＳｈｅｎｑｉＦｕｚｈｅｎｇＩｎｊｅｃｔｉｏｎｂｙｕｌｔｒａ￣ｆａｓｔｌｉｑｕｉｄｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙｃｏｍｂｉｎｅｄｗｉｔｈｑｕａｄｒｕｐｏｌｅ￣ｔｉｍｅ￣ｏｆ￣ｆｌｉｇｈｔｍａｓｓｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ[Ｊ].ＪｏｕｒｎａｌｏｆＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌａｎｄＢｉｏｍｅｄｉｃａｌＡｎａｌｙｓｉｓꎬ２０１３ꎬ７４:１４１￣１５５.ＤＯＩ:１０.１０１６/ｊ.ｊｐｂａ.２０１２.１０.０２４. [２０]ＹＥＪＢꎬＲＥＮＧꎬＬＩＷＹꎬｅｔａｌ.ＣｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎａｎｄｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｐｒｅｎｙｌａｔｅｄｆｌａｖｏｎｏｉｄｓｆｒｏｍＡｒｔｏｃａｒｐｕｓｈｅｔｅｒｏｐｈｙｌｌｕｓｌａｍ.ｒｏｏｔｓｂｙｑｕａｄｒｕｐｏｌｅｔｉｍｅ￣ｏｆ￣ｆｌｉｇｈｔａｎｄｌｉｎｅａｒｔｒａｐｑｕａｄｒｕｐｏｌｅｏｒｂｉｔｒａｐｍａｓｓｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ[Ｊ].Ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ(ＢａｓｅｌꎬＳｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ)ꎬ２０１９ꎬ２４(２４):４５９１.ＤＯＩ:１０.３３９０/ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ２４２４４５９１.[２１]ＬＩＵＸＣꎬＦＡＮＸＹꎬＷＡＮＧＸꎬｅｔａｌ.ＳｔｒｕｃｔｕｒａｌｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎａｎｄｓｃｒｅｅｎｉｎｇｏｆｃｈｅｍｉｃａｌｍａｒｋｅｒｓｏｆｆｌａｖｏｎｏｉｄｓｉｎＬｙｓｉｍａｃｈｉａｅＨｅｒｂａａｎｄＤｅｓｍｏｄｉｉＳｔｙｒａｃｉｆｏｌｉｉＨｅｒｂａｂｙｕｌｔｒａｈｉｇｈ￣ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｌｉｑｕｉｄｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙｑｕａｄｒｕｐｏｌｅｔｉｍｅ￣ｏｆ￣ｆｌｉｇｈｔｔａｎｄｅｍｍａｓｓｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙｂａｓｅｄｍｅｔａｂｏｌｏｍｉｃｓａｐｐｒｏａｃｈ[Ｊ].ＪｏｕｒｎａｌｏｆＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌａｎｄＢｉｏｍｅｄｉｃａｌＡｎａｌｙｓｉｓꎬ２０１９ꎬ１７１:５２￣６４.ＤＯＩ:１０.１０１６/ｊ.ｊｐｂａ.２０１９.０４.００３.[２２]ＱＵＹＸꎬＺＨＡＮＧＣＮꎬＬＩＵＲＨꎬｅｔａｌ.ＲａｐｉｄｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎｔｈｅｃｈｅｍｉｃａｌｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓｏｆＢｅｒｇｅｎｉａｐｕｒｐｕｒａｓｃｅｎｓａｎｄｅｘｐｌｏｒｅｐｏｔｅｎｔｉａｌｍｅｃｈａｎｉｓｍｉｎｔｒｅａｔｉｎｇｏｓｔｅｏａｒｔｈｒｉｔｉｓｂｙｕｌｔｒａｈｉｇｈｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｌｉｑｕｉｄｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙｃｏｕｐｌｅｄｗｉｔｈｑｕａｄｒｕｐｏｌｅｔｉｍｅ￣ｏｆ￣ｆｌｉｇｈｔｍａｓｓｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙｃｏｍｂｉｎｅｄｗｉｔｈｎｅｔｗｏｒｋｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ[Ｊ].ＪｏｕｒｎａｌｏｆＳｅｐａｒａｔｉｏｎＳｃｉｅｎｃｅꎬ２０２０ꎬ４３(１６):３３３３￣３３４８.ＤＯＩ:１０.１００２/ｊｓｓｃ.２０１９０１２８４.[２３]叶馨源ꎬ吴建明ꎬ杨杰ꎬ等.白背三七化学成分及代表性成分质谱裂解特征的研究进展[Ｊ].中草药ꎬ２０２１ꎬ５２(２１):６６８７￣６７００.ＤＯＩ:１０.７５０１/ｊ.ｉｓｓｎ.０２５３￣２６７０.２０２１.２１.０２８.。

难拆字

拜——rdfh 凹——mmgd 翱——rdfn 靶——afcn 耙——dicn 霸——fafe 傲——wgqt 稗——trtf 版——thgc 拌——rufh 伴——wufh 半——ufk 绊——xufh 豹——eeqy 碑——drtf 悲——djdn 卑——rtfj 辈——djdl 敝——umit 弊——umia 鞭——afwq 彪——hame 鳖——umig 憋——umin 斌——ygah 濒——ihim 秉——tgvi 拨——rnty 博——fgef 搏——rgef 膊——egef 哺——kgey 埠——fwnf 簿——tigf 蚕——gdju 槽——sgmj 策——tgmi 豺——eeft 搀——rqku 谗——yqku 厂——dgt 乘——tuxv 承——bdii 虫——jhny 丑——nfd 锄——qegl 楚——ssnh 处——thi 舜——epqh 斯——adwr 撕——radr 嘶——kadr 肆——dvfh 似——wnyw 巳——nngn 捶——rtgf 锤——qtgf 垂——tgaf 寸——fghy 撮——rjbc 歹——gqi 耽——bpqn 丹——myd 岛——qynm 第——txht 碘——dmaw 典——mawu 叼——kngg 懂——natf 毒——gxgu 犊——trfd 锻——qwdc 蛾——jtrt 峨——mtrt 鹅——trng 娥——vtrt 饿——qntt 耳——bghg 贰——afmi 筏——twar 伐——wat 乏——tpi 阀——uwae 飞——nui 夫——fwi 敷——geht 釜——wqfu 脯——egey 赋——mgah 阜——wnnf 父——wqu缚——xgef 感——dgkn 皋——rdfj 革——afj 根——svey 跟——khve 耕——difj 更——gjqi 庚——yvwi 羹——ugod 躬——tmdx 辜——duj 瓜——rcyi 罐——rmay 惯——nxfm 贯——xfmu 瑰——grqc 鬼——rqci 裹——yjse 喊——kdgt 撼——rdgn 憾——ndgn 毫——yptn 黑——lfou 很——tvey 哼——kybh 亨——ybj喉——kwnd 猴——qtwd 弧——xrcy 互——gxgd 缓——xefc 换——rqmd 昏——qajf 豁——pdhk 惑——akgn 击——fmk 棘——gmii 脊——iwef 既——vcaq 荚——aguw 颊——guwm 甲——lhnh 兼——uvou 缄——xdgt 拣——ranw 减——udgt 践——khgt 贱——mgt 见——mqb 件——wrhh 溅——imgt 建——vfhp 降——btah 浇——iatq 嚼——kelf 睫——hgvh 戒——aak 巾——mhk 斤——rtth 谨——yakg 韭——djdg 九——vtn 厩——dvcq 救——fiyt臼——vthg 舅——vllb 疽——uegd 倦——wudb 眷——udhf 卷——udbb 撅——rduw 攫——rhhc 抉——rnwy 爵——elvf 君——vtkd 俊——wcwt 卡——hhu慨——nvcq 慷——nyvi 糠——oyvi 靠——tfkd 克——dqb 亏——fnv 喇——kgkj 来——goi澜——iugi 谰——yugi 揽——rjtq 览——jtyq 懒——ngkm 缆——xjtq 滥——ijtl 榔——syvb 狼——qtye 廊——yyvb 朗——yvce 浪——iyve 牢——prhj 勒——afln 镰——qyuo 敛——wgit 脸——ewgi 炼——oanw 练——xanw 粮——oyve 撩——rdui 聊——bqtb 僚——wdui 疗——ubk 燎——odui 潦——idui 镣——qdui 临——jtyj 龄——hwbc 榴——sqyl 留——qyvl 六——uygy 窿——pwbg 鹿——ynjx 旅——ytey 率——yxif 卵——qyty 麦——gtu 忙——nynn 矛——cbtr 茂——adnt 貌——eerq 美——ugdu 寐——pnhi 妹——vfiy 门——uyhn 冕——jqkq 免——qkqb 勉——qkql 娩——vqkq 缅——xdmd 面——dmjd 蔑——aldt 灭——goi 鸣——kqyg 末——gsi 牟——crhj 某——afsu 拇——rxgu 姆——vxgu 哪——kvfb 乃——etn 囊——gkhe 蔫——agho 年——rhfk 鸟——qyng 孽——awnb 凝——uxth 扭——rnfg 纽——xnfg 脓——epey 浓——ipey 疟——uagd 哦——ktrt 鸥——aqqg 藕——adiy 偶——wjmy 爬——rhyc 排——rdjd 牌——thgf 徘——tdjd 湃——irdf 派——irey 判——udjh 叛——udrc 耪——diuy 砰——dguh 抨——rguh 片——thgn 撇——rumt 瞥——umih 频——hidm 苹——aguh 萍——aigh 瓶——uagn 婆——ihcv 破——dhcy 莆——agey 圃——lgey 普——uogj 妻——gvhv 气——rnb 遣——khgp 歉——uvow 羌——udnb 墙——ffuk 蔷——afuk 且——egd 擒——rwyc 禽——wybc 球——gfiy 求——fiyi 曲——mad 躯——tmdq 龋——hwby 犬——dgty 缺——rmnw 炔——onwy 榷——spwy 雀——iwyf 群——vtkd 瓤——ykky 壤——fyke 攘——ryke 嚷——kyke 扰——rdnn 绕——xatq 壬——tfd 刃——vyi 绒——xadt 柔——cbts 伞——wuhj 丧——fueu 陕——bguw 膳——eudk善——uduk 烧——oatq 舌——tdd身——tmdt 升——tak盛——dnnl 剩——tuxj 失——rwi 尸——nngt 士——fghg 世——anv 市——ymhj 手——rtgh 戍——dynt 耍——dmjv 甩——env 睡——htgf 瞬——heph 搜——rvhc 艘——tevc 塑——ubtf 溯——iube 肃——vijk 穗——tgjn 祟——bmfi 糖——oyvk 躺——tmdk 掏——rqrm 逃——iqpv 套——ddu 藤——aeui 腾——eudc 誊——udyf 舔——tdgn 腆——emaw 挑——riqn 眺——hiqn 跳——khiq 廷——tfpd 彤——myet 头——udi 凸——hgmg 兔——qkqy 退——vepi 吞——gdkf 屯——gbnv 鸵——qynx 唾——ktgf 瓦——gnyn 袜——pugs 歪——gigh 挽——rqkq 亡——ynv 妄——ynvf 问——ukd 瓮——wcgn 呜——kqng 钨——qqng 毋——xde 五——gghg 午——tfj 舞——rlgh 侮——wtxu 坞——fqng 戊——dnyt 西——sghg 夕——qtny 霞——fnhc 暇——jnhc 峡——mguw 乡——xte 晓——jatq 楔——sdhd 卸——rhbh 行——tfhh 兄——kqb 羞——udnf 锈——qten 戌——dgnt 血——tld 熏——tglo 讯——ynfh 迅——nfpk 鸦——ahtg 呀——kaht 丫——uhk 芽——aaht 牙——ahte 蚜——jaht 雅——ahty 哑——kgog 亚——gogd 讶——yaht 焉——ghgo 蜒——jthp 演——ipgw 彦——uter 央——mdi鸯——mdqg 秧——tmdy 痒——uudk 漾——iugi 曳——jxe 夜——ywty 夷——gxwi 遗——khgp 胰——egxw 疑——xtdh 姨——vgxw 彝——xgoa 已——nnnn 乙——nnll 肄——xtdh 赢——ynky 庸——yveh 用——etnh 由——mhng 迂——gfpk 隅——bjmy 予——cbj 御——trhb 渊——itoh 冤——pqky 缘——xxey 曰——jhng 凿——ogub 枣——gmiu 早——jhnh 乍——thfd 炸——othf 窄——pwtf 毡——tfnk 栈——sgt 杖——sdyy 丈——dyi 仗——wdyy 整——gkih 正——ghd 止——hhhg 舟——tei 株——sriy 茱——ariu 铢——qriy 珠——griy 属——ntky 瞩——hnty 爪——rhyi 足——khu 亍——fhk 兀——gqv 丐——ghnv 廿——aghg 禺——jmhy 氐——qayi 兆——iqv 谏——ygli尥——dnqy 尬——dnwj 尴——dnjl 弋——agny 制——rmhj 追——wnnp 幺——xnny 自——thd 缶——rmk 竹——ttgh 曹——gmaj 粤——tlon。

三点共线时线段长度乘积的计算策略

三点共线时线段长度乘积的计算策略朱贤良(长沙市周南梅溪湖中学ꎬ湖南长沙４１０２０５)摘㊀要:从一道简单的线段长度之积问题出发ꎬ转换思考的角度ꎬ形成求解此类三点共线时线段长度之积问题的三种解法:两点间距离公式法㊁向量数量积法㊁参数方程法.由此ꎬ可以分别借助三种方法破解高考与模考中的相关难题.关键词:线段长度乘积ꎻ两点间距离公式ꎻ三点共线ꎻ数量积ꎻ直线的参数方程中图分类号:Ｇ６３２㊀㊀㊀文献标识码:Ａ㊀㊀㊀文章编号:１００８－０３３３(２０２３)１９－０００２－０５收稿日期:２０２３－０４－０５作者简介:朱贤良(１９８１－)ꎬ男ꎬ安徽省枞阳人ꎬ本科ꎬ中学高级教师ꎬ从事中学数学教学研究.㊀㊀文章先从一道解析几何中的经典问题的求解说起.１转换视角:简单题中也有大智慧例１㊀如图１ꎬ过点Ｍ(２ꎬ１)作一直线ｌ分别与ｘ轴㊁ｙ轴的正半轴相交于ＡꎬＢ两点ꎬ求ＭＡＭＢ的最小值.在学习直线的方程知识时ꎬ我们常选用本题来引导学生选择合适的直线方程进行解题.本题的求解思路是先设出直线的方程ꎬ得出ＡꎬＢ两点的坐标ꎬ再根据两点间距离公式得到乘积ＭＡＭＢꎬ最后求得最小值.具体解法如下:解析㊀设直线ｌ的点斜式方程为ｙ－１＝ｋ(ｘ－２)(ｋ<０)ꎬ则Ａ(２－１ｋꎬ０)ꎬＢ(０ꎬ１－２ｋ).故ＭＡＭＢ＝１ｋ２＋１４＋４ｋ２＝２ｋ２＋１ｋ２＋２ȡ４.当且仅当ｋ２＝１ｋ２ꎬ即ｋ＝－１时等号成立ꎬ此时图１㊀例１图ＭＡＭＢ取得最小值４.在求解涉及线段长度的问题时ꎬ一般都是由两点间距离公式的１.０版本ＡＢ＝(ｘ１－ｘ２)２＋(ｙ１－ｙ２)２计算线段长度ꎬ此公式与两点的横㊁纵坐标均相关ꎬ运算量较大.因此ꎬ常借助两点间距离公式的２.０版本ＡＢ＝１＋ｋ２ｘ１－ｘ２＝１＋１ｋ２ｙ１－ｙ２来简化运算.比如本题中ꎬＭＡ＝１＋１ｋ２ｙＭ－ｙＡ＝１＋１ｋ２ꎬＭＢ＝１＋ｋ２ｘＭ－ｘＢ＝２１＋ｋ２ꎬ故ＭＡＭＢ＝２１＋１ｋ２１＋ｋ２.当然ꎬ不论是使用何种版本的距离公式ꎬ上述解题思路还是将着眼点放在两点间距离公式上.倘若换个角度来进行思考ꎬ突破两点间距离公式这一局限ꎬ我们就能找到全新的出发点和突破口.不难发现ꎬ本题中的ＭꎬＡꎬＢ三点共线ꎬ从向量的角度看ꎬ此即向量ＭＡңʊＭＢң(方向相反)ꎬ则有ＭＡＭＢ＝－ＭＡң ＭＢң.这样ꎬ线段长度之积问题就转化成了向量的数量积问题[１]ꎬ故有如下解法:另解１㊀同上述解析ꎬＡ(２－１ｋꎬ０)ꎬＢ(０ꎬ１－２ｋ)ꎬ则ＭＡң＝(－１ｋꎬ－１)ꎬＭＢң＝(－２ꎬ－２ｋ).故ＭＡＭＢ＝－ＭＡң ＭＢң＝(－２ｋ)＋(－２ｋ)ȡ２(－２ｋ) (－２ｋ)＝４.学过直线的参数方程后ꎬ我们还常利用参数ｔ的几何意义来解决线段的长度问题ꎬ这样就有了下面的解法:另解２㊀设直线ｌ的倾斜角为α(π２<α<π)ꎬ则其参数方程为ｘ＝２＋ｔｃｏｓαｙ＝１＋ｔｓｉｎα{(ｔ为参数).将坐标轴所在曲线方程写成ｘｙ＝０ꎬ将其与直线ｌ联立可得(２＋ｔｃｏｓα)(１＋ｔｓｉｎα)＝０.即１２ｓｉｎ２α ｔ２＋(２ｓｉｎα＋ｃｏｓα)ｔ＋２＝０.故ＭＡＭＢ＝ｔ１ｔ２＝４ｓｉｎ２αȡ４.当且仅当ｓｉｎ２α＝１ꎬ即α＝３４π时等号成立ꎬ此时ＭＡＭＢ取得最小值４.综观上述问题的不同求解思路ꎬ我们不难将三点共线时线段长度之积问题的破解方法归纳为以下三种:(１)两点间距离公式法:先求出两点的坐标ꎬ或是设而不求 ꎬ再借助两点间距离公式计算距离.这也是解决长度问题的通法ꎬ求解时要注意恰当借助两点间距离公式的２.０版本来减少运算量.(２)向量数量积法:三点共线时ꎬ两个向量数量积的绝对值与其模的乘积相等ꎬ由此将线段长度之积转化为向量的数量积问题.(３)参数方程法:若直线ｌ经过定点Ｐ(ｘ０ꎬｙ０)ꎬ倾斜角为αꎬ则其参数方程为ｘ＝ｘ０＋ｔｃｏｓαｙ＝ｙ０＋ｔｓｉｎα{(ｔ为参数ꎬ０ɤα<π).已知Ｑ为直线ｌ上一点ꎬ所对应的参数为ｔꎬ即点Ｑ的坐标为(ｘ０＋ｔｃｏｓαꎬｙ０＋ｔｓｉｎα)ꎬ则ＰＱ＝ｔ(参数ｔ的几何意义).这样ꎬ我们就可以利用参数ｔ的几何意义来计算线段长度之积.２应用举例:心中若有法ꎬ难题亦无忧掌握了以上三种方法ꎬ即使是面对模考与高考中的压轴题ꎬ也可以从容应对㊁泰然处之.例２㊀(湖南省郴州市２０１９届高三二模理２０)已知点Ｅ在椭圆Ｃ:ｘ２ａ２＋ｙ２ｂ２＝１(ａ>ｂ>０)上ꎬ以Ｅ为圆心的圆与ｘ轴相切于椭圆的右焦点Ｆ２ꎬ与ｙ轴相交于ＡꎬＢ两点ꎬ且әＡＢＥ是边长为２的正三角形.㊀图２㊀例２图(１)求椭圆Ｃ的方程ꎻ(２)如图２ꎬ已知圆Ｏ:ｘ２＋ｙ２＝１８５ꎬ设圆Ｏ上任意一点Ｐ处的切线交椭圆Ｃ于ＭꎬＮ两点ꎬ试判断ＰＭＰＮ是否为定值?若为定值ꎬ求出该定值ꎻ若不是定值ꎬ请说明理由.第(１)问较易ꎬ椭圆Ｃ的方程为ｘ２９＋ｙ２６＝１.以下依次用两点间距离公式法㊁向量数量积法㊁参数方程法来求解第(２)问:解法１㊀(两点间距离公式法)①当切线ＭＮ的斜率不存在时ꎬ易求ＰＭ＝ＰＮ＝１８５ꎬ此时ＰＭＰＮ＝１８５.②当切线ＭＮ的斜率存在时ꎬ设Ｐ(ｘ０ꎬｙ０)ꎬ则ｘ２０＋ｙ２０＝１８５ꎬ且ｋＯＰ＝ｙ０ｘ０ꎬｋＭＮ＝－ｘ０ｙ０.故ＭＮ的方程为ｙ－ｙ０＝－ｘ０ｙ０(ｘ－ｘ０).即ｙ＝－ｘ０ｙ０ｘ＋１８５ｙ０.再设Ｍ(ｘ１ꎬｙ１)ꎬＮ(ｘ２ꎬｙ２)ꎬ由ｙ＝－ｘ０ｙ０ｘ＋１８５ｙ０ꎬｘ２９＋ｙ２６＝１ꎬìîíïïïï得(ｘ２０＋３６５)ｘ２－１０８ｘ０５ｘ＋１８(ｘ２０－３６２５)＝０.故ｘ１＋ｘ２＝１０８ｘ０５(ｘ２０＋３６５)ꎬｘ１ｘ２＝１８(ｘ２０－３６２５)ｘ２０＋３６５.由两点间距离公式可知ꎬＰＭ＝１＋ｘ２０ｙ２０ｘ０－ｘ１ꎬＰＮ＝１＋ｘ２０ｙ２０ｘ０－ｘ２ꎬ故ＰＭＰＮ＝－(１＋ｘ２０ｙ２０)(ｘ０－ｘ１)(ｘ０－ｘ２)＝－ｘ２０＋ｙ２０ｙ２０[ｘ２０－ｘ０(ｘ１＋ｘ２)＋ｘ１ｘ２]＝－１８５ｙ２０[ｘ２０－１０８ｘ２０５(ｘ２０＋３６５)＋１８(ｘ２０－３６２５)ｘ２０＋３６５]＝－１８５ｙ２０(ｘ２０－１８５)＝１８５.综上所述ꎬＰＭＰＮ＝１８５为定值.解法２㊀(向量数量积法)①当切线ＭＮ的斜率不存在时ꎬ同解法１.②当切线ＭＮ的斜率存在时ꎬＰＭң ＰＮң＝(ｘ１－ｘ０ꎬｙ１－ｙ０) (ｘ２－ｘ０ꎬｙ２－ｙ０)＝(ｘ１－ｘ０)(ｘ２－ｘ０)＋(ｙ１－ｙ０)(ｙ２－ｙ０)＝(ｘ１－ｘ０)(ｘ２－ｘ０)＋[－ｘ０ｙ０(ｘ１－ｘ０)] [－ｘ０ｙ０(ｘ２－ｘ０)]＝(１＋ｘ２０ｙ２０)(ｘ０－ｘ１)(ｘ０－ｘ２).同解法１的运算过程可得ＰＭң ＰＮң＝－１８５.故ＰＭＰＮ＝－ＰＭң ＰＮң＝１８５.所以ＰＭＰＮ＝１８５为定值.解法３㊀(参数方程法)设Ｐ(ｘ０ꎬｙ０)ꎬ切线ＭＮ的倾斜角为αꎬ则ＭＮ的参数方程为ｘ＝ｘ０＋ｔｃｏｓαｙ＝ｙ０＋ｔｓｉｎα{(ｔ为参数ꎬ０ɤα<π)ꎬ且ｘ２０＋ｙ２０＝１８５ꎬｓｉｎ２α＝５ｘ２０１８.将直线ＭＮ的方程与椭圆Ｃ的方程联立ꎬ得(ｘ０＋ｔｃｏｓα)２９＋(ｙ０＋ｔｓｉｎα)２６＝１.即(２＋ｓｉｎ２α)ｔ２＋(４ｘ０ｃｏｓα＋６ｙ０ｓｉｎα)ｔ－ｘ２０－３６５＝０.则ｔ１ｔ２＝－ｘ２０－３６５２＋ｓｉｎ２α＝－ｘ２０－３６５２＋５ｘ２０１８＝－(ｘ２０＋３６５)５１８(３６５＋ｘ２０)＝－１８５.根据参数的几何意义ꎬＰＭＰＮ＝ｔ１ｔ２＝１８５为定值.例３㊀(２０２１年新高考全国Ⅰ卷第２１题)在平面直角坐标系ｘＯｙ中ꎬ已知点Ｆ１(－１７ꎬ０)ꎬＦ２(１７ꎬ０)ꎬ点Ｍ满足ＭＦ１－ＭＦ２＝２.记点Ｍ的轨迹为Ｃ.(１)求Ｃ的方程ꎻ(２)如图３ꎬ设点Ｔ在直线ｘ＝１２上ꎬ过点Ｔ的两条直线分别交Ｃ于ＡꎬＢ两点和ＰꎬＱ两点ꎬ且ＴＡＴＢ＝ＴＰＴＱꎬ求直线ＡＢ的斜率与直线ＰＱ的斜率之和.图３㊀例３图对于第(１)问ꎬ根据双曲线的定义ꎬ不难求得曲线Ｃ的方程为ｘ２－ｙ２１６＝１(ｘȡ１).对于第(２)问ꎬ涉及ＴꎬＡꎬＢ三点共线㊁ＴꎬＰꎬＱ三点共线时的线段长度之积ＴＡＴＢ与ＴＰＴＱꎬ依次采用前述三种方法进行求解:解法１㊀(两点间距离公式法)设Ｔ(１２ꎬｍ)ꎬ直线ＡＢ的方程为ｙ＝ｋ１(ｘ－１２)＋ｍꎬＡ(ｘ１ꎬｙ１)ꎬＢ(ｘ２ꎬｙ２)ꎬ将直线ＡＢ方程代入Ｃ的方程ꎬ整理ꎬ得(ｋ２１－１６)ｘ２＋２ｋ１(ｍ－１２ｋ１)ｘ＋(ｍ－１２ｋ１)２＋１６＝０.故ｘ１＋ｘ２＝－２ｋ１(ｍ－１２ｋ１)ｋ２１－１６ꎬｘ１ｘ２＝(ｍ－１２ｋ１)２＋１６ｋ２１－１６.则｜ＴＡ｜＝１＋ｋ２１｜１２－ｘ１｜ꎬ｜ＴＢ｜＝１＋ｋ２１｜１２－ｘ２｜.结合两点间距离公式ꎬ可得ＴＡＴＢ＝(１＋ｋ２１)(１２－ｘ１)(１２－ｘ２)＝(１＋ｋ２１)[１４－１２(ｘ１＋ｘ２)＋ｘ１ｘ２]＝(１＋ｋ２１)[１４＋ｋ１(ｍ－１２ｋ１)ｋ２１－１６＋(ｍ－１２ｋ１)２＋１６ｋ２１－１６]＝(１＋ｋ２１)(ｍ２＋１２)ｋ２１－１６.设直线ＰＱ的方程为ｙ＝ｋ２(ｘ－１２)＋ｍꎬＰ(ｘ３ꎬｙ３)ꎬＱ(ｘ４ꎬｙ４)ꎬ同理可得ＴＰＴＱ＝(１＋ｋ２２)(ｍ２＋１２)ｋ２２－１６.又因为ＴＡＴＢ＝ＴＰＴＱꎬ故(１＋ｋ２１)(ｍ２＋１２)ｋ２１－１６＝(１＋ｋ２２)(ｍ２＋１２)ｋ２２－１６.即１＋ｋ２１ｋ２１－１６＝１＋ｋ２２ｋ２２－１６.即１＋１７ｋ２１－１６＝１＋１７ｋ２２－１６.即ｋ２１－１６＝ｋ２２－１６.即ｋ２１＝ｋ２２.由题知ｋ１ʂｋ２.所以ｋ１＝－ｋ２.即直线ＡＢ的斜率与直线ＰＱ的斜率之和为０.解法２㊀(向量数量积法)同解法１得ｘ１＋ｘ２＝－２ｋ１(ｍ－１２ｋ１)ｋ２１－１６ꎬｘ１ｘ２＝(ｍ－１２ｋ１)２＋１６ｋ２１－１６.因为ＴＡң ＴＢң＝(ｘ１－１２ꎬｙ１－ｍ) (ｘ２－１２ꎬｙ２－ｍ)＝(ｘ１－１２)(ｘ２－１２)＋(ｙ１－ｍ)(ｙ２－ｍ)＝(１＋ｋ２１)(ｘ１－１２)(ｘ２－１２)＝(１＋ｋ２１)(ｍ２＋１２)ｋ２１－１６.故ＴＡＴＢ＝ＴＡң ＴＢң＝(１＋ｋ２１)(ｍ２＋１２)ｋ２１－１６.同理ꎬＴＰＴＱ＝ＴＰң ＴＱң＝(１＋ｋ２２)(ｍ２＋１２)ｋ２２－１６.以下同解法１[２].解法３㊀(参数方程法)设Ｔ(１２ꎬｍ)ꎬ直线ＡＢ的倾斜角为αꎬ则其参数方程为ｘ＝１２＋ｔｃｏｓαｙ＝ｍ＋ｔｓｉｎα{(α为参数)ꎬ将其代入Ｃ的方程并整理可得(１６ｃｏｓ２α－ｓｉｎ２α)ｔ２＋(１６ｃｏｓα－２ｍｓｉｎα)ｔ－(ｍ２＋１２)＝０.则ｔ１ｔ２＝ｍ２＋１２ｓｉｎ２α－１６ｃｏｓ２α＝ｍ２＋１２１－１７ｃｏｓ２α.由参数的几何意义可知ＴＡＴＢ＝ｔ１ｔ２＝ｍ２＋１２１－１７ｃｏｓ２α[３].再设直线ＰＱ的倾斜角为βꎬ同理可得ＴＰＴＱ＝ｍ２＋１２１－１７ｃｏｓ２β.依题意ꎬ得ｍ２＋１２１－１７ｃｏｓ２α＝ｍ２＋１２１－１７ｃｏｓ２β.则ｃｏｓ２α＝ｃｏｓ２β.即ｃｏｓα＝－ｃｏｓβ.故α＋β＝π.从而直线ＡＢ的斜率与直线ＰＱ的斜率之和为０[４].㊀３解题启示:小题大做㊁发散思维是提高解题能力㊁学好数学的重要途径㊀㊀解题是数学学习的重要方面ꎬ从某种意义上说ꎬ数学能力的高低可以直接通过解题水平的高低表现出来.正如著名数学教育家波利亚所说的那样ꎬ 掌握数学就意味着善于解题. 因此ꎬ在高中数学学习中首要的目标是必须学会思考ꎬ掌握分析问题㊁解决问题的思维方式ꎬ提升思维品质.日常学习过程中ꎬ通过小题大做来发散思维就是加深对数学思想和方法领悟的一个好方法.当我们遇到一些简单的小题时也会有不一样的灵感ꎬ感觉从不同途径入手都能解决问题.这往往意味着问题背后有着丰富的背景ꎬ此时我们不应放过这份灵感ꎬ而应该更加深入地去思考ꎬ进行一些探究式㊁发散式的学习.小题大做的目的就在于利用发散思维打通不同知识模块之间的壁垒ꎬ又或者完成从特殊到一般的延展.这样主动学习一个小问题所带来的解题能力乃至数学水平的提升ꎬ可能远远超过对一份试卷的机械刷题.解题是提升数学能力的手段ꎬ而不是数学学习的目的.解题活动不能是只求量不求质的刷题行为ꎬ解题一旦变成了简单的重复劳动ꎬ就意味着低效甚至无效.让我们的解题学习过程变得主动起来ꎬ让思维的运转更加活跃起来ꎬ才是提高思考和解决问题能力的有效途径.参考文献:[１]宋妮航ꎬ侯典峰.巧用向量数量积形式表示线段长度乘积解题[Ｊ].数学通讯ꎬ２０１８(０７):５９－６０.[２]李维ꎬ吴统胜.对２０２１年新高考全国Ⅰ卷第２１题的解法探究与变式拓展[Ｊ].数学通讯ꎬ２０２１(１６):４６－４９.[３]徐维武ꎬ朱贤良.利用向量数量积巧解一类线段长度乘积问题[Ｊ].数学通讯ꎬ２０２２(１３):２２－２３.㊀[４]田鹏.一道椭圆中两线段长度乘积为定值试题的探究[Ｊ].数理化学习(高中版)ꎬ２０２２(０６):１５－１８.[责任编辑:李㊀璟]。

游戏包文件结构分析（2）

游戏包⽂件结构分析（2）5.第⼆个例⼦——⼀个⼩游戏的包⽂件格式包⽂件是安装⽂件夹中最⼤的⽂件Game.dat。

这个格式⽤到了简单的异或加密，但是⽂件索引表⾮常简单，因为没有⽂件夹格式。

打开⽂件，发现有⼀些⽂件名(1.BMP，1.WAV)，⽽且每两个⽂件名的开头间隔⼀样，说明⽂件索引长度固定，为28。

可以看到⽂件名占20字节，⽂件名的空⽩⽤空格(0x20)来填充。

每两个⽂件名之间还有8个字节，即两个Int32。

可以估计其中⼀个是⽂件位置，另⼀个是⽂件长度。

图2 Game.dat⽂件头00000000h: 52 45 53 59 00 C2 09 00 00 88 47 03 00 4E 55 4D ; RESY.?..圙..NUM00000010h: 2E 42 4D 50 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 ; .BMP00000020h: 20 4B 51 03 00 C2 58 01 00 31 2E 42 4D 50 20 20 ; KQ..耎..1.BMP00000030h: 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 0E AA 04 ; .?00000040h: 00 2A 20 00 00 31 2E 57 41 56 20 20 20 20 20 20 ; .* ..1.WAV00000050h: 20 20 20 20 20 20 20 20 20 39 CA 04 00 C0 58 01 ; 9?.繶.00000060h: 00 32 2E 42 4D 50 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 ; .2.BMP00000070h: 20 20 20 20 20 FA 22 06 00 D8 AF 02 00 32 2E 57 ; ?..⼃..2.W00000080h: 41 56 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 ; AV00000090h: 20 D3 D2 08 00 C0 58 01 00 33 2E 42 4D 50 20 20 ; 右..繶..3.BMP000000a0h: 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 94 2B 0A ; ?.000000b0h: 00 1E 80 00 00 33 2E 57 41 56 20 20 20 20 20 20 ; ..€..3.WAV000000c0h: 20 20 20 20 20 20 20 20 20 B3 AB 0A 00 C0 58 01 ; 倡..繶.000000d0h: 00 34 2E 42 4D 50 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 ; .4.BMP000000e0h: 20 20 20 20 20 74 04 0C 00 04 50 01 00 34 2E 57 ; t....P..4.W000000f0h: 41 56 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 ; AV00000100h: 20 79 54 0D 00 C0 58 01 00 35 2E 42 4D 50 20 20 ; yT..繶..5.BMP00000110h: 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 3A AD 0E ; :?00000120h: 00 18 B0 00 00 35 2E 57 41 56 20 20 20 20 20 20 ; ..?.5.WAV00000130h: 20 20 20 20 20 20 20 20 20 53 5D 0F 00 C0 58 01 ; S]..繶.00000140h: 00 36 2E 42 4D 50 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 ; .6.BMP00000150h: 20 20 20 20 20 14 B6 10 00 08 30 01 00 36 2E 57 ; .?..0..6.W00000160h: 41 56 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 ; AV00000170h: 20 1D E6 11 00 C0 58 01 00 37 2E 42 4D 50 20 20 ; .?.繶..7.BMP00000180h: 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 DE 3E 13 ; ?.00000190h: 00 28 30 00 00 37 2E 57 41 56 20 20 20 20 20 20 ; .(0..7.WAV000001a0h: 20 20 20 20 20 20 20 20 20 07 6F 13 00 C0 58 01 ; .o..繶.000001b0h: 00 38 2E 42 4D 50 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 ; .8.BMP图3 Game.dat⽂件索引和第⼀个⽂件结合部00000970h: 00 C0 58 01 00 36 31 2E 42 4D 50 20 20 20 20 20 ; .繶..61.BMP00000980h: 20 20 20 20 20 20 20 20 20 7D 9C 82 00 C0 58 01 ; }渹.繶.00000990h: 00 36 32 2E 42 4D 50 20 20 20 20 20 20 20 20 20 ; .62.BMP000009a0h: 20 20 20 20 20 3E F5 83 00 B7 C2 0C 00 44 41 54 ; >鮾.仿..DAT000009b0h: 41 2E 42 4D 50 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 ; A.BMP000009c0h: 20 42 4C 84 44 07 05 06 07 08 09 3C 0F 0C 0D 26 ; BL凞......<...&000009d0h: 0F 10 11 02 11 14 15 83 16 18 19 1B 1B 14 1D 1E ; .......?.......000009e0h: 1F 20 21 72 60 27 25 34 2C 28 29 38 20 2C 2D 2E ; . !r`'%4,()8 ,-.000009f0h: 2F 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 3A 3B BC 3D 3E ; /0123456789:;?>00000a00h: BF 40 41 42 C3 C4 45 C6 47 48 49 CA 4B CC 4D CE ; 緻AB媚E艷HI蔏蘉?00000a10h: CF 50 51 92 93 94 55 96 8B 98 59 AA 91 FA 5D 5E ; 螾Q挀擴枊榊獞鷀^00000a20h: 7F 20 61 62 43 04 65 66 47 E8 69 6A 4B CC 6D 6E ; abC.efG鑙jK蘭n00000a30h: 4F B0 71 72 53 94 75 76 37 78 79 7A 3B 5C 7D 7E ; O皅rS攗v7xyz;\}~00000a40h: 3F C0 81 82 C3 E4 85 86 C7 08 89 8A CB 2C 8D 8E ; ?纴偯鋮喦.墛?崕00000a50h: CF 50 91 92 D3 74 95 96 F7 98 99 9A FB BC 9D 9E ; 螾憭觮晼鳂櫄潪00000a60h: FF E0 A1 A2 C3 C4 A5 A6 C7 28 A9 AA CB 0C AD AE ; ô唷⒚磨η(┆?往下翻，⼀直翻到索引结束，如图3。

胡桃楸果实表型性状及遗传多样性分析

㊀山东农业科学㊀２０２３ꎬ５５(５):２８~３４ＳｈａｎｄｏｎｇＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ㊀ＤＯＩ:１０.１４０８３/ｊ.ｉｓｓｎ.１００１－４９４２.２０２３.０５.００５收稿日期:２０２２－０８－１０基金项目:山东省自然科学基金项目(ＺＲ２０１９ＭＣ０５５)ꎻ山东省重点研发计划(重大科技创新工程)项目(２０２１ＬＺＧＣ０２３)ꎻ山东省农业良种工程项目子课题(２０１９ＬＺＧＣ０１８０５)ꎻ山东省草本植物种质资源普查项目(鲁财预指２０２１１号)作者简介:王子豪(１９９８ )ꎬ男ꎬ山东临沂人ꎬ硕士研究生ꎬ主要从事植物生态学方面研究ꎮＥ－ｍａｉｌ:２９４９３３９９４＠ｑｑ.ｃｏｍ通信作者:胡德昌(１９７８ )ꎬ男ꎬ山东潍坊人ꎬ博士ꎬ副教授ꎬ硕士生导师ꎬ主要从事植物生态学方面研究ꎮＥ－ｍａｉｌ:ｈｕｄｃｈ７８＠１６３.ｃｏｍ胡桃楸果实表型性状及遗传多样性分析王子豪１ꎬ苏迅１ꎬ解孝满２ꎬ仝伯强２ꎬ丁平２ꎬ韩彪２ꎬ刘丹２ꎬ张萍１ꎬ孔冬瑞１ꎬ胡德昌１(１.鲁东大学生命科学学院ꎬ山东烟台㊀２６４０２５ꎻ２.山东省林草种质资源中心ꎬ山东济南㊀２５００１４)㊀㊀摘要:基于山东地区３个不同地理居群(泰山居群㊁仰天山居群㊁昆嵛山居群)以及胡桃楸原生地吉林地区长白山居群的胡桃楸果实６个数量指标ꎬ开展方差分析㊁相关性分析以及聚类分析ꎬ并进行部分材料的ＩＴＳ序列比对ꎬ旨在探究其表型性状及遗传背景差异程度ꎮ结果表明:①供试材料的果实多为８个纵脊ꎬ具长尖ꎻ山东地区胡桃楸果实表面纹饰均较浅ꎬ变化相对丰富ꎬ而吉林地区材料表面纹饰均较深ꎬ差异较小ꎻ不同居群间果实表型性状存在极显著差异ꎬ而居群内则以泰山居群单株间的果实表型性状变异最为丰富ꎮ②表型性状的遗传力均在０.９３及以上ꎬ说明表型性状受较强的遗传特性控制ꎬ居群间差异相对稳定ꎻ不同地区间胡桃楸材料的欧式距离相对较小ꎬ推测居群间存在着基因交流ꎮ③不同材料的ＩＴＳ区域序列碱基位点变异无明显规律ꎬ呈现随机变化ꎬ且居群间遗传距离较小ꎻ供试群体总遗传变异中有４１.９９％发生在居群内ꎬ５８.０１％发生在居群间ꎻ４个居群间的遗传分化系数ＦＳＴ为０.６６５ꎬ基因流Ｎｍ为１.９３ꎬ存在着基因交流ꎮ遗传分析结果与果实表型性状分析结果基本一致ꎬ个体的表型性状与遗传背景存在明显相关性ꎬ但遗传距离与地理分布距离间的相关性并不明显ꎮ关键词:胡桃楸ꎻ果实ꎻ表型性状ꎻＩＴＳ序列ꎻ遗传多样性中图分类号:Ｓ７９２.１３２.０１㊀㊀文献标识号:Ａ㊀㊀文章编号:１００１－４９４２(２０２３)０５－００２８－０７ＡｎａｌｙｓｉｓｏｆＦｒｕｉｔＰｈｅｎｏｔｙｐｉｃＣｈａｒａｃｔｅｒｓａｎｄＧｅｎｅｔｉｃＤｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＪｕｇｌａｎｓｍａｎｄｓｈｕｒｉｃａＷａｎｇＺｉｈａｏ１ꎬＳｕＸｕｎ１ꎬＸｉｅＸｉａｏｍａｎ２ꎬＴｏｎｇＢｏｑｉａｎｇ２ꎬＤｉｎｇＰｉｎｇ２ꎬＨａｎＢｉａｏ２ꎬＬｉｕＤａｎ２ꎬＺｈａｎｇＰｉｎｇ１ꎬＫｏｎｇＤｏｎｇｒｕｉ１ꎬＨｕＤｅｃｈａｎｇ１(１.ＳｃｈｏｏｌｏｆＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅｓꎬＬｕｄｏｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬＹａｎｔａｉ２６４０２５ꎬＣｈｉｎａꎻ２.ＳｈａｎｄｏｎｇＦｏｒｅｓｔａｎｄＧｒａｓｓＧｅｒｍｐｌａｓｍＲｅｓｏｕｒｃｅｓＣｅｎｔｅｒꎬＪｉｎａｎ２５００１４ꎬＣｈｉｎａ)Ａｂｓｔｒａｃｔ㊀ＢａｓｅｄｏｎｓｉｘｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅｉｎｄｅｘｅｓｏｆＪｕｇｌａｎｓｍａｎｄｓｈｕｒｉｃａｆｒｕｉｔｓｆｒｏｍｔｈｒｅｅＳｈａｎｄｏｎｇｐｏｐｕｌａ￣ｔｉｏｎｓ(ＴａｉｓｈａｎꎬＹａｎｇｔｉａｎｓｈａｎａｎｄＫｕｎｙｕｓｈａｎｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ)ａｎｄｏｎｅＣｈａｎｇｂａｉｓｈａｎｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｉｎＪｉｌｉｎＰｒｏｖ￣ｉｎｃｅꎬｔｈｅａｎａｌｙｓｅｓｏｆｖａｒｉａｎｃｅꎬｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎａｎｄｃｌｕｓｔｅｒｗｅｒｅｃｏｎｄｕｃｔｅｄꎬａｎｄａｌｓｏｔｈｅＩＴＳｓｅｑｕｅｎｃｅｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｏｆｓｏｍｅｍａｔｅｒｉａｌｓꎬｉｎｏｒｄｅｒｔｏｅｘｐｌｏｒｅｔｈｅｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓｉｎｐｈｅｎｏｔｙｐｉｃｔｒａｉｔｓａｎｄｇｅｎｅｔｉｃｂａｃｋｇｒｏｕｎｄ.Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｗｅｒｅａｓｆｏｌｌｏｗｓ.①Ｍｏｓｔｏｆｔｈｅｆｒｕｉｔｓｏｆｔｈｅｔｅｓｔｅｄｍａｔｅｒｉａｌｓｈａｄ８ｌｏｎｇｉｔｕｄｉｎａｌｒｉｄｇｅｓａｎｄｌｏｎｇｔｉｐｓ.ＴｈｅｓｕｒｆａｃｅｄｅｃｏｒａｔｉｏｎｏｆｔｈｅｆｒｕｉｔｓｆｒｏｍＳｈａｎｄｏｎｇＰｒｏｖｉｎｃｅｗａｓｓｈａｌｌｏｗｅｒｗｉｔｈｒｅｌａｔｉｖｅｌｙｒｉｃｈｅｒｃｈａｎｇｅｓꎬｗｈｉｌｅｔｈａｔｏｆｆｒｕｉｔｓｆｒｏｍＪｉｌｉｎＰｒｏｖｉｎｃｅｗａｓｄｅｅｐｅｒｗｉｔｈｓｍａｌｌｅｒｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ.Ｔｈｅｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｉｎｆｒｕｉｔｐｈｅｎｏｔｙｐｉｃｃｈａｒａｃ￣ｔｅｒｓｗａｓｖｅｒｙｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔａｍｏｎｇｄｉｆｆｅｒｅｎｔｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓꎬａｎｄｔｈａｔａｍｏｎｇｓｉｎｇｌｅｐｌａｎｔｓｉｎＴａｉｓｈａｎｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｈａｄｔｈｅｒｉｃｈｅｓｔｖａｒｉａｔｉｏｎ.②Ｔｈｅｈｅｒｉｔａｂｉｌｉｔｙｏｆｐｈｅｎｏｔｙｐｉｃｔｒａｉｔｓｗａｓｍｏｒｅｔｈａｎ０.９３ꎬｗｈｉｃｈｉｎｄｉｃａｔｅｄｔｈａｔｔｈｅｐｈｅ￣ｎｏｔｙｐｉｃｔｒａｉｔｓｗｅｒｅｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄｂｙｓｔｒｏｎｇｅｒｇｅｎｅｔｉｃｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓꎬａｎｄｔｈｅｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓａｍｏｎｇｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓｗｅｒｅｒｅｌａｔｉｖｅｌｙｓｔａｂｌｅ.ＴｈｅＥｕｃｌｉｄｅａｎｄｉｓｔａｎｃｅｂｅｔｗｅｅｎＪ.ｍａｎｄｓｈｕｒｉｃａｍａｔｅｒｉａｌｓｆｒｏｍｄｉｆｆｅｒｅｎｔｒｅｇｉｏｎｓｗａｓｒｅｌａｔｉｖｅｌｙｓｍａｌｌꎬｗｈｉｃｈｃｏｕｌｄｂｅｉｎｆｅｒｒｅｄｔｈａｔｔｈｅｒｅｗａｓｇｅｎｅｆｌｏｗａｍｏｎｇｄｉｆｆｅｒｅｎｔｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ.③ＴｈｅｂａｓｅｓｉｔｅｖａｒｉａｔｉｏｎｏｆＩＴＳｓｅｑｕｅｎｃｅａｍｏｎｇｄｉｆｆｅｒｅｎｔｍａｔｅｒｉａｌｓｓｈｏｗｅｄｒａｎｄｏｍｃｈａｎｇｅｗｉｔｈｏｕｔｏｂｖｉｏｕｓｒｕｌｅꎬａｎｄｔｈｅｇｅｎｅｔｉｃｄｉｓ￣ｔａｎｃｅｂｅｔｗｅｅｎｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓｗａｓｓｍａｌｌ.Ｔｈｅｒｅｗｅｒｅ４１.９９％ｏｆｔｈｅｔｏｔａｌｇｅｎｅｔｉｃｖａｒｉａｔｉｏｎｏｃｃｕｒｒｅｄｗｉｔｈｉｎｐｏｐｕｌａ￣ｔｉｏｎｓａｎｄ５８.０１％ａｍｏｎｇｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ.ＴｈｅｇｅｎｅｔｉｃｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔＦＳＴａｍｏｎｇｔｈｅｆｏｕｒｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓｗａｓ０.６６５ａｎｄｔｈｅｇｅｎｅｆｌｏｗＮｍｗａｓ１.９３ꎬｉｎｄｉｃａｔｉｎｇｔｈｅｐｒｅｓｅｎｃｅｏｆｇｅｎｅｅｘｃｈａｎｇｅ.Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｏｆｆｒｕｉｔｐｈｅｎｏｔｙｐ￣ｉｃｔｒａｉｔｓａｎａｌｙｓｉｓａｎｄｇｅｎｅｔｉｃａｎａｌｙｓｉｓｗｅｒｅｂａｓｉｃａｌｌｙｃｏｎｓｉｓｔｅｎｔ.Ｔｈｅｐｈｅｎｏｔｙｐｉｃｔｒａｉｔｓｏｆｉｎｄｉｖｉｄｕａｌｓｗｅｒｅｏｂｖｉ￣ｏｕｓｌｙｒｅｌａｔｅｄｔｏｔｈｅｇｅｎｅｔｉｃｂａｃｋｇｒｏｕｎｄꎬｂｕｔｔｈｅｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎｂｅｔｗｅｅｎｇｅｎｅｔｉｃｄｉｓｔａｎｃｅａｎｄｇｅｏｇｒａｐｈｉｃａｌｄｉｓｔｒｉｂｕ￣ｔｉｏｎｄｉｓｔａｎｃｅｗａｓｎｏｔｏｂｖｉｏｕｓ.Ｋｅｙｗｏｒｄｓ㊀ＪｕｇｌａｎｓｍａｎｄｓｈｕｒｉｃａꎻＦｒｕｉｔꎻＰｈｅｎｏｔｙｐｉｃｔｒａｉｔｓꎻＩＴＳｓｅｑｕｅｎｃｅꎻＧｅｎｅｔｉｃｄｉｖｅｒｓｉｔｙ㊀㊀胡桃楸(ＪｕｇｌａｎｓｍａｎｄｓｈｕｒｉｃａＭａｘｉｍ.)为胡桃科(Ｊｕｇｌａｎｄａｃｅａｅ)胡桃属(ＪｕｇｌａｎｓＬ.)植物ꎬ又称核桃楸㊁野核桃ꎬ是一种高大温带落叶乔木ꎬ常作材用ꎬ与水曲柳和黄波罗并称东北地区三大阔叶树种ꎬ且种仁可食[１ꎬ２]ꎮ作为核桃的近缘种ꎬ与栽培核桃杂交育种㊁用作核桃砧木等成为近年胡桃楸研究的热点[３－５]ꎮ另外ꎬＸｕ等[６]揭示了核桃青皮酚类物质能够有效抵御胶孢炭疽菌ꎬ对下一步开发植物源核桃炭疽病绿色防控农药具有重要意义ꎮ因此ꎬ对胡桃楸进行相关研究具有巨大实际应用潜力ꎮ果实作为繁殖器官ꎬ与叶片等营养器官相比特征相对稳定ꎬ能在不同地理位置㊁复杂多变的环境下表现出较强的适应性ꎬ能较好地体现进化上的变异规律ꎮ陈思羽等[７]发现分布在长白山不同区域的核桃楸ꎬ种子质量㊁种子长度和种子宽度等性状变异明显ꎮ宋佳兴等[８]将辽东山区胡桃楸种质资源的果实根据表型性状划分为球形㊁卵形等十余种果实形态ꎬ变异类型丰富ꎮ高张莹等[９]认为不同种群间核桃楸果核性状存在极显著差异ꎬ主要受生境因子影响ꎬ但也受到很强的遗传控制ꎬ基于表型性状数据的聚类结果与地理分布并不完全一致ꎬ呈现随机变异特征ꎮ李红莉等[１０]研究得知黑龙江野生毛榛果实表型性状多样性丰富ꎮ张深梅等[１１]调查发现大别山１９个核桃野生居群的果实表型性状在居群间和居群内均存在极显著差异ꎬ具有丰富的表型变异ꎮ董胜君等[１２]发现东北杏的果实性状变异较为丰富ꎬ且变异主要来源于居群间ꎮ王尧等[１３]研究得知山东省盐肤木果实表型性状多样性较为丰富ꎬ变异以居群间变异为主ꎬ而且受地理位置影响明显ꎬ可作为盐肤木优质种源筛选的重要指标ꎮ可见ꎬ以果实作为试验材料能更直观地反映胡桃楸各个居群间的表型差异ꎮ胡桃楸主要分布于我国东北及华北地区ꎬ然而近几年的资源普查发现山东省的泰山㊁仰天山㊁昆嵛山等地也有部分自然种群分布ꎬ呈现狭域分布格局ꎮ目前ꎬ该物种已被列为山东省珍稀濒危植物ꎬ相关的物种保护工作也已开展[１４－１６]ꎮ由于个体数量少且结实率低㊁啮齿类动物取食以及人为采集等因素影响ꎬ获取一定数量的群体样本和果实材料相对困难ꎬ这导致胡桃楸种质资源相关研究甚少ꎮ前期研究结果表明ꎬ各居群胡桃楸存在一定程度的表型性状分化ꎬ遗传背景不明确ꎮ因此ꎬ为探究不同种源地胡桃楸果实变异规律及造成其形态学特征差异的原因ꎬ本研究采集山东地区３个生境的地理居群以及胡桃楸原生地吉林地区的长白山居群共１３个单株的２８９枚胡桃楸果实ꎬ测定其表型性状ꎬ并通过差异性㊁相关性及聚类分析研究其变异程度ꎬ同时ꎬ基于ＩＴＳ区域测序获得的生物学信息检测其遗传多样性水平ꎬ挖掘各居群的遗传背景ꎬ以期为胡桃楸种质资源的分类鉴定㊁物种保护㊁资源圃建立以及核桃新品种选育等提供参考ꎮ１㊀材料与方法１.１㊀果实材料采集本试验对山东地区胡桃楸主要居群泰山居群(ＴＳꎬ１１７.１０ʎＥ㊁３６.２５ʎＮꎬ山东泰安)㊁仰天山居群(ＹＴＳꎬ１１８.４５ʎＥ㊁３６.７１ʎＮꎬ山东潍坊)㊁昆嵛山居群(ＫＹＳꎬ１２１.７４ʎＥ㊁３７.３０ʎＮꎬ山东烟台)以及吉林地区长白山居群(ＣＢＳꎬ１２１.０８ʎＥ㊁３８.４６ʎＮꎬ吉林延边)分别进行单株取样ꎻ居群内各供试植株相距１００ｍ以上ꎬ以避免克隆单株ꎮ于２０２１年９月９２㊀第５期㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀王子豪ꎬ等:胡桃楸果实表型性状及遗传多样性分析底到１０月初果实成熟期采集成熟果实ꎬ分别编号并带回实验室ꎬ人工剥离青皮获得内果实ꎬ蒸馏水清洗干净后ꎬ置于通风良好处室温条件下风干ꎬ然后装入自封袋保存备用ꎮ共收集到４个胡桃楸居群１３个单株的２８９枚果实(表１)ꎮ由于结实数量存在差异ꎬ从各单株采集的果实数量不同ꎬ部分单株已达取样极大值ꎮ其中ꎬ泰山居群６个单株１４０枚果实ꎬ仰天山居群２个单株６０枚果实ꎬ昆嵛山居群２个单株４６枚果实ꎬ长白山居群３个单株４３枚果实ꎮ㊀㊀表１㊀试验材料编号居群名称单株数量(株)单株编号单株果实数量(枚)合计果实数量(枚)ＴＳ泰山居群６ＴＳ０１３０ＴＳ０２３０ＴＳ０３２０ＴＳ０４２０ＴＳ０５２０ＴＳ０６２０１４０ＹＴＳ仰天山居群２ＹＴＳ０１３０ＹＴＳ０２３０６０ＫＹＳ昆嵛山居群２ＫＹＳ０１１６ＫＹＳ０２３０４６ＣＢＳ长白山居群３ＣＢＳ０１１０ＣＢＳ０２１４ＣＢＳ０３１９４３总数１３２８９１.２㊀ＤＮＡ提取于各供试单株上分别采集成熟叶片３~５枚ꎬ迅速置入盛有变色硅胶的封口塑料袋内带回实验室ꎮ随机抽取泰山居群的４个单株㊁仰天山居群的２个单株㊁昆嵛山居群的２个单株㊁长白山居群的３个单株共计１１份材料进行ＩＴＳ区域测序分析ꎮ应用ＣＴＡＢ法进行ＤＮＡ提取ꎬ并通过紫外分光光度计和琼脂糖凝胶电泳检测其浓度及质量ꎬ－２０ħ保存备用ꎮ１.３㊀果实表型性状数据获取与统计分析使用游标卡尺(精准度ʃ０.２ｍｍ)测量胡桃楸果实的横径(垂直于纵轴无棱处最大横截面的长度)㊁侧径(垂直于纵轴的２条纵棱之间的长度)与纵径(果实纵轴的长度)ꎬ精确到０.００１ｍｍꎬ并计算果型指数(果型指数＝纵径/横径)ꎬ果型指数０.９~１.１为圆形ꎬ>１.１~ɤ１.５为椭圆形ꎬ>１.５为长椭圆形ꎮ人工观察判断果核尖端类型㊁表面纹饰㊁纵脊数目等特征ꎬ果核尖端类型分为长尖㊁渐尖㊁无尖三种ꎬ表面沟纹分为深㊁浅两种ꎮ运用ＭｉｃｒｏｓｏｆｔＥｘｃｅｌ２０１６软件进行数据处理ꎬ采用ＳＰＳＳ２５.０软件进行统计分析ꎮ不同居群果实表型性状差异采用单因素方差分析(ＡＮＯ￣ＶＡ)ꎬ用Ｄｕｎｃａｎｓ最小显著差异法进行多重比较ꎬ显著㊁极显著水平分别设置为０.０５㊁０.０１ꎻ将数据进行标准化转换ꎬ采用组间联结－系统聚类法ꎬ以欧式平方距离进行聚类分析ꎻ采用Ｐｅａｒｓｏｎ法进行相关性分析ꎮ变异系数ＣＶ＝Ｓ/Ｘˑ１００％ꎬ其中Ｓ为性状标准差ꎬＸ为性状平均值ꎻ相对极差ＲＲ＝(Ｘｍａｘ－Ｘｍｉｎ)/Ｘˑ１００％ꎬ其中Ｘｍａｘ㊁Ｘｍｉｎ分别为性状最大㊁最小值ꎻ居群遗传力Ｈ２＝１－１/Ｆꎬ其中Ｆ为方差分析中的Ｆ检验值ꎻ三径均值Ｄ＝(Ｄ纵径＋Ｄ横径＋Ｄ侧径)/３ꎻ果实体积Ｖ＝４/３π(１/２Ｄ)３ꎮ１.４㊀ＩＴＳ片段ＰＣＲ扩增与数据分析应用ＰＣＲ技术特异扩增１１份胡桃楸材料相关ＩＴＳ片段ꎬ并进行序列分析ꎬ获得遗传信息ꎬ检测变异程度ꎮ引物序列(ＩＴＳ４:５ᶄ－ＴＣＣＴＣＣＧＣＴ￣ＴＡＴＴＧＡＴＡＴＧＣ－３ᶄꎻＩＴＳ５:５ᶄ－ＧＧＡＡＧＴＡＡＡＡＧＴＣＧＴＡＡＣＡＡＧＧ－３ᶄ)㊁扩增体系及扩增程序参考张浩[１７]的方案ꎮ引物合成及所获得的ＰＣＲ产物单向测序委托生工生物工程(上海)股份有限公司进行ꎮ利用ＭＥＧＡ－Ｘ软件对序列信息进行比对ꎬ分别计算各片段的碱基含量㊁变异位点数目㊁简约性信息位点等信息ꎮ运用ＤＮＡｓｐ５软件计算ＩＴＳ序列单倍型多样性指数(Ｈｄ)㊁核苷酸多样性指数(Ｐｉ)以及平均核苷酸多样性差异(Ｋ)等相关遗传多样性指数ꎻ应用Ａｒｌｅｑｕｉｎ３.５软件对ＩＴＳ区域遗传信息进行分子方差(ＡＭＯＶＡ)分析ꎬ计算其遗传分化系数(ＦＳＴ)及基因流(Ｎｍ)ꎬ检测胡桃楸居群内和居群间的遗传变异关系ꎮ２㊀结果与分析２.１㊀不同居群胡桃楸果实表型性状差异性分析如图１所示ꎬ山东地区不同居群胡桃楸果实表面纹饰均较浅ꎬ多为８个纵脊㊁具长尖(仅泰山居群１７枚果实具渐尖和无尖)ꎬ而吉林地区长白山居群多为表面纹饰较深㊁８个纵脊㊁具长尖ꎮ经０３㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀山东农业科学㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀第５５卷㊀比较ꎬ所收集的泰山居群果实体积中等ꎬ果型变化丰富ꎬ１４０枚果实中ꎬ５７.９％(８１枚)为椭圆形ꎬ３０.０％(４２枚)为长椭圆形ꎬ１２.１％(１７枚)为圆形ꎻ仰天山居群胡桃楸果实体积偏大ꎬ５１.７％(３１枚)为椭圆形ꎬ４８.３％(２９枚)为长椭圆形ꎻ昆嵛山居群果实体积整体较小ꎬ８４.８％(３９枚)为椭圆形ꎬ１５.２％(７枚)为长椭圆形ꎻ长白山居群胡桃楸果实体积最大ꎬ３２.６％(１４枚)为椭圆形ꎬ６７.４％(２９枚)为长椭圆形ꎮ４个居群胡桃楸果实的横径㊁侧径㊁纵径㊁果型指数㊁三径均值㊁体积变幅分别为１.８５~３.１５ｃｍ㊁１.８９~３.２５ｃｍ㊁２.１７~５.１７ｃｍ㊁１.００~２.１３㊁２.０３~３.９６ｃｍ㊁４.３８~３２.５０ｃｍ３ꎬ平均值分别为２.３９ｃｍ㊁２.５１ｃｍ㊁３.３４ｃｍ㊁１.４０㊁２.７７ｃｍ㊁１１.５６ｃｍ３ꎬ变异系数在７.５６％~３６.０７％之间ꎬ经Ｆ检验居群间差异均达极显著水平(Ｐ<０.０１)ꎬ遗传力分别为０.９３㊁０.９７㊁０.９８㊁０.９７㊁０.９８㊁０.９８(表２)ꎬ推断这些果实表型性状受较强的遗传特性控制ꎬ居群间差异相对稳定ꎮ不同居群中ꎬ各单株果实表型性状的变化程度存在差异ꎮ对比果型指数ꎬＣＢＳ与ＹＴＳ居群内个体间无显著差异ꎬ果实性状相似度较高ꎻ极值(最大２.１４ꎬ最小０.９３)均出现在ＴＳ居群材料内ꎬ说明该居群个体间差异明显ꎬ果实类型最为丰富ꎬ其中ＴＳ０１与ＴＳ０２㊁ＴＳ０５单株之间差异显著ꎬＴＳ０３㊁ＴＳ０４㊁ＴＳ０６之间差异不显著ꎮＡꎬ泰山居群ꎻＢꎬ仰天山居群ꎻＣꎬ昆嵛山居群ꎻＤꎬ长白山居群ꎮ图１㊀不同地理居群的胡桃楸果实㊀㊀表２㊀不同居群胡桃楸果实表型性状统计分析结果项目材料横径(ｃｍ)侧径(ｃｍ)纵径(ｃｍ)果型指数三径均值(ｃｍ)体积(ｃｍ３)ＴＳ０１２.３８ʃ０.３７ａｂｃｄ２.５３ʃ０.２２ｂ３.８８ʃ０.８９ｅｆ１.６３ʃ０.５０ｅ２.９３ʃ０.２３ｅｆ１３.２３ʃ３.２８ｄｅＴＳ０２２.２５ʃ０.４０ａ２.２７ʃ０.５３ａ３.２２ʃ１.０５ｂｃ１.４３ʃ０.６１ｃ２.５８ʃ０.６１ａｂ９.３８ʃ７.６０ａｂＴＳ０３２.４４ʃ０.７２ｂｃｄ２.６５ʃ０.５３ｂｃ２.７２ʃ０.８６ａ１.１２ʃ０.１９ａ２.６０ʃ０.７０ａｂｃ９.４１ʃ９.３９ａｂＴＳ０４２.６７ʃ０.２７ｆ２.８１ʃ０.４４ｄ３.１６ʃ０.５０ｂｃ１.１９ʃ０.１９ａｂ２.８８ʃ０.２１ｄｅ１２.５４ʃ２.５８ｃｄＴＳ０５２.３６ʃ０.１３ａｂｃ２.５７ʃ０.４２ｂ３.３５ʃ０.６４ｃｄ１.４２ʃ０.２９ｃ２.７６ʃ０.２５ｃｄ１１.０９ʃ３.０１ｂｃＴＳ０６２.５０ʃ０.３６ｄｅ２.５６ʃ０.６４ｂ３.０６ʃ０.５６ｂｃ１.２２ʃ０.１９ａｂ２.７１ʃ０.４６ｂｃ１０.５５ʃ６.１２ａｂｃＹＴＳ０１２.４７ʃ０.３９ｃｄｅ２.７６ʃ０.２６ｃｄ３.７１ʃ０.２７ｅ１.５０ʃ０.２９ｃｄ２.９８ʃ０.２５ｅｆ１３.８５ʃ３.２０ｄｅｆＹＴＳ０２２.４７ʃ０.１４ｃｄｅ２.７３ʃ０.１６ｃｄ３.６６ʃ０.２７ｄｅ１.４８ʃ０.０８ｃ２.９５ʃ０.１６ｅｆ１３.４８ʃ２.１２ｄｅｆＫＹＳ０１２.３１ʃ０.３２ａｂ２.３８ʃ０.３４ａ３.３９ʃ０.６５ｃｄ１.４７ʃ０.２７ｃ２.６９ʃ０.４２ｂｃ１０.２８ʃ３.９９ａｂＫＹＳ０２２.２６ʃ０.３６ａ２.３６ʃ０.２７ａ２.９３ʃ０.４８ａｂ１.３０ʃ０.１６ｂ２.５２ʃ０.３０ａ８.４２ʃ３.３１ａＣＢＳ０１２.５８ʃ０.３８ｅｆ２.５８ʃ０.２９ｂ４.１５ʃ１.３７ｆ１.６０ʃ０.３４ｄｅ３.１０ʃ０.６８ｆ１６.１１ʃ８.６７ｆＣＢＳ０２２.５１ʃ０.３０ｄｅ２.６４ʃ０.２５ｂｃ４.１４ʃ０.５０ｆ１.６６ʃ０.１９ｅ３.１０ʃ０.３４ｆ１５.６２ʃ５.６７ｆｇＣＢＳ０３２.４８ʃ０.５２ｃｄｅ２.５５ʃ０.５２ｂ４.１１ʃ１.０６ｆ１.６５ʃ０.３０ｅ３.０５ʃ０.６３ｅｆ１５.２７ʃ１０.７３ｅｆｇ各居群材料均值ＴＳ２.４１ʃ０.７４ｂ２.５４ʃ０.７１ｂ３.２８ʃ１.４８ａ１.３６ʃ０.７７ａ２.７４ʃ０.７１ｂ１１.０７ʃ７.６４ｂＹＴＳ２.４７ʃ０.３９ｂｃ２.７４ʃ０.２４ｃ３.６８ʃ０.２８ｂ１.４９ʃ０.３０ｂ２.９６ʃ０.２３ｃ１３.６７ʃ３.０２ｃＫＹＳ２.２８ʃ０.４２ａ２.３５ʃ０.３７ａ３.３０ʃ１.０５ａ１.３１ʃ０.４３ａ２.５４ʃ０.４６ａ８.６５ʃ５.６２ａＣＢＳ２.５１ʃ０.５１ｃ２.５８ʃ０.５２ｂ４.１３ʃ１.３５ｃ１.６４ʃ０.３８ｃ３.０８ʃ０.６６ｄ１５.７７ʃ１０.３１ｄ所有材料均值２.３９２.５１３.３４１.４０２.７７１１.５６Ｆ值１４.９９３∗∗３２.７４８∗∗５４.５１９∗∗３０.６７４∗∗５３.５５７∗∗５７.３８０∗∗居群遗传力０.９３０.９７０.９８０.９７０.９８０.９８变异系数(％)７.５６９.０１１６.３８１４.０４１１.２４３６.０７相对极差(％)５４.８１５４.５８８９.５２８０.７１６９.６８２４３.２５㊀㊀注:∗∗表示差异极显著(Ｐ<０.０１)ꎮ同列数据后不同小写字母表示差异显著(Ｐ<０.０５)ꎮ１３㊀第５期㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀王子豪ꎬ等:胡桃楸果实表型性状及遗传多样性分析２.２㊀胡桃楸果实表型性状间的相关性分析由表３可知ꎬ胡桃楸果实的横径㊁侧径㊁纵径㊁体积㊁三径均值间均呈极显著正相关关系ꎬ果型指数与果实纵径㊁三径均值㊁体积均极显著正相关ꎬ表明果实横径㊁侧径㊁纵径的变异具有互相适应的协同变化特征ꎮ㊀㊀表３㊀胡桃楸果实表型性状间的相关性系数相关横径侧径纵径果型指数三径均值体积横径１.００００.７５９∗∗０.４４０∗∗－０.０３００.７５４∗∗０.７４６∗∗侧径１.００００.３７５∗∗０.００８０.７０７∗∗０.６７９∗∗纵径１.００００.８８０∗∗０.８９８∗∗０.８９８∗∗果型指数１.００００.６０６∗∗０.６０２∗∗三径均值１.００００.９９０∗∗体积１.０００㊀㊀注:∗∗表示相关性达极显著水平(Ｐ<０.０１)ꎮ２.３㊀基于果实表型性状的不同居群胡桃楸材料聚类分析根据胡桃楸果实表型性状数据ꎬ运用欧氏距离类平均法进行聚类分析ꎬ结果(图２)显示ꎬ在欧氏距离２５.０处ꎬ可将胡桃楸居群分为２组ꎬ第１组包括ＣＢＳ０１㊁ＣＢＳ０２㊁ＣＢＳ０３㊁ＴＳ０１㊁ＴＳ０４㊁ＹＴＳ０１㊁ＹＴＳ０２ꎬ第２组包括ＴＳ０２㊁ＴＳ０３㊁ＴＳ０５㊁ＴＳ０６㊁ＫＹＳ０１㊁ＫＹＳ０２ꎮ可见泰山居群内多样性更丰富ꎬ呈现一定程度的分化ꎬ分别与长白山居群㊁昆嵛山居群有一定程度的相似ꎮ供试材料间欧氏距离相对较小ꎬ相互混杂ꎬ推断山东地区胡桃楸不同居群间以及与长白山居群间存在着基因交流ꎮ图２㊀基于欧氏距离构建的不同居群㊀㊀胡桃楸果实表型特征聚类图２.４㊀基于ＩＴＳ序列的不同居群胡桃楸遗传分析由表４可见ꎬＹＴＳ居群的Ｈｄ㊁Ｐｉ㊁Ｋ值均为零ꎬ其余３个居群的Ｈｄ均为１.０００㊁Ｐｉ和Ｋ均表现为ＣＢＳ>ＫＹＳ>ＴＳꎬ表明ＹＴＳ居群遗传多样性水平最低ꎬＴＳ和ＫＹＳ居群遗传多样性相对偏高ꎬＣＢＳ居群遗传多样性最高ꎮ测序信息经比对后ꎬ不同材料的碱基变异位点无明显规律ꎬ呈现随机变化ꎮ综合上述结论ꎬ果实表型性状分析结果与遗传分析结果基本一致ꎮ因此ꎬ推断山东地区３个胡桃楸居群以及东北地区ＣＢＳ居群各个体的表型性状与遗传背景存在一定程度的相关性ꎮ由遗传距离分析结果(表５)可知ꎬ４个胡桃楸居群间遗传距离普遍较小(０.００１~０.０４８)ꎬ平均值为０.０２７ꎬ其中ＴＳ与ＫＹＳ居群遗传距离相对较远ꎬ呈现最大遗传距离(０.０４８)ꎻ而ＴＳ与ＹＴＳ居群遗传距离相对较近ꎬ遗传距离最小(０.００１)ꎮＣＢＳ居群与ＴＳ㊁ＹＴＳ㊁ＫＹＳ居群地理距离较远ꎬ但居群间遗传距离较小ꎬ表明各胡桃楸居群间的遗传距离与地理距离间未表现明显的相关性ꎮ㊀㊀表４㊀基于ＩＴＳ序列的胡桃楸居群遗传多样性居群编号单倍型多样性指数Ｈｄ核苷酸多样性指数Ｐｉ平均核苷酸多样性差异ＫＴＳ１.００００.００２１.６６７ＹＴＳ０.００００.００００.０００ＫＹＳ１.００００.００３２.０００ＣＢＳ１.００００.０３９２７.０００平均值０.７５００.０１５７.６６７㊀㊀表５㊀基于ＩＴＳ序列的胡桃楸居群间遗传距离居群编号ＴＳＹＴＳＫＹＳＹＴＳ０.００１ＫＹＳ０.０４８０.０４８ＣＢＳ０.０１８０.０１７０.０３２㊀㊀应用Ａｒｌｅｑｕｉｎ３.５软件对ＩＴＳ区域遗传信息进行分子方差(ＡＭＯＶＡ)分析ꎬ结果(表６)显示该物种群体总遗传变异中有４１.９９％发生在居群内ꎬ５８.０１％的变异发生在居群间ꎮ３个胡桃楸居群间的遗传分化系数ＦＳＴ为０.６６５ꎬ居群间基因流Ｎｍ较大ꎬ为１.９３ꎬ表明胡桃楸居群间存在基因交流ꎮ㊀㊀表６㊀胡桃楸居群ＩＴＳ序列ＡＭＯＶＡ分析变异来源自由度总方差变异成分变异比例(％)居群间３６１.２２７６.０１９Ｖａ５８.０１居群内７３０.５００４.３５７Ｖｂ４１.９９３㊀讨论与结论植物个体的表型性状是基因型与环境共同作２３㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀山东农业科学㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀第５５卷㊀用的结果ꎮ变异系数越大说明对环境适应性越强ꎬ变异系数小则说明性状相对稳定ꎬ遗传稳定性较好ꎬ不易受到环境等因素的影响ꎮ胡桃楸果实体积㊁形状等相关指标均属于数量性状ꎬ与个体生长的立地生境和树木生理年龄等因素存在一定相关性ꎮ于国斌[１８]发现东北地区胡桃楸果实存在丰富的变异类型ꎬ不同种源地的胡桃楸果实横径㊁纵径㊁侧径之间有显著性差异ꎬ推断变异类型受多种环境因素影响ꎮＣｏｓｍｕｌｅｓｃｕ等[１９]对核桃属Ｊ.ｒｅｇｉａ的坚果形态学特征进行比较后认为所观察的性状变异可能是由农业气候条件和果实自身繁殖特性引起ꎮ本研究结果表明ꎬ胡桃楸果实６个表型性状的变异系数在７.５６％~３６.０７％之间ꎬ在居群间存在极显著差异ꎬ４个居群的地理位置㊁气候条件和种群大小存在较大差异可能是导致其果实性状变异的主要原因ꎻ另外ꎬ泰山居群的果实类型最为丰富ꎬ表明居群内的单株间也存在一定程度的遗传变异ꎻ与逄宏扬等[２０]的研究结果一致ꎬ本研究也发现胡桃楸果实横径㊁侧径㊁纵径之间存在极显著正相关关系ꎬ表明这三个性状间具有互相适应的协同变化特征ꎮ丰富的形态多样性可为后期进行胡桃楸资源收集和种质保存提供研究基础ꎮ聚类分析结果显示ꎬ泰山居群胡桃楸果实表型性状呈现一定程度的分化ꎬ分别与长白山和仰天山居群㊁昆嵛山居群的果实表型较为相似ꎬ而且居群间遗传距离较小ꎬ判断可能存在着基因交流ꎻ而仰天山居群与昆嵛山居群间表型性状差异较大ꎬ未聚在一起ꎮ表明这４个居群的胡桃楸果实形态特征呈现片断化分布ꎬ这与高张莹等[９]的核桃楸果核形态特征在部分地区呈现区域板块化特征的结论一致ꎮ当遗传基础较窄时ꎬ为适应复杂的生态环境ꎬ物种的表型性状有可能会随着外界环境条件的变化而产生与之相适应的遗传变异ꎮ宋佳兴等[８]调查发现立地条件相对一致的胡桃楸果实表现出丰富的变异类型ꎬ推断胡桃楸种群具有丰富的遗传多样性ꎮ高张莹等[９]研究发现东北到华北天然分布的９个核桃楸种群间果核性状存在极显著差异ꎬ且各性状的遗传力均大于０.９ꎬ受到很强的遗传控制ꎬ各表型性状并未完全按地理距离而聚类ꎮ本研究基于ＩＴＳ序列分析结果显示ꎬ山东地区的仰天山居群遗传多样性水平最低ꎬ泰山居群㊁昆嵛山居群和长白山居群遗传多样性相对偏高ꎻ基于形态学特征分析的结果也表明仰天山居群果实表型性状较为单一ꎬ泰山居群的性状变异相对丰富ꎮ两方面分析所得结论基本一致ꎬ推断胡桃楸果实表型性状的差异是其适应不同生境条件的方式之一ꎬ且这种变异是不连续的ꎬ可能受遗传多样性影响ꎮ因此ꎬ若要完全阐明胡桃楸果实表型变异规律ꎬ还需进一步扩大种质资源的收集范围ꎬ并结合分子手段对其遗传多样性和亲缘关系等进行深入研究ꎮ参㊀考㊀文㊀献:[１]㊀ＨｕＺꎬＺｈａｎｇＴꎬＧａｏＸＸꎬｅｔａｌ.Ｄｅｎｏｖｏａｓｓｅｍｂｌｙａｎｄｃｈａｒａｃ￣ｔｅｒｉｚａｔｉｏｎｏｆｔｈｅｌｅａｆꎬｂｕｄꎬａｎｄｆｒｕｉｔｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｏｍｅｆｒｏｍｔｈｅｖｕｌ￣ｎｅｒａｂｌｅｔｒｅｅＪｕｇｌａｎｓｍａｎｄｓｈｕｒｉｃａｆｏｒｔｈｅｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆ２０ｎｅｗｍｉｃｒｏｓａｔｅｌｌｉｔｅｍａｒｋｅｒｓｕｓｉｎｇＩｌｌｕｍｉｎａｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ[Ｊ].Ｍｏ￣ｌｅｃｕｌａｒＧｅｎｅｔｉｃｓ＆Ｇｅｎｏｍｉｃｓꎬ２０１６ꎬ２９１(２):８４９－８６２. [２]㊀张晓林ꎬ刘超ꎬ刘剑ꎬ等.核桃楸研究现状及育种策略[Ｊ].吉林林业科技ꎬ２０１９ꎬ４８(１):１４－１７.[３]㊀李佳娜ꎬ高瑞馨.我国胡桃楸的遗传育种研究进展[Ｊ].安徽农业科学ꎬ２０２０ꎬ４８(１７):４－７.[４]㊀袁显磊ꎬ祁永会ꎬ逄宏扬ꎬ等.珍贵树种胡桃楸杂交育种研究概述[Ｊ].中国林副特产ꎬ２０２２(３):６９－７１ꎬ７４. [５]㊀金虎ꎬ魏彪ꎬ刘影ꎬ等.胡桃楸嫁接核桃技术研究[Ｊ].安徽农业科学ꎬ２０１５ꎬ４３(２１):１７０－１７１.[６]㊀ＸｕＨＦꎬＷａｎｇＧＦꎬＺｈａｎｇＪꎬｅｔａｌ.Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｐｈｅｎｏｌｉｃｃｏｍｐｏｕｎｄｓａｎｄａｃｔｉｖｅａｎｔｉｆｕｎｇａｌｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓｏｆｗａｌｎｕｔｉｎｒｅ￣ｓｐｏｎｓｅｔｏａｎｔｈｒａｃｎｏｓｅ(Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍｇｌｏｅｏｓｐｏｒｉｏｉｄｅｓ)[Ｊ].ＰｏｓｔｈａｒｖｅｓｔＢｉｏｌｏｇｙａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙꎬ２０２２ꎬ１９２:１１２０１９. [７]㊀陈思羽ꎬ杨辉ꎬ韩姣ꎬ等.长白山区核桃楸结实性状种源变异分析[Ｊ].东北林业大学学报ꎬ２０１５ꎬ３７(１２):３２－４０. [８]㊀宋佳兴ꎬ李吉ꎬ果冲ꎬ等.辽东山区胡桃楸种质资源果实变异类型的筛选[Ｊ].分子植物育种ꎬ２０１７ꎬ１５(９):３７９８－３８０２.[９]㊀高张莹ꎬ张海峰ꎬ陈国平ꎬ等.核桃楸种群果核形态及地理变异[Ｊ].应用与环境生物学报ꎬ２０１７ꎬ２３(４):６０９－６１５. [１０]李红莉ꎬ李雪ꎬ逄宏扬.黑龙江野生毛榛果实表型性状的多样性研究[Ｊ].西部林业科学ꎬ２０２２ꎬ５１(２):２０－２６. [１１]张深梅ꎬ奚建伟ꎬ洪俊彦ꎬ等.大别山山核桃果实与叶片性状的表型多样性研究[Ｊ].林业科学研究ꎬ２０２０ꎬ３３(１):１５２－１６１.[１２]董胜君ꎬ王若溪ꎬ张皓凯ꎬ等.不同种源东北杏果实表型性状多样性分析[Ｊ].植物资源与环境学报ꎬ２０２０ꎬ２９(６):４２－５０.[１３]王尧ꎬ吴姝青ꎬ张俊康ꎬ等.山东省不同种源盐肤木果实表型性状多样性分析[Ｊ].植物资源与环境学报ꎬ２０２０ꎬ２９３３㊀第５期㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀王子豪ꎬ等:胡桃楸果实表型性状及遗传多样性分析(１):１８－２５.[１４]李法曾.山东植物精要[Ｍ].北京:科学出版社ꎬ２００４. [１５]陈汉斌ꎬ郑亦津ꎬ李法曾.山东植物志(上卷)[Ｍ].青岛:青岛出版社ꎬ１９９０.[１６]臧德奎.山东珍稀濒危植物[Ｍ].北京:中国林业出版社ꎬ２０１７:３－８.[１７]张浩.濒危植物胡桃楸山东地区种群结构及遗传分析[Ｄ].烟台:鲁东大学ꎬ２０２１.[１８]于国斌.东北地区胡桃楸种质资源收集及果实类型研究[Ｊ].林业科技ꎬ２０２０ꎬ４５(３):１９－２２.[１９]ＣｏｓｍｕｌｅｓｃｕＳꎬＳｔｅｆａｎｅｓｃｕＤ.Ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌｖａｒｉａｔｉｏｎａｍｏｎｇｐｅｒｓｉａｎｗａｌｎｕｔ(Ｊｕｇｌａｎｓｒｅｇｉａ)ｇｅｎｏｔｙｐｅｓｗｉｔｈｉｎｔｈｅｐｏｐｕｌａｔｉｏｎａｎｄｄｅｐｅｎｄｉｎｇｏｎｃｌｉｍａｔｉｃｙｅａｒ[Ｊ].ＳｃｉｅｎｔｉａＨｏｒｔｉｃｕｌｔｕｒａｅꎬ２０１８ꎬ２４２:２０－２４.[２０]逄宏扬ꎬ龙作义ꎬ李雪ꎬ等.核桃楸种质资源保存与创新利用[Ｚ].黑龙江省牡丹江林业科学研究所ꎬ２０１８.４３㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀山东农业科学㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀第５５卷㊀。

例谈函数极限的求法

例谈函数极限的求法陈小燕(海南省海口市琼台师范学院㊀５７１１００)摘㊀要:极限理论及其求法是微积分学的理论基础ꎬ在高等数学中占有重要的地位ꎬ是学好高等数学的关键.高等数学中极限求法很多ꎬ不同类型极限对应不同的求法ꎬ且具有较高的技巧性和灵活性.对于大一的学生来说很难正确掌握ꎬ本文结合例题归纳㊁总结极限的常用求法ꎬ以供初学者参考.关键词:无穷小ꎻ重要极限ꎻ洛必达法则中图分类号:Ｇ６３２㊀㊀㊀㊀㊀㊀文献标识码:Ａ㊀㊀㊀㊀㊀㊀文章编号:１００８－０３３３(２０２１)０９－０００４－０２收稿日期:２０２０－１２－２５作者简介:陈小燕(１９８２.４－)ꎬ女ꎬ海南省海口人ꎬ本科ꎬ讲师ꎬ从事中学数学教学研究.㊀㊀一㊁求极限的常用方法１.无穷小量及其性质性质１㊀有限个无穷小的和也是无穷小性质２㊀有界函数与无穷小的乘积是无穷小.性质３㊀常数与无穷小的乘积是无穷小.性质４㊀有限个无穷小的乘积也是无穷小.例１㊀求ｌｉｍｘңɕｓｉｎｘｘ.解㊀ｌｉｍｘңɕｓｉｎｘｘ＝ｌｉｍｘңɕ１ｘｓｉｎｘꎬ因为ｘңɕ时ꎬ１ｘ是无穷小量ꎬｓｉｎｘ是有界量ꎬ所以ｌｉｍｘңɕｓｉｎｘｘ＝０.２.利用等价无穷小定理㊀设α~α~ꎬβ~β~ꎬ且ｌｉｍβ~α~存在ꎬ则ｌｉｍβα＝ｌｉｍβ~α~.㊀ｘң０时ꎬｓｉｎｘ~ｘꎬｔａｎｘ~ｘꎬａｒｃｓｉｎｘ~ｘꎬ１－ｃｏｓｘ~１２ｘ２例２㊀求ｌｉｍｘң０ｔａｎ３ｘｓｉｎ５ｘ.解㊀ｌｉｍｘң０ｔａｎ３ｘｓｉｎ５ｘ＝ｌｉｍｘң０３ｘ５ｘ＝３５.３.极限的运算法则如果ｌｉｍｆ(ｘ)＝Ａꎬꎬｌｉｍｇ(ｘ)＝Ｂꎬ那么(１)ｌｉｍ[ｆ(ｘ)ʃｇ(ｘ)]＝ｌｉｍｆ(ｘ)ʃｌｉｍｇ(ｘ)＝ＡʃＢꎻ(２)ｌｉｍ[ｆ(ｘ) ｇ(ｘ)]＝ｌｉｍｆ(ｘ) ｌｉｍｇ(ｘ)＝ＡＢꎻ(３)ｌｉｍｆ(ｘ)ｇ(ｘ)＝ｌｉｍｆ(ｘ)ｌｉｍｇ(ｘ)＝ＡＢ(Ｂʂ０).说明:只有两个函数都有极限时才能用运算法则ꎬ特别是用商的法则时分母的极限不能是零.例３㊀求ｌｉｍｘң１ｘ２－１ｘ２＋２ｘ－３.解㊀ｘң１时ꎬ分子㊁分母的极限都是零ꎬ不能直接用法则.但分子和分母有公因子ｘ－１ꎬ先约去为零的因子ｘ－１ꎬ然后再求极限.ｌｉｍｘң１ｘ２－１ｘ２＋２ｘ－３＝ｌｉｍｘң１(ｘ＋１)(ｘ－１)(ｘ＋３)(ｘ－１)＝ｌｉｍｘң１ｘ＋１ｘ＋３＝１２.４.利用夹逼准则准则:如果(１)当ｘɪＵʎ(ｘ０ꎬｒ)(或ｘ>Ｍ)时ꎬｇ(ｘ)ɤｆ(ｘ)ɤｈ(ｘ)ꎻ㊀(２)ｌｉｍｘңｘ(ｘңɕ)ｇ(ｘ)＝Ａꎬｌｉｍｘңｘ(ｘңɕ)ｈ(ｘ)＝Ａꎬ那么ｌｉｍｘңｘ(ｘңɕ)ｆ(ｘ)存在ꎬ且等于Ａ.例４㊀求ｌｉｍｎңɕ(１ｎ２＋１＋１ｎ２＋２＋＋１ｎ２＋ｎ)解㊀ȵｎｎ２＋ｎ<１ｎ２＋１＋＋１ｎ２＋ｎ<ｎｎ２＋１ꎬ又ｌｉｍｎңɕｎｎ２＋ｎ＝ｌｉｍｎңɕ１１＋１ｎ＝１ꎬ４ Copyright©博看网 . All Rights Reserved.ｌｉｍｎңɕｎｎ２＋１＝ｌｉｍｎңɕ１１＋１ｎ２＝１由夹逼准则得ꎬｌｉｍｎңɕ(１ｎ２＋１＋１ｎ２＋２＋＋１ｎ２＋ｎ)＝１.说明:此方法的关键是找出前后两个函数ꎬ且这两个函数的极限相同.５.利用重要极限(１)ｌｉｍｘң０ｓｉｎｘｘ＝１(２)ｌｉｍｘңɕ(１＋１ｘ)ｘ＝ｅ例５㊀计算ｌｉｍｘңɕ２ｘｓｉｎｈ２ｘ(ｈ为不等于零的常数)解㊀ｌｉｍｘңɕ２ｘｓｉｎｈ２ｘ＝ｌｉｍｘңɕｓｉｎｈ２ｘｈ２ｘｈ＝ｈ例６㊀求ｌｉｍｘңɕ(ｘ＋２ｘ＋１)２ｘ.解㊀ｌｉｍｘңɕ(ｘ＋２ｘ＋１)２ｘ＝ｌｉｍｘңɕ[(１＋１ｘ＋１)ｘ＋１]２(１＋１ｘ＋１)－２＝ｅ２.说明㊀在求极限过程中ꎬ要对函数进行适当变形ꎬ使其变成重要极限的形式ꎬ再用重要极限求解.６.洛必达法则定理㊀设(１)当ｘңａ时ꎬ函数ｆ(ｘ)及Ｆ(ｘ)都趋于零ꎻ(２)在点ａ的某邻域内(点ａ可以除外)ｆᶄ(ｘ)ꎬＦᶄ(ｘ)都存在且Ｆᶄ(ｘ)ʂ０ｌｉｍｘңａｆᶄ(ｘ)Ｆᶄ(ｘ)存在(或为无穷大)那么ｌｉｍｘңａｆ(ｘ)Ｆ(ｘ)＝ｌｉｍｘңａｆᶄ(ｘ)Ｆᶄ(ｘ).例７㊀求ｌｉｍｘң＋ɕπ２－ａｒｃｔａｎｘ１ｘ解㊀ｌｉｍｘң＋ɕπ２－ａｒｃｔａｎｘ１ｘ(００)＝ｌｉｍｘң＋ɕ－１１＋ｘ２－１ｘ２＝ｌｉｍｘң＋ɕｘ２１＋ｘ２＝１说明㊀(１)把定理中的ｘңａ换成ｘңɕꎬ把(２)换成当ｘ>Ｎ时ꎬｆ(ｘ)ꎬＦ(ｘ)都可导且Ｆᶄ(ｘ)ʂ０ꎬ结论仍然成立.(２)洛必达法则是求未定式的一种有效方法ꎬ但最好能与其他求极限的方法结合使用.例如要求的极限函数是幂指函数的形式ｕ(ｘ)ｖ(ｘ)(ｕ(ｘ)>０ꎬｕ(ｘ)ʂ１时ꎬ通常先把函数转化成指数函数ｕ(ｘ)ｖ(ｘ)＝ｅｌｎｕ(ｘ)＝ｅｖ(ｘ)ｌｎｕ(ｘ)ꎬ再求极限.例８㊀求ｌｉｍｘң０ｘｓｉｎｘ.解㊀这是未定式００ꎬ设ｙ＝ｘｓｉｎｘꎬ取对数得ｌｎｙ＝ｓｉｎｘｌｎｘꎬ又ｌｉｍｘң０ｌｎｙ＝ｌｉｍｘң０(ｓｉｎｘｌｎｘ)＝０因为ｙ＝ｅｌｎｙꎬ而ｌｉｍｙ＝ｌｉｍｅｌｎｙ＝ｅｌｉｍｌｎｙ(ｘң０＋)ꎬ故ｌｉｍｘң０ｘｓｉｎｘ＝ｌｉｍｘң０ｙ＝ｅ０＝１.(３)本节定理给出的是求未定式的一种方法.当定理条件满足时,所求的极限当然存在(或为ɕ),但定理条件不满足时,所求极限却不一定不存在.例９㊀求ｌｉｍｘң＋ɕｘ＋ｓｉｎｘｘ因为极限ｌｉｍｘң＋ɕｘ＋ｓｉｎｘｘ＝ｌｉｍｘң＋ɕ(ｘ＋ｓｉｎｘ)ᶄ(ｘ)ᶄ＝ｌｉｍｘң＋ɕ(１＋ｃｏｓｘ)不存在ꎬ所以不能用洛必达法则ꎬ但其极限是存在的:ｌｉｍｘң＋ɕｘ＋ｓｉｎｘｘ＝ｌｉｍｘң＋ɕ(１＋ｓｉｎｘｘ)＝１.㊀㊀二㊁结论函数极限的求法是多样的ꎬ除了本文的这几种方法ꎬ还有其他的求解方法ꎬ因此在解题过程中要根据函数本身的特点来选择合适的方法ꎬ以简便计算.㊀㊀参考文献:[１]同济大学数学系.高等数学[Ｍ].北京:高等教育出版社ꎬ２０１４.[２]华东师范大学.数学分析[Ｍ].北京:高等教育出版社ꎬ２００１.[３]苏丽.函数极限的几种特殊求法[Ｊ].赤峰学院学报(自然科学版)ꎬ２０１６(０７):８－９.[４]舒孝珍.高等数学中函数极限的求法技巧解析[Ｊ].赤峰学院学报(自然科学版)ꎬ２０１９(０２):１１－１３.[５]郭俊梅.高职高数一元函数极限求法探讨[Ｊ].数理化研究ꎬ２０１７(０３):３１３.[责任编辑:李㊀璟]５Copyright©博看网 . All Rights Reserved.。

潮汕话学习——精选推荐

潮汕话学习潮汕话词汇⼈物，指代⽡（我）乐（你）伊（他/她）阮（我们）恁（你们）伊⼈（他们）⽼公（曾祖⽗）⽼嫲（曾祖母）阿公（爷爷）阿嫲（奶奶）外公（外公）外嫲（外婆）阿爸（爸爸）阿妈/阿姨/⽼政府（⽼公称的）阿niea（妈妈）阿伯（伯伯）阿姆（伯母）阿叔（叔叔）阿婶（婶婶）阿舅（舅舅）阿妗（舅妈）阿兄（哥哥）阿姐（姐姐）阿弟（弟弟）阿嫂（嫂嫂）阿孙（孙⼦）阿弟（⼉⼦）阿妹/⾛仔（⼥⼉）⼤dā倌（家⽗）⼤dā家（家婆）丈⼈公（岳⽗）丈姆婆（岳母）sim 妇（媳妇）新⼈（新娘）同门（连襟兄弟）同塞（兄弟的⽼婆）契⽗（⼲爹）契仔（⼲⼉⼦）同年（契兄弟）⽼dā埠（⽼东西，⽼家伙）⽼查亩/⽼姿娘（⽼处⼥）dā埠（男⼈）姿娘（⼥⼈）后⽣仔（年轻⼩伙⼦）雅仔（漂亮的⼩伙⼦）雅姿娘（漂亮的姑娘）孥仔（⼩孩）马仔（打⼿，⼿下）头家（⽼板）⼈客（客⼈）单丁（独⽣男孩）乞⾷（乞丐）只块（这⾥）许块（那⾥）地块（哪⾥）嗨系做尼（为什么/⼲什么）做尼（怎样）咪该（什么）善好（最好）硬⽔（⾼⽔准）翘楚（聪明，厉害，有派头）分依(给他)烧骂(吵架)拍死乐(打死你)后⽣仔(⼩伙⼦)⽣好(美)武你灵精(打你个痛快) 交际呾（说）讲三国（摆龙门阵）同暹罗诐到猪槽（扯得太远了）哗甫/抽风（吹⽜）⾷诐唔落（道不同不相与谋）托浪脬（拍马屁）散嚷/吼/呾（胡说）⼈客（客⼈）齐谢（谢谢）对唔住（对不起）⽆相⼲（没关系）呾唔北块去（说不清）柴戆/戆过只⽔鸭（糊涂、不懂）晓理/晓理死（害羞）悦着伊（喜欢他/她）硬（厉害）⽩傻/⽩仁（⽩痴）搏命（拼命）青盲⽜（⽂盲）dumb 丁/柴戆（傻⼦）只撮话（这些话）我佮汝（我和你）相互（帮忙）猛（快）猛下（快点）霈pai长（有脸⾯）相辅（帮忙）⽣活、⽤品、动植物⾷（吃）糜（粥）糜籴（盛粥汤匙）调羹（汤匙）箸（筷⼦）⿍（锅【炒菜⽤的，并不是煮饭的】）⾷桌（赴宴）喉⼲（⼝渴）番枧/饼药（肥皂）饼药粉（洗⾐粉）⾬遮（⾬伞）扫⼿（扫把）⽬涩（困了）洗浴（洗澡）褛（外套）衫（⾐服）鞋拖（拖鞋）银（钱）个银（⼀块钱）四⼈头（⼀百元）⼀粒（⼀万元）电⽑（烫发）洗⾯（洗脸）放屎/交税（⼤便）放尿（⼩便）东司（厕坑）关⽕（熄灯）起厝（建房）⽕油（煤烟）辇（车轮）暝仔（晚上）暝昏（黄昏）⽇⽃（中午）纸鹞(风筝)朥（猪油）床墘（床边）腈tsia⾁（瘦⾁）⾁脞tso（⾁末⼉）蔹hiam 椒（辣椒）醪lo（液体混浊）滒ko（⼜粘⼜稠）铰⼑（剪⼑）蛓⽑⾍（⽑⽑⾍）胡螓（苍蝇）⾹橼（佛⼿）檨（芒果）碓tui（舂⽶⼯具）龙（泠）⽬（眼睛）⽬汁（眼泪）⽑（发）酒精窟（酒窝）尻川（屁股）腰龙⾻（尾⾻）浮⽕（上⽕）青昧（盲⼈）涝屎（拉肚⼦）腰痀（驼背）结疕pi（痂⼦）瘕痀抽（⽓喘病）“犭肖”狗（疯狗）垢gau圻goi（⾝上的污垢）⽬屎膏（眼屎）动作、⾏为跍（半蹲）徛/企（站）⾏（⾛）⾛（跑）睇（看）擿（扔）泅（游）沕（潜）⽔沵了（⽔满了）夯（zhong）拍（打）税（租）掠（捉）晓/别（知）惜（亲昵）嚷（吼、喊）惊（害怕）拍⾚脚（⾚脚）刣（杀）颐（睡觉）睒iam（迅速的看）倳sai（放置，如个锅倳在风炉顶）dia揨（碰触，如我阿未揨着伊，伊哩呾我拍伊）搵ung（蘸，如搵蒜泥醋）沃ak（浇淋，如沃菜）潠suang（喷⽔，如潠尿）摵sek（掉落，如等摵跋死去）囥keng（藏，如条⾦项链囥在箱底）缒tui（下坠，如撮物件缚条索了缒落去）坫tiam（躲藏，如伊坫在楼顶）薅kao（拔草，如薅草）烊yang（融化）幔mua（披上去，如出门领衫介伊幔落去）沞tsap（湿，如通⾝沞沞）灱da（⼲，领衫灱了）奅pa（空⼼的⼤，如撮包炊到奅奅）侕dzu（杂乱，如间内侕过狗窦）鏖糟otso（肮脏，如免洗浴？汝够鏖糟恶汁）沕bi（潜⽔）刜huk（打，如汝等⽋刜⼿底）椓dok（敲）"卑刂"poi（削）蠫loi（砍）搑len（推，如弟阿，相辅搑下车）掿nak（捉、握）揙bian（掴⽿光）摝lok（摇）扱tsa（挽起裤⼦）擎kia（举）擘pe（掰开）揞a（捂住掩盖）戽hou（戽⽔上⽥）蹃nek（⽤脚蹬）婓hui（四处兜兜）蹘liao（溜）敨tao（解开）捼rue（搓）捘（拧）汏tua（淘洗，如汏⽶）熻hip（蒸）烙luat（煎）焯cok（在开⽔⾥滚下，如打围炉焯飞薐）煠sat（煮，如汝暝仔是煠糜抑是煮饭）煏pet（烤，如煏鱿鱼）秫⽶（糯⽶）蕹菜（空⼼菜）飞薐（菠菜）饭床（饭桌）思想、感情激⾎（⽣⽓）激⼼（焦虑、烦躁）专爱（故意）迫性（暴躁）厚划（难受）⼼胸（胸怀）烤（哭）变⾯（翻脸）逼过⽕（抓狂）蔬菜⽔果菜头（萝⼘）蕹菜（空⼼菜）飞龙（菠菜）同窝（茼蒿）玻璃菜/为菜（⽣菜）钱葱（马蹄/荸荠）莶椒（辣椒）芥蓝花（菜花）芥蓝蕾（包⼼菜）蕃茨（地⽠/番薯）地⾖（花⽣）幼⽶仁（⽟⽶）⾓⽠（丝⽠）吊⽠（黄⽠）鸟梨、⼭楂、林檎（番荔枝）⼸蕉/⽛蕉（⾹蕉）⽶蕉（粉蕉）猴⼒（栗⼦）⽊仔（番⽯榴）番梨/拉⼑（菠萝）银艾（桂圆潮汕话潮汕话潮汕话潮汕话词汇/她）阮（我们）恁（你们）伊⼈（他们）⽼公（曾祖⽗）⽼嫲（曾祖母）阿公（爷爷）阿嫲（奶奶）外公（外公）外嫲（外婆）阿爸/⽼政府（爸爸）阿妈/阿姨/阿niea（妈妈）阿伯（伯伯）阿叔（叔叔）阿婶（婶婶）阿舅（舅舅）阿妗（舅妈）阿兄（哥哥）阿姐（姐姐）弟（弟弟）阿嫂（嫂嫂）阿孙（孙⼦）阿弟（⼉⼦）阿妹/⾛仔（⼥⼉）dā官（家⽗）dā家（家婆）潮⼈（岳⽗）点婆（岳母）⼼妇（媳妇）同门（姐妹的⽼公）同媳（兄弟的⽼婆）契⽗（⼲爹）契仔（⼲⼉⼦）同年（契兄弟）⽼⽲埠（⽼东西，⽼家伙）⽼查某（⽼处⼥）dā埠（男⼈）姿娘（⼥⼈）后⽣仔（年轻⼩伙⼦）雅仔（漂亮的⼩伙⼦）雅姿娘（漂亮的姑娘）孥仔（⼩孩）马仔（打⼿，⼿下）头家（⽼板）只块（这⾥）许块（那⾥）地块（哪⾥）做尼（为什么/⼲什么）乜个（什么）善好（这么好）硬⽔（⾼⽔准）翘楚（聪明，厉害）不相与谋）托浪脬（拍马屁）散嚷/吼/呾（胡说）⼈客（客⼈）齐谢（谢谢）对唔住（对不起）⽆相⼲（没关系）呾唔北块去（说不清）戆过只⽔鸭（糊涂、不懂）晓理（害羞）悦着伊（喜欢他/她）硬（厉害）⽩傻/⽩仁（⽩痴）搏命（拼命）青冥⽜（⽂盲）dumb丁/柴戆（傻⼦）只撮话（这些话）我佮汝（我和你）相互（帮忙）猛（快）猛下（快点）⽣活、⽤品⾷（吃）糜（粥）糜籴（盛粥汤匙）调羹（汤匙）箸（筷⼦）⿍（锅）⾷桌（赴宴）喉⼲（⼝渴）番枧/饼药（肥皂）饼药粉（洗⾐粉）⾬遮（⾬伞）扫⼿（扫把）⽬涩（困了）洗浴（洗澡）褛（外套）衫（⾐服）鞋拖（拖鞋）银（钱）个银（⼀块钱）四⼈头（⼀百元）⼀粒（⼀万元）电⽑（烫发）洗⾯（洗脸）放屎/交税（⼤便）放尿（⼩便）东司（厕坑）关⽕（熄灯）起厝（建房）⽕油（煤烟）辇（车轮）暝仔（晚上）暝昏（黄昏）⽇⽃（中午）纸鹞(风筝)朥（猪油）床墘（床边）⽕）青盲（盲⼈）涝屎（拉肚⼦）腰痀（驼背）动作、⾏为跍（半蹲）徛/企（站）⾏（⾛）⾛（跑）睇（看）擿（扔）泅（游）沕（潜）⽔沵了（⽔满了）夯（zhong）拍（打）税（租）掠（捉）晓/别（知）惜（亲昵）嚷（吼、喊）惊（害怕）拍⾚脚（⾚脚）刣（杀）思想、感情激⾎（⽣⽓）激⼼（焦虑、烦躁）专爱（故意）迫性（暴躁）厚划（难受）潮汕⼟话潮汕⼟话```^O^滴汤——笨通街市找⽆==社会上没有渣亩==⼥⼈..⾷酒==喝酒..拍字=打字潮汕话潮汕话潮汕话潮汕话词汇来以好=睡觉够硬=厉害卖想=不懂事⽰油=酱油烧骂=吵架亚=辩解，争论东司头--厕所浴房--冲凉房头晕=头痛唔晓=不知道（不懂）秃桃=游玩歌沥==包菜迈=不要好⾷=好吃臭相=不讲信⽤胶已=⾃⼰外呈=院⼦煮⾷=做饭地块=那⾥地个=什么胶那=橄榄⽊⼈==别⼈⽛⼯＝蜈蚣胶抓＝蟑螂眠床＝床床＝桌⼦帝政＝该死的豹脚＝厉害讨债仔＝醉已忘归潮汕话潮汕话潮汕话潮汕话词汇楼顶==楼上志你衰啊＝咒骂我呸==吐痰!⽣莫====长得很丑⾁矮=龙眼翁科===拍拖我领⽗===我是你⽗亲领姨===你妈妈哭⽗死母===吵宗真尾仔=尾指糖裤===脱裤散哭⽗=乱说话粉葛＝地⽠莲拐=荔枝候溜＝泥鳅臭脚惜=⾹港脚雷同天熄＝雷电交加修－游泳味－潜⽔胶罗=还要很久喉⼲=⼝渴姿娘=⼥⼈⾛仔=⼥⼉祷仔=⼉⼦⽼公=曾主⽗地甜＝谁讨赚===赚钱⾷笨===吃饭鸡=*⼥！潮汕话潮汕话潮汕话潮汕话词汇孔=⽩痴钱龙-壁虎草猴=螳螂⾝底裤===内裤胶仓=屁股！鸡母⽪===鸡⽪疙瘩四散担===乱说猛猛去死===快去死只船=现在⽇暗=天⿊池块=哪⾥地个=什么烟仔蒂===烟头在地块－－在那⾥欢唔灾－－还不知道．⾏=⾛欢有=还有勿=不要妻哥=⾊狼猎街=逛街出⽇＝出太阳卤=恨卤⾯=讨厌胶迹=背迈哭⽗＝不要吵玩==耍烧拍==打架甩=芒果⽬镜=眼镜潮汕话潮汕话潮汕话潮汕话词汇烟碟=烟灰缸⾁矮===龙眼鸟嘴=多话怪浪=希奇放屎=⼤便试流===流氓哌仔=流氓假矮=多事搭埔===男⼈短帐==倒闭⽼马==多事⼩==神经病飞龙＝菠菜吊⽠=黄⽠过衰=很倒霉⽆影⽆迹=不可能安=⽼公亩=⽼婆在你=随你爱作泥=什么事脑莫=脑袋坏掉知预==⼩⼼唔北=不懂茶⽶===茶叶电涂===电池⽆变轮=受不了⼟话=俗话落⾬===下⾬滚⽔=开⽔潮汕话潮汕话潮汕话潮汕话词汇在地块=在哪⾥圆头卵===光头开去==⾛开冲茶===泡茶除⼈=顽⽪池个＝什么激⾎===淤⾎歇⼯=下班找讨赚=找⼯作抽讨死===笑死⼈艰苦=⽣病江爱凤===只要吃迷=不是迈=不要爱=要散物=乱来烧护=帮忙着脉=要命倒返=回来钓妮=泡妞鸟来===⼭楂地⾖===花⽣胶⼰=⾃⼰欢未=还没有散抽=胡说⼋道排回=以前锯弦=拍拖孚景=谈恋爱咸涩===⼩⽓潮汕话潮汕话潮汕话潮汕话词汇弯=转薄壳=海⽠⼦硬虎--⼀定四散担===乱说迈担=不要说康课=⼯作薄壳枪===⼩⼿枪奴仔===⼩孩⼩姿娘--疯婆⼦鞋拖===拖鞋虾姑=濑尿虾⽢同==⼟⾖胶村=屁股雅姿娘--靓妞庵庶=夫妻胶⼑===剪⼑头家===⽼板甲枝=⾃⼰池江=痰盂洗亿=洗澡哦===牡蛎赢⽼爷===游神罗哩=汽车⾷⽔=喝⽔涩啤===便秘宫招=⾹蕉⽆变=没办法裤尘===底裤地个--什么潮汕话潮汕话潮汕话潮汕话词汇姿娘===⼥⽣割猪⾁==买猪⾁吾知＝不知道鹤然-很像使车=开车迈=不要⽬涩===眼困肚困===肚⼦饿脚车=⾃⾏车⾯布=⽑⼱⽉娘====⽉亮厚稳===蚯蚓痴膏===好⾊莲厚=莲藕⽩仁=⽩痴塔埠=男⼈⾛起==起床吐⾎凉=胡说⼋1~窝落：夸奖2、暗蒙⼭猫：周围环境很⿊3、肚妖：肚⼦饿4、做咪个：做什么5、七哥、七哥眉灿灿：好⾊6、我哈你：我爱你7、我卤你：我讨厌你8、地爹：哪⾥9、⽆影⽆迹：⽆根据的或⽆关重要的，胡说⼋道10、卖做泥：没事11、亲采：随便12、亲菜讲、四散讲：乱说、胡说13、咩咩：快快14、吾知做泥讲好罗：不知道怎么说好了15、头拱拱：指头晕，不知道发⽣什么事16、清⽓相：爱⼲净17、半酸、半癫、半⼤肿：神经病18、卡村：屁股19、卡数：⼈20、拨缴：赌博21、俭到臭腥：寒酸、⾮常节俭22、⽆正⽆经：不正经23、AC我箩：东歪西倒24、烧拍：打架25、煌卡：烂仔26、隆隆⾦：⾮常好，风光27、亲采来、四散来：乱来28、旭⼼：⽣⽓29、科哩册死：给你⽓死30、浪鸟⽕着：特别⽣⽓31、⼤细⽬：偏⼼32、死港仔：对男孩称呼的贬义词33、妹阿昌：对⼥孩称呼的贬义词34、⽼热：热闹35、⽆瘾：没意思，⽆聊35、乌暗晕；头晕36、卸衰：丢脸37、哩哎处啊：直译你的家，⽆具体意思，带贬义38、青硬：很凶恶39、乌青斑肿：肿得挺严重40、盆头猪：⾮常笨41、嚣横：霸道42、去地爹煌啊：去哪⾥玩啊43、圾脚：菜鸟、很差44、翁鸽：傻⽠45、枕啊：什么事46、⽣好：长得漂亮，帅47、北吾北啊：懂不懂啊48、卖去打理依：不要去管它49、做泥样啊：怎么样啦50、你科蛇咬着、你科⿁拍着：指某⼈突然做出异常⾏为51、嘿死：好困52、堕靓：丢脸，尴尬53、飘⼫露⾻：指不务正业，花天酒地54、⽆路⽤：⽆能，⽆⽤处，窝囊55、哩⽋科雷卡：你会被雷劈56、⾷饱翁翁：傻得很严重，指某⼈被骗57、杏挂饱：对某事某物不感兴趣、厌烦58、脚头有⾚⾚：髌⾻磨破⽪59、七早⼋早：时间很早60、靠爬（⽗）靠母、靠妖：形容某⼈某物很吵61、迈呐喃：不要罗嗦62、爱迈：要不要63、卤到你抗⽬：⾮常讨厌你64、⽪厚过猪屠垫：形容⽪特别厚65、魔睇魔相：不好看66、等阿科我僻债浮：等下给我⼀⽣⽓……67、型衰：样衰68、边边开：死开点69、呓魔哎魔：这不好那也不好70、仔哥涛：⽼⼈家要对年轻⼈进⾏思想教育时对年轻⼈的称呼，例如：粤语中的“后⽣仔”滴汤——笨通街市夺⽆==社会上没有渣亩==⼥⼈..⾷酒==喝酒..拍字=打字楚汤===鱼露够市=恐怖咯抽=乱叫来以好=睡觉够硬=厉害卖想=不懂事⽰油=酱油烧骂=吵架亚=辩解，争论东施头--厕所亿房--冲凉房头熊=头晕唔晓=不知道（不懂）铁桃=游玩歌历==包菜迈哩=不要好⾷=好吃臭相=不讲信⽤胶已=⾃⼰外呈=院⼦煮⾷=做饭地块=那⾥地个=什么胶那=橄榄绑⼈==别⼈厚稳、==蚯蚓⽛⼯＝蜈蚣胶抓＝蟑螂眠床＝床床＝桌⼦帝政＝该死的敖脚＝没种讨债仔＝醉已忘归卖好仔==扬扬楼顶==楼上志衰旅啊＝呸！呸！呸！呸诺==吐痰!⼩到堆===疯⼦⼀群⽣莫====长得很丑烧插===拍拖我领⽗===我是你⽗亲（澄海）真头公=⼤母指真尾仔=尾指糖裤===脱裤散哭⽗=乱说话番割＝地⽠莲果=荔枝候溜＝泥鳅臭脚惜=⾹港脚唔珍对－不正常雷同天熄＝雷电交加修－游泳味－潜⽔胶罗=还要很久喉搭=⼝渴烧真=亲亲姿娘=⼥⼠⾛仔=⼥⼉祷仔=⼉⼦⽼公=曾主⽗地甜＝谁讨探===赚钱⾷笨===吃饭但灯-⽩痴⾦⽢==糖丸钱龙-壁虎草猴=螳螂莲果＝荔枝鸡母⽪===鸡⽪疙瘩四散担===乱说猛猛**===快**紫船=现在⽇暗=天⿊池块=哪⾥地个=什么烟仔蒂===烟头丢紫屁=说⼤话逃地块－－在那⾥欢唔灾－－还不知道．⾏=⾛悦着伊=爱上他市姨=丑欢有=还有勿=不要妻哥=⾊狼猎街=逛街出⽇＝出太阳卤=恨卤⾯=讨厌胶迹=背迈哭⽗＝不要吵玩==耍蛋眉=笨蛋烧拍==打架溜溜==猛猛!``甩=芒果⽬镜=眼镜分碟=烟灰缸⾁矮===龙眼鸡翠=吹⽜怪浪=希奇放屎=⼤便滴嗒=逝世试流===流氓哌仔=流氓假矮=多事剪罗=该死搭埔===男⼈短帐==倒闭⼒出⽣叨仔=硬邦邦⽼马==多事⼩==神经病猪⾁⽄尿钱?===猪⾁⼀⽄多少钱?飞龙＝菠菜吊⽠=黄⽠过衰=很倒霉⽆影⽆迹=不可能安=⽼公亩=⽼婆在你=随你爱作泥=什么事脑莫=脑袋坏掉知预==⼩⼼唔北=不懂茶⽶===茶叶⽋死=真⾏南洋=莲上莲下!`电涂===电池⽆变轮=受不了⼟话=俗话落⾬===下⾬滚⽔=开⽔在地块=在哪⾥圆头卵===光头⼭耕=仙居开去==⾛开冲茶===泡茶除⼈=顽⽪池个＝什么激⾎===淤⾎歇⼯=下班找讨赚=找⼯作抽讨死===笑死⼈艰苦=⽣病江爱凤===只要吃迷=不是迈=不要爱=要散物=乱来铁桃=玩烧护=帮忙着脉=要命倒返=回来东西头=厕所钓妮=泡妞鸟来===⼭楂地⾖===花⽣胶⼰=⾃⼰欢未=还没有散抽=胡说⼋道排回=以前散哭⽗===胡说⼋道锯弦=拍拖孚景=谈恋爱咸涩===⼩⽓弯=转薄壳=海⽠⼦硬虎--⼀定四散担===乱说迈担=不要说康课=⼯作薄壳枪===⼩⼿枪奴仔===⼩孩⼩姿娘--疯婆⼦鞋拖===拖鞋虾姑=濑尿虾康同==⼟⾖雅姿娘--靓妞庵庶=夫妻胶⼑===剪⼑头家===⽼板甲枝=⾃⼰池江=痰盂洗亿=洗澡⼤哦===牡蛎塞怕===笨蛋⼿扶=拖拉机赢⽼爷===游神罗哩=汽车⾷⽔=喝⽔涩啤===便秘宫招=⾹蕉⽆变=没办法裤⽉===底裤地个--什么姿娘===⼥⽣番葛=地⽠割猪⾁==买猪⾁吾知＝不知道鹤然-很像碎消--吹⽔觅=不是使车=开车迈=不要⽬涩===眼困肚困===肚⼦饿脚车=⾃⾏车⾯布=⽑⼱⽉娘====⽉亮厚稳===蚯蚓侯溜=善鱼姿娘=⼥⼠⾛仔=⼥⼉祷仔=⼉⼦⽼公=曾主⽗飞龙=波菜痴膏===好⾊莲厚=莲藕⽩仁=⽩痴塔埠=男⼈⾛起==起床吐⾎凉=胡说⼋道⽊仔=巴乐嘀嗒==逝世乌哑==逝世猴⽣孬==有够丑⽆你便==受不了你灌⼼肝头==捶胸⼝死奔吕看==死给你看。

Edge-Core AS4610 Series 层交换机快速使用指南说明书

Quick Start Guide
24/48-Port GE Data Center Switch
AS4610-30T | AS4610-30P | AS4610-54T | AS4610-54P
1. Unpack the Switch and Check Contents
AS4610-30T
AS4610-30P
2 Connect DAC cables to the SFP+/QSFP+ slots. Or first install SFP+/QSFP+ transceivers and then connect fiber optic cabling to the transceiver ports. The following transceivers are supported: ◆ 40GBASE-CR4 ◆ 40GBASE-SR4 ◆ 10GBASE-CR ◆ 10GBASE-SR (ET5402-SR) ◆ 1000BASE-SX (ET4201-SX) ◆ 1000BASE-LX (ET4201-LX)
1 Ensure the rack on which the switch is to be mounted is properly grounded and in compliance with ETSI ETS 300 253. Verify that there is a good electrical connection to the grounding point on the rack (no paint or isolating surface treatment).
2 For a PoE switch, attach a lug (not provided with PSU) to a #12 AWG minimum grounding wire (not provided with PSU), and connect it to the grounding point on the switch rear panel. Then connect the other end of the wire to rack ground. For a Non-PoE switch, attach a lug (not provided with PSU) to a #18 AWG minimum grounding wire (not provided with PSU), and connect it to the grounding point on the switch rear panel. Then connect the other end of the wire to rack ground.

蒙台梭利法：一种新型老年痴呆症非药物疗法

参考文献［１］　辛世卿．超声造影成像对甲状腺良恶性结节鉴别诊断价值［Ｊ］．影像研究与医学应用，２０２１，５（１）：４３４４．［２］　刘海伟．常规超声成像与超声弹性成像诊断甲状腺结节良恶性的价值［Ｊ］．医疗装备，２０２０，３３（２４）：１９２０．［３］　王咏梅．超声造影联合弹性成像诊断甲状腺癌的价值［Ｊ］．当代医学，２０１９，２５（３）：９４９６．［４］　黄伟强，黄伟伟，宋琦，等．甲状腺结节超声纵横比诊断甲状腺癌１５６例分析［Ｊ］．肿瘤学杂志，２０１７，２３（７）：６４９６５０．［５］　李慧婕．超声弹性成像在甲状腺良恶性结节诊断中的价值［Ｊ］．临床医药实践，２０２１，３０（１）：４４４６．［６］　戴维德，陈秀华，马娜，等．超声引导细针抽吸细胞块免疫组织化学检查对甲状腺癌的诊断价值［Ｊ］．中国临床保健杂志，２０１７，２０（３）：２２５２２７．［７］　杜锦．常规超声以及超声弹性成像技术对于甲状腺良恶性结节的临床诊断效果［Ｊ］．现代医用影像学，２０２１，３０（１）：１７６１７８．［８］　邓晓妃，廖诚德，黄李梅．超声造影结合超声弹性成像对甲状腺癌的诊断价值分析［Ｊ］．影像研究与医学应用，２０２１，５（２）：４２４３．［９］　王旭东，李佳，焦秀丽．超声弹性成像及应变率比值在良恶性甲状腺结节体检中的应用［Ｊ］．临床研究，２０２１，２９（３）：１４１１４２．［１０］杭敏．甲状腺结节超声特征对甲状腺癌的诊断指导价值探析［Ｊ］．中外女性健康研究，２０１９（１３）：１１９，１３１．［１１］陈高松．甲状腺结节超声特征诊断甲状腺癌的价值探讨［Ｊ］．影像研究与医学应用，２０１７，１（５）：１１０１１１．［１２］周艳珂，李潜，田婧，等．超声弹性成像分级法及评分法在甲状腺结节鉴别诊断中的应用［Ｊ］．医学影像学杂志，２０２１，３１（１）：２５２８．［１３］柳鹏翔，吴丹枫，陈刘飞．弹性成像在甲状腺ＦＮＡ中的应用价值［Ｊ］．中外医学研究，２０２１，１９（４）：７１７３．［１４］聂云雷，侯庆玲，张呈祥．超声弹性成像应变率比值法与ＭＳＣＴ在诊断甲状腺结节中的应用［Ｊ］．河北医学，２０２１，２７（１）：１２８１３１．（收稿日期：２０２１０５１４）·综述·基金项目：国家重点研发计划项目（２０１８ＹＦＣ２００２４００）作者简介：张露露，硕士研究生，Ｅｍａｉｌ：１４３３０３８０２９＠ｑｑ．ｃｏｍ通信作者：王曙红，主任护师，Ｅｍａｉｌ：ｗａｎｇｓｈｕｈｏｎｇ＠ｃｓｕ．ｅｄｕ．ｃｎ蒙台梭利法：一种新型老年痴呆症非药物疗法张露露１，２，王娅平１，３，王凤玲１，２，唐倩云２，杨静静１，３，黄敬１，３，王曙红１，２，３１．中南大学湘雅医院护理教研室，长沙４１００００；２．中南大学湘雅护理学院；３．国家老年疾病临床医学研究中心（湘雅医院）［摘要］　蒙台梭利法结合了痴呆患者现存技能水平和兴趣爱好，通过设计适合患者的日常生活干预方式，锻炼患者自主生活能力，满足患者生理和心理需求，缓解伴随临床症状，提高患者生活质量。

泉州话入门教程

ua活抹杀 ue狭八截 ui挖刮血 iao嚼
m默
n物呛
ã凹合膜
ẽ咩
ĩ镊闪
ãi嗐遗憾
iã赢背（孩子） iũ□心动
ão嗷
uĩ蜢
ião蛲
uãi扌弯使劲晃门
（三）声调 7 个
调类
阴平
1
调值（五度标记法） 33
阳平 2 24
阴上阳上
3
4
55 22
去声 5 41
阴入 6
“扰”）；没有撮口呼韵母ü，单韵母 ü 通常读作（如“女”、“驴”），韵头ü通常读作韵头 u （如
“捐”、“选”）；有 -m、-n、-n 三个鼻音韵尾和-b、-d、-、- 四个塞音韵尾；声调一般有 7 个，
上声分阴阳，完整保留着古代的入声；有复杂的文白异读现象，文读和白读各成系统。词汇上的主要特点是保存了不少古语词，如：汝（你）、伊（他）、箸（筷子）、鼎（锅）、走（跑）、食（吃）、历日（日历）、鸡母（母鸡）、人客（客人）等。
赵 dio22
吕 l22
范 huan22 项 han22 鲍 bao22 解 hai22
戴 d41
宋 sn41
魏ui41
郑 dĩ41
谢 sia41 赖 lua41 傅 b41
郭5
葛ad5
戚 cia5
卓 do5
薛 si5 聂 liab5 屈 kud5
岳a24 陆 li24
叶 iab24
白 pe24
、、和表示；
3.泉州话中有较多的鼻化韵，《汉语拼音方案》没有相应的符号，故借用国际音标 “ ”表示（一
般加在主要元音上）。
4.泉州话的声调采用五度标记法，在音节的右上角用数字注明调值，轻声以 0 表示。为直观起

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樓馱隅酕磁肮﹛﹛隅酕源ㄩ明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明﹝﹛﹛創擦源ㄩ明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明﹝﹛﹛隅ㄩ明明明明爛明明明明堎明明明明﹝﹛﹛蝠ㄗ枑ㄘ億癹明明明明爛明明明明堎明明明明﹝﹛﹛珨﹜靡麼砐醴﹜寞跡﹜蚚蹋﹜杅講﹜踢塗﹝﹛﹛靡麼砐醴寞跡蚚蹋杅講踢塗ㄗ啋ㄘ﹛﹛磁數﹛﹛媼﹜窐講猁摯撮扲梓袧ㄩ明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明﹛﹛明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明﹛﹛明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明﹝﹛﹛﹜撮扲訧蹋摯芞祧枑鼎源楊ㄩ明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明﹝﹛﹛侐﹜婦蚾猁摯煤蚚蛹童ㄩ明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明﹛﹛明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明﹝﹛﹛拻﹜蝠ㄗ枑ㄘ億源宒摯華萸睿煤蚚創童ㄩ明明明明明明明明明明明明明明明明明明﹛﹛明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明﹝﹛﹛鞠﹜蝠葆隆踢啎葆遴杅塗摯奀潔ㄩ明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明﹝﹛﹛﹜賦呾源宒摯癹ㄩ明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明﹛﹛明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明﹝﹛﹛匐﹜峊埮孮ㄩ明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明﹛﹛明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明﹝﹛﹛嬝﹜邧源衪妀腔坳沭遴ㄩ明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明﹛﹛明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明﹛﹛明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明﹝﹛﹛坋﹜掛磁肮腔衄虴癹ㄩ赻明明明明爛明明明堎明明明明﹛﹛明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明明﹛﹛明明明明明明明明明明明祫明明明明爛明明明堎明明明明﹝﹛﹛隅酕源明明明明明明明明明明明明明明明創擦源﹛﹛等弇靡備ㄩ明明明明明明明明明明明明明等弇靡備ㄩ明明﹛﹛等弇華硊ㄩ明明明明明等弇華硊ㄩ﹛﹛薊炵萇趕ㄩ明明明明明薊炵萇趕ㄩ﹛﹛等弇測燴ㄩ明明明明明明明明等弇測燴ㄩ嫘豢親樓馱隅酕磁肮產薛淩諾奪樓馱隅酕磁肮毓掛珛磁釬樓馱隅酕磁肮猁樓馱隅酕磁肮猁樓馱隅酕磁肮。

基于自然的解决方案在北方防沙带生态屏障建设中的应用

第４４卷第８期２０２４年４月生态学报ＡＣＴＡＥＣＯＬＯＧＩＣＡＳＩＮＩＣＡＶｏｌ．４４，Ｎｏ．８Ａｐｒ．，２０２４基金项目：国家重点研发计划项目（２０２２ＹＦＦ１３０３２００）收稿日期：２０２３⁃１０⁃０６；㊀㊀网络出版日期：２０２４⁃０１⁃３０∗通讯作者Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇａｕｔｈｏｒ．Ｅ⁃ｍａｉｌ：ｙａｎｇｃｈｏｎｇｙａｏ＠ｌｃｒｃ．ｏｒｇ．ｃｎＤＯＩ：１０．２０１０３／ｊ．ｓｔｘｂ．２０２３１００６２１３９罗明，刘世梁，高岩，孙雨芹，杨崇曜，张琰，胡俊涛．基于自然的解决方案在北方防沙带生态屏障建设中的应用．生态学报，２０２４，４４（８）：３１２１⁃３１３１．ＬｕｏＭ，ＬｉｕＳＬ，ＧａｏＹ，ＳｕｎＹＱ，ＹａｎｇＣＹ，ＺｈａｎｇＹ，ＨｕＪＴ．ＡｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｏｆｔｈｅＮａｔｕｒｅ⁃ｂａｓｅｄＳｏｌｕｔｉｏｎｓｃｏｎｃｅｐｔｉｎｔｈｅｅｃｏｌｏｇｉｃａｌｂａｒｒｉｅｒｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎｉｎｔｈｅＮｏｒｔｈｅｒｎＳａｎｄＰｒｅｖｅｎｔｉｏｎＢｅｌｔ．ＡｃｔａＥｃｏｌｏｇｉｃａＳｉｎｉｃａ，２０２４，４４（８）：３１２１⁃３１３１．基于自然的解决方案在北方防沙带生态屏障建设中的应用罗㊀明１，２，３，刘世梁４，高㊀岩１，２，３，孙雨芹１，２，３，杨崇曜１，２，３，∗，张㊀琰１，胡俊涛１１基于自然的解决方案亚洲中心，北京㊀１０００３５２自然资源部国土整治中心（土地科技创新中心），北京㊀１０００３５３自然资源部土地整治重点实验室，北京㊀１０００３５４北京师范大学环境学院，北京㊀１００８７５摘要：基于自然的解决方案（ＮｂＳ）通过自然资源高效利用和适应性生态系统管理应对多样化挑战，是国际上普遍认可的生态恢复前沿理念，我国的国家生态屏障建设从本质上是中国特色的ＮｂＳ，具有系统性㊁综合性和多尺度特征㊂ＮｂＳ的对象㊁主体㊁目标以及方案等方面与生态屏障的建设思路上高度契合，相关准则能够为生态屏障建设提供全面的理论思路和实践框架㊂以北方防沙带生态屏障带为例，从北方防沙带的生态问题入手，深入剖析了ＮｂＳ与探讨了北方防沙带生态屏障之间的耦合关系，从格局⁃过程⁃尺度机理㊁服务⁃价值⁃福祉路径和保护⁃修复⁃管理体系角度对ＮｂＳ实施准则和北方防沙带生态屏障进行了阐述；并结合基于自然解决方案的北方防沙带案例分析，总结了ＮｂＳ在北方防沙带生态屏障建设中的未来发展趋势和面临的挑战㊂关键词：基于自然的解决方案（ＮｂＳ）；北方防沙带；生态修复；生态系统服务；人类福祉ＡｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｏｆｔｈｅＮａｔｕｒｅ⁃ｂａｓｅｄＳｏｌｕｔｉｏｎｓｃｏｎｃｅｐｔｉｎｔｈｅｅｃｏｌｏｇｉｃａｌｂａｒｒｉｅｒｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎｉｎｔｈｅＮｏｒｔｈｅｒｎＳａｎｄＰｒｅｖｅｎｔｉｏｎＢｅｌｔＬＵＯＭｉｎｇ１，２，３，ＬＩＵＳｈｉｌｉａｎｇ４，ＧＡＯＹａｎ１，２，３，ＳＵＮＹｕｑｉｎ１，２，３，ＹＡＮＧＣｈｏｎｇｙａｏ１，２，３，∗，ＺＨＡＮＧＹａｎ１，ＨＵＪｕｎｔａｏ１１Ｎａｔｕｒｅ⁃ｂａｓｅｄＳｏｌｕｔｉｏｎｓＡｓｉａｎＨｕｂ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１０００３５，Ｃｈｉｎａ２ＬａｎｄＣｏｎｓｏｌｉｄａｔｉｏｎａｎｄＲｅｈａｂｉｌｉｔａｔｉｏｎＣｅｎｔｅｒ（ＬａｎｄＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙＩｎｎｏｖａｔｉｏｎＣｅｎｔｅｒ），ＭｉｎｉｓｔｒｙｏｆＮａｔｕｒａｌＲｅｓｏｕｒｃｅｓ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１０００３５，Ｃｈｉｎａ３ＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＬａｎｄＣｏｎｓｏｌｉｄａｔｉｏｎａｎｄＲｅｈａｂｉｌｉｔａｔｉｏｎ，ＭｉｎｉｓｔｒｙｏｆＮａｔｕｒａｌＲｅｓｏｕｒｃｅｓ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１０００３５，Ｃｈｉｎａ４ＳｃｈｏｏｌｏｆＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ，ＢｅｉｊｉｎｇＮｏｒｍａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１００８７５，ＣｈｉｎａＡｂｓｔｒａｃｔ：Ｎａｔｕｒｅ⁃ｂａｓｅｄＳｏｌｕｔｉｏｎｓ（ＮｂＳ）ｉｓａｇｌｏｂａｌｌｙｒｅｃｏｇｎｉｓｅｄａｐｐｒｏａｃｈｔｏｅｆｆｅｃｔｉｖｅｌｙａｄｄｒｅｓｓｅｓｖａｒｉｏｕｓｃｈａｌｌｅｎｇｅｓｔｈｒｏｕｇｈｔｈｅｅｆｆｉｃｉｅｎｔｕｓｅｏｆｎａｔｕｒａｌｒｅｓｏｕｒｃｅｓａｎｄａｄａｐｔｉｖｅｍａｎａｇｅｍｅｎｔｏｆｅｃｏｓｙｓｔｅｍｓ．ＴｈｅｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎｏｆｎａｔｉｏｎａｌｅｃｏｌｏｇｉｃａｌｂａｒｒｉｅｒｓｉｎＣｈｉｎａｉｓａｎｅｘａｍｐｌｅｏｆＮｂＳｗｉｔｈｄｉｓｔｉｎｃｔｉｖｅＣｈｉｎｅｓｅｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ．Ｔｈｅｓｅｅｃｏｌｏｇｉｃａｌｂａｒｒｉｅｒｓｈａｖｅｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ，ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅａｎｄｍｕｌｔｉ⁃ｓｃａｌｅｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ，ｗｈｉｃｈａｒｅｃｌｏｓｅｌｙｒｅｌａｔｅｄｔｏｔｈｅｏｂｊｅｃｔｉｖｅｓ，ａｐｐｒｏａｃｈｅｓａｎｄｉｎｔｅｒｖｅｎｔｉｏｎｓｏｆＮｂＳ．ＲｅｌａｔｉｖｅｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓａｓｓｏｃｉａｔｅｄｗｉｔｈＮｂＳｐｒｏｖｉｄｅａｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅｔｈｅｏｒｅｔｉｃａｌｂａｓｉｓａｎｄｐｒａｃｔｉｃａｌｆｒａｍｅｗｏｒｋ．ＴｈｅＮｏｒｔｈｅｒｎＳａｎｄＰｒｅｖｅｎｔｉｏｎＢｅｌｔｓｔｒｅｔｃｈｅｓａｃｒｏｓｓｎｏｒｔｈｅｒｎＣｈｉｎａ，ｉｎｃｌｕｄｉｎｇｓｉｘｎａｔｉｏｎａｌｋｅｙｅｃｏｌｏｇｉｃａｌｆｕｎｃｔｉｏｎａｒｅａｓ，ａｎｄｐｌａｙｓａｎｉｍｐｏｒｔａｎｔｒｏｌｅｉｎｐｒｅｖｅｎｔｉｎｇｅｎｃｒｏａｃｈｍｅｎｔｏｆｗｉｎｄａｎｄｓａｎｄ．Ｔｈｒｏｕｇｈｔｈｅｉｍｐｌｅｍｅｎｔａｔｉｏｎｏｆａｓｅｒｉｅｓｏｆｅｃｏｌｏｇｉｃａｌ２２１３㊀生㊀态㊀学㊀报㊀㊀㊀４４卷㊀ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎａｎｄｒｅｓｔｏｒａｔｉｏｎｐｒｏｊｅｃｔｓｉｎｔｈｅｒｅｇｉｏｎ，ａｎｅｃｏｌｏｇｉｃａｌｂａｒｒｉｅｒｓｙｓｔｅｍｈａｓｂｅｅｎｆｏｒｍｅｄ，ｒｅｓｕｌｔｉｎｇｉｎａｎｉｎｃｒｅａｓｅｉｎｖｅｇｅｔａｔｉｏｎｃｏｖｅｒ，ａｒｅｄｕｃｔｉｏｎｉｎｄｉｓａｓｔｅｒｓ，ａｎｉｎｃｒｅａｓｅｉｎｂｉｏｄｉｖｅｒｓｉｔｙａｎｄａｎｏｖｅｒａｌｌｉｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔｉｎｔｈｅｅｃｏｌｏｇｉｃａｌｑｕａｌｉｔｙｏｆｔｈｅｒｅｇｉｏｎ．Ｈｏｗｅｖｅｒ，ｉｔｈｉｇｈｌｉｇｈｔｓｔｈｅｉｓｓｕｅｓｏｆｅｃｏｌｏｇｉｃａｌａｎｄｓｏｃｉａｌｖｕｌｎｅｒａｂｉｌｉｔｉｅｓ，ｎｏｔａｂｌｅｃｏｎｔｒａｄｉｃｔｉｏｎｓｂｅｔｗｅｅｎｅｃｏｌｏｇｉｃａｌｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎａｎｄｒｅｓｏｕｒｃｅｕｓｅ，ｔｈｅｉｍｐａｃｔｏｆｈｕｍａｎａｃｔｉｖｉｔｉｅｓａｎｄｃｌｉｍａｔｅｃｈａｎｇｅ，ｔｈｅｎｅｅｄｔｏｆｕｒｔｈｅｒｓｔｒｅｎｇｔｈｅｎｔｈｅｅｆｆｅｃｔｉｖｅｎｅｓｓｏｆｅｃｏｌｏｇｉｃａｌｇｏｖｅｒｎａｎｃｅ，ａｎｄｗｅａｋａｗａｒｅｎｅｓｓｏｆｐｕｂｌｉｃｐａｒｔｉｃｉｐａｔｉｏｎ．ＴｈｅｌａｒｇｅｓｐａｔｉａｌｓｐａｎｏｆｔｈｅＮｏｒｔｈｅｒｎＳａｎｄＰｒｅｖｅｎｔｉｏｎＢｅｌｔ，ｔｈｅｃｏｍｐｌｅｘｉｔｙｏｆｔｈｅｅｃｏｓｙｓｔｅｍａｎｄｔｈｅｅｘｉｓｔｅｎｃｅｏｆｃｏｍｐｌｅｘｅｃｏｌｏｇｉｃａｌｐｒｏｃｅｓｓｅｓｗｉｔｈｉｎｉｔｒｅｑｕｉｒｅｔｈｅａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｏｆＮｂＳｆｏｒｔｈｅｉｎｔｅｇｒａｔｅｄｍａｎａｇｅｍｅｎｔｏｆｔｈｅｒｅｇｉｏｎ．ＴａｋｉｎｇｔｈｅｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎｏｆｔｈｅｅｃｏｌｏｇｉｃａｌｂａｒｒｉｅｒｂｅｌｔｏｆｔｈｅＮｏｒｔｈｅｒｎＳａｎｄＣｏｎｔｒｏｌＢｅｌｔａｓａｎｅｘａｍｐｌｅ，ｔｈｉｓｐａｐｅｒｐｒｏｖｉｄｅｓａｎｉｎ⁃ｄｅｐｔｈａｎａｌｙｓｉｓｏｆｔｈｅｃｏｕｐｌｉｎｇｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｂｅｔｗｅｅｎＮｂＳａｎｄｅｃｏｌｏｇｉｃａｌｂａｒｒｉｅｒｓ，ｗｈｉｃｈｓｈａｒｅｔｈｅｓａｍｅｏｂｊｅｃｔｉｖｅｓｉｎｔｅｒｍｓｏｆｓｏｌｖｉｎｇｍａｊｏｒｓｏｃｉｅｔａｌｃｈａｌｌｅｎｇｅｓ，ｓｙｓｔｅｍｉｃｔｈｉｎｋｉｎｇ，ｅｃｏｌｏｇｉｃａｌｏｒｉｅｎｔａｔｉｏｎ，ｍｕｌｔｉ⁃ｏｂｊｅｃｔｉｖｅｓｙｎｅｒｇｙ，ｓｐａｔｉａｌｍａｔｃｈｉｎｇａｎｄｐｒｏｃｅｓｓｍａｎａｇｅｍｅｎｔ．Ｔｈｉｓｐａｔｈｉｓｕｎｄｅｒｐｉｎｎｅｄｂｙｔｈｅｔｈｅｏｒｅｔｉｃａｌｆｏｕｎｄａｔｉｏｎｏｆｐａｔｔｅｒｎ⁃ｐｒｏｃｅｓｓ⁃ｓｃａｌｅａｎｄｇｕｉｄｅｄｂｙｔｈｅｏｖｅｒａｒｃｈｉｎｇｇｏａｌｏｆｓｅｒｖｉｃｅ⁃ｖａｌｕｅ⁃ｗｅｌｌ⁃ｂｅｉｎｇ．Ｔｈｅｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓｏｆｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ⁃ｒｅｓｔｏｒａｔｉｏｎ⁃ｍａｎａｇｅｍｅｎｔａｒｅａｐｐｌｉｅｄｔｏｆａｃｉｌｉｔａｔｅｅｃｏｌｏｇｉｃａｌｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎａｎｄｒｅｓｔｏｒａｔｉｏｎｅｆｆｏｒｔｓ．Ａｌｏｇｉｃａｌｆｒａｍｅｗｏｒｋｆｏｒｔｈｅｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ⁃ｒｅｓｔｏｒａｔｉｏｎ⁃ｍａｎａｇｅｍｅｎｔｐｒｏｇｒａｍｍｅｓｙｓｔｅｍｉｓａｌｓｏｐｒｏｐｏｓｅｄ．ＩｔａｎａｌｙｓｅｄｔｈｅｐｒａｃｔｉｃａｌｃａｓｅｓｏｆｔｈｅＮｏｒｔｈｅｒｎＳａｎｄＰｒｅｖｅｎｔｉｏｎＢｅｌｔ，ｓｕｃｈａｓｔｈｅＵｌａｎｓｕｈａｉＮｕｒＷａｔｅｒｓｈｅｄｉｎＩｎｎｅｒＭｏｎｇｏｌｉａａｎｄｔｈｅＫｅｋｅｙａＥｃｏｌｏｇｉｃａｌＭａｎａｇｅｍｅｎｔＰｒｏｊｅｃｔｉｎＸｉｎｊｉａｎｇᶄｓＡｋｓｕＢａｓｉｎ，ａｎｄｓｕｍｍａｒｉｓｅｄｔｈｅｒｅｓｅａｒｃｈｄｉｒｅｃｔｉｏｎｓ，ｓｕｃｈａｓｓｔｒｅｎｇｔｈｅｎｉｎｇｔｈｅｒｅｓｅａｒｃｈｏｎｔｈｅｃｏｕｐｌｉｎｇｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆＮｂＳｅｌｅｍｅｎｔｓｕｎｄｅｒｔｈｅｂａｃｋｇｒｏｕｎｄｏｆｅｃｏｌｏｇｉｃａｌｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎａｎｄｒｅｓｔｏｒａｔｉｏｎｆｏｒｔｈｅｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎｏｆｅｃｏｌｏｇｉｃａｌｂａｒｒｉｅｒｓｉｎｔｈｅＮｏｒｔｈｅｒｎＳａｎｄＰｒｅｖｅｎｔｉｏｎＢｅｌｔｉｎｔｈｅｆｕｔｕｒｅ，ｅｘｐｌｏｒｉｎｇｔｈｅｗａｙｓｏｆａｐｐｌｙｉｎｇｔｈｅｆｕｌｌｌｉｆｅｃｙｃｌｅｏｆＮｂＳｃｏｎｃｅｐｔｓａｎｄｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓｗｉｔｈｔｈｅｍｅｔｈｏｄｓｏｆｅｆｆｅｃｔｉｖｅｎｅｓｓａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ，ａｎｄｐｒｏｍｏｔｉｎｇｔｈｅｓｙｎｅｒｇｙｏｆｅｃｏｌｏｇｉｃａｌｉｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔａｎｄｆｏｏｄｓｅｃｕｒｉｔｙ，ｗａｔｅｒｓｅｃｕｒｉｔｙ，ｅｃｏｎｏｍｉｃｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｎｄｏｔｈｅｒｍｕｌｔｉｐｌｅｓｏｃｉａｌｃｈａｌｌｅｎｇｅｓ．ＫｅｙＷｏｒｄｓ：Ｎａｔｕｒｅ⁃ｂａｓｅｄＳｏｌｕｔｉｏｎｓ（ＮｂＳ）；ＮｏｒｔｈｅｒｎＳａｎｄＰｒｅｖｅｎｔｉｏｎＢｅｌｔ；ｅｃｏｌｏｇｉｃａｌｒｅｓｔｏｒａｔｉｏｎ；ｅｃｏｓｙｓｔｅｍｓｅｒｖｉｃｅｓ；ｈｕｍａｎｗｅｌｌ⁃ｂｅｉｎｇ我国是世界上沙漠化最严重的国家之一，特别是北方地区由于地处干旱和半干旱气候区，干燥少雨，植被稀疏，沙漠广布，是典型的生态脆弱区，受气候变化和人地关系不相协调等因素影响，成为我国主要的风沙策源区［１］㊂据第六次全国荒漠化和沙化调查统计，截至２０１９年，全国荒漠化土地总面积已达到２５７３７．１３万ｈｍ２，占我国国土总面积的２６．８１％［２］㊂其中，我国北方风蚀区总面积达３４０万ｋｍ２［３］，沙化土地面积占国土面积的１７．９３％［４］㊂草场退化严重㊁土壤风蚀沙漠化和沙尘暴频发不仅严重影响本地区生产生活，也对我国东部地区乃至周边国家造成环境污染［５］㊂为治理风沙灾害，我国自２０世纪５０年代起开始在北方干旱区建设防沙带，先后实施了一系列生态修复工程，如：京津风沙源治理工程㊁三北防护林体系建设工程㊁退牧还草工程㊁沙区自然保护区及沙化土地封禁保护区㊁山水林田湖草沙一体化生态保护修复等生态工程［６７］㊂经过几十年建设，北方防沙带目前已形成自西向东㊁连片分布的生态屏障体系，北方防沙带通过改变地表生物地球化学过程抑制风蚀，增加植被盖度㊁灾害减少，生物多样性增加，局地生态质量提升，对保障北方地区社会经济可持续发展发挥了重要作用［８］㊂防风固沙是北方防沙带生态系统最重要的服务功能，主要表现在能够减少沙尘暴并降低其对农业㊁工业和交通的影响，具体来说，通过植被的结构和过程，生态系统可以减少风蚀导致的土壤侵蚀［９］，北方防沙带也成为我国两屏三带中的生态屏障体系重要部分，在国家生态安全战略格局中具有重要的地位［１］㊂随着国家对北方防沙带的生态保护与修复投入不断增加，使得我国生态环境得到一定的改善，但总体形势仍然不容乐观㊂在北方防沙带生态屏障建设中，由于生态工程工期长㊁地域广㊁恢复时间长㊁过程复杂，维持生态屏障的可持续性管理具有重要意义［１０］㊂因此，需要寻求一种和谐型的发展模式，提高生态系统的服务功能㊂从适应性管理㊁应对各类社会挑战和提升人类福祉等角度来看，国际上所倡导的基于自然的解决方案（ＮｂＳ）是具有重要的现实意义，也是自然保护领域的创新与变革的方向［１１］㊂虽然ＮｂＳ是近１０年才逐渐被认可和广泛使用的新的概念，其内涵和目标与生态屏障的总体目标是一致的，相关的理念和方案可以应用于生态屏障的建设㊂本文以北方防沙带为例，梳理了北方防沙带目前面临的生态问题，剖析ＮｂＳ与探讨了北方防沙带生态屏障建设内涵关系，总结了ＮｂＳ在北方防沙带生态屏障建设中应用，并从不同角度分析北方防沙带屏障建设的ＮｂＳ路径，提出了未来发展趋势和相关建议㊂１㊀中国北方防沙带的概述１．１㊀北方防沙带布局北方防沙带横跨我国北部，呈细长带状分布，东起大兴安岭，西至新疆准噶尔盆地（７１ʎ３４ᶄ １２５ʎ４３ᶄＥ，２６ʎ４５ᶄ ４３ʎ５３ᶄＮ），跨越青海㊁内蒙古㊁宁夏㊁甘肃等９个省（区㊁市），由西往东分为三段：塔里木防沙屏障带㊁河西走廊防沙屏障带和内蒙古防沙屏障带，包括了京津冀协同发展区和阿尔泰山地森林草原㊁科尔沁草原㊁浑善达克沙地㊁阴山北麓草原㊁塔里木河荒漠和呼伦贝尔草原６个国家重点生态功能区㊂北方防沙带以不同类型的草原㊁荒漠㊁林网等生态系统为主要形态，充当了阻止风沙对人类生活环境的侵袭的屏障作用［１２］㊂２０２０年，我国颁布了‘全国重要生态系统保护和修复重大工程总体规划（２０２１２０３５年）“（以下简称双重规划），将全国重要生态系统保护和修复重大工程规划布局在包含北方防沙带的三区四带㊂２０２１年，在双重规划总体安排的基础上，进一步发布了‘北方防沙带生态保护和修复重大工程建设规划（２０２１２０３５年）“，以防治沙化和荒漠化为目标，重点部署了６项重点工程和２９个重点项目，总面积达到１８３万ｋｍ２［１３］㊂图１㊁图２显示的是两屏三带的北方防沙带生态屏障和双重规划北方防沙带工程位置㊂北方防沙带的生态保护和修复工作，对于国家战略如京津冀协同发展㊁西部大开发和一带一路等的顺利实施具有重要意义，并保障中华民族的生存和发展空间㊂图１㊀两屏三带北方防沙带生态屏障Ｆｉｇ．１㊀ＴｗｏＢａｒｒｉｅｒｓａｎｄＴｈｒｅｅＢｅｌｔｓｅｃｏｌｏｇｉｃａｌｂａｒｒｉｅｒｓｉｎｔｈｅＮｏｒｔｈｅｒｎＳａｎｄＰｒｅｖｅｎｔｉｏｎＢｅｌｔ３２１３㊀８期㊀㊀㊀罗明㊀等：基于自然的解决方案在北方防沙带生态屏障建设中的应用㊀图２㊀北方防沙带生态保护和修复重大工程建设规划Ｆｉｇ．２㊀ＴｈｅｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎｐｌａｎｆｏｒｍａｊｏｒｐｒｏｊｅｃｔｓｆｏｒｅｃｏｌｏｇｉｃａｌｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎａｎｄｒｅｓｔｏｒａｔｉｏｎｉｎｔｈｅＮｏｒｔｈｅｒｎＳａｎｄＰｒｅｖｅｎｔｉｏｎＢｅｌｔ１．２㊀北方防沙带的屏障功能与生态问题生态屏障是国家重要的生态安全战略格局，其特征是为人类的可持续发展提供所需的生态系统服务，其功能是指对屏障生态系统内㊁外人类赖以生存的环境的保护效应，可以概括为缓冲㊁过滤器㊁庇护㊁隔板㊁水源涵养和精神美学等功能［１４１５］㊂北方防沙带以防风固沙为主导功能，呈现出区域分异性，对于屏障功能的修复与建设需要考虑屏障本身的地域性㊁梯度性㊁动态性和外部性特点，从山水林田湖草沙生命共同体理念出发，考虑屏障的综合性㊁立体性和尺度性，结合修复的目标，对关键地带不同生态系统通过防御㊁保护㊁恢复和提升等措施，提升其生态功能，谋求生态安全㊂北方防沙带受自然因素与人为因素综合影响，森林㊁草原功能退化，河湖㊁湿地面积减少，水土流失严重，水资源短缺㊂北方防沙带年降水量少，蒸发量大，风沙灾害频繁，由于长期过度放牧㊁乱采挖草药和灌木以及非法圈占草场等人为破坏，北方防沙带植被普遍退化㊂虽然我国荒漠化和沙化状况持续好转，沙区生态状况呈现整体好转，改善加速，荒漠生态系统呈现功能增强，稳中向好的态势［２］，但当前北方防沙带生态屏障建设仍然是初步的㊁阶段性的，沙漠化防治和治理任务艰巨，生态屏障建设依旧是长期的㊁持续的工程㊂基于目前的相关研究结论，北方防沙带的生态问题及其驱动因素主要表现在以下几个方面：（１）北方防沙带的自然禀赋差，基础脆弱，存在生态脆弱性和社会脆弱性㊂草原退化㊁沙化面积广阔，林草植被质量不高，远低于全国平均水平；部分河流断流㊁湖泊湿地面积萎缩甚至消失，局部地区地下水超采严重；调查表明，全国沙化土地中，降水量位于２００ｍｍ以下的面积超过７８％，２００４００ｍｍ面积超过１６％，植被盖度低于４０％的沙化土地面积占全国沙化土地总面积的７６％［２］㊂研究表明，屏障带不同区域的防风固沙功能差异的原因与各地植被覆盖密切相关［１６］㊂总体上，内蒙古防沙屏障带大于河西走廊，最小的是塔里木防沙屏障带，防风固沙能力较弱的区域主要分布在塔里木盆地，阿拉善高原以及内蒙古浑善达克沙地［１２］㊂但总体上，２００５２０１５年生态系统质量稳中有升，但在局部存在退化现象［１７］㊂提升生态系统多样性㊁稳定性和持续性是保护和修复的核心内容，目前北方防沙带的生态系统质量和稳定性不容乐观，社会⁃生态系统脆弱性是北方防沙带建设的重大障碍，社会系统和生态系统两者之间相互耦合互动，４２１３㊀生㊀态㊀学㊀报㊀㊀㊀４４卷㊀相互影响反馈，因此人地系统耦合的系统治理是解决生态问题的重要策略㊂（２）生态保护与资源利用矛盾突出，需要提升水土资源匹配和山水林田湖草沙要素的稳定性维持途径㊂防沙带生境敏感脆弱，生物多样性水平低，生态保护压力大，动植物自然栖息地受扰，野生物种减少，外来有害生物入侵严重，生物多样性受损；基于土地覆被转类指数的研究结果显示２０００２００５年宏观生态状况变差，而２００５２０１０年和总体的２０００２０１０年宏观生态状况趋好；防风固沙功能低等级占６０％以上，具有较大的开发潜力，２０１０年防风固沙总价值达到４００亿元以上，其中以保持土壤肥力的价值占比最高，达到７５％以上［１８］㊂水资源供给结构性矛盾突出，生态用水比例低，水土资源不匹配㊂（３）人类活动和气候变化灾害风险不容忽视，生态效应具有空间分异和尺度特征，需要考虑生态系统时空演变特征㊂北方防沙带人类开发活动和资源利用监督管理缺乏，区域矿产资源丰富，草原超载㊁露天采矿和耕地滥垦仍较多，对生态系统破坏问题突出㊂气候变化主要表现在极端气候频发，高温和强降雨等产生较大的风险，虽然目前我国荒漠化地区年均降水量总体呈弱增加趋势，但存在区域差异㊂研究表明，受人类活动和气候变化影响，屏障带生态系统格局相对稳定，自然生态系统面积呈增加趋势，但是农田㊁森林㊁草地之间转换较为频繁，各分屏障带表现有较大差异［１７］㊂沙尘暴较为频繁的区域分布于河西走廊和阿拉善高原㊁南疆盆地南缘及内蒙古中部［１２］㊂（４）防治与治理提升了生态系统服务，但成效需要巩固，任务艰巨㊂研究表明，内蒙古东部防风固沙总量呈总体上升趋势，主要归功于该地区实施的一系列生态工程［６，１９２０］㊂鄂尔多斯（位于北方防沙带）生态系统提供的防风固沙服务使得下风向的受益地区降尘量减少了约２．８７ˑ１０８ｔ，受益区面积约１．６６ˑ１０６ｋｍ２，约５．０８ˑ１０８人受益［１５］㊂京津风沙源土地利用变化情形风蚀面积总体减少，尤其是２０１０２０１５年间减小了４．１０％，说明京津风沙源治理工程发挥了重要作用［２１］㊂但目前已经治理的沙化土地中，初步治理和中等治理的占国土总面积的９０％以上，并存在大量沙化趋势的土地，需进一步巩固和提升治理成效［２］㊂（５）公众参与意识薄弱，保护与发展的矛盾突出，人类福祉需要提升㊂公众参与对北方防沙带保护修复起着至关重要的作用，目前仍缺乏公众的积极有效的参与，大多数公众仍处于观望状态，主要原因是公众缺乏对生态环境问题的科学性理解和认识，参与建设的渠道不足，与政府互动畅通的有效平台还未搭建成熟，信息公开机制㊁环保激励机制和法律保障机制不完善，影响了公众参与的积极性㊁主动性和创造性㊂北方防沙带的协调保护与发展，需要考虑到区域产业发展对资源依赖程度，以及当地居民生计的可持续问题［２２］㊂１．３㊀生态保护修复主攻方向基于‘全国重要生态系统保护和修复重大工程总体规划（２０２１２０３５年）“，北方防沙带重点工程包括京津冀协同发展生态保护和修复㊁内蒙古高原生态保护和修复㊁河西走廊生态保护和修复㊁塔里木河流域生态修复㊁天山和阿尔泰山森林草原保护和三北地区矿山生态修复（图２）㊂主要是以推动森林㊁草原和荒漠生态系统的综合整治和自然恢复为导向，全面保护森林㊁草原㊁荒漠㊁河湖㊁湿地等生态系统，持续推进防护林体系建设㊁退化草原修复㊁水土流失综合治理㊁京津风沙源治理㊁退耕还林还草，深入开展河湖修复㊁湿地恢复㊁矿山生态修复㊁土地综合整治㊁地下水超采综合治理等，进一步增加林草植被盖度，增强防风固沙㊁水土保持㊁生物多样性等功能㊂在生态保护与修复过程中，突出沙化土地封禁保护，强化禁垦（樵㊁牧㊁采）㊁封沙育林育草㊁网格固沙障等建设；落实禁牧休牧制度，促进草原休养生息，执行原生沙漠和原生植被封禁保护制度，在主要风沙口㊁沙源区和沙尘路径区推行冬季免耕留茬制度等，相关的制度㊁技术和措施符合基于自然的解决方案的基本理念㊂２㊀基于自然的解决方案的基本原则２．１㊀ＮｂＳ概念框架㊀㊀ＮｂＳ就是采取行动保护㊁养护㊁恢复㊁可持续利用和管理自然或经改造的陆地㊁淡水㊁沿海和海洋生态系５２１３㊀８期㊀㊀㊀罗明㊀等：基于自然的解决方案在北方防沙带生态屏障建设中的应用㊀统，以有效和适应性地应对社会㊁经济和环境挑战，同时对人类福祉㊁生态系统服务㊁复原力和生物多样性产生惠益［２３］，作为一个整体性和系统性引领下的理念，旨在保护㊁持续性管理㊁修复自然或改善生态系统的行动，以高效解决社会挑战，比如气候变化㊁粮食安全㊁水安全㊁人类健康㊁自然灾害㊁社会和经济发展㊁生态环境退化与生物多样性丧失等问题，同时还旨在提供人类福祉和生物多样性带来的福利，可以认为是所有以自然为基础㊁为环境和人类带来利益的各种相关做法的统称［２４］㊂ＮｂＳ是积极地利用生态系统的服务功能，应对人类社会面临的重大危机与风险，从而助力实现可持续发展目标（ＳＤＧｓ）的一个整体概念（图３）㊂图３㊀基于自然的解决方案概念框架［２２］Ｆｉｇ．３㊀ＣｏｎｃｅｐｔｕａｌＦｒａｍｅｗｏｒｋｏｆＮａｔｕｒｅ⁃ｂａｓｅｄＳｏｌｕｔｉｏｎｓ２．２㊀ＮｂＳ的准则和指标体系世界自然保护联盟（ＩＵＣＮ）提出了ＮｂＳ实施的８项准则和２８项指标［２５］，在具体项目实施过程中，可以依据ＮｂＳ的原则使项目规范化，并鼓励项目管理者根据各项指标对ＮｂＳ项目进行自我评估和改进，确保项目的科学性㊁合理性与包容性，ＮｂＳ包括了一系列的基于生态系统的手段，比如其基于生态系统的适应（ＥｂＡ）㊁基于生态系统的灾害风险减缓（Ｅｃｏ⁃ＤＲＲ）㊁自然或基于自然的基础设施（ＥＩ）㊁绿色基础设施（ＧＩ）和基于自然的气候解决方案（ＮＣＳ），核心理念包括了自然为本㊁系统思维㊁多目标协同㊁尺度匹配和适应管理，也包括基于生态系统的原则在农业实践㊁粮食系统和水资源管理方面的应用［２６］㊂２．３㊀ＮｂＳ与国土空间保护与修复‘全国重要生态系统保护和修复重大工程总体规划（２０２１２０３５年）“和‘山水林田湖草生态保护修复工程指南（试行）“的颁布，进一步引领了国土空间生态保护修复工作的实施，ＮｂＳ所提倡的核心理念㊁准则和相关的方法㊁工具和措施，对推动保护与修复具有重要的启示作用和借鉴意义㊂ＮｂＳ是遵循自然演变或自然演替的路径，采取保护㊁修复或重建的辅助措施开展生态保护㊁修复和重建工作，相关指南也强调了对不同生态系统受损程度开展不同修复路径㊂ＮｂＳ中的景观尺度㊁生态系统尺度以及场地尺度三个层级对应指南的项目区尺度㊁保护修复单元尺度㊁子项目尺度㊂ＮｂＳ更多的强调和支撑生态系统的稳定性㊁可持续性和服务性，这与目前我国国土空间生态保护修复工作中，强调生物多样性保护，重视生态成效评估等具有很高的契合度㊂６２１３㊀生㊀态㊀学㊀报㊀㊀㊀４４卷㊀３　北方防沙带生态保护修复工程中的自然解决方案理念北方防沙带建设的目标是防治荒漠化，治理京津冀风沙源头，改善生态环境，保障区域可持续发展，这与ＮｂＳ解决社会挑战，实现人与自然和谐共生的理念高度契合㊂具体来说，两者在以下几个方面目标一致㊂１）解决重大社会挑战㊂防沙带建设解决了北方地区严重的荒漠化问题；ＮｂＳ也强调解决气候变化㊁生物多样性流失等社会挑战㊂２）系统思维㊂防沙带建设需要考虑林草水土综合配置，以提高生态系统服务功能；ＮｂＳ强调整体系统优化㊂生命共同体尊重自然㊁顺应自然㊁保护自然已日益成为国土空间规划以及生态保护修复工作的共识性理念㊂３）生态本位㊂防沙带恢复和重建了生态系统，ＮｂＳ强调保护生态系统完整性㊂４）多目标协同㊂防沙带建设既解决了当地的生态问题，也提高了人居环境；ＮｂＳ也能实现多重目标㊂ＮｂＳ涵盖了生态系统修复生态系统保护生态系统管理解决特定问题和基础设施建设五大范畴［２１］㊂５）空间匹配㊂防沙带根据本地气候㊁地形设计样带分布；ＮｂＳ强调空间尺度匹配㊂国家政府从十一五起就越来越关注国家生态功能区战略，生态屏障建设作为区域尺度上提升生态功能的重要途径，能够有效减轻各种自然灾害带来的财产损失，能够为国家和区域提供生态安全保障［１２］㊂６）过程管理㊂防沙带建设需要配套管护措施促进林草恢复，ＮｂＳ提出适应性管理㊂北方防沙带由于空间跨度大，生态系统复杂，生态因子多元化，其内部存在复杂的生态过程，而ＮｂＳ是基于证据的方法，建立在对特定生态系统的深入了解基础之上，实施ＮｂＳ需要充分了解其结构和生态过程㊂因此，从ＮｂＳ内在的因素复杂的耦合机理方面，研究重点生态区的山水林田湖草沙要素间生态耦合机制及其生态系统的稳定性维持机理是开展生态修复实施的科学基础㊂北方防沙带生态系统质量和稳定性是发挥生态屏障功能的基础，也是提升生态系统服务的基础，有利于生态屏障的可持续性，ＮｂＳ围绕应对可持续发展挑战，通过管理生态系统服务和自然资本，并利用自然以应对社会⁃经济⁃环境三者耦合的可持续发展的挑战，在不同区域的人地系统耦合关系，能够有效链接知识⁃科学⁃决策㊂因此，从ＮｂＳ内在因素关联㊁主导生态系统服务提升㊁生态系统稳定性维持和可持续性方面，北方防沙带体现了ＮｂＳ的理念㊂ＮｂＳ相关准则和屏障建设在机理㊁实施路径和逻辑体系上存在密切的耦合关系㊂从生态屏障的机理上，格局⁃过程⁃尺度是生态屏障建设的理论基础，也是景观生态学原理在ＮｂＳ的体现㊂两屏三带是生态安全格局的总体框架，是宏观尺度上生态和社会经济系统的空间布局，不同生态系统在空间的配置和连接性等对生态屏障的功能至关重要，ＮｂＳ考虑景观的总体格局，采取系统性㊁整体性来保护和恢复自然㊂而格局涉及到生态系统和社会经济系统之间的相互作用和反馈，生态屏障的功能（如碳汇㊁水源保护和生物多样性保护）可以通过生态过程（如能量流动㊁物质循环和生物互作用）来维持，而ＮｂＳ强调生态过程的完整性和生态系统韧性，关注生态系统的自然过程，重视景观尺度的生物多样性㊁构成㊁结构㊁功能㊁连通性和外部威胁的评估㊂从尺度上来看，生态屏障格局和过程在不同空间和时间尺度上具有显著差异，国家尺度的两屏三带，在同一屏障带内，也会因为自然地理条件差异而表现出不同的功能，ＮｂＳ关注的尺度也可以从小尺度的国土空间管理和生态系统恢复到大尺度的气候变化缓解和适应措施，选择合适的尺度是ＮｂＳ的重要的标准㊂服务⁃价值⁃福祉主线贯穿生态保护与修复的实施路径，生态屏障具有生物多样性保育功能和供给㊁调节等生态系统服务能力，如水源涵养㊁土壤保持㊁防风固沙等生态服务，也会形成生态产品，从而包括市场价值或非市场价值的内容，通过提供生态服务和创造价值，生态屏障可以增强人类的福祉㊂例如，生态屏障可以提高水源的稳定性和质量，从而提高人类的健康和生活质量㊂而ＮｂＳ强调不同的生态系统的自然经济价值和非经济价值，鼓励利用生态补偿来激励自然保护，进而提高人与自然和谐共生的福祉㊂保护⁃修复⁃管理是ＮｂＳ的方案体系，也是生态屏障建设的逻辑体系，ＮｂＳ接受自然保护的规范和原则，强调优化设计和经济可行性的生态修复，重视基于证据的适应性管理，识别和处理短期经济利益和长期㊁全部的生态系统服务的未来选择之间的权衡，总体的行动设计是动态的体系㊂我国生态屏障建设中，保护是基础，通过规划等手段划定生态红线㊁重点生态功能区，修复和保护在生态屏障建设中相辅相成，修复通过识别生态７２１３㊀８期㊀㊀㊀罗明㊀等：基于自然的解决方案在北方防沙带生态屏障建设中的应用㊀８２１３㊀生㊀态㊀学㊀报㊀㊀㊀４４卷㊀系统退化的关键区与优先区，以提升主导生态系统服务为目标开展修复，而生态屏障建设作为我国的长期策略，需要通过科学研究㊁监测评估和适应性管理等手段实现㊂总体上，生态屏障和ＮｂＳ实施中，都是多层面㊁多尺度和多过程的动态系统，需要通过格局⁃过程⁃尺度机理㊁服务⁃价值⁃福祉路径和保护⁃修复⁃管理体系的理论框架进行研究和实践（图４）㊂因此，北方防沙㊂带生态安全屏障可以说是中国的ＮｂＳ实践，对于国际上ＮｂＳ的建设也具有重要的借鉴意义Array图４㊀生态屏障建设体系与基于自然解决方案（ＮｂＳ）理念的耦合逻辑框架Ｆｉｇ．４㊀ＬｏｇｉｃａｌｆｒａｍｅｗｏｒｋｆｏｒｔｈｅｃｏｕｐｌｉｎｇｏｆｅｃｏｌｏｇｉｃａｌｂａｒｒｉｅｒｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎｓｙｓｔｅｍａｎｄＮａｔｕｒｅ⁃ｂａｓｅｄＳｏｌｕｔｉｏｎｓｃｏｎｃｅｐｔ４㊀自然解决方案理念应用于具体案例工程启示ＮｂＳ原则优化工程的实施效果和稳定性的同时，也促进人与自然的和谐共生，对于不同工程实践，往往从三个方面来刻画其不同类型，即涉及多少生物多样性及生态系统的工程化程度㊁能够提供多少生态系统服务和涉及多少的利益相关者群体［２７］㊂因此，利用回顾性分析北方防沙带具体案例工程，可以对ＮｂＳ应用于实践的路径及其成效有更好的理解㊂４．１㊀内蒙古乌梁素海流域生态保护修复工程乌梁素海流域地处内蒙古西部巴彦淖尔市境内，西连乌兰布和沙漠，南临黄河，东部毗邻乌拉山国家森林公园，北部与阴山山脉和乌拉特草原相接，流域总面积约１．６３万ｋｍ２㊂乌梁素海是中国第八大淡水湖，是黄河流域最大的功能性湿地，也是荒漠⁃半荒漠地区罕见的湿地，是北方防沙带的关键地区，承担着调节黄河水量㊁保护生物多样性㊁改善区域气候等重要功能㊂而流域内的河套灌区也是中国三大灌区之一和重要的商品粮油生产基地，对于保障国家粮食安全也至关重要［２８］㊂在此背景下，应用ＮｂＳ有效推进了乌梁素海流域社会⁃经济⁃生态协同发展㊂在项目规划设计中已明确实现乌梁素海流域生态环境持续改善与绿色高质量发展，提升北方防沙带生态系统服务功能，保障黄河中下游水生态安全的目标，即协同应对经济与社会发展㊁食品安全㊁水安全㊁环境退化与生物多样性丧失４类社会挑战㊂项目充分根据尺度进行设计，根据流域内不同的自然地理单元和主导生态系统类型，分成乌兰布和沙漠㊁。

侠道列车手秘籍

PGGOMOY = Perfect Handling 开车的时候更加灵敏
SZCMAWO = Suicide 自爆=自杀
ZEIIVG = All green lights 所有交通灯转为绿灯
YLTEICZ = Aggressive Drivers 开车的都好猛……
LLQPFBN = Pink traffic 应该是较多的车在路上跑
BGLUAWML = Peds Attack You With Weapons, Rocket Launcher 路人都攻击你，你得到火箭弹
CIKGCGX = Beach Party 海滩派对？？！！
MROEMZH = Gang Members Everywhere 周围都是黑社会
BIFBUZZ = Gangs Control the Streets 黑帮控制了道路……
PDNEJOH = Spawn Racecar 召唤 Racecar 应该是速度很快的赛车
VPJTQWV = Spawn Racecar 同上，不同的赛车
AQTBCODX = Spawn Romero 召唤 Romero
KRIJEBR = Spawn Stretch 召唤 Stretch
ICIKPYH = Very Sunny Weather 阳光灿烂
ALNSFMZO = Overcast Weather 阴云密布
AUIFRVQS = Rainy Weather 细雨绵绵
CFVFGMJ = Foggy Weather 迷雾漫天
YSOHNUL = Faster Clock 让时钟转得更快
MGHXYRM = Thunderstorm 雷雨
CWJXUOC = Sandstorm 沙暴

复习资料

二、多音字。

shì(似的) xiānɡ(相逢) fā(发现) sàn（散步）juǎn（胶卷）dànɡ（停当）似相发散卷当Si (似乎) xiang（照相）fa（理发）san（散架）juan（试卷）dang（当时）mò（磨坊）fánɡ（磨坊）躲藏cáng 扇shàn子尽jǐn管闷mēn热几jī乎磨坊藏扇尽闷几mó（磨刀）fānɡ（牌坊）西藏zàng 扇shān动尽jìn力烦闷mēn 几jǐ个调tiáo节看kàn见倒dào车爪zhǎo牙参cān加luo(落后) chu(到处) 调看倒爪参落处调diào动看kān守累倒dǎo 鹰zhuǎ爪海参sheng lao(落下) chu(处理)gei(给你) dang(担心) huang(摇晃) zhao(朝阳) hao(好人) jia(假装) ka(卡片) 给挡晃朝好假卡ji(给予) dang(重担) huang(明晃晃) chao(朝代) hao(好动) jia(放假) qia（关卡）描写神态的成语：没精打采沉默不语目不转睛恍然大悟垂头丧气写人：笑呵呵、孤零零、懒洋洋、圆溜溜、胖乎乎、红扑扑、乐陶陶、喜滋滋、笑嘻嘻、气呼呼慢吞吞写景：静悄悄、雾沉沉、雨蒙蒙、绿油油、黑糊糊、白花花、油亮亮、亮晶晶、滑溜溜严严实实、舒舒服服、确确实实、来来往往、清清楚楚、飘飘摇摇、祖祖辈辈、密密层层、痛痛快快、仔仔细细、丁丁当当、肥肥壮壮、吵吵闹闹、干干净净、整整齐齐葱葱茏茏含反义词远近闻名、日夜兼程、黑白相间、轻重倒置、舍近求远、头重脚轻、积少成多、取长补短、舍本逐末、贪小失大、异口同声、左邻右舍、里应外合、小题大做同部首的词语坪坝、蝴蝶、铜钟、遗迹、继续、菠萝、杨树、娇嫩、遥远、宇宙、肌肤、设计、愿意、热烈、祝福、拥抱ABCC白发苍苍、千里迢迢、风尘仆仆大名鼎鼎AABC彬彬有礼、恋恋不舍、头头是道ABAC自言自语、转来转去、挤来挤去、又踢又跳、各种各样、穿来穿去、又香又脆、又松又软、又肥又厚、又唱又跳、又说又笑、不慌不忙、不紧不慢、不知不觉、不闻不问、摸来摸去、糊里糊涂、游来游去、好声好气、无边无际、一模一样左抵右挡、蹦来跳去含动物叶公好龙打草惊蛇顺手牵羊狗急跳墙狐假虎威鸡犬不宁一本正经、引人注目、手脚并用、惹人注意、随风飘动、缕缕炊烟、满载而归、月落柳梢、来回跳动、惹人喜爱、阳光明媚、闻鸡起舞、金秋时节、凌空飞起、翩翩起舞、大惊失色、半沉半浮、你挤我碰、频频点头、芬芳迷人、欣然怒放、含笑一现、准确无误、随意调节、学无止境、毫无保留、奔流不息、花草树木、世界闻名、回首遥望、双龙戏珠、名扬中外、形态各异、风景优美、物产丰富、瑰丽无比、高低不平、颜色不一、四脚朝天、酸甜可口、景色诱人、琳琅满目、应有尽有、一应俱全、大饱口福、旅游胜地、举世闻名、夜幕降临、光彩夺目、五洲四海、璀璨无比、令人神往、难以招架、合二为一、大显神威、哇哇直叫、乱成一团、和睦相处、没精打采、灰心丧气、狮口逃生、刻舟求剑、一摇一晃、不假思索、如愿以偿、目不转睛、鸦雀无声、一动不动、欢蹦乱跳、翻来覆去、勤学苦练、千呼万唤、争奇斗艳、风餐露宿、成群结队、千奇百怪、物美价廉、五颜六色、高楼大厦、兴高采烈、摇头晃脑四、近反义词。

沪教牛津版八年级上册 Ancient stories Listening课件

3. How could the soldiers steal the gold in Sparta? Because the King of Sparta was not in the city.
4. Where are Paris and Helen? They are in Troy.
5. Whose ships are these?
8. My grandfather fought in two _w_a_r_s_ (war) when he was young.
9. Anna _h_a_s_s_t_u_d_ie_d_ (study) in the middle school for two years.
10. The man had a serious disease last year. After that, he gave up _s_m_o_k__in_g_ (smoke).
6. As soon as I __e_n_t_e_re_d___ (enter), they stopped the conversation and walked away.
7. Millie succeeded in w__o_r_k_in_g_ (work) out the Maths problem by herself.
— I see. 3. A thief _s_to_l_e_ (steal) a lot of money from the bank last
night. 4. There is a _d_if_f_e_re_n_c_e_ (different) in Sara. She has
changed her hairstyle. 5. Our family _h_a_v_e_l_iv_e_d_ (live) in Shenzhen since 2004.

蒙古语四级——精选推荐

蒙古语四级och 去us ⽔ód ⽻⽑úr 种⼦aav 爸爸eej 妈妈iim 这样too 数uul ⼭óor 别的úud 门tahia 鸡golio蝈zoriud 故意的ail 村庄súrtei 威风的oir 近tuil 极限úildver ⼯⼚guai 先⽣huar 花aha 哥avdar 柜⼦olon 多olov 得到了udaan 慢hatuu 硬ehe 母亲uzeh 看óshoo 仇úureg 任务arvin 多narim ⾼粱ohin ⼥⼉uliral 季节shineleh 过年sejig 疑⼼dórvoljin 四⽅形úmhii 臭shiher 糖bichig ⽂字minii 我的hil 边境bi 我ard ⼈民aduu 马群ajiglah 观察dardang 宽⼴em 药erdem 学问elbeg 多ish 柄eruul 健康ideh 吃irlee 来了ijil 相同的il 明显oroh 进⼊oloh 得到osol 过错ochih 去or 位⼦mongol 蒙古ulaan 红buruu 错误tug 旗帜ódor ⽇⼦óvol 冬天óroo 房间úner 味道úher ⽜úlger 故事únee 奶⽜hooson 空的daarah 冷temee 骆驼hódoo 乡村tuulai 兔⼦toiruu 绕弯的húiten 冷的taria ⽥地melhii 蛙uigur 维吾尔erdemtei 有知识的ceceg 花朵idne 吃呢oyono 缝呢bol 是egch 姐姐door 下⾯biir 笔emee 奶奶óvoo爷爷mori 马gúine 跑呢sain 好baatar 英雄baruun 西bagsh ⽼师bas ⼜daran 还pagdgar 矮⼩mal 牲畜margaash 明天charmaih 努⼒sambar ⿊板nar 太阳nam 党nom 书ner 名字nis 飞davs 盐hadah 割dagah 跟随dotood 内部的targan 肥胖的tavan 五个tagtaa 鸽⼦lavduun 稳重的haluun 热的oloh 得到sul 松的shiree桌⼦tor⽹⼦ireh来surah学sar ⽉亮sam梳⼦asar楼húsleng理想zandan 檀⾹树france法兰西zam路zasal装饰manju满州samj猴⼦zús模样yavjei⾛了cas雪caas纸hurc锋利chadal⼒⽓cagaan⽩⾊chimee消息shin新的shish⾼梁shúd⽛齿shól汤yas⾻头yamaa⼭⽺yamar 什么tuyaa霞光hos两个hash⽟hamar⿐⼦haluun热har⿊⾊gar⼿gazar地⽅sags篮⼦gashuun苦tug 旗帜cug共同kino电影tarkator拖拉机anchin猎⼈angah渴tangnai腭feodal封建sandal 椅⼦zúlgeh擦tahia鸡temee骆驼navch叶⼦hoyor⼆uslah浇⽔tómorlog⾦属asuuh问ezen主⼈uzeh看oroh进⼊ósoo仇恨ulaan红的erdem知识avdar柜⼦ahmad长辈itgel 信任namar秋天havar春天hatuu 硬hooson空的cecerleg公园gurvan三个amarhan容易túrgen快egch姐姐ilch热量órc胸怀emch医⽣amjilt成绩suragch学⽣barimt证据herem 墙úseg字hudal假dúrem规则naiman⼋个oirhon较近uudam宽阔tariachin农民namar秋天suudal座位húchir困难namtar传记hónjil被tolgoi头devsger褥⼦olzloh抓获heden⼏个mongol蒙古durtai愿意ail村庄egch姐姐súu奶hacar⾯颊úher⽜agaar空⽓malgai帽⼦asuuh问agui⼭洞arbin多taarah对chaaguu从那边rnaiman⼋个aigaad怕hairtai可爱的baiguulah建设taria⽥地ohor短的odoo现在oroi晚hoshuu旗bolobsronggui熟练hoishoon向后hoiguur从后边us⽔udaan慢ulaan红⾊的huurmag假的uugaad喝tuulai兔⼦egduucheh⽓愤ezhgui荒⽆⼈烟的deguur从上⾯0r0h排列00r00n⾃⼰0r00房间0guuleh说h0huuleh让哺乳uner味道uher⽜unench诚实uuruuleh让背uildber⼯⼚uilduuleh让加⼯uuseh发⽣uudeed发明h0ndiir0h变空radio收⾳机altanochir阿拉坦敖其尔gradus度uchrah见⾯uudam宽阔hoshuursan出尖的hoishloh拖后uureg任务buruushaah批评buree喇叭uilchleh服务第⼆部分⽂字ol得到us⽔anina闭眼0n00现在unana骑abb爸爸abna要（买）bi 我bi abna我要买bi unana我要骑puu枪puus铺⼦puuzang鞭炮ah哥哥eh母亲hana墙壁h0h蓝⾊aaga糠baga⼩nogoo菜nehene追neg⼀haana关闭bagana桩uneg狐狸bi 0n00 haana我现在关bi uneg nehne我追狐狸minii我的am粮⽶haa哪⼉0mn0前⾯am嘴emeg奶奶minii emeg我的奶奶uul云uul⼭ablaa买了、拿了ah hulgana alna哥哥杀耗⼦aab nogoo ablaa爸爸买菜了asuuna问huls⽵⼦shanaga勺⼦m0s冰sanaa想法bish不是husne希望ene minii shanaga bish这不是我的勺⼦bi us abna我要⽔shal地板sh0l汤shuuna雕塑shaalna揭shuune捞ta您tamhi烟草tatna吸temee骆驼too数⽬toolnoo数数bi too toolno我数数aab tamhi tatna爸爸吸烟dagna跟hodood胃0bd0n0疼duulna歌唱idne吃budaa饭minii hodood 0bdn0我的胃疼ah 0bs hadna哥哥割草aab budaa idne爸爸吃饭chi你chadna能chaas纸chohino打chomoo杯⼦chub⾬⾐chol称号bi chub 0ms0n0我穿⾬⾐ah chabga idne哥哥在吃枣bi chamass asuuna我问你chi nadaas asuu你问我zhaam⾐领chaazh法律zhuud梦zheb锈zhoboono（使）发愁cheezh胸zhaana指教bi zhuzhig uzhne我在看戏bi chud zheelne我借⾬⾐minii cheezh 0bd0n0我的胸疼chi haa ochino你去那⼉？yaduu贫穷yabya⾛吧hezhee何时guine跑goyo美丽的yos礼节oyono缝hayaa偶尔bulaah抢bid yabya我们⾛吧chi yaana你怎么办？chi hezee yabna你何时⾛？sar⽉nar太阳harah看mori马gerchilne证明ter那个、他（她）ene mod hugarab这个树折了ter hurga guine那个⽺羔跑呢ah min mori unazh yabna哥哥骑马⾛egch taria tarina姐姐种地chi nadiig dagazh ir你跟我来hashaad hurga orob⽺羔进圈了bi zheeld garna我（要）上街waasidaa哎呀gua⽠gua美丽的abchir拿来（命令式）arab阿拉伯chi chaas abchir你把纸拿来ter arabt ochib他去阿拉伯了bagsh⽼师subegch线索hadag哈达uddeg送（客⼈）minii tagtaa nislee我的鸽⼦飞了bi uragsilna我（要）前进ter nuh b0gl0r0b那个洞堵塞了minii eh nutag lab h0gzhin0我的故乡⼀定会繁荣起来tal deer neg sureg honi idsilne草原上⼀群⽺在吃草debter册⼦targa膘chi hurdal你快⼀点（⾛）namar bolloo秋天到了hagas半tusbur每个、分别odob去了、⾛了busad其他的chi setgezh uzh你思考⼀下ter odob他⾛了tend那⼉hun⼈bi tend ochino我去那⾥ene hudag mash gun这井很深zham路0mch遗产bi emch bolyo我成医⽣了egch gezhig samnana姐姐在梳头发mal牲畜maltah挖ter bol eyeldeg hun他是个和⽓的⼈modon deer bolzhmor zhigen⼩鸟在树上叫inggeh这样tarialang农业angchin ang hine猎⼈在狩猎tangnuul barigdab特务被捕了aimag盟、部落iim这样uimeh喧哗ugui不、没有tend yuu baina那⼉有什么？end mogoi baina这⾥有蛇tuulai兔⼦yaruu忙碌的bi us uuna我喝⽔luubang tarib种箩⼘第三部分会话neg⼀hoyor⼆gurab三y0s九arab⼗hori⼆⼗guch三⼗d0ch四⼗tabi五⼗zar六⼗dal七⼗naya⼋⼗yer九⼗zhuu百myangga千tum万neg hun⼀个⼈gurban honi三只⽺taban tuur五个桃zhuun hubi⼀百分arban hoyor uher⼗⼆头⽜yeren zhurgaan temee九⼗六只骆驼tumen t0gr0g万元arban neg⼗⼀arban hoyor⼗⼆y0s⼗九hori y0s⼆⼗九horin sandal⼆⼗把椅⼦arab y0s0n toli⼗九⾯镜⼦nud眼睛chih⽿朵am嘴hamar⿐⼦huruu⼿指hums指甲gedes肚⼦muruu腰dal肩胛m0r肩膀minii nud sain我的眼睛好boyor chih两只⽿朵bi am zhailna我要漱⼝ter h0l ugaana他要洗脚ter hunei dal m0r ni 0rg0n那个⼈的肩宽minii gedes 0bdzhei我的肚⼦疼shud araagaan hamgaalah heregtei要保护⽛齿erhii huruu拇指chechege hool idne其其格在吃饭baatar h0l ugaana巴特尔在洗脚gargiin negen星期⼀gargiin hoyor星期⼆gargiin gurban星期三gargiin d0rb0n星期四gargiin taban星期五gargiin zurgaan星期六gargiin 0d0r星期⽇gargiin negend h0d0lm0rl0n0星期⼀劳动bagsh gargiin hoyort irne⽼师星期⼆来ene 0d0r gargiin gurban今天星期三bid gargiin zurgaand kino uzhne我们星期六看电影gargiin 0d0r amarna星期⽇休息yabna将要⾛idne将要吃tutraga⼤⽶buudai⼩麦monggol（蒙古⽶）糜⼦erdene shish⽟⽶shagag荞麦sar burchag⼤⾖nogoon burchag绿⾖ulaan shish红⾼梁narm tarilaa种⾕⼦了bi tutraga budaa ideh durtai我爱吃⼤⽶饭tabin zing monggol am五⼗⽄糜⼦⽶ene bol erdene shish这是⽟⽶ene bol sagag这是荞麦yablaa⾛了（已经⾛了）irlee来了（已经来了）uzheh durtai爱看ochih durtai愿意去uzheh durgui不爱看heleh durgui不爱说ene bol nom这是书ter bol zham那是路huur胡琴bishguur唢呐morin huur马头琴eruu huur提琴fengchin风琴gangchin钢琴elektron h0gzhim电⼦琴henggereg⿎b0mb0r⼩⿎huuriin ai胡琴演奏曲ter morin huur tatlaa他拉马头琴了bi elektron h0gzhim sonirhono我欣赏电⼦琴⾳乐ter fengchin darzh baina他在弹风琴ene bol gangchin这是钢琴ene bol b0mb0r这是⼩⿎ter alhazh baina他在⾛baatar ug helzh baina巴特尔在说话0gl00早晨ugaah洗samnah梳amisgal⽓息bolobsroh练习guichetgeh完成ungshih读buuh下去0gl00 bosoh早晨起床nuur garaan ugaah洗⼿洗脸gezhig useen samnah梳理头发guih跑步tamir hiih做操hiin amisgal bolobsroh练⽓功budaa ideh吃饭azhild garah上班uureg guichetgeh执⾏任务sonin ungshih读报纸azhilaas buuh下班bi nuur eenugaana我要洗脸eezh gezhig useen samnana妈妈在梳理头发huurai budaa炒⽶gulir⾯粉boob饽饽suusen budaa⼲饭singgen budaa稀饭gahain mah猪⾁tahian 0nd0g鸡蛋binggan饼⼲bangsh饺⼦talh⾯包deufuu⾖腐bi huurai budaa ideye我吃炒⽶chinii gulir baina uu你有⾯粉吗？end hoyor ayaga suusen budaa baina这⾥有两碗⼲饭end neg zing gahain mah baina 这⾥有⼀⽄猪⾁bi binggan abya我买饼⼲ene 0d0r bid bangsh idne今天我们吃饺⼦chi talh ideh durtai yuu你爱吃⾯包bi ochyo我去吧bi uzhye我看吧chi meden uu你知道吗？bataar ochno uu巴图去吗？chinii nom bainuu你有书吗？chi bangsh idne uu你吃饺⼦吗？速成蒙语会话⼊门续almard苹果uzhem葡萄chabga枣zhurzh桔⼦tuur桃alim梨guils杏tarbas西⽠hash茄⼦t0b0d hash藩茄songgino葱gogod⾲菜chin chai芹菜luubang箩⼘chagaan nogoo⽩菜b0 chai波菜t0ms⼟⾖zhangduu⾖⾓sarimsag蒜ene almard sain这苹果好ter uzhem amttai那葡萄好吃chi chabga idne uu你吃枣吗？bi luubang tarina我在种箩⼘ene t0ms tom这个⼟⾖很⼤end gurban t0bd hash baina这⾥有三个西红柿chi zhurzh ideerei请你吃桔⼦ene guils bolobsorzhai这杏熟了bi hoyor zhing gogod abna我买⼆⽄⾲菜b0 chai baina uu有波菜吗？end zhangduu baina这⾥有⾖⾓end cin chai baihgui这⾥没有芹菜ter sarmsag ablaa他买⼤蒜了bat gerteen baina uu巴图在家吗？bat gerteen baihgui巴图不在家aab(echig)爸爸（⽗亲）eezh(eh)妈妈（母亲）0b0g爷爷emeg奶奶bergen嫂⼦egch姐姐ohin duu妹妹duu弟弟huu⼉⼦huuhen⼥⼉er n0h0r丈夫ber媳妇er em夫妻hadam aab岳⽗hadam eezh岳母uch孙zhee huu外甥zhee uch外孙minii aab irlee我爸爸来了minii 0b0g tariachin我爷爷是农民minii ohin duu bol suragch我的妹妹是学⽣ted hoyor bol er em他俩是夫妻tuunei hadam aab irzhei他的岳⽗来了ter chinii zhee huu m0n uu他是你外甥吗？ne chinii nom m0n uu这是你的书吗？m0n ene minii nom m0n是，这是我的书ene tuunei malgai m0n uu这是他的帽⼦bish ene tuunei malgai bish不是，这不是他的帽⼦0nd0r beye⾼个⼦bogino beye矮个⼦targan胖eruul健康0bchin tei有病sohor瞎⼦doglong瘸的d0lii聋yaaba哑ter bol 0nd0r beyetei hun他是⼀个⾼个⼦的⼈minii duu mash targan我弟弟很胖chinii beye eruul uu你的⾝体健康吗？ter chin 0bchintei hun shuu他是个病⼈sohor hun irlee盲⼈来了yaaba hun bichig surch baina哑⼈在学字ter 0nd0r beyetei hun dogolong那个⾼个⼦是瘸⼦ene bogino beyetei hun minii egch这个矮个⼦的⼈是我姐姐surch学abch买sonsoch听0gch给naadazh玩tengger天ogtorgui天空od星nar⽉亮sar太阳delhiin b0mb0rch0g地球tenggeriin zhaadas天河altan gadas北极星agaar空⽓daguul od卫星hiimel daguul od⼈造卫星dohiur doloon od北⽃星gurban nohoi三星nar mandsan uu太阳升起来了吗？nar mandzhai太阳升起来了od garaadui ba星星还没出来吧？od garaadui星星还没出来tengger gegeerlee bid bosohgui yuu天亮了，我们不起床吗？bosyo ertiin bolobsrol hiiheer garya起床吧，去做早操吧bid ali odon b0mb0rchog deer amidarzh baih bii我们住在那个星球上？bid delhiin b0mb0rch0g deer amidarzh baina我们住在地球上ter yamar od bii那是什么星？ter bol altan gadas那是北极星ter yamar od nuud bii那些是什么星星？ter chin dohiur doloon od shidee那是北⽃星chi gurban nohoig erzh olno uu你能认出来三星吗？erzh olno能认出来al n那⼀个yuu什么yamar什么样的haa那⾥hen谁hedii多少heden⼏个hezhee何时0mn0前、南hoino后、北zhuun东、左baruun西、右zhuun 0mn0东南baruun 0mn0西南zhuun hoit东北baruun hoit西北ene 0d0r 0mn00s salhitai今天刮南风hoinoos uultei北⾯有云ter zhuun zhug yablaa他向东⾛了bi baruun garaar bichdeg我⽤右⼿写字zhuun 0mn0 yuu baih bai东南⽅向有什么东西？minii ger baruun hoit zhugt baina我家在西北⽅向上zhuun hoitiin gurban muzh东北三省ter baruun 0mn00s irzhei他从西南⽅向来ter chooyang hotoos irlee他从朝阳市来ulaan surguulaas irlee乌兰从学校来的aab h0d00g00s irlee爸爸从乡下来的shireegees从桌⼦上、⽐桌⼦h0d00g00s从乡下、⽐乡下sanaagaas从思想上nohoigoos⽐狗gahaigaas⽐猪modchin modoor shiree hiine⽊匠⽤⽊头做桌⼦suragch biireer bichig bichne学⽣⽤笔写字aldar 尊名bayan巴⾳nutag故乡haanah那⼉的harchin喀喇沁suugaarai请坐ta sain uu你好吗？sain好tanai aldar chin hen gedeg bii你贵姓（您的⼤名叫什么？）minii ner bayan gedeg我的名字叫巴⾳ug nutag chin haanah bii你籍贯在那⼉？bi harchinnai hun我是喀喇沁⼈zha suugaarai好，请坐tuunei ner bat gedeg他的名字叫巴图ter bol tuyaa gedeg她叫托娅tanai您的tuunei他的morinoi马的bagshiin⽼师的shaahain鞋的tolgoin头的h0d00giin乡下的neg udaagiin⼀次的geriin家的sabanggiin 肥皂的0ch0gd0r昨天m0gd0n沈阳ulaanhad⾚峰undesten民族aanai差⼀些asruu很hureerei请到（某地）ovor mongoliin odoriin sonin" ni negen surbaljilagchiin helheer, "ovor mongoliin odoriin sonin"ba "Umratiin sonin" ni hamtiin charmailgaar, Delhiin hamag under hun Bao XiShun Y apon ulsiin T okyo TV iin urilgaar 3 sariin suulch, 4 sariin eheer, yapon ulst ailchlhaar bolj baih yum genee.ta hezhee irsen bii您什么时候来的？bi 0ch0gd0r irzhei我昨天来的ta m0gd0n00s irsen uu您是从沈阳来的吗？bish bi d0rb0diin monggol dundad surguulaas irzhei不，我是从杜尔伯特蒙中来的tanai alder chin hen gedeg bii您贵姓？mini ner shio hung gedeg我叫⼩红chi monggol undsten uu你是蒙古族吗？bi monggol undsten m0n gebech minii monggol ug aanai yum是，但是我的蒙语说的差⼀些bi yablaa我⾛了bayartai再见yabsan⾛了（的）ochson去了（的）uzhsen看了（的）saruul hezhee yabsan bii萨如拉何时⾛的？yabsan hun saruul m0n uu⾛了的⼈是萨如拉吗？zhargal吉⽇嘎拉t0l0b模样pagdagar矮个⼦harabtar⿊的zus长相bosoo⽴着的maraa胖ineed笑uulzhazh见⾯ta zhargaliig tanina uu你认识吉尔嘎拉吗？tanihgui ter yamar t0l0btei hun bii不认识，他是什么模样的⼈呢？ter bol harabtar zustei tom nudtei bosoo hamartai beye n pagdagar b0g00d ih maraa mahtai hun yum他长得略⿊，⼤眼睛，⾼⿐梁，个⼦矮胖aa bi medlee urgelzh inned aldaad yabah hun ba啊，我知道了，他是不是总是⾯带笑容的⼈？tiim是0ngg0rs0nd bi tuuntei ulzhazh 0ngg0rzhei过去我同他是见过⾯bi hoyor nomtoi我有两本书ter gurban biirtei他有三⽀笔checheg bagstai yarilchazh baina其其格在同⽼师说话bi ene nomiig tuund 0gn0我把这本书给他ulaan hicheeliin gert baina乌兰在教室⾥呢附加成份所属格iin n ai ei oi⽤让格aar eer oor 00r把使格iig g由从格aas ees oos 00s有同格tai toi tei给在格d t蒙古语常⽤会话⼀百句(第⼀部分)1 你好！sainuu! sain bainuu!2 过年好！sain xinelbuu!3 谢谢！bayarlla! talarhala!4 您贵姓？ta yamer obugten bei?5 您是谁？（⽹上聊天时会⽤）ta hen bei?6 您是蒙古⼈吗？ta mongol hun uu?7 您是哪⾥⼈？ta haanhi hun bei?8 您是哪⾥的蒙古⼈？ta haanhi mongol bei?9 您（你）多⼤了？tanai nasun suder hedui bei?（对⽼⼈）ta hedui nastai bei?（对长于⾃⼰）qi hedun nastai bei?（对⼩孩）qi hedui nastai bei?（对平辈）10 再见！bayartai!11 数字：0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 teg nig hoyor gorub durub tabe jurgaa taloo naime yis areb12 问安menduu? 答mendee!13 请安amersain u? 答saina!14 你叫什么名字？tano nere hen bei?15 我叫特⽇格勒。

拖字开头怎么做成语接龙

拖字开头怎么做成语接龙拖字意思是牵引，拉，拽，拖开头怎么做成语接龙呢?接下来店铺给大家带来的拖字开头成语接龙相关内容，欢迎大家学习借鉴。

以拖开头的成语接龙拖泥带水→ 水落石出→ 出生入死→ 死声咷气→ 气吞山河→ 河倾月落→ 落落大方→ 方枘圆凿→ 凿壁偷光→ 光采夺目→ 目中无人→ 人定胜天→ 天外有天→ 天伦之乐→ 乐不可支→ 支支吾吾→吾膝如铁→ 铁证如山→ 山穷水尽→ 尽善尽美→ 美中不足→ 足智多谋→ 谋事在人→ 人定胜天→ 天外有天→ 天伦之乐→ 乐不可支→ 支支吾吾→ 吾膝如铁→ 铁证如山→ 山穷水尽→ 尽其所长→ 长驱直入→ 入木三分→ 分秒必争→ 争权夺利→利欲熏心→ 心口如一→ 一步登天→ 天壤之别拖字开头的成语拖泥带水、拖天扫地、拖男挟女、拖紫垂青、拖家带口、拖儿带女、拖男带女、拖人下水、拖金委紫、拖拖沓沓、拖拖拉拉拖字开头成语意思1) 拖金委紫：佩带紫绶金印。

比喻官高位显。

2) 拖麻拽布：指戴孝。

旧时，长辈丧亡，幼辈要披麻衣系白布。

3) 拖男带女：带领着男儿女儿。

多形容旅途的辛苦或生计的艰难。

4) 拖泥带水：比喻说话做事不干脆利落。

5) 拖人下水：比喻勉强人一道做他不愿做的事(多指坏事)。

6) 拖青纡紫：汉制，诸侯佩带的印绶为紫色，公卿为青色。

以之比喻官位显贵。

7) 拖天扫地：形容衣服过长。

包含拖字的成语解释1) 施绯拖绿：形容衣衫不整。

2) 生拖死拽：形容强行拖扯。

3) 怀金拖紫：形容显贵。

同“怀金垂紫”。

4) 横拖竖拉：犹横拖倒拽。

指用暴力强拖硬拉。

5) 横拖倒拽：拽：用力拉扯。

指用暴力强拖硬拉。

6) 横拖倒扯：犹横拖倒拽。

7) 横金拖玉：指官服盛装。

8) 带水拖泥：①形容泥泞难行。

②比喻不顺利或不干脆。

现多作“拖泥带水”。

9) 腰金拖紫：比喻身居高官。

金，金印;紫，紫绶。

10) 纡青拖紫：比喻显贵。

11) 毡上拖毛：氈为毛制，在氈上拖毛，则涩滞难行。

用以形容脚步畏缩不前。

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