实验二、重金属污染对植物叶绿素含量

实验步骤3：叶片中叶绿素提取
在暗处静置3 ～ 5min后，用一层滤 纸过滤到30mL烧杯中 用滴管吸取80%丙酮将研钵和滤纸
周围洗脱色素
待滤纸和残渣全部变白后，用80% 丙酮定容至20mL
实验步骤4：测定吸光度
先用少量色素提取液清洗比色皿2 ～ 3次， 然后将色素提取液倒入比色皿中 80%丙酮作空白对照
实验目的
掌握叶绿素含量的测定
了解重金属污染对叶绿素含量的影响 了解在重金属胁迫条件下的变化趋势
实验原理
植物叶绿素分叶绿素a和叶绿素b，其含量 的高低是反映植物光合作用能力的一个重 要指标 叶绿素含量的变化可以反映污染对植物光 合作用的影响
实验仪器与材料
仪器：研钵、滤纸、漏斗、5 mL移液管、分 光光度计等 材料：小麦
浓度的重金属氯化铬溶液处理
每组3个平行处理
实验步骤2：分组染毒处理
每天用蒸馏水冲洗1次，再用原组重金 属溶液培养
培养1周后，即可用
实验步骤3：叶片中叶绿素提取
取新鲜植物叶片0.1g (5株等长植物)
剪碎，放入研钵中，加入80%丙酮2.5mL和 少量(3 ～ 4粒）石英砂研成糊状，再加3mL 80%的丙酮,继续研磨至组织变白
式中：A663、A645分别为提取液在波长663nm、645nm下的
吸光度。
数据处理与实验结果分析：
• 每个处理组的平行测定结果用平均数± 标准误（￣ X ±SE）表示，用One-Way ANOVA分析不同处理间的差异性。可 Excel做图，展示实验结果并分析。
Let’s do it!
wk.baidu.com剂：丙酮（80%） 、石英砂、氯化铬 （Cd 2+）系列溶液（0、5、10、25、
50mg/L）
实验步骤1：实验材料培养
将大小比例均匀的种子用蒸馏水浸泡、吸 胀后，移入铺有2层滤纸的培养皿中，置
入光照培养箱中培养（22 ℃ ～25℃）
实验步骤2：分组染毒处理
在种子长出2片真叶后，分别用5个不同
在波长分别为663nm、645nm条件下测定
提取液的吸光度。如果浓度较高，适当稀 释后比色定量。
计算叶绿素含量
• 叶绿素a和b及总叶绿素的浓度分别为：
Ca、Cb和CT，可根据下式计算：
Ca=12.7A663-2.69A645
Cb=22.9A645-4.68A663
CT=8.02A663+20.21A645